一种酯化胆酸/Fe₃O₄磁性纳米复合体及其制备方法和应用

一种酯化胆酸/Fe₃O₄磁性纳米复合体及其制备方法和应用
【专利摘要】本发明提供了一种新型的酯化胆酸/Fe3O4磁性纳米粒子复合体，该复合体是用甲酸修饰胆酸使其酯化，与3?氨基丙基三乙氧基硅烷修饰后的含有氨基的Fe3O4磁性纳米粒子脱水缩合制得。运用X?射线衍射、透射电镜、红外光谱和热重分析方法进行表征，证实Fe3O4磁性纳米粒子上接枝了胆酸。该复合体借助胆酸是内源性的肝细胞特异性的天然配基、具有较好的生物兼容性以及Fe3O4磁性纳米粒子的磁学性能来实现药物的磁靶向传递，可作为一种重要的药物载体。盐酸阿霉素或盐酸表阿霉素被Fe3O4磁性纳米复合体包合后，不但降低了药物的毒副作用、提高了药物的生物相容性，而且在外磁场作用下该包合物还可用于靶向给药，能最大限度的发挥药物疗效。
【专利说明】
一种酯化胆酸/Fe3O4磁性纳米复合体及其制备方法和应用
技术领域
[0001 ]本发明涉及磁性纳米复合体及其药物包合物，具体涉及一种酯化胆酸/Fe3O4磁性纳米复合体及其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002]磁性纳米材料是近年来新兴的功能型材料，不仅具有纳米粒子的四大效应:尺寸效应、表面效应、体积效应和隧道效应，还具有优良的磁学效应。常用的磁性纳米材料主要是指过渡元素铁、镍、钴或其合金、氧化物等，Fe3Ck磁性纳米粒子因其高比表面积、生物相容性好、粒径可控、易制备和在外部磁场下快速响应等特性得到人们的特别关注，广泛应用于生物医药、材料化学、分离科学等领域，尤其是在磁靶向给药方面的应用引起了研究者们持续而广泛的关注。
[0003]胆酸(Cholicacid，CA)是人类四种主要胆汁酸中含量最丰富的一种，是人体中存在的一类具有生物活性和生物相容性的两亲性分子(亲水性和亲油性)。胆酸分子的留环上连有三个羟基和一个羧基易于进行化学修饰。胆酸是在肝细胞中以胆固醇为原料在酶催化条件下合成的，是肝脏清除胆固醇的主要方式，对降低胆固醇治疗有重要作用。另外某些胆酸还有镇痉、健胃、降低血液中胆留醇含量等作用。胆酸是内源性的肝细胞特异性的天然配基，具有较好的生物兼容性、高度的器官特异性和较高的转运能力，以胆酸及其衍生物为靶向载体，赋予药物包合物靶向定位功能，能够实现药物的靶向性传递，减少毒副作用。该包合物生物兼容性强、毒副作用低、具有潜在靶向定位作用和抗癌功能，在生物载体方面有着重要的应用价值。
[0004]盐酸阿霉素(DOX)是从放线菌发酵液中提取的蒽环抗生素，是一种氨基糖苷类的广谱抗肿瘤活性药物，临床上用于治疗急性白血病、乳腺癌、小细胞肺癌、膀胱癌等，作用机理是药物分子嵌入DNA链中阻断其复制而达到抗肿瘤的目的。盐酸表阿霉素(EPI)为桔红色粉末状结晶，溶于水，微溶于乙醇，不溶于氯仿、丙酮等溶剂，主要作用是直接嵌入DNA碱基对之间，干扰转录过程，阻止mRNA的形成。EPI能抑制DNA和RNA的合成，故对细胞周期各阶段均有作用，为细胞周期非特异性药物。在临床上被广泛用于治疗乳腺癌、肺癌、恶性淋巴瘤、卵巢癌、肾癌、胃癌、软组织肉瘤、恶生黑色素瘤等。但是，在应用盐酸表阿霉素进行化疗的过程中可能发生严重的不良反应，如骨髓抑制、心脏毒性和过敏反应等，尤其是药物蓄积引起的剂量依赖性的骨髓抑制、心脏毒性，成为限制其临床应用的主要因素。此类药物的安全使用问题也越来越受到社会各界的广泛关注，研究和制备该类药物的靶向给药系统一直是制药领域的热点。

【发明内容】

