一种江南卷柏提取物在制备治疗血栓性疾病药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种江南卷柏水或醇水提取物及该提取物用 于治疗血栓性疾病的新医药用途。
【背景技术】
[0002] 血栓性疾病是由血栓引起的血管腔狭窄与闭塞，使主要脏器发生缺血和梗塞而引 发机能障碍的各种疾病，属于心脑血管疾病。机体的正常止凝血，主要依赖于完整的血管壁 结构和功能、有效的血小板质量和数量、正常的血浆凝血因子活性。血栓形成的原因，简单 地说是随着人年龄的增长，体内纤溶系统功能逐渐降低，血液中凝血与抗凝血功能失去平 衡而出现凝血，即血栓。
[0003] 血栓性疾病的发病率、致死率和致残率非常高。它是严重危害人类健康的疾病之 一，也是世界各国医药学家研究的热点。目前临床上用于血栓预防和治疗的药物主要分为3 类，抗血小板的药物、抗凝血的药物和溶解血栓的药物。从天然产物中寻找新的活性成分， 并进而研制新的药物也是当今攻克临床顽疾的重要途径，本发明通过对江南卷柏乙醇提取 物进行活性研究以期为寻找新的抗血栓病的药物提供科学依据。
[0004] 江南卷柏（Selaginella moellendorfii Hieron.)，是一种多年生常绿草本植物， 为我国常用的中草药。其性平，味微甘，能清热利尿，活血消肿。现代药理研究表明其有广 泛的药理活性，例如抗肿瘤活性，抗菌活性，抗病毒及免疫调节活性，被用于治疗急性传染 性肝炎、胸胁腰部挫伤、全身浮肿等疾病。
[0005] 江南卷柏提取物是一种从江南卷柏的整体植物中经水或醇水提取得到的混合物。 目前国内、外对江南卷柏研究较多，但未有江南卷柏提取物在制备抗血栓性疾病药物方面 的研究报道。
【发明内容】
[0006] 为了满足临床需要，解决上述问题，本发明的目的是提供一种江南卷柏提取物及 其在治疗血栓性疾病药物中的应用；江南卷柏提取物可作为活性成份用于制备治疗血栓 性疾病的药物中，即可用于预防和/或治疗冠心病、心绞痛、脑血栓或肺栓塞等疾病的药物 中。
[0007] 为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：
[0008] 江南卷柏提取物，其为整株江南卷柏的水或醇水提取物。
[0009] 所述江南卷柏的水或醇水提取物具体制备过程为：
[0010] 1)将整株江南卷柏剪碎成长约3mm的碎片，加70%乙醇溶液浸泡9h，然后回流提 取3h，提取温度40-45°C，稍冷，用纱布过滤，得滤液，保留滤渣。再向滤渣中加入70%乙醇 溶液进行二次加热回流提取。
[0011] 所述每次回流提取时70%乙醇的用量为江南卷柏质量的4倍（V/W)。
[0012] 2)合并上述两次提取所得滤液，在50°C以下减压浓缩，得到具有抗血小板聚集和 抗血栓活性的江南卷柏提取物。
[0013] 3)所述滤液经减压浓缩后可采用浓缩干燥、冷冻干燥或喷雾干燥方法干燥为固 体，得到具有治疗血栓性疾病的提取物。
[0014] 所述提取物用于制备预防和/或治疗血栓性疾病药物、血栓性疾病的预防性保健 食品或食品添加剂。
[0015] 所述制备预防和/或治疗血栓性疾病的药物是指权利要求1其所制成的药物剂型 可为丸剂、散剂、片剂、膏剂、粉剂、针剂、水剂、颗粒剂或注射剂。
[0016] 所述预防和/或治疗血栓性疾病的药物是将所述植物提取物作为活性成分与药 物学上可接受的载体作为赋形剂相结合，按照常规方法制成口服给药的内服剂型或非口服 给药的注射剂；即可制备成为治疗冠心病、心绞痛、脑血栓或肺栓塞等疾病的丸剂、散剂、片 齐IJ、膏剂、粉剂、针剂、水剂、颗粒剂、注射剂等各种剂型的药物；保健食品形态可以是液体的 比如像清凉饮料等。
