基于醇提法提取金银花提取物的酶法加工的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明属于药物制备技术领域，具体涉及中药材金银花提取物的一种新型加工方法。
【背景技术】
[0002]金银花提取物的主要指标性成分是绿原酸，即由咖啡酸与奎尼酸组成缩酚酸，异名为咖啡糅酸，化学名为3-0-咖啡酰奎尼酸，是植物体在有氧呼吸过程中经莽草酸途径产生一种苯丙素类化合物。
[0003]绿原酸具有清除自由基、抗菌消炎、抗病毒、降糖、降脂、保肝利胆等多种功效，近年来发现绿原酸类物质有抗癌、抗艾滋病的作用，可作为先导设计开发抗癌、抗艾滋病药物，同时，作为良好的抗氧化剂，绿原酸在医药、日用化工、食品等领域都有广泛的应用。
[0004]在我国，绿原酸的生产技术落后，大多采用乙醇法，产量低，应用范围不大，有些品种尚属空白，大量生产绿原酸对发展国民经济的生产具有重要的意义。
【发明内容】
[0005]本发明的目的是克服现有技术的不足，提出一种能够提升绿原酸纯度、安全绿色，提高绿原酸利用率的一种新型金银花提取物的加工方法。
[0006]本发明实现目的的技术方案是:
[0007]一种新型金银花提取物的加工方法，包括以下组分及质量分数:金银花10 — 20份，纤维素酶70%乙醇溶液。
[0008]中药材金银花提取物的新型加工方法，步骤是:
[0009](I)取经干燥粉碎后的样品5g，加30mL水；
[0010](2)将纤维素酶配成含量为2.5%的标准酶液，在上述金银花样品中分别加
0.5ml, 1.0ml, 1.5ml, 2.0ml, 2.5ml，45°C温度下酶处理 2h ；
[0011](3)加入10倍量70%的乙醇，80°C水浴回流提取2次，每次2h，离心，收集上清液；
[0012](4)真空减压浓缩至50mL，用0.2mol/L盐酸溶解并定容至10mL容量瓶中；
[0013](5)在324nm处测定吸光度，定量。平行三次。
[0014]本发明的优点和有益效果为:
[0015]1.本发明创新了金银花提取物加工方法，该法绿原菌酸得率比乙醇回流法提高25.97%，充分体现了该法在金银花提取过程中的优势，是国内金银花提取加工的重大突破，为国内提取方法开辟了新途径。
[0016]2.本工艺提取条件较为温和，避免了绿原酸在高温条件下分解，大大地提高了绿原酸的产率。
[0017]3.本发明工艺简单、操作容易，涉及设备设施少，适合规模化生产和产业化等多种优点，应用于工业生产上切实可行，可为金银花中提取绿原酸的工业化大生产提供参考。
【具体实施方式】
[0018]下面通过具体实施例对本发明作进一步详述，以下实施例只是描述性的，不是限定性的，不能以此限定本发明的保护范围。
[0019]首先确定最适的酶用量、酶解时间、温度对实验的影响,包括如下步骤:
[0020]酶的用量对绿原酸得率的影响
[0021]设置了0.5，1.0, 1.5，2.0, 2.5，3.0, 3.5，4.0, 4.5，5.0%10 个水平纤维素酶用量对纤维素酶处理效果的影响，以不加酶液为对照，45°C条件下酶处理2h。
[0022]酶解时间对绿原酸得率的影响
[0023]金银花样品中加1.0ml酶液，酶解温度45 °C，酶解时间
0.5，1.0, 1.5，2.0, 2.5，3.0, 3.5h金银花提取物的平均得率和绿原酸得率。
[0024]酶处理温度对绿原酸得率的影响
[0025]设置了25°C，30°C 35°C，40°C，45°C , 50°C , 55°C , 60°C 8 个水平研究温度对纤维素酶处理效果的影响，试验时每个金银花样品加酶液1.0ml，酶处理2h。
[0026]实验结果表明:当酶用量为2.5%时，绿原酸得率最高；酶解时间2小时时绿原酸得率最高；纤维素酶处理的最适温度范40°C _50°C，在45°C时绿原酸得率最高，当高于50°C时，绿原酸得率降低，可以看出，纤维素酶的最适温度为45°C。