[0005]本发明的目的是提供一种毒副作用小、生物相容性好的酯化胆酸/Fe3O4磁性纳米复合体及其制备方法，进一步将该复合体与盐酸阿霉素(DOX)或盐酸表阿霉素(EPI)制备成药物包合物，并作为靶向药物。该靶向药物在外磁场作用下可使所含药物定位在病变部位释放，以降低药物不良反应，减少给药次数，发挥药物最大疗效。
[0006]本发明所提供的TC-APTES-Fe304-MNPs复合体，通过包括如下步骤的方法制备得到:
[0007](I )Fe304_MNPs的制备:将摩尔比为I: 1.5-2的FeCl2.4H20和FeCl3.6H20置于反应器中，加入反应器容量1/3-2/3的二次水，氮气保护下加热、搅拌至溶解，同时滴加浓氨水(25%)将反应液的pH调至9.5-10.5(优选10)，机械搅拌(优选800r/min)反应1.5-3小时(优选2小时)，冷却至室温，磁滞分离，黑褐色沉淀用二次水洗涤，再用乙醇洗涤至中性，40-700C (优选60 0C)真空干燥12小时，得到Fe3O4-MNPs ；
[0008](2)3-氨基丙基三乙氧基硅烷(APTES)修饰的Fe3O4-MNPs的制备:取摩尔比为90-110:1的Fe3O4-MNPs和APTES，先将Fe3O4-MNPs超声分散在乙醇溶液中，氮气保护下加入APTES，室温下机械搅拌(优选800r/min)7-8h，反应停止后磁滞分离，弃去上清液，沉淀用无水乙醇洗涤3次，40-7O °C (优选6O °C )真空干燥12小时，得到APTES修饰的磁性纳米粒子(APTES-Fe3O4-MNPs);
[0009](3)甲酸修饰胆酸的制备:将胆酸溶解在甲酸溶液中，在50-60 °C (优选55 °C)下，搅拌反应5-6小时后，产物旋转蒸发去除溶剂，所得固体过柱提纯(展开剂为乙醇:二氯甲烷=2:98); 40-700C (优选60 V)真空干燥12小时，得到甲酸修饰的酯化胆酸(TC)，密封保存；
[0010](4)酯化胆酸/Fe3O4磁性纳米复合体的制备:将酯化胆酸溶解于无水二氯甲烷中，加入缩水剂二环己基碳二亚胺、催化剂4-二甲氨基吡啶，搅拌lOmin，所述酯化胆酸、缩水剂和催化剂的摩尔比为1: 0.9-1.2:0.8-1.2;同时称取酯化胆酸质量18-22% (优选20 % )的APTES-Fe3O4-MNPs溶于无水二氯甲烷溶液中，超声使其均匀分散后加入到上述酯化胆酸溶液中，室温反应过夜;所得产物过滤，用二氯甲烷漂洗，再分别用二次水、饱和碳酸氢钠、二次水洗涤;40-70°C (优选600C)真空干燥12小时，得到酯化胆酸/Fe3O4磁性纳米复合体(TC-APTES-Fe3OfMNPs)。
[0011]本发明所提供的一种酯化胆酸/Fe304磁性纳米复合体与盐酸阿霉素(DOX)或盐酸表阿霉素(EPI)的包合物，通过如下方法制得:
[0012]将TC-APTES-Fe3OfMNPs加入pH=7.4的磷酸缓冲溶液中，超声混匀，再加入浓度为10—3mol/L的药物DOX或EPI，缓冲溶液和药物的体积比1:1，复合体与药物的质量比为3_5:1;在室温下超声lOmin，振荡24小时;磁滞分离(上清液稀释一定倍数后测定其荧光强度，确定包合物中药物含量)，沉淀在60 °C下真空干燥12小时，得到TC-APTES-Fe3O4-MNPs与药物DOX或EPI的包合物。
[0013]与现有技术相比本发明的有益效果:
