小檗碱用于制备治疗柯萨奇病毒b3所致病毒性心肌炎疾病的药物的用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药领域，特别涉及一种小檗碱用于制备治疗柯萨奇病毒B3所致病 毒性心肌炎疾病的药物的用途。
【背景技术】
[0002] 病毒性心肌炎（viralmyocarditis)是指嗜心性病毒感染引起的以心肌炎性病变 为主的疾病，可引起急性心功能不全，且约有1/3的患者进一步发展为慢性心肌炎和扩张 型心肌病，是引发心力衰竭的常见病因之一。近年来该病发病率呈上升趋势，已成为危害 人类健康的常见疾病之一。但迄今尚无特异性治疗方法。因此，寻找新的有确切疗效的药 物来预防及治疗病毒性心肌炎是当前临床迫切需求的。
[0003] 多种病毒感染均可引发病毒性心肌炎，目前所知的相关病毒主要为肠道病毒，包 括柯萨奇病毒、埃可病毒、脊髓灰质炎病毒等，此外还有巨细胞病毒、疱瘆病毒、腺病毒、肝 炎病毒等也可能引发心肌炎。在这些病毒中，柯萨奇病毒B组（coxsackievirusB)具有 高度亲心肌性和流行性，共包括6种血清型（CVB1-CVB6)，其中柯萨奇病毒B3被认为是引 起心肌炎和扩张型心肌病最为常见的病原体，回顾性研宄表明50%以上的病毒性心肌炎和 25%的心肌病与之有关。
[0004] 柯萨奇病毒B3(CVB3)属于小RNA病毒科，肠道病毒属。病毒颗粒为二十面体，立 方对称呈球形，无包膜，直径约25-30nm，病毒衣壳包绕着一条单股正链RNA，基因组长度为 7. 4kb〇
[0005] 目前对于病毒性心肌炎的临床治疗，还存在诸多不足。现临床主要采用抗病毒和 调节细胞免疫功能疗法。其中临床抗病毒药物包括阿昔洛韦、病毒唑和更昔洛韦等，在感 染早期，这些抗病毒药物能有效抑制病毒复制，减轻心肌损伤，提高生存率，但是，在感染后 期，其疗效有限，因此，目前临床应用的抗病毒药物的疗效均不够满意。在细胞免疫功能调 节方面，目前临床上使用的药物包括：丙种球蛋白、人白细胞干扰素等，虽然这些药物能减 弱免疫反应，清除病毒，改善左心室功能，提高生存率，但仍存在个体疗效差异大，有一定副 作用，成本过高等问题。因而，筛选和研制治疗病毒性心肌炎的新药具有重要意义。
[0006] 我国有着悠久的中医药传统文化和丰富的药用动植物资源，从中药中筛选出新的 抗病毒药物不仅是可行的解决途径，而且还具有筛选时间短、节省人力、物力和财力等优 势。与此同时，中药普遍存在毒性低、副作用小等优势。
[0007] 小檗碱（Berberine，BBR)又名黄连素，是清热解毒中药黄连、黄柏、三颗针等植物 中提取的异喹啉生物碱，分子式为C20H18N04,其药理作用广泛，毒性和副作用较小，临床广 泛用于治疗细菌性痢疾和肠炎等。除了传统的抗肠道细菌感染的作用外，小檗碱还具有抑 制肿瘤转移、降低血糖和改善心脑血管功能等药效。近年来有关研宄表明小檗碱具有抗流 感病毒的活性，但其具体的抗病毒机制还未完全阐明。而小檗碱抗其它病毒的研宄还很鲜 见。尤其对于抗柯萨奇病毒B3活性还尚未见报道。
【发明内容】
[0008] 本发明的目的是提供一种檗碱用于制备治疗柯萨奇病毒B3所致病毒性心肌炎疾 病的药物的用途。采用本发明所述药物，治疗柯萨奇病毒B3所致病毒性心肌炎疾病，具有 抗CVB3作用，抑制促炎因子和趋化因子的表达效果明显，可用于制备治疗病毒性心肌炎的 药物，该副作用小，疗效高，在目前临床上治疗CVB3所致病毒性心肌炎尤其是在感染后期， 治疗的疗效不够满意的情况下，应用前景良好。
[0009] 本发明的技术方案是：
[0010] 小檗碱用于制备治疗柯萨奇病毒B3所致病毒性心肌炎疾病的药物的用途。
[0011] 我们是灌胃小鼠，对于人来说是口服给药量对成人而言为每公斤每天4. 5-8mg。
[0012] 本发明的有益效果是：
[0013] (1)药理活性方面
[0014] 申请人的动物实验证明，小檗碱显著改善CVB3所致病毒性心肌炎小鼠生存率，心 脏组织实验方面，小檗碱能明显的抑制炎症细胞浸润和组织坏死，具有抗CVB3作用和抑制 其复制的作用以及明显的抑制促炎因子和趋化因子的表达，血清样本用全自动生物分析 仪进行检测，结果表明，小檗碱具有抑制心肌酶活性的作用、保护心肌功能的作用，体外抗 CVB3活性作用表明小檗碱具有显著的抑制VPl蛋白表达水平的作用。
