口服肽类药品的制作方法

专利名称：口服肽类药品的制作方法
发明的背景发明的领域本发明涉及活性化合物分子结构中包括多个氨基酸和至少一个肽键的口服肽类药品，及增加这种肽类活性化合物口服给药时的生物利用度的方法。
相关技术的描述各种人类激素、神经递质和其它重要的生物化合物具有肽作为其分子结构的主要部分。很多疾病对患者体内这些肽类化合物水平的升高产生正性应答反应。治疗有效量的这种生物学上有关的肽可以各种方式给予患者。但是，如下面将进一步讨论的，较佳的口服给药对于这类活性化合物是很困难的。
例如，鲑降钙素是降低钙从骨中摄取的肽类激素。将其用于治疗与骨有关的疾病和钙代谢紊乱(如骨质疏松症、Paget′s病、恶性肿瘤的高血钙症等)时，有帮助维持骨密度的作用。很多类型的降钙素已被分离出来(人降钙素、鲑降钙素、鳗降钙素、糜降钙素(elkatonin)、猪降钙素和鸡降钙素)。在各种降钙素之间存在明显的结构非同源性。例如，在构成人降钙素的氨基酸和构成鲑降钙素的氨基酸之间只有50％相同。尽管在分子结构有差异，鲑降钙素仍可用于人上述降钙素反应性疾病的治疗。
现有技术中所用的肽类药品常通过注射或经鼻给药。胰岛素是常通过注射给药的肽类药品的一个例子。较好的口服给药法易产生问题，因为肽类活性化合物对胃肠的降解非常敏感。例如，据信现有技术未报告过鲑降钙素口服给药时达到可重复的血浓度的能力。这是因为鲑降钙素在胃肠道中缺乏足够的稳定性，且不易经肠壁进入血液。然而，注射和经鼻给药显然是不方便的，比起口服来，更多的患者感到不适。这种不方便和不适常导致病人实质上不配合治疗。因此，本技术领域对于更有效、可重复的肽类药品(如胰岛素、鲑降钙素和本文中更详细讨论的其它肽类)的口服给药产生需求。
胃和肠的蛋白分解酶可降解肽，使其在吸收到血流中之前就失活。从胃蛋白酶(典型地具有酸性最适pH)的蛋白分解降解幸存的任何量的肽以后要面临小肠的蛋白酶和胰脏分泌的酶(典型地具有中性至碱性的最适pH)。由诸如鲑降钙素之类肽口服给药所引起的具体困难涉及分子体积相当大及其所带电荷的分布。这使鲑降钙素更难渗透肠壁粘膜或经肠道刷状缘膜进入血液。这些外加的问题可进一步与有限的生物利用度有关。
发明的概述因此，本发明的一个目的是提供可靠地释放肽类药物(如生理活性肽药物，如胰岛素、鲑降钙素、血管加压素及本文讨论的其它肽)的治疗有效量的口服药物组合物。
本发明的另一个目的是提供增加这些肽的生物利用度的治疗方法。
本发明的还有一个目的是提供口服鲑降钙素治疗与骨有关的疾病和钙代谢紊乱的方法。
另一方面，本发明提供口服给药的生理活性肽的药物组合物，包含(A)治疗有效量的所述活性肽；(B)至少一种药学上可接受的pH降低剂；(C)至少一种有效地提高所述活性药物生物利用度的吸收促进剂；和(D)将所述药物组合物经患者的胃有效转运的抗酸保护赋形剂，它阻止所述活性肽和胃蛋白酶接触；其中，所述药物组合物中存在一定量的所述pH降低剂，其量为若所述组合物加到0.1M碳酸氢钠水溶液10ml中，则足以使所述溶液的pH降低到不高于5.5。
较佳的肽活性剂包括但不限于胰岛素、血管加压素、鲑降钙素和下面讨论的其它肽，特别是鲑降钙素。
另一方面，本发明提供提高肽治疗活性剂口服给药的生物利用度的方法，所述方法包括将所述肽活性剂、及至少一种pH降低剂和至少一种吸收促进剂选择性地释放到患者的肠中，这是在所述肽活性剂、pH降低剂和至少一种吸收促进剂在能实质上阻止胃蛋白酶和所述肽接触的抗酸性保护赋形剂的保护下通过所述患者的嘴和胃之后发生的。
其中所述pH降低剂和与其一起释放的其它化合物释放到所述肠道的量为如果加到0.1M碳酸氢钠水溶液10ml中足以使所述溶液的pH降低到不高于5.5的量。
另一方面，本发明提供增加口服给药鲑降钙素的生物利用度的方法，所述方法包括将所述鲑降钙素、及至少一种pH降低剂和至少一种吸收促进剂选择性地释放到患者的肠中，这是在所述鲑降钙素、所述pH降低剂和所述吸收吸收促进剂在能实质上阻止胃蛋白酶和所述鲑降钙素接触的肠溶包衣的保护下通过所述患者的嘴和胃之后发生的。
其中所述降低pH的化合物被所述赋形剂释放到所述肠道的量为如果加到0.1M碳酸氢钠水溶液10ml中足以使所述溶液的pH降低到不高于5.5的量。
我们相信，通过同时保护肽类活性化合物免受(1)胃蛋白酶(它们典型地在酸性pH下活性最大)和(2)肠或胰蛋白酶(它们典型地在碱性至中性pH下活性最大)的蛋白分解，本发明减少了肽类活性化合物蛋白分解的降解可能性。
然后，我们相信，本发明促进肽类通过肠道刷状缘膜进入血液的过程，并继续保护肽类化合物免受蛋白分解的降解作用。
抗酸性保护赋形剂保护肽类活性剂免受胃内酸激活的蛋白酶的作用。然后，大量的酸(肽类活性化合物与其混合)通过将pH降低到肠内中性至碱性激活的蛋白酶(如luminal或消化蛋白酶和刷状缘膜的蛋白酶)最适活性范围以下而降低它们的活性。本发明的吸收促进剂可用于促进肽类药物转运通过肠粘膜层、通过刷状缘膜和进入血液。
按照本发明，吸收促进剂和降低pH化合物的同时使用，与单用吸收促进剂或单用降低pH化合物相比，提供了对生物利用度的惊人的协同效应。比较表4(见下面)制剂Ⅰ(单用鲑降钙素)、表3制剂Ⅰ(鲑降钙素和降低pH化合物)和表4制剂Ⅱ(鲑降钙素和吸收促进剂)与表4制剂Ⅲ(鲑降钙素、降低pH化合物和吸收促进剂)。
本发明的其它特征和优点将从下面发明的详细描述中变得更明了。
发明的详细描述按照本发明，对需要用肽类活性成分治疗的患者以适当的剂量提供它们的口服药物组合物，较佳为而不是必须为药学工业上通常大小的片剂或胶囊剂。剂量和给药次数在下面作更详细的描述。可能受益的患者是罹患对含肽化合物浓度增高反应好的任何人。例如，按照本发明的口服鲑降钙素可用于治疗罹患钙代谢紊乱或骨病的患者。例如，本发明可用口服降钙素，特别是鲑降钙素，治疗骨质疏松症、佩吉特(Paget′s)病、恶性肿瘤的高血钙等。
