专利名称：商陆总皂甙及其对子宫内膜异位症的治疗应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及从中药商陆中提取的商陆总皂甙，并经动物试验证明对子宫内膜异位症具有显著的治疗作用。
中药商陆为商陆科植物商陆Phytolacca esculenta Van Houtte(P．Acinose Roxb．)或垂序商陆Phytolacca americana L．的干燥块根，是一种传统中药。性味苦、寒、有毒。中医用于泻水散结，主治水肿、胀满、喉痹、痈肿、恶疮。但是，它从未被用于治疗子宫内膜异位症。治疗子宫内膜异位症，目前多采用激素类药物如达那唑等。
本发明的目的在于利用我国的中药资源，寻找出对子宫内膜异位症有治疗作用的化学成份，以便研制新的治疗子宫内膜异位症的药物。
本发明以中药商陆为原料，用溶剂提取法提取得商陆总皂甙，为三萜皂甙类化学成分。主要含以下化学成份，其化学结构式如下
商陆皂甙O H -木糖 HH商陆皂甙P OH -葡萄糖 HH商陆皂甙Q OH -葡萄糖4-1木糖4-1葡萄糖HH经动物试验，发现上述商陆总皂甙对子宫内膜异位症具有明显的治疗作用。试验方法与结果如下一、实验药物商陆总皂甙批号为970201，纯度为74．1％，用0．5％羧甲基纤维素钠溶液配成10mg／ml液体，供灌胃用。
达那唑上海第十二制药厂产品，用0．5％羧甲基纤维素钠溶液配成10mg／ml溶液，供灌胃用。
二、实验动物SD大鼠，雌性，体重150±20g，购自上海西普尔必凯实验动物有限公司(清洁级，合格证书医动字第02-49-2号)。
三、实验方法1．自体移植子宫块法诱发的大鼠子宫内膜异位症模型的制备按Johes描述的方法进行自体子宫内膜移植(Johes RC．The effect of a luteinizing hormonereleasing hormone(LRH)agonists(Wy-40，972)，levonorgetrel，danazol and ovariectmy onexperimental endometriosis in the rat．Acta Endocrinologica，1984；106∶282)。具体步骤如下3％戊巴比妥钠溶液进行腹腔注射麻醉(剂量为30mg／Kg)，将大鼠仰卧固定于手术台上，剪去腹毛，消毒皮肤后，在无菌条件下进行手术。取下腹正中切口，自耻骨联合上缘0．5cm处向上切开3cm，暴露子宫。从左侧子宫角远端切下长约1cm的子宫角片段，两头结扎，保留卵巢和输卵管。沿子宫系膜纵行剖开子宫角片段，将子宫内膜从子宫肌层分离开来，并切成5mm×4mm的子宫内膜块，置于37℃ RPMI-1640培养液中待用，用号码为7个0的无损伤尼龙缝合线将子宫内膜块缝合于腹膜，使其粘膜面朝向腹腔表面。于手术后3周，行第二次剖腹，检查子宫内膜异位灶的生长情况，并用卡尺测量所形成的囊肿大小(长×宽×高，mm3)。
2．大鼠子宫内膜异位症治疗实验的分组和给药方案治疗自第二次剖腹手术后开始，将造子宫内膜异位症模型的大鼠，随机分成7组，各组按以下方案给药(1)商陆总皂甙大剂量组每天每只动物给予100mg／Kg商陆总皂甙；(2)商陆总皂甙小剂量组每天每只动物给予50mg／Kg商陆总皂甙；(3)达那唑组每天每只动物给予100mg／Kg达那唑；(4)对照组每天每只动物给予等体积0．5％羧甲基纤维素钠溶液。
所有组动物均用灌胃法给药，每日1次，连续3周。最后，在服药3周后，第三次打开大鼠腹腔，用卡尺测量其子宫内膜异位症的囊肿体积(长×宽×高，mm3)。用本组动物自身对照法进行统计学t检验，评价用药前后子宫内膜异位症囊肿体积大小差异的显著性。
四、实验结果所有用药组和阳性对照达那唑组动物，在用药3周后，囊肿均比用药前显著缩小，具体数据如下表1所示。
表1商陆总皂甙对大鼠子宫内膜症囊肿的治疗作用组别 动物数 囊肿大小(mm3) 囊肿平均减少量 抑制率给药前给药3周后 (mm3) (％)对照组 17 103．7±98．0 119．6±103．9-16．0±12．9商陆总皂甙100mg／Kg 17 118．9±119．618．2±18．9**100．6±104．3**84．650mg／Kg18 110．5±89．8 48．8±49．5**51．7±48．6**51．4达那唑100mg／Kg 17 108．2±102．353．0±46．7**55．2±47．4**51．0*P＜0．05**P＜0．01 与对照组用药相比。
五、结论本实验结果表明，本发明的商陆总皂甙对大鼠子宫内膜异位症均有显著的治疗作用，作用强于同剂量的达那唑，说明用于临床治疗子宫内膜异位症有重要的治疗价值。可见，用商陆总皂甙可制成对子宫内膜异位症具有治疗作用的药品或功能食品。
本发明中，商陆总皂甙的提取方法如下以中药商陆为原料，粉碎后用具60％乙醇回流提取2～4次，合并提取液，减压回收乙醇，得浓缩浸膏。浸膏以适量水稀释，用水饱和正丁醇反复多次萃取，合并正丁醇萃取液，活性炭脱色，减压回收正丁醇，得浅黄色粉末，即商陆总皂甙。商陆总皂甙经硅胶柱层析，以氯仿∶甲醇-8∶2洗脱，得主要化学成分为商陆皂甙甲。此外，还有商陆皂甙乙、丙、丁、戊、己、H、O、P、Q等多种皂甙成分。
权利要求
1．一种以中药商陆为原料的提取物商陆总皂甙，其特征在于具有以下化学结构
其中R1R2R3R4商陆皂甙甲 OH -木糖4-1葡萄糖 H CH3商陆皂甙乙 OH -木糖 H CH3商陆皂甙丙 H -木糖4-1葡萄糖 H CH3商陆皂甙丁 OH -葡萄糖 H CH3商陆皂甙戊 OH -木糖 H H商陆皂甙己 OH -木糖4-1葡萄糖 H H商陆皂甙H OH -木糖 4-1 葡萄糖 葡萄糖CH3商陆皂甙O H -木糖 H H商陆皂甙P OH -葡萄糖 H H商陆皂甙Q OH -葡萄糖4-1木糖4-1葡萄糖H H
2．如权利要求1所述的商陆总皂甙，其特征在于用它制成对子宫内膜异位症具有治疗作用的药品或功能食品。
全文摘要
一种以中药商陆为原料提取的中药成分商陆总皂甙,含有商陆皂甙甲、乙、丙、丁、戊、己、H、O、P、Q等多种皂甙成分,经对大鼠子宫内膜异位症治疗试验,发现具有显著的治疗作用,作用强于同剂量的达那唑,证明用于临床治疗子宫内膜异位症有重要治疗价值。
文档编号A61P43/00GK1205339SQ98110989
公开日1999年1月20日 申请日期1998年7月28日 优先权日1998年7月28日
发明者易杨华, 郑钦岳 申请人:中国人民解放军第二军医大学