专利名称：应用二磺酰基甲烷防治寄生虫的制作方法
技术领域：
本发明一般涉及杀寄生虫剂，且具体地涉及防治脊椎动物体外和体内寄生虫的新方法和新型组合物。
人们早已认识到体外寄生虫，如蚤、蜱、厩螫蝇等的防治是人类和动物健康领域的一个重要方面。传统的治疗方法为局部施用，如有名的牛浸洗，实际上这种治疗方法目前仍然被广泛应用。可是，较先进的研究已瞄准一些化合物，这些化合物可以给动物口服或非肠道给药，单个的寄生虫通过吸取治疗动物的血液被毒杀，从而控制了寄生虫的种群。
体内寄生虫，或肠内寄生虫的防治，也是人类和动物健康领域的一个重要方面。
尽管已应用了大量体外杀寄生虫剂和体内杀寄生虫剂，这些杀寄生虫剂仍存在各种各样的问题包括活性谱受限制、需要重复治疗、而且在很多情况下，寄生虫对药物的抗性。因此有必要开发新的体内和体外杀寄生虫剂以确保在很长一段时间内安全和有效地防治广谱的寄生虫。
此外，用一种治疗药剂同时控制体外和体内寄生虫是有利的。例如，单一的杀寄生虫剂容易给药并易于同食物的摄入相结合，剂量也可更准确地控制，可去除干扰因素，且在某些情况下可鉴别和开发出增效的组合物。
因此需要开发防治寄生虫的新方法，即通过提供一种组合物，当口服、非肠道或局部向人或动物给药时可有效防治寄生虫。本发明能够满足上述需要。
本发明的一个方面是提供了保护脊椎动物使之免受寄生虫伤害的方法，该方法包括给动物施用有效量的下列式Ⅰ化合物的所述的活性剂
其中R1是下式的部分
其中R11为氰基;
R12为硝基、异氰基、C2至C4链烷醇基、C2至C4全氟链烷醇基、2，2，3，3-四氟丙酰基、-N(氢或C1至C3烷基)SO2CF3，或-N＝C(各自独立选自C1至C2烷基、C1至C2全氟烷基，或1，1，2，2-四氟乙基)2;
R13为溴、氯或氟;
R14为碘或下式的基团
-R15n-R16其中n代表0或1，且其中R15代表-O--S--SO--SO2，-OSO2，或，仅当R16代表-CH3，-SO2O-，和R16代表-CF3，-CF2CF2H，-CH2CF3，-C2F5，或，仅当n为1和R15为-SO-，-SO2，-OSO2-，或-SO2O-，-CH3;
R2为氢、卤素、C1至C3烷基、苄基，或C2至C3链烯基;
R3为氢或卤素;和R4为C1-C4全氟烷基或1，1，2，2-四氟烷基;如上述当R1含有一个或多个R11、R12或R14取代基时，R1上取代基的总数不超过3。
另外，该方法包括施用式Ⅰ化合物生理学上可接受的盐类。
本发明另一方面提供了防治寄生虫的方法，即通过服用含有式Ⅰ化合物和另外的已知杀寄生虫剂的组合物来防治寄生虫的方法。
除前述新方法之外，本发明涉及下述式Ⅱ定义的一些新化合物
其中R2、R3和R4如前述定义;而R1a为下式的部分
其中R11、R12和R14如前述定义，R13a为氯，和R13b为溴或氟;
同时具有下述限定(1)R1a至少含有一个取代基，(2)当R1a含有一个或多个R11、R12或R14取代基时，R1a上取代基的总数不超过3个，(3)如果R1a仅含有一个R12取代基，R1a或为多位被取代或为在邻位或间位被取代，(4)如果R1a仅含有一个R13a取代基，R1a或为多位被取代或为邻位或间位被取代。
在前述定义中的“多”意为三个或更多，而且，本发明包括式Ⅱ化合物生理学上可接受的盐类。
本发明的一个目的是提供防治脊椎动物体内或体表寄生虫的新方法。
本发明的另一个目的是提供用于上述方法的新型化合物。
通过下述优选实施方案的说明，本发明的其它目的和优点将更加明显。
为促进对本发明原理的理解，下文论述了本发明优选实施方案，并用具体的文字描述之。因此应理解，这些优选实施方案及其描述并不限制本发明的范围，例示的实施方案的一些变化和进一步的改进，以及如例示中说明的本发明原理的进一步应用，应当认为是本发明所属领域技术人员通常可以预见的。
本发明的目的是预防和治疗寄主动物上的寄生虫侵扰并提供了控制寄生生物的新方法。具体地说，本发明提供了通过施用一种一般称作二磺酰基甲烷类化合物以防治寄生虫的方法。更具体地说本发明涉及通过施用一种或多种下述式Ⅰ的化合物而在脊椎动物中防治寄生虫的方法
其中R1、R2、R3和R4如前述定义。
对摄取血液侵扰其寄主的以食血为生的生物，这种治疗特别有效。“摄取”不仅意为刺穿和从循环系统吸血的那些寄生生物，还包括那些消耗寄主组织或组织液因此不可避免地消耗血液或血液成分的寄生生物，典型地为节肢动物。
本发明化合物还可以以其它方法使用，在此方法中上述定义的同样的活性剂作为“饲喂杀幼剂”使用。在此方法中，将化合物施于脊椎动物特别是温血动物，以抑制生存在动物粪便中的寄生生物。典型的上述生物为在卵和幼虫期的昆虫。
因此，可以看出本方法可用于保护动物使之免受广谱范围的寄生生物的侵害。而且，应注意到保护作用对于存在寄生生物感染的动物是通过消灭其存在的寄生生物而获得的，和/或对于寄生生物侵扰敏感的动物是通过预防寄生生物的侵扰而获得的。因此，保护作用包括治疗以消灭存在的侵染和预防将来的侵袭两部分。
代表性的寄生生物包括下述扁形动物门吸虫纲如华支睾吸虫棘口吸虫属肝片吸虫(肝吸虫)巨大拟片吸虫姜片虫属后殖吸虫属并殖吸虫属血吸虫属线形动物门
