专利名称：表鬼臼毒素2″,3″二脱氧糖苷的新型胺衍生物,其制备方法其作为药物的应用及其抗癌 ...的制作方法
技术领域：
本发明涉及表鬼臼毒素2″，3″二脱氧糖苷的新型胺衍生物，其制备方法，其作为药物的应用以及其用于抗癌治疗的应用。
在由天然木酚素得到的衍生物中，有一类具有鬼臼毒素碱骨架的表鬼臼毒素。其中有半合成的衍生物，比如依托泊甙或替尼泊甙，它们一般用来制备治疗癌症的药物。它们被看作是这个领域内的主要产品。
依托泊甙具有抗肿瘤的特性，特别可以治疗小细胞肺癌和睾丸癌。
这些产品的缺点是水溶性差，因此会遇到在配制和给药用方面的困难。
本发明的目标是证明，在4′-位具有2″-脱氧糖苷结构的取代基的4′-去甲基表鬼臼毒素衍生物通过加入一个或几个氮原子，形成其加合盐具有水溶性的化合物，使得解决了问题并显示出所研究的抗癌活性。
专利EP-0 196,618涉及下式的4′-去甲基表鬼臼毒素的水溶性衍生物
式中R1＝Me，X1＝NH2、NMe2，X2＝OH专利EP-0 415,453提到了下式的4′-去甲基表鬼臼毒素-β-D-阿卓糖苷衍生物
式中R1＝Me，R2、R3＝OH和NH2或F和NH2，也见JP 0 161,423。
在其它的出版物中也提到了类似的衍生物。见《碳水化合物研究》(Carbohydr.Res.)1990，206，219、《药物化学通报》(Chem.Pharm.Bull)1986，34，3741、《化学通信》(Chem.Lett.)1987，799。
利用2″-脱氧的的糖甙是非常特别的。这使得能得到比羟基类似物更亲脂的化合物，因此就具有更宽的抗肿瘤活性谱。这就使得具有更好的膜渗透性，能够更容易地达到生物靶子上，比如灌注差的实体肿瘤。另外，在比如3″位具有氨基官能团的优点给予了它成盐的可能性，其水溶解性足以进行更好地配制和更好地给药。
因此本发明涉及通式I的化合物
式中在3″位的基团N(R1R2)处于环的β位(2-脱氧-D-阿拉伯糖基系列)或α位(2-脱氧-D-核糖基系列)，R1和R2相同或不同，表示氢原子、C1～C6的烷基，这些烷基可以形成带有如氧和氮等杂原子的环，以及C1～C6的氨基烷基，或者氰基甲基。
X和Y可以相同或者不同，表示OH、CH3、CH2-NH2，X和Y还可以连在一起形成一个环，比如2-甲基-1，3-二噁烷，这样就形成了4，6-亚乙基-3-氨基-2，3-二脱氧-β-D-吡喃阿拉伯糖苷或吡喃核糖苷型的糖苷双环骨架。
本发明还涉及该化合物与使一个或几个氮原子成盐的无机酸或有机酸的加合盐，特别是盐酸盐。
按照一种优选的方式，基团N(R1R2)是基团NH2或N(CH3)2。
基团N(R1R2)还可以是一次或两次被甲基、CH2CN、CH2-CH2-NH2取代的氨基，形成象吗啉的环。
按照一种优选的方式，选择有一个糖苷的通式I化合物，其中X和Y形成具有OCH(CH3)OCH2链的环，比如4，6-亚乙基-3-氨基-2，3-二脱氧-β-D-吡喃阿拉伯糖苷或4，6-亚乙基-3-氨基-2，3-二脱氧-β-D-吡喃核糖苷。
特别是从下面的化合物中选择本发明的化合物4-去甲基-4-O-(3-氨基-4，6-亚乙基-2，3-二脱氧-β-D-吡喃阿拉伯糖基)表鬼臼毒素；4-去甲基-4-O-(3-氨基-4，6-亚乙基-2，3-二脱氧-β-D-吡喃核糖基)表鬼臼毒素；4-去甲基-4-O-(3-二甲基氨基-4，6-亚乙基-2，3-二脱氧-β-D-吡喃阿拉伯糖基)表鬼臼毒素；4-去甲基-4-O-(3-二甲基氨基-4，6-亚乙基-2，3-二脱氧-β-D-吡喃核糖基)表鬼臼毒素；4-去甲基-4-O-(3-氰基甲基氨基-4，6-亚乙基-2，3-二脱氧-β-D-吡喃核糖基)表鬼臼毒素；4-去甲基-4-O-(3-(N-吗啉代)-4，6-亚乙基-2，3-二脱氧-β-D-吡喃核糖基)表鬼臼毒素；4-去甲基-4-O-[3-(2-氨基乙基氨基)-4，6-亚乙基-2，3-二脱氧-β-D-吡喃核糖基]表鬼臼毒素；4-去甲基-4-O-(3-氨基-2，3，6-三脱氧-β-D-吡喃核糖基)表鬼臼毒素4-去甲基-4-O-(3，6-二氨基-2，3，6-三脱氧-β-D-吡喃核糖基)表鬼臼毒素。
本发明还涉及含有至少一种本发明的通式I的化合物和适当的赋形剂的药物组合物。
该药物组合物可以通过注射途径或以明胶胶囊、胶囊、片剂的形式口服途径服用，剂量为每24小时注射1～200mg/m2，口服5～500mg/m2。
这种衍生物在临床上给人服用治疗各种癌症，比如小细胞肺癌、睾丸癌、胚胎肿瘤、成神经细胞瘤、肾癌、何杰金氏和非何杰金氏淋巴瘤、急性白血病、结肠直肠癌、黑色素瘤、胎盘绒毛膜癌和乳腺癌。
本发明还涉及通式I化合物以及它们与可药用的无机酸或有机酸的加合盐的制备方法。
因此本发明涉及本发明的通式I化合物的制备方法，其中让式III或式IV或式V的化合物，在低温和惰性溶剂中与4′-去甲基-4′-苄氧羰基表鬼臼毒素和BF3的醚化物或三氟甲磺酸三甲基甲硅烷基酯反应；
在式III和式IV中，在3位的取代基可以是α位或β位的，NR1R2可以是被基团Z保护的氨基，在式V中，P表示醇的保护基，此缩合得到的产物被脱保护和氢化得到式I的化合物，在糖苷基3位的伯胺被甲醛和氰基硼氢化钠甲基化。
通式IV的中间体的制备方法是让二乙酰氧基叠氮基糖苷VI和二甲基叔丁基甲硅烷基氯的混合物在咪唑存在下反应，分离由此反应得到的产物，将每种产物进行脱乙酰化，在催化酸性介质中与乙醛的缩醛环化为4，6-亚乙基。
本发明方法的另一些特点通过下面的说明，特别是在图示I上报道的合成方法得以显示。
图示1
反应按照已知的方法[J.C.Florent、C.Monneret在《化学学会杂志，化学通讯》(J.Chem.Soc.Chem.Comm.)1987，1171和B.Abbaci、J.C.Floret和C.Monneret在《法国化学学会通报》(Buul.Soc.Chim.Fr.)1989，667]，从己烯糖1进行。缩合叠氮根离子得到糖苷类中间体2，其中的端基异构羟基按照已知方法[C.Kolar和G.Kneissl在《国际应用化学》(Angew.Chem.Int.)29版，809(1990)中所述]单独在β位被甲硅烷基保护，提供两种差向异构体的混合物3和4，它们在这一步是可以用色谱分离的。通过在甲醇钠存在下进行碱性脱乙酰基得到在4，6-位的二醇化合物5和12。β-叠氮二醇化合物5在酸性催化剂存在下，借助于乙醛的缩醛常规地环化成为亚乙基环，得到化合物6，其叠氮基被还原成为胺7，再用苄氧羰基(Z)保护，便成为化合物8，为与去甲基表鬼臼毒素偶合的需要，其本身在4′位的酚被苄氧羰基保护，这个中间体称为DMEPT4′-OZ。偶合是这样进行的先通过F-离子裂解甲硅烷基保护基，然后在低温下在相同的介质中用BF3的醚化物处理。通过氢解使基团Z解保护提供通式I的化合物10(NR1R2＝βNH2；XY＝OCH(CH3)OCH2)。通过甲醛和氰基硼氢化钠的作用，使前述的伯胺甲基化，得到通式I的化合物11(NR1R2＝βNMe2；XY＝OCH(CH3)OCH2)。
