专利名称：三甲曲沙盐结晶及其制备方法
技术领域：
本发明涉及新的结晶形式的三甲曲沙盐以及制备三甲曲沙盐结晶的新方法。
2.本发明的背景技术已知2，4-二氨基-5-甲基-6-[(3，4，5-三甲氧基苯胺基)甲基]喹唑啉盐(“三甲曲沙trimetrexate”)具有抗肿瘤、抗寄生虫和抗菌的活性。三甲曲沙是一种强有力的二氢叶酸还原酶(“DHFR”)的抑制剂，且已知二氢叶酸还原酶可催化DNA和RNA的核苷酸前体的合成。此酶的抑制导致细胞被还原叶酸盐的耗尽，而此被还原叶酸盐对于各种细胞过程是必需的，包括RNA和DNA的合成，由此这种抑制最终导致细胞死亡。正是这种特性赋予三甲曲沙具有抗肿瘤、抗寄生虫和抗菌的活性。
已经在体外和体内实验中证明三甲曲沙对一系列实验性鼠和人肿瘤细胞系的抗肿瘤活性。例如三甲曲沙已在体外实验中显示出它对诸如L1210、L5178Y、S-180、W-256的鼠细胞系具有抗肿瘤活性。另外三甲曲沙还在体外实验中显示出它对来源于乳腺、结肠、肺、卵巢、肾细胞和黑色素瘤细胞的人肿瘤细胞系具有抗肿瘤活性。体内研究已经证明三甲曲沙对诸如B16黑色素瘤、结肠26和38、L1210和P388白血病和CD8F乳房肿瘤的鼠肿瘤具有治疗效用。三甲曲沙其它可能的应用包括对疟疾、银屑病、类风湿性关节炎的治疗和对卡氏肺囊虫肺炎的预防。
作为游离碱，三甲曲沙是一种水溶性很低的亲油DHFR。为提高其水溶性，Warner-Lambert公司合成了许多不同的盐，它们由Colbry公开于美国专利4,376,858号，且于1983年3月15日获得专利并转让给Warner-Lambert公司。Colbry所报道的优选盐为三甲曲沙葡糖醛酸盐，这是由于它具有较高的水溶性、稳定性和葡糖醛酸的低毒性。Colbry公开的方法为一个制备方法，其中将三甲曲沙和葡糖醛酸溶解于温的甲醇和乙酸乙酯中，然后冷却以沉淀此盐。Colbry专利阐明所公开的三甲曲沙葡糖醛酸盐为非结晶的。
J.L.Hicks等在《放射性药物的标记化合物杂志》(J.LabelledCompound Radiopharm.)29，415(1991)中公开了另一种制造三甲曲沙葡糖醛酸盐的方法。在此方法中，将三甲曲沙游离碱和葡糖醛酸加入一个安瓿内的水溶液中，然后冷冻干燥以形成固体。此方法也产生一种非晶形盐。
一种注射形式的非晶形三甲曲沙葡糖醛酸盐已经在美国和加拿大获得销售授权，其商品名为Neutrexin，由美国Bioscience(WestConshohocken，宾夕法尼亚)生产，它与甲酰四氢叶酸联合使用以治疗免疫损害病人(例如AIDS患者)的中度至重度卡氏肺囊虫肺炎(U.S.Bioscience’s Neutrexin for PCP，Scripp 1886/87，31(1994))。
A.Hempel等在肿瘤生物化学生理学(Cancer Biochem.Biophys.)10，25-30(1988)中公开了结晶结构的三甲曲沙乙酸酯一水合物和水合三甲曲沙游离碱。但没有关于结晶葡糖醛酸三甲曲沙及其制备方法的建议。
H.K.Chan等在结晶形成杂志(J.Crystal Growth)94，488-498(1989)中公开了改进氨甲喋呤结晶的技术。溶液中三甲曲沙的存在可影响所要沉淀的氨甲喋呤的结晶习性。但没有关于三甲曲沙葡糖醛酸盐结晶的建议。
P.L.Stetson等在《色谱法杂志》(J.Chromatography)464，163-171(1989)中讨论了根据Warner Lambert/Parke-Davis的药物研究部(Pharmaceutical Research Division)获得的三甲曲沙葡糖醛酸盐的稳定性。很明显，这种盐是通过美国专利4,376,858公开的方法而获得的，此专利转让给Warner Lambert。它指出此盐在溶液中的半衰期于37℃为51.6±0.8天。
已认识到非晶体形式的三甲曲沙盐不是用于口服给药药物的优选形式。因此，为了在贮藏中具有一致且较高的稳定性，以及提供具有良好稳定性和生物利用度的口服形式的三甲曲沙药物，在技术上非常需要可生产大量高纯度、药用级的具有结晶结构的三甲曲沙盐的适宜方法。
3.本发明的概述本发明提供结晶形式的三甲曲沙，它既可为葡糖醛酸盐、乙酸盐、盐酸盐、甲磺酸盐也可为乳酸盐，并可作为稳定且明确限定的固体物质按植物制剂生产。这种晶体形式在贮存中具有超长的稳定性并可适用于药物的口服和静脉内给药。
在水或水-酒精溶液中应用一种弱碳素酸处理三甲曲沙碱以增溶游离碱，弱碳素酸即葡糖酸、葡糖醛酸、乳酸、乙酸等，而优选葡糖酸。将三甲曲沙溶液加热到40℃至80℃，并且搅拌至非常均匀，应用活性炭处理并真空过滤。用过量所需要的酸或者此酸的共轭碱处理滤液，从而获得需要的三甲曲沙盐。将溶液冷却至20℃，过滤并且用一种适宜的溶剂洗涤此结晶，然后在真空中干燥。
本发明进一步提供生产性质优良的结晶三甲曲沙盐的新方法。在一个优选实施方式中，本发明提供生产性质优良的结晶三甲曲沙葡糖醛酸盐的新方法。此方法的特征如下a.将水用作溶剂；b.应用过量的葡糖醛酸防止三甲曲沙游离碱与所需要的三甲曲沙葡糖醛酸盐的共沉淀；c.在水溶液中将正庚烷用作防泡剂；d.过滤三甲曲沙葡糖醛酸盐结晶并用2％的葡糖醛酸溶液洗涤；e.在范围为40至50度的升高温度下将此盐在真空中干燥，以避免此盐的分解以及结块和凝聚的形成。
