一种防治猪流行性腹泻病毒病的中草药复方的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种防治猪流行性腹泻病毒病的中草药复方，将叶下珠、牛至、荔枝草按质量比3:2:1制成散剂，将散剂和饲粮按照质量比1:100混合，喂养患病猪，或者散剂加10倍散剂质量的蒸馏水，浸泡1h后加热回流1h，趁热用纱布过滤，药渣再分别加8倍质量的水和6倍质量的水加热回流1h，合并3次滤液，减压浓缩成生药浓度为1g/mL的药液，对患病猪肌肉注射。能显著上调TFF3含量，提升动物小肠粘膜防御功能，下调NO水平，改善小肠的蠕动性和肠液的电解质平衡，增强动物体质，降低机体的尿素水平；能显著上调ALB水平，增加机体肝脏代谢功能，能显著提高GLO水平，增强机体免疫功能。
【专利说明】
-种防治猪流行性腹泻病毒病的中草药复方
技术领域
[0001] 本发明属于兽药领域，尤其设及一种防治猪流行性腹泻病毒病的中草药复方。
【背景技术】
[0002] 猪流行性腹泻，英文缩写为阳D^orcine Epidemic Diarrhea)，由猪流行性腹泻 病毒引起的一种接触性肠道传染病，其特征为呕吐、腹泻、脱水。临床变化和症状与猪传染 性胃肠炎极为相似。1971年首发于英国，20世纪80年代初我国陆续发生本病。我国多发生在 每年12月份至翌年1~2月，多发生于寒冷季节，夏季也有发病的报道。
[0003] 猪流行性腹泻病毒(P邸V)，属于冠状病毒科冠状病毒属。本病只发生于猪，各种年 龄的猪都能感染发病。哺乳猪、架子猪或肥育猪的发病率很高，尤W哺乳猪受害最为严重， 母猪发病率变动很大，约为15-90%。病猪是主要传染源。病毒存在于肠绒毛上皮细胞和肠 系膜淋己结，随粪便排出后，污染环境、饲料、饮水、交通工具及用具等而传染。主要感染途 径是消化道。如果一个猪场陆续有不少窝仔猪出生或断奶，病毒会不断感染失去母源抗体 的断奶仔猪，使本病呈地方流行性，在运种繁殖场内，猪流行性腹泻可造成5-8周龄仔猪的 断奶期顽固性腹泻。
[0004] 病毒经口和鼻感染后，直接进入小肠。通过免疫巧光和电子显微镜检查，病毒的复 制是在小肠和结肠绒毛上皮细胞浆中进行。其他脏器内未发现病毒增殖。由于病毒增殖首 先造成细胞器的损伤，继而出现细胞功能障碍。肠绒毛萎缩，造成了吸收表面积的减少，小 肠黏膜碱性憐酸酶含量显著降低进而引起营养物质吸收障碍，运是引起腹泻的主要原因， 属于渗透性腹泻。严重腹泻引起脱水，是导致病猪死亡的主要原因。
[0005] 预防措施包括种猪群紧急接种胃流二联苗或胃流轮Ξ联苗。发生呕吐腹泻后立即 封锁发病区和产房，尽量做到全部封锁。扑杀10日龄之内呕吐且水样腹泻的仔猪，运是切断 传染源、保护易感猪群的做法，但成本较高。本病应用抗生素治疗无效，疫苗效果日益下降。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的在于提供一种防治猪流行性腹泻病毒病的中草药复方，旨在解决现 有猪流行性腹泻预防措施成本较高，疫苗效果日益下降的问题。
[0007] 本发明是运样实现的，一种防治猪流行性腹泻病毒病的中草药复方，所述防治猪 流行性腹泻病毒病的中草药复方由叶下珠、牛至、慕枝草按质量比3:2:1组成。
[000引本发明的另一目的在于提供一种所述防治猪流行性腹泻病毒病的中草药复方的 制备方法，所述制备方法包括：
[0009] 将叶下珠、牛至、慕枝草按质量比3:2:1制成散剂后，将散剂和饲粮按照质量比1: 100混合，喂养患病猪。
[0010] 进一步，所述防治猪流行性腹泻病毒病的中草药复方的使用方法包括：
