专利名称：9-顺-视黄酸及其盐和酯的药物用途的制作方法
技术领域：
本发明有关于含有9-顺-视黄酸，它的药物上可接受的盐类和它的药物上可接受的，可水解的酯类的药物组成物。进一步，本发明有关于用9-顺-视黄酸，它的药物上可接受的盐类和它的药物上可接受的，可水解的酯类作为一种药物。另一方面，本发明也有关于把9-顺-视黄酸，它的药物上可接受的盐类和它的药物上可接受的，可水解的酯类用来制造一种用于下面指定的药物适用症的药物。
德国专利DE3827467描述了视黄酸与嘧啶衍生物组合用于诱导和刺激头发生长并减少其脱落。
按照本发明，已经发现9-顺-视黄酸，它的药物上可接受的盐类或它的药物上可接受的可水解的酯类具有与上皮损伤，抗增殖，抗转化(变态)，抗肿瘤性的肿瘤预防以及治疗肿瘤有关的性质，而只呈现有限的毒性或别的与类视黄素类化合物相连系的不利效应。现已发现涉及上述性质的病理症状的治疗可通过系统地或局部地施用9-顺-视黄酸，它的药物上可接受的盐类或它的药物上可接受的，可水解的酯类而得到有效的治疗。
按照本发明的一个具体实例，当给患有癌前期上皮损伤，即癌变前损伤的哺乳动物服用9-顺-视黄酸，它的药物上可接受的盐类或药物上可接受的可水解的酯类时，阻止了损伤的进展。这种化合物控制住了细胞增生并分化了这些恶化前或癌变前的损伤，从而导致细胞的修复，以这种方式防止了这些损伤发展成为上皮癌。
在治疗恶化前或癌变前的上皮损伤，防止这些损伤发展或为癌时，可以给患有这些疾病的病人口服或局部施用9-顺-视黄酸，它的药物上可接受的盐类或它的药物上可接受的可水解的酯类，所用剂量应能有效阻止这些损伤的进一步发展。剂量应依赖于损伤的数量和大小以及患者的需要。
9-顺-视黄酸，它的药物上可接受的盐类或它的药物上可接受的可水解的酯类在治疗乳房、皮肤、结肠、膀胱、食管、胃、喉、肺或口腔中的上皮性的恶化前或癌变前损伤方面是特别有效的，按照本发明的一个优选的实例，这种化合物可用来治疗恶化前或癌变前损伤诸如各种粘膜白斑病，特别是口腔和舌头部位的，以及乳房部位的癌变前或恶化前损伤。
按照本发明的进一步的实例，9-顺-视黄酸，它的药物上可接受的盐类或它的药物上可接受的可水解的酯类可被用来治疗上皮起端的癌或肿瘤，阻止这些肿瘤的发展。按照这种化合物的抗癌或抗肿瘤性质，用这种化合物来治疗肿瘤可使这些肿瘤的大小和数量两方面都产生消退。在应用这种化合物作为一种抗肿瘤剂时，这种化合物在阻止乳房、皮肤、结肠、膀胱、食管、胃、喉部、肺或口腔中的肿瘤发展方面是特别有效的，可以把9-顺-视黄酸以上述与治疗患有恶化前或癌变前损伤的病人有关的方式给患者服药。
在上面叙述的治疗中，9-顺-视黄酸，它的药物上可接受的盐类或它的药物上可接受的可水解的酯类可以一种含有9-顺-视黄酸和一种药物上可接受的与所说化合物相容的载体所组成的组成物系统地或局部地给患者施药。在制备这种组成物时，可用任意通常药物上可接受的载体。当药物是供口服时，一般是每隔一定时间服药，方便地是在用餐时，或者每天服一次。已经确定这种化合物当局部施药或当口服时是相对无毒性的。
能有效地用9-顺-视黄酸治疗的涉及恶化前和癌变前的上皮损伤或肿瘤的疾病实例有光照性角质化，砷中毒性角质化，着色性干皮病，鲍恩氏症(癌前皮炎)，粘膜白斑病，组织转化，发育异常和粘液膜上的乳头状瘤例如口、舌、咽、喉部位的这类瘤，支气管粘液膜的癌变前期变化诸如组织转化和发育异常(特别是常见于抽烟抽得很厉害的人和与石棉和/或铀接触的人)，子宫预的发育异常和粘膜白斑病，外阴部的营养障碍，膀胱的癌变前期变化，例如组织转化和发育异常，膀胱的乳浆状瘤和肠道的息肉。可有效地用9-顺-视黄酸治疗的上皮起端的半恶性或恶性肿瘤或癌的实例有乳腺瘤，皮肤瘤，例如茎底细胞癌，膀胱瘤例如浅源膀胱癌，结肠瘤，食管瘤，胃瘤，喉瘤和肺瘤。
