一种高效的双壳贝类血淋巴的提取方法
【专利说明】
【技术领域】
[0001]本发明涉及双壳贝类血淋巴的提取技术领域，具体地说，是一种高效的双壳贝类血淋巴的提取方法。
【【背景技术】】
[0002]如今是海洋的时代，水产养殖业迅速发展。双壳贝类作为重要的经济水产动物，在生产实践中病害一直是丰产的关键因素，一直被研究者所关注。而血淋巴作为贝类的重要免疫组织，具有极高的研究价值。
[0003]由于双壳贝类属开管式循环系统，其血淋巴的采集一直是难点。目前，研究者多用注射器和针头，然而传统的用注射器和针头取血的方法针头过细，吸取时容易堵塞，往往导致吸取的量不够，并且容易抽到体液而不纯。
[0004]基于上述的原因，在血淋巴的提取过程中，纯度不高、量少一直是困扰研究者的问题。因此，人们希望寻找一种简单有效的提取大量而且纯净的贝类血淋巴的方法。
【
【发明内容】
】
[0005]本发明的目的是针对现有技术中的不足以及上述亟待解决的问题，提供一种操作便捷、卫生高效的双壳贝类血淋巴的提取方法
[0006]为实现上述目的，本发明采取的技术方案是:一种高效的双壳贝类血淋巴的提取方法，包括以下步骤:a.用棉球吸净双壳贝类表面的海水，并用酒精棉擦拭其表面进行消毒，再次用棉球把双壳贝类表面的海水吸取干净;b.将擦拭干净的双壳贝类竖直立于提取装置的凹槽内，将双壳贝类的前部闭壳肌划开，使双壳贝类体内液体流干;c.将双壳贝类倒置于凹槽内并将其撑开，割断其后方闭壳肌，把壳打开，使双壳平展立于凹槽之内；d.刺破体腔使体内残留的体腔液流出，并用棉球把缢蛏组织表面的体液吸干，然后在双壳贝类斧足和水管下方垫棉球后，用镊子把围心腔上方的外套膜轻轻拨离，使围心腔完全暴露;e.切割移液器的枪头，同时刺激双壳贝类的斧足，在心脏跳动围心腔鼓起之时用移液器迅速吸取。
[0007]所述的步骤a中再次用棉球把双壳贝类表面的海水吸取干净目的是保证吸取血淋巴的纯净度。
[0008]所述的步骤d中在双壳贝类斧足和水管下方垫棉球用于吸取体液，同时固定住双壳贝类斧足和水管，防止斧足受刺激而滑动。
[0009]所述的步骤e中切割移液器的枪头时，切掉枪头头部3_4mm的尖头以增大枪头的口径直径。
[0010]所述的步骤e中刺激斧足时，双壳贝类血淋巴会回流到围心腔中，并于围心腔中大量聚集，使围心腔鼓起，围心腔膜变薄。
[0011]本发明优点在于:
[0012]1、本发明方法操作简单，并且能够有效增加提取到的双壳贝类血淋巴的总量，提升血淋巴的纯度，操作过程中可保持操作环境的整洁。
[0013]2、本发明方法中多次使用到棉球辅助操作，一方面支撑双壳贝类使其处于利于提取的姿态，一方面可及时吸收操作过程中产生的多余体液，并且棉球易取方便，成本低廉。
[0014]3、本发明方法在使用移液器时，将移液器枪头的尖头切割，避免枪头堵塞影响到血淋巴提取的总量。
[0015]4、本发明方法在提取血淋巴之前刺激双壳贝类的斧足，使血淋巴大量聚集于围心腔中，一方面提供血淋巴的纯度和总量，一方面使围心腔膨胀鼓起围心腔膜变薄，易于被移液器吸破。
【【附图说明】】
[0016]附图1是本发明方法操作装置示意图。
[0017]附图2是本发明方法操作装置的塑料平板示意图。
[0018]附图3是移液器枪头切割处示意图。
【【具体实施方式】】
[0019]下面结合附图对本发明提供的【具体实施方式】作详细说明。在说明中，本发明方法中的双壳贝类以缢蛏为例对其进行血淋巴的提取。
[0020]附图中涉及的附图标记和组成部分如下所示:
[0021]1.金属框架2.塑料平板3.抽屉状小盒4.把手
[0022]5.凹槽 6.小孔 7.枪头切割处。
[0023]首先将暂养2-3天后的缢蛏用棉球吸净表面海水，再用酒精棉擦拭表面进行消毒，再次用棉球把缢蛏组织表面的海水吸取干净，将其置于提取装置(如附图1所示)的凹槽5内。此处再次用棉球把缢蛏组织表面的海水吸取干净的目的是进一步保证吸取的血淋巴纯度。这里还需要说明的是，放置缢蛏时应该将缢蛏的前方(贝类形态学的前方)朝下，背方(贝类形态学的背部)朝观察者竖直放置立于凹槽5内。然后用23号解剖刀从缢蛏的背方将铰合部向前方划断将缢蛏前部的闭壳肌划开。