在另一优选实施方式中，本发明提供生产性质优良的三甲曲沙乙酸盐结晶水合物的新方法。此方法特征如下a.在水介质中将20至30％的乙醇用作溶解三甲曲沙游离碱的溶剂；b.然后加入过量的葡糖酸以形成三甲曲沙葡糖酸盐，并且防止三甲曲沙游离碱与所得三甲曲沙葡糖酸盐的共沉淀；c.然后加入过量的乙酸，将三甲曲沙葡糖酸盐转化为乙酸盐；d.过滤三甲曲沙乙酸盐结晶水合物并用3至7％的乙酸溶液洗涤；e.在范围为70至80度的升高温度下将此盐在真空中干燥，以避免此盐的分解以及结块和凝聚的形成。
在另一优选实施方式中，本发明提供生产性质优良的三甲曲沙盐酸盐结晶水合物的新方法。此方法特征如下a.将水用作溶解三甲曲沙游离碱的溶剂；b.然后加入过量的葡糖酸以形成三甲曲沙葡糖酸盐，并且防止三甲曲沙游离碱与所得三甲曲沙葡糖酸盐的共沉淀；
c.然后加入过量的氯化钠，将三甲曲沙葡糖酸盐转化为盐酸盐；d.过滤三甲曲沙盐酸盐结晶水合物并用75至85％的乙醇水溶液洗涤；e.在范围为70至80度的升高温度下将此盐在真空中干燥，以避免此盐的分解以及结块和凝聚的形成。
在另一优选实施方式中，本发明提供生产性质优良的三甲曲沙甲磺酸盐结晶的新方法。此方法特征如下a.将水用作溶解三甲曲沙游离碱的溶剂；b.然后加入过量的葡糖酸以形成三甲曲沙葡糖酸盐，并且防止三甲曲沙游离碱与所得三甲曲沙葡糖酸盐的共沉淀；c.然后加入过量的甲磺酸，将三甲曲沙葡糖酸盐转化为甲磺酸盐；d.过滤三甲曲沙甲磺酸盐结晶并用一种水溶液洗涤；e.在范围为75至90度的升高温度下将此盐在真空中干燥，以避免此盐的分解以及结块和凝聚的形成。
在另一优选实施方式中，本发明提供生产性质优良的三甲曲沙乳酸盐结晶水合物的新方法。此方法特征如下a.将水用作溶解三甲曲沙游离碱的溶剂；b.然后加入过量的L-(+)-乳酸，将三甲曲沙碱转变为乳酸盐；c.过滤三甲曲沙乳酸盐结晶水合物并用50％的乙醇水溶液洗涤以避免产生由此盐溶解带来的损耗；d.在范围为70至80度的升高温度下将此盐在真空中干燥，以避免此盐的分解以及结块和凝聚的形成。
4.附图的简要说明附
图1表示本发明三甲曲沙葡糖醛酸盐结晶水合物的X-线粉末衍射花样。此盐是结晶的，显示可测定的衍射峰。Cu放射线(1.54)是X-线源。
附图2表示由冷冻干燥产生的非晶形三甲曲沙葡糖醛酸盐的X-线粉末衍射花样。此盐没有显示衍射峰，并且在10-30°的2-θ区域中具有一个峰，这是非晶形物质的特征。Cu放射线(1.54)是X-线源。
附图3表示本发明三甲曲沙葡糖醛酸盐结晶水合物的差示扫描量热法的扫描。此盐在大约136℃显示一个明显的熔点，在接近此温度时分解。
附图4表示由冷冻干燥产生的非晶形三甲曲沙葡糖醛酸盐的差示扫描量热法的扫描。此盐显示一个围绕129℃宽阔的熔化范围，并且在高温下以较慢的速率分解。
附图5表示本发明三甲曲沙乙酸盐结晶水合物的差示扫描量热法的扫描。
附图6表示本发明三甲曲沙乙酸盐结晶水合物的X-线粉末衍射花样。Cu放射线(1.54)是X-线源。
附图7表示本发明三甲曲沙盐酸盐结晶水合物的差示扫描量热法的扫描。
附图8表示本发明三甲曲沙盐酸盐结晶水合物的X-线粉末衍射花样。Cu放射线(1.54)是X-线源。
附图9表示本发明三甲曲沙甲磺酸盐结晶的差示扫描量热法的扫描图。
附图10表示本发明三甲曲沙甲磺酸盐结晶的X-线粉末衍射花样。Cu放射线(1.54)是X-线源。
附图11表示本发明三甲曲沙乳酸盐结晶水合物的差示扫描量热法的扫描。
附图12表示本发明三甲曲沙乳酸盐结晶水合物的X-线粉末衍射花样。Cu放射线(1.54)是X-线源。
表1显示三甲曲沙葡糖醛酸盐结晶水合物的X-线粉末衍射花样的峰位和强度。
表2显示三甲曲沙乙酸盐结晶水合物的峰位和强度。
表3显示三甲曲沙盐酸盐结晶水合物的峰位和强度。
表4显示三甲曲沙甲磺酸盐结晶的峰位和强度。
表5显示三甲曲沙乳酸盐结晶水合物的峰位和强度。
5.优选实施方式的说明已经发现通过仔细地控制此盐结晶中所用试剂的纯度在某种程度上可以避免三甲曲沙盐的污染和产量下降。
在葡糖醛酸盐和其它结晶盐制备中所用的葡糖醛酸的纯度应该是高的。可通过几步处理的葡萄糖的合成获得葡糖醛酸，也可从植物群的天然产物中获得葡糖醛酸，诸如樱桃树胶(见，C.L.Mehltretter等，《美国化学会杂志》(J.Amer.Chem.Soc.)73，2424(1951))。当合成制备时，草酸盐离子、钙阳离子和反应副产物可能会污染葡糖醛酸。在用于本发明结晶方法之前，应通过离子交换或其它适宜的方法除去这些污染物。
同样，三甲曲沙游离碱的纯度应该是高的。三甲曲沙游离碱可能的污染物包括3，4，5-三甲氧苯胺，2，4-二氨基-5-甲基-6-喹唑啉甲醛，6-氨甲基-5-甲基-2，4-喹唑啉二胺，2-氨基-4-羟基-5-甲基-6-[(3，4，5-三甲氧苯胺)甲基]喹唑啉和2，4-二氨基-5-甲基-6-喹唑啉羟甲基。
生产三甲曲沙葡糖醛酸盐结晶水合物的常用方法如下a.在约60-70℃的水中混合三甲曲沙游离碱和葡糖醛酸或葡糖醛酸的前体，直至形成一种均匀溶液；b.通过一个澄清过滤器过滤此均匀溶液；c.将此过滤溶液冷却至约40-50℃；d.将一种诸如庚烷这样的防泡剂加入此溶液，e.将此溶液冷却至约20℃1小时以上，然后冷却至10℃1小时，然后冷却至5℃，滤出三甲曲沙葡糖醛酸盐晶体，并用约2％的三甲曲沙葡糖醛酸盐溶液洗涤此晶体而形成一种淤浆；并且f.在丙酮中搅拌此三甲曲沙葡糖醛酸盐淤浆，过滤并在约50℃的真空中干燥此晶体。
可用于上述方法中的葡糖醛酸的一种前体为葡糖醛酸内酯，它通过与水反应可水解为葡糖醛酸。
