氯唑西林钠和克霉唑的组合物及其在生物医药中的应用
【专利摘要】本发明公开了氯唑西林钠和克霉唑的组合物及其在生物医药中的应用，本发明提供的药物组合物包含氯唑西林钠和克霉唑，且该组合物中氯唑西林钠和克霉唑的重量份之比为6～8:1。本发明提供的氯唑西林钠和克霉唑的药物组合物含有两种临床常用的化学药物氯唑西林钠和克霉唑，本发明研究表明：氯唑西林钠和克霉唑联合作用且满足一定的重量份之比时，对肾血管性高血压致心肌纤维化和急性肺损伤具有优异的治疗作用，可以开发成治疗肾血管性高血压致心肌纤维化和急性肺损伤的药物。
【专利说明】
氯唑西林钠和克霉唑的组合物及其在生物医药中的应用
技术领域
[0001] 本发明属于生物医药领域，涉及氯唑西林钠和克霉唑的老药新用，具体涉及氯唑 西林钠和克霉唑的药物组合物在医药方面的新用途。
【背景技术】
[0002] 氯唑西林钠为半合成青霉素，具有耐酸、耐青霉素酶的特点，对革兰阳性球菌和奈 瑟菌属有抗菌活性，对葡萄球菌属(包括金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌)产酶株的 抗菌活性较苯唑西林强，但对青霉素敏感葡萄球菌和各种链球菌的抗菌作用较青霉素为 弱，对甲氧西林耐药葡萄球菌无效。
[0003] 克霉唑为广谱抗真菌药，对多种真菌尤其是白色念珠菌具有较好抗菌作用，其作 用机制是抑制真菌细胞膜的合成，以及影响其代谢过程。
[0004] 目前，尚未见氯唑西林钠或克霉唑与肾血管性高血压致心肌纤维化和急性肺损伤 的相关性报道，该领域研究尚属空白。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种氯唑西林钠和克霉唑的药物组合物以及该药物组合 物在治疗肾血管性高血压致心肌纤维化和急性肺损伤方面的新用途。
[0006] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0007] -种药物组合物，包含氯唑西林钠和克霉唑，且该组合物中氯唑西林钠和克霉唑 的重量份之比为6~8:1。
[0008] 进一步地，所述的药物组合物包含氯唑西林钠和克霉唑，且该组合物中氯唑西林 钠和克霉唑的重量份之比为7:1。
[0009] 进一步地，所述的药物组合物包含氯唑西林钠和克霉唑，且该组合物中氯唑西林 钠和克霉唑的重量份之比为6:1。
[0010] 进一步地，所述的药物组合物包含氯唑西林钠和克霉唑，且该组合物中氯唑西林 钠和克霉唑的重量份之比为8:1。
[0011] 上述药物组合物在制备治疗肾血管性高血压致心肌纤维化的药物中的应用。
[0012] -种用于治疗肾血管性高血压致心肌纤维化的药物制剂，包括上述的药物组合 物，还包括药学上可以接受的药用辅料或载体。
[0013] 进一步地，所述制剂为片剂、口服液、注射液、无菌粉针、胶囊剂或颗粒剂。
[0014] 上述药物组合物在制备治疗急性肺损伤的药物中的应用。
[0015] -种用于治疗急性肺损伤的药物制剂，包括上述的药物组合物，还包括药学上可 以接受的药用辅料或载体。
[0016] 进一步地，所述制剂为片剂、口服液、注射液、无菌粉针、胶囊剂或颗粒剂。
[0017] 本发明的优点：
[0018] 本发明提供的氯唑西林钠和克霉唑的药物组合物含有两种临床常用的化学药物 氯唑西林钠和克霉唑，本发明研究表明：氯唑西林钠和克霉唑联合作用且满足一定的重量 份之比时，对肾血管性高血压致心肌纤维化和急性肺损伤具有优异的治疗作用，可以开发 成治疗肾血管性高血压致心肌纤维化和急性肺损伤的药物。
【具体实施方式】
[0019] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。下述 实施例中，氯唑西林钠和克霉唑的比例均为重量份之比。
