化合物vs1在制备抗非小细胞肺癌药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及已知化合物的新用途，具体设及化合物VS1在制备抗非小细胞肺癌药 物中的应用。
【背景技术】
[0002] 天然产物是指动物、植物、昆虫、海洋生物和微生物体内的组成成分或其代谢产物 W及人和动物体内许许多多内源性的化学成分统称作天然产物，其中主要包括蛋白质、多 肤、氨基酸、核酸、各种酶类、单糖、寡糖、多糖等天然存在的化学成分。天然产物在药物研发 中有着广泛的应用，现已开发出的典型药物有奎宁、吗啡、地高辛、长春新碱等。从天然产物 中寻找生物活性成分和先导物，W研究创新药物，是世界各国新药研究科学工作者公认的 有效途径之一，也已取得许多成果。
[0003] 作为全球头号癌症杀手，近年来肺癌的发病率在全球范围内仍呈持续上升的趋 势，而运一趋势在中国尤其明显。肺癌的发生、发展过程受遗传和环境两方面的共同影响。 然而，由于内因中的基因变异种类繁多，使得目前很难开发出新的能有效治疗肺癌的疗法 或者药物。
[0004] 密歇根大学综合研究中屯、最新发表在《化化reCommunications》上的研究表明， 肺癌中的基因异常主要分布在两个基因路径中：Hippo通路和神经调节蛋白l(NRGl)通路， 其中NRG1通路在W前的癌症中没有发现过。对NRG1通路进行药物研究，通过虚拟筛选获 得祀向小分子药物，将有助于研究治疗肺癌的新药物和治疗方案。由于与合成化合物相比， 天然产物与人体内的内生代谢产物结构相似，具有更好的成药性，学术界普遍认为其能为 肿瘤的治疗提供新的希望。比如之前发现有抗肿瘤效果的天然哇嘟化合物6-甲基犬尿哇 嘟酸，就是从麻黄中分离出来的。
[0005] 目前，基于肿瘤细胞的ERBB家族巧GFR同源异构体）特异性分子治疗非小细胞肺 癌（Non-smallcelllungcancer,NS化C)的祀向药物已被研究并广泛应用于临床。主要 祀向药物有两大类：一类是小分子抑制剂，W酪氨酸激酶抑制剂（简称TKI)为主。其进入 细胞内，并直接作用于ERBB家族的胞内区，从而干扰Ξ憐酸腺巧（AT巧结合。代表性的药 物如吉非替尼（Gefitinib)和厄洛替尼巧rlotinib)。另一类是单克隆抗体，其作用于胞外 区，竞争性地抑制配体与ERBB家族的结合，从而使受体失去活性，影响细胞的生长，代表性 的药物如西妥昔单抗（Cetuxim油）。但是，根据对ERBB3抑制剂的已有文献调研，发现抑制 剂W单克隆抗体为主，化学小分子药物也主要来源于合成。
【发明内容】
[0006] (一）要解决的技术问题
[0007] WERBB3为作用祀标，经过筛选得到对非小细胞肺癌细胞系有明显抑制作用的化 合物，旨在为抗非小细胞肺癌药物的新药研发提供候选的先导化合物。 阳00引（二）技术方案
[0009] 本发明首先提供了化合物vsi在制备抗非小细胞肺癌药物中的应用，所述的化合 物VS1化学结构式如下：
[0010]
1] 上述化合物VS1的分子量为534. 56194g/mol，分子式为C3iH2eN4〇g。
[0012] 本发明选择购买上述化合物VS1进行细胞生物学实验，具体选用A549人非小细胞 肺癌细胞株作为受试细胞系，MRC-5人正常胚肺成纤维细胞作为对照细胞系，按适量的细胞 接种浓度常规细胞培养法进行培养；CCK-8试剂法测定药物的ICw值W及它们的抗癌作用。 实验结果表明，上述化合物对人非小细胞肺癌细胞系（A549)有明显的抑制作用。
[0013] 上述化合物VS1为已知的可市售购得的化合物，可购自eMoleculesOit化 emolecules.com)或IBScreenNP化ttp://www.ibscreen.com)。
[0014] 本发明在实际研发过程中意外发现上述化合物对于人非小细胞肺癌细胞系 (A549)有明显的抑制作用，证实其可有效用于制备治疗抗非小细胞肺癌药物。
[0015] 进一步地，本发明所述化合物VS1可W作为所述抗非小细胞肺癌药物中唯一活性 成分或活性成分群中的一种，所述活性成分群中的其他活性成分为化学药或天然产物。
[0016] 本发明所述抗非小细胞肺癌药物W口服剂、透皮吸收剂或注射剂的形式存在。
[0017] 优选地，本发明所述抗非小细胞肺癌药物可W直接W本发明所述化合物VS1，或进 一步加入药学上可接受的赋形剂制备成常见剂型应用在抗非小细胞肺癌药物中，理想的剂 型如颗粒剂、片剂、胶囊剂、注射液等，具体为本领域技术人员所掌握。
[0018] 进一步地，本发明所述抗非小细胞肺癌优选为肺腺癌。经试验验证，所述化合物 VS1对于肺腺癌的药用活性尤为显著。
[0019] (S)有益效果
[0020] 本发明首次验证了上述化合物VS1对非小细胞肺癌细胞系的明显抑制作用，可用 于制备抗非小细胞肺癌药物，为抗非小细胞肺癌药物的新药研发提供候选的先导化合物。
【附图说明】
[0021] 图1为A549细胞抑制率对比示意图；
