黄酮醇、黄烷醇类化合物的用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药领域，具体是黄酬醇、黄烧醇类化合物的用途。
【背景技术】
[0002] R-spondin(Rspo)是近年来新发现的蛋白家族，包括4个成员（Rspol~4)。已报道 Rspo蛋白家族所有成员均为分泌性蛋白，均有两个富含半脫氨酸的化rin-like结构域、1 个TSPl结构域和富含碱性氨基酸的C端区域。Rspos通过激活并协同Wnt/0-catenin信 号通路参与对细胞增殖和分化的调控，影响骨骼、肌肉、血管等组织的发育W及肢体和性腺 的形成，并在多种疾病的发生过程中起重要作用。
[0003] 近年来研究发现经过化疗药物5-氣尿喀晚（5-FU，5-flurouracil)处理的小鼠 肿瘤模型服用Rspol后，黏膜炎和体重失重症状明显减轻。研究发现，Rspol可W促进小鼠 舌黏膜上皮细胞增殖，减轻由化疗药物和/或福射引起的口腔黏膜炎乃至舌溃瘍症状。此 夕h最新研究发现Rspol的治疗处理可W促进成骨细胞分化，减轻关节炎小鼠模型中的骨质 损害症状。鉴于Rspo可W促进成骨细胞分化、帮助骨骼修复和重塑的作用，Rspo有望应用于 多种骨髓瘤的治疗。
【发明内容】
[0004] 本发明通过实验发现，黄烧醇、黄酬醇类化合物能显著上调因化、NO等损伤因素导 致的R-spondin蛋白下调，从而减轻该信号通路引起的细胞调亡和组织损伤。基于黄烧醇、 黄酬醇类化合物天然、绿色、安全的特性，该类化合物为因R-spondin蛋白素乱引起的疾病 治疗提供了可能，特别在相关疾病的临床药物开发有着潜在的应用。
[000引本发明提供黄烧醇类化合物、黄酬醇类化合物在制备调控R-spondin蛋白药物中 的用途。
[0006] 本发明提供的技术方案之一黄烧醇类化合物、黄酬醇类化合物在制备内皮损伤型 高血压病症药物中对R-spondin蛋白分泌调控作用。
[0007] 本发明提供的技术方案之二黄烧醇类化合物、黄酬醇类化合物在制备放射治疗肠 屏障损伤药物中对R-spondin蛋白分泌调控作用。
[0008] 本发明提供的技术方案之=黄烧醇类化合物、黄酬醇类化合物降低腹部脂肪药物 中的用途。
[0009] 本发明的有益效果在于:黄烧醇、黄酬醇类的化合物具有调控R-spondin蛋白的作 用，是一种安全、高效治疗血管内皮损伤(导致的高血压、屯、脑血管疾病）、粘膜损伤(导致的 消化道疾病）、骨损伤、脂代谢素乱等疾病的药物。
【具体实施方式】
[0010] 下面结合实施例对本发明作进一步说明。
[0011] 实施例1:观察黄烧醇类化合物、黄酬醇类化合物在制备内皮损伤型高血压病症药 物中对R-spondin蛋白分泌调控作用。黄烧醇类化合物W矢车菊素为例，黄酬醇类化合物W 山奈酪为例。
[0012] 1.1试验动物:SD大鼠，雌雄兼用，由武汉大学动物试验中屯、提供；180-250g，常规 饲料，许可证号：SCXK(鄂）2008-0004。
[0013] 1.2试验材料:矢车菊素，医用级，浙江天然产物化学有限公司，批号:020150507; 山奈酪，医用级，浙江天然产物化学有限公司，批号：20150302; N-硝基一L-精氨酸甲醋 a-NAME)，Sigma产品，批号：20150308。