上皮性质的癌变前损伤和恶性肿瘤的治疗可单独使用9-顺-视黄酸，它的药物上可接受的盐或它的药物上可接受的可水解的酯来进行，也可以和别的治疗方法诸如外科手术，放射疗法，荷尔蒙疗法或用标准的化学治疗法(抑制细胞生长剂和细胞毒剂)或生物反应变更因子(干扰素，白细胞素或别的细胞分裂素)等疗法结合在一起进行治疗。
进一步，按照本发明，已经发现把9-顺-视黄酸和它的药物上可接受的盐类及可水解的酯类局部施用于患者皮肤时，可逆转与光照性损伤有关的疾病。因此，通过对由于阳光曝晒而受到损伤的患者皮肤局部施用9-顺-视黄酸化合物，可以逆转皱纹，弹性组织变性和早衰等曝晒造成的影响而使皮肤外观得到改善。
通过局部施用9-顺-视黄酸化合物和药物上可接受的盐类和可水解的酯类，加速了皮肤损伤的修复，从而赋予皮肤以更光滑和更年青的外观。
按照本发明，也已发现当给患者口服或局部服用9-顺-视黄酸，它的药物上可接受的盐类或它的药物上可接受的可水解的酯类时，皮脂的分泌即减少。因此，通过服用这种化合物来减少皮脂分泌和痤疮损伤，从而提供了一种治疗痤疮，油脂性头发和油脂性头皮的方法。在这种治疗方法中，服用这种化合物可被用作由于过量的皮脂分泌而引起的疾病诸如痤疮，或油脂性头皮和头发的一种预防方法，也可用于这些疾病的治疗。
已经知道抑制皮脂的产生和/或分泌在治疗和/或预防像痤疮这类疾病中是有效的，增加皮脂分泌则可导致像皮脂溢性皮炎包括(头)皮屑，油脂性皮肤，油脂性头发，粟粒疹和黑头粉刺等这类皮肤病。
按照本发明，局部施用或口服9-顺-视黄酸化合物，它的药物上可接受的盐类和它的药物上可接受的可水解的酯类，在治疗所有形式的痤疮诸如炎性和非炎性的痤疮时都是有效的。
本发明还有另一方面的内容，即已经发现把9-顺-视黄酸，它的药物上可接受的盐类或它的药物上可接受的可水解的酯类给患有牛皮癣的病人口服或局部用药时，它对于治疗牛皮癣是有效的。服药减轻了牛皮癣病症对皮肤的影响。
药物上，接受的盐类包括任何化学上允许的9-顺-视黄酸的盐，并在药物上可接受的制剂中可供人类患者服用。任何这样的通常在药物上可接受的盐都可以使用。在这类可以使用的普通盐类中包括碱盐，例如碱金属盐如钠盐或钾盐，碱土金属盐如钙盐或镁盐，以及铵盐或烷基铵盐。
按照本发明，9-顺-视黄酸可以它的药物上可接受的可水解的酯类的形式服用，任何药物上可接受的可水解的酯类都可用于本发明的组成物和方法中，在这些酯类化合物中有芳香酯类诸如苄基酯(OB2l)或取代有低级烷基，卤素，硝基的苄基酯；或低级烷基酯类，例如叔丁基酯；或环戊基酯，环己基酯，环庚基酯；或9-芴甲基酯。
按照本发明，可以药物上可接受的供口服或局部用药的组成物的形式提供9-顺-视黄酸或它的药物上可接受的盐类和它的药物上可接受的可水解的酯类。这些本发明的药物组成物含有所说的9-顺-视黄酸或它的药物上可接受的盐类和它的药物上可接受的可水解的酯类，以及一种与之相容的药物上可接受的载体物质。可应用任何一种通常的载体物质。载体物质可以是一种适合于口服的有机或无机的惰性载体物质。适当的载体包括水，明胶，阿拉伯胶，乳糖，淀粉，硬脂酸镁，滑石，植物油，聚亚烷基-乙二醇，凡士林等。进一步，药物制剂还可包含其它的药物活性剂，与接受的药物化合物的实践经验一致，还可以加入别的添加剂诸如香味剂，保存剂，稳定剂，乳化剂，缓冲剂等。
药物制剂可以做成任何通常的形式，包括(a)供口服的固体形式的制剂诸如片剂，胶囊，丸剂，粉剂，粒剂等；(b)供局部施药的制剂诸如溶液，悬浮液，软膏，乳膏，凝胶，降低颗粒体积至5微米以下的细粉剂，烟雾剂等。药物制剂可被消毒和/或含有辅剂，诸如保存剂，稳定剂，润湿剂，乳化剂，以及为改变渗透压的盐类和/或缓冲剂。