[0020] 实施例1:对肾血管性高血压致心肌纤维化的治疗作用
[0021] 1、材料与方法
[0022] 1.1动物
[0023]正常雄性SD大鼠（广州中医药大学实验动物中心提供），体重90~120g。
[0024] 1.2试剂与样品
[0025] 氯唑西林钠和克霉唑购自中国药品生物制品检定所。巯甲丙脯酸:常州制药厂。
[0026] 1.3大鼠分组及模型制备
[0027]采用经典的肾动脉钳夹方法。若术后血压大于术前的3个标准差且高于115mmHg， 则确定模型建立。假手术组仅游离肾动脉，不套上银夹。将肾血管性高血压大鼠（RHR)随机 分为8组:假手术组、模型对照组、阳性对照组(巯甲丙脯酸，10mg/100g)、氯唑西林钠和克霉 唑7:1组(20mg/100g)、氯唑西林钠和克霉唑6:1组(20mg/100g)、氯唑西林钠和克霉唑8:1组 (20mg/100g)、氯唑西林钠和克霉唑5:1组(20mg/100g)、氯唑西林钠和克霉唑9:1组(20mg/ l〇〇g)。于术后第5周开始给药，持续治疗8周，处死动物。模型对照组:注射用水2ml/100g体 重灌胃，每天1次。其他药物组:药物体重灌胃，每天1次。假手术组:除不夹肾动脉外，均与模 型组相同。
[0028] 1.4血压的测量
[0029] 采用尾袖法，血压仪为大鼠电脑血压心率仪(RBP-1大鼠血压仪，中日友好医院研 制）。于上午9时测定大鼠清醒状态下的尾动脉收缩压，连测3次，取平均值。
[0030] 1.5左心室重量(LVW)、左心室重量指数(LVI =左心室重量/体重)测定
[0031] 实验结束时大鼠称重，断头处死，取出心脏，4°C预冷生理盐水冲洗血污，滤纸吸干 称重。沿房室交界处去除心房和大血管，去除右心室游离壁，分离左心室并称重，以此作为 LVW，并计算LVW/BW。然后立即置液氮中冷冻，-70 °C保存待测。
[0032] 1.6 胶原浓度(Coll)
[0033] 采用南京建成生物工程研究所提供的羟脯氨酸测试盒测定心肌羟脯氨酸浓度。算 出羟脯氨酸含量，然后乘以8.2，算出胶原浓度。
[0034] 1.7统计学方法
[0035]实验数据用均数土标准差(X土s)表示，应用SPSS18.0版统计软件进行单因素方差 分析和t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
[0036] 2、实验结果
[0037] 2.1对肾血管性高血压(RHR)模型大鼠左心室重量指数LVI的影响
[0038] 与正常对照组比较，模型对照组大鼠的左心室重量指数LVI升高；与模型对照组比 较，阳性药组、氯唑西林钠和克霉唑7:1组、6:1组和8:1组大鼠左心室重量指数LVI显著降低 (P<0.01或P<0.05);与模型对照组比较，氯唑西林钠和克霉唑5:1组、9:1组无显著变化(P > 0.05)。试验结果见表1。
[0039] 2.2对肾血管性高血压模型大鼠胶原水平的影响
[0040] 与正常对照组比较，模型对照组大鼠的胶原水平升高(P<0.05)。与模型对照组比 较，阳性药组、氯唑西林钠和克霉唑7:1组、6:1组和8:1组大鼠胶原水平显著降低(P<0.01 或P<0.05);与模型对照组比较，氯唑西林钠和克霉唑5:1组、氯唑西林钠和克霉唑9:1组无 显著变化(P>〇. 05)。试验结果见表1。
[0041] 表1对肾血管性高血压模型大鼠左心室重量指数LVI和胶原(coll)水平的影响
[0043] 高血压引起的主要心脏病理改变不仅指心肌细胞的肥大，而且还包括心肌纤维化 (MF)和冠状微血管的结构改变，研究表明：由此引起心功能障碍，与心肌间质胶原堆积，间 质重建，形成MF有关。现代研究表明：RHR是研究心肌纤维化最为典型的动物模型。在术后4 周RHR心肌呈反应性纤维化表现，在术后12周则呈修复性纤维化表现。
