防治水产动物细菌性疾病的中西复合药物及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及防治水产养殖动物细菌性疾病药物。
【背景技术】
[0002] 随着水产养殖地域的扩展、养殖规模的扩大、集约化水平的提高、养殖环境的变 化、养殖种苗因过于追求快速生长而抗病力降低、抗生素滥用导致病原耐药提高等，水产养 殖病害日益严峻，其中细菌性疾病是最常见也是危害最严重的水产疾病，具有病原种类多、 流行范围广、死亡率高等特点，对水产养殖业造成了严重的经济损失。
[0003] 近年来，由无乳链球菌和海豚链球菌等病原引起的链球菌病对水产养殖业造成了 严重危害，该病发病速度快、流行范围广、死亡率高，广泛危害罗非鱼、虹鳟、斑点叉尾鮰、牙 鲆和多耙等淡海水养殖鱼类，特别对罗非鱼等热带养殖鱼类危害尤为严重。2009年我国广 东、海南、福建和广西等地养殖罗非鱼链球菌发病率为20%~50%，死亡率达50%~70%; 2011年以来，罗非鱼链球菌病不仅发病时间提前，而且危害范围扩大，逐渐向原来不发病的 小规格鱼种和鱼苗蔓延，损失极为惨重。由于许多水产养殖人员缺乏科学用药知识，在养殖 生产中为防治该病暴发常常滥用药物，导致病原耐药性增强和防治难度增加。此外，由于 链球菌存在多种耐药和免疫逃避途径，进一步加大了该病的防治难度，在耐药途径方面，仅 针对阳离子抗菌肽的耐药途径就存在改变细胞表面电荷、青霉素结合蛋白调节、菌毛调节 等途径；在免疫逃避方面，研究较多的有荚膜多糖抗原、Alp家族、0蛋白、C5a肽酶、Lmb、 FbsA、Sip等介导的途径，其中荚膜多糖抗原含有末端唾液酸的成分，是抗吞噬细胞功能的 重要因子，0蛋白具有与人IgA和因子H结合能力，有助于免疫逃避。水产养殖中抗生素等 违禁药物的滥用还使罗非鱼等养殖产品药物残留超标，严重影响产品品质和消费者安全。 中西复合药物是将中草药与化学药品进行合理配伍，以临床疗效为依据，经科学评价后制 备的复方制剂。中西复合药物可集化学药高效快速治标的优势和中草药多靶位发挥功效的 优势，既克服了因大量使用抗生素而易产生耐药性、造成环境污染、药物残留等缺点，也解 决了中草药作用温和、起效慢、用量大等不足，通过优势互补和协同作用，不仅显著提高了 疗效和缩短疗程，还有效避免了耐药性和药物残留等缺陷，使中西药配伍在临床上的使用 越来越普遍。
[0004] 本发明是以水产链球菌等病原为研究对象，通过研究抗生素与中草药配伍对抗菌 效果的影响和它们之间的交互作用，筛选具有协同作用的抗生素和中草药。采用高效液相 色谱-质谱-质谱（HPLC-MS-MS)分析技术研究应用中西复合药物后抗生素在罗非鱼体内 的药代动力学规律，制定中西药复方制剂的安全高效配伍使用方案，减少抗生素的使用量， 降低链球菌的耐药性和避免抗生素的药物残留，促进水产养殖业的健康和可持续发展。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供了高效、来源广泛、不易引起病原菌耐药的中西复合药物，同 时建立其科学、合理的使用方法；按此使用方法，这些中西复合药物可对水产养殖动物链球 菌等细菌性疾病进行安全高效防治。
[0006] 为了实现上述目的，本发明的技术方案为：提供一种防治水产动物细菌性疾病的 中西复合药物，所述中西复方药物按重量份数由鸡血藤丙酮提取浸膏55~120份和硫酸链 霉素1~3份组成；所述鸡血藤丙酮提取浸膏制备方法如下步骤：
[0007] A、将鸡血藤50°C烘干至恒重，粉碎，过40目筛；
[0008] B、按液料比为10 :l(ml :g)加入丙酮，50°C提取1~3h，过滤；
[0009] C、在步骤B的滤渣中按液料比为10 :1加入丙酮，50°C提取1~3h，过滤；
[0010] D、合并步骤B和步骤C的滤液，减压蒸馏将丙酮全部回收，获取鸡血藤丙酮提取浸 膏；
[0011] 所述硫酸链霉素符合《中国兽药典》2010年版标准的市售；
[0012] 所述鸡血藤符合《中国兽药典》2010年版标准的市售；
[0013] 所述鸡血藤丙酮提取浸膏用量是按其抑菌活性为0. 62IU 土霉素/mg计算，根据抑 菌活性调整其用量。本发明中所述的鸡血藤丙酮提取浸膏均按此法进行应用。
[0014] 本发明中西复合药物的应用方法：采用拌料投喂或药浴的使用方法。拌料投喂方 法：将鸡血藤丙酮提取浸膏85份和硫酸链霉素2份融入适量的水，然后喷洒拌入饲料，使饲 料中鸡血藤丙酮提取浸膏浓度为3. 43g/Kg、硫酸链霉素浓度为0. 08g/Kg，按鱼体重1~2% 投喂，早晚各投喂一次，连续投喂7d，休药期要为15d以上；药浴方法：用含鸡血藤丙酮提取 浸膏3. 43g/L和硫酸链霉素0. 08g/L药液浸泡病鱼30min，每天浸泡两次，连续7d，休药期 为15d以上。