为向皮肤上局部施药，上述化合物最好是被制成软膏，酊剂，乳膏，凝胶，溶液，洗剂，喷雾剂，悬浮剂，洗发剂，洗发用肥皂，香水等。事实上，按照本发明，可以使用任何一种通常用于头皮或皮肤上的组成物。经优选的施用含有本发明试剂的组成物的方法中，是以凝胶，洗剂和乳膏剂的形式来施药。为向皮肤上局部施药用的药物制剂，可通过把上述活性组份按通常用于这类制剂中的方法与非毒性的，治疗上是惰性的固体或液体载体相混合来制备。这些制剂应含有基于组成物的总重量计算至少大约0.01重量百分数的活性组份。因为活性组份9-顺-视黄酸是相对非毒性和非刺激性的，它在局部用药的组成物中的含量可超过0.15％重量百分数。最好是这些制剂包含基于组成物的总重量计算大约0.01至0.15％重量百分数的活性组份。并且最好是每天往皮肤上施用这些制剂一或两次。这些制剂可按患者的需要来施药。在实施本发明时，活性组份可通过水溶液或醇溶液诸如乙醇溶液来施药。
在制备上述局部用的制剂过程中，可使用通常用于局部制剂的药物化合物领域中的上述添加剂，诸如保存剂，增稠剂，香料等。此外，也可往含有上述活性试剂的局部用药物制剂中掺入通常的抗氧剂或通常的抗氧剂的混合物。可用于这些制剂中的通常的抗氧剂包括N-甲基-α-生育胺，生育酚，丁基化的羟基苯甲醚，丁基化的羟基甲苯，乙氧喹等。用于本发明中的含有活性药剂的乳膏基药物配方，是由包含一种脂肪酸醇，半固体的石油烃，1.2-乙二醇和一种乳化剂的水溶液孔化液所组成的。
按照本发明的含有活性药剂的软膏配方，包含半固体石油烃与一种活性物质在一种溶剂中形成的分散体系的混合物。包含用于本发明的活性成份的乳膏组成物最好是包含由致湿物、一种粘度稳定剂和水组成的水相，由脂肪酸醇、一种半固体石油烃和乳化剂组成的油相，以及含有分散在一种水溶液稳定剂—缓冲溶液中的活性药剂的相所形成的乳状液。稳定剂可被加到局部用的制剂中。按照本发明可应用任何一种通常的稳定剂。在油相中，脂肪酸醇组份起着稳定剂的作用。这些脂肪酸醇组份是由至少包含大约14个碳原子的长链饱和脂肪酸还原而衍生出来的。按照本发明，也可使用一般用于头发上的局部用制剂中的普通香水和洗剂。进一步，如果需要，还可在本发明的局部用制剂中使用通常的乳化剂。
一种经优选的口服剂型包括片剂，由硬或软的明胶，甲基纤维素或其它容易在消化道溶解的适当材料组成的胶囊。按照本发明，经仔细考虑的口服剂量将按照具体患者的需要而变化，这可由处方的医生来决定。不过，一般说来每日的剂量在大约每公斤体重O.01毫克至大约3毫克之间，最好是在每公斤患者体重约0.025毫克至大约1.5毫克之间。这一剂量可按照患者的需要，按医生决定的任何剂量安排来服用。
以任何所需的量掺入这里列举的治疗活性物质到用于口服剂型中经肠道施药，同样是在本发明的权限范围之内。但最好是以这样的方式来配制含有本发明活性物质的制剂，即每种剂型中包含大约1毫克至大约50毫克活性物质以及合适的治疗上是惰性的填充剂和稀释剂。特别优选的作法是把这样的剂量掺入软的明胶胶囊和片剂中。
按照本发明，使用9-顺-视黄酸的效果可用下述试验模型来证实。
A. 9-顺-视黄酸对于人类肿瘤细胞系和对于实验肿瘤的抗肿瘤效果对人类变态的上皮细胞系生长和增殖的抑制效应把9-顺-视黄酸对人类肿瘤细胞系SCC 15(舌部的鳞状细胞癌)和A431(外阴部的鳞状细胞癌)进行试验。增殖作用是由能存活的细胞通过线粒体酶活性对MTT染料[3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2.5-二苯基四唑溴化鎓盐]的还原作用来测量的(参见Mosmann T.Rapid关于细胞生长和生存的比色试验应用于增殖和细胞毒性试验的论文，发表于J.Jmmunol.Methods 6555-63，1983年)。
试验结果对人类鳞状细胞癌SCC 15(舌部)增育7天后相对于对照组存活癌细胞的％对照组(DMSO)100±11.49-顺-视黄酸(1.10-7M) 54±7.5 P＜0.0025干扰素α(IFNα)(1000单位/毫升) 60±8.3 P＜0.0059-顺-视黄酸+IFNα20±2.5 P＜0.001可见9-顺-视黄酸的浓度为3.10-7M时可抑制增殖达46％，与IFNα结合使用时甚至可达80％。