三甲曲沙游离碱与葡糖醛酸或其前体的优选摩尔比约为1.17至1.22。需要过量的葡糖醛酸以防止三甲曲沙游离碱的沉淀，并且确保此碱完全转化为盐。然而，太多过量的葡糖醛酸可造成葡糖醛酸的共沉淀。另外，三甲曲沙游离碱与葡糖醛酸的摩尔比低于1.17使在短时间内三甲曲沙游离碱完全溶解于水中发生较大的困难。
由这些试剂的溶解度以及此溶液的搅拌性确定用于溶解三甲曲沙游离碱和葡糖醛酸的水量。每千克三甲曲沙游离碱，水量优选约为500ml。
优选地，可将正庚烷、辛醇或甲苯加入此水溶液中以减少发泡。
为了除去诸如极性氧化产物的有色杂质，通过一种澄清介质将此溶液澄清，澄清介质选自由皂土、蒙脱石或洗涤过的漂白土或合成硅石的其它酸组成的物质组。
一旦在冷却水中形成三甲曲沙葡糖醛酸盐结晶水合物，则过滤此盐而将它从溶液中分离出来。用约2％葡糖醛酸溶液洗涤此过滤的盐以除去有色杂质并避免溶解此盐。然后通过在含水不应超过1％的无水丙酮中形成淤浆、过滤和在约50℃的真空中干燥此盐，使水含量约为3％至9％，由此形成单-、二-或三水合形式的三甲曲沙葡糖醛酸盐。选择干燥的温度和时间长度以避免此盐的分解，并且高效地获得准确的含水量。
可通过HPLC、薄层色谱法或NMR分析法定性分析与此盐一起存在的分解产物。
对于三甲曲沙的乙酸盐、盐酸盐和甲磺酸盐的制备，优选先用葡糖酸处理，将三甲曲沙碱转化为葡糖酸盐。可用TMTX葡糖酸盐的共轭酸处理而将TMTX葡糖酸盐转化为所需要的TMTX盐。下面为各种盐制备的实例。
通过在70至80℃的温度范围内用过量乙酸和乙酸钠的混合物处理三甲曲沙葡糖酸盐可将三甲曲沙葡糖酸盐转化为三甲曲沙乙酸盐水合物。然后通过冷却至20至25℃的温度范围将所得三甲曲沙乙酸盐结晶，过滤并用浓度为3至7％的乙酸溶液或另一种在洗涤过程中可避免溶剂损耗的适宜溶剂洗涤。在一优选方法中，应用一种乙醇溶剂形成此三甲曲沙葡糖酸盐，并且此后直接转化为此乙酸盐。
或者，通过在65至75℃的温度范围内用过量氯化钠处理三甲曲沙葡糖酸盐可将三甲曲沙葡糖酸盐转化为三甲曲沙盐酸盐水合物。然后通过冷却至45至55℃的温度范围将所得三甲曲沙盐酸盐水合物结晶，过滤并用80％的乙醇水溶液或另一种在洗涤过程中可避免溶剂损耗的适宜溶剂洗涤。在一优选方法中，应用一种水溶剂形成此三甲曲沙葡糖酸盐，并且此后直接转化为此盐酸盐。
再或者，通过在80至90℃的温度范围内用过量甲磺酸处理三甲曲沙葡糖酸盐可将三甲曲沙葡糖酸盐转化为三甲曲沙甲磺酸盐。然后通过冷却至15至25℃的温度范围将所得三甲曲沙甲磺酸盐结晶，过滤并用水或另一种在洗涤过程中可避免溶剂损耗的适宜溶剂洗涤。在一优选方法中，应用一种水溶剂形成此三甲曲沙葡糖酸盐，并且此后直接转化为此甲磺酸盐。
再或者，通过用过量乳酸水溶液处理三甲曲沙碱的直接反应可形成三甲曲沙乳酸盐水合物。然后通过冷却至0至10℃的温度范围将所得三甲曲沙乳酸盐水合物结晶，过滤并用浓度为45至55％的乙醇水溶液或另一种在洗涤过程中可避免溶剂损耗的适宜溶剂洗涤。
6.实施例实施例1制备三甲曲沙D(+)葡糖醛酸盐结晶水合物的方法在一个试管中将33L纯水加热至60-70℃，将2.23kg(11.49kgmol)葡糖醛酸加入此热水中，并装入(以干燥原料为准)3.88kg(10.50kg mol)的三甲曲沙碱。然后加入0.33kgsTonsil并在50-70℃、约1巴的压力下加压过滤此混合物。将滤液冷却至45-50℃。
在45-50℃下搅拌此滤液约30分钟后，加入0.1L正庚烷。将此悬浮液在超过1小时的时间内缓慢冷却至20℃，然后冷却至10℃，在此温度下搅拌悬浮液1小时，最终将其冷却至5℃。
将产物通过真空滤出，首先用3L2％葡糖醛酸纯水溶液洗涤，然后用5L丙酮洗涤。
在一个试管中装入25L丙酮，并装入前面所得湿的三甲曲沙葡糖醛酸盐水合物以形成一种淤浆。在20-25℃下搅拌此浆15分钟，并通过真空再一次将产物滤出，并用5L丙酮洗涤，得到7.0kg湿产物。
将湿三甲曲沙葡糖醛酸盐水合物移入一种冷真空干燥器中，并在20-30毫巴、最高温度为50℃下，干燥3-6小时，得到4.80kg干燥三甲曲沙葡糖醛酸盐水合物(以三甲曲沙游离碱为准的理论收率为78％)。
然后将此干燥产物过筛(500μ)，如果使用的是一种盘式干燥器，还可以掺合并装入有两个聚乙烯袋作插入物的纤维转鼓中。最大差示扫描量热(DSCmax)＝136℃。含水量为4.26％(w/w)，参照无水物质，通过HPLC测定其纯度为104％(w/w)。
此三甲曲沙葡糖醛酸盐水合物干燥产物表现一种附图1所示的X-线粉末衍射花样以及附图3所示的差示扫描量热法的扫描图。此外，制备作为一种矿物油分散体的此干燥产物的样品表现结晶物质典型的双折射。实施例2制备三甲曲沙乙酸盐水合物的方法在350ml乙醇和100ml水中将62.0g水合三甲曲沙碱(160mMol)形成淤浆。将此混合物加热至70℃，并加入28ml 50％葡糖酸水溶液(90mMol)、7.5ml冰醋酸、4g Tonsil和0.5g活性炭。然后在70-75℃加压过滤此混合物。
向此透明棕色溶液中装入在25ml水中含6.5g(80m Mol)乙酸钠的溶液，并且然后在70-75℃装入11ml冰醋酸。
然后冷却此混合物至20℃。通过一个真空吸滤过滤器滤出乙酸盐的粗结晶沉淀，并用50ml 5％乙酸水溶液洗涤。在一个75℃真空烘箱内干燥后，获得65.5g(理论收率为84％)暗黄色结晶。最大差示扫描量热(DSCmax)＝128℃(-H2O)，最小＝209℃、217℃。含水量为4.1％(w/w)，并且参照无水物质，通过滴定法测定其纯度为99.3％(w/w)。
