一种没药叶细胞提取物的提取方法及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物美容领域，具体涉及没药叶细胞提取物的提取方法及其在护肤品 中的应用。
【背景技术】
[0002] 没药又名末药、明没药、没药、末药、制没药、炙没药、醋炒没药、生没药、生明没药 等别称。为橄榄科植物地丁树或哈地丁树的干燥树脂，主产于非洲索马里、埃塞俄比亚以及 印度等地。采集由树皮裂缝处渗出的白色油胶树脂，于空气中变成红棕色而坚硬的圆块。打 碎后，炒至焦黑色应用。主治胸腹瘀痛、痛经、经闭、症瘕、跌打损伤、痈肿疮疡、肠痈、目赤肿 痛。有活血止痛、消肿生肌等功效。在东方是一种活血、化瘀、止痛、健胃的中药，来自产地 古代阿拉伯及东非一带。《北史》中即有记载，说是来自西域漕国。在西方，没药是一种据说 有神奇疗效的药物。希伯来人将没药树枝制作成各种芳香剂、防腐剂和止痛剂。旧约时期， 常被做成油膏，涂抹在伤口，促进伤口愈合。
[0003] 没药中富含黄酮类化合物。植物黄酮具有消除氧化自由基，抗氧化，抗菌，抗病毒 等作用。关于没药叶总黄酮的提取工艺目前暂未见报道，提取没药叶中黄酮类化合物应用 于化妆品中也是最新的尝试。
[0004] 目前暂无关于对没药叶提取类黄酮化合物的方案，但有以下方法可以提取植物的 黄酮物质：醇提法、超声波提取法、微波萃取法。其中，醇提法是指利用乙醇的溶解性，将乙 醇作为溶剂对物质进行分离提纯的方法；然而本方法提取出来的黄酮得率低、消耗有机溶 剂量大而且分离难度高，操作步骤多；超声波提取法是采用超声波辅助溶剂进行提取，声波 产生高速、强烈的空化效应和搅拌作用，破坏植物药材的细胞，使溶剂渗透到药材细胞中， 缩短提取时间，提高提取率，但不易于在工业中广泛生产。微波萃取是利用电磁场的作用使 固体或半固体物质中的某些有机物成分与基体有效的分离，并能保持分析对象的原本化合 物状态的一种分离方法。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供了一种更为简单的提取没药叶细胞 提取物的方法及将所述没药叶细胞与透明质酸等应用于化妆品中，具有抗衰老和清除自由 基等功效。
[0006] 本发明的目的通过以下技术方案来实现：
[0007] -种没药叶细胞提取物的提取方法，包括如下步骤：
[0008] (1)没药叶预处理：没药叶烘干并粉碎；
[0009] (2)酶解：将没药叶、纤维素酶、吐温-80和水混合均勾，在温度为（40-70) °C和真 空度为（_〇. 4) -（-0. 8)MPa下反应50-110min ;所述没药叶在水中的含量为l-150g/L，纤 维素酶在水中的含量为〇. l-l〇g/L，吐温-80在水中的含量为0. 4g-50g/L ;
[0010] (3)过滤与浓缩：将步骤（2)获得的浸提液进行过滤，将浸提液浓缩为浓缩前体积 的三分之一以上，得到浓缩液；
[0011] (4)提取：采用微波法在微波输出功率为200-500W，频率为3000MHz条件下对浓 缩液进行提取，对提取液过滤并烘干滤渣，磨成粉末得到没药叶细胞提取物。
[0012] 优选的，步骤（1)中没药叶粉碎后过40-60目筛。
[0013] 优选的，步骤（2)中所述没药叶在水中的含量为10_140g/L，纤维素酶在水中的含 量为2-8g/L，吐温-80在水中的含量为2g-40g/L。
[0014] 优选的，步骤（2)中酶解反应在55°C下反应95min
[0015] 优选的，没药叶细胞提取物为黄酮。
[0016] 本发明还提供了一种包含本发明提供的方法提取的没药叶细胞提取物的护肤品， 其原料包括如下组分：
[0017] 丙二醇：1-10 份；