对人类鳞状细胞癌A 431(外阴部)培育7天后相对于对照组存活癌细胞的％对照组(DMSO) 100±8.79-顺-视黄酸(3.10-7M) 36±1.8 P＜0.001IFNα(1000单位/毫升) 42±0.9 P＜0.00059-顺-视黄酸+IFNα 23±0.4 P＜0.001可见9-顺-视黄酸的浓度为3.10-7M时可抑制增殖达64％，与IFNα结合使用时甚至可达77％。
9-顺-视黄酸对两种试验的人类上皮癌细胞系均有显著的抑制生长的效应。
进一步还研究了9-顺-视黄酸对于其它变态细胞系的效果，在两组各重覆四次的试验中，进行了含有细胞系SKv-11，即一种包含在人类乳头癌病毒中的变态角质化细胞系被9-顺-视黄酸抑制增殖的情况方面的试验。把细胞按5-104细胞/孔的浓度植入Eagle氏介质中并把癌细胞培育2天。在用10-4M浓度的类视黄素培育前和培育后，用血细胞计数器直接进行细胞计数，并计数相应的在DMSO对照组中培育的细胞数目。生长抑制情况用相对于对照组的％来表示。
试验结果9-顺-视黄酸的浓度为10-6M时，可明显地抑制人类变态的角质化细胞SKv-11的增殖达32.4％(P＜0.001)。
B. 9-顺-视黄酸对于肿瘤细胞诱导的血管生成的效果。
现已确定，肿瘤的不受限制的生长是依赖于血管生成。肿瘤细胞数目增加之前必定先有会聚在肿瘤上的新的毛细血管的增加。因此，抑制了血管的生成，也就抑制了肿瘤的生长。(参见Folkman J.论文在正常组织和肿瘤组织中血管生长是怎样调节的？在G.N.A.Clowed纪念奖的演讲，发表于Cancer Res.46467-473，1986年；以及Sidky Y.A和Bordem E.C的论文血管生成被干扰素所抑制对于肿瘤诱导的和淋巴细胞诱导的血管增生的影响，发表于CancerRes.47.5155-5161，1987年)。
血管生长方面的试验以前曾被描述过(参看Sidky Y.A和Auerbach R.论文淋巴细胞诱导的血管生成移植物对宿主反应的一种定量的和灵敏的试验；发表于J.exp.Med.，1411084-1100，1975年，Majewski S等人的论文通过系统地服用鱼精蛋白硫酸盐来抑制肿瘤诱导的血管生成。发表于Int.J Cancer 33831-833，1984年)。在试验9-顺-视黄酸时应用了两种试验方法。在第一种试验中，类视黄素是在把细胞系注射到老鼠体内前在活体外加入到细胞系中的，在第二种试验中，老鼠是在真皮内注射肿瘤细胞之前把类视黄素经腹膜内在活体内进行注射的。
试验方法两种致癌细胞系SKv-e2和HeLa.的细胞和一种非致癌性的细胞系SKv-e1有活体外预先用10-7M浓度的9-顺视黄酸培育48小时，然后进行细胞计数并在TC 199介质中洗涤。把细胞浓度调节到每0.1毫升介质中有2.105个存活的细胞，并经真皮内注射到经过X-光照射，但未用类视黄素处理过的Balc/c老鼠体内，对照组注射预先用DMSO培育的肿瘤细胞。按前面参考文献中的方法测定血管生成效应。
试验结果a)在活体外事先用9-顺-视黄酸培育过的细胞系SKv-e2(致癌的)，HeLa(致癌的)和SKv-el(非致癌的)，注射到Balc/c老鼠体内时对血管生成能力的影响平均血管数目SKv-e2 HeLa Skv-e1对照组34.7±3.7 32.5±2.7 26.3±1.59-顺-视黄酸 23.6±4.2 23.8±2.9 25.6±2.2(P＜0.001) (P＜0.001) (P＜0.1)可见，与9-顺-视黄酸对两种致癌细胞系诱导的新血管生成具有抑制效应相反，9-顺-视黄酸对于非致癌性细胞子系诱导的血管生成并没有抑制作用。