[0017] 本发明所述应用中，所述血栓性疾病是由血小板聚集引起的动脉血栓性疾病。
[0018] 药理药效实验证实，本发明所述江南卷柏提取物能有效的、剂量依赖性的抑制体 外血小板聚集，降低小鼠急性肺血栓死亡率，能制备为抗血栓药物，特别是抗血小板聚集引 起的动脉血栓药物。
[0019] 本发明具有如下优点：
[0020] 江南卷柏提取物作为天然中药材提取物的主要成分，其来源丰富、价格低廉，具有 高抗血栓活性等优点，可广泛用于动脉粥样硬化、心肌梗死等动脉心血管性疾病。
【附图说明】
[0021] 图1是本发明所述江南卷柏提取物体外抗血小板聚集实验结果的分析图。
【具体实施方式】
[0022] 以下通过实施例说明本发明的具体步骤，但不受实施例限制。
[0023] 在本发明中所使用的术语，除非另有说明，一般具有本领域普通技术人员通常理 解的含义。
[0024] 下面结合具体实施例并参照数据进一步详细描述本发明。应理解，这些实施例只 是为了举例说明本发明，而非以任何方式限制本发明的范围。
[0025] 在以下实施例中，未详细描述的各种过程和方法是本领域中公知的常规方法。
[0026] 实施例1江南卷柏提取物的制备 将整株江南卷柏（500g)剪碎成长约3mm的碎片，加8L的70 %乙醇溶液浸泡9h，然后 回流提取3h，提取温度40-45°C，稍冷，用纱布过滤，得滤液，保留滤渣。再向滤渣中加入8L 的70%乙醇溶液进行二次加热回流提取。合并上述两次提取所得滤液，在50°C以下减压浓 缩，冷冻干燥，得到江南卷柏提取物。
[0027] 实施例2体外活性实验：江南卷柏提取物（简称Psl)对血小板聚集的影响
[0028] 兔颈动脉取血，置于含有Iml的3. 8%枸橼酸钠的15ml离心管中（每管最终的体 积约为10ml，保证兔血和抗凝剂体积比为9 : I) ;1000r/min离心5min，取上层液即富血小 板血楽（platelet rich plasma，PRP)，余下血样以3000r/min离心10_15min，得到贫血小 板血楽（platelet poor plasma，PPP)。用 PPP 调整血小板浓度至（250 ?300) X IO9个/L ; 每次测试吸取300 μ I PPP置于血小板聚集仪测试区调零，再吸取270 μ I PRP置于预热槽 中，分别加入不同浓度梯度的受试样品和测试珠；37°C条件下，预热5min后置于测试区；最 后加入10 μ 1相关诱导剂如ADP (法国Hyphen Biomed公司，终浓度10 μ M)、凝血酶（法国 Hyphen Biomed 公司，终浓度 2U/ml)或 U46619(美国 Sigma-Aldrich 公司，终浓度 6μΜ); 在LBY-NJ4血小板凝集仪（北京普利生）上测定5min内血小板的最大聚集率（RPA);其中， 空白对照为生理盐水；实验重复三次，同时通过以下公式计算血小板聚集抑制率：
[0029] 血小板聚集抑制率=[(X-Y) /X] X 100%。X代表生理盐水组血小板最大聚集率； Y代表受试样品血小板最大聚集率。
[0030] 结果显示，随浓度增加，最大血小板聚集率逐渐减小，其抑制作用呈现浓度依赖性 的升高（如图1所示）。
[0031] 实施例3动物体内活性实验：江南卷柏提取物对小鼠急性肺血栓的影响