由于各种原因，鲑降钙素是按照本发明使用的较佳的活性成分。例如，即使用于患病的人，它也提供甚至优于人降钙素的各种优点。用鲑降钙素代替入降钙素治疗人骨质疏松症中提供的优点有效力增加、镇痛和半衰期延长。在治疗中，鲑降钙素比天然人降钙素更有效，因为比起人降钙素来，需要的剂量低。鲑和人降钙素之间有实质上的非同源性，两种降钙素的氨基酸序列之间只有50％相同。
申请人发现，鲑降钙素按本发明口服给药时其生物利用度意想不到地比从其分子量所预料的要高。申请人发现，在本发明的一个口服制剂中，鲑降钙素的生物利用度明显地超过申请人内部比较试验中的一个分子量可比的肽-甲状旁腺素(甲状旁腺素为34个氨基酸，鲑降钙素为32个氨基酸)。
申请人不想受理论的束缚，相信本发明的药物组合物克服了一系列不同和无关的对生物利用度的天然屏障。药物组合物的各成分通过各自合适的机制起克服各种屏障的作用，在肽类活性成分的生物利用度上产生协同效应。如下面所述的，鲑降钙素和其它肽类固有的理化性质使某些吸收促进剂比其它物质更有效地提高其生物利用度。
肽类活性化合物可口服给药。按照本发明，胃蛋白酶(其中大多数在酸性pH范围内有活性)和肠或胰蛋白酶(其中大多数在中性至碱性pH范围内有活性)对肽的蛋白分解降解减弱。溶解促进剂帮助肽类活性剂通过肠上皮细胞屏障。
而且，不想受理论的束缚，显然，按照本发明，在实质上阻止鲑降钙素或其它活性肽和任何能使其降解的胃蛋白酶接触的合适的抗酸保护性赋形剂的保护下，肽转运通过胃。一旦本发明的药物组合物通过胃进入碱性至中性pH占优势的肠区，在此处蛋白酶倾向于有碱性至中性最适pH，则肠溶衣或其它赋形剂释放肽和酸(互相接近)。
据信该酸将肠道局部pH(此处释放活性物质)降低到很多肠内蛋白酶的最适范围以下。这样的pH降低减弱了肠内蛋白酶的蛋白分解活性，从而对出于可能降解状态的肽提供了保护。这些蛋白酶的活性被本发明提供的临时性酸性环境所削弱。以提供足够的酸使肠道局部pH暂时降低到5.5或更低为宜，4.7或更低较佳，3.5或更低则更佳。下面所述的碳酸氢钠试验(在题为“pH降低剂”一节中)指示所需的酸量。肠内pH降低状况持续的时间较佳为足以保护肽类药物不受蛋白分解的降解作用直至至少部分肽类药物有机会通过肠壁进入血流。对于鲑降钙素来说，试验证明，鲑降钙素直接注入十二指肠、回肠或结肠，活性成分血浓度峰值的时间Tmax为5-15分钟。降低蛋白酶活性的情况成功的同时，本发明的吸收促进剂协同地促进肽吸收达到血液中。
据信本发明达到提高生物利用度目标的机制借助于药物组合物的活性成分尽可能同时释放。为此，较佳的是与保护不受胃蛋白酶降解相一致地将肠溶衣的体积保持到尽可能低。从而，肠溶衣不见得干扰肽的释放，或干扰其它成分在与肽非常接近的时间内释放。肠溶衣加入的重量通常应低于药物组合物其余成分(即除了肠溶衣外组合物的其它成分)的30％。较佳的为低于20％，更佳的为相对于未包衣成分的重量所加的肠溶衣在10％-20％之间。
可以是溶解促进剂和/或转运促进剂的吸收促进剂(下面作更详细的描述)帮助肽类药物从肠道转运到血液，并可促进在肠内pH降低和肠内蛋白分解活性降低的时期该过程能更好地出现。很多表面活性剂可同时起溶解促进剂和转运(摄取)促进剂的作用。不想受理论的束缚，相信促进溶解能提供(1)本发明的活性成分更同时释放到肠道的含水部分，(2)肽更好地溶解或转运通过沿肠壁的粘液层。一旦肽类活性成分到达肠壁，摄取促进剂则使其经跨细胞或细胞旁转运而更好地通过肠刷状缘膜转运进入血液。如下面更详细讨论的，很多较佳的化合物可提供这两种功能。在那些情况下，利用这两种功能的优选实施例可通过仅加入一种外加化合物到药物组合物中即可做到。在其它实施例中，分开的吸收促进剂可分别提供这两种功能。
本发明的药物组合物的每一种优选成分分别讨论如下。与只用单一pH降低剂和/或单一促进剂一样，可合用多种pH降低剂或多种促进剂。某些优选组合物也在下面讨论。
肽类活性成分可受益于本发明的口服给药的肽类活性成分包括生理学上有活性的、分子结构中有多个氨基酸及至少一个肽键的任何治疗剂。本发明通过若干种机制抑制活性成分被蛋白酶降解，否则这些酶易裂解活性成分的一个或几个肽键。分子结构还可包括其它取代基或变体。例如，鲑降钙素(本发明中一种较佳的肽类活性剂)在其C-末端被酰胺化。按照本发明，不论人工制造的和天然的肽均可口服给药。
本发明的肽类活性化合物包括(但不限于)胰岛素、血管加压素、降钙素(不仅包括较佳的鲑降钙素，而且包括其它降钙素)。其它例子包括降钙素基因相关性肽、甲状旁腺素、促黄体素释放因子、红细胞生成素、组织纤溶酶原激活物、人生长因子、促肾上腺皮质激素、各种白细胞介素、脑啡肽等。很多其它肽是本领域已知的。可以预想到，具有在胃肠道中可被裂解的肽键的任何药物化合物均因本发明提供的这种降解的减少而受益于本发明的口服给药法。
使用鲑降钙素时，较佳为包含相当于全部药物组合物总重量(除去肠溶包衣)的0.02-0.2％。鲑降钙素有市售品(例如，购自BACHEM,Torrence,California)。或者，可用已知方法合成，其中有些简单讨论如下。根据对活性化合物所需的靶血浓度及其在本发明的口服给药系统中的生物利用度(表8报告了几种)，其它肽类活性剂应以较高或较低的浓度存在。
用本领域的化学或重组合成技术，可制备鲑降钙素的前体。其它酰胺化的肽类活性剂的前体可按类似的方法进行制备。相信重组生产价格昂贵。用同样是本领域已知的酰胺化反应将前体转化为活性鲑降钙素。例如，美国专利4,708,934和欧洲专利公开公报0308067和0382403中所述的酶促酰胺化反应。对于前体和催化前体向鲑降钙素转化的酶来说，重组制备是较佳的。这样的重组制备在Biotechmology,Vol.11(1993)pp.64-70中加以讨论，该文进一步描述了前体向酰胺化产物的转化。该文所报告的重组产物与天然鲑降钙素和用溶液和固相肽化学合成制得的鲑降钙素相同。