钓虫血管圆线虫属无饰线虫属蛔虫布鲁丝虫属仰口线虫属古柏线虫属网尾线虫属(肺虫)双板线虫属恶丝虫属(心虫)龙线虫属丝绒虫属Gaigeria球头线虫(Globocephalus urosubulatus)血矛线虫属后圆线虫属(肺虫)肺蠕虫(肺虫)美洲板口线虫盘尾丝虫属胃线虫属原圆线虫属(肺虫)鬃丝虫属冠丝虫属比翼属线虫弓蛔线虫属弓蛔虫属毛线虫属钩虫(Uncinaria stenocephala)班氏吴策线虫节肢动物门甲壳纲鲺属鱼虱属蛛形纲美洲纯眼蜱(德克萨斯蜱)斑点纯眼蜱(墨西哥湾海岸蜱)波斯锐缘蜱(禽蜱)微小牛蜱(牛蜱)牛蠕螨犬蠕螨安氏革蜱(落山矶斑点致热蜱)变异革蜱(美洲狗蜱)鸡皮刺螨(鸡螨)蓖子硬蜱(普通羊蜱)拔羽蜱鸟疥螨(knemidokoptes mutans)耳蜱(Otobius megnini)马痒螨羊痒螨血红扇头蜱(棕色狗蜱)疥螨昆虫纲伊蚊属按蚊属库蚊属脉毛蚊属牛羽虱美洲旋锥蝇斑虻属温带臭虫犬节头蚤猫节头蚤库蠓(蚋，毛蠓，蠓或no-see-ums)羊羽虱皮蝇属(皮蝇)潜蚤属(蚤)赤尾胃蝇大马胃蝇马鼻胃蝇舌蝇属(舌蝇)拢血蝇驴盲虱牛盲虱体血虱(Haematopinus ovillus)猪虱Hydrotaea irritans(头蝇)牛皮蝇纹皮蝇(踵蝇)体长颚虱(Linognathus ovillus)脚长颚虱(L.pedalis)犊长颚虱(长鼻牛虱)绿蝇属(蛆蝇)羊虱蝇羊狂蝇(鼻马蝇)黑花蝇(绿头苍蝇)鳞蚊属猎蝽属(猎蝽)墨蚊属(墨蚊)水盲厩螫蝇虻属(虻)寄生生物昆虫的卵和幼虫期生活于排泄物中典型地如家蝇(马蝇)秋家蝇(面蝇)黑角蝇属(螫蝇，牛蝇和其它蝇)。
在防治寄生虫时，经常使用杀寄生虫剂的混合组合物以减少抗性的产生，增加寄生虫防治的范围并减少副作用的危险性。因此，本发明还涉及通过给药式Ⅰ化合物，或其一种生理学上可接受的盐类，和一种或多种已知杀寄生虫混用的组合物，以防治脊椎动物中的寄生虫的方法。本技术领域熟练人员可以知道，适用于本发明的已知杀寄生虫剂包括抗蠕虫剂(endectocides)和体外杀寄生虫剂。优选的混合组合物是与抗蠕虫剂一起使用的。
与本化合物混用的代表性的已知杀寄生虫剂包括下述抗蠕虫剂丙硫咪唑苄酚宁丁萘脒蝇毒磷敌敌畏乙胺嗪epsiprantelfenbantel苯硫哒唑氟苯哒唑异阿凡曼菌素左咪唑甲苯咪唑米尔倍霉素噻烯氢嘧啶moxidectin
netobimin氯硝柳胺烟碱硝异硫氰二苯醚磺唑氨酯氯苯哒唑对二氮己环吡喹酮噻嘧啶ricobendazole四咪唑噻苯咪唑杀吸虫剂clorsulonclosantel双醋氨苯氧乙醚硝羟碘苄腈羟氯柳苯胺氯苯磺柳胺三氯苯咪唑体外杀寄生虫剂顺式氯氰菊酯二甲苯胺脒蝇毒磷杀螟菊酯氟氯氰菊酯三氟氯氰菊酯氯氰菊酯灭蝇胺溴氰菊酯二嗪磷除虫脲敌恶磷倍硫磷氰戊菊酯氟氰菊酯氟氯苯醚菊酯异阿凡曼菌素烯虫酯敌百虫moxidectin二氯苯醚菊酯亚胺硫磷甲基嘧啶磷胺虫畏残杀威鱼藤酮双硫磷杀虫畏上述混合组合物中优选的已知杀寄生虫剂为抗蠕虫剂，且特别是下述丙硫咪唑，苯硫哒唑，氟苯哒唑，左咪唑，甲苯咪唑，噻烯氢嘧啶，磺唑氨酯，氯苯哒唑，对二氮己环，噻嘧啶，ricobendazole，噻苯咪唑，和三氯苯咪唑。
对所使用的本活性剂的量要求不严格，随寄主的种类、寄生生物的种类、给药途径，是单剂量给药还是多剂量给药，和本技术领域熟练人员已知的其它因素的不同而变化。对于单剂量给药，通常剂量为1.0mg/kg至50mg/kg，而优选5mg/kg至40mg/kg的剂量一般有效。在寄主受到连续的寄生压力的情况下，例如，寄主过一段时间就会周期性地受到寄生虫侵扰时，通常优选将本化合物以多于一次的剂量方式给药。这种给药方式可短暂地进行几天或几周，或者一个季节，或整个生活期。因此，在一段时间内提供释放的持续释放制剂通常是优选的。当使用重复剂量时，该化合物可在低剂量下使用，如每天0.1至10mg/kg。上述所有剂量与可用式Ⅰ表示的母体化合物的量有关。当使用盐时，需使用相应的稍高的量，以提供母体化合物所表明的量。作为例外，当盐是具有杀寄生虫活性的化合物如左咪唑时，式Ⅰ母体化合物的量将被降低。
为了防治摄取血液的寄生虫，必须使本发明化合物以某种方式进入寄主循环系统并在其中释放。然而已发现采用众多手段中的任何一种即可获得上述释放，如肌内的、瘤胃内的、静脉内、口腔、皮下的、和脑内给药。如果在口腔或瘤胃内释放化合物，在化合物通过瘤胃时，需要保护化合物。获得上述保护作用的技术对本技术中熟练人员是已知的。
对一些释放方式，如明胶胶囊，本化合物可使用纯品。可是，对大多数释放技术，本化合物与一种或多种生理学上可接受的载体一起配制。制剂技术是医疗和兽医实践中熟知的，且本技术领域熟练人员可很容易地选择一种用于本发明。对于口腔释放，化合物可配制成固体形式如咀嚼或非咀嚼片剂、胶囊剂和膏剂，或液体形式如浆液、水悬浮液、溶液、浸液等。本化合物也可配制成巨丸剂。用适当的设计和配制方法，巨丸剂将保留在反刍的瘤胃中，并在一段时间内提供本发明化合物的连续释放。
借助饲料、饮用水或矿物块可将本化合物方便地向牲畜给药。在饲料给药的场合下，典型地将化合物和预混合物结合，随后加入其它饲料成分以形成完整的饲料。该化合物也可配制成饮用水的一部分。
本化合物也可通过瘤胃内、肌肉内、静脉内、皮下注射的形式给药。典型地，化合物配制成自然脂质的赋形剂，如动物或植物油，能够提供延缓释放作用的非肠道制剂，也可用于释放本化合物。
在前述所有制剂中，化合物与适于特定释放方式的生理学上可接受的载体混合。对本化合物的浓度要求不严格，并随特定的释放方式的不同而变化。因此，浓度可在0.1至95%重量/体积范围内，且在许多情况下为1至50%重量/体积。
本发明方法中，一些化合物优于其它的化合物。例如，至今测试的优选的化合物包括[((3，5-双三氟甲基)苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]二氯甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;和[(五氯苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷。