[0024]划开缢蛏前部的闭壳肌之后会有大量的体液流出，待体液流干后，将缢蛏倒置于本装置凹槽5内并用手或钳子(大个体的双壳贝类使用)稍撑开(不可用力过猛，能清楚分辨外套膜和壳之间的界限即可)。然后用解剖刀延外套膜和壳之间的边缘轻轻往下(即贝类形态学的后方)划开(在围心腔附近切忌划破围心腔)，直至割断后方闭壳肌。然后慢慢移开双壳贝类的一边壳，把壳打开，使双壳平展立于装置凹槽5之内。划断后将会有大量的贝类体液流出，此时继续用解剖刀划破体腔使体内残留的体腔液充分流出。这里需要说明的是，在进行上述操作时会有大量体液流出，这些体液会通过提取装置凹槽内的圆柱状小孔6流向装置底部的塑料抽屉状小盒3中(如附图2所示)，塑料抽屉状小盒3为可以的装置，当其内部体液过多时，可通过其正面把手4抽出塑料抽屉状小盒3将体液倒弃，清洗后可重复使用。
[0025]待在缢蛏体液充分流出后，用棉球把缢蛏组织表面的体液吸干，并在缢蛏斧足和水管下方垫适量棉球。在斧足和水管下方垫适量棉球的目的是进一步将贝类的体液吸取干净，保证血淋巴纯度，并且对斧足和水管起到一定的固定作用，以便刺激斧足之时，斧足不滑动。然后将装置的可移动的塑料平板2取下平放于实验台上，用镊子(9cm精细解剖尖头镊子)沿着缢蛏围心腔的边缘挑破围心腔上方的外套膜和围心腔膜并将其轻轻拨离，使围心腔充分暴露出来，便于移液器吸力对血淋巴的吸取，保证心脏不被戳破。
[0026]最后把lOOOul移液器的枪头从其枪头切割处7切割掉3-4_左右(如附图3所示，大约为心脏的大小)，刺激缢蛏斧足，使血淋巴回流到围心腔中，并于围心腔中大量聚集。在心脏跳动围心腔鼓起之时，用移液器迅速吸取血淋巴。这里需要说明的是，采用lOOOul移液器的枪头为了保证吸力足够将围心腔吸破，将血淋巴吸入枪头中。附图3中，将枪头切割掉3-4mm(大约为心脏的大小)尖头，是为了增大枪头的口径直径，防止收缩后块状的心脏堵塞口径。刺激斧足的目的一方面是使血淋巴聚集提高血淋巴的提取量，另一方面围心腔鼓起，围心腔膜变薄，有利于用移液器的吸取时将围心腔吸破。
[0027]以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明方法的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为本发明的保护范围。
【主权项】
1.一种高效的双壳贝类血淋巴的提取方法，其特征在于，所述的方法包括以下步骤:a.用棉球吸净双壳贝类表面的海水，并用酒精棉擦拭其表面进行消毒，再次用棉球把双壳贝类表面的海水吸取干净;b.将擦拭干净的双壳贝类竖直立于提取装置的凹槽内，将双壳贝类的前部闭壳肌划开，使双壳贝类体内液体流干;c.将双壳贝类倒置于凹槽内并将其撑开，割断其后方闭壳肌，把壳打开，使双壳平展立于凹槽之内；d.刺破体腔使体内残留的体腔液流出，并用棉球把缢蛏组织表面的体液吸干，然后在双壳贝类斧足和水管下方垫棉球后，用镊子把围心腔上方的外套膜轻轻拨离，使围心腔完全暴露;e.切割移液器的枪头，同时刺激双壳贝类的斧足，在心脏跳动围心腔鼓起之时用移液器迅速吸取。2.根据权利要求1所述的一种高效的双壳贝类血淋巴的提取方法，其特征在于，所述的步骤a中再次用棉球把双壳贝类表面的海水吸取干净目的是保证吸取血淋巴的纯净度。3.根据权利要求1所述的一种高效的双壳贝类血淋巴的提取方法，其特征在于，所述的步骤d中在双壳贝类斧足和水管下方垫棉球用于吸取体液，同时固定住双壳贝类斧足和水管，防止斧足受刺激而滑动。4.根据权利要求1所述的一种高效的双壳贝类血淋巴的提取方法，其特征在于，所述的步骤e中切割移液器的枪头时，切掉枪头头部3-4mm的尖头以增大枪头的口径直径。5.根据权利要求1所述的一种高效的双壳贝类血淋巴的提取方法，其特征在于，所述的步骤e中刺激斧足时，双壳贝类血淋巴会回流到围心腔中，并于围心腔中大量聚集，使围心腔鼓起，围心腔膜变薄。
【专利摘要】本发明涉及一种高效的双壳贝类血淋巴的提取方法，包括以下步骤：a.用棉球吸净双壳贝类表面的海水，并用酒精棉擦拭其表面进行消毒，再次用棉球把双壳贝类表面的海水吸取干净；b.将擦拭干净的双壳贝类置于提取装置的凹槽内，将双壳贝类闭壳肌划开，把壳打开，使双壳平展立于凹槽之内；c.在双壳贝类斧足和水管下方垫棉球后，用镊子把围心腔上方的外套膜轻轻拨离，使围心腔完全暴露；d.切割移液器的枪头，同时刺激双壳贝类的斧足，在心脏跳动围心腔鼓起之时用移液器迅速吸取。其优点表现为：本发明方法操作简单，并且能够有效增加提取到的双壳贝类血淋巴的总量，提升血淋巴的纯度，操作过程中可保持操作环境的整洁。
【IPC分类】A61D3/00, A61B5/15
【公开号】CN105476646
【申请号】CN201610006424
【发明人】牛东红, 杜蕴超, 李家乐, 彭茂潇, 卫侃韵, 谢淑媚, 蓝天一
【申请人】上海海洋大学
【公开日】2016年4月13日
【申请日】2016年1月6日