例如，用谷胱甘肽-S-转移酶在大肠杆菌中制备甘氨酸延伸的鲑降钙素前体，为一可溶性熔融蛋白，可进行较佳的鲑降钙素(rsCT)的制备。除了在C末端(此处，鲑降钙素以-pro-NH2为末端，而前体以-pro-gly为末端)外，甘氨酸延伸的前体具有和活性鲑降钙素相同的分子结构。上述出版物中所述的一种α-酰胺化酶催化前体向鲑降钙素转化。该酶以重组制备为佳，例如，如上面所引的生物技术论文所述，在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中进行制备。其它酰胺化肽的前体可以类似的方法进行制备。不需要酰胺化或其他外加官能团的肽也可以类似的方法进行制备。其他肽类活性剂为市售品或可用本领域已知的方法进行制备。
pH降低剂与每次鲑降钙素给药同时给予的降低pH的化合物的总量最好应该是这样的量当其释放到肠道中时，足以将肠道局部pH降低到该处所见蛋白酶的最适pH之下。所需要的量必然随几个因素而异，这些因素包括所用的pH降低剂的类型(下面讨论)和一定的pH降低剂所提供的质子当量。实际上，提供好的生物利用度所需要的量是这样的当它加到0.1M碳酸氢钠溶液10ml中时，将该碳酸氢钠溶液的pH降低到不大于5.5，较佳为不大于4.7，最佳为不大于3.5。在上述试验中，某些实施例中可用降低ph到约2.8的足量的酸。在本发明的药物组合物中以使用至少300mg pH降低剂为宜，至少400mg pH降低剂则更佳。上述选择量指两种或两种以上这样pH降低剂合用时其总的合用量。口服制剂不应包含相当量的任何碱，当其与降低pH的化合物一起释放时，会阻止上述碳酸氢钠试验的pH降低到5.5或更低。
本发明的pH降低剂可以是在胃肠道内无毒、能释出氢离子(传统的酸)或从局部环境引起较高的氢离子含量的任何药学上可接受的化合物。它还可以是这些化合物的任何合并使用。较好的是，至少一种本发明所用的pH降低剂其pKa值不大于4.2，更好的是不大于3.0。还要好的是，在室温下pH降低剂在水中的溶解度至少为30g/100ml水。
可引起较高氢离子含量的化合物有例如氯化铝和氯化锌。药学上可接受的传统酸包括(但不限于)氨基酸的酸式盐(如氨基酸盐酸盐)或其衍生物。它们的例子有乙酰谷氨酸、丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、甜菜碱、肉碱、肌肽、瓜氨酸、肌酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、羟赖氨酸、羟脯氨酸、亚牛黄酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲基组氨酸、正亮氨酸、鸟氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、肌氨酸、丝氨酸、牛黄酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨酸的酸式盐。
有用的降低pH化合物的其它例子包括羧酸，如乙酰水杨酸、乙酸、抗坏血酸、柠檬酸、富马酸、葡糖醛酸、戊二酸、甘油酸、甘氨胆汁酸、乙醛酸、异柠檬酸、异戊酸、乳酸、马来酸、草酰乙酸、草酰琥珀酸、丙酸、丙酮酸、琥珀酸、酒石酸、戊酸等。
在本领域中可能不常叫做“酸”但按照本发明可能是有用的其它有用的pH降低剂是磷酸酯类(如果糖-1,6-二磷酸、葡萄糖-1,6-二磷酸、磷酸甘油酸和二磷酸甘油酸)。CARBOPOL(商标，BF Goodrich)和polycarbophil之类聚合物也可用于降低pH。
在上述碳酸氢钠试验中能达到不大于5.5的所需pH水平的任何pH降低剂的组合均可试验。一个优选实施方案利用选自柠檬酸、酒石酸和氨基酸酸式盐的一种酸作为药物组合物的pH降低剂。
当鲑降钙素是肽类活性剂时，pH降低剂与鲑降钙素的一定比例被证明是特别有效的。pH降低剂与鲑降钙素的重量比以超过200∶1为宜，较好为800∶1，最好为2000∶1。
吸收促进剂吸收促进剂以构成相当于药物组合物总重量(除了肠溶包衣外)0.1-20.1％的量为宜。较佳的吸收促进剂为兼具溶解促进剂和摄取促进剂作用的表面活性剂。一般说来，“溶解促进剂”改善本发明的成分溶解于它们原来要释放于其中的水性环境的能力或溶解到沿肠壁的粘液层的亲脂性环境中的能力，或二者兼有。“转运(摄取)促进剂”(它们常常是用作溶解促进剂的同样的表面活性剂)是有利于肽类药物通过肠壁的那些化合物。
在本发明的范围内，一种或一种以上吸收促进剂可能只起一种功能(如溶解性)，或一种或一种以上吸收促进剂只能起其它功能(如摄取)。也可能有几种化合物的混合物，其中一些化合物改善溶解性，一些化合物改善摄取和/或一些化合物二者兼具。本发明者不想受理论的束缚，相信摄取促进剂可通过以下机制起作用(1)增加肠细胞膜外疏水区域的无序化，使跨细胞转运增加；(2)沥滤膜蛋白，导致跨细胞转运增加；或(3)增宽细胞间的孔径以增加细胞旁的转运。
相信表面活性剂作为溶解促进剂和摄取促进剂都是有用的。例如，去污剂在以下方面有用(1)将所有活性成分很快溶解到它们原来要释放的水性环境中；(2)增加本发明的成分，特别是肽类活性药物的亲脂性，帮助其进入和通过肠粘液；(3)增强通常是极性的肽类活性剂通过刷状缘膜上皮细胞屏障的能力；(4)如上所述，增加跨细胞或细胞旁转运。
当表面活性剂用作吸收促进剂时，它们以自由流动粉末为宜，以便在制造过程中有利于混合和装入胶囊。由于鲑降钙素和其它肽的固有特性(如它们的等电点、分子量、氨基酸组成等)，某些表面活性剂与某些肽相互作用得最好。事实上，有些表面活性剂可与鲑降钙素的荷电部分不合需要地相互作用，阻止其吸收，从而不合需要地导致生物利用度降低。当试图增加鲑降钙素或其它肽的生物利用度时，用作吸收促进剂的任何表面活性剂宜选自如下物质组成的组(ⅰ)阴离子表面活性剂，它们是胆甾醇衍生物(如胆汁酸)；(ⅱ)阳离子表面，活性剂(如酰基肉碱类、磷脂类等)，(ⅲ)非离子型表面活性剂，和(ⅳ)阴离子型表面活性剂(特别是具有线性烃区域的阴离子型表面活性剂)和负电荷中和剂的混合物。负电荷中和剂包括(但不限于)酰基肉碱类、氯化鲸蜡基吡啶鎓等。较佳的是吸收促进剂溶于酸性pH，特别是在3.0-5.0范围内。