[0015] ⑵药学方面
[0016] 小檗碱是清热解毒中药黄连、黄柏、三颗针等植物中提取的异喹啉生物碱，其本身 理化性质稳定，药理作用广泛，毒性和副作用较小。
【附图说明】
[0017] 图1为小檗碱改善CVB3所致病毒性心肌炎小鼠生存率的曲线；
[0018] 图2为小檗碱抑制炎症细胞浸润和组织坏死结果，图中，A为正常对照组，B为小檗 碱组，C为CVB3感染组，D为CVB3+小檗碱治疗组；
[0019] 图3为小鼠心肌组织切片H&E染色评分结果，图中，1:正常对照组，2:小檗碱组， 3 :CVB3感染组，4 :CVB3+小檗碱治疗组（注：*P〈0. 05,CVB3感染组与正常对照组比较； #P〈0. 05,CVB3+小檗碱治疗组与CVB3感染组比较）；
[0020] 图4为小檗碱抗CVB3作用，图中，A为dsRNA染色结果，B为CVB3染色结果。（1 : 正常对照组，2 :小檗碱组，3 :CVB3感染组，4 :CVB3+小檗碱治疗组）；
[0021] 图5为小檗碱抑制小鼠心肌组织中CVB3衣壳蛋白VPlmRNA表达量，图中，1:正常 对照组，2 :CVB3感染组，3 :CVB3+小檗碱治疗组（注：*P〈0. 001，CVB3感染组与正常对照组 比较；#P〈〇. 001，CVB3+小檗碱治疗组与CVB3感染组比较）；
[0022] 图6为ELISA检测小檗碱抗炎作用，图中，1 :正常对照组，2 :小檗碱组，3 :CVB3感 染组，4 :CVB3+小檗碱治疗组；（注：*P〈0. 05,CVB3感染组与正常对照组比较；#P〈0. 05， CVB3+小檗碱治疗组与CVB3感染组比较）；
[0023] 图7为qRT-PCR检测小檗碱抗炎作用，图中1:正常对照组，2:小檗碱组，3 :CVB3 感染组，4 :CVB3+小檗碱治疗组；（注：*P〈0. 05,CVB3感染组与正常对照组比较；#P〈0. 05， CVB3+小檗碱治疗组与CVB3感染组比较）；
[0024] 图8为qRT-PCR检测小檗碱体外抗CVB3作用，图中，I:正常对照组，2 :CVB3感染 组，3 :CVB3+小檗碱治疗组；（注：*P〈0. 05，CVB3感染组与正常对照组比较；#P〈0. 05，CVB3+ 小檗碱治疗组与CVB3感染组比较）
[0025] 图9为Westernblot检测小檗碱体外抗CVB3作用。
【具体实施方式】
[0026] - .材料和试剂
[0027] 1.动物、病毒株
[0028] BALB/c小鼠，雄性，4-6周龄，购买于第三军医大学大坪医院动物中心；
[0029] 柯萨奇病毒B3(Nancy)购买于中国科学院武汉病毒研宄所；
[0030] HeLa细胞株购于中国科学院上海生命科学研宄院细胞资源中心。
[0031] 2?主要试剂
[0032]
【主权项】
1. 一种小檗碱用于制备治疗柯萨奇病毒B3所致病毒性心肌炎疾病的药物的用途。
2. 根据权利要求1所述的用途，其特征在于：用小檗碱制备的药物以注射剂或输液剂 给药。
3. 根据权利要求2所述的用途，其特征在于：用小檗碱制备的药物用药量为每公斤每 天 4. 5-8mg〇
【专利摘要】本发明涉及一种小檗碱用于制备治疗柯萨奇病毒B3所致病毒性心肌炎疾病的药物的用途。采用本发明所述药物治疗柯萨奇病毒B3所致病毒性心肌炎疾病，具有抗CVB3作用，抑制促炎因子和趋化因子的表达效果明显，可用于制备治疗病毒性心肌炎的药物，该药物副作用小，疗效高，在目前临床上治疗CVB3所致病毒性心肌炎尤其是在感染后期，治疗的疗效不够满意的情况下，其应用前景良好。
【IPC分类】A61P9-04, A61K31-4375, A61P9-00
【公开号】CN104758282
【申请号】CN201510117606
【发明人】张克斌, 代黔, 钱桂生, 周世文, 余华, 张迪, 何晓梅, 熊浚智, 辛榕, 谢玮
【申请人】中国人民解放军第三军医大学第二附属医院
【公开日】2015年7月8日
【申请日】2015年3月17日