一种含人干细胞生长因子的护肤品及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于日化产品领域，尤其涉及一种含人干细胞生长因子的护肤品及其制备 方法。
【背景技术】
[0002] 细胞生长因子，对多种细胞生理功能和代谢活动发挥生理调节作用，它们在体内 含量极微，但生物活性极高。在美容护肤、整形外科、烧伤溃疡以及各种皮肤病的伤口修复 与愈合中有重要作用。
[0003] 细胞生长因子与存在于靶细胞上的特异受体相结合而发挥作用，其主要生物学效 应为：趋化诱导炎症细胞、刺激靶细胞增值和分化、促使靶细胞合成分泌细胞外基质，如胶 原等。细胞生长因子调节T细胞、B细胞、组织细胞、朗格罕氏细胞和真皮树突的形成、发育、 代谢等功能，并影响他们的迀移和生长速率。同时也刺激芥蒂组织、角化细胞、成纤维细胞 和巨噬细胞等分泌细胞因子、淋巴因子、血清蛋白、细胞外蛋白和基质多糖。在胚胎发育期， 细胞生长因子通过调节相同或不同类型细胞的活动而参与组织器官形成的调节；对于发育 成熟的组织器官，创伤后引发的器官受损、功能削弱，细胞因子都有显著的修复重建功能。
[0004] 细胞生长因子是皮肤护理的最佳活性成分，能够控制或调节皮肤老化进程，保护 受损皮肤，延缓皮肤老化，对保持正常皮肤的结构和功能、维持机体的正常生理活动和代谢 具有重要意义。由于年龄、生理、环境等因素引起的皮肤衰老过程中，皮肤活性降低，生理功 能下降，严重的还会造成病理性改变。以微小颗粒形式或通过特殊传递系统（脂质体、包裹 脂质体、微球），将细胞生长因子添加到洗面奶、凝胶、精华素或乳液中，对衰老皮肤发挥重 要的分子生物学功能。细胞生长因子的作用是：
[0005] 1.在表皮水平上：影响角化细胞的活性和生长因素，刺激角化细胞迀移和上皮 化，刺激表皮细胞分化和矫正，强烈促进表皮修复和愈合。
[0006] 2.在真皮水平上：刺激成纤维细胞活性，增强细胞外基质收缩和构造，提供表皮 养分促进皮肤伤口愈合和功能再生。
[0007] 3.在皮肤整体水平上：增强对环境侵袭、紫外线、污染物、刺激物、敏化剂、炎性细 胞的抵抗力，巩固、增强皮肤张力，增强皮肤弹性，刺激瘢痕组织褪色，减少瘢痕形成，延缓 皮肤衰老。
【发明内容】
[0008] 本发明的目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种含人干细胞生长因子的 护肤品及其制备方法。
[0009] 本发明的技术方案是：一种含人干细胞生长因子的护肤品及其制备方法，是通过 均质乳化工艺将人细胞生长因子添加到化妆品中，其中，每克化妆品的人干细胞生长因子 含量为〇. 1-30. ng，纯度为88-98 %。
[0010] 所述的均质乳化工艺具体包括以下步骤：将化妆品的原料中需要加热的成分分为 油性和水性组分，分别加热后混匀，然后均质乳化，冷却至30-40°C，加入含人干细胞生长因 子的溶液以及其他组分，搅拌均匀，真空脱气。
[0011] 所述的人干细胞生长因子可以是用基因工程方法制备的重组人干细胞生长因子， 也可以是应用细胞培养液天然分离的人源人干细胞生长因子组分。
[0012] 所述的化妆品包括护肤类及抗皱产品、清洁类化妆品、功能性化妆品和美容化妆 品。
[0013] 所述的护肤类及抗皱产品包括润肤霜、冷霜、乳液、眼霜、面膜。
[0014] 一种含有人干细胞生长因子的嫩肤乳液，主要含有如下按质量百分比计的成分：
[0015] A 组分：
[0016] 小麦胚芽乳化剂 1. 8-2. 2% 16-18 醇 1,0-1.5% DC200 0.1% SB45 (乳木果油） 0.5-1.0% 白油 3. 0-5. 0% 异壬酸异壬酯 1. 0-3. 0% 霍霍巴油 2.0-3.0%
[0017] B 组分：
[0018] 甘油 2. 5%-4% 尿囊素 0. 1% 芦芭胶 0. 5-2. 5% NMF (保湿剂） 1. 0-5. 0% EDTA-2NA 0,01% 余量为水
[0019] C 组分：
[0020] IS-45 0. 3%
[0021] 维生素 B3 0. 1%