一个实施得很好的特佳结合是将均在酸性pH溶解的阳离子型表面活性剂和阴离子型表面活性剂胆甾醇衍生物混合。
特别好的结合是酸溶性胆汁酸与阳离子型表面活性剂。酰基肉碱和蔗糖酯是一种好的结合。单独使用一种特殊的吸收促进剂时，以阳离子型表面活性剂为宜。酰基肉碱类(如月桂酰肉碱)、磷脂类和胆汁酸类是特别好的吸收促进剂，特别是酰基肉碱。在同样的实施方案中也使用阴离子型表面活性剂胆甾醇衍生物。这些选择的目的是避免与肽类药物相互作用，这会干扰肽类药物吸收到血液中。
为了减少副作用发生的可能性，用作本发明的吸收促进剂的较佳的去污剂可以是可生物降解的或可重吸收的(例如，在生物学上可再循环的化合物，如胆汁酸类、磷脂类和/或酰基肉碱类)，较佳的是可生物降解的。酰基肉碱类在促进细胞旁转运上被认为特别有用。当胆汁酸(或其它缺乏线性烃的阴离子型去污剂)与阳离子型去污剂合用时，鲑降钙素较好地转运到肠壁中或通过肠壁。
较佳的吸收促进剂包括(a)水杨酸盐，如水杨酸钠、3-甲氧基水杨酸盐、5-甲氧基水杨酸盐和高香草酸盐；(b)胆汁酸，如牛黄胆酸、牛黄去氧胆酸、去氧胆酸、胆酸、乙醇酸、石胆酸盐、鹅胆酸、熊去氧胆酸、熊胆酸、去氢胆酸、梭链孢酸等；(c)非离子型表面活性剂，如聚氧乙烯醚类(如Brij 36T、Brij 52、Brij56、Brij 76、Brij 96、Texaphor A6、Texaphor A14、Texaphor A60等)、对叔辛基酚聚氧乙烯类(Triton-45、Triton-100、Triton-114、Triton-305等)、壬基苄氧基聚氧乙烯类(如Igepal CO系列)、聚氧乙烯脱水山梨醇酯类(如吐温20、吐温80等)；(d)阴离子型表面活性剂，如二辛基磺基琥珀酸钠；(e)溶血磷脂类，如溶血卵磷脂和溶血磷脂酰乙醇胺；(f)酰基肉碱类，酰基胆碱类和酰基氨基酸类，如月桂酰基肉碱、肉豆蔻酰基肉碱、棕榈酰基肉碱、月桂酰基胆碱、肉豆蔻酰基胆碱、棕榈酰基胆碱、十六烷基赖氨酸、N-酰基苯丙氨酸、N-酰基甘氨酸等；(g)水溶性磷脂类，如二庚酰基磷脂酰胆碱，二辛基磷脂酰胆碱等；(h)中等链长的甘油酯，它们是含中等链长脂肪酸(辛酸、癸酸和月桂酸)的甘油一酯、甘油二酯和甘油三酯的混合物；(i)乙二胺四乙酸；(i)阳离子型表面活性剂，如氯化鲸蜡基吡啶鎓；(k)聚乙二醇的脂肪酸衍生物，如Labrasol,Labrafac等；和(1)烷基糖化物，如月桂基麦芽糖苷、月桂酰基蔗糖、肉豆蔻酰基蔗糖、棕榈酰基蔗糖等。
不想受理论的束缚，在某些实施例中包括阳离子交换剂(如去污剂)，通过其它可能的机制增加溶解度。特别是，它们可能阻止鲑降钙素或其它肽类活性剂与粘液的结合。较佳的阳离子交换剂包括氯化鱼精蛋白或其它聚阳离子。
其它任选的成分较好的是水溶性屏障将pH降低剂与抗酸保护性赋形剂分开。在下面的一些实施例中，为了提供这一屏障而使用常规的药物胶囊。很多水溶性屏障在本领域是已知的，包括(但不限于)羟丙基甲基纤维素和常规的药用明胶。
在一些优选的实施方案中，包括另一个肽(如白蛋白、酪蛋白、大豆蛋白、其它动植物蛋白质等)以减少非特异性吸附(如肽与肠粘液屏障的结合)，从而降低该昂贵的肽类活性剂的必须浓度。这种肽如果加入的话，以药物组合物总重量(除了保护性赋形剂之外)的1.0-10.0％为宜。较好的是，该第二种肽不是生理活性肽，更好的是食用肽，如大豆肽等。不想受理论的束缚，该第二种肽还可能作为蛋白酶清除剂，令人满意地与肽类活性剂竞争与蛋白酶的相互作用，从而也可提高生物利用度。该第二种肽还可帮助活性化合物通过肝脏。
本发明的所有药物组合物还可任意地包括通常知道大小和数量的普通的药用稀释剂、glycants、润滑剂、明胶胶囊、防腐剂、着色剂等。
保护性赋形剂保护鲑降钙素不被胃蛋白酶破坏然后本身溶解以使本发明的其它成分可在肠中释放的任何屏障或赋形剂都是合适的。很多这样的肠溶包衣是本领域中已知的，按照本发明是有用的。其例子包括乙酸邻苯二甲酸纤维素、琥珀酸羟丙基甲基乙基纤维素、邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素、羧基甲基乙基纤维素和甲基丙烯酸-甲基丙烯酸甲酯共聚物。在一些实施例中，活性肽、吸收促进剂(如溶解促进剂和/或摄取促进剂)和降低pH的化合物包含在足够粘的保护性糖浆中，使本发明的成分受保护地通过胃。
在本发明的其余成分装入胶囊后，可将例如保护肽类药物不受胃蛋白酶破坏的合适的肠溶包衣加在胶囊上。在其它实施方案中，将肠溶包衣包在片剂外面或包在活性成分颗粒的外表面，然后压成片剂，或装入胶囊，胶囊本身再被覆肠溶包衣。
非常令人满意的是，本发明的所有成分尽可能同时从载体或赋形剂中释放并溶于肠内环境。较佳的是，赋形剂或载体在小肠内释放活性成分，在此促进跨细胞或细胞旁转运的摄取促进剂比同样的摄取促进剂如果在后面的结肠释放可能较少引起不良的副作用。但是，要强调的是，我们相信本发明在结肠与在小肠同样地有效。除了上面讨论的赋形剂或载体外，本领域中已知许多这样的物质。合乎需要的是(特别在如何使本发明的各种成分同时释放上达到最适程度)使肠溶包衣保持低量。较好的是，加到药物组合物其余部分中的肠溶包衣的量不大于30％重量(“其余部分”为除了肠溶包衣本身外的药物组合物)。更好的是，加少于20％，特别是未包衣组合物的重量的12％-20％。较好的肠溶包衣应该是足以持续2小时阻止本发明的药物组合物在0.1N HCl中崩解，然后能使药物组合物在每分钟旋转100转的溶解浴中在pH增加至6.3后，其所有内容物完全释放。
