一种半乳糖胺和聚多巴胺修饰的肝癌靶向纳米粒及制备方法与应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种半乳糖胺和聚多巴胺修饰的肝癌靶向纳米粒及其制备方法与应 用。
【背景技术】
[0002] 肝脏是人体最为关键的器官之一，参与体内消化、排泄、解毒和免疫调节等多个过 程，因此肝脏也是人体最易受损的器官之一。然而，肝癌等疾病导致了大量的死亡，严重威 胁人类的健康。肝癌治疗的方法迄今已经发展了有十几种之多，例如：化学治疗、放射疗法、 外科手术、生物疗法、基因治疗、光动力学治疗、癌症疫苗等。发展比较早且使用广泛的治疗 方法是化学治疗和放射疗法，其主要缺点在于：治疗手段对癌细胞的靶向性不高，不能有效 区分癌细胞和正常细胞，特别是化疗及一些蛋白质药物具有很高的细胞毒性，在治疗的同 时也对正常机体器官造成很大损伤。按照传统的给药方式，小分子药物在体内随机分布，真 正蓄积到病患部位进而发挥药效的只是少部分药物，多数都被代谢排出体外，生物利用度 很低。
[0003] 靶向性药纳米物传递是一种既可以提高治疗靶向性又比较容易实现的治疗途径， 主要依靠药物分子通过靶向特异性到达病变部位，杀灭致病病毒、修复受损组织或消除疾 病症状。概括而言，靶向性药物输送体系具有如下主要优点：高度靶向性，减少毒副作用； 增加非水溶性药物在体内的分散量，稳定药物在体内的存在；浓集药物并能够调节药物的 释放速度；改变药物给药途径，如将需要静脉注射的药物制成方便的口服药物。目前关于体 内靶向功能的药物载体成功用于临床报道极其少见，导致靶向药物的临床应用进展缓慢。
[0004] 聚合物纳米粒子（NPs)由于其靶向缓释、控释的特点，被公认为是一种优良的抗 癌药物载体系统。聚乳酸（PLA)、聚乙醇酸（PGA)、聚乳酸-乙醇酸（PLGA)、聚己内酯（PCL)、 聚乙二醇-聚（乳酸-乙醇酸）（PEG-PLGA)等生物可降解的药物载体，具有良好的生物相 容性、生物可降解性及抗张强度，在人体无毒，无积累，因此它在生物医学领域具有很诱人 的应用前景和极高的商业价值，广泛应用于负载抗癌药的纳米药物。但是这种纳米药物不 具有主动靶向的功能。肝癌靶向治疗已经成为癌症纳米技术领域非常重要的研宄方向。与 正常细胞相比，肿瘤细胞表面常会出现一些受体的表达异常，这为靶向治疗提供了基础。
[0005] 肝肿瘤细胞表面存在特异的去唾液酸糖蛋白受体（Asialoglycoprotein Receptor，ASGPR)，可专一 ,性识别端基含有半乳糖的载体（如半乳糖胺），并与之特异性结 合，通过细胞内吞作用进入肝癌细胞并释放药物。靶向配体的导入要求纳米粒子表面有可 链接的反应官能团，在纳米药物表面修饰一层聚多巴胺（polydopamine，pD)被认为是一种 在纳米药物表面引入化学反应官能团较简单的方法，多巴胺的分子结构如下：
[0006]
【主权项】
1. 一种半乳糖胺和聚多巴胺修饰的肝癌靶向纳米粒的制备方法，其特征是包括如下步 骤： (1) 按比例，称取IOOmg聚合物和2-20mg的疏水性药物，溶于8-10ml有机溶剂中，在搅 拌条件下，滴加到100mL的0. 3-10mg/L的聚乙二醇1000维生素 E琥珀酸酯水溶液中，搅拌 6~24小时，减压挥发除去有机溶剂，10000~20000rpm离心15-30min，弃上清液，用去离 子水洗涤，沉淀为载疏水性药物的聚合物初始纳米粒； (2) 按lmg-lOmg: ImL的比例将所述初始纳米粒重悬于10mM，pH = 8. 5的Tris缓冲液 中，加入多巴胺盐酸盐使浓度为0. 2~1.0 mg/mL，反应3~12小时，10000~20000rpm离 心15-30min，收集沉淀，用去离子水洗绦，获得载疏水性药物的被聚多巴胺包裹的纳米粒； (3) 按lmg-lOmg: ImL的比例将载疏水性药物的被聚多巴胺包裹的纳米粒分散在pH为 8. 5~12的弱碱水溶液中，加入肝癌革El向配体半乳糖胺使浓度为0. 1-lOmg/mL，反应1~3 小时，10000~20000rpm离心15-30min，收集纳米粒子，用去离子水洗涤，冷冻干燥得半乳 糖胺和聚多巴胺修饰的肝癌靶向纳米粒。
2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述聚合物为聚乳酸、聚乙醇酸、聚乳 酸-乙醇酸、聚己内酯、聚乙二醇-聚（乳酸-乙醇酸）或聚乙二醇1000维生素 E琥珀酸 酯-聚乳酸。
3. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述疏水性药物为紫杉醇、多烯紫杉醇、阿 霉素、香豆素-6、顺铂、5-氟尿嘧啶、喜树碱、布洛芬或10-羟基喜树碱。
4. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述有机溶剂为丙酮、二氧六环、二甲基亚 砜、二氯甲烷、乙腈、四氢呋喃或N，N-二甲基甲酰胺。
5. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述弱碱水溶液为PBS缓冲溶液、Tris缓 冲溶液、碳酸钠水溶液、碳酸氢纳水溶液或氢氧化钠水溶液。
6. 权利要求1-5之一的方法制备的半乳糖胺和聚多巴胺修饰的肝癌靶向纳米粒。
7. 权利要求6的半乳糖胺和聚多巴胺修饰的肝癌靶向纳米粒在制备恶性肝癌治疗药 物的应用。
【专利摘要】本发明公开了一种半乳糖胺和聚多巴胺修饰的肝癌靶向纳米粒及制备方法与应用，制备为：取聚合物和疏水性药物，溶于有机溶剂中，搅拌，滴加到TPGS水溶液中，搅拌，减压挥发，离心，弃上清液，得载疏水性药物的聚合物初始纳米粒；将初始纳米粒重悬于Tris缓冲液中，加多巴胺盐酸盐反应，离心，得载疏水性药物的被聚多巴胺包裹的纳米粒；将载疏水性药物的被聚多巴胺包裹的纳米粒分散在弱碱水溶液中，加入肝癌靶向配体半乳糖胺，反应，离心，冷冻干燥得半乳糖胺和聚多巴胺修饰的肝癌靶向纳米粒。本发明方法简单，无污染。半乳糖胺和聚多巴胺修饰的肝癌靶向纳米粒具有良好肝脏靶向性、生物相容性以及生物可降解性，可靶向肝癌并有治疗作用。
【IPC分类】A61K9-19, A61P35-00, A61K47-34, A61K31-337, A61K47-26
【公开号】CN104666251
【申请号】CN201510088949
【发明人】梅林 , 曾小伟, 刘赣, 张明明
【申请人】深圳市百诺康泰生物科技有限公司
【公开日】2015年6月3日
【申请日】2015年2月26日