一种从鸡腿菇中提取鸡腿菇素的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种从鸡腿菇中提取鸡腿菇素的方法，本发明涉及生物医药领域。
【背景技术】
[0002]鸡腿葫(Coprinus comatus)，学名毛头鬼伞，在分类学上隶属真菌门、担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、鬼伞科、鬼伞属。鸡腿菇肉质细嫩，味道鲜美，营养丰富。其味甘滑性平，有益脾胃，清心安神，经常食用有助消化、增加食欲和治疗痔疮等作用。现代研宄表明鸡腿菇具有抗氧化、降血糖、防止肝损伤、抗肿瘤、提高免疫力、抑菌等功效，被联合国粮农组织和世界卫生组织确定为具“天然、营养、保健”3种功能为一体的16种珍稀食用菌之一。
[0003]鸡腿菇素为鸡腿菇中的主要活性成分。鸡腿菇素能有效抑制非酶糖基化反应，在2mg/mL的浓度下，其体外抑制率达95.86%。动物实验表明，鸡腿菇素对正常大鼠和四氧嘧啶诱导糖尿病大鼠均具有降血糖作用，按80mg/kg体重的剂量喂养，正常大鼠的血糖浓度在3h内从5.14mmol/L降到4.28mmol/L，诱导糖尿病大鼠的果糖胺、甘油三醋和总胆固醇浓度明显下降。对比传统的降血糖药物甲福明二甲双胍，鸡腿菇素的降血糖效果更佳。
[0004]目前，国内外对鸡腿菇的报道主要集中蛋白质类、多糖类物质等方面，对鸡腿菇中鸡腿菇素进行的提取研宄还没有。
【发明内容】
[0005]本发明解决的技术问题是，方便、经济地从鸡腿菇中提取鸡腿菇素，提高鸡腿菇提取物中鸡腿菇素的含量。
[0006]本发明的技术方案是，提供一种从鸡腿菇中提取鸡腿菇素的方法，包括以下步骤:
(1)用质量分数为0.05?0.2%的盐酸溶液在50?60°C提取鸡腿菇，得提取液；
(2)将所述提取液加碱调节pH值至7.0?7.3，再固液分离除去不溶物，得澄清的水溶液A ；
(3)在所述水溶液A中加酸调节pH值至5.0?5.5，再固液分离除去不溶物，得澄清的水溶液B ；
(4)将所述水溶液B加入到大孔吸附树脂柱中，先用水洗涤大孔吸附树脂除去未被吸附的杂质；再用体积分数为25?30%的乙醇溶液洗涤大孔吸附树脂除去极性较高的杂质；再用体积分数为75?85%的乙醇溶液作为解吸液洗涤大孔吸附树脂，收集洗涤后的解吸液，经减压浓缩、干燥得鸡腿菇提取物。
[0007]进一步地，步骤(I)中，所述盐酸溶液的质量分数为0.1%。
[0008]进一步地，所述固液分离为过滤或离心。
[0009]进一步地，所述大孔吸附树脂为中极性大孔吸附树脂。
[0010]进一步地，所述大孔吸附树脂为AB-8大孔吸附树脂。
[0011]进一步地，所述酸为柠檬酸。
[0012]进一步地，所述碱为氢氧化钠。
[0013]进一步地，所述步骤(4)中减压浓缩的温度为60?65°C。
[0014]进一步地，所述干燥为真空干燥或喷雾干燥，干燥至鸡腿菇提取物的水分不超过
5% ο
[0015]进一步地，在所述步骤(I)之前，将鸡腿菇破碎至0.5cm以下。
[0016]目前类似物质的通常采用的是醇提，成本高，浓缩后用低温长时间沉淀除去杂质，主要缺陷是温度要求高(4°C左右)、时间长(静置12?48小时)、杂质去除不完全，从而导致生产周期产、成本高，而且有效成分含量低、难于产业化。本发明突出的优点是，采用盐酸水溶液提取，成本低，而且不需要进行浓缩，工艺简单连贯，提取液固液分离后直接加碱调节PH值至7.0?7.3，溶液中在酸性条件可溶的杂质会在弱碱性下迅速沉淀，加柠檬酸调节pH值至5.0?5.5，溶液中在弱碱性条件可溶的杂质会在弱酸性下迅速沉淀，不需低温长时间静置，然后即可常温稀释、立即分离，极大缩短了生产周期。再使用得到酸性水溶液上大孔吸附树脂柱分离，强极性的杂质无法在树脂上吸附，再采用25?30%的乙醇洗涤除去中等极性的杂质，杂质去除完全，产品有效成分高。目前常用的提取方法，提取物中目标产物的含量一般在5%，而用本发明的方法，提取物中鸡腿菇素的含量能达到20?40%。本发明制备出的产品主要用于膳食补充剂、营养保健品。
[0017]本发明的优势在于:
1、本方法中鸡腿菇素的提取连贯性好，工艺简单，适合工业推广。
[0018]2、本方法工艺合理、有效成分含量高、提取效率高，操作简单，适合工业化生产。
[0019]3、本发明所制备的提取物纯度稳定，鸡腿菇素含量在20?40%之间。
[0020]4、本发明的制备方法收率高；溶剂可以回收再利用。
【具体实施方式】
[0021]本发明中乙醇的浓度均采用体积百分数表示。
[0022]实施例1
称取干燥鸡腿菇碎10kg，投入200L提取罐中，并加入0.1%盐酸(质量分数，下同)溶液100L，开搅拌；打开夹套蒸汽加热至50?60°C时，开始计时，提取Ih ;料液过400目滤袋，并向滤渣中再次投入0.1%盐酸溶液100L，重复提取Ih ;回流提取完毕后，料液过400目滤袋，并将两次的滤液合并，加氢氧化钠调节PH值至7.2，离心分离；离心清液加柠檬酸调节pH值至5.3，离心分离；离心清夜以25L/h的流速通过25L的AB-8树脂柱；上柱完毕后，用150L纯水以50L/h的流速洗脱去树脂不吸附的杂质，再用25%乙醇25L以10L/h的流速洗脱，再用75%的乙醇25L以10L/h的流速解吸，收集醇解吸液，减压回收乙醇解吸液浓缩到固形物含量达50%以上，真空干燥，得干浸膏312g，鸡腿菇素含量为22.5%。