[0032] 1)实验动物：ICR小鼠（18_22g)60只，雌雄各半，购自江苏省南京市青龙山动物中 心。
[0033] 2)实验过程：将小鼠分为5组，每组10只，分别为阴性对照组（生理盐水代替样 品及诱导剂）；模型对照组（生理盐水代替样品）；阳性对照组（给予等体积的阿司匹林）； 低、中、高剂量样品组（18、55、165mg/kg)。给药体积为5ml/kg。给药30min后，尾静脉注 射ADP(450mg/kg)，使小鼠形成急性肺血栓栓塞，记录注射混合诱导剂后15min内各组死亡 小鼠的数量。计算出每组的死亡率并通过以下公式计算抗栓活性物急性肺血栓栓塞的保护 率。
[0034] 抗栓活性物质急性肺血栓栓塞的保护率=[1-(X/Y)] X100%。X代表各组死亡小 鼠的数量；Y代表各组的小鼠总数量。
[0035] 表1所示江南卷柏提取物对小鼠急性肺血栓的影响
[0036]
【主权项】
1. 江南卷柏提取物，其特征在于：其为整株江南卷柏的水或醇水提取物。
2. 根据权利要求1所述江南卷柏提取物，其特征在于：将整株江南卷柏剪碎成长约3mm 的碎片，加70%乙醇溶液浸泡9h，然后回流提取3h，回流温度40-45°C，稍冷，用纱布过滤， 得滤液，保留江南卷柏渣。再向江南卷柏渣中加入70%乙醇溶液进行二次加热回流提取。 合并上述两次提取所得滤液，在50°C以下减压浓缩，冷冻干燥，得到具有治疗血栓性疾病的 江南卷柏提取物。
3. 根据权利要求2所述江南卷柏提取物的制备方法，其特征在于：每次回流提取时 70%乙醇的用量为江南卷柏质量的4倍（V/W)。
4. 根据权利要求2所述江南卷柏提取物的制备方法，其特征在于：所述滤液经减压浓 缩回收溶剂后可采用浓缩干燥、冷冻干燥或喷雾干燥方法干燥为固体，得到具有治疗血栓 性疾病的植物提取物。
5. 江南卷柏提取物在制备治疗血栓性疾病药物中的应用，其特征在于：所述江南卷柏 提取物用于制备预防和/或治疗为目的的治疗血栓性疾病的药物、治疗血栓性疾病的预防 性保健食品或食品添加剂；所述江南卷柏提取物为权利要求1所述江南卷柏的水或醇水提 取物。
6. 根据权利要求5所述江南卷柏提取物在制备治疗血栓性疾病药物中的应用，其特征 在于：所述制备预防和/或治疗为目的的治疗血栓性疾病的药物是指权利要求1所述江南 卷柏提取物作为活性成分与药物学上可接受的载体作为赋形剂相结合，其所制成的药物剂 型可为丸剂、散剂、片剂、膏剂、粉剂、针剂、水剂、颗粒剂或注射剂。
【专利摘要】本发明涉及生物医药，具体地说是江南卷柏提取物及其在制备治疗血栓性疾病药物中的应用，所述的江南卷柏提取物为整株江南卷柏的乙醇提取物，制备方法为：将整株江南卷柏剪碎成约3mm长加70％乙醇溶液浸泡9h，然后回流提取3h，提取温度40-45℃，稍冷，用纱布过滤，得滤液，保留卷柏渣。再向卷柏渣中加入70％乙醇溶液进行二次加热回流提取。合并上述两次提取所得滤液，在50℃以下减压浓缩并回收乙醇至无醇味，冷冻干燥，得江南卷柏提取物。该提取物具有抗血栓和抗血小板聚集活性，可作为治疗血栓性疾病的候选药物进行开发。
【IPC分类】A23L1-30, A61P9-10, A23L1-29, A61K36-11, A61P7-02
【公开号】CN104546953
【申请号】CN201510016292
【发明人】孔毅, 苏杏丽, 苏雯
【申请人】中国药科大学
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2015年1月8日