α叠氮糖苷中间体12随后进行与其差向异构体同样的反应，同样由3″位的叠氮化合物13得到与DMEPT4′-OZ偶合的化合物，在此情况下，按照两种技术更容易进行偶合。
第一种技术包括在-40℃下在二氯甲烷中用三氟甲磺酸三甲基甲硅烷基酯(TMSOTf)处理吡喃核糖苷13。第二种技术包括在-15℃下在二氯甲烷中使用三氟化硼的醚化物。然后将得到的中间体14催化还原，得到相当于式中NR1R2＝αNH2；XY＝OCH(CH3)OCH2的通式I的化合物15。通过甲醛和氰基硼氢化物进行与βNH2化合物相同的甲基化，得到相应的二甲基氨基衍生物通式I(NR1R2＝αNMe2；XY＝OCH(CH3)OCH2)。由伯胺15出发，能够用卤代衍生物比如碘代乙腈在存在三乙胺DMF溶液的弱碱性条件下使氮烷基化，得到式中NR1R2＝αNHCH2CN；XY＝OCH(CH3)OCH2的通式I的化合物16。通过二碘化醚对同样的伯胺中间体15进行环化，形成吗啉环，得到衍生物17。对化合物15通过被Z基团保护的碘乙胺进行同样的烷基化，得到衍生物18，它可以被催化还原成为相当于式中NR1R2＝α-NHCH2CH2NH2；XY＝OCH(CH3)OCH2的通式I的二氨基化合物19。
按照在下面图示2中所表示的方式，得到式中XY没有形成环的通式I的化合物。
图示2
甲硅烷基化的α叠氮化合物12在吡啶中用对甲苯磺酰氯进行选择性的甲苯磺酰化成为21，伯醇的甲苯磺酸酯转变为碘衍生物22。在这一步，4位仲醇被氯乙酸酯保护，形成官能化2-脱氧糖23，准备在低温和二氯甲烷中，在同三氟化硼醚化物反应的一般条件下，与DMEPT4′-OZ缩合。得到的中间体24在碱性介质中通过处理过的Amberlite IRA410，脱除氯乙酸酯保护基团成为化合物25，最后进行的催化氢化使得达到的状况是，将叠氮基还原成为3″α氨基，4′位的Z官能团被解除，以及将6″碳还原为甲基，从而得到相当于式中NR1R2＝3″αNH2；X＝OH；Y＝CH3的通式I的衍生物26。前面得到的中间体24可以在环境温度下在DMF中和叠氮化合物离子反应，得到在4″位含有一个叠氮乙酸酯的3″αN3，6″-N3化合物27，通过与前面相似的处理，它可以断裂为4″醇通过离子交换树脂Amberlite IRA410得到二叠氮醇28。最后的催化还原步骤使得得到相当于式中NR1R2＝3″αNH2；X＝OH；Y＝CH2NH2的通式I化合物的二胺衍生物29。由这些含氮化合物形成的盐是比如盐酸盐，可以按传统的方式，通过根据待成盐位点化学计量的预先确定数量的盐酸甲醇溶液处理含氮化合物的甲醇溶液来得到。可以任选地通过加入乙醚到反应介质中产生沉淀来得到结晶的盐酸盐。
作为象征的方式，也为了说明不同的合成步骤，给出了如下的实施例，但是没有限制的意义。
实施例1通式INR1R2＝β-NH2；XY＝OCH(CH3)OCH24′-去甲基-4-O-(3-氨基-2，3-二脱氧-4，6-亚乙基-β-D-吡喃阿拉伯糖基)表鬼臼毒素(化合物10)步骤180℃下将三-O-乙酰基-D-己烯糖(50g，183mmol)在400mL水中的溶液加热3小时。然后将反应介质冷却至20℃，然后加入叠氮化钠(17.9g，275mmol)和醋酸(38mL，600mmol)。在环境温度下搅拌24小时以后，用碳酸氢钠(盐)中和介质。用乙酸乙酯(3×500mL)萃取该相。合并有机相用硫酸镁干燥，然后减压浓缩。得到51g粗产品2，立即进行后面的处理。特征TLC环己烷/乙酸乙酯1/1；Rf＝0.43C10H15N3O6M＝273步骤2叔丁基二甲基甲硅烷基-3-叠氮基-2，3-二脱氧-4，6-二-O-乙酰基-β-D-吡喃阿拉伯糖苷3和叔丁基二甲基甲硅烷基-3-叠氮基-2，3-二脱氧-4，6-二-O-乙酰基-β-D-吡喃核糖苷4在氩气气氛下，向在步骤1中得到的粗混合物2(16.1g，58mmol)在预先冷却至0℃的无水二氯甲烷(200mL)中的溶液里依次加入6g咪唑(87.8mmol)和13.24g叔丁基二甲基甲硅烷基氯(87.8mmol)。在0℃下搅拌15分钟和在20℃下搅拌19小时后，将反应介质倒入500mL水中。用200mL二氯甲烷萃取水相，然后用硫酸镁干燥，减压浓缩有机相，在硅胶上色谱提纯(环己烷/乙酸乙酯9/1)残渣(18.7g)。如此分离到10.7g化合物3(浆状；48％)和4.7g化合物4(浆状；21％)；这时中间级分含有3和4的混合物(3.3g；15％)。特征 3 TLC环己烷/乙酸乙酯4/1Rf＝0.45[α]D20＝-10°(c＝1.4；CHCl3)MSm/z 405(M+NH4)C16H29N3O6SiM＝3874 Rf＝0.52[α]D20＝+10°(c＝1；CHCl3)MSm/z 405(M+NH4)+C16H29N3O6SiM＝3871H NMR 300MHz CDCL3δ衍生物30,13(3H，s，SiCH3)；0,14(3H，s，SiCH3)；0,92(9H，s，tBu)；1,72(1H，m，J2a-1＝9,5Hz，J2a-2e＝12,5Hz，J2a-3＝12,5Hz，H2a)2,05(3H，s，COCH3)；2,15(3H，s，COCH3)；2,25(1H，ddd，J2e-1＝1,5Hz，J2e-2a＝12,5Hz，J2e-3＝4,5Hz，H2e)；3,55-3,62(2H，m，H3和H5)；
4,10(1H，dd，J6-5＝2,5Hz，H6)；4,20(1H，dd，J6-5＝6Hz，J6-6′＝12Hz，H6′)；4,86(1H，t，J＝9,5Hz，H4)；4,86(1H，dd，J1-2a＝9,5Hz，J1-2e＝1,5Hz，H1).衍生物4 0,1(6H，s，Si(CH3)2)；0,88(9H，s，tBu)；1,64(1H，ddd，J2a-2e＝14Hz，J2a-1＝8,5Hz，J2a-3＝3,5Hz，H2a)；2,03(1H，ddd，J2e-2a＝14Hz，J2e-1＝2Hz，J2e-3＝4Hz，H2e)；2,05(3H，s，COCH3)；2,13(3H,s，COCH3)；4,05-4,12(1H，m，H5)；4,17-4,22(3H，m，H3，H6et H6′)；4,89(1H，dd，J4-5＝9,5Hz，J4-3＝3,5Hz，H4)；5,02(1H，dd，J1-2a＝8,5Hz，J1-2e＝2Hz，H1).