此三甲曲沙乙酸盐水合物干燥产物表现一种附图5所示的差示扫描量热法的扫描图以及附图6所示的X-线粉末衍射花样。实施例3制备三甲曲沙盐酸盐水合物的方法在500ml水和72ml 50％葡糖酸水溶液中将50g水合三甲曲沙碱(130mMol)形成淤浆。将此混合物加热至70℃，并搅拌直至获得一种均匀溶液。加入1g活性炭后，将此混合物加压过滤并冷却至50℃。
加入20g氯化钠。然后冷却此溶液至20℃并搅拌1小时。通过真空吸滤过滤器滤出结晶并用50ml 80％乙醇洗涤两遍。在一个75℃的真空烘箱内干燥后，获得48g(理论收率为90％)盐酸盐。最大差示扫描量热(DSCmax)＝148℃，最小＝233℃。含水量为5.9％(w/w)，并且参照无水物质通过滴定法测定其纯度为98.7％(w/w)。
此三甲曲沙盐酸盐水合物干燥产物表现一种附图7所示的差示扫描量热法的扫描以及附图8所示的X-线粉末衍射花样。实施例4制备三甲曲沙甲磺酸盐的方法在700ml去离子水中将77g水合三甲曲沙碱(200mMol)形成淤浆。将100ml 50％葡糖酸水溶液、5g Tonsil和5g活性炭加入此悬浮液中。将此混合物加热至50℃并加压过滤。
然后将滤液加热至80℃并装入26.4ml(400mMol)甲磺酸。在80至90℃的范围内，加入在100ml水中含30ml 30％氢氧化钠的溶液而将PH值调节为4.2。形成无色甲磺酸盐结晶后，冷却此溶液至20℃。通过真空吸滤过滤器滤出固体并用水洗涤。在一个75至90℃的真空烘箱内干燥至恒重后，获得89g(理论收率为95％)。最大差示扫描量热(DSCmax)＝239℃，最小＝241℃和290℃。含水量为0.2％(w/w)，并且参照无水物质通过滴定法测定其纯度为99.2％(w/w)。
此三甲曲沙甲磺酸盐干燥产物表现一种附图9所示的差示扫描量热法的扫描图以及附图10所示的X-线粉末衍射花样。实施例5制备三甲曲沙乳酸盐水合物的方法通过加热至40℃，将13g水合三甲曲沙碱(34mMol)和3.5ml 85％L-(+)-乳酸(40mMol)水溶液溶解在100ml水中。在此温度下用1g活性炭和1g Tonsil进行加压过滤。
将100ml乙醇加入此滤液并且然后将混合物冷却5℃。滤出沉淀的固体并用20ml 50％乙醇水溶液洗涤。
在75℃的真空中干燥后，获得13.1g(理论收率为81％)浅黄色乳酸盐。最大差示扫描量热(DSCmax)＝196℃和208℃，最小＝198℃。含水量为3.3％(w/w)，并且参照无水物质通过滴定法测定其纯度为99.2％(w/w)。
此三甲曲沙乳酸盐水合物干燥产物表现一种附图11所示的差示扫描量热法的扫描以及附图12所示的X-线粉末衍射花样。参数原料与试剂的摩尔比一般在±3％变动。
除非另作说明，A±5％的变动是所有溶剂测定在操作上的公差。
加入“大约”和“近似”表示其数量可在较宽的范围内变动。
除非另作说明，时间为近似值，并且可在±5％内变动。
除非另作说明，温度的公差为±5％。
对于压力，除非另作说明，允许±10％的变动范围。
除非另作说明，PH值可在±1PH单位变动，如果在调节中PH值被超过，可用一种适宜的酸或碱校准。
因为这些实施方式是本发明几个方面的举例说明，所以本文说明和要求保护的本发明并不限制于本文公开的特殊实施方式的范围内。所有相当的实施方式都要符合本发明的范围。事实上，除了本文所显示和说明的那些以外，对于本领域技术人员来说，对前面描述的本发明做不同的修改将是显而易见的。这些修改也要符合所附的权利要求的范围。将本申请中引用的所有参考资料作为整体引入本文作为参考。
表1日期6-12-93时间_5146从峰定位程序中增加的产量鉴定样品三甲曲沙-葡糖醛酸盐批号93-07231文件HEU06.RAW D/I文件HEU06.DIF测定日期和时间03-12-93 102149文件测定参数范围#1 起始角2.000终止角80.000 步骤0.050计时衍射计1-A 扫描阶跃扫描特定参数 方法＝趋势定位法灵敏系数＝2.00最小峰值比最大峰值＝0.50％α-2除去α-1/α-2之比＝2.002-θ的校准系列 #1序号 2θ d 相对1(％)最大1积分1宽度类型范围#11 4.473 19.7411100.0 309 1531.94 0.248 KA12 6.348 13.912741.5 128 468.330.182 KA13 8.990 9.8289 51.6 160 1210.00 0.379 KA14 10.086 8.7627 12.6 39 176.940.228 KA15 12.711 6.9584 9.329 198.890.344 KA16 13.517 6.5454 51.1 158 1063.61 0.336 KA17 14.286 6.1949 30.8 95 574.170.301 KA18 16.290 5.4369 6.520 112.780.281 KA19 18.061 4.9075 27.0 84. 589.440.353 KA110 22.698 3.9145 10.2 31. 179.440.286 KA111 69.486 1.3516 38 12 32.22 0.138 KA1