b)Balc/c老鼠在活体内用9-视黄酸预处理时，对于细胞诱导的血管生成的抑制效果平均血管数目对照组 9-顺-视黄酸HeLa(致癌性的) 28.3±0.8 16.3±1.8 P＜0.001SKv-12(致癌性的)30.3±2.6 15.3±1.0 P＜0.001SKv-e2(致癌性的)31.3±2.7 19.7±0.6 P＜0.001SKv-e1(非致癌性的) 19.7±3.7 24.3±5.6 P＞0.1可见，经9-顺-视黄酸处理过的老鼠当被注射三种致癌性的细胞系时显示出对于新血管生成的抑制效果，当注射的是非致癌性的细胞系时，则不显示这种抗血管生成的效果。
9-顺-视黄酸在活体外和活体内都能抑制经肿瘤细胞诱导的新血管的生成。因为形成新血管是肿瘤生长的先决条件，所以9-顺-视黄酸不仅通过抑制增殖和/或分化的诱导直接起到抗肿瘤的作用，还通过抗血管生成的效应，间接地起着抑制肿瘤生长的作用。
c. 9-顺-视黄酸对老鼠的由化学诱导产生的皮肤乳头状瘤的效果已经很好地确定，类视黄素对于皮肤，呼吸道，消化道和泌尿系统的由化学诱导产生的肿瘤具有预防和治疗的效果(参见Bollag W.和Hartmann H.R的论文在动物和人类身上用类视黄类预防素预防和治疗癌。发表于Cancer Surveys 2293-314，1983年)。9-顺-视黄酸对老鼠身上已被确认的皮肤乳头状瘤具有显著的治疗效果，能导致这些上皮肿瘤的消退。乳头状瘤试验是筛选类视黄素类化合物抗肿瘤活性的标准试验。
试验结果剂量每只老鼠乳头状瘤直径的平均和的变化百分数毫克/公斤体重，腹膜内注射对照组 +23.5±2.19-顺-视黄酸400 -43.3±2.4P＜0.0005200 -24.8±4.5P＜0.0005可见，9-顺-视黄酸对于老鼠身上已被确认的化学诱导产生的皮肤乳头状瘤具有重要的治疗性的抗肿瘤效果，使这种上皮肿瘤消退。
D. 9-顺-视黄酸抗牛皮癣活性的效应抗牛皮癣活性可以用C节中所引证的试验模型，通过使老鼠身上的由化学诱导产生的皮肤乳头状瘤产生消退的能力来测定。乳头状瘤试验是类视黄素抗牛皮癣效应的标准试验(参看Teelmann K，Bollag W.的论文用老鼠乳头状瘤试验作为类视黄素对人类牛皮瘤治疗活性的预测试验的关聪，发表于Dermatologica 18030-35，1990年)。
像由C节中所给出的数据可以看出的那样，9-顺-视黄酸在这个预测对于人类的抗牛皮癣活性的模型试验中显示出明显的治疗效果。
E. 9-视黄酸抑制痤疮和皮脂的活性痤疮的病因学是多因素的，皮脂过量分泌，角化过度，细菌移生在它的病理学中起着关键性的作用。
下面的两种模型被用来量度抗痤疮的活性1.人类皮脂细胞抗增殖试验已经显示出与临床实验对于治疗人类痤疮活性的化合物有很强的相互关系(参看Doran T.I和Shapiro S.S的论文“类视黄素对皮脂细胞增殖的影响”。发表于“类视黄素，B部分细胞分化和临床应用”，酶学中的方法(Methods inEnzymology)第190卷，Ed.L.Packer，Academic Press，pp 334-338，1990年)。
2.Rhino老鼠的抗角质化试验也被用来作为抗痤疮活性的量度(参看Mezick J.A，Bhatia M.C和Capetola R.J发表的论文“类视黄素对rhino老鼠身上充满角质的小囊大小的局部和全身的效应，一种量度类视黄素‘抗角质化’效果的模型”，发表于J.Invest.Dermatol，83，110-113，1984年，以及Mezick J.A.，Bhatia M.C.，Shea L.M.，Thorne E.G.，和Capetola R.J等的论文“类视黄素在rhino老鼠身上的抗痤疮活性”发表于“皮肤病学中的模型”(Modelsof Dermatology)，Maibach and Lowe(eds)，Karger(Basel)volume2.p.p.59-63，1985年)。