[0022] D 组分：
[0023] 人干细胞生长因子 0.000001-0.0003%
[0024] -种含有人干细胞生长因子的嫩肤乳液的制备方法，包括以下步骤：
[0025] 1、将A、B相组分分别加热到75_80°C，搅拌溶解均匀；
[0026] 2、将A组分缓慢真空吸入至B组分，充分搅拌，均质8分钟；
[0027] 3、保持真空搅拌冷却至45°C以下，添加 C组分；
[0028] 4、D组分在稳定剂PBS (0. 01M的磷酸盐缓冲液）预处理搅拌3分钟后加入，搅拌 均勾，出锅。
[0029] -种含有人干细胞生长因子的抗皱滋养面膜，主要含有如下按质量百分比计的成 分：
[0030] EG-1聚甘油醚（保湿剂） 0.5-1,0% BT-85 保湿剂 1.0-3,0% BioStine HP (紧肤剂）： 3.0-5.0% 金缕梅提取液 2. 0-6. 0% 海藻提取液 0. 5-3. 0% 卡波 0. 15-0. 3% 三乙醇胺 0.15-0.3% 苯氧乙醇 0. 2-Q.S% 人干细胞生长因子 0.000001-0.0003% 余量为水
[0031] -种含有人干细胞生长因子的抗皱滋养面膜的制备方法，包括以下步骤：
[0032] 1、卡波和去离子水按1 :100的比例，溶解浸润；
[0033] 2、升温至60°C，拉真空，中速搅拌，冷却至45°C以下；
[0034] 3、依次添加其他成分，搅拌均匀；
[0035] 4、保持真空，添加三乙醇胺中和，脱气，慢速搅拌；
[0036] 5、冷却至37°C添加人干细胞生长因子，搅拌均匀，出锅。
[0037] 本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：
[0038] 本发明首次将人干细胞生长因子应用于化妆品中，含有人干细胞生长因子的化妆 品中于摄氏4度环境中保存，一个月内仍可检测到人干细胞生长因子的活性。
[0039] 将人干细胞生长因子按0. 1-30. ng/g化妆品的量添加于化妆品中，得到的含有人 干细胞生长因子的化妆品于4多环境中保存一个月后，其抗皱活性依然保持良好。
【附图说明】
[0040] 图1是表皮生长因子作用人真皮成纤维细胞的效果图。
【具体实施方式】
[0041] 以下给出本发明的【具体实施方式】，用来对本发明的构成进行进一步说明。
[0042] 实施例1 :
[0043] 从人脐带间充质干细胞中抽提总RNA，逆转录为cDNA。根据人EGF全长基因序列， 设计PCR引物。EGF上游引物序列：5' -CAAGAGTCCAGCTTAATGCAGGCAG-3'，下游引物序列： 5' -GCTAGAAGGGGAACTCGCAGACGTA-3' .以上所获 cDNA 为模板，通过 PCR 获取 EGF 基因。用 Nde，BamHl双酶切EGF和pET-28a质粒，T4DNA连接酶连接；连接物转化感受态大肠杆菌 DH5 α。重组质粒pET-28a构建成功后，转化入大肠杆菌BL21表达。表达的重组人细胞生 长因子通过镍柱纯化，获得目标重组蛋白。
[0044] 实施例2 :
[0045] 一种含有人干细胞生长因子的嫩肤乳液，主要含有如下按质量百分比计的成分：
[0046] A 组分：
[0047] 小麦胚芽乳化剂 2, 0% 16-18 醇 1. 0% DC200 0. 1% SB45 (乳木果油） 0.5% 白油 3.0% 异壬酸异壬酯 1. 5 % 霍霍巴油 2.0%
[0048] B 组分：
[0049] 甘油 2. 6 % 尿囊素 0. 1% 芦芭胶 1.5% NMF (保湿剂） 3. 0% EDTA-2NA 0.01% 余量为水
[0050] C 组分：
[0051] IS-45 0. 3%
[0052] 维生素 B3 0. 1%
[0053] D 组分：
[0054] 人干细胞生长因子 0.000001%
[0055] -种含有人干细胞生长因子的嫩肤乳液的制备方法，包括以下步骤：
[0056] 1、将A、B相组分分别加热到75°C，搅拌溶解均匀；