步骤3叔丁基二甲基甲硅烷基-3-叠氮基-2，3-二脱氧-β-D-吡喃阿拉伯糖苷5在氩气气氛下，向在步骤2中得到的衍生物3(3g，7.7mmol)在无水甲醇(40mL)的溶液里加入1M的甲醇钠溶液(1.9mL)。在20℃下反应1小时30分钟后，加入H+树脂(Amberlite IRC 50S)将反应介质调到pH值等于7。过滤反应混合物，减压浓缩滤液，得到2.27g化合物5(97％)。特征 TLC环己烷/乙酸乙酯2/1Rf＝0.36[α]D20＝-26°(c＝1；CHCl3)MSm/z 304(M+H)+321(M+NH4)+Mp＝70～72℃C12H25N3O4SiM＝303步骤4
叔丁基二甲基甲硅基-3-叠氮基-2，3-二脱氧-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃阿拉伯糖苷(化合物6)向在步骤3中得到的化合物5(0.20g，0.6mmol)在5mL乙腈中的溶液里加入0.94mL(6.6mmo1)乙醛的二乙基缩醛，然后加入15mg对甲基苯磺酸(0.08mmol)。在环境温度下搅拌反应介质1小时，然后用20mL乙酸乙酯稀释，用20mLpH值等于9的碳酸氢钠溶液洗涤，再用20mL水洗涤。用硫酸镁干燥有机相，然后减压浓缩得到0.25g粗产品。在硅凝胶上进行色谱提纯(环己烷/乙酸乙酯95/5)分离出0.19g纯的化合物6(86％)。特征 TLC环己烷/乙酸乙酯7/3Rf＝0.89[α]D20＝-19°(c＝1.1；CHCl3)MSm/z 347(M+NH4)+C14H27N3O4SiM＝329C H N计算 51.04 8.26 12.75实测 51.64 8.43 12.51步骤5叔丁基二甲基甲硅烷基-3-氨基-2，3-二脱氧-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃阿拉伯糖苷(化合物7)向在步骤4中得到的化合物6(2g，6mmol)在30mL乙酸乙酯中的溶液里加入50μL三乙胺，然后加入0.5g10％的碳载钯。反应介质置于大气压下的氢气气氛中。在环境温度下搅拌6小时以后，过滤除去催化剂，减压浓缩有机相，得到1.82g纯的化合物7(98％)。
特征 TLC环己烷/乙酸乙酯1/1Rf＝0.23[α]D20＝-28°(c＝1.3；CHCl3)MSm/z 304(M+H)+C14H29NO4SiM＝303步骤6叔丁基二甲基甲硅烷基-3-氨基苄氧羰基-2，3-二脱氧-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃阿拉伯糖苷(化合物8)在氩气气氛下，将苄氧羰基氯(1.12mL，7.88mmol)加入预先冷却到0℃的在步骤5中得到的乙缩醛7(1.82g，6mmol)在无水的二氯甲烷(30mL)和三乙胺(1.27mL，9.1mmol)的混合物里。在搅拌8小时以后，将反应介质倒入100mL水中，用100mL二氯甲烷萃取水相。用硫酸镁干燥有机相，减压浓缩，并用硅胶色谱提纯残渣(环己烷/乙酸乙酯6/1和4/1)，分离出1.9g化合物8(72％)。特征 TLC环己烷/乙酸乙酯1/1Rf＝0.64[α]D20＝-27°(c＝1.14；CHCl3)MSm/z 438(M+H)+Mp＝102℃C22H35NO6SiM＝437CHN计算 60.38 8.06 3.20实测 60.27 8.10 3.29步骤7
4-苄氧羰基表鬼臼毒素的3-氨基苄氧羰基-2，3-二脱氧-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃阿拉伯糖苷(化合物9)向在步骤6中得到的糖8(2.0g，4.57mmol)在100mL无水二氯甲烷中的溶液里加入5.06mL四丁基氟化铵(1.1M的THF溶液，5.5mmol)。当TLC确认化合物8完全消失时(搅拌2小时)，反应介质被冷却至-20℃，这时连续加入DMEPT4′-OZ(2.57g，4.8mmol)，然后加入8.44mL三氟化硼乙醚化物(68.5mmol)。在-20℃反应1小时以后，将反应介质倒入200mL饱和碳酸氢钠溶液(加入碳酸氢钠盐)(pH＝9)。用硫酸镁干燥有机相，减压浓缩，然后将粗产物(6.2g)在硅胶上进行色谱提纯(二氯甲烷/丙酮98/2然后97/3)，得到化合物9(2.1g，54％)。特征 TLC二氯甲烷/丙酮92/8 Rf＝0.61[α]D20＝-74°(c＝1.1；CHCl3)MSm/z 857(M+NH4)+Mp＝175℃C45H45NO15M＝839C H N计算 64.36 5.40 1.67实测 64.21 5.30 1.58步骤8向化合物9(0.28g，0.33mmol)在20mL乙酸乙酯中的溶液里加入30μL三乙胺，然后加入150mg10％的碳载钯。将反应介质置于大气压下的氢气气氛下。在环境温度下搅拌1小时30分钟后，过滤除去催化剂，减压浓缩有机相，然后用硅胶进行色谱提纯(二氯甲烷/甲醇97/3然后95/5)，得到172mg纯的化合物10(90％)(在二氯甲烷/戊烷中重结晶)特征 TLC二氯甲烷/甲醇95/5 Rf＝0.31[α]D20＝-120°(c＝1.05；CHCl3)MSm/z 594(M+Na)+610(M+K)+Mp＝219℃C29H33NO11M＝571C H N计算 60.94 5.82 2.45实测 60.45 5.78 2.581H RMN 300MHz CDCl3δ1,36(3H，d，J＝5Hz，CH3-CH)；1,51(1H，m，H2″a)；2,05(1H，m，H2″e)；2,88(1H，m，H3)；3,02(2H，m，H3″etH4″)；3,28(1H，m，J2-1＝5,2Hz，H2)；3,30(1H，m，H5″)；3,57(1H，t，J＝10Hz，H6″a)；3,75(6H，s，OCH3)；4,15(1H，dd，J＝5Hz，J＝10Hz，H6″e)；4,41(1H，dd，J＝9Hz，H11a)；4,21(1H，t，J＝9Hz，H11b)；4,59(1H，d，J＝5,2Hz，H1)；4,75(1H，q，J＝5Hz，H7″)；4,85(1H，dd，J＝9Hz，J＝2Hz，H1″)；4,94(1H，d，J＝3,3Hz，H4)；5,98(1H，d，OCHAO)；6,00(1H，d，OCHBO)；6,24(2H，s，H2et H6′)；6,55(1H，s，H8)；6,75(1H，s，H5).