其它选择pH降低剂与吸收促进剂的重量比以3∶1至20∶1为宜，较佳为4∶1-12∶1，最佳为5∶1-10∶1。一定的药物组合物中，所有pH降低剂的总量和所有吸收促进剂的总量包括在上述较佳的比例中。例如，如果药物组合物包括两种pH降低剂和三种吸收促进剂，上述比例在两种pH降低剂的合并总量和所有三种吸收促进剂的合并总量的基础上进行计算。
较佳的是，pH降低剂、肽类活性剂和吸收促进剂(无论每一类是单种或多种化合物)均匀地分散于药物组合物中。在一个实施方案中，药物组合物包含颗粒，该颗粒包括有肽类活性剂、pH降低剂和吸收促进剂均匀分散于其中的药用粘合剂。较佳的颗粒也可由被均匀的有机酸层包围的酸性芯、一层促进剂和一层被有机酸外层包围的肽所组成。颗粒可从一种水性混合物制得，该混合物由诸如聚乙烯吡咯烷酮或羟丙基甲基纤维素的药用粘合剂和本发明的pH降低剂、吸收促进剂和肽类活性剂一起组成。
制造方法本发明较佳的药物组合物包括填充了0.25mg鲑降钙素、400mg颗粒状柠檬酸(例如购自Archer Daniels Midland Corp.)、50mg牛黄去氧胆酸(例如购自SIGMA)和50mg月桂酰肉碱(SIGMA)的00号明胶胶囊。
所有成分最终都填入明胶胶囊，它们以粉末状为佳，可以任何顺序加入粘合剂中。因此，使粘合剂流动约5分钟，直至粉末完全混合于其中。再将混合好的粉末装进明胶胶囊的大端。然后加胶囊的另一端。再将胶囊咬合。在包衣设备(如Vector LDCS 20/30 Laboratory Development Coating System(购自Vector Corp.,Marion,Iowa))中可加500个或更多个这样的胶囊。
肠溶包衣溶液配制如下称量500g EUDRAGIT L30 D-55(一种具有甲基丙烯酸甲酯的甲基丙烯酸共聚物，购自ROHM Tech Inc.,Maidan,Mass.)。加入411g蒸馏水，15g柠檬酸三乙酯和38g滑石粉。此包衣的量足以将约500个00号胶囊进行包衣。
将胶囊称重，加到包衣机的滚筒中。启动机器，使圆筒(装有胶囊)以24-28rpm旋转。喷雾口的温度以约45℃为宜。出口温度以约30℃为宜。未包衣的胶囊的温度以约25℃为宜。气流约为38呎3/分钟。
然后将连接机器的管子插入如上所制备的包衣溶液中，启动泵，将溶液送入包衣设备中，进行自动包衣。可在任何时候停机将胶囊称重以测定包衣量是否足够。通常进行60分钟包衣。然后关泵约5分钟，机器仍在转动，帮助包衣后的胶囊干燥。然后可关机。胶囊包衣是完成了，但建议通风干燥约2天。
由于本发明提高了生物利用度，因此本发明药物制剂中昂贵的鲑降钙素可保持相当低的浓度。具体的制剂例在下面的实施例中阐述。
患者的治疗选用鲑降钙素作为活性成分治疗骨质疏松症时，建议周期性给药。鲑降钙素在给人皮下给药后代谢很快，半衰期仅20-40分钟。但是，尽管血浓度快速降低，它对骨质疏松症的有益效应持续时间却长得多，可持续24小时以上。在以常规剂量注射鲑降钙素后2小时以上，通常就没有可测出的血浓度。因此，较好的是一个剂量周期性给药，每周约5天。鲑降钙素皮下给药(100 IU)常导致血清峰浓度为约250 pcg/ml。鲑降钙素鼻内给药(200 IU)证明在低至10 pcg/ml的峰浓度对骨质疏松症有效。一些患者报告在高的峰浓度(如200 pcg/ml或以上)时有胃肠不适。因此，鲑降钙素血清峰值在10-150 pcg/ml之间较好，在10-50 pcg/ml之间则更好。血清浓度可用本领域已知的放射免疫测定技术进行测定。住院医师可监测患者的反应、鲑降钙素的血浓度或骨病的代表性标志(如尿中的pyridinoline或deoxypyridinoline)，特别是在治疗的开始阶段(1-6个月)。然后可略改变剂量以说明个体的代谢和反应的意义。
仅用每个胶囊100-1000微克的鲑降钙素，较好为100-400微克，特别好为1-200微克之间，按照本发明可达到的生物利用度使口服鲑降钙素可以上述较佳的浓度水平进入血液。
较好的是，每次给药用一个胶囊，因为一个胶囊能最好地使多肽、pH降低剂和吸收促进剂同时释放。这是合乎需要的，因为当酸在接近多肽释放的时间释放时，能够最好地减少不合要求的对多肽的蛋白分解攻击。将本发明的所有成分作为一个丸或胶囊来给药，可最好地达到接近同时释放。然而，本发明还包括例如可将需要量的酸和促进剂分在可同时给药的两个或两个以上胶囊中，从而共同提供必需量的所有成分。本文所用的“药物组合物”包括适合于对患者进行特定给药的完全的剂量，不管它是否再分开，只要它是基本上同时给药的即可。
下面阐述通过改变某些参数对生物利用度显示作用的一系列表格。
除了本文关于人的研究外，由于人和动物模型中所用的动物之间的差异，各成分的量可与本申请所要求保护的量不同。
表1缓冲液pH对大鼠十二指肠鲑降钙素吸收的影响
*缓冲液pH方法将雌性Wister大鼠(250-275g)(每个制剂3只)用氯胺酮和赛拉嗪麻醉，然后作颈动脉插管。将插管与三通阀相接，通过此阀取血样和代之以生理盐水。在腹腔作中线切开，将0.5ml制剂直接注射到暴露的十二指肠。通过混合不同量的等摩尔浓度柠檬酸和柠檬酸钠来调节制剂的pH。在给予该制剂前或给予后5、15、30、60和120分钟时取血(0.5ml)。将血样于2600g离心10分钟，所得的血浆上清液储存于-20℃。用竞争性放射免疫测定法测定血浆中降钙素的浓度。从以降钙素血浆浓度作为时间的函数所作的点得到的曲线下的面积计算出绝对生物利用度(即相当于降钙素静脉注射剂量)。
结果和讨论当缓冲液的pH从5(配方Ⅰ)降低到4(配方Ⅱ)时，绝对生物利用度从0.02％至0.1％增加至5倍。当pH降低到3(配方Ⅲ)时，绝对生物利用度再增加6.4倍。当pH降低到2时，降钙素的生物利用度增加很少。当缓冲液的pH从5降低到3时，降钙素的生物利用度总共增加至32倍。