[0022] 图2为MRC-5细胞抑制率对比示意图。
【具体实施方式】
[0023] W下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
[0024] W下实施例中化合物VS1来自于：
[00巧]陶素生化：化t1:p://www.tsbiochem.com/);
[0026]进口于IBScreen NP : (ht1:p://www. ibscreen. com)。
[0027] 此外，所设及的所有试验材料及试剂均为可通过市售购得的已知材料。 阳0測实施例1
[0029] 本实施例验证了本发明所述化合物VS1对非小细胞肺癌细胞系的抑制作用：
[0030] (1)选用对数生长期的A549和MRC-5贴壁细胞，用膜酶消化后，用含10%胎牛血 清的DMEM和改良型α-MEM培养基分别配成5X104个/ml的细胞悬液，接种在96孔培养 板中，每孔接种200μ1，37°C，5 %C〇2培养。
[0031](2)配置药物试样母液（本发明所述化合物VSl)，用50%DMSO溶液将药物试样溫 育震荡溶解，配置成终浓度为2mg/ml的溶液；并配置五倍稀释的工作液，终浓度为Img/ml， 200μg/ml，40μg/ml，8μg/ml，160ng/ml，32ng/ml。
[0032] 配置阳性药尼莫司下（为已知的可用于抗非小细胞肺癌的药物）50mg/ml母液，并 配置五倍稀释的工作液，终浓度为Img/ml，200μg/ml，40μg/ml，8μg/ml，160ng/ml，32ng/ ml〇 阳〇3引配置溶剂阴性对照母液40%DMSO,工作浓度为40 %，8%，1.6 %，0. 32%， 0. 064%，0. 0128%。
[0034] (3) 24h后换新的含不同浓度被测样品的培养基，按照浓度对照组则换含等体积溶 剂的培养基，每组设3平行孔，37°C，5%C〇2,培养4她，倒置显微镜下观察。
[0035] 4化后弃去上清液，小屯、用正常的完全培养基清洗一次，每孔加入200μ1完全清 培养基，再在每孔加入20μ1CCK-8试剂，37°C继续培养地。用微型超声振荡器混匀后，在 酶标仪上W试验波长为450nm测定光密度值。
[0036] 根据药物在不同浓度对细胞生长的抑制率，计算ICs。值，如表1所示：
[0037] 表1药物在A549和MRC-5的ICso值
[0038]
[0039] 由上表可知，VS1和阳性对照药物尼莫司下的ICs。值相近，都对A549人非小细胞 肺癌细胞系有明显的抑制作用；且对于同一种药物VS1，A549的ICw值明显小于MRC-5的 ICw值，说明VS1对A549人非小细胞肺癌细胞的杀伤力大于对MRC-5人正常胚肺成纤维细 胞的杀伤力，具有比较强的选择性，可进一步用于新的非小细胞肺癌治疗药物的研发。
[0040] 虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在 本发明基础上，可W对之作一些修改或改进，运对本领域技术人员而言是显而易见的。因 此，在不偏离本发明精神的基础上所做的运些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
【主权项】
1. 化合物VSl在制备抗非小细胞肺癌药物中的应用，其特征在于：所述的化合物VSl 化学结构式如下：2. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述化合物VSl作为所述抗非小细胞肺 癌药物中唯一活性成分或活性成分群中的一种。3. 根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述活性成分群中的其他活性成分为化 学药或天然产物。4. 根据权利要求1-3任一项所述的应用，其特征在于：所述抗非小细胞肺癌药物以口 服剂、透皮吸收剂或注射剂的形式存在。5. 根据权利要求1-3任一项所述的应用，其特征在于：所述抗非小细胞肺癌药物为颗 粒剂、片剂、胶囊剂、注射液。6. 根据权利要求1-3任一项所述的应用，其特征在于：所述抗非小细胞肺癌药物进一 步包括药学上可接受的赋形剂。7. 根据权利要求1-3任一项所述的应用，其特征在于：所述抗非小细胞肺癌为肺腺癌。
【专利摘要】本发明涉及已知化合物的新应用，具体涉及化合物VS1在制备抗非小细胞肺癌药物中的应用。经验证上述化合物对非小细胞肺癌细胞系具有明显抑制作用，可用于制备抗非小细胞肺癌药物。本发明以ERBB3为作用靶标，经过筛选得到对非小细胞肺癌细胞系有明显抑制作用的化合物，旨在为抗非小细胞肺癌药物的新药研发提供候选的先导化合物。
【IPC分类】A61K31/407, A61P35/00
【公开号】CN105412089
【申请号】CN201510837217
【发明人】郭榕, 张媛, 肖旭东, 赵勇
【申请人】北京市计算中心
【公开日】2016年3月23日
【申请日】2015年11月26日