盐酸盐的制备向胺10(61mg，0.10mmol)在无水二氯甲烷(6mL)中的溶液里加入0.098M的氯化氢甲醇溶液(1.09mL，0.106mmol)。搅拌反应介质10分钟。在加入乙醚(20mL)后目的产物沉淀出。回收56mg(86％)化合物10的盐酸盐。特征 Mp＝230℃C29H32NO11ClM＝606溶解度实验在0.3mL水中2.56mgC＝0.014M
实施例2通式I(NR1R2＝βNMe2；XY＝OCH(CH3)OCH2)4′-去甲基-4-O(3-二甲基氨基-2，3-二脱氧-4，6-亚乙基-β-D-吡喃阿拉伯糖基)表鬼臼毒素(化合物11)向化合物10(0.19g，0.33mmol)在无水二氯甲烷(15mL)中的溶液里依次加入甲醛(13.5μL)和氰基硼氢化钠(85mg)。在环境温度下搅拌45分钟后，加入同样的反应物，继续反应45分钟。用30mL二氯甲烷稀释反应介质，用水(40mL)洗涤。用硫酸镁干燥有机相，减压浓缩。用硅胶将残渣进行色谱提纯(二氯甲烷/甲醇97/3)，得到101mg化合物11(51％)。特征 TLC二氯甲烷/甲醇95/5Rf＝0.4[α]D20＝-121°(c＝1；CHCl3)MSm/z 600(M+H)+Mp＝270℃C31H37NO11M＝5991HRMN 300MHz CDCl3δ1,38(3H，d，J＝5Hz，CH3-CH)；1,55(1H，m，H2″a)；1,96(1H，m，H2″a)；1,96(1H，m，H2″e)；2,33(3H，s，CH3-N)；2,91-2,82(1H，m，H3)；2,91-2,82(1H，m，H3″)；3,35-3,25(1H，m，H5″)；3,38(1H，t，J4″-5″＝9Hz，J4″-3″＝9Hz，H4″)；3,58(1H，t，J6″a-5″＝10Hz，J6″a-6″e＝10Hz，H6″a)；3,75(3H，s，CH3O)；4,16(1H，dd，J6″e-5″＝5Hz，J6″e-6″a＝10Hz，H6″e)；4.21(1H，t，J9b-9a＝9Hz，J9b-3＝8Hz，H9b)；4,42(1H，dd，J9a-9b＝9Hz，J9a-3＝10,5Hz，H9a)；4,59(1H，d，J1-2＝5,2Hz，H1)；4,74(1H，q，J＝5Hz，CH-CH3)；4,82(1H，dd，J1″-2″a＝9,5Hz，J1″-2″e＝2Hz，H1″)；4,95(1H，d，J4-3＝3,2Hz，H4)；5,97(1H，d，OCHAO)；6,00(1H，d，OCHBO)；6,25(2H，s，H2′和H6′)；6,55(1H，s，H8)；6,76(1H，s，H5).
盐酸盐的制备向胺11(101mg，0.17mmol)在无水二氯甲烷(7mL)中的溶液里加入0.098M的氯化氢甲醇溶液(1.72mL，0.17mmol)。搅拌反应介质10分钟。在加入乙醚(20mL)后目的产物沉淀出。回收86mg(81％)化合物11的盐酸盐。特征 Mp＝199℃C31H33NO11ClM＝635溶解度实验在0.1mL水中2.5mgC＝0.038M实施例3通式I(NR1R2＝α-NH2；XY＝OCH(CH3)OCH2)4′-去甲基-4-O(3-氨基-2，3-二脱氧-4，6-亚乙基-β-D-吡喃核糖基)表鬼臼毒素(化合物19)步骤1叔丁基二甲基甲硅烷基-3-叠氮基-2，3-二脱氧-β-D-吡喃核糖苷(化合物12)按照与实施例1中的步骤3相似的方法，但是使用化合物4，得到化合物12，直接将其用于步骤2。
步骤2叔丁基二甲基甲硅烷基-3-叠氮基-2，3-二脱氧-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃核糖苷(化合物13)向在步骤1得到的化合物12(0.25g，0.8mmol)在10mL乙腈中的溶液里加入1.1mL(8mmol)乙醛的二乙基缩醛，然后加入52mg樟脑磺酸(0.24mmol)。在环境温度下搅拌反应介质9小时，然后用乙酸乙酯(30mL)稀释，用碳酸氢钠溶液(pH＝9)洗涤，再用水(30mL)洗涤。用硫酸镁干燥有机相，再减压波缩，得到0.3g粗产物。用硅胶进行色谱提纯(环己烷/乙酸乙酯15/1)，分离出0.15g纯的化合物13(55％)。特征 TLC环己烷/乙酸乙酯4/1Rf＝0.77[α]D20＝-35°(c＝1.1；CHCl3)C14H27N3O4SiM＝329步骤34′-苄氧羰基表鬼臼毒素的3-叠氮基-2，3-二脱氧-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃核糖苷(化合物14)第一个合成路线向DMEPT4′-OZ(438mg，0.82mmol)、在步骤2得到的化合物13(270mg，0.82mmol)和分子筛4A(1.5g)在30mL冷却至-40℃的无水二氯甲烷中的混合物里加入三氟甲磺酸三甲基甲硅烷基酯(TMSOTf)(446μL，2.46mmol)。在-40℃下反应1小时15分钟后，用三乙胺(342μL)中和反应介质，过滤然后用饱和氯化钠溶液(20mL)洗涤。用硫酸镁干燥有机相，减压浓缩，然后在硅胶上色谱提纯粗残渣(环己烷/乙酸乙酯65/35)，得到化合物14(260mg，45％)。
第二个合成路线向DMEPT4′-OZ(1.85mg，3.46mmol)、在步骤2得到的化合物13(1.20g，3.64mmol)在100mL冷却至-15℃的无水二氯甲烷中的混合物里加入三氟化硼乙醚化物(425μL，3.46mmol)。在-15℃下反应2小时，用100mL二氯甲烷稀释反应介质，然后倒入到200mL饱和碳酸氢钠溶液中。用硫酸镁干燥有机相，减压浓缩，然后用硅胶色谱提纯(环己烷/乙酸乙酯65/35)粗残渣(2.9g)，得到化合物14(1.19g，47％)(用乙醚/环己烷进行重结晶)。特征 TLC环己烷/乙酸乙酯6/4 Rf＝0.41环己烷/乙酸乙酯65/3 Rf＝0.27[α]D20＝-105°(c＝1.05；CHCl3)MSm/z 749(M+NH4)+Mp＝139℃C37H37N3O13M＝731步骤4表鬼臼毒素的3-氨基-2，3-二脱氧-4，6-亚乙基-β-D-吡喃核糖苷(化合物15)向在步骤3得到的化合物14(110mg，0.15mmol)在10mL乙醇和5mL乙酸乙酯的混合物中的溶液里加入20μL三乙胺，然后加入20mg10％的碳载钯。反应介质置于大气压的氢气气氛下。在环境温度下搅拌2小时后，过滤除去催化剂，减压浓缩有机相，然后用硅胶色谱提纯(二氯甲烷/甲醇97/3然后95/5)，得到63mg纯的化合物15(72％)。
特征 TLC二氯甲烷/甲醇95/5 Rf＝0.39[α]D20＝-100°(c＝1.05；CHCl3)MSm/z 572(M+1)+589(M+NH4)+Mp＝217℃C29H33NO11M＝5711HRMN 300MHz CDCl3δ1,35(3H，d，J＝5Hz，CH3-CH)；1,73(1H，m，H2″a)；1,90(1H，m，H2″e)；2,83(1H，m，H3)；3,22(1H，dd，J2-1＝5,2Hz，J2-3＝14Hz，H2)；3,42(1H，dd，J4″-3″＝9,5Hz，J4″-5″＝3,5Hz，H4″)；3,74(6H，s，OCH3)；3,49-3,60(2H，m，H3″et H6″)；3,94-4,02(1H，m，H5″)；4,10-4,20(2H，m，H6″etH11b)；4,42(1H，dd，J11a-3＝9Hz，J11a-11b＝9,5Hz，H11a)；4,57(1H，d，J1-2＝5,2Hz，H1)；4,78(1H，q，J＝5Hz，H7″)；4.91(1H，d，J4-3＝3,4Hz，H4)；5,38(1H，dd，J1″-2″e＝2Hz，J1″-2″a＝9Hz，H1″)；5,93(1H，s，OCHAO)；5,97(1H，s，OCHBO)；6,25(2H，s，H2′和H6′)；6,51(1H，s，H8)；6,86(1H，s，H5).