[00川将叶下珠、牛至、慕枝草按质量比3:2:1制成散剂后，加10倍散剂质量的蒸馈水，浸 泡化后加热回流化，趁热用纱布过滤，药渣再分别加8倍质量的水和6倍质量的水加热回流 化，合并3次滤液，减压浓缩成生药浓度为Ig/mL的药液，对患病猪肌肉注射。
[0012] 本发明的防治猪流行性腹泻病毒病的中草药复方中药方剂能显著上调TFF3含量， 提升动物小肠粘膜防御功能，下调NO水平，改善小肠的蠕动性和肠液的电解质平衡，增强动 物体质，同时降低机体的尿素水平，运意味着蛋白质沉积增加，氨基酸平衡理想，加快了新 陈代谢的速度，促进生长发育;能显著上调ALB水平，增加机体肝脏解毒功能。同时还能显著 提高GL0水平，增强机体免疫功能;具有防治猪流行性腹泻病毒病和提高机体免疫功能的作 用。
【具体实施方式】
[0013] 为能进一步了解本发明的
【发明内容】
、特点及功效，兹例举W下实施例，详细说明如 下：
[0014] -种防治猪流行性腹泻病毒病的中草药复方，将叶下珠、牛至、慕枝草按质量比3: 2:1制成散剂。
[0015] 进一步，所述防治猪流行性腹泻病毒病的中草药复方将叶下珠、牛至、慕枝草按质 量比3:2:1制成散剂后，将散剂和饲粮按照质量比1:100混合，喂养患病猪。
[0016] 进一步，所述防治猪流行性腹泻病毒病的中草药复方将叶下珠、牛至、慕枝草按质 量比3:2:1制成散剂后，加10倍散剂质量的蒸馈水，浸泡比后加热回流比，趁热用纱布过滤， 药渣再分别加8倍质量的水和6倍质量的水加热回流化，合并3次滤液，减压浓缩成生药浓度 为Ig/mL的药液，对患病猪肌肉注射。
[0017]实施例1
[0018] 基础饲粮由南京禾嘉吉升农牧发展有限公司提供，基础饲粮组成及营养水平见表 1。同仁堂药店购得的中药叶下珠、牛至、慕枝草按质量比3:2:1制成散剂后，再按质量比1: 100与基础饲粮混合均匀，进行仔猪体内试验。
[0019] 表1基础饲粮组成及营养水平(风干基础）
[0020]
[0021]
[0022] 40头健康普通级"杜X大X长"Ξ元杂交断奶仔猪，35日龄，购自南京农业大学江 浦试验猪场。适应环境后随机分为4组，每组10头，公母各半。空白组和阳DV组饲喂不添加中 药复方的基础日粮、预防组和药物对照组添加中药复方1%的基础日粮，2周后饲喂不添加 中药复方的基础日粮。于试验的第S周第ld，PEDV组和预防组Wl06TCID5〇/mL的 阳DVA肥012/12株攻毒，每头灌服2. OmL 1次，然后隔离饲养。试验总周期4周。
[0023] 分别于试验的第Id和最后Id早上8:00空腹称重，根据初重和末重计算平均日增 重。平均日增重=头均净增重/试验天数。记录仔猪的采食量，计算日均采食量，试验结束后 计算料重比。料重比=日均采食量/平均日增重。结果发现，P抓V组的平均日增重为426. Ig， 预防组的平均日增重为526.8g，两者差异极显著，空白组的平均日增重为505.Og，药物对照 组的平均日增重为533.7g。阳DV组的日均采食量为714.9g，预防组的日均采食量为807.8邑， 两者差异极显著，空白组的的日均采食量为835.5g，药物对照组的日均采食量为829.6g。 阳DV组的料重比为1.68,预防组的料重比为1.53,空白组的料重比为1.65,药物对照组的料 重比1.55。实验表明，该中药复方可W大幅提升仔猪的日增重，对饲料的适口性没有任何影 响，采食量的增加与仔猪消化能力的提高有关。同时料重比下降，说明动物生长性能明显改 善，营养状态良好。