1.皮脂细胞增殖I.方法皮脂细胞是由整容外科手术中切除的面部皮肤衍生的成年人的皮脂腺中析离的，并在一层老鼠3T3纤维细胞中培育(参看DoranT.I.，Baff.R.，Jacob P.，和Pacia E.的论文“活体外人类皮脂细胞的特性”，发表于J.Invest.Dermatol.96，341-348，1991年)。细胞被植入不含试验化合物的介质中，然后在最初植入细胞的24-48小时后换成含有试验化合物的新鲜介质。以后每48小时把培养基换成含有试验化合物的新鲜介质。在试验完成的当天，培养基用0.03％EDTA在PBS中的溶液清洗，只除掉3T3纤维细胞，然后在0.05％胰蛋白酶/0.03％EDTA溶液中培育。细胞被悬浮并剧烈混合以制备单一细胞的悬浮液，并用血液细胞计数器计数。测定的结果表示成与仅用稀释剂处理的对照组培养基比较，为使得皮脂细胞增殖的抑制率达50％时所必需的化合物的μM量(IC50值)。
II.试验结果9-顺-视黄酸在活体外具有抑制人类皮脂细胞增殖的活性，其IC50值为0.1μM。
2.Rhino鼠小囊的减少，抗角质化试验I.方法用从Jackson Laboratories得到的鼠龄为6至8周的雌性rhimo鼠(hrhrhrhr，每组用6只动物。通过把化合物溶于丙酮制得试验化合物的溶液。用微量移液管把试验化合物溶液施用到老鼠的背部。连续3周，每周5天，每天往老鼠背部施用100微升试验化合物的溶液。通过吸入CO2将老鼠窒息致死。由它的背部切下一片皮肤留作组织学检验。由真皮分离出的表皮被放置在丝网状的组织学暗盒中并在每个阶段在70％，80％，90％，100％的乙醇和二甲苯中脱水2小时。皮肤试样由二甲苯溶中取出后放在玻璃的显微镜载片上。用Ultimage系统作影像分析以测定小囊的平均面积，每只老鼠要分析大约150个小囊。
II.试验结果9-顺-视黄酸……在局部施用3周后对于减少莱茵鼠小囊大小方面的效果化合物 剂量小囊大小％变化(％溶液)(毫克/公斤体重)(平方微米)平均值±标准偏差9-顺-视黄酸 0.001％0.042593±559-520.01％ 0.4 1425±167-740.1％ 4.0 1210±76 -78对照组赋形剂5420±42…将经过化合物处理的试样与只用赋形剂处理的试样比较所有的P值都＜0.001。为统计性测定还进行了学生t-统计量值的计算。
在这种抗角质化和抗痤疮试验中，9-顺-视黄酸是有活性的。
F.用9-顺-视黄酸治疗患痤疮的普通患者的临床数据。
8位年龄在15-48岁，平均年龄27岁的患者，其中2位男性，6位女性，用9-顺-视黄酸治疗1至3个月。在8位患者中，2位治疗一个月，2位治疗两个月，4位治疗三个月。5位患者有粉刺，7位有丘疹，6位有脓疱，1位有小结。7位患者损伤只限于面部，1位患者的损伤在面部和背部。按下面的配方施以9-顺-视黄酸0.01％活性化合物在乙醇-丙二醇(50/50)中的溶液。把溶液每天晚上给患者的有痤疮损伤部位施用。
损伤(粉刺，丘疹，脓疱，小结)分别在开始时和在经过1，2和3个月的治疗后进行计数。测定每位患者从开始计数时总损伤数降低的百分数，并计算出平均值。结果如下经一个月治疗后总损伤数(8位患者)降低了平均48％，两个月治疗后(6位患者)降低72％，三个月治疗后(4位患者)降低77％。应特别注意对皮肤的刺激作用，其中两位患者在治疗开始时观察到轻微的红斑和轻微红斑和轻微的鳞屑，但这是暂时性的，虽然继续进行治疗，它们也会在一至二周内消失。患者很难注意到这些副作用。
与用全反式或13-顺-视黄酸所取得的成果比较，用9-顺-视黄酸治疗痤疮产生了非常好的结果。为成功进行局部治疗所需的药液浓度为0.01％，明显地低于全反式视黄酸或13-顺-视黄酸，用它们治疗为得到相同的治疗结果所必需的浓度0.05％。进一步，9-顺-视黄酸在治疗上有效的浓度下所引起的副作用也明显地小于全反式或13-顺式视黄酸。
