球虫疫苗助悬剂的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物医药领域，尤其是一种球虫疫苗助悬剂。
【背景技术】
[0002] 鸡球虫病是一种原生动物寄生虫病，由一种或多种艾美尔球虫引起的急性流行性 寄生虫病。艾美尔球虫可以在鸡的肠道各部位寄生，引起肠道炎症、出血乃至鸡的死亡，给 养鸡业造成了巨大的经济损失。
[0003] 长期以来，化学防治鸡球虫病的方法曾在控制本病的流行方面起过重要作用，但 目前所面临的问题越来越多，诸如球虫耐药性问题、药物残留问题、药物使用效果下降、费 用增加问题、生态问题、胁迫病原突变问题等。采用疫苗预防鸡球虫病的方法不仅能够解决 球虫的耐药性问题，而且能够减少药物残留，改善鸡的肉蛋品质。
[0004] 随着球虫活疫苗的不断商品化，活疫苗免疫途径也得到了广泛的研究。目前免疫 接种方法主要有喷雾、喷料、拌料、染料、滴口、口服凝胶、饮水等。上述方法无法彻底解决免 疫均匀性和副反应的问题，若每只鸡免疫接种剂量不同，机体产生的免疫力高低不一，当鸡 从垫料中吃到所免疫球虫疫苗的后代卵囊时，那些免疫力较低并摄入后代卵囊较多的鸡容 易出现疫苗免疫的副反应，出现肠道炎症、出血甚至死亡的现象，影响养鸡生产和球虫疫苗 的使用。
[0005] 饮水免疫操作简单，对鸡群应激小，但卵囊很快就会沉入饮水器底部导致疫苗不 能发挥免疫作用，同时鸡群免疫接种剂量不均一，造成疫苗免疫副反应，因此免疫时必须加 入一种能使卵囊漂浮在饮水中的助悬剂。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的在于克服已有技术的一些缺点，搜索一种可以快速溶解且助悬效果 持久的球虫病疫苗助悬剂，达到免疫前无须先行停水而免疫接种剂量均匀的效果，以解决 球虫病疫苗免疫接种方法的问题。
[0007] 本发明是通过以下技术方案实现的：
[0008] -种球虫疫苗助悬剂，该助悬剂是由抗结剂、山梨醇、纤维素类衍生物、环糊精和 多糖所构成，其组分含量（以助悬剂重量为100%计）：抗结剂〇. 2%_2%，山梨醇5%_20%，纤维 素类衍生物5%_30%，环糊精10%_30%，其余为多糖。
[0009] 所述的抗结剂是一种分散剂，防止助悬剂在保存期间吸潮结块变质。
[0010] 所述的山梨醇是山梨糖和己醛糖的还原产物，为白色吸湿性粉末或晶状粉末、片 状或颗粒，无臭、无毒、易吸潮、清凉甜味，易溶于水，微溶于乙醇和乙酸，广泛存在于藻类和 高等植物中。山梨醇具有增稠、分散、稳定、保水等性能，可以分散媒介的粘度，吸附于微粒 的表面增加其亲水性，有利于助悬剂不溶于水的成分分散并增强助悬剂的悬浮能力，增强 助悬剂稳定性。
[0011] 所述的纤维素类衍生物是是以纤维素高分子中的羟基与化学试剂发生酯化或醚 化反应后的生成物。所述纤维素类衍生物主要包括甲基纤维素、羧甲基纤维素、羟丙基纤 维素、羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素等，溶于水可以形成稳定的胶体溶液，具有悬浮、增 稠、乳化、分散、粘合、保护胶体等作用，可以作为稳定剂、分散剂、增稠剂、乳化剂等。
[0012] 所述的环糊精（Cyclodextrin，简称⑶）是直链淀粉在由芽孢杆菌产生的环糊精 葡萄糖基转移酶作用下生成的一系列环状低聚糖的总称。由于环糊精的外缘亲水而内腔疏 水，因而它能够象酶一样提供一个疏水的结合部位，可以包容纤维素类衍生物以及多糖，进 而使其快速溶解，是一种良好的助溶剂。
[0013] 所述的多糖是由糖苷键结合的糖链，至少要超过10个以上的单糖组成的聚合糖 高分子碳水化合物。所述多糖主要包括果胶、海藻酸钠、琼脂、角叉菜胶、树胶、阿拉伯胶、白 芨胶、脱乙酰甲壳素等。多糖在水中可以形成稳定的胶体溶液，具有悬浮、增稠、分散等作 用，可以作为分散剂与乳化剂使用。除此之外，多糖可以增强动物机体免疫系统，起到免疫 增效作用，同时可以调节动物肠胃功能，促进机体生长。球虫病疫苗免疫接种后会对鸡肠道 造成轻微的损伤，短期内生长减缓，在助悬剂中加入适量多糖可以适当降低损伤程度。
[0014] 本发明将上述五种物质按一定比例组合而成的助悬剂,能使球虫病疫苗的卵囊均 匀悬浮于饮水中保持10个小时以上不沉降。疫苗接种前无须先行停水，既省事又减少应 激，避免出现抢水现象，同时因饮水时间的延长使其接种更加均匀，为球虫病疫苗的推广提 供了简便可行的方案。