盐酸盐的制备向在步骤4得到的胺15(50mg，0.087mmol)里加入0.098M的氯化氢甲醇溶液(890μL，0.087mmol)。搅拌反应介质10分钟。在加入乙醚(10mL)后，过滤得到的结晶即盐酸盐(52mg，98％)。特征 Mp＝175℃C29H34NO11ClM＝607溶解度实验在0.2mL水中2.2mgC＝0.02M实施例4通式INR1R2＝α-NMe2；XY＝OCH(CH3)OCH24′-去甲基-4-O(3-N，N-二甲基氨基-2，3-二脱氧-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃核糖基)表鬼臼毒素(化合物20)向在步骤4得到的化合物15(29mg，0.05mmol)在乙腈(1mL)中的溶液里依次加入甲醛(10.3μL)和氰基硼氢化钠(12mg)。在环境温度下搅拌2小时后。用20mL二氯甲烷稀释反应介质，用水(20mL)洗涤。用硫酸镁干燥有机相，减压浓缩。残渣在同样的条件下进行反应，在同样的处理之后，用硅胶将残渣进行色谱提纯(二氯甲烷/甲醇97/3)，得到29mg化合物20(95％)。特征 TLC二氯甲烷/甲醇95/5Rf＝0.5[α]D20＝-85°(c＝1.06；CHCl3)MSm/z 600(M+H)+Mp＝140℃C31H37NO11M＝5991H RMN 300MHz CDCl3δ1,35(3H，d，J＝5Hz)；1,55(1H，m，H2″a)；2,20(1H，m，H2″e)；2,36(3H，s，CH3N)；2,62(1H，m，2,62，H3″)；2,85(1H，m，H3)；3,23(1H，dd，J2-1＝5,2Hz，J2-3＝14Hz，H2)，3,52(1H，dd，J4″-3＝3Hz，J4″-3″＝9Hz，H4″)；3,61(1H，t，J6″a-6″e＝10Hz，J6″a-5″＝10Hz，H6″a)；3,75(3H，s，CH3O)；4,22-4,02(1H，m，H5″)；4,22-4,02(1H，m，H6″e)；4,22-4,02(1H，m，H9b)；4,43(1H，dd，J9a-9b＝9Hz，J9b-3＝10,5Hz，H9b)；4,62-4,57(1H，m，J1-2＝5,2Hz，H1)；4,62-4,57(3H，m，J＝5Hz，CH-CH3)，4,88(1H，d，J4-3＝3,4Hz，H4)；5,96(1H，d，OCHAO)；5,98(1H，d，OCHBO)；6,25(2H，s，H2和H6′)；6,52(1H，s，H8)；6,80(1H，s，H5).
盐酸盐的制备向胺20(59mg，0.1mmol)在无水甲醇(2mL)的溶液里加入0.098M的氯化氢甲醇溶液(1mL，0.1mmol)。搅拌反应介质10分钟。在加入乙醚(20mL)后，沉淀出所得产物。回收33mg(53％)结晶。特征 Mp＝150℃C31H38NO11ClM＝635溶解度实验在0.1mL水中2.6mgC＝0.04M实施例5通式INR1R2＝α-NHCH2CN；XY＝OCH(CH3)OCH24′-去甲基-4-O(3-氰基甲基氨基-2，3-二脱氧-4，6-亚乙基-β-D-吡喃核糖基)表鬼臼毒素(化合物16)向在实施例3的步骤4中得到的化合物15(120mg，0.21mmol)在二甲基甲酰胺(4mL)中的溶液里加入三乙胺(200μL，1.47mmol)，然后加入100μL碘乙腈(1.47mmol)。在环境温度下搅拌反应介质20小时，然后用30mL乙酸乙酯稀释反应介质，再用水(4×30mL)洗涤。用硫酸镁干燥有机相，减压浓缩。然后用硅胶将残渣进行色谱提纯(二氯甲烷/丙酮92/8)，得到71mg纯化合物16(55％)。特征 TLC二氯甲烷/甲醇95/5Rf＝0.25[α]D20＝-86°(c＝0.80；CHCl3)MSm/z 611(M+H)+628(M+NH4)+C31H34NO11M＝6101H RMN 300MHz CDCl3δ1,35(3H，d，J＝5Hz，CH3CH)；1,69(1H，m，J2″a-1＝9,5Hz，J2″a-2″e＝13Hz，J2″a-3＝3Hz，H2″a)；1,93(1H，m，H2″e)；2,86(1H，m，H3)；3,25(1H，dd，J2-1＝5,2Hz，J2-3＝14Hz，H2)；3,51-3,56(2H，m，H4″和H6″a)；3,56(2H，m，CH2CN)；3,76(6H，s，OCH3)；3,88(1H，m，H5″)；4,17(2H，t，J11a-3＝8Hz，J11a-11b＝10Hz，H3″和H11b)；4,14(1H，dd，J6a″-6″b＝10Hz，J6″b-5″＝5Hz，H6″b)；4,41(1H，dd，J11a-3＝9Hz，J11a-11b＝10Hz，H11a)；4,60(1H，d，J1-2＝5,3Hz，H1)；4,75(1H，q，J＝5Hz，H7″)；4,90(1H，d，J4-3＝3,3Hz，H4)；5,17(1H，dd，J1″-2″c＝2Hz，J1″-2″a＝9,5Hz，H1″)；5,99(1H，s，OCHAO)；6,00(1H，s，OCHBO)；6,25(2H，s，H2和H6′)；6,54(1H，s，H8)；6,79(1H，s，H5).