表2柠檬酸浓度对大鼠十二指肠吸收鲑降钙素的生物利用度的影响
方法按对表Ⅰ的注释中所描述的方法，将在总体积0.5ml中含一定量牛黄去氧胆酸和2种不同量柠檬酸的制剂注射到麻醉大鼠十二指肠中。制剂中包括甘露醇作为测量细胞旁转运的标志。如上所述，在不同的时间取血样分析降钙素。
结果和讨论在9.6mg柠檬酸存在下(Ⅰ)所给的鲑降钙素的生物利用度是0.25％，而在48mg柠檬酸存在下(Ⅱ)鲑降钙素的生物利用度是2.43％。在一定量牛黄去氧胆酸的存在下，当配方中柠檬酸的量仅增加5倍时，鲑降钙素的生物利用度却增加近10倍。
表3在柠檬酸存在下促进剂对大鼠十二指肠中鲑降钙素吸收的影响
方法按对表Ⅰ的注释中所描述的方法，将在总体积0.5ml中含柠檬酸、降钙素和各类促进剂的制剂注射到麻醉大鼠十二指肠中。制剂中包括甘露醇作为测量细胞旁转运的标志。如上所述，在不同的时间取血样分析降钙素。
结果和讨论在无促进剂时，降钙素的绝对生物利用度是0.69％。包含水溶性磷脂(配方Ⅶ)则使生物利用度增加4.3倍，至2.97％。最有效的促进剂是糖酯类(配方Ⅴ)，在糖酯类中，降钙素的生物利用度是5.83％。使用胆汁酸和阳离子型去污剂(配方Ⅲ)、非离子型去污剂(配方Ⅳ)和酰基肉碱(配方Ⅵ)，导致从3.03％至4.53％的中等度生物利用度。比起在配方中只有柠檬酸、无促进剂存在所观察到的，在各类促进剂存在下降钙素生物利用度的差异甚微。
表4在各种添加剂存在下月桂酰肉碱对大鼠十二指肠中鲑降钙素吸收的影响
方法按对表Ⅰ的注释中所描述的方法，将在总体积0.5ml中含月桂酰肉碱、降钙素和各类其它化合物的制剂注射到麻醉大鼠十二指肠中。如上所述，在不同的时间取血样分析降钙素。
结果和讨论在无柠檬酸和任何促进剂时(配方Ⅰ)，降钙素的绝对生物利用度是0.096％。在5mg氯化月桂酰肉碱存在下(配方Ⅱ)，生物利用度增加1.8倍，至0.17％。当柠檬酸和月桂酰肉碱同时包括在内时(配方Ⅲ)，生物利用度再增加27倍，至4.53％。月桂酰肉碱的量减少5倍而柠檬酸的量不变(配方Ⅳ)，并不明显地降低鲑降钙素的生物利用度。配方Ⅲ中加入5mg二庚酰基磷脂酰胆碱产生配方Ⅴ，轻度增加生物利用度(1.4倍)。用25mg牛血清白蛋白代替柠檬酸(配方Ⅵ)，则将生物利用度从4.53％(配方Ⅲ)降低到0.42％。这些结果一起表明，在诸如柠檬酸这样的pH降低剂和诸如月桂酰肉碱这样的促进剂之间存在协同效应。
表5配方对大鼠十二指肠鲑降钙素吸收的影响
方法将改良的血管入口(插管)经手术植入雄性小猎兔犬的十二指肠、回肠和结肠。将人口的中隔/储液体植入皮下，用作降钙素制剂的给药部位。在将降钙素制剂给清醒犬前后，将入口用2ml无降钙素的制剂冲洗。在给降钙素前t=30、15和0分钟，及给药后5、10、20、30、40、50、60分钟和此后每15分钟，共2小时，通过腿静脉血管插管采血(2ml)。将血样于2600g离心10分钟，所得的血浆上清液储存于-20℃。用竞争性放射免疫测定法测定血浆中降钙素的浓度。从以降钙素血浆浓度作为时间的函数所作的点得到的曲线下的面积计算出绝对生物利用度(即相当于降钙素静脉注射剂量)。
结果和讨论在水中给药(Ⅰ)的降钙素的绝对生物利用度是0.015％。在192mg柠檬酸存在下(Ⅱ)，降钙素的生物利用度增加25倍。在制剂中加入20mg牛黄去氧胆酸(Ⅲ)在绝对生物利用度上又产生2.2倍增加，至0.81％。降低pH的化合物柠檬酸和促进剂牛黄去氧胆酸的合并使用，在鲑降钙素的绝对生物利用度上产生总共54倍的增加。
表6剂型和配方对狗口服鲑降钙素的绝对生物利用度的影响
方法以所标示的配方充填淀粉和明胶胶囊，在包衣锅中用邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素50(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)(增量1％)或Eudragit L 30 D-55(Ⅳ)(增量10％)包衣60分钟。用“网蓝法”(basket method)在溶解浴中测定胶囊在0.1N盐酸中的稳定性。每种标示的胶囊至少给2只狗口服，如前所述，采血、分析鲑降钙素。
结果与100mg柠檬酸和100mg牛黄去氧胆酸混合并在淀粉胶囊(Ⅰ)中给药的10mg鲑降钙素的生物利用度是0.07％。当同样的配方在明胶胶囊(Ⅱ)中给狗给药时，鲑降钙素的生物利用度提高到0.26％。柠檬酸量增加6倍、鲑降钙素量减少50％，导致降钙素生物利用度提高约3倍。
当肠溶包衣从邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素50改为Euragit L 30 D-55(一种甲基丙烯酸酯聚合物)而配方保持相同(Ⅳ)时，鲑降钙素的生物利用度从0.62％提高到1.48％。肠溶包衣从邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素50改为EuragitL 30D-55导致胶囊在0.1N HCl中的稳定性增加。这种稳定性的增加导致在狗的血液中降钙素水平的峰值出现在较晚的时间点上。胶囊Ⅰ、Ⅱ和Ⅱ在HCl中不稳定，提示这些胶囊在狗的胃中可能打开了，而胶囊Ⅳ的稳定性改善，提示它在狗的胃中是完全稳定的，而在狗的肠中才打开。这表明，最小限度一定量的肠溶包衣是较适宜的。同时，太多的包衣可延缓降钙素的释放至其它重要成分(如酸和去污剂)的释放之后。肠溶包衣以加到未包衣的药剂量的5-15％为宜。
表7人口服降钙素(10.5mg)的药物代谢动力学
方法用138mg柠檬酸、105mg牛黄去氧胆酸和10.5mg鲑降钙素充填淀粉胶囊。将胶囊在包衣锅内用邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素50包衣20分钟，储存于4℃。在研究日的早上，给禁食后的受试者服用1个胶囊，用一杯橙汁送服。在服用胶囊前15分钟和服用降钙素胶囊后指定的时间取血。用竞争性放射免疫试验测定降钙素的血浓度。从血浆降钙素浓度作为时间的函数所得的曲线下的面积计算绝对生物利用度(即相当于静脉注射降钙素的剂量)。