[0018] 没药叶细胞提取物：0. 01-5份；
[0019] 透明质酸：0· 01-3份；
[0020] POE 油醇醚：0· 5-1. 5 份；
[0021] 尼泊金酯：0· 01-0. 5 份；
[0022] 维生素 B :0· 001-0. 1 份；
[0023] 维生素 E :0· 001-0. 1 份；
[0024] 羧甲基纤维素：0. 5-5份
[0025] 剩余为水，总量为100份。
[0026] 优选的，按重量份计包括如下组分：
[0027] 丙二醇：3-8 份；
[0028] 没药叶细胞提取物：0· 05-4份；
[0029] 透明质酸：0· 02-2. 5 份；
[0030] POE 油醇醚：0· 2-1. 2 份；
[0031] 尼泊金酯：0· 04-0. 45 份；
[0032] 维生素 B :0· 002-0. 08 份；
[0033] 维生素 E :0· 002-0. 08 份；
[0034] 羧甲基纤维素：1-4. 5份
[0035] 剩余为水，总量为100份。
[0036] 优选的，所述护肤品为面膜、爽肤水、面霜、乳液、眼箱、洗面乳。
[0037] 有益效果
[0038] 1、简化工艺且操作简便：本发明采用纤维素酶和没药反应，过滤且采用乙醇进行 提取的新工艺相对于超声波提取法和微波萃取法提取工艺操作简便；且本发明只有在提 取时使用乙醇，且本发明中的乙醇溶液可循环使用，相较于其他方法而言，消耗的有机溶剂 少。
[0039] 2、将没药叶提取物应用于抗衰老护肤品中，从而达到美容效果。
[0040] 3、本发明包含没药叶提取物的护肤品不仅具有保湿、美白、光滑皮肤的功效，而且 还具有抗衰老，去皱的功效。
[0041] 4、本发明提取率高、节能、省时。与传统酶法比较，本发明提取率高出0. 5% ;由于 整个提取工艺无需使用太多设备设施，主要是没药叶与纤维素酶反应相较于其他工艺具有 明显节能的优点；此外，整个提取工艺只需2. 5个小时，比传统酶法提取提高了 2-2. 5个小 时。
【具体实施方式】
[0042] 为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明 进行进一步详细说明。
[0043] 实施例1
[0044] ①没药的预处理：没药叶子洗净，自然阴干，50°C恒温烘干，粉碎过60目筛；
[0045] ②混合：称取没药叶10g，放入三角瓶中，加入0· 4g吐温-80和0· Ig纤维素酶和 水，混合溶液共1L，混合均匀搅拌，使没药叶与吐温-80和纤维素酶充分混合；
[0046] ③酶解：将装有没药叶粉末，吐温-80,纤维素酶的三角瓶放在水浴锅内，水浴温 度为70°C，真空度为_0.8MPa酶解反应IlOmin ;
[0047] ④过滤：酶解反应结束后进行减压过滤，将固液混合物转移到滤纸上，打开抽气泵 开始抽滤；
[0048] ⑤浸提液浓缩：进过过滤后，使用旋转薄膜浓缩这个方法，通过反复浓缩，将浸提 液浓缩为原来的30% ;
[0049] ⑥提取在微波提取装置的输出功率为200,频率为3000MHz对浓缩液进行提取和 过滤，对过滤后得到的滤渣烘干，并磨成粉末得到没药叶细胞提取物。
[0050] ⑦将黄酮粉末称取10g，加入烧杯中，加入50ml的水混合均匀，移至100mL容量瓶 中，定容。
[0051] ⑧测定黄酮浓度；参照《中国药典2010版》记载的花黄酮类物质含量测定方法为
[2]绘制芦丁的标准曲线；以芦丁为对照物，采用硝酸铝显色法在510nm处测定不同质量浓 度P (mg/ml)的芦丁吸光度，绘制芦丁标准曲线，总黄酮得率的计算各提取工艺下测得吸光 度，代入芦丁标准曲线方程计算出测定液的质量浓度，以下是没药叶总黄酮的得率计算公 式：