特别优选的化合物包括[((3，5-双三氟甲基)苯基)磺酰基][(三氟甲基]磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;和[(3，4-二氯苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]二氯甲烷。
如上面提到的，本发明化合物可以以其生理学上可接受的盐类的形式使用。对盐部分的同一性要求不严格，适合的盐包括下述碱金属盐;
碱土金属盐;
铵盐和取代铵盐如单-、二-、三-或四-烷基铵盐，上述盐可含有总数1至40的碳原子，且优选不超过25个碳原子;和碱性驱肠虫剂，优选为苄酚宁，乙胺嗪，左咪唑，噻烯氢嘧啶，烟碱，对二氮己环，和噻嘧啶。
与驱肠虫剂形成的盐是本发明优选的方面，在该盐中驱肠虫剂有效的成盐部分与主要具有体外杀寄生虫活性的二磺酰基甲烷互补。尽管上述互补作用也可通过二磺酰基甲烷和驱肠虫剂的简单混合获得，但通常优选使用盐的形式。因此与驱肠虫剂碱形成的盐是本发明优选的方面。该盐中包括那些不包括在式Ⅱ中的式Ⅰ化合物，例如[苯基磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;和[(3-硝基-4-氯苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷。
因此，本发明的另一方面是上述一种或四种化合物与选自下列驱肠虫剂碱形成的盐类苄酚宁，乙胺嗪，左咪唑，噻烯氢嘧啶，
烟碱，对二氮己环，和噻嘧啶。
特别优选的盐是与左咪唑形成的盐。
另外，含有式Ⅰ化合物和如上述定义的已知杀寄生虫剂混合的组合物，也包括在本发明范围内。优选的混合组合物包括式Ⅰ相应的化合物和下列已知杀寄生虫剂中的一种丙硫咪唑，苯硫哒唑，氟苯哒唑，左咪唑，甲苯咪唑，噻烯氢嘧啶，磺唑氨酯，氯苯哒唑，对二氮己环，噻嘧啶，ricobendazole，噻苯咪唑，和三氯苯咪唑。
如上述所示，上述组合物可以加强对寄生虫的防治。
如上述所示，本发明组合物可被配制成在脊椎动物中完成治疗释放作用的制剂。对特定组合物的合适制剂由被防治的寄生虫、被保护的寄主等决定，且本领域熟练技术人员不经过实验即可确定该制剂类型。
在一些情况下，式Ⅰ化合物是已知化合物，它们全部可以通过已知的合成方法制备。最通用的合成路线基本上是应用Zh.Org.Khim.，33(3)，920-928(1963)中的方法，如下述
在初反应中，苯硫醇和被取代的氯代甲烷缩合以制备中间体R1-S-CH2-S-R4该反应在反应介质中如低级烷醇中很容易进行，反应温度大约为50至80℃。然后氧化所得中间体，使之转化为相应的式Ⅰ化合物。优选的氧化剂是30%过氧化氢的三氟乙酸溶液，可是，溶于乙酸中的三氧化铬(CrO3)，也可用作氧化剂。通常采用的反应温度大约为25至100℃。
其它合成技术亦可，并可用以制备许多种式Ⅰ化合物。上述技术之一如下述
对其中R4是三氟甲基的化合物需要使用该方法。在大约-100至-50℃的温度下，反应物和丁基化锂应在反应介质如乙醚中混合。另一种方法是在大约60至70℃的温度下，在反应介质如四氢呋喃中，起始产物R1SO2CH3与和反应。
对许多种化合物，其它替代合成技术如下述
上述三种技术用来制备其中R2＝R3＝氢的式Ⅰ化合物。
如下述实施例3和4说明的，通过相应的R2＝R3＝氢的化合物的卤化或烷基化作用，可制备R2和R3中的一个或两个不是氢的那些化合物。其中R1含有R12取代基的化合物，优选地是通过相应的硝基取代的化合物以常规技术制备的，R12取代基为异氰基，-N(氢或C1至C3烷基)SO2CF3，或-N＝C(各自独立地选自C1至C2烷基，C1至C2全氟烷基，或1，1，2，2-四氟乙基)2。
盐类以常规方法制备，即其中R2＝R3＝氢的式Ⅰ化合物与所需的碱反应，或所需的碱与式Ⅰ化合物的钠盐反应。
当R15代表“-OSO2-”时，与苯环连接的是氧。
且R16可为任何列出的部分。当R15代表“-SO2O-”时，与苯环连接的是硫。
且R16仅为甲基。
下述实施例说明可用于制备组合物的方法，不构成对本发明范围的限制。
实施例1制备[(3，4-二氯苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷
根据McBee.74，J.Am.Chem.Soc.，3594(1952)的方法制备中间体产物CCl3SCH2Cl。将20g二甲基硫化物加入冰浴的三颈烧瓶中。烧瓶带有漏斗和洗涤器。在5℃时加入SO2Cl2(192g)(温度升至20℃)，使混合物升至室温，然后用两小时将温度升至95℃。在90～100℃下连续加热六小时。将混合物搅拌过夜。在大气压下蒸馏混合物获得CCl3SCH2Cl。馏份1-145-150℃;馏份2-175-185℃。NMR显示出产物加上5%的CCl3SCH3化合物。产量＝41g(64%)。
在20℃水浴中将SbF3(35.5g)和SbCl5(1g)加入三颈烧瓶中。用15分钟加入20gCCl3SCH2Cl。将混合物在水浴中加热至80℃，并在80～90℃下保持2小时。蒸馏CF3SCH2Cl，在45～50℃收集。
将NaOMe(2.9g，0.053mol)加入25ml甲醇中，并将9.5g(0.053mol)的3，4-二氯苯硫醇缓慢加入其中。滴加8g起始物(CF3SCH2Cl)，回流两小时。在室温下将反应物搅拌过夜，倒入水中并用乙醚提取。洗涤并干燥产物，然后用于下列程序。