[0014]本发明在Fe3O4磁性纳米粒子上接枝了胆酸，合成了一种新型酯化胆酸/Fe3O4磁性纳米粒子复合体。该复合体生物兼容性强、毒副作用低、具有靶向定位作用，在生物载体方面有着重要的应用价值。由于胆酸是内源性的肝细胞特异性的天然配基，具有较好的生物兼容性，以酯化胆酸为靶向载体，赋予药物包合物肝细胞靶向定位作用功能，不仅能够实现药物的靶向性，减少毒副作用，也能提高肝脏等重要器官对抗癌药物的吸收能力和器官对药物的选择性。本发明还通过改变缓冲液的pH值研究了酯化胆酸/Fe3O4磁性纳米复合体对DOX和EPI负载能力，及其在体外释放的能力。此外，还对其进行了细胞内药物分布评价。得出该复合体生物兼容性强、毒副作用低、具有肝细胞靶向定位作用和抗癌功能，在生物载体方面有着重要的应用价值。
【附图说明】
[0015]图1Fe3O4-MNPs的分离过程。图中:(a)制备的Fe3(k-MNPs分散在水溶液中；(b)Fe304-MNPs完全被分离。
[0016]图2Fe304_MNPs(a)、APTES-Fe3O4-MNPs(b)及TC-APTES-Fe3O4-MNPs (c)的红外光谱图。
[0017]图3Fe304_MNPs (a)和 TC-APTES-Fe3OfMNPs (b)的透射电镜照片。
[0018]图4TC-APTES-Fe304-MNPs 的 X-射线衍射图。
[0019]图5Fe304_MNPs、APTES-Fe304-MNPs和TC-APTES-Fe3OfMNPs的磁滞回线图。
[0020]图6Fe304_MNPs(a)、APTES-Fe3O4-MNPs (b)及TC-APTES-Fe3O4-MNPs (c)的热重分析图。
[0021]图7pH 对 TC-APTES-Fe3OfMNPs 与 EPI 和 DOX 负载作用的影响，F:TC-APTES-Fe304-MNPs吸附后上清液中DOX和EPI的荧光强度，Fo: DOX和EPI的荧光强度。
[0022]图8不同pH条件下两种药物(D0X和EPI)的体外释放曲线。
[0023]图9药物EP 1(a)和DOX(b)进入HepG2细胞效果图。
[0024]图10药物EPI(a)和DOX(b)流式实验效果图。
[0025]图11包合物不同浓度下的细胞毒性图。
【具体实施方式】
[0026]实施例1:TC-APTES-Fe3OfMNPs的制备
[0027](I )Fe304_MNPs的制备:称取Ig的FeCl2.4H20和2.7g的FeCl3.6H20置于反应器中，加入二次水200mL。氮气保护下加热至80°C，机械搅拌至溶解；同时滴加浓氨水(25% )将反应液的pH调至10，在800r/min的条件下反应2小时。待反应完毕后将反应液冷却至室温，磁滞分离，黑褐色沉淀用二次水洗涤3次，再用乙醇反复洗涤(至少3次)至中性。在60°C真空干燥12 小时，得到Fe3O4-MNP s ；
[0028](2)APTES-Fe304-MNPs 的制备:将 300mg 的 Fe3O4-MNPs 超声分散在 600mL 乙醇溶液中，氮气保护下加入120uL的APTES。室温下800r/min机械搅拌7h，反应停止后磁滞分离弃去上清液，沉淀用无水乙醇洗涤3次，在60 0C下真空干燥12小时，得到APTES-MNPs;
[0029 ] (3)甲酸修饰胆酸的制备:称取1.042g胆酸，将其溶解在I OmL甲酸溶液中。55 °C下，磁力搅拌5小时后，产物通过旋转蒸发仪去除溶剂，所得固体过柱提纯(展开剂:乙醇:二氯甲烷=2:98)。60°(:真空干燥12小时，得到甲酸修饰的酯化胆酸(TC)，密封保存；