【具体实施方式】
[0015] 本发明通过以下实施例进一步详述。需要说明的是：下述实施例是说明性的，不是 限定性的，不能以下述实施例来限定本发明的保护范围。
[0016] 本发明的助悬剂由0.8%抗结剂，15%山梨醇，15%纤维素类衍生物，20%环糊精， 49. 2%多糖混合构成（以助悬剂重量为100%计)。
[0017] 下面用实例进一步说明本发明的效果：
[0018] 例1球虫卵囊沉降静态测定试验
[0019] 1材料与方法：
[0020] I. 1球虫卵囊混合液：含柔嫩艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫和堆型艾美耳球虫3 个种，以1:1:1比例混匀，用2. 5%重铬酸钾溶液配成100万个卵囊/ ml的球虫病疫苗液。
[0021] 1. 2试验分组与设计：
[0022] 第一组：将球虫卵囊混合液充分摇匀，吸取3ml加入到1000 ml饮水中，从不同方向 (顺时针、逆时针、上下）反复搅拌均匀；称取本发明助悬剂l〇g，缓缓加入上述球虫卵囊液 中，边加边从不同方向（顺时针、逆时针、上下）反复搅拌，直至助悬剂完全溶解，球虫卵囊 液呈糊状。
[0023] 第二组：将球虫卵囊混合液充分摇匀，吸取3ml加入到1000 ml饮水中，从不同方向 (顺时针、逆时针、上下）反复搅拌均匀；按使用说明称取某公司出售的球虫病疫苗助悬剂 l〇g，缓缓加入上述球虫卵囊液中，边加边从不同方向（顺时针、逆时针、上下）反复搅拌，直 至助悬剂完全溶解，球虫卵囊液呈糊状。
[0024] 三组（空白对照组）：将球虫卵囊混合液充分摇匀，吸取3ml加入到1000 ml饮水 中，从不同方向（顺时针、逆时针、上下）反复搅拌均匀。
[0025] 分别于他、111、211、411、611、811、1011用移液枪吸取每组上层液体15以1，置于血球计 数板中进行卵囊计数，每组每次从6个取样点吸液计数，取其平均值。
[0026] 2 结果
[0027] 本发明助悬剂能使球虫卵囊均匀地悬浮在饮水中并可维持IOh以上而不沉降；而 某公司出售的球虫病疫苗助悬剂到IOh时卵囊已下降了 35. 4%。
[0028] 具体数据见表1 :
[0029] 表1球虫病疫苗助悬剂静态测定试验结果
【主权项】
1. 一种球虫疫苗助悬剂，其特征在于：该助悬剂是由抗结剂、山梨醇、纤维素类衍生 物、环糊精和多糖所构成，其组分含量（以助悬剂重量为100%计）：抗结剂〇. 2%-2%，山梨醇 5%-20%，纤维素类衍生物5%-30%，环糊精10%-30%，其余为多糖。
2. 如权利要求1所述的球虫疫苗助悬剂，其特征在于：所述的山梨醇为食品级、药物级 山梨醇。
3. 如权利要求1所述的球虫疫苗助悬剂，其特征在于：所述的环糊精为食品级、药物级 环糊精。
4. 根据权利要求1所述的球虫疫苗助悬剂，其特征在于：所述的多糖为果胶、海藻酸 钠、琼脂、角叉菜胶、树胶、阿拉伯胶、白芨胶、脱乙酰甲壳素一种或几种的组合。
5. 根据权利要求1所述的球虫疫苗助悬剂，其特征在于：所述的纤维素类衍生物为甲 基纤维素、羧甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素一种或几种的 组合。
6. 如权利要求4所述的球虫疫苗助悬剂，其特征在于：所述的多糖为食品级、药物级多 糖。
7. 如权利要求5所述的球虫疫苗助悬剂，其特征在于：所述的纤维素类衍生物为食品 级、药物级纤维素类衍生物。
【专利摘要】本发明涉及一种球虫疫苗助悬剂，其特征在于，该助悬剂是由抗结剂、山梨醇、纤维素类衍生物、环糊精和多糖所构成，其组分含量（以助悬剂重量为100%计）：抗结剂0.2%-2%，山梨醇5%-20%，纤维素类衍生物5%-30%，环糊精10%-30%，其余为多糖。本发明的有益效果是：1、能使球虫卵囊均匀的悬浮在饮水中并维持10小时不沉降，提高鸡饮入疫苗卵囊数量的均匀度；2、疫苗接种前无须先行停水，既省事又减少应激，避免出现抢水现象；3、可以调节鸡胃肠环境，促进生长；4、具有免疫增效作用，增强免疫效果；5、降低疫苗的副反应。
【IPC分类】A61K47-38, A61K47-26, A61K47-40, A61K47-36
【公开号】CN104645337
【申请号】CN201310588929
【发明人】陈庆忠, 安同伟, 高华义
【申请人】天津嘉瑞生物科技有限公司
【公开日】2015年5月27日
【申请日】2013年11月20日