实施例6通式INR1R2＝α-吗啉基；XY＝OCH(CH3)OCH24′-去甲基-4-O(3-N-吗啉代-2，3-二脱氧-4，6-亚乙基-β-D-吡喃核糖基)表鬼臼毒素(化合物17)向在实施例3的步骤4中得到的化合物15(60mg，0.10mmol)在二甲基甲酰胺(2mL)中的溶液里加入三乙胺(58μL，0.42mmol)，然后加入512mg二碘乙醚(1.57mmol)。在环境温度下和在黑暗中搅拌反应介质96小时，然后用30mL乙酸乙酯稀释反应介质，再用水(4×30mL)洗涤。用硫酸镁干燥有机相，减压浓缩。然后用硅胶进行色谱提纯(二氯甲烷/丙酮92/8)，得到46mg纯化合物17(68％)。特征 TLC二氯甲烷/丙酮92/8Rf＝0.31[α]D20＝-98°(c＝1.04；CHCl3)C33H39NO12M＝6411H RMN 300MHz CDCl3δ1,33(3H，d，J＝5Hz，CH3CH)；1,55(1H，m，J2″a-1″＝9,5Hz，J2″a-2″e＝13Hz，J2″a-3″＝3Hz，H2″a)；2,15(1H，m，H2″e)；2,84-2,90(5H，m，CH2N et H3)；2,80(1H，dd，J3″-4″＝3Hz，J3″-2″a＝3Hz，J3″-2″e＝3Hz，H3″)；3,23(1H，dd，J2-1＝5,2Hz，J2-3＝14Hz，H2)；3,48(1H，t，J6″a-6″b＝12Hz，J6″a-5″＝12Hz，H6″a)；3,57(1H，dd，J3″-4″＝3Hz，J4″-5″＝9Hz，H4″)；3,66-3,76(10H，m，OCH3et OCH2)；4,08-4,16(2H，m，H5″et H6″b)；4,20(1H，t，J11a-3＝8Hz，J11a-11b＝9Hz，H11a)；4,43(1H，dd，J11b-3＝9Hz，J11b-11a＝9Hz，H11b)；4,57-4,62(2H，m，H1和H7″)；4,89(1H，d，J4-3＝3,4Hz，H4)；5,20(1H，dd，J1″-2″e＝2Hz，J1″-2″a＝9,5Hz，H1″)；5,97(1H，s，OCHAO)；6,00(1H，s，OCHBO)；6,25(2H，s，H2′和H6′)；6,54(1H，s，H8)；6,73(1H，s，H5).
实施例7通式INR1R2＝α-NH2(CH2)2NH2；XY＝OCH(CH3)OCH24′-去甲基-4-O[3-(2-氨基乙基氨基)-2，3-二脱氧-4，6-亚乙基-β-D-吡喃核糖基]表鬼臼毒素(化合物18)向在实施例3的步骤4中得到的化合物15(173mg，0.30mmol)在二甲基甲酰胺(10mL)中的溶液里加入三乙胺(127μL，0.91mmol)，然后加入0.28g N-苄氧羰基-2-碘乙基胺(0.91mmol)。在环境温度下搅拌反应介质5天，然后用30mL水稀释反应介质。在用乙酸乙酯(30mL)萃取后，再用水(5×20mL)洗涤，用硫酸镁干燥有机相，减压浓缩，然后用硅胶进行色谱提纯(二氯甲烷/甲醇97/3)，得到155mg纯化合物18(68％)。特征 TLC二氯甲烷/甲醇95/5Rf＝0.70[α]D20＝-74°(c＝1.17；CHCl3)MSm/z749(M+H)+C39H44N2O13M＝748该化合物直接用于下面的脱苄基步骤向化合物18(0.15g，0.20mmol)在乙酸乙酯和乙醇的混合物(10mL，1/1)中的溶液里加入三乙胺(30μL)，然后加入10％的碳载钯(0.1g)。将反应介质置于大气压的氢气气氛下。
在大气压的氢气存在下，在环境温度系搅拌1小时30分钟，过滤除去催化剂，减压浓缩有机相，在硅胶上用色谱提纯(二氯甲烷/甲醇氨溶液97/3)，得到107mg(84％)的化合物19。特征 TLC二氯甲烷/甲醇(氨)95/5Rf＝0.22[α]D20＝-77°(c＝1；CHCl3)Mp＝130℃C31H38NO11M＝6141H RMN 300MHz CDCl3δ1,33(3H，d，J＝5Hz)；1,55(1H，m，H2″a)；2,15(1H，m，H2″e)；2,33(3H，m，NH2和NH可交换)；2,84-2,90(5H，m，CH2-N和H3)；3.20(1H，dd，J3″-4″＝3Hz，J3″-2″a＝3Hz，J3″-2″e＝3Hz，H3″)；3,23(1H，dd，H2)；3,48(1H，t，J6″a-6″b＝12Hz，J6″a-5″＝12Hz，H6″a)；3,57(1H，dd，J4″-3″＝3Hz，J4″-5″＝9Hz，H4″)；3,75(6H，s，OCH3)；4,08-4,16(2H，m，H5″et H6″b)；4,20(1H，t，J11b-3＝8，J11b-11a＝9Hz，H11b)；4,43(1H，dd，J11a-3＝9Hz，J11a-11b＝9Hz，H11a)；4,57-4,62(2H，m，H1和H7″)；4,89(1H，d，J4-3＝3,4Hz，H4)；5,20(1H，dd，J1″-2″e＝2Hz，J1″-2″a＝9,5Hz，H1″)；5,97和6,00(2H，d，OCH2O)；6,25(2H，s，H2′和H6′)；6,54(1H，s，H8)；6,73(1H，s，H5).