将在55ml AcOH中的CrO3(23.8g，0.24mol)用两小时滴加入提取的产物中(8.7g，0.03mol在10ml AcOH中)中。将温度保持在40℃以下。缓慢加热到80℃后，使混合物在此温度下再保持1.5小时，倒入400mlH2O并收集。将产物溶于CH2Cl2中，并用水洗涤直到所有的绿色消失。干燥并蒸发掉CH2Cl2后生成白色固体。粗产量8.7g。将该产物在异丙醇中搅拌(129～131℃)，得到5.7g产物。(理论分析C-26.90%;H-1.41%。实测值C-27.08%;H-1.42%)。
根据上述合成路线通过起始物3，4-二氯苯硫醇的适当取代，可合成类似的二磺酰基甲烷。本领域普通技术人员不需要进行实验即可选择制备特定的二磺酰基甲烷的适当的起始物。
实施例2
制备[(4-三氟甲氧基苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷
将750mg NaOMe(0.0139mol)溶于约12ml MeOH的溶液，缓慢加入2.70g起始物(0.139mol)中。滴加入CF3SCH2Cl(2.09g)。回流混合物二小时，并在室温下搅拌过夜。然后将产物倒入水中，用乙醚提取两次，用水洗涤，MgSO4干燥，并蒸发除去溶剂。
产量3.05g。
将如前段制备的13.6g起始物溶于15ml AcOH中，并在室温下，滴加35.3g CrO3(0.353mol，8eq.)溶于150ml AcOH的溶液。在室温下搅拌反应混合物过夜，倒入400ml冰水，搅拌20分钟并过滤。收集沉淀并用水洗涤几次。从120ml EtOH中重结晶18.2g产物(温)，合并各馏份(共8.5g)溶于约15ml MeOH中。滴加CrO3(5.5g，2eq.)，并在70～80℃之间回流混合物大约二小时，重复上述操作，用异丙醇重结晶后获得产物，熔点103～105℃。
实施例3制备1-[(4-三氟甲氧基苯基)磺酰基]-1-[(三氟甲基)磺酰基]乙烷将[(4-三氟甲氧基)苯基]磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷(1.0g)、碳酸钾(460mg)和碘代甲烷(400g)在20ml DMF中混合，并搅拌反应混合物4小时。再加入200mg碘代甲烷，并使反应混合物搅拌过周末(全部在大约25℃的室温下进行)。然后将反应混合物倒入水中并过滤。酸化滤液。沉淀所需产物并收集。用HPLC纯化(90%己烷、10%乙酸乙酯洗脱)，在77～80℃熔化。
实施例4制备[(3，4-二氯苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]二氯甲烷[(3，4-二氯苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷(500mg)与过量的磺酰氯在乙酸(20ml)中反应。加热反应混合物大约一小时至60℃，然后倒入一体积的水并收集产物。从乙醇中重结晶两次，熔点85～87℃。
实施例5制备[苯基磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷将CF3SO2K(1g)与6ml乙腈混合，并在一段时间内滴加苯基(氯甲基)硫化物(780mg)。回流反应混合物过夜，反应完成后得到所需的(苯基硫代)[(三氟甲基)磺酰基]甲烷为暗色油状物，化合物的性质用NMR和IR证实。
该化合物与5ml三氟乙酸和5ml过氧化氢(30%)混合。将反应混合物加热至75℃维持一小时，然后冷却反应混合物，加入50ml水，收集沉淀产物，从己烷中重结晶，熔点71～73℃。
实施例6制备[(3，4-二氯苯基)磺酰基][(全氟丁基)磺酰基]甲烷通过3，4-二氯苯基甲基砜与丁基化锂反应，然后加入全氟丁基磺酰氟可合成[(3，4-二氯苯基)磺酰基][(全氟丁基)磺酰基]甲烷。将2g 3，4-二氯苯基甲基砜加入100ml乙醚中，并滴加3.6ml丁基化锂，将混合物冷却到-70℃缓慢加入1.3g CF3CF2CF2CF2SO2F。搅拌混合物1小时，加入水，蒸发掉乙醚。用10% Na2CO3提取出白色固体，酸化并收集产物，熔点105～107℃，NMR图谱表示产物为[(3，4-二氯苯基)磺酰基][(全氟丁基)磺酰基]甲烷。
实施例7制备[(3，4-二氯苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷的钠盐按下述方法制备[(3，4-二氯苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷的钠盐。将2.9g(0.0081mol)的[(3，4-二氯苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷和甲醇钠(0.44g;0.0081mol)在100ml甲醇中反应。在室温下搅拌反应混合物过夜，然后过滤，并蒸发掉甲醇，获得所需产物，熔点178～182℃。
实施例8制备[(3，4-二氯苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷的左咪唑盐将2g(0.0053mol)的[(3，4-二氯苯基)磺酰基][(三氟甲基]磺酰基]甲烷和300mg(0.005mol)甲醇钠在100ml甲醇中反应。在室温下搅拌反应混合物10分钟，蒸发掉甲醇。加入10至15ml的水，将溶液过滤加入1.4g(0.0058 mol)左咪唑HCl于50ml H2O的溶液中，收集立即形成的沉淀，并用异丙醇洗涤获得所需产物，用NMR和元素分析对固体进行分析，以确定形成的是左咪唑盐，熔点109～112℃。