[0052]
[0053]
【主权项】
1. 一种没药叶细胞提取物的提取方法，其特征在于，包括如下步骤： (1) 没药叶预处理：没药叶烘干并粉碎； (2) 酶解：将没药叶、纤维素酶、吐温-80和水混合均匀，在温度为（40-70) °C和真空度 为（-0. 4) - (-0. 8) MPa下反应50-1 IOmin ;所述没药叶在水中的含量为l-150g/L，纤维素酶 在水中的含量为〇. l-l〇g/L，吐温-80在水中的含量为0. 4g-50g/L ; (3) 过滤与浓缩：将步骤（2)获得的浸提液进行过滤，将浸提液浓缩为浓缩前体积的三 分之一以上，得到浓缩液； (4) 提取：采用微波法在微波输出功率为200-500W，频率为3000MHz条件下对浓缩液 进行提取，对提取液过滤并烘干滤渣，磨成粉末得到没药叶细胞提取物。
2. 根据权利要求1所述的一种没药叶细胞提取物的提取方法，其特征在于，步骤（1)中 没药叶粉碎后过40-60目筛。
3. 根据权利要求1所述的一种没药叶细胞提取物的提取方法，其特征在于，步骤（2)中 所述没药叶在水中的含量为10_140g/L，纤维素酶在水中的含量为2-8g/L，吐温-80在水中 的含量为2g-40g/L。
4. 根据权利要求1所述的一种没药叶细胞提取物的提取方法，其特征在于，步骤（2)中 酶解反应在55°C下反应95min
5. 根据权利要求1所述的一种没药叶细胞提取物的提取方法，其特征在于，没药叶细 胞提取物为黄酮。
6. -种包含权利要求1所述的方法提取的没药叶细胞提取物的护肤品，其特征在于， 其原料包括如下组分： 丙二醇：1-10份； 没药叶细胞提取物：〇. 01-5份； 透明质酸：〇. 01-3份； POE油醇醚：0· 5-1. 5份； 尼泊金酯：0.01-0. 5份； 维生素 B :0.001-0. 1份； 维生素 E :0.001-0. 1份； 羧甲基纤维素：0.5-5份； 剩余为水，总量为100份。
7. 根据权利要求6所述的护肤品，其特征在于，按重量份计，包括如下组分： 丙二醇：3-8份； 没药叶细胞提取物：〇. 05-4份； 透明质酸：0.02-2. 5份； POE油醇醚：0· 2-1. 2份； 尼泊金酯：〇. 04-0. 45份； 维生素 B :0. 002-0. 08 份； 维生素 E :0. 002-0. 08 份； 羧甲基纤维素：1-4. 5份； 剩余为水，总量为100份。
8.根据权利要求6-7任一项所述的护肤品，其特征在于，所述护肤品为面膜、爽肤水、 面霜、乳液、眼箱、洗面乳。
【专利摘要】本发明公开了一种没药叶细胞提取物的提取方法及其应用，提取方法包括如下步骤：(1)没药叶烘干并粉碎；(2)酶解：将没药叶、纤维素酶、吐温-80和水混合均匀，在温度为(40-70)℃和真空度为(-0.4)—(-0.8)MPa下反应50-110min；(3)获得的混合物进行过滤和浓缩；(4)提取：采用微波法在微波输出功率为200-500W,频率为3000MHz条件下对浓缩液进行提取，过滤提取液并对滤渣烘干，磨成粉末得到没药叶细胞提取物。本发明提取的没药叶细胞提取物与透明质酸等组成的抗衰老护肤品具有抗衰老、清除自由基等功效。
【IPC分类】A61Q19-02, A61Q19-08, A61Q19-00, A61K8-97, A61Q19-10
【公开号】CN104706553
【申请号】CN201510072717
【发明人】陈海佳, 王一飞, 葛啸虎, 黎敏聪, 池诗源
【申请人】广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
【公开日】2015年6月17日
【申请日】2015年2月11日