盐酸盐的制备向二胺19(64mg，0.10mmol)在无水甲醇(3mL)的溶液里加入0.098M的氯化氢甲醇溶液(2.13mL，0.21mmol)。搅拌反应介质10分钟。在加入乙醚(20mL)后，沉淀出所得产物。回收50mg(73％)盐酸盐。特征 Mp＝170℃C31H39N2O11C12M＝649溶解度实验在0.05mL水中2.0mgC＝0.06M实施例8通式INR1R2＝α-NH2；X＝OH；Y＝CH34′-去甲基-4-O-(3-氨基-2，3，6-三脱氧-β-D-吡喃核糖基)表鬼臼毒素(化合物26)步骤1叔丁基二甲基甲硅烷基-3-叠氮基-2，3-二脱氧-6-O-对甲苯磺酰基-β-D-吡喃核糖苷(化合物21)将对甲苯磺酰氯(1.55g，8.15mmol)在吡啶(10mL)中的溶液滴加到预先冷却到0℃的，在实施例3的步骤1中得到的二醇12(2.06g，6.79mmol)的溶液里。在同样的温度下搅拌1小时后，再在20℃下搅拌18小时。然后用100mL二氯甲烷稀释反应介质，用水(2×100mL)洗涤有机相，用硫酸镁干燥有机相，减压浓缩，然后用硅胶进行色谱提纯(环己烷/乙酸乙酯8/2)残渣，得到2.02g化合物21(65％)。特征 TLC环己烷/乙酸乙酯2/1Rf＝0.45MSm/z 475(M+H)+C19H31N3O6SSiM＝457步骤2叔丁基二甲基甲硅烷基-3-叠氮基-6-碘-2，3，6-三脱氧-β-D-吡喃核糖苷(化合物22)在碘化钠(2.65g，17.68mmol)存在下，将步骤1中得到的化合物21(2.02g，4.42mmol)在丙酮(120mL)中的溶液回流加热72小时。冷却后，将反应介质减压浓缩(30mL)，然后用100mL二氯甲烷稀释。在用10％的硫代硫酸钠水溶液洗涤后，用硫酸镁干燥，再减压浓缩，将得到的残渣用硅胶进行色谱提纯(环己烷/乙酸乙酯8/2)，得到1.5g化合物22(82％)。特征 [α]D20＝-30°(c＝1.06；CHCl3)MSm/z 431(M+NH4)+C12H24N3O11ISiM＝413C HN计算 34.87 5.81 10.17实测 35.07 5.76 10.25步骤3叔丁基二甲基甲硅烷基-3-叠氮基-6-碘-4-O-氯乙酰基-2，3，6-三脱氧-β-D-吡喃核糖苷(化合物23)将氯乙酰基氯(396mL，5mmol)加入在前面步骤中得到的化合物22(1.03g，2.5mmol)在二氯甲烷(20mL)和吡啶(404μL，5mmol)混合物中的溶液里。在-10℃下搅拌1小时后，用30mL二氯甲烷稀释反应介质，用水(3×20mL)洗涤。常规处理后，用硅胶进行色谱提纯(环己烷/乙酸乙酯10/1)，得到1.1g化合物23(90％)。特征 [α]D20＝-14°(c＝1.03；CHCl3)MSm/z 507(M+NH4)+C14H25N3O4ClISiM＝489CH N计算 34.35 5.11 8.59实测 34.69 5.16 8.22步骤44′-去甲基-4-O(3-叠氮-6-碘-2，3，6-三脱氧-β-D-吡喃核糖苷)表鬼臼毒素(化合物24)向冷却至-15℃的DMEPT 4′-OZ(1g，1.85mmol)、前面步骤中得到的化合物23(1g，2.04mmol)在无水二氯甲烷(100mL)中的混合物里加入三氟化硼的乙醚化物(BF3·Et2O)(455μL，3.7mmol)。在-15℃至0℃反应5小时后，用100mL二氯甲烷稀释反应介质，然后倒入200mL饱和碳酸氢钠水溶液中。用硫酸镁干燥有机相，减压浓缩。将粗残渣用硅胶进行色谱提纯(环己烷/乙酸乙酯7/3)，得到0.8g化合物24(48％)。特征 TLC环己烷/乙酸乙酯1/1Rf＝0.58[α]D20＝-85°(c＝1.26；CHCl3)MSm/z 909(M+NH4)+Mp＝143℃C37H35N3O13ClIM＝891步骤5
4′-去甲基-4-O(3-叠氮-6-碘-2，3，6-三脱氧-β-D-吡喃核糖基)-4′-苄氧羰基表鬼臼毒素(化合物25)向叠氮-糖苷24(257mg，0.29mmol)在二氯甲烷/甲醇(15mL，2/1)混合物中的溶液里加入OH-树脂(Amberlite IRA 410)。在20℃反应3小时后，过滤反应介质，然后减压浓缩，得到0.22g纯化合物25(94％)。
特征 TLC环己烷/乙酸乙酯1/1Rf＝0.46[α]D20＝-57°(c＝1.02；CHCl3)MSm/z 833(M+NH4)+Mp＝115℃C35H34N3O12IM＝815步骤64′-去甲基-4-O(3-氨基-2，3，6-三脱氧-β-D-吡喃核糖基)表鬼臼毒素(化合物26)向前面步骤中的化合物25(0.20g，0.25mmol)在乙酸乙酯(10mL)中的溶液里加入100μL三乙胺，然后加入0.2g10％的碳载钯。在大气压的氢存在下，在环境温度下搅拌30小时后，过滤除去催化剂，减压浓缩有机相，将残渣用硅胶进行色谱提纯(二氯甲烷/甲醇92/8)，得到50mg化合物26(38％)。
特征 TLC二氯甲烷/甲醇90/10Rf＝0.33[α]D20＝-90°(c＝0.5；CHCl3)MSm/z 530(M+H)+Mp＝140℃C27H31NO10M＝529
盐酸盐的制备向前面的胺26(70mg，0.14mmol)在无水甲醇(6mL)的溶液里加入0.098M的氯化氢甲醇溶液(1.44mL，0.14mmol)。搅拌反应介质10分钟。在加入乙醚(20mL)后，沉淀出所得产物。回收40mg(53％)盐酸盐。特征 Mp＝164℃C27H32NO10ClM＝565溶解度实验在0.2mL水中2.6mgC＝0.02M实施例9通式INR1R2＝α-NH2；X＝OH；Y＝CH2NH24′-去甲基-4-O(3，6-二氨基-2，3，6-三脱氧-β-D-吡喃核糖基)表鬼臼毒素(化合物29)步骤14′-去甲基-4-苄氧羰基-4-O(3，6-二叠氮基-4-叠氮乙酰基-2，3，6-三脱氧-β-D-吡喃核糖基)表鬼臼毒素(化合物27)向在实施例8的步骤4中得到的化合物24(0.45g，0.51mmol)在10mL二甲基甲酰胺中的溶液里加入叠氮化钠(0.1g，1.5mmol)。在环境温度下搅拌反应介质64小时，再用30mL水和30mL乙酸乙酯稀释。用水(4×20mL)洗涤有机相，用硫酸镁干燥，减压浓缩和用硅胶进行色谱提纯(环己烷/乙酸乙酯7/3)，得到0.36g化合物27(90％)。特征 TLC环己烷/乙酸乙酯6/4Rf＝0.44[α]D20＝-64°(c＝1；CHCl3)MSm/z 831(M+NH4)+Mp＝120℃C37H35N9O13M＝813