在本发明中使用的，并用前述方法制备的化合物中的代表包括下述
表1在苯环上的取代基 R2R3R4熔点:℃3,5-二氯 H H CF3108-110五氟 H H CF3164-1664-氟 H H CF382-842,4-二氯 H H CF393-953,5-双(三氟甲基) H H CF3110-1114-三氟甲基 H H CF3119-1222,4,5-三氯 H H CF3122-1253-氯-4-氟 H H CF3109-1113-三氟甲基 H H CF398-1002,6-二氯 H H CF377-792-氯 H H CF3101-1044-氰基 H H CF3134-1364-溴 H H CF3130-131
表1(续)在苯环上的取代基 R2R3R4熔点:℃4-氯 H H CF3文献,1214-氯 H Na CF3240-2442,4-二氯 H Na CF3250-2533,5-双(三氟甲基) H Na CF3230(分解)4-溴 H Na CF3246-2474-硝基 H H CF3文献,150-1514-(三氟甲氧基) H 左咪唑 CF378-793,4-二氯 H CH3CF3102-1042-硝基-4-(三氟甲基) H H CF3125-1273,4-二氯 H 四甲基铵 CF3103-1074-(三氟甲氧基) H 四甲基铵 CF3115-1174-(三氟甲氧基) H Na CF3236-2394-OSO2CF3H H CF395-974-(三氟甲氧基) H 四-正-丁基铵 CF3油状物3,4-二氯 H H CF3油状物4-溴 H K CF3279-281(分解)现将论述本发明方法的具体实施例。应当清楚，提供这些实施例是为更完整地描述本发明优选实施方案，而并非旨在限制本发明的范围。
实施例9防治绿头大苍蝇(Phormia regina)和厩螫蝇(Stomoxys calcitrans)的试验使用本发明的多种化合物进行防治厩螫蝇成虫的初筛试验，并进行评价。初筛试验中使用了各化合物的原液。本试验还进行以下报道的附加的体内试验。在这种情况下，试验使用处理动物的血清(或在一些情况下用全血)或已渗入化合物的血清。初筛试验仅对厩螫蝇成虫进行;血清或全血试验是针对厩螫蝇以及绿头大苍蝇。试验方法如下述。
把需评价的化合物溶于1份丙酮/1份乙醇中，以提供浓度为5.000ppm的化合物原液;如果需要，将溶液放置在声波处理器中15分钟。将几份原液放置在15ml试管中，加入几份牛血清以提供所需稀释度的供试化合物，还可以将所使用的血清或血液样品放置在试管中。将牙科用纱布放置在每个试管中，并使血清浸透纱布。
对绿头大苍蝇进行试验大约20只苍蝇幼虫被放置在血清饱和的牙科用纱布的顶部中心，试验试管用棉花塞住，在80°F和80%相对湿度条件下培养48小时。计算每隔24和48小时幼虫死亡率，以确定防治绿头大苍蝇的百分效果。
对厩螫蝇成虫进行试验血清饱和的纱布被放置在1.5平方英寸称盘中，并放在培替氏(petri)盘中的滤纸上，把大约10只体冷、饥饿的活厩螫蝇放在盘底中央。盖上盖，使之在80°F和80%相对湿度下培养48小时。每隔24和48小时检查死亡率，以测定防治厩螫蝇成虫的百分效果。
对绿头大苍蝇和厩螫蝇试验结果表明，根据式Ⅰ的化合物对吸血的寄生虫如昆虫特别有效，而且，下述化合物显示出特别的效果[(3，5-双三氟甲基)苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷。
实施例10-24防治羊和牛中蠕虫如捻转血矛线虫的试验用被寄生的羊和牛评价本发明中使用的代表性化合物。这些动物被捻转血矛线虫自然侵染且经常还会受其它种类的侵染。评价如下述方法进行配制各种化合物，通常将化合物简单溶解于聚乙二醇200中(PEG 200制剂)。在瘤胃内或皮下单剂注射，或连续向瘤胃内灌注将制剂施于供试动物。典型地每个治疗组有两头动物，且在赋形剂对照组有一至两头动物。在处理前和处理后，每天收集其粪便，测定线虫卵数/粪便克数。对那些卵数/粪便克数降低率大于75%的动物，确定排出的未死的总蠕虫数，且动物坏死后(通常在处理后14天)计算未排出的内部蠕虫数。
代表性的试验结果示于下述表2-6。
表2用单剂量瘤胃内注射5至10 mg/kg体重的[(4-三氟甲氧苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷治疗羊，每克粪便中捻血矛线虫卵数每克粪便的蠕虫卵数(EPG)治疗天数剂量前*1 2 3 4 5-7*EPG降低百分比5 2233 2900 0 0 0 0 1005 11367 4100 100 0 0 0 10010 770 600 0 0 0 0 10010 2667 2800 100 0 0 0 100＊三天样品的平均值表3用单剂量非肠道注射5mg/kg体重的[(3，4-二氯苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷治疗羊，每克粪便中捻血矛线虫数每克粪便的蠕虫卵数(EPG)治疗天数前*1 2 3 4 5-7*EPG降低百分比IM 2533 1000 600 300 100 550 78.3SC 7167 3800 1700 1300 200 400 94.4IM=肌肉注射SC=皮下注射＊三天样品的平均值表4用六小时连续瘤胃内灌注[(3，4-二氯苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷治疗羊的杀蠕虫数据每克粪便的蠕虫卵数(EPG)治疗天数EPG降低 蠕虫 