[0014] 1.3试验方法:SD大鼠130只，随机分组，每组10只，分为如下十S组， 正常组； kNAME 组，腹腔注射（ip)L-NAME 125mg/k，一天一次； kNAME+矢车菊素组，ip L-NAME 125mg/k，ig灌胃矢车菊素50mg/kg，一天一次； kNAME+山奈酪组，ip L-NAME 125mg/k，ig灌山奈酪50mg/kg，一天一次； 高巧组，ig氯化巧50mg/k，一天一次； 高巧+矢车菊素组，ig氯化巧50mg/k，g灌胃矢车菊素50mg/kg，一天一次； 高巧+山奈酪组，ig氯化巧50mg/k，ig灌胃山奈酪50mg/kg，一天一次； 高钢组，ig氯化钢300mg/k，一天一次； 高钢+矢车菊素组，ig氯化钢300mg/k，g灌胃矢车菊素50mg/kg，一天一次； 高钢+山奈酪组，ig氯化钢300mg/k，ig灌胃山奈酪50mg/kg，一天一次； 高铁组，ig硫酸亚铁lOmg/k，一天一次； 高铁+矢车菊素组，ig硫酸亚铁lOmg/k，g灌胃矢车菊素50mg/kg，一天一次； 高铁+山奈酪组，ig硫酸亚铁lOmg/k，ig灌胃山奈酪50mg/kg，一天一次； 于造模给药4周后，无创测定血压;SD大鼠断头处死，取胸主动脉匀浆，ELISA检测胸主 动脉匀浆 RSpol (R-spondinl)。
[0015] 双抗夹屯、检测RSpol大鼠抗小鼠R-Spondinl单抗（1:20000稀释)每孔200 iU，4 °C过夜包被酶标板;PBST洗板3次，5 min/次;5%脱脂奶粉溶液每孔300山，37°C封闭1 h; 取小肠匀浆上清稀释1500倍后，每孔加200山，4°C解育过夜;PBST洗板3次，5min/次；山羊 抗小鼠R-Spondinl多抗（1 μg/ml)每孔100山，4°C解育过夜，PBST洗板3次，5 min/次;过 氧化物酶标记兔抗山羊IgG抗体（1:30000稀释)每孔100山，37°C解育2 h，PBST洗板3次 后，加入TMB显色液每孔100 yl，37°C解育0.5 h，然后加入等体积0.5 mol/L硫酸终止反 应，最后在酶标仪上取450 nm处读数。样本、阴性对照和空白对照均做两孔，共104孔。阴性 对照为小牛血清白蛋白溶液(6 mg/ml)，空白对照为憐酸盐缓冲液(0.2 mol/L，pH=7.2)。取 每个样本2孔吸光度均值为该样本吸光度值，大于阴性对照2倍为有效。
[0016] 1.4统计学处理:采用SPSS10.0如见进行统计分析。计量资料W(x±S)表示，结果 进行t检验;计数资料采用卡方检验。P<0.05为差异显著。
[0017] 1.5试验结果:结果可见，低的NO、高巧、高钢、高铁均可导致收缩压升高，损伤上 动脉内皮，血管中RSpol的表达，与血压呈负相关，矢车菊素、山奈酪可提升RSpol的表达，减 轻内皮损伤。结果见表1。
[0018] 表1不同因素对血压的影响及RSpol蛋白表达的影响
[0019] 实施例2:黄烧醇类化合物、黄酬醇类化合物在制备放射治疗肠屏障损伤药物中对 R-spondin蛋白分泌调控作用。黄烧醇类化合物W儿茶素为例、黄酬醇类化合物W搬皮素为 例。
[0020] 2.1实验材料:SD大鼠；甲醒;水合氯醒;儿茶素，医用级，浙江天然产物化学有限 公司，批号:020150507;搬皮素，医用级，浙江天然产物化学有限公司，批号:20150302。
[0021 ] 2.2实验方法。
[0022] (1)模型制备:模型制备参考化ssatt等。SD大鼠10%水合氯醒腹腔注射麻醉，采用 加速器6MVx线，源皮距100cm，机架角180,照射野IOcmX IOcm,单次20Gy照射腹部，其余部位 铅皮防护。
[0023] (2)观察指标：照射后7日，SD大鼠断头处死，取结肠，进行炎症评分，称重，计算脏 器指数。
[0024] 参照WHO分级法[13]对各组SD大鼠OM程度进行分级。0级：无症状；I级:红肿； n级：溃瘍；m级：大面积溃瘍；IV级：巨结肠。