步骤24′-去甲基-4′-苄氧羰基-4-O(3，6-二叠氮基-2，3，6-三脱氧-β-D-吡喃核糖基)表鬼臼毒素(化合物28)向叠氮糖苷化合物27(70mg，0.08mmol)在3mL二氯甲烷/甲醇混合物(2/1，v/v)中的溶液里加入OH-树脂(Amberlite IRA 410)。在20℃下反应5小时后，过滤反应介质，减压浓缩得到59g纯化合物28(94％)。特征 TLC环己烷/乙酸乙酯6/4Rf＝0.25[α]D20＝-53°(c＝1.04；CHCl3)Mp＝125℃C35H34N6O12IM＝730步骤34′-去甲基-4-O(3，6-二氨基-2，3，6-三脱氧-β-D-吡喃核糖基)表鬼臼毒素(化合物29)向前面步骤中的化合物28(0.11g，0.15mmol)在10mL乙酸乙酯和乙醇混合物(1/1)中的溶液里加入三乙胺(20μL)，然后加入70mg10％的碳载钯。在大气压的氢气存在下，在环境温度下搅拌16小时后，过滤除去催化剂，减压浓缩有机相，得到78mg化合物29(95％)。特征 TLC二氯甲烷/甲醇90/10Rf＝0.06C27H32N2O10M＝544盐酸盐的制备向前面的二胺29(78mg，0.14mmol)在无水甲醇(2mL)的溶液里加入0.098M的氯化氢甲醇溶液(2.92mL，0.28mmol)。搅拌反应介质10分钟。在加入乙醚(20mL)后，沉淀出所得产物。回收70mg(79％)盐酸盐。特征 Mp＝95℃C27H34N2O10Cl2M＝616溶解度实验在0.05mL水中2.1mgC＝0.07M生物学实验通过生物学实验测试了这些化合物，在白血病P388小鼠体内实验中显示出它们可作为抗癌剂。该实验目前常用于抗癌剂的研究领域[见筛选化学物和天然物抗肿瘤和其它生物学体系的方法，R.Geran、N.H.Greenberg、M.M.MacDonald、A.M.Schumacher和B.J.Abbott《癌症化疗报道》(CancerChemotherapy reports)1972，3，No.2]。
但是，这个实验模型对化疗是十分敏感的，很多化合物显示出良好的活性，这使得这个试验分辨力差。
我们已经改变了测试的程序，使之更具有选择性。通过静脉的途径，而不是通过腹膜的途径注入肿瘤细胞。这样就通过血液循环迅速地散布到整个身体中。然后通过腹膜途径投放被测试的化合物。为了证实该化合物的活性，定义了两个参数·确定50％有效的剂量(ED50)，这表示服用化合物与未治疗的参照动物相比能得到明显的动物存活的最小单一剂量；·确定接受一次注射剂量后动物的最长存活时间，能够给予大剂量的化合物并观察到很长的存活期的事实使得可能获得化合物所能达到的最大治疗效果的度量。
肿瘤的产生在1955年由3-甲基胆蒽化学诱发DBA/2小鼠产生白血病P 388[《美国病理学杂志》(Am.J.Pathol.)33，603，1957]。
药理学操作程序通过每周一次以腹水的形式传代，在DBA/2鼠(原始品系)的腹膜中维持肿瘤，用重20±2g的杂交雌鼠CDF1(bal b/c雌鼠和XDBA/2雄鼠杂交)[《癌症化疗报道》3，9，1972]进行实验。在第0日通过静脉途径植入肿瘤细胞(每只鼠106个细胞)。将动物随机分组，每组2只。
在接种白血病细胞(急性处理)后第一天，通过腹膜途径(ip)投入抗肿瘤化合物。按照每kg鼠10mL的剂量注射溶液。抗肿瘤活性的评价准则是延长了被处理动物的成活期。86％的鼠在接种肿瘤后的第七天死亡。如果某种化合物可以使存活期延长到八天以上，就认为它是有活性的。
下表证实了本发明化合物的水溶性(以mg/mL为单位)、以ED50表示的这些化合物的活性、以天数或T/C％表示的存活期，后者表示被治疗的动物组的平均存活期和对照组动物的平均存活期之比。<
因此表明，本发明的化合物保持了参考化合物如依托泊甙的活性水平，而更具有有利于配制和给药的水溶解性。
权利要求
1.通式I的化合物，及其与可药用的无机酸或有机酸的加合盐，
式中，在3″位的基团N(R1R2)处于相对于环的β位(2-脱氧-D-阿拉伯糖基系列)或α位(2-脱氧-D-核糖基系列)，R1和R2相同或不同，表示氢原子、C1-C6的烷基，这些烷基可以形成可带有如氧和氮等杂原子的环，以及C1-C6的氨基烷基，或者氰基甲基。X和Y可以相同或者不同，表示OH、CH3、CH2-NH2，X和Y还可以连在一起形成一个环，比如2-甲基1，3二噁烷，这样就形成了4，6-亚乙基-3-氨基-2，3-二脱氧糖苷型二环糖苷骨架。
2.按照权利要求1的通式I的化合物，其特征在于，基团NR1R2是基团NH2或N(CH3)2。
3.按照权利要求1的通式I的化合物，其特征在于，基团NR1R2是被甲基、CH2CN或CH2-CH2-NH2一次或两次取代的氨基。
4.按照权利要求1至3之一的通式I的化合物，其特征在于，X和Y形成具有OCH(CH3)OCH2链的环。
5.按照权利要求1至4之一的通式I的化合物，其特征在于，它选自下面的化合物4′-去甲基-4-O-(3-氨基-4，6-亚乙基-2，3-二脱氧-β-D-吡喃阿拉伯糖基)表鬼臼毒素；4′-去甲基-4-O-(3-氨基-4，6-亚乙基-2，3-二脱氧-β-D-吡喃核糖基)表鬼臼毒素；4′-去甲基-4-O-(3-二甲基氨基-4，6-亚乙基-2，3-二脱氧-β-D-吡喃阿拉伯糖基)表鬼臼毒素；4′-去甲基-4-O-(3-二甲基氨基-4，6-亚乙基-2，3-二脱氧-β-D-吡喃核糖基)表鬼臼毒素；4′-去甲基-4-O-(3-氰基甲基氨基-4，6-亚乙基-2，3-二脱氧-β-D-吡喃核糖基)表鬼臼毒素；4′-去甲基-4-O-(3-(N-吗啉代)-4，6-亚乙基-2，3-二脱氧-β-D-吡喃核糖基)表鬼臼毒素；4′-去甲基-4-O-[3-(2-氨基乙基氨基)-4，6-亚乙基-2，3-二脱氧-β-D-吡喃核糖基]表鬼臼毒素；4′-去甲基-4-O-(3-氨基-2，3，6-三脱氧-β-D-吡喃核糖基)表鬼臼毒素4′-去甲基-4-O-(3，6-二氨基-2，3，6-三脱氧-β-D-吡喃核糖基)表鬼臼毒素。
6.按照权利要求4的化合物，其特征在于，它们呈盐酸盐的形式。
7.按照权利要求1～4的通式I化合物的制备方法，其特征在于，该方法包括让式III或式IV或式V的化合物，在低温和惰性溶剂中与4′-去甲基-4′苄氧羰基表鬼臼毒素和BF3的醚化物或三氟甲磺酸三甲基硅烷基酯反应；
在式III和式IV中，在3-位的取代基可以是α位或β位的，NR1R2可以是被基团Z保护的氨基，在式V中，P表示醇的保护基，此缩合得到的产物被保护并氢化得到式I的化合物，在糖苷基3位的伯胺用甲醛和氰基硼氢化钠甲基化。
8.通式IV化合物的制备方法，其特征在于，让二乙酰氧基叠氮基糖苷VI和叔丁基二甲基甲硅烷基氯的混合物在咪唑存在下反应，分离由此反应得到的产物，将每种产物进行脱乙酰化，在催化酸性介质中与乙醛的缩醛环化成为4，6-亚乙基
9.按照权利要求1～6的通式I化合物作为一种药物。
10.药物组合物，其特征在于，它含有至少一种按照权利要求1～6之一的化合物和适当的赋形剂。
11.按照权利要求1～4之一的通式I化合物在制备用于抗癌治疗的药物中的应用，所述药物特别用于治疗如下类型的癌症，如小细胞肺癌、睾丸癌、胚胎肿瘤、成神经细胞瘤、肾癌、胎盘绒毛膜癌、乳腺癌、结肠直肠癌、黑色素瘤、何杰金氏和非何杰金氏淋巴瘤、和急性白血病。
全文摘要
公开了通式(Ⅰ)的化合物,其中X、Y、R
文档编号A61K31/70GK1202173SQ96198199
公开日1998年12月16日 申请日期1996年10月11日 优先权日1995年10月12日
发明者C·莫尼里特, L·达利, Y·古米斯基, T·艾比尔特, B·希尔 申请人:皮埃尔法博赫药品公司