表2日期22-12-94时间124738从峰定位程序中增加的产量鉴定样品LO7 92-11926文件USB27.RAW D/I文件USB27.DIF测定日期和时间22-12-94 113633文件测定参数范围#1起始角4.000终止角40.000 步骤0.050 计时衍射计1-A扫描阶跃扫描特定参数方法＝趋势定位法灵敏系数＝2.00最小峰值比最大峰值＝0.50％α-2除去α-1/α-2之比＝2.002-θ的校准系列#1序号 2θ d 相对1(％) 最大1积分1宽度类型范围#115.049 17.487330 66 94.44 0.071 KA125.401 16.348819.8441.1377.22 0.156 KA1310.604 8.3359 54.91218. 4812.06 0.221 KA1410.800 8.1851 100.0 2221. 7485.72 0.169 KA1511.592 7.6278 27.4609 2614.17 0.215 KA1612.504 7.0731 7.5 166.570.000.172 KA1713.546 6.5315 5.1 114.438.060.192 KA1813.900 6.3660 6.0 133.366.670.138 KA1915.077 5.8717 6.0 134.332.780.124 KA110 15.353 5.7664 19.5434.1590.28 0.183 KA111 16.234 5.4555 24.4543.2397.11 0.238 KA112 16.500 5.3682 35.7794.2926.23 0.184 KA113 17.674 5.0143 11.5256.893.330.174 KA114 18.416 4.8137 6.9 153.525.000.171 KA1序号2θ d相对1(％) 最大1积分1 宽度类型1319.167 4.6269 5.9 130. 367.780.141 KA11620.049 4.4253 7.8 173. 785.560.227 KA11721.140 4.1992 16.1 357. 2059.44 0.289 KA11821.679 4.0961 7.0 156. 200.350.116 KA11921.896 4.0560 16.9 376. 1767.43 0.235 KA12022.902 3.8801 31.8 707. 3481.67 0.246 KA12123.312 3.8126 14.8 329. 1003.33 0.152 KA12223.998 3.7052 9.0 199. 871.990.242 KA12324.105 3.6890 12.0 267. 771.340.144 KA12424.507 3.6294 8.4 186. 461.390.124 KA12524.963 3.5642 6.0 134. 353.330.132 KA12625.216 3.5290 2.3 51. 126.110.123 KA12725.657 3.4694 45.7 1015.5032.78 0.248 KA12826.722 3.3334 13.8 305 1221.94 0.200 KA12927.198 3.2761 10.3 228. 805.560.177 KA13027.548 3.2353 10.0 222. 671.390.151 KA13128.140 3.1686 8.4 187. 606.990.175 KA13329.541 3.214 1.4 31. 51.67 0.082 KA13431.471 2.403 1.2 27. 92.22 0.168 KA13534.406 2.6045 2.5 55. 179.720.163 KA13637.820 2.3769 2.9 64. 270.000.209 KA13738.356 2.3449 3.8 84. 281.390.168 KA1USB27.RAW的继续表2(续)
表3时间22-12-94时间124955从峰定位程序中增加的产量鉴定样品LO7 92-11927文件USB28.RAW D/I文件USB28.DIF测定日期和时间22-12-94 115909文件测定参数范围#1起始角4.000终止角40.000 步骤0.050计时1衍射计1-A扫描阶跃扫描特定参数 方法＝趋势定位法灵敏系数＝2.00最小峰值比最大峰值＝0.50％α-2除去α-1/α-2之比＝2.002-θ的校准系列#1序号 2θ d 相对1(％) 最大1积分1宽度类型范围#11 8.100 10.906414.2 181 555.83 0.153 KA2 8.772 10.072633.1 422. 1858.330.220 KA13 10.357 8.5341 100.0 1277.5850.560.229 KA14 11.910 7.4249 3.0 39. 56.39 0.073 KA15 15.182 5.8310 1.4 18. 56.11 0.155 KA16 15.568 5.6873 61.3 783. 3116.940.199 KA17 17.299 5.1221 2.9 37. 110.28 0.150 KA18 18.539 4.7821 9.3 119. 508.06 0.214 KA19 19.055 4.6538 1.7 22. 30.00 0.069 KA11020.811 4.2648 98.1 1252.5814.440.232 KA11121.397 4.1494 2.9 37. 86.11 0.117 KA11222.658 3.9213 1.1 14. 