[0015] 本发明的中西复合药物具有如下优点和有益效果：采用微孔板法进行初筛、琼脂 扩散法进行复筛敏感的中草药和抗生素，采用化学计量学方法筛选具有协同作用的中草药 和抗生素，避免因沿用人用或兽用中西药成方而不适于水产养殖动物的情况。以水产链球 菌为研究对象，进行筛选和组合，通过体外抑菌实验和鱼体实验，本发明的中西复合药物可 有效防治水产养殖动物细菌性疾病。尤其是对于罗非鱼链球菌病，用于预防，保护率可达到 100%，而用于治疗，治愈率可达50%以上。采用中西药配伍使用技术，通过中西药互补优势 和协同抗菌，降低抗生素类药物的使用剂量，降低链球菌耐药性、缩短疗程和休药期，解决 水产养殖动物细菌性疾病的危害和药物残留等制约水产养殖业快速发展的瓶颈问题。提高 养殖成活率、产品品质和养殖效益，促进水产养殖业的健康快速发展。
【具体实施方式】
[0016] 实施例一
[0017] 鸡血藤丙酮提取浸膏116份，硫酸链霉素1份，制备成鸡血藤丙酮提取浸膏 23. 20mg/ml+硫酸链霉素0? 20mg/ml的中西复合药液；
[0018] 实施例二
[0019] 鸡血藤丙酮提取浸膏116份，硫酸链霉素3份，制备成鸡血藤丙酮提取浸膏 23. 20mg/ml+硫酸链霉素0. 60mg/ml的中西复合药液；
[0020] 实施例三
[0021]鸡血藤丙酮提取浸膏69. 5份，硫酸链霉素2份，制备成鸡血藤丙酮提取浸膏 13. 92mg/ml+硫酸链霉素0? 40mg/ml的中西复合药液；
[0022] 实施例四
[0023] 鸡血藤丙酮提取浸膏81. 25份，硫酸链霉素1份，制备成鸡血藤丙酮提取浸膏 32. 48mg/ml+硫酸链霉素0. 40mg/ml的中西复合药液；
[0024] 实施例五
[0025] 鸡血藤丙酮提取浸膏56份，硫酸链霉素1份，制备成鸡血藤丙酮提取浸膏 27. 84mg/ml+硫酸链霉素0. 50mg/ml的中西复合药液；
[0026] 实施例六
[0027] 鸡血藤丙酮提取浸膏62份，硫酸链霉素1份，制备成鸡血藤丙酮提取浸膏 18. 56mg/ml+硫酸链霉素0. 30mg/ml的中西复合药液；
[0028] 实施例七
[0029] 鸡血藤丙酮提取浸膏85份，硫酸链霉素2份，制备成鸡血藤丙酮提取浸膏 20. 23mg/ml+硫酸链霉素0? 48mg/ml的中西复合药液；
[0030]试验：
[0031] 1、抑菌效果：
[0032] (1)以0. 03mg/ml的土霉素作为阳性对照，采用琼脂扩散测定中西复合药物的对 罗非鱼无乳链球菌抑制活性，结果如表1。
[0033] 表1各中西复合药液的抑菌效果
[0034]
【主权项】
1. 一种防治水产动物细菌性疾病的中西复合药物，其特征在于所述中西复方药物按重 量份数由鸡血藤丙酮提取浸膏55~120份和硫酸链霉素1~3份组成；所述鸡血藤丙酮提 取浸膏制备方法如下步骤： A、 将鸡血藤50°C烘干至恒重，粉碎，过40目筛； B、 按液料比为10 :1加入丙酮，50°C提取1~3h，过滤； C、 在步骤B的滤渣中按液料比为10 :1加入丙酮，50°C提取1~3h，过滤； D、 合并步骤B和步骤C的滤液，减压蒸馏将丙酮全部回收，获取鸡血藤丙酮提取浸膏； 所述鸡血藤丙酮提取浸膏用量是按其抑菌活性为0. 62IU 土霉素/mg计算，根据抑菌活 性调整其用量。
2. 如权利要求1所述的防治水产动物细菌性疾病的中西复合药物，其特征在于：所述 的中西复合药物的优选重量份数为：鸡血藤丙酮提取浸膏85份，抑菌活性为0. 62IU土霉素 /mg,硫酸链霉素2份。
3. 如权利要求1所述的防治水产动物细菌性疾病的中西复合药物，其特征在于：将中 西复合药物溶于水后拌入饲料投喂或药浴方式使用。
【专利摘要】本发明公开了一种防治水产动物细菌性疾病的中西复合药物，所述中西复方药物按重量份数由鸡血藤丙酮提取浸膏55～120份和硫酸链霉素1～3份组成；本发明中西复合药物采用拌料投喂或药浴的使用方法；本发明采用中西药配伍使用技术，通过中西药互补优势和协同抗菌，降低抗生素类药物的使用剂量，降低链球菌耐药性、缩短疗程和休药期，解决水产养殖动物细菌性疾病的危害和药物残留等制约水产养殖业快速发展的瓶颈问题。提高养殖成活率、产品品质和养殖效益，促进水产养殖业的健康快速发展。
【IPC分类】A61K31-7036, A61P31-04, A61K36-486
【公开号】CN104622948
【申请号】CN201510070985
【发明人】郭伟良, 周永灿, 王文慧, 胡文婷, 吴学贵, 谢珍玉, 王世锋
【申请人】海南大学
【公开日】2015年5月20日
【申请日】2015年2月11日