用于长期保存表皮生长因子活性的组合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种用于长期保存表皮生长因子活性的组合物，属于生物技术和日化
技术领域。
【背景技术】
[0002] 表皮生长因子（EGF)在体内能促进机体表皮细胞、上皮细胞、成纤维细胞的生长、 分裂和新陈代谢，促进微血管的生长，改善细胞生长的微环境。因此它对受损皮肤、敏感皮 肤、创伤皮肤以及改建性皮肤具有良好的修复、护理作用，特别是对目前美容院中流行的换 肤术后局部受损皮肤的修复，还能预防术后并发症的发生。正是由于其效果好，副作用小， 更具安全性，越来越受到人们的重视，在化妆品中添加EGF已经非常普遍，并且广受欢迎。
[0003] 但是EGF作为一种具有生物活性的多肽分子，理论上可以作为生物功效性原料添 加到保健品和化妆品中，但在实际的应用过程中发现EGF比较难储存。一方面EGF很容易 被细菌所产生的酶水解；另一方面，其对热和微生物不稳定，在生产、运输和储存过程中非 常容易降解，其分子结构和生物活性比较难保持。这就亟需开发一种保存组合物体系：既能 防止微生物的生长，延长该体系的寿命，又能缓解EGF的降解并保持其生物学活性。
【发明内容】
[0004] 为了克服EGF对热和微生物不稳定，在生产、运输和储存过程中容易降解失活的 问题，本发明的目的是提供一种长期保存EGF活性的组合物。
[0005] 本发明提供的一种长期保存EGF的组合物包括：0.00001-0. 05 %的EGF、 0. 001-5. 00%的防腐剂、0. 01-25. 00%的保护剂，溶剂为磷酸盐缓冲液（0. 01-0.lmol/L， PH6-8)，其中各成分含量为质量分数。其中防腐剂和保护剂可以采用正交的方法进行任意 复配。
[0006] 所述EGF为生物工程发酵制备的EGF，其氨基酸序列如SEQIDNo. 1所示：
[0007] SEQIDNo. 1：
[0008] NSDSECPLSHDGYCLHDGVCMYIEALDKYACNCVVGYIGERCQYRDLKffffELR〇
[0009]所述防腐剂选自苯氧乙醇、DMDM乙内酰脲、苯甲醇、苯甲酸、甲基异噻唑啉酮、羟苯 丙酯、羟苯甲酯等中的一种或几种，优选苯氧乙醇。
[0010] 所述保护剂选自水解胶原蛋白、海洋胶原蛋白、水解小麦蛋白、透明质酸钠、氨基 酸、葡聚糖、海藻糖、抗坏血酸、水溶性维生素E、壳聚糖、丝肽等中的一种或几种，优选水解 小麦蛋白和海藻糖的复合物。
[0011] 所述溶剂为含有0.80-0.90%氯化钠的磷酸盐缓冲液（0.01-0.1111〇1/1，？册-8)。
[0012] 在一个优选的实施方案中，制备本发明的组合物优选的组分质量百分含量如下：
[0013]
【主权项】
1. 一种用于长期保存表皮生长因子活性的组合物，其特征在于：所述组合物包括防腐 剂和保护剂，溶剂为磷酸盐缓冲体系。
2. 根据权利要求1所述的组合物，其特征在于：按质量百分数计，包含以下成分： 0. 00001-0. 05 %表皮生长因子、0. 001-5. OO %防腐剂、0. 01-25. OO %保护剂，溶剂为 0· 01-0. lmol/L的磷酸盐缓冲液，pH6-8。
3. 根据权利要求1所述的组合物，所述表皮生长因子为生物工程发酵制备的表皮生长 因子，其氨基酸序列为SEQ ID No. 1。
4. 根据权利要求1所述的组合物，所述防腐剂选自苯氧乙醇、DMDM乙内酰脲、苯甲醇、 苯甲酸、甲基异噻唑啉酮、羟苯丙酯、羟苯甲酯等中的一种或多种，优选苯氧乙醇。
5. 根据权利要求1所述的组合物，所述保护剂选自水解胶原蛋白、海洋胶原蛋白、水解 小麦蛋白、透明质酸钠、氨基酸、葡聚糖、海藻糖、抗坏血酸、水溶性维生素 E、壳聚糖、丝肽等 中的一种或几种，优选水解小麦蛋白和海藻糖的复合物。
6. 根据权利要求1所述的组合物，所述磷酸盐缓冲体系为含0. 80-0. 90%氯化钠的 0. 01-0. lmol/L 磷酸盐缓冲液，pH6-8。
7. 根据权利要求1-6中任一项所述的组合物，所述组合物的成分与质量百分数如下： 表皮生长因子 0.00001-0.05% 苯氧乙醇 0.01-2.00% 水解小麦蛋白 0.01-5.00% 海藻糖 0.01-5.00% 甘油 1-10% 透明质酸钠 0.01-0.5% 余量为含〇. 80-0. 90%氯化钠的0. 01-0. lmol/L磷酸盐缓冲液，PH6-8。
8. 根据权利要求7所述的组合物，其中所述磷酸盐缓冲液的pH为7. 4。
9. 根据权利要求1所述的组合物，所述的防腐剂和保护剂可以采用正交的方法进行任 意复配。
10. 根据权利要求1所述的组合物，所述长期保存的条件是指保存在常温、阴凉处。
【专利摘要】本发明公开了一种用于长期保存表皮生长因子活性的组合物，该组合物包括防腐剂、保护剂和磷酸盐缓冲液，优选地，按质量百分数计，包含以下成分：0.00001-0.05％EGF、0.001-5.00％防腐剂、0.01-25.00％保护剂，溶剂为pH6-8，0.01-0.1mol/L的磷酸盐缓冲液。所述防腐剂主要包括苯氧乙醇、DMDM乙内酰脲、苯甲醇、苯甲酸、甲基异噻唑啉酮、羟苯丙酯、羟苯甲酯等；所述保护剂主要包括水解胶原蛋白、海洋胶原蛋白、水解小麦蛋白、透明质酸钠、氨基酸、葡聚糖、海藻糖、抗坏血酸、水溶性维生素E、壳聚糖、丝肽等；试验证明该组合物能够有效缓解EGF的降解并保持其生物活性。
【IPC分类】A61K8-65, A61K8-73, A61Q19-00, A61K8-64
【公开号】CN104721067
【申请号】CN201510111407
【发明人】杨登亮, 项琪, 毛勇进, 黄亚东, 刘德海, 张卉, 邓燕柠, 李健安, 贝煜, 张敏静, 黄永彤, 张伟杰, 张楚标
【申请人】广州市白云联佳精细化工厂, 暨南大学
【公开日】2015年6月24日
【申请日】2015年3月13日