25.28 0.092 KA11322.893 3.8816 2.0 25. 68.89 0.137 KA11423.424 3.7947 18.6 237. 1412.780.298 KA1序号2θ d 相对I(％) 最大1积分1宽度 类型15 25.3933.50482.9 37. 61.110.083 KA116 25.9173.43505.1 65. 143.19 0.155 KA117 26.0303.42047.2 92. 338.75 0.185 KA118 27.5103.239721.9280. 1365.56 0.244 KA119 28.8243.09495.3 68. 241.67 0.178 KA120 31.5412.83420.5 6. 26.670.207 KA1USB28.RAW的继续表3(续)
表4时间22-12-94时间130728从峰定位程序中增加的产量鉴定样品LO7 92-11929文件USB30.RAW D/I文件USB30.DIF测定日期和时间22-12-94 124139文件测定参数范围#1起始角4.000终止角40.000 步骤0.050 计时1衍射计1-A扫描阶跃扫描特定参数方法＝趋势定位法灵敏系数＝2.00最小峰值比最大峰值＝0.50％α-2除去α-1/α-2之比＝2.002-θ的校准系列#1序号2θ d 相对1(％) 最大1积分1 宽度类型范围#11 7.541 11.7132100.01725.7379.44 0.214 KA12 9.196. 9.6093 9.2 158. 617.78 0.195 KA13 11.007 8.0317 32.0 553. 2370.00 0.214 KA14 12.036 7.3475 12.1 208. 810.56 0.195 KA15 15.159 5.8401 47.0 811. 4142.64 0.257 KA16 15.337 5.7724 13.1 226. 480.14 0.106 KA17 15.993 5.5372 1.7 116. 381.67 0.164 KA18 16.473 5.3770 3.7 64. 211.67 0.165 KA19 17.799 4.9794 13.0 224. 978.33 0.218 KA110 18.521 4.7867 19.2 331. 1376.16 0.225 KA111 18.657 4.7521 19.8 342. 942.73 0.138 KA112 20.571 4.3140 9.5 165. 508.33 0.154 KA113 21.060 4.2150 1.9 32. 59.44 0.092 KA11422.744 3.9067 9.1 157. 710.92 0.241 KA1序号 2θd相对I(％)最大1积分1宽度类型1522.8563.8878 9.0 155.339.910.110KA11623.9693.7096 29.1 502.2503.89 0.249KA11724.6533.6083 4.4 76. 191.940.126KA11825.4053.5032 5.1 87. 342.220.196KA11925.9883.4258 2.1 36. 107.500.147KA12026.3283.3823 9.3 161.685.000.212KA12127.5033.2405 2.8 48. 143.610.151KA12227.8323.2030 4.7 82. 360.000.221KA12328.9063.0863 2.7 46. 131.390.142KA12429.8072.9950 2.2 37. 71.11 0.095KA12530.4632.9320 1.7 29. 60.56 0.103KA12633.2192.6948 2.0 34. 120.560.177KA12734.5692.5926 1.0 18. 49.44 0.140KA12835.6562.5160 1.1 19 53.33 0.140KA1USB30.RAW的继续表4(续)
表5时间22-12-94时间125301从峰定位程序中增加的产量鉴定样品LO7 92-11928文件USB29.RAW D/I文件USB29.DIF测定日期和时间；22-12-94 122030文件测定参数范围#1起始角4.000终止角40.000 步骤0.050计时1衍射计1-A扫描阶跃扫描特定参数方法＝趋势定位法灵敏系数＝2.00最小峰值比最大峰值＝0.50％α-2除去α-1/α-2之比＝2.002-θ的校准系列#1序号 2θ d 相对1(％) 最大1积分1 宽度类型范围#114.894 18.0405 8.0 69. 227.78 0.164 KA127.528 11.7334 100.0866.3915.000.226 KA139.805 9.0140 46.9 406.1807.780.222 KA1411.360 7.7830 63.8 553.2597.220.235 KA1512.816 6.9016 28.2 244.985.56 0.202 KA1614.730 6.0092 19.4 168.608.33 0.181 KA1715.662 5.6534 84.4 731.3580.560.245 KA1817.071 5.1900 9.0 78. 