[0057] 2、将A组分缓慢真空吸入至B组分，充分搅拌，均质8分钟；
[0058] 3、保持真空搅拌冷却至45°C以下，添加 C组分；
[0059] 4、D组分在稳定剂PBS (0. 01M的磷酸盐缓冲液）预处理搅拌3分钟后加入，搅拌 均勾，出锅。
[0060] 实施例3 :
[0061] 一种含有人干细胞生长因子的抗皱滋养面膜，主要含有如下按质量百分比计的成 分：
[0062] EG-1聚甘油醚（保湿剂） 0.5% BT-85保湿剂 1,0% BioStine HP (紧肤剂》 3. 0% 金缕梅提取液 2. 0% 海藻提取液 0. 5% 卡波 0. 15% 三乙醇胺 0. 15% 苯氧乙醇 0.2%
[0063] 人千细胞生长因子 0,000001% 余量为水
[0064] 一种含有人干细胞生长因子的抗皱滋养面膜的制备方法，包括以下步骤：
[0065] 6、卡波和去离子水按1 :100的比例，溶解浸润；
[0066] 7、升温至60°C，拉真空，中速搅拌，冷却至45°C以下；
[0067] 8、依次添加其他成分，搅拌均匀；
[0068] 9、保持真空，添加三乙醇胺中和，脱气，慢速搅拌；
[0069] 10、冷却至37°C添加人干细胞生长因子，搅拌均匀，出锅。
[0070] 人真皮成纤维细胞，由16周岁人包皮细胞分离而来，达到80-90 %融合，消化，以 5 X 104/ml的细胞密度铺96孔板，每孔100ul，12小时候加细胞因子，实验分为加 EGF组和 不加 EGF组。每组设4复孔。37°C，5 % C02,饱和湿度培养箱孵育48小时，加 MTT，继续孵 育4小时候加 DMSO, 570nm波长下测吸收光度值，实验重复三次。
[0071] 结果显示，含有细胞因子组与不含细胞因子对照组相比，吸光度值明显增加，有显 著性差异，如图1所示。图1的结果表明，在一定浓度范围内，人细胞生长因子对人真皮成 纤维细胞（HDF)有促增值能力，效果显著。
【主权项】
1. 一种含人干细胞生长因子的护肤品及其制备方法，其特征是：通过均质乳化工艺将 人细胞生长因子添加到化妆品中，其中，每克化妆品的人干细胞生长因子含量为0. 1-30. ng，纯度为 88-98%。2. 根据权利要求1所述的一种含人干细胞生长因子的护肤品及其制备方法，其特征 是：所述均质乳化工艺具体包括以下步骤：将化妆品的原料中需要加热的成分分为油性和 水性组分，分别加热后混匀，然后均质乳化，冷却至30-40°C，加入含人干细胞生长因子的溶 液以及其他组分，搅拌均匀，真空脱气。3. 根据权利要求1所述的一种含人干细胞生长因子的护肤品及其制备方法，其特征 是：所述的人干细胞生长因子是应用细胞培养液天然分离的人源人干细胞生长因子组分。4. 一种含有人干细胞生长因子的嫩肤乳液，其特征是通过权利要求1所述的应用得 至IJ，主要含有如下按质量百分比计的成分：C组分： IS-45 0. 3% 维生素B3 0. 1% D组分： 人干细胞生长因子〇. 000001-0. 0003%。5. -种含有人干细胞生长因子的抗皱滋养面膜，主要含有如下按质量百分比计的成 分： EG-1聚甘油醚（保湿剂） 0K.O%:
【专利摘要】一种含人干细胞生长因子的护肤品及其制备方法，是通过均质乳化工艺将人细胞生长因子添加到化妆品中，其中，每克化妆品的人干细胞生长因子含量为0.1-30.ng，纯度为88-98％。所述的均质乳化工艺具体包括以下步骤：将化妆品的原料中需要加热的成分分为油性和水性组分，分别加热后混匀，然后均质乳化，冷却至30-40℃，加入含人干细胞生长因子的溶液以及其他组分，搅拌均匀,真空脱气。本发明首次将人干细胞生长因子应用于化妆品中，含有人干细胞生长因子的化妆品中于摄氏4度环境中保存，一个月内仍可检测到人干细胞生长因子的活性。
【IPC分类】A61Q19/10, A61Q19/00, A61K8/64, A61Q1/00
【公开号】CN105287242
【申请号】CN201510771061
【发明人】徐丽君, 奕志娟, 王亚莉
【申请人】浙江元研生物科技有限公司
【公开日】2016年2月3日
【申请日】2015年11月11日