蠕虫百分比总数1降低前*1 2 3 4 5-7*百分比1667 1100 1000 0 0 0 100 0 100对照 533 900 800 900 900 900 0 188 0捻血矛线虫的总蠕虫数＊三天样品的平均值1治疗后七天尸体解剖表5用单剂量瘤胃内或皮下注射本发明化合物治疗小牛收集的杀蠕虫数据每克粪便的蠕虫卵数(EPG)治疗天数蠕虫 蠕虫卵降总数1化合物剂量前*1 2 3 4 5-7*9 11 14 低%A 10 SC 600 100 0 100 100 150 200 200 200 66.7 N/DA 10 SC 433 100 100 200 200 150 100 100 100 76.9 N/DB 10 IR 400 500 800 400 300 233 41.8 71B 20 IR 300 300 200 100 0 33 89 152蠕虫卵数化合物A＝[(4-三氟甲氧基苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷化合物B＝[(3，4-二氯苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷单剂量皮下(SC)或瘤胃内(IR)注射1治疗后7天解剖尸体＊三天样品的平均值表6体内试验结果总结表效果百分比化合物 寄主 剂量 途径 EPG降(mg/kg) 低% HC Ost Tricho ASF LBFA 羊 15 SQ 100 100a>95a>95a90(13天) NAA 羊 15 IR 100 100a>95a>95a90(11天) NA表6(续)体内试验结果总结表化 寄 剂量合 主 (mg/物 kg) 途径 EPG降低% 效果百分比HC Ost Tricho ASF LBF7天/16b天B 羊 15 SQ 67/67 100 72 40 100(7天) NA
表6(续)体内试验结果总结表化 寄 剂量合 主 (mg/物 kg) 途径 EPG降低% 效果百分比HC Ost Tricho ASF LBF7天/13b天A 羊 5 SQ 100/96.7 98 0c99 75(4天) 0A 羊 5 IR 99.05/100 100 20c90 85(4天) 0A 羊 10 SQ 100/100 100 100 100 95(7天) 0A 羊 10 IR 100/100 100 0c100 80(7天) 0
表6(续)体内试验结果总结表化 寄 剂量合 主 (mg/物 kg) 途径 EPG降低% 效果百分比HC Ost Tricho ASF LBF7天/13b天A 牛 2.5 SQ 95.3/96.3 ND ND ND 75(6天) 0A 牛 5 SQ 100/99.1 ND ND ND 65(7天) 0A 牛 7.5 SQ 100/100 ND ND ND 75(7天) 0A 牛 10 SQ 92.7/100 ND ND ND 85(10天) 0A 牛 15 SQ 100/100 ND ND ND 80(20天) 0左 牛 2.6 SQ 100/100 ND ND ND 0 0咪唑对照化合物A[[(4-三氟甲氧基)苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷左咪唑盐化合物B[((4-三氟甲氧基)苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷四甲基铵盐
a 估计作用b 尸体剖检后收集的粪便样品c 由于未处理对照组数目低难于解释对Ostertagia的活性ASF 厩螫蝇成虫HC 捻血矛线虫IR 瘤胃内注射LBF 绿头大苍蝇幼虫NA 无活性ND 未测到Ost Ostertagia ostertagiSQ 皮下注射Tricho 毛圆线虫种试验结果表明，根据式Ⅰ的化合物对蠕虫如捻血矛线虫有效。
发现下述的化合物在这方面特别有效[(4-氯苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;和[((4-三氟甲基)苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷。[(三氟甲基)磺酰基]甲烷的左咪唑盐。
实施例25-35防治在羊和牛上的绿头大苍蝇和厩螫蝇的试验使用多种本发明化合物，评价其对厩螫蝇成幼虫阶段和对绿头大苍蝇幼虫的防治。试验方法如下述
配制各种化合物，在许多试验中将化合物简单溶解于聚乙二醇200中(PEG 200制剂)，在其它试验中将化合物溶解于聚乙二醇200和乙醇中。以单剂瘤胃内注射或皮下注射施于供试动物，典型地每个治疗组有两头动物，赋形剂对照组有一至两头动物。
处理后30分钟、五小时、一天和随后的每天从受试动物中抽取血样，制备血清样品。通过将血清样品暴露于蝇的幼虫和成虫来测定杀虫剂的活性。
绿头大苍蝇和厩螫蝇体内试验结果表明，根据式Ⅰ的化合物，对吸血寄生虫如昆虫有效。发现下述化合物有这种治疗效果[(苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(三氟甲基)磺酰基]甲烷。
体内作用的代表性实验结果示于下述表7和8。
表7在羊上的endectocide试验体外暴露48小时后的[(4-三氟甲氧基苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷的杀虫剂活性百分比0天 30分钟 5小时 1天 2天 3天剂量 L A L A L A L A L A L A10 0 0 0 80 0 100 0 100 0 90 0 10010 0 13 0 20 0 100 0 100 0 100 0 1005 0 0 0 0 0 0 0 60 0 30 0 205 0 0 0 0 0 50 0 80 0 90 0 30对照 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