253.89 0.162 KA1918.353 4.8301 16.5 143.502.22 0.176 KA110 19.700 4.5029 45.8 396.2038.610.257 KA111 20.500 4.3288 2.9 25. 39.17 0.078 KA112 20.745 4.2782 2.8 24. 38.61 0.079 KA113 20.957 4.2355 10.7 92. 235.00 0.127 KA114 21.407 4.1475 16.7 145.535.56 0.185 KA1序号 2θ d 相对1(％) 最大1 积分1 宽度 类型1522.1104.01724.8 41.88.89 0.108 KA11622.8343.89156.9 60.183.330.154 KA11723.0623.85359.7 84.154.170.092 KA11823.9503.71253.0 26.78.89 0.151 KA11924.2453.668024.0 208. 746.670.180 KA12024.6823.604129.2 253. 913.890.181 KA12125.0553.55131.6 14.13.89 0.050 KA12225.3413.51198.5 74.283.890.193 KA12326.2443.393016.8 145. 613.330.211 KA12427.2963.26467.6 65.233.330.178 KA12528.8013.09733.2 28.63.89 0.115 KA12629.3513.04052.0 17.42.78 0.124 KA12733.6872.65854.5 39.117.780.152 KA12834.2922.61291.5 13.20.00 0.077 KA12934.8142.57495.0 44.150.560.173 KA13035.3052.54025.6 48.166.670.172 KA13136.8942.43433.6 31.57.22 0.091 KA1USB29.RAW的继续表5(续)
权利要求
1.一种2，4-二氨基-5-甲基-6-[(3，4，5-三甲氧基苯胺基)甲基]喹唑啉葡糖醛酸盐结晶水合物。
2.一种根据权利要求1所述的2，4-二氨基-5-甲基-6-[(3，4，5-三甲氧基苯胺基)甲基]喹唑啉葡糖醛酸盐结晶水合物，其中葡糖醛酸为D(+)葡糖醛
3.酸种根据权利要求2所述的2，4-二氨基-5-甲基-6-[(3，4，5-三甲氧基苯胺基)甲基]喹唑啉葡糖醛酸盐结晶水合物，其具有一种与附图1基本相同的X-线粉末衍射花样。
4.一种根据权利要求2所述的2，4-二氨基-5-甲基-6-[(3，4，5-三甲氧基苯胺基)甲基]喹唑啉葡糖醛酸盐结晶水合物，其具有一种与表1基本相同的X-线粉末衍射花样。
5.一种制备2，4-二氨基-5-甲基-6-[(3，4，5-三甲氧基苯胺基)甲基]喹唑啉葡糖醛酸盐结晶水合物的方法，包括下面的步骤a.在大约60-70℃的水中混合三甲曲沙游离碱和葡糖醛酸或葡糖醛酸的前体以形成制备三甲曲沙葡糖醛酸盐水合物的溶液；b.冷却此溶液至大约40℃至50℃；c.将所冷却溶液通过一种澄清介质；以及d.将所澄清的溶液冷却至约20℃超过1小时，然后冷却至10℃1小时，而且然后冷却至5℃以形成此三甲曲沙葡糖醛酸盐水合物的结晶。
6.一种根据权利要求5所述的方法，其中三甲曲沙游离碱和葡糖醛酸的摩尔比约为1.17至1.22。
7.一种根据权利要求5所述的方法，其中葡糖醛酸的前体选自由葡糖醛酸-γ-内酯和葡糖醛酸一丙酮化合物组成的物质组。
8.一种根据权利要求5所述的方法，其中在步骤a)中的溶液还包括一种选自由正庚烷、辛醇和甲苯组成的物质组的防泡剂。
9.一种根据权利要求5所述的方法，其中澄清介质选自由皂土和蒙脱石组成的物质组。
10.一种根据权利要求5所述的方法，其中将步骤d)的三甲曲沙葡糖醛酸盐结晶水合物从溶液中分离出来并用约2％葡糖醛酸溶液洗涤。
11.一种根据权利要求10所述的方法，其中将所洗涤的三甲曲沙葡糖醛酸盐结晶水合物干燥至含水量约为3至9％。
12.一种根据权利要求11所述的方法，其中通过在丙酮中形成淤浆、从丙酮中分离此盐以及在真空中干燥此盐而干燥三甲曲沙葡糖醛酸盐结晶水合物。
13.一种2，4-二氨基-5-甲基-6-[(3，4，5-三甲氧基苯胺基)甲基]喹唑啉乙酸盐结晶水合物，具有一种与表2基本相同的X-线粉末衍射花样。
14.一种2，4-二氨基-5-甲基-6-[(3，4，5-三甲氧基苯胺基)甲基]喹唑啉乙酸盐结晶水合物，具有一种与附图6基本相同的X-线粉末衍射花样。
15.一种制备2，4-二氨基-5-甲基-6-[(3，4，5-三甲氧基苯胺基)甲基]喹唑啉乙酸盐结晶水合物的方法，包括下面的步骤a.在乙醇中混合三甲曲沙游离碱和葡糖酸或葡糖酸的前体并将所述的混合物加热至约70℃；b.将冰乙酸加入所述的混合物；c.将所述的混合物通过一种澄清介质，并将乙酸钠加入所述澄清混合物中以制备三甲曲沙乙酸盐水合物；以及d.冷却所澄清的混合物至约20℃以形成此三甲曲沙乙酸盐水合物的结晶。
16.一种根据权利要求15所述的方法，其中三甲曲沙游离碱和葡糖酸的摩尔比约为2至1。
17.一种根据权利要求15所述的方法，其中葡糖酸的前体选自由葡糖酸-内酯和葡糖酸一丙酮化合物组成的物质组。
18.一种根据权利要求15所述的方法，其中澄清介质选自由皂土和蒙脱石组成的物质组。