[0024] 试验最后Id仔猪清晨空腹前腔静脉采血，酶联免疫吸附法检测血清中阳DV的抗体 水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果发现，P邸V组的PEDV的抗体水平0D值为0.319，预防 组的PEDV的抗体水平0D值为0.402，两者差异极显著，空白组的PEDV的抗体水平0D值为 0.069，药物对照组的阳DV的抗体水平0D值为0.075。阳DV组的血清SOD含量为7.77ng/mL，预 防组的SOD含量为10.26ng/mL，两者差异显著，空白组的SOD含量为9.14ng/mL，药物对照组 的SOD含量为11.0化g/mL。实验表明，该中药复方可W大幅上调仔猪PEDV的抗体水平，特异 性的中和、消灭PEDV病原，从而增强机体免疫功能，预防该疫病的发生。SOD水平可反应出机 体细胞受自由基攻击的严重程度和机体清除自由基的能力，该中药复方可W减少过氧化作 用的发生，通过抑制肌肉的脂质氧化，参与调控禍体品质和肉质风味。
[0025] 试验最后Id仔猪清晨空腹前腔静脉采血，酶联免疫吸附法检测血清中TFF3和血清 NO含量，全自动生化分析仪检测血液尿素（UREA)水平。结果发现，P抓V组的TFF3含量为 15.60ng/mL，预防组的TFF3含量为18.9化g/mL，两者差异极显著，空白组的TFF3含量为 18.09ng/mL，药物对照组的TFF3含量为ig.Ung/血。阳DV组的血清NO含量为43.41皿〇1/1， 预防组的NO含量为38.22ymol/L，两者差异显著，空白组的NO含量为36.45皿ol/L，药物对照 组的NO含量为36.90皿o1/LdP抓V组的血清尿素水平为3.66mmol/L，预防组的尿素水平为 2.71mmol/L，两者差异极显著，空白组的尿素水平为3.05mmol/L，药物对照组的尿素水平为 2.98mmol/L"TFF3的主要生理功能是保护胃肠道粘膜上皮免受外源因子所致的损伤，W及 损伤后的上皮重建和再生。NO具有神经递质的作用，高水平的NO也是临床上断奶仔猪腹泻 脱水、形体消瘦、高病死率的主要原因。实验表明，该中药方剂能显著上调TFF3含量，提升动 物小肠粘膜防御功能，下调NO水平，改善小肠的蠕动性和肠液的电解质平衡，增强动物体 质。同时降低机体的尿素水平，运意味着蛋白质沉积增加，氨基酸平衡理想，加快了新陈代 谢的速度，促进生长发育。
[00%] 实施例2
[0027]同仁堂药店购得的中药叶下珠、牛至、慕枝草按质量比3:2:1制成散剂后，加10倍 蒸馈水于圆底烧瓶中，浸泡Ih后加热回流比，趁热用纱布过滤。药渣再分别加8倍水和6倍水 加热回流化。合并3次滤液，减压浓缩成生药浓度为Ig/mL的药液，进行仔猪体内试验。
[00%] 40头健康普通级"杜X大X长"Ξ元杂交断奶仔猪，35日龄，购自南京农业大学江 浦试验猪场。适应环境后随机分为4组，每组10头，公母各半。P抓V组和治疗组W106TCI化〇/ mL的P邸VAH2012/12株攻毒，每头灌服2.0mL 1次，然后隔离饲养2周。于试验的第Ξ周第Id 治疗组和药物对照组，颈部肌肉注射该中药复方液每天1次，每次2.OmL，持续2周。空白组和 PEDV组不颈部肌肉注射该中药复方液。试验总周期4周。
[0029] 每天定时观察仔猪粪便情况，记录腹泻头数，计算腹泻率，腹泻率（％) =总腹泻次 数/(总头数X试验天数）X 100。腹泻指数=粪便评分之和/供试猪总头数(评分标准见表 2 )，该指数越高，表示腹泻程度越严重。
[0030] 表2腹泻评分标准
[0031]
[0032] 结果发现，P抓V组的腹泻率为25.33,治疗组的腹泻率为11.31，两者差异极显著， 空白组的腹泻率为8.92，药物对照组的腹泻率为9.07 dP抓V组的腹泻指数为0.86，治疗组的 腹泻指数为0.51，两者差异极显著，空白组的腹泻指数为0.23,药物对照组的腹泻指数为 0.37。实验表明，该中药方剂能显著下调动物机体的腹泻率和腹泻指数，治疗该病毒病的最 主要临床症状，从而改善机体脱水状态，增进健康。