[002引（3)处理方法:SD大鼠40只，随机分为4组，每组10只，雌雄各半，分别为，正常组;模 型组;模型+儿茶素50mg/kg组，于造模前3天，ig儿茶素，一天一次，连续10天;模型+搬皮素 50mg/kg组，于造模前3天，ig搬皮素，一天一次，连续10天。
[0026] 取结肠匀浆，ELISA检测结肠匀浆RSpo2(R-spondin2)。
[0027] 3.实验结果：结果可见，福照后，SD大鼠结肠系数显著下降，炎症评分明显升高， RSpo2蛋白表达下降;儿茶素、搬皮素可逆转上述改变。结果见表2. 表2.福照对结肠指数、结肠炎症评分的影响及RSpo2蛋白表达的影响
[0028] 实施例3:黄烧醇类化合物、黄酬醇类化合物在制备降低腹部脂肪药物中的用途。 黄烧醇类化合物W矢车菊素为例，黄酬醇类化合物W杨梅素为例。
[0029] 3.1实验材料：SD大鼠；儿茶素，医用级，浙江天然产物化学有限公司，批号： D20150507;杨梅素，医用级，浙江天然产物化学有限公司，批号:20150302。
[0030] 3.2实验方法：SD大鼠40只，随机分为4组，每组10只，雌雄各半，分别为，正常组； 模型组;模型+儿茶素50mg/kg组，ig儿茶素，一天一次，连续30天;模型+杨梅素50mg/kg组， ig杨梅素，一天一次，连续30天。
[0031] 模型及给药组SD大鼠同时喂高脂饲料，一个月后，断头处死SD大鼠，取腹部脂肪， 计算腹部脂肪系数;脂肪匀浆，ELISA检测腹部脂肪匀浆RSpo3(R-spondin3)。
[0032] 3.3实验结果：结果可见，高脂饮食后，SD大鼠体重无显著变化，但腹部脂肪明显 增加，RSpo3蛋白表达上调，儿茶素、杨梅素可逆转上述变化，结果见表3。
[0033] 表3.高脂饮食对腹部脂肪及其RSpo3蛋白表达的影响
[0034] W上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人 员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可W做出若干改进或变形，运些改进或变形也应 视为本发明的保护范围。
【主权项】
1. 黄烷醇类化合物、黄酮醇类化合物在制备调控R-spondin蛋白药物中的用途。2. 根据权利要求1所述的用途，其特征在于:所述黄烷醇类化合物、黄酮醇类化合物在 制备内皮损伤型高血压病症药物中的用途。3. 根据权利要求1所述的用途，其特征在于:所述黄烷醇类化合物、黄酮醇类化合物在 制备放射治疗肠屏障损伤药物中的用途。4. 根据权利要求1所述的用途，其特征在于:所述黄烷醇类化合物、黄酮醇类化合物在 制备降低腹部脂肪药物中的用途。
【专利摘要】本发明属于医药领域，具体是黄酮醇、黄烷醇类化合物的用途，即黄烷醇类化合物、黄酮醇类化合物在制备调控R-spondin蛋白药物中的用途。本发明首次提出将黄烷醇类化合物、黄酮醇类化合物用于制备内皮损伤型高血压病症、放射治疗肠屏障损伤、降低腹部脂肪等疾病的药物，能够安全、高效治疗血管内皮损伤（导致的高血压、心脑血管疾病）、粘膜损伤（导致的消化道疾病）、骨损伤、脂代谢紊乱等疾病。
【IPC分类】A61P9/12, A61P9/10, A61P19/08, A61P9/00, A61K31/352, A61K31/353, A61P1/00, A61P3/04
【公开号】CN105497006
【申请号】CN201510928373
【发明人】李建, 李晓斐, 牛云辉, 杜思达, 翁丽霞, 丁虹
【申请人】武汉华纳联合药业有限公司
【公开日】2016年4月20日
【申请日】2015年12月15日