结果只给人服用10mg鲑降钙素，无可检出的降钙素血清水平。但是，当服用如表7所述的本发明组合物时，在摄入胶囊后30和60分钟之间，血液中检出降钙素的水平最高。血液中降钙素的最高浓度是70-497pg/ml。在t=30分钟时，5个个体的降钙素平均峰浓度为173pg/ml。绝对生物利用度为0.02-0.06％，群体平均值为0.03％。
表8在大鼠试验中柠檬酸和月桂酰肉碱对血管加压素、降钙素和胰岛素的生物利用度
方法如对表1的注释中所述，将由〔arg8〕-血管加压素、重组鲑降钙素或人胰岛素和所指明的添加剂组成的总体积为0.5ml的制剂注射到麻醉大鼠的十二指肠中。如前所述，在不同的时间取血样，进行分析。
结果和讨论在无任何添加剂的情况下，十二指肠内注射〔arg8〕-血管加压素的生物利用度是0.38％。制剂中加入柠檬酸和月桂酰肉碱，则生物利用度增加到8.1％。在无酸和促进剂存在的情况下，降钙素的生物利用度是0.096％，低于未配方的血管加压素。但是，制剂中包括柠檬酸和月桂酰肉碱时，绝对生物利用度增加50倍，至4.53％。在无柠檬酸时，人胰岛素甚至不能溶于水。在柠檬酸的存在下，所有肽均易溶解，人胰岛素十二指肠给药的绝对生物利用度为0.07％。制剂中包括月桂酰肉碱时，胰岛素的绝对生物利用度增加10倍。这些结果表明，未配方的肽其生物利用度最多为0.38％，而加入有机酸(如柠檬酸)和促进剂(如月桂酰肉碱)则肽的生物利用度增加到高达8.1％。表9人口服降钙素(0.82mg)的药物代谢动力学
方法用473mg柠檬酸、75mg牛黄去氧胆酸、75mg月桂酰肉碱和0.82mg鲑降钙素充填明胶胶囊。将胶囊在包衣锅中用Eudragit L30-D55包衣60分钟，并储存于4℃。在试验日的早晨给禁食后的受试者服用1个胶囊，用一杯橙汁送服。在服用胶囊前15分钟和服用降钙素胶囊后指定的时间取血。用竞争性放射免疫试验测定降钙素的血浓度。从血浆降钙素浓度作为时间的函数所得的曲线下的面积计算绝对生物利用度(即相当于静脉注射降钙素的剂量)。
结果个体摄入胶囊后50-180分钟之间血液中测出最高水平降钙素。血液中降钙素的最高浓度在211-623pg/ml之间。5个个体的降钙素平均峰浓度(Cmax)为411pg/ml，比治疗目标血浆水平约高5-10倍。绝对生物利用度为0.14-0.68％，群体均值为0.38％。这些结果表明，与表7所得的结果相比，通过用明胶胶囊代替淀粉胶囊，用Eudragit L30-D55代替邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素作为肠溶包衣，通过增加柠檬酸的量和在制剂中加入月桂酰肉碱，虽然肽的含量减少约10倍，但鲑降钙素的生物利用度提高10倍。
虽然就特定的实施方案对本发明进行了描述，但很多其它变动和修改及其它用途对于本领域技术人员来说将会变得十分明了。因此，本发明并不限于本说明书的具体揭示，而只是被权利要求所限定。
权利要求
1．生理活性肽口服给药用的药物组合物，包含(A)治疗有效量的所述活性肽；(B)至少一种药学上可接受的pH降低剂；(C)至少一种有效地提高所述活性药物生物利用度的吸收促进剂；和(D)将所述药物组合物经患者的胃有效转运的抗酸保护赋形剂，它阻止所述活性肽和胃蛋白酶接触；其中，所述药物组合物中存在一定量的所述pH降低剂，其量为若所述组合物加到0.1M碳酸氢钠水溶液10ml中，则足以使所述溶液的pH降低到不高于5.5。
2．如权利要求1所述的药物组合物，其中，存在一定量的所述pH降低剂，其量为若所述组合物加到0.1M碳酸氢钠水溶液10ml中，则足以使所述溶液的pH降低到不高于3.5。
3．如权利要求1所述的药物组合物，其中，所述保护赋形剂的存在重量为不大于所述药物组合物余量的30％。
4．如权利要求1所述的药物组合物，其中，所述肠溶包衣的存在重量为不大于所述药物组合物余量的20％。
5．如权利要求1所述的药物组合物，其中，所述肠溶包衣的存在重量为所述药物组合物余量的10％-20％之间。
6．如权利要求1所述的药物组合物，其中，所述保护赋形剂足以阻止所述药物组合物在2小时内在0.1N HCl中崩解，还使所述组合物在100转/分的溶解浴中在pH升高到6.3后所述药物组合物的所有含量都在30分钟内完全释放。
7．如权利要求1所述的药物组合物，其中，所述吸收促进剂是表面活性剂。
8．如权利要求7所述的药物组合物，其中，所述表面活性剂是可吸收或可生物降解的。
9．如权利要求8所述的药物组合物，其中，所述表面活性剂选自酰基肉碱、磷脂和胆汁酸。
10．如权利要求9所述的药物组合物，其中，所述促进剂是酰基肉碱。
11．如权利要求10所述的药物组合物，其中进一步包括蔗糖酯。
12．如权利要求1所述的药物组合物，其中，所述吸收促进剂是选自以下物质的表面活性剂(ⅰ)阴离子型表面活性剂胆甾醇衍生物，(ⅱ)带负电的中和剂和阴离子型表面活性剂的混合物，(ⅲ)非离子型表面活性剂，和(ⅳ)阳离子型表面活性剂。
13．如权利要求1所述的药物组合物，其中，所述吸收促进剂选自阳离子型表面活性剂和阴离子型表面活性剂胆甾醇衍生物组成的组。
14．如权利要求1所述的药物组合物，其中，所述药物组合物包括至少两种吸收促进剂，一种是阳离子型表面活性剂，另一种是阴离子型表面活性剂胆甾醇衍生物。
15．如权利要求14所述的药物组合物，其中，所述阴离子型表面活性剂是酸溶性胆酸。
16．如权利要求1所述的药物组合物，其中进一步包括能有效地提高所述肽类活性剂的生物利用度的一定量的第二种肽。
17．如权利要求1所述的药物组合物，其中进一步包括将所述pH降低剂与所述保护赋形剂分开的水溶性载体。