[0044] 结果表明，氯唑西林钠和克霉唑重量份比6~8:1时可以通过降低胶原浓度的作用 来干预肾血管性高血压模型大鼠的心肌纤维化，可开发成治疗肾血管性高血压致心肌纤维 化的药物。
[0045] 实施例2:对急性肺损伤的治疗作用
[0046] 1、材料与方法
[0047] 1.1动物
[0048]选用健康雄性清洁级SD大鼠，体重320-370g(由南京军区总医院动物实验中心提 供）。动物饲养在温度(22 ± 1) °C、相对湿度55 %~65 %、12h光照周期的通风干燥环境中，采 用大小鼠维持料1022饲养。
[0049] 1.2试剂与样品
[0050] 氯唑西林钠和克霉唑购自中国药品生物制品检定所。大鼠肿瘤坏死因子-a (TNF-α)、白细胞介素 -6(IL-6)、白细胞介素 -IO(IL-IO)，酶联免疫吸附法(ELISA)检测试剂盒购 自美国Biosource International公司；大鼠 HMGB1ELISA检测试剂盒购自日本Shino-Test 公司产品。HMGB1即高迀移率族蛋白1。
[0051] 1.3大鼠分组及模型制备
[0052] 采用盲肠结扎穿孔法(CLP)建立脓毒血症模型，术前禁食12h，以乌拉坦（1250mg/ kg)腹腔注射剂量麻醉，沿腹正中线做一 2cm长的切口，进腹找到盲肠，以4-0丝线环形结扎 盲肠根部，以18G针头在游离端对穿1次后挤出粪便少许，送回腹腔，随后依次缝合腹膜和皮 肤。Sham组仅做剖腹、分离盲肠远端、关腹手术。术后立即皮下注射生理盐水lmL补充术中液 体丢失。大鼠随机分为7组，每组10只，分别为假手术组(Sham组）、模型对照组(CLP组）、氯唑 西林钠和克霉唑7:1组（20mg/100g)、氯唑西林钠和克霉唑6:1组(20mg/100g)、氯唑西林钠 和克霉唑8:1组(20mg/100g)、氯唑西林钠和克霉唑5:1组(20mg/100g)、氯唑西林钠和克霉 唑9:1组(20mg/100g)<XLP+药物组于CLP后即时及6h后腹腔分别注射药物;Sham组于假手术 后即时及6h后、CLP组于CLP后0及6h腹腔分别注射生理盐水lmL。
[0053] 1.4检测指标及方法
[0054] 各组动物均于CLP后24h取股静脉血2mL，离心10min后取血清-80°C保存。采用 ELISA法检测血清中TNF-a、HMGBl及IL-10的水平。此外，CLP 24h后检测肺组织干湿重比(W/ D)、髓过氧化物酶活性(MPO)。
[0055] 1.5统计学方法
[0056] 采用SPSS19.0统计软件进行统计分析，计量资料以均数土标准差(X 土 s)表示，多 组间比较采用单因素方差分析，P〈〇.05为差异有统计学意义。
[0057] 2、实验结果
[0058] 2.1对脓毒血症大鼠 TNF_a、HMGBl及IL-10水平的影响
[0059] 与Sham组比较，CLP明显增加血浆TNF-a、HMGB1及IL-10水平。与模型对照组比较， 氯唑西林钠和克霉唑7:1组、6:1组和8:1组血浆TNF-a、HMGBl及IL-10水平明显降低（P< 0.01或P<0.05);与模型对照组比较，氯唑西林钠和克霉唑5:1组、9:1组血浆TNF-a、HMGBl 及IL-10水平无显著变化(P>0.05)。结果见下表。
[0060] 2.2对脓毒血症大鼠肺组织W/D及MPO活性的影响
[0061 ] 与Sham组比较，CLP明显增加肺组织W/D及MPO活性，（P〈0.05)。与模型对照组比较， 氯唑西林钠和克霉唑7 :1组、6:1组和8:1组肺组织W/D及MPO活性明显降低(P<0.01或卩< 〇. 05);与模型对照组比较，氯唑西林钠和克霉唑5:1组、氯唑西林钠和克霉唑9:1组无显著 变化(P>0.05)。结果见下表。
[0062]