G. 9-顺-视黄酸在光照性损伤治疗中的活性I.方法无毛的老鼠被用紫外线照射，然后局部用9-顺-视黄酸治疗使皮肤损伤得到修复。
经照射的皮肤和治疗后的部位用组织学方法评价修复的程度。修复通过由表皮往下延伸至压缩的弹性蛋白的正常皮肤的外观来定义。修复的程度即反映在这一区域的宽度上。
这一方法被描述于Bryce G.F.，Bogdan N.J.，和Brown C.C的论文“视黄酸促进经紫外线照射的无毛老鼠皮肤损伤的修复和皱纹的消除”，发表于J.Invest.Dermatol.91，175-180，1988年。
II.试验结果治疗修复面积皱纹消除以平方毫米×103计 标度0-4ED50ED50对照组 0.21±0.12 3.1±0.39-顺-视黄酸10μg 0.57±0.48 2.6±0.730μg 0.87±0.34 1.8±0.3**100μg 7.37±2.04**0.3±0.1***200μg 6.46±1.57**0*****P＜0.01***P＜0.001相对于对照组H.急性毒性急性毒性试验是用感染了白化病的Füillnsdorf老鼠来测定的。把9-顺-视黄酸悬浮于菜子油中，经腹膜内一次性剂量给药，在此一次性剂量给药的24小时，10天和20天以后，记录老鼠10％，50％和90％的致死剂量(LD)。每组同10只老鼠。
试验结果(以毫克服用的化合物/公斤体重计)24小时10天20天LD 10％＞400012001200LD 50％＞400014001400LD 90％＞400018001800下面的实例解释了本发明提供的含有9-顺-视黄酸的药物制剂，化合物9-顺-视黄酸也可以被命名为(E，Z，E，E)-3.7-二甲基-9-[2.6.6-三甲基-1-环己烯-1基]-2，4，6，8-壬四烯酸。
实例1洗剂(溶液)优选量9-顺-视黄酸 0.02-0.30克丙二醇 5.00-20.00克10.00克可可酸PEG-甘油酯*0.00-20.00克10.00克dl-α-生育酚0.001-0.50克0.02克软脂酸抗坏血酯酯0.01-0.20克 0.10克棓酸丙酯 0.001-0.02克 0.002克无水柠檬酸**0.00-0.20克0.01克异丙醇***40.00-90.00克 50.00克水 加 100.00克 100.00克(相应于毫升)*或别的表面活性剂**或别的络合剂例如EDTA***或别的醇例如乙醇实例2优选量9-顺-视黄酸0.02-0.30克丙二醇 5.00-20.00克 10.00克可可酸PEG-甘油酯*0.00-20.00克 10.00克dl-α-生育酚 0.001-0.50克 0.02克软脂酸维生素C酯0.01-0.20克 0.10克酸丙酯 0.001-0.02克 0.002克无水柠檬酸**0.00-0.20克 0.01克异丙醇***40.00-90.00克 50.00克HPMC****0.50-5.00克 3.00克保存剂*****适量 适量水 加100.00克 100.00克*或别的表面活性剂**或别的络合剂例如EDTA
***或别的醇例如乙醇****羟丙基甲基纤维素或别的聚合物，例如中性的Carbomer，甲基纤维素，羧甲基纤维素钠盐。
*****保存剂例如Paraben酯类(甲酯，乙酯，丙酯，丁酯)，山梨酸，苯甲酸。
实例3乳膏剂 优选量9-顺-视黄酸 0.02-0.30克甘油 0.00-10.00克5.00克Na2EDTA 0.001-0.50克0.03克甘油酯*5.00-20.00克10.00克鲸蜡醇0.50-5.00克 1.00克硬脂醇0.50-5.00克 1.00克甘油-硬脂酸酯 1.00-8.00克 4.00克Cetaereth**0.50-5.00克 2.00克dl-α-生育酚 0.001-0.50克0.02克保存剂***适量适量水 加100.00克100.00克*例如辛酸/癸酸/三甘油酯，辛酸/癸酸/亚油酸三甘油酯，天然的甘油酯和例如丙二醇的二辛酸酯/二癸酸酯以及蜡，诸如硬脂酸的硬脂醇酯，油酸的油醇酯，肉豆蔻酸丙酯。