表7(续)在羊上的endectocide试验体外暴露48小时后的[(4-三氟甲氧基苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷的杀虫剂活性百分比4天 5天 6天 7天剂量 L A L A L A L A10 0 90 0 100 0 90 0 10010 0 90 0 100 0 70 0 1005 0 10 0 10 0 10 0 05 0 10 0 20 0 0 0 20对照 0 0 0 0 0 0 0 0单剂瘤胃内(IR)注射5或10mg/体重PEG 200制剂L 绿头大苍蝇幼虫A 厩螫蝇成虫表8在小牛上的endectocide试验体外暴露48小时后杀虫剂的活性百分比药剂10天 30分钟 5小时 1天 2天 3天 4天化合物A 0 20 100 100 100 100 100化合物A 0 20 100 90 100 100 100化合物B 0 90 100 100 100 100 100化合物B 0 70 100 100 100 100 100对照 10 10 20 10 0 0 10表8(续)在小牛上的endectocide试验体外暴露48小时后杀虫剂的活性百分比药剂15天 6天 7天 14天化合物A 100 100 100 ND化合物A 100 90 70 ND化合物B 100 100 ND 90化合物B 100 100 ND 100对照 0 0 0 0以PEG 200制剂单剂皮下注射10mg/kg体重化合物A＝[(3，4-二氯苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷化合物B＝[(4-三氟甲氧基苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷ND＝未测定在先前描述中已经详细地说明和阐述了本发明，应当清楚地认识到它们是说明性的而没有限制其特征，仅仅是显示和描述本发明的优选实施方案，并且其中的所有变化和改进在本发明中需要被保护。
权利要求
1.治疗或保护脊椎动物使之免受寄生虫伤害的方法，其中包括施于动物下述式Ⅰ化合物或其生理学上可接受的盐类的活性剂
其中R1是下式部分
其中R11为氰基；R12为硝基、异氰基、C2至C4链烷醇基、C2至C4全氟链烷醇基、2，2，3，3-四氟丙酰基、-N(氢或C1至C3烷基)SO2CF3，或-N=C(各自独立选自C1至C2烷基、C1至C2全氟烷基，或1，1，2，2-四氟乙基)2；R13为溴、氯或氟；R14为碘或下式的基团-Rn5-R16其中n代表0或1，且其中R15代表-O--S--SO--SO2，-OSO2，或，仅当R16代表-CH3，-SO2O-，和R16代表-CF3，-CF2CF2H，-CH2CF3，-C2F5，或，仅当n为1和R15为-SO-，-SO2，-OSO2-，或-SO2O-，-CH3；R2为氢、卤素、C1至C3烷基、苄基，或C2至C3链烯基；R3为氢或卤素；和R4为C1-C4全氟烷基或1，1，2，2-四氟烷基；如上述当R1含有一个或多个R11、R12或R14取代基时，R1上取代基的总数不超过3。
2.根据权利要求1的方法，其中活性剂为[(4-三氟甲氧基苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷或其生理学上可接受的盐类。
3.治疗或保护脊椎动物使之免受寄生虫侵害的适合制剂，其中包含生理学上可接受的载体和以下式Ⅰ化合物、或其生理学上可接受的盐类的活性剂
其中R1为下式的部分
其中R11为氰基;R12为硝基、异氰基、C2至C4链烷醇基、C2至C4全氟链烷醇基、2，2，3，3-四氟丙酰基、-N(氢或C1至C3烷基)SO2CF3，或-N＝C(各自独立选自C1至C2烷基、C1至C2全氟烷基，或1，1，2，2-四氟乙基)2;R13为溴、氯或氟;R14为碘或下式的基团-R5n-R16其中n代表0或1，且其中R15代表-O--S--SO--SO2，-OSO2，或，仅当R16代表-CH3，-SO2O-，和R16代表-CF3，-CF2CF2H，-CH2CF3，-C2F5，或，仅当n为1和R15为-SO-，-SO2，-OSO2-，或-SO2O-，-CH3;R2为氢、卤素、C1至C3烷基、苄基，或C2至C3链烯基;R3为氢或卤素;和R4为C1-C4全氟烷基或1，1，2，2-四氟烷基;如上述当R1含有一或多个R11、R12或R14取代基时，R1上取代基的总数不超过3。
4.根据权利要求3的制剂，其中活性剂为[(4-三氟甲氧基苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷或其生理学上可接受的盐类。
5.治疗或保护脊椎动物使之免受寄生虫侵害的方法，其中包括对动物给药两种活性成分，第一种活性剂为下式的化合物及其生理学上可接受的盐类
其中R1是下式的部分