18．如权利要求1所述的药物组合物，其中所述组合物包括至少一种pKa值不高于4.2的pH降低剂。
19．如权利要求1所述的药物组合物，其中至少一种pH降低剂在室温下水中的溶解度为至少30g/100升水。
20．如权利要求1所述的药物组合物，其中除了所述肠溶包衣外的所有成分是均匀分散的。
21．如权利要求20所述的药物组合物，其中所述药物组合物包含含有药用粘合剂和均匀分散在所述粘合剂中的所述pH降低剂、所述吸收促进剂和所述肽类活性剂的颗粒。
22．如权利要求1所述的药物组合物，其中所述药物组合物是固体剂型，其中所述pH降低剂与所述吸收促进剂的重量比在3∶1和20∶1之间。
23．如权利要求1所述的药物组合物，其中所述药物组合物是固体剂型，其中所述pH降低剂与所述吸收促进剂的重量比在5∶1和10∶1之间。
24．如权利要求1所述的药物组合物，其中所述pH降低剂选自柠檬酸、酒石酸和氨基酸的酸式盐。
25．如权利要求1所述的药物组合物，其中所述pH降低剂以不少于300mg的量存在。
26．如权利要求25所述的药物组合物，其中所述pH降低剂以不少于400mg的量存在。
27．如权利要求1所述的药物组合物，其中所述肽类药物为血管加压素。
28．如权利要求1所述的药物组合物，其中所述肽类药物为鲑降钙素。
29．如权利要求1所述的药物组合物，其中所述肽类药物为胰岛素。
30．如权利要求1所述的药物组合物，其中所述保护赋形剂为粘稠的保护性糖浆。
31．如权利要求1所述的药物组合物，所述药物组合物是鲑降钙素口服给药用的，包含(A)治疗有效量的所述鲑降钙素；(B)至少一种药学上可接受的pH降低剂；(C)至少一种有效地提高所述鲑降钙素的生物利用度的吸收促进剂；和(D)肠溶包衣；其中，所述药物组合物中存在一定量的所述pH降低剂，其量为若所述组合物加到0.1M碳酸氢钠水溶液10ml中，则足以使所述溶液的pH降低到不高于5.5。
32．如权利要求31所述的药物组合物，其中所述pH降低剂与所述鲑降钙素的重量比为至少200∶1。
33．如权利要求31所述的药物组合物，其中所述pH降低剂与所述鲑降钙素的重量比为至少800∶1。
34．如权利要求31所述的药物组合物，其中所述pH降低剂与所述鲑降钙素的重量比为至少2000∶1。
35．如权利要求31所述的药物组合物，其中所述组合物包括至少一种的pH降低剂，其pKa值不高于4.2，窒温下在水中的溶解度为至少30g/100ml水。
36．如权利要求31所述的药物组合物，其中水溶性载体将所述pH降低剂与所述肠溶包衣分开。
37．如权利要求31所述的药物组合物，其中所述鲑降钙素、所述pH降低剂和所述吸收促进剂都是均匀分散的。
38．如权利要求28所述的药物组合物，其中所述肠溶包衣的重量不大于所述药物组合物除去所述肠溶包衣后的余量的30％。
39．如权利要求1所述的鲑降钙素口服给药用的药物组合物，包含(A)治疗有效量的所述鲑降钙素；(B)至少一种药学上可接受的pH降低剂，其pKa值不高于4.2，在室温下水中的溶解度不低于30mg/100ml水；(C)至少一种有效地提高所述鲑降钙素生物利用度的吸收促进剂；和(D)以所述药物组合物余量的10％-20％重量存在的肠溶包衣；(E)将所述pH降低剂与所述肠溶包衣分开的水溶性屏障；其中，所述药物组合物中存在一定量的所述pH降低剂，其量为若所述组合物加到0.1M碳酸氢钠水溶液10ml中，则足以使所述溶液的pH降低到不高于5.5；且其中所述药物组合物包含含有均匀分散在药用粘合剂中的鲑降钙素、所述pH降低剂、所述吸收促进剂的颗粒。
40．提高治疗性肽活性剂口服给药的生物利用度的方法，所述方法包括将所述肽活性剂与至少一种pH降低剂和至少一种吸收促进剂选择性地释放到患者的肠中，这是在所述肽活性剂、pH降低剂和吸收促进剂在能实质上阻止胃蛋白酶和所述肽接触的抗酸性保护赋形剂的保护下通过所述患者的嘴和胃之后发生的；其中所述pH降低剂和与其一起释放的其它化合物释放到所述肠道的量为如果加到0.1M碳酸氢钠水溶液10ml中足以使所述溶液的pH降低到不高于5.5的量。
41．如权利要求40所述的方法，其中所述pH降低剂的量为如果所有成分加到0.1M碳酸氢钠水溶液10ml中足以使所述溶液的pH降低到不高于3.5的量。
42．如权利要求40所述的方法，其中，所述保护赋形剂足以阻止其它成分在2小时内在0.1M HCl中释放，还使所述保护赋形剂和其它成分在100转/分的溶解浴中在pH升高到6.3后所有成分都在30分钟内完全释放。
43．如权利要求40所述的方法，其中，所述吸收促进剂选自阳离子型表面活性剂和阴离子型表面活性剂胆甾醇衍生物组成的组。
44．如权利要求40所述的方法，其中所述pH降低剂的pKa值不高于4.2，在室温下水中的溶解度为至少30g/100ml水。
45．如权利要求40所述的方法，其中所述pH降低剂与所述吸收促进剂的重量比在3∶1和20∶1之间。
46．如权利要求1所述的方法，其中所述pH降低剂以不少于300mg的量存在。
47．如权利要求40所述的方法，其中所述肽活性剂为鲑降钙素。
48．如权利要求47所述的方法，其中所述pH降低剂与所述鲑降钙素的重量比为至少800∶1。
49．如权利要求47所述的方法，其中所述pH降低剂与所述鲑降钙素的重量比为至少200∶1。
50．如权利要求47所述的方法，其中所述pH降低剂与所述鲑降钙素的重量比为至少2000∶1。
全文摘要
借助抗酸性保护赋形剂将本发明的成分经胃转运、使肽定点释放于肠的药物组合物提高了肽类活性剂口服给药的生物利用度。组合物包含吸收促进剂和能降低肠内局部pH的足量的pH降低剂。所有成分与肽一起释放到肠内。
文档编号A61K9/50GK1213282SQ97193029
公开日1999年4月7日 申请日期1997年3月14日 优先权日1996年3月15日
发明者W·斯特恩, J·P·吉力干 申请人:尤尼金实验室股份有限公司