[0063] 上述结果表明，氯唑西林钠和克霉唑重量份比6~8:1时可以显著降低脓毒血症引 发的肺损伤，可以开发成治疗急性肺损伤的药物。
[0064]实施例3:片剂的制备
[0065]制备氯唑西林钠与克霉唑的组合物，以及利用有机酸如酒石酸、或柠檬酸或甲酸 或乙二酸等、无机酸如盐酸或硫酸或磷酸制成的盐，常规比例加入赋形剂制粒压片。
[0066]实施例4: 口服液的制备
[0067]制备氯唑西林钠与克霉唑的组合物，以及利用有机酸如酒石酸、或柠檬酸或甲酸 或乙二酸等、无机酸如盐酸或硫酸或磷酸制成的盐，按常规口服液制法制成口服液。
[0068]实施例5:注射液的制备
[0069] 制备氯唑西林钠与克霉唑的组合物，以及利用有机酸如酒石酸、或柠檬酸或甲酸 或乙二酸等、无机酸如盐酸或硫酸或磷酸制成的盐，按常规加注射用水，精滤，灌封灭菌制 成注射液。研究发现，pH范围在6.2~6.4时，加速试验及长期试验中，注射液始终保持澄清。 pH低于6.2或高于6.4时，长期3月常温条件下出现沉淀，且振摇无法复溶。
[0070] 实施例6:无菌粉针的制备
[0071]制备氯唑西林钠与克霉唑的组合物，以及利用有机酸如酒石酸、或柠檬酸或甲酸 或乙二酸等、无机酸如盐酸或硫酸或磷酸制成的盐，将其溶于无菌注射用水中，搅拌使溶， 用无菌抽滤漏斗过滤，再无菌精滤，分装于安瓿中，低温冷冻干燥后无菌熔封得粉针剂。 [0072]实施例7 :胶囊剂或颗粒剂的制备
[0073] 制备氯唑西林钠与克霉唑的组合物，以及利用有机酸如酒石酸、或柠檬酸或甲酸 或乙二酸等、无机酸如盐酸或硫酸或磷酸制成的盐，按常规比例加入赋形剂，制成胶囊或颗 粒剂。
[0074] 上述实施例的作用在于说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明的保护 范围。本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换， 而不脱离本发明技术方案的实质和保护范围。
【主权项】
1. 一种药物组合物，其特征在于:包含氯唑西林钠和克霉唑，且该组合物中氯唑西林钠 和克霉唑的重量份之比为6~8:1。2. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于:包含氯唑西林钠和克霉唑，且该组 合物中氯唑西林钠和克霉唑的重量份之比为7:1。3. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于:包含氯唑西林钠和克霉唑，且该组 合物中氯唑西林钠和克霉唑的重量份之比为6:1。4. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于:包含氯唑西林钠和克霉唑，且该组 合物中氯唑西林钠和克霉唑的重量份之比为8:1。5. 权利要求1~4任一所述的药物组合物在制备治疗肾血管性高血压致心肌纤维化的 药物中的应用。6. -种用于治疗肾血管性高血压致心肌纤维化的药物制剂，其特征在于:包括权利要 求1~4任一所述的药物组合物，还包括药学上可以接受的药用辅料或载体。7. 根据权利要求6所述的药物制剂，其特征在于:所述制剂为片剂、口服液、注射液、无 菌粉针、胶囊剂或颗粒剂。8. 权利要求1~4任一所述的药物组合物在制备治疗急性肺损伤的药物中的应用。9. 一种用于治疗急性肺损伤的药物制剂，其特征在于:包括权利要求1~4任一所述的 药物组合物，还包括药学上可以接受的药用辅料或载体。10. 根据权利要求9所述的药物制剂，其特征在于:所述制剂为片剂、口服液、注射液、无 菌粉针、胶囊剂或颗粒剂。
【文档编号】A61K31/431GK105832730SQ201610326712
【公开日】2016年8月10日
【申请日】2016年5月16日
【发明人】李同芬
【申请人】李同芬