[0033] 试验最后Id仔猪清晨空腹前腔静脉采血，实时巧光定量PT-PCR法检测血清中PEDV 的抗原含量，酶联免疫吸附法检测血清中IFN-丫的含量。结果发现，PEDV组的抗原含量为 5.86(lg)AiL，治疗组的抗原含量为4.21(lg)AiL，两者差异极显著，空白组和药物对照组的 PEDV抗原均未检测到。PEDV组的IFN- 丫含量为15 2.7Pg/mL，治疗组的IFN- 丫含量为 203.4pg/mL，两者差异极显著，空白组的IFN- 丫含量为111.6pg/mL，药物对照组的IFN- 丫含 量为134.化g/mL。实验表明，该中药方剂能显著降低机体内的病毒含量，抑制病毒血症的产 生，具有明显的抗PEDV病毒作用。该中药方剂还能明显提高动物血清中IFN- γ的含量，该细 胞因子具有全面广谱的抗病毒作用，从而提高免疫功能。
[0034] 试验最后Id仔猪清晨空腹前腔静脉采血，全自动生化分析仪检测机体中IgG、IgM、 白蛋白（ALB)和球蛋白（GLO)的水平。结果发现PEDV组的IgG水平为1.35mg/mL，治疗组的IgG 水平为1.65mg/血，两者差异极显著，空白组的IgG水平为1.27mg/mL，药物对照组的IgG水平 为1.44mg/mL。阳DV组的IgM水平为0.63mg/mL，治疗组的IgM水平为1.21mg/mL，两者差异极 显著，空白组的IgM水平为0.70mg/mL，药物对照组的IgM水平为0.86mg/mUPEDV组的血清 ALB含量为28.17g/L，治疗组的ALB含量为35.52g/L，两者差异极显著，空白组的ALB含量为 32.60g/L，药物对照组的ALB含量为34.34g/L。阳DV组的血清化0含量为30.15g/L，治疗组的 GL0含量为37.07g/L，两者差异极显著，空白组的化0含量为35.51g/L，药物对照组的化0含 量为36.98g/L。实验表明，该中药方剂能大幅上调仔猪血清中IgG的水平，从而提高防病抗 病能力。同时还能显著提高IgM水平，影响体液免疫反应，加快初次应答。白蛋白作为一种胆 存蛋白质，可随时修补组织和提供能量。该中药方剂能显著上调ALB水平，增加机体肝脏代 谢功能。同时还能显著提高GL0水平，增强机体免疫功能。
[0035] W上所述仅是对本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制， 凡是依据本发明的技术实质对W上实施例所做的任何简单修改，等同变化与修饰，均属于 本发明技术方案的范围内。
【主权项】
1. 一种防治猪流行性腹泻病毒病的中草药复方，其特征在于，所述防治猪流行性腹泻 病毒病的中草药复方由叶下珠、牛至、荔枝草按质量比3:2:1组成。2. -种如权利要求1所述防治猪流行性腹泻病毒病的中草药复方的制备方法，其特征 在于，所述制备方法包括： 将叶下珠、牛至、荔枝草按质量比3:2:1制成散剂后，将散剂和饲粮按照质量比1:100混 合，喂养患病猪。3. 如权利要求2所述制备方法制备的防治猪流行性腹泻病毒病的中草药复方，其特征 在于，所述防治猪流行性腹泻病毒病的中草药复方的使用方法包括： 将叶下珠、牛至、荔枝草按质量比3:2:1制成散剂后，加10倍散剂质量的蒸馏水，浸泡Ih 后加热回流Ih，趁热用纱布过滤，药渣再分别加8倍质量的水和6倍质量的水加热回流Ih，合 并3次滤液，减压浓缩成生药浓度为I g/mL的药液，对患病猪肌肉注射。
【文档编号】A61P31/14GK105878369SQ201610460029
【公开日】2016年8月24日
【申请日】2016年6月22日
【发明人】胡屹屹, 茅爱华, 何孔旺, 温立斌, 倪艳秀, 郭容利, 范宝超
【申请人】江苏省农业科学院