[0027]实施例1:
[0028]金银花，纤维素酶，乙醇
[0029](I)取经干燥粉碎后的样品5g，加30ml水；
[0030](2)将纤维素酶配成含量为2.5%的标准酶液，在上述金银花样品中分别加0.5ml,
1.0ml, 1.5ml, 2.0ml, 2.5ml,以不加酶液为对照，45°C温度下酶处理2h。
[0031](3)加入10倍量70%的乙醇，80°C水浴回流提取2次，每次2h，离心，收集上清液；
[0032](4)真空减压浓缩至50ml，用0.2mol/L盐酸溶解并定容至10ml容量瓶中；
[0033](5)在324nm处测定吸光度，定量，平行三次。
[0034]实施例2:
[0035]金银花，纤维素酶，乙醇
[0036](I)取经干燥粉碎后的样品5g，加30mL水；
[0037](2)将纤维素酶配成含量为2.5%的标准酶液，在上述金银花样品中分别加0.5，
1.0，1.5,2.0,2.5mL,以不加酶液为对照，45°C温度下酶处理2h。
[0038](3)加入10倍量70%的乙醇，80°C水浴回流提取2次，每次2h，离心，收集上清液；
[0039](4)真空减压浓缩至50mL，用0.2mol/L盐酸溶解并定容至10mL容量瓶中；
[0040](5)在324nm处测定吸光度，定量，平行三次。
[0041]实施例3:
[0042]金银花，纤维素酶，乙醇
[0043](I)取经干燥粉碎后的样品5g，加30ml水；
[0044](2)将纤维素酶配成含量为2.5%的标准酶液，在上述金银花样品中分别加0.5，1.0,1.5,2.0,2.5mL,不加酶液为对照，45°C温度下酶处理2h。
[0045](3)加入10倍量70%的乙醇，80°C水浴回流提取2次，每次2h，离心，收集上清液；
[0046](4)真空减压浓缩至50ml，用0.2mol/L盐酸溶解并定容至10ml容量瓶中；
[0047](5)在324nm处测定吸光度，定量，平行三次。
[0048]本发明提取的绿原菌酸得率比单独乙醇回流法提高约25.97%，反应条件温和，采用该工艺绿原酸得率最高可达6.38%。
【主权项】
1.基于醇提法提取金银花提取物的酶法加工，其特征在于:包括以下组分及其质量分数:金银花10 — 20份，纤维素酶70份，乙醇溶液。2.基于醇提法提取金银花提取物的酶法加工，其特征在于: (1)取经干燥粉碎后的样品5g，加30ml水； (2)将纤维素酶配成含量为2.5%的标准酶液，在上述金银花样品中分别加0.5ml,.1.0ml, 1.5ml, 2.0ml, 2.5ml,以不加酶液为对照，45°C温度下酶处理2h ； (3)加入10倍量70%的乙醇，80°C水浴回流提取2次，每次2h，离心，收集上清液； (4)真空减压浓缩至50ml，用0.2mol/L盐酸溶解并定容至10ml容量瓶中，在324nm处测定吸光度，定量，平行三次。
【专利摘要】本发明公开了中药材金银花提取物的新型加工方法，绿原酸是金银花的主要药用成分，具有抗菌消炎、降脂降糖、调节免疫、抑制突变和抗肿瘤等作用，目前国内提取的方法主要是醇提法，这种方式虽简单易行，但绿原酸得率较低，本发明在醇提的基础上加上酶提，研究了酶的用量、酶反应时间、温度对实验的影响，在此基础上运用醇提方法进行提取，与原有技术相比，该法绿原菌酸得率比乙醇回流法提高约25.97%，反应条件温和，采用该工艺绿原酸得率最高可达6.38%，由此可见，酶法提取新工艺能够显著提高绿原酸得率。
【IPC分类】A61K36/355
【公开号】CN104922186
【申请号】CN201410098541
【发明人】张刚
【申请人】天津绿格瑞科技发展有限公司
【公开日】2015年9月23日
【申请日】2014年3月18日