19.一种根据权利要求15所述的方法，其中将步骤d)的三甲曲沙乙酸盐结晶水合物从溶液中分离出来并用约5％乙酸溶液洗涤。
20.一种根据权利要求19所述的方法，其中将所洗涤的三甲曲沙乙酸盐结晶水合物干燥至含水量约为3.5至5％。
21.一种根据权利要求20所述的方法，其中通过从乙酸溶液中分离此盐和在真空中干燥此盐而干燥三甲曲沙乙酸盐结晶水合物。
22.一种2，4-二氨基-5-甲基-6-[(3，4，5-三甲氧基苯胺基)甲基]喹唑啉盐酸盐结晶水合物，具有一种与表3基本相同的X-线粉末衍射花样。
23.一种2，4-二氨基-5-甲基-6-[(3，4，5-三甲氧基苯胺基)甲基]喹唑啉盐酸盐结晶水合物，具有一种与附图8基本相同的X-线粉末衍射花样。
24.一种制备2，4-二氨基-5-甲基-6-[(3，4，5-三甲氧基苯胺基)甲基]喹唑啉盐酸盐结晶水合物的方法，包括下面的步骤a.在水中混合三甲曲沙游离碱和葡糖酸或葡糖酸的前体并将所述的混合物加热至约70℃；b.将所述的混合物通过一种澄清介质，并将氯化钠加入所述澄清混合物中以制备三甲曲沙盐酸盐水合物；c.冷却所澄清的混合物至约20℃以形成此三甲曲沙盐酸盐水合物的结晶。
25.一种根据权利要求24所述的方法，其中三甲曲沙游离碱和葡糖酸的摩尔比约为1至2。
26.一种根据权利要求24所述的方法，其中葡糖酸的前体选自由葡糖酸-内酯和葡糖酸一丙酮化合物组成的物质组。
27.一种根据权利要求24所述的方法，其中澄清介质选自由皂土和蒙脱石组成的物质组。
28.一种根据权利要求24所述的方法，其中将步骤c)的三甲曲沙盐酸盐结晶水合物从溶液中分离出来并用约80％乙醇溶液洗涤。
29.一种根据权利要求28所述的方法，其中将所洗涤的三甲曲沙盐酸盐结晶水合物干燥至含水量约为3.5至8％。
30.一种根据权利要求29所述的方法，其中通过从乙醇溶液中分离此盐和在真空中加热此盐而干燥三甲曲沙盐酸盐结晶水合物。
31.一种2，4-二氨基-5-甲基-6-[(3，4，5-三甲氧基苯胺基)甲基]喹唑啉甲磺酸盐结晶，其具有一种与表4基本相同的X-线粉末衍射花样。
32.一种2，4-二氨基-5-甲基-6-[(3，4，5-三甲氧基苯胺基)甲基]喹唑啉甲磺酸盐结晶，其具有一种与附图10基本相同的X-线粉末衍射花样。
33.一种制备2，4-二氨基-5-甲基-6-[(3，4，5-三甲氧基苯胺基)甲基]喹唑啉甲磺酸盐结晶的方法，包括下面的步骤a.混合三甲曲沙游离碱和葡糖酸或葡糖酸的前体而形成一种混合物并将所述的混合物加热至约50℃；b.将所述的混合物通过一种澄清介质，加热所述澄清混合物至约80℃，并将甲磺酸钠加入所述加热的澄清混合物中以制备三甲曲沙甲磺酸盐；c.冷却此混合物至约20℃以形成此三甲曲沙甲磺酸盐的结晶。
34.一种根据权利要求33所述的方法，其中三甲曲沙游离碱和葡糖酸的摩尔比约为2至3。
35.一种根据权利要求33所述的方法，其中葡糖酸的前体选自由葡糖酸-γ-内酯和葡糖酸一丙酮化合物组成的物质组。
36.一种根据权利要求33所述的方法，其中澄清介质选自由皂土和蒙脱石组成的物质组。
37.一种根据权利要求33所述的方法，其中将步骤c)的三甲曲沙甲磺酸盐结晶从溶液中分离出来并用约30％氢氧化钠溶液洗涤。
38.一种根据权利要求37所述的方法，其中将所洗涤的三甲曲沙甲磺酸盐结晶干燥至含水量约为0至1％。
39.一种根据权利要求38所述的方法，其中通过从氢氧化钠溶液中分离此盐和在真空中干燥此盐而干燥此三甲曲沙甲磺酸盐结晶。
40.一种2，4-二氨基-5-甲基-6-[(3，4，5-三甲氧基苯胺基)甲基]喹唑啉乳酸盐结晶水合物，具有一种与表5基本相同的X-线粉末衍射花样。
41.一种2，4-二氨基-5-甲基-6-[(3，4，5-三甲氧基苯胺基)甲基]喹唑啉乳酸盐结晶水合物，具有一种与附图12基本相同的X-线粉末衍射花样。
42.一种制备2，4-二氨基-5-甲基-6-[(3，4，5-三甲氧基苯胺基)甲基]喹唑啉乳酸盐结晶水合物的方法，包括下面的步骤a.混合三甲曲沙游离碱和乳酸而形成一种混合物并将所述的混合物加热至约40℃以制备三甲曲沙乳酸盐水合物；b.将所述的混合物通过一种澄清介质；c.冷却所澄清的混合物至约5℃以形成此三甲曲沙乳酸盐水合物的结晶。
43.一种根据权利要求42所述的方法，其中三甲曲沙游离碱和乳酸的摩尔比约为1至2。
44.一种根据权利要求42所述的方法，其中澄清介质选自由皂土和蒙脱石组成的物质组。
45.一种根据权利要求42所述的方法，其中将步骤c)的三甲曲沙乳酸盐结晶水合物从溶液中分离出来并用约50％乙醇溶液洗涤。
46.一种根据权利要求45所述的方法，其中将所洗涤的三甲曲沙乳酸盐结晶水合物干燥至含水量约为3.5至5％。
47.一种根据权利要求46所述的方法，其中通过从乙醇溶液中分离此盐和在真空中干燥此盐而干燥此三甲曲沙乳酸盐结晶水合物。
全文摘要
本发明提供一种结晶形式的三甲曲沙,它即可为葡糖醛酸盐、乙酸盐、盐酸盐、甲磺酸盐也可为乳酸盐,并可作为稳定且明确限定的固体物质按植物制剂生产,同时还提供制备此结晶形式的方法。这种晶体形式在贮存中具有超长的稳定性并可适用于药物的口服和静脉内给药。
文档编号A61K31/517GK1177925SQ96192464
公开日1998年4月1日 申请日期1996年1月11日 优先权日1995年1月13日
发明者保罗E·肯尼迪, 英戈马·格拉弗, 约翰P·摩斯道夫, 科特－汉宁·阿兰斯 申请人:保罗E·肯尼迪, 英戈马·格拉弗, 约翰P·摩斯道夫, 科特－汉宁·阿兰斯