其中R11为氰基;R12为硝基、异氰基、C2至C4链烷醇基、C2至C4全氟链烷醇基、2，2，3，3-四氟丙酰基、-N(氢或C1至C3烷基)SO2CF3，或-N＝C(各自独立选自C1至C2烷基、C1至C2全氟烷基，或1，1，2，2-四氟乙基)2;R13为溴、氯或氟;R14为碘或下式的基团-R5n-R16其中n代表0或1，且其中R15代表-O--S--SO--SO2--OSO2，或，仅当R16代表-CH3，-SO2O-，和R16代表-CF3，-CF2CF2H，-CH2CF3，-C2F5，或，仅当n为1和R15为-SO-，-SO2，-OSO2-，或-SO2O-，-CH3;R2为氢、卤素、C1至C3烷基、苄基，或C2至C3链烯基;R3为氢或卤素;和R4为C1-C4全氟烷基或1，1，2，2-四氟烷基;如上述当R1含有一个或多个R11、R12或R14取代基时，R1上取代基的总数不超过3;和第二种活性剂选自下述化合物及其生理学上可接受的盐类丙硫咪唑，苯硫哒唑，氟苯哒唑，甲苯咪唑，磺唑氨酯，氧苯哒唑，ricobendazole，噻苯咪唑，三氟苯咪唑，左咪唑，噻烯氢嘧啶，噻嘧啶，对二氮己环。
6.根据权利要求5的方法，其中第一种活性剂为[(4-三氟甲氧基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷或其生理学上可接受的盐类。
7.根据权利要求6的方法，其中第二种活性剂是左咪唑或其生理学上可接受的盐类。
8.治疗或保护脊椎动物使之免受寄生虫侵害的制剂，其中包括生理学上可接受的载体和两种活性剂。第一种活性剂是下式的化合物及其生理学上可接受的盐类
其中R11为氰基;R12为硝基、异氰基、C2至C4链烷醇基、C2至C4全氟链烷醇基、2，2，3，3-四氟丙酰基、-N(氢或C1至C3烷基)SO2CF3，或-N＝C(各自独立选自C1至C2烷基、C1至C2全氟烷基，或1，1，2，2-四氟乙基)2;R13为溴、氯或氟;R14为碘或下式的基团-R5n-R16其中n代表0或1，且其中R15代表-O--S--SO--SO2，-OSO2，或，仅当R16代表-CH3，-SO2O-，和R16代表-CF3，-CF2CF2H，-CH2CF3，-C2F5，或，仅当n为1和R15为-SO-，-SO2，-OSO2-，或-SO2O-，-CH3;R2为氢、卤素、C1至C3烷基、苄基，或C2至C3链烯基;R3为氢或卤素;和R4为C1-C4全氟烷基或1，1，2，2-四氟烷基;如上述当R1含有一个或多个R11、R12或R14取代基时，R1上取代基的总数不超过3;和第二种活性剂选自下述化合物及其生理学上可接受的盐类丙硫咪唑，苯硫哒唑，氟苯哒唑，甲苯咪唑，磺唑氨酯，氧苯哒唑，ricobendazole，噻苯咪唑，三氟苯咪唑，左咪唑，噻烯氢嘧啶，噻嘧啶，对二氮己环。
9.根据权利要求8的制剂，其中第一种活性剂为[((4-三氟甲氧基)苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷或其生理学上可接受的盐类。
10.根据权利要求9的制剂，其中第二种活性剂是左咪唑或其生理学上可接受的盐类。
11.下式的化合物或其生理学上可接受的盐类，
其中R1a为下式部分
其中R11是氰基;R12为硝基、异氰基、C2至C4链烷醇基、C2至C4全氟链烷醇基、2，2，3，3-四氟丙酰基、-N(氢或C1至C3烷基)SO2CF3，或-N＝C(各自独立选自C1至C2烷基、C1至C2全氟烷基，或1，1，2，2-四氟乙基)2;R13a为氯;R13b为溴或氟;R14为碘或下式基团-R5n-R16，和其中n代表0或1，且其中R15代表-O--S--SO--SO2，-OSO2，或，仅当R16代表-CH3，-SO2O-，和R16代表-CF3，-CF2CF2H，-CH2CF3，-C2F5，或，仅当n为1时，R15为-SO-，-SO2，-OSO2-，或-SO2O-，-CH3;R2为氢、卤素、C1至C3烷基、苄基，或C2至C3链烯基;R3为氢或卤素;和R4为C1-C4全氟烷基或1，1，2，2-四氟烷基;附带有下述限定(1)R1a至少含有一个取代基，(2)当R1a含有一个或多个R11、R12或R14取代基时，R1a上取代基的总数不超过3个，(3)如果R1a仅含有一个R12取代基，R1a或为多位被取代或为在邻位或间位被取代，(4)如果R1a仅含有一个R13a取代基，R1a或为多位被取代或为邻位或间位被取代。
12.根据权利要求11的化合物为[(4-三氟甲氧基苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷或其生理学上可接受的盐类。
13.根据权利要求12的化合物为左咪唑盐。
14.二磺酰基甲烷类化合物的盐选自下列的化合物[苯基磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(4-氯苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷;[(4-硝基苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷;和[(3-硝基-4-氯苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷和选自下列抗蠕虫化合物苄酚宁，乙胺嗪，左咪唑，噻烯氢嘧啶，烟碱，对二氮己环，和噻嘧啶。
15.根据权利要求14的盐，其中二磺酰基甲烷化合物为[(3，4-二氯苯基)磺酰基][(三氟甲基)磺酰基]甲烷。
全文摘要
本发明涉及应用二磺酰基甲烷类化合物防治在脊椎动物中的寄生虫。
文档编号A61K31/425GK1095061SQ93119988
公开日1994年11月16日 申请日期1993年12月29日 优先权日1992年12月30日
发明者戴维·艾拉·威基塞 申请人:伊莱利利公司