从罗布麻叶中提取总黄酮的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于植物有效成分分离、提取技术领域，尤其涉及一种从罗布麻叶中提取总黄酮的方法。
【背景技术】
[0002]罗布麻，别名红麻、茶叶花、红柳子等，直立半灌木，高1.5-3米，生长于河岸、山沟、山坡的砂质地，主要分布在中国淮河、秦岭、昆仑上以北各省。罗布麻的干燥叶可入药，具有平肝止痛、养血调经、敛阴止汗的功能。
[0003]黄酮类化合物是罗布麻叶中的一类重要活性成分，具有止咳、祛痰、平喘、抗菌、护肝、解肝毒的功效，可用于治疗急、慢性肝炎，肝硬化。黄铜类化合物常用的提取分离工艺是:醇提一水沉一乙酸乙酯提取法，该方法提取得到的黄酮类化合物不仅得率低，而且含有的杂质多，使得异槲皮素、槲皮素、山奈等黄酮类化合物成分含量太低。
【发明内容】
[0004]本发明解决的技术问题是提供一种从罗布麻叶中提取总黄酮的方法，该方法制得的总黄酮不仅得率高，而且异槲皮素、槲皮素、山奈等总黄酮类成分含量高。
[0005]为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是:
一种从罗布麻叶中提取总黄酮的方法，该方法包括以下步骤:
A、将罗布麻叶在常温下风干，去杂，杀青，粉碎，得到罗布麻叶粉；
B、将A步骤制得的罗布麻叶粉放入提取容器中，再向所述提取容器中加入2?3倍所述罗布麻叶粉体积的75%乙醇溶液，并调节其pH值至3?6，然后加热至65°C?80°C，提取0.5小时?I小时，重复提取I?3次，合并提取液并浓缩至相对密度为1.0?1.21，得到浸膏；
C、将B步骤制得的浸膏溶于2?3倍所述浸膏体积的蒸馏水中，过滤，收集滤液；将所述滤液通过聚酰胺柱层析，然后依次进行以下三个阶段的洗脱:
1)、用蒸馏水洗脱，洗脱至所述聚酰胺柱的流出液无色、澄清、透明；
2)、用10%?20%乙醇溶液洗脱I?2个柱体积，去除洗脱液；
3)、用60%?70%乙醇溶液洗脱，洗脱至所述聚酰胺柱的乙醇洗脱液无色、澄清、透明，收集所述乙醇洗脱液，浓缩至相对密度为1.0?1.21，然后真空干燥，即得。
[0006]由于采用上述技术方案，本发明得到的有益效果是:
本发明制得的罗布麻叶总黄酮得率高，而且异槲皮素、槲皮素、山奈等总黄酮类成分含量高。
【具体实施方式】
[0007]以下结合具体实施例对本发明作进一步详述，而本发明的保护范围并非仅仅局限于以下实施例。
[0008]实施例1
本从罗布麻叶中提取总黄酮的方法包括以下步骤:
A、将罗布麻叶在常温下风干，去杂，杀青，粉碎，得到罗布麻叶粉；
B、将A步骤制得的罗布麻叶粉放入提取容器中，再向所述提取容器中加入2倍所述罗布麻叶粉体积的75%乙醇溶液，并调节其pH值至3，然后加热至65°C，提取0.5小时，重复提取I次，合并提取液并浓缩至相对密度为1.0，得到浸膏；
C、将B步骤制得的浸膏溶于2倍所述浸膏体积的蒸馏水中，过滤，收集滤液；将所述滤液通过聚酰胺柱层析，然后依次进行以下三个阶段的洗脱:
1)、用蒸馏水洗脱，洗脱至所述聚酰胺柱的流出液无色、澄清、透明；
2)、用20%乙醇溶液洗脱2个柱体积，去除洗脱液；
3)、用70%乙醇溶液洗脱，洗脱至所述聚酰胺柱的乙醇洗脱液无色、澄清、透明，收集所述乙醇洗脱液，浓缩至相对密度为1.0，然后真空干燥，即得。
[0009]本实施例，罗布麻叶总黄酮的得率为6.0%，异槲皮素、槲皮素、山奈等总黄酮类成分含量为80%。
[0010]实施例2
本从罗布麻叶中提取总黄酮的方法包括以下步骤:
A、将罗布麻叶在常温下风干，去杂，杀青，粉碎，得到罗布麻叶粉；