[0023]实施例2
称取干燥鸡腿菇碎300kg，投入3000L提取罐中，并加入0.1%盐酸溶液2400L，开搅拌；打开夹套蒸汽加热至50?60°C时，开始计时，提取Ih ;料液过400目滤袋，并向滤渣中再次投入0.1%盐酸溶液2400L，重复提取Ih ;回流提取完毕后，料液过400目滤袋，并将两次的滤液合并，加氢氧化钠调节PH值至7.2，离心分离；离心清液加柠檬酸调节pH值至5.3，离心分离；离心清夜以1000L/h的流速通过1000L的AB-8树脂柱；上柱完毕后，用3000L纯水以2000L/h的流速洗脱去树脂不吸附的杂质，再用25%乙醇100L以500L/h的流速洗脱，再用80%的乙醇1500L以500L/h的流速解吸，收集醇解吸液，减压回收乙醇解吸液浓缩到固形物含量达50%以上，真空干燥，得干浸膏9.3kg，鸡腿菇素含量为24.6%。
[0024] 实施例3
称取干燥鸡腿菇碎200kg，投入3000L提取罐中，并加入0.1%盐酸溶液1600L，开搅拌；打开夹套蒸汽加热至50?60°C时，开始计时，提取Ih ;料液过400目滤袋，并向滤渣中再次投入0.1%盐酸溶液1200L，重复提取Ih ;回流提取完毕后，料液过400目滤袋，并将两次的滤液合并，加氢氧化钠调节PH值至7.2，离心分离；离心清液加柠檬酸调节pH值至5.3，离心分离；离心清夜以1000L/h的流速通过1000L的AB-8树脂柱；上柱完毕后，用3000L纯水以2000L/h的流速洗脱去树脂不吸附的杂质，再用25%乙醇1000L以500L/h的流速洗脱，再用75%的乙醇1500L以500L/h的流速解吸，收集醇解吸液，减压回收乙醇解吸液浓缩到固形物含量达50%以上，真空干燥，得干浸膏6.1kg，鸡腿菇素含量为27.2%。
【主权项】
1.一种从鸡腿菇中提取鸡腿菇素的方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)用质量分数为0.05?0.2%的盐酸溶液在50?60°C提取鸡腿菇，得提取液； (2)将所述提取液加碱调节pH值至7.0?7.3，再固液分离除去不溶物，得澄清的水溶液A ； (3)在所述水溶液A中加酸调节pH值至5.0?5.5，再固液分离除去不溶物，得澄清的水溶液B ； (4)将所述水溶液B加入到大孔吸附树脂柱中，先用水洗涤大孔吸附树脂除去未被吸附的杂质；再用体积分数为25?30%的乙醇溶液洗涤大孔吸附树脂除去极性较高的杂质；再用体积分数为75?85%的乙醇溶液作为解吸液洗涤大孔吸附树脂，收集洗涤后的解吸液，经减压浓缩、干燥得鸡腿菇提取物。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(I)中，所述盐酸溶液的质量分数为0.1%。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述固液分离为过滤或离心。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述大孔吸附树脂为中极性大孔吸附树脂。5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述大孔吸附树脂为AB-8大孔吸附树脂。6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述酸为柠檬酸。7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述碱为氢氧化钠。8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(4)中减压浓缩的温度为60?.65℃。9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述干燥为真空干燥或喷雾干燥，干燥至鸡腿菇提取物的水分不超过5%。10.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述步骤(I)之前，将鸡腿菇破碎至.0.5cm以下。
【专利摘要】本发明公开了一种从鸡腿菇中提取鸡腿菇素的方法，该方法包括以下步骤：(1)用质量分数为0.05～0.2%的盐酸溶液在50～60℃提取鸡腿菇，得提取液；(2)将所述提取液加碱调节pH值至7.0～7.3，再固液分离除去不溶物，得澄清的水溶液A；(3)在所述水溶液A中加酸调节pH值至5.0～5.5，再固液分离除去不溶物，得澄清的水溶液B；(4)将所述水溶液B加入到大孔吸附树脂柱中，先用水洗涤大孔吸附树脂除去未被吸附的杂质；再用体积分数为25～30%的乙醇溶液洗涤大孔吸附树脂除去极性较高的杂质；再用体积分数为75～85%的乙醇溶液作为解吸液洗涤大孔吸附树脂，收集洗涤后的解吸液，经减压浓缩、干燥得鸡腿菇提取物。该方法工艺合理、提取效率高，操作简单，适合工业化生产。
【IPC分类】A23L1/29, A61K36/07
【公开号】CN104940246
【申请号】CN201510418424
【发明人】黄六仔
【申请人】湖南杰萃生物技术有限公司
【公开日】2015年9月30日
【申请日】2015年7月17日