**Ceteareth 5-30或别的乳化剂诸如聚山梨酸酯20-80，脂肪酸脱水山梨醇酯，PEG的脂肪酸酯。
***保存剂诸如Paraben酯(甲基，乙基，丙基，丁基酯)，山梨酸，苯甲酸。
实例4软明胶胶囊的填充物9-顺-视黄酸 5.00-50.00毫克油*1-3份蜡混合物**1-5份填充体积 1-6量滴*天然的植物油例如豆油，花生油和人造的甘油酯**天然和人造蜡的组成物或部分水合的油脂。
实例51.含有20毫克活性物质的硬明胶胶囊组成一个胶囊包含9-顺-视黄酸 20.0毫克明胶Bloom 3070.0毫克麦芽糖糊精MD05 108.0毫克dl-α-生育酚2.0毫克抗坏血酸钠 10.0毫克微晶纤维素 48.0毫克硬脂酸镁2.0毫克
(胶囊内容物重量) 260.0毫克把活性物质在明胶，麦芽糖糊精，dl-α-生育酚和抗坏血酸钠的溶液中进行湿磨。
把经过湿磨的悬浮液进行喷雾干燥。
把经过喷雾干燥的粉末与微晶纤维素和硬脂酸镁一起混合。
把每260毫克这种混合物填充到适当大小和颜色的硬明胶胶囊中。
实例62.含有20毫克活性物质的片剂片核9-顺-视黄酸20.0毫克无水乳糖 130.5毫克微晶纤维素 80.0毫克dl-α-生育酚 2.0毫克抗坏血酸钠 10.0毫克聚乙烯基吡咯烷酮K 30 5.0毫克硬脂酸镁 2.5毫克(片核重量) 250.0毫克包膜9-羟丙基甲基纤维素 3.5毫克聚乙二醇6000 0.8毫克滑石 1.3毫克氧化铁，黄色 0.8毫克二氧化钛 0.8毫克(膜的重量) 7.4毫克操作程序把9-顺-视黄酸与无水乳糖和微晶纤维素混合在一起。
混合物在水中与聚乙烯基吡咯烷酮，dl-α-生育酚以及抗坏血酸钠的溶液/分散液一起造粒。
粒状物与硬脂酸镁混合，然后压成250毫克重的片核。
片核用具有上面所述组成的溶液/悬浮液包膜。
实例7含有50毫克活性物质的香囊组成9-顺-视黄酸 50.0毫克细粉状乳糖 990.0毫克微晶纤维素 1400.0毫克羧甲基纤维素钠 14.0毫克dl-α-生育酚 5.0毫克抗坏血酸钠 20.0毫克聚乙烯基吡咯烷酮K 30 10.0毫克硬脂酸镁 10.0毫克香味剂 1.0毫克(香囊填充物重量) 2500.0毫克操作步骤
把9-顺-视黄酸与乳糖，微晶纤维素以及羧甲基纤维素钠混合在一起。
混合物在水中与聚乙烯基吡咯烷酮，dl-α-生育酚以及抗坏血酸钠的溶液/分散液一起造粒。
粒状物与硬脂酸镁以及香味剂混合在一起。
把它们填充到适当大小的香囊中。
权利要求
1. 9-顺-视黄酸及其可药用的盐类和可药用的可水解的酯类在制造治疗与光照性皮肤损伤有关病症的药物中的用途。
2. 9-顺-视黄酸及其可药用的盐类和可药用的可水解的酯类在制造减少皮脂分泌的药物中的用途。
3. 9-顺-视黄酸及其可药用的盐类和可药用的可水解的酯类在制造治疗牛皮癣的药物中的用途。
4.权利要求1-3中任一权利要求的用途，其中所说的药物适合于口服给药。
5.权利要求4的用途，其中所说药物的一个剂量单位含有1至50毫克的活性成份。
6.权利要求1-3中任一权利要求的用途，其中所说的药物适合于局部给药。
7.权利要求6的用途，其中所说的药物含有0.01％至0.15％重量百分数的活性成份。
8.按照权利要求6的用途，其中所说的药物含有0.02％至0.05％重量百分数的活性成份。
全文摘要
9－顺—视黄酸,它的盐和酯类可用来治疗恶性肿瘤和癌前期的损伤,光照性皮肤损伤,由于皮脂增生引起的疾病以及牛皮癣。
文档编号A61P35/00GK1256916SQ99126469
公开日2000年6月21日 申请日期1999年12月15日 优先权日1992年1月22日
发明者W·波拉格, J·F·格里波, A·莱文 申请人:霍夫曼-拉罗奇有限公司