B、将A步骤制得的罗布麻叶粉放入提取容器中，再向所述提取容器中加入3倍所述罗布麻叶粉体积的75%乙醇溶液，并调节其pH值至6，然后加热至80°C，提取I小时，重复提取3次，合并提取液并浓缩至相对密度为1.21，得到浸膏；
C、将B步骤制得的浸膏溶于3倍所述浸膏体积的蒸馏水中，过滤，收集滤液；将所述滤液通过聚酰胺柱层析，然后依次进行以下三个阶段的洗脱:
1)、用蒸馏水洗脱，洗脱至所述聚酰胺柱的流出液无色、澄清、透明；
2)、用10%乙醇溶液洗脱I个柱体积,去除洗脱液；
3)、用60%乙醇溶液洗脱，洗脱至所述聚酰胺柱的乙醇洗脱液无色、澄清、透明，收集所述乙醇洗脱液，浓缩至相对密度为1.21，然后真空干燥，即得。
[0011]本实施例，罗布麻叶总黄酮的得率为6.5%，异槲皮素、槲皮素、山奈等总黄酮类成分含量为79%。
[0012]实施例3
本从罗布麻叶中提取总黄酮的方法包括以下步骤:
A、将罗布麻叶在常温下风干，去杂，杀青，粉碎，得到罗布麻叶粉；
B、将A步骤制得的罗布麻叶粉放入提取容器中，再向所述提取容器中加入2.5倍所述罗布麻叶粉体积的75%乙醇溶液，并调节其pH值至5，然后加热至70°C，提取0.5小时，重复提取2次，合并提取液并浓缩至相对密度为1.10，得到浸膏；
C、将B步骤制得的浸膏溶于2.5倍所述浸膏体积的蒸馏水中，过滤，收集滤液；将所述滤液通过聚酰胺柱层析，然后依次进行以下三个阶段的洗脱:
1)、用蒸馏水洗脱，洗脱至所述聚酰胺柱的流出液无色、澄清、透明；
2)、用15%乙醇溶液洗脱I个柱体积,去除洗脱液；
3)、用65%乙醇溶液洗脱，洗脱至所述聚酰胺柱的乙醇洗脱液无色、澄清、透明，收集所述乙醇洗脱液，浓缩至相对密度为1.10，然后真空干燥，即得。
[0013]本实施例，罗布麻叶总黄酮的得率为7.0%，异槲皮素、槲皮素、山奈等总黄酮类成分含量为82%。
【主权项】
1.一种从罗布麻叶中提取总黄酮的方法，其特征在于包括以下步骤: A、将罗布麻叶在常温下风干，去杂，杀青，粉碎，得到罗布麻叶粉； B、将A步骤制得的罗布麻叶粉放入提取容器中，再向所述提取容器中加入2?3倍所述罗布麻叶粉体积的75%乙醇溶液，并调节其pH值至3?6，然后加热至65°C?80°C，提取0.5小时?I小时，重复提取I?3次，合并提取液并浓缩至相对密度为1.0?1.21，得到浸膏； C、将B步骤制得的浸膏溶于2?3倍所述浸膏体积的蒸馏水中，过滤，收集滤液；将所述滤液通过聚酰胺柱层析，然后依次进行以下三个阶段的洗脱: .1)、用蒸馏水洗脱，洗脱至所述聚酰胺柱的流出液无色、澄清、透明； . 2)、用10%?20%乙醇溶液洗脱I?2个柱体积，去除洗脱液； . 3)、用60%?70%乙醇溶液洗脱，洗脱至所述聚酰胺柱的乙醇洗脱液无色、澄清、透明，收集所述乙醇洗脱液，浓缩至相对密度为1.0?1.21，然后真空干燥，即得。
【专利摘要】本发明公开了一种从罗布麻叶中提取总黄酮的方法，属于植物有效成分分离、提取技术领域。本发明先将罗布麻叶风干，去杂，杀青，粉碎，得到罗布麻叶粉，然后放入75乙醇溶液中，调节pH值至3～6，加热提取，合并提取液并浓缩得到浸膏；将所述浸膏溶于蒸馏水中，然后通过聚酰胺柱层析，再依次用蒸馏水，10%～20%乙醇溶液和60%～70%乙醇溶液分段洗脱，收集60%～70%乙醇溶液的洗脱液，浓缩，真空干燥，即得。本发明提供一种从罗布麻叶中提取总黄酮的方法，该方法制得的总黄酮不仅得率高，而且异槲皮素、槲皮素、山奈等总黄酮类成分含量高。
【IPC分类】A61K36-24, A61K127-00
【公开号】CN104644707
【申请号】CN201410292042
【发明人】钟延华
【申请人】钟延华
【公开日】2015年5月27日
【申请日】2014年6月26日