[0030](4)TC-APTES-Fe304_MNPs复合体的制备:称取酯化胆酸Ig溶解于20mL无水二氯甲烧中，加入缩水剂二环己基碳二亚胺0.58g、催化剂4-二甲氨基卩比啶0.24g，搅拌1min。同时称取0.2g的APTES-Fe3O4-MNPs溶于无水二氯甲烷溶液中，超声lOmin，待其均匀分散后加入酯化胆酸溶液中，室温反应过夜。所得产物用二氯甲烷漂洗，再分别用二次水、饱和碳酸氢钠、二次水洗涤。60 °C真空干燥12小时，得到TC-APTES-Fe3O4-MNPs。
[0031]从图2红外光谱图显示:a谱线588cm—1处的吸收峰为Fe3O4-MNPs中Fe-O四面体的特征吸收，3424cm—1处为Fe3O4-MNPs表面-OH的伸缩振动峰。b为APTES-Fe3O4-MNPs的红外谱线，Fe3O4-MNPs被APTES包裹后Fe-O键在500-6500^1范围内的特征吸收峰稍有移动，1630cm—1和3420cm—1为-NH和-NH2的伸缩振动峰。b谱线的分析表明:APTES成功修饰到Fe3O4-MNPs表面。c谱线为TC-APTES-Fe3O4-MNPs的红外谱线，1114cm—1为酯化胆酸中C-C( =0)-0的强吸收峰，此峰强且宽，在酯的红外光谱中常为第一强峰。1716cm—1为酰胺中C = O伸缩振动，1630cm—1为-NH的伸缩振动峰，1559cm—1为N-H的弯曲振动，1410cm—1为C-N的伸缩振动，以上特征峰的出现证实了酯化胆酸成功修饰到APTES-Fe3O4-MNPs上。
[0032]图3的透射电镜照片显示:图中a和b分别为Fe3OfMNPs和TC-APTES-Fe3OfMNPs的TEM照片。从图中可看到Fe3O4-MNPs和TC-APTES-Fe3O4-MNPs形状近似球形或椭球形，分散性良好，没有明显的团聚现象。Fe3O4-MNPs和TC-APTES-Fe3OfMNPs的平均粒径分布在12 土2nm,在Fe304_MNPs超顺磁性粒径要求范围内(粒径小于20nm)，酯化胆酸的修饰对平均粒径影响不大。
[0033]图4为TC-APTES-Fe3OfMNPs 的 X-射线衍射图谱(XRD)。图中 2Θ 位于 30.27,35.52,43.38，53.70，57.30，62.，80相应的衍射峰分别对应于Fe3O4面心立方的(220)，(311)，(400)，(422)，(511)和(440)衍射面。上述结果与JCPDS(N0.85-1436)标准卡片中赤铁矿的图谱一致，表明合成的TC-APTES-Fe3OfMNPs具有立方尖晶石结构。选取TC-APTES-Fe3OfMNPs的最强衍射峰(311)用于粒径估算，由Scherrer公式(I)计算出TC-APTES-Fe3O4-MNPs的平均粒径为10.20nm，与TEM测得的粒径数据接近。
[0034]D = 0.89A/Bcos9(I)
[0035]其中，D为粒子的平均直径/nm，0.89为Scherrer常数，λ为0.154nm，是X-射线波长，B为衍射峰的半高宽，Θ为衍射角/rad。
[0036]图5 为 Fe3OfMNPs、APTES-Fe3OfMNPs 和 TC-APTES-Fe304-MNPs 的磁滞回线图。横坐标为外加磁场强度，纵坐标为单位质量磁性物质在外加磁场存在时的感应磁性大小。从下图可以看到，三条曲线都经过原点。当外加磁场为O时，以上三种物质的磁感应强度都为0，符合超顺磁的概念，说明以上三种物质均是超顺磁性的。根据磁力矩实验得到结果为:Fe3O4-MNPs的饱和磁化值可达到64emu/g，将其包裹以后磁性纳米复合物磁化值分别降至61emu/g。当用酯化胆酸进一步将APTES修饰后，其磁化值降到了56emu/g。分析原因我们认为APTES和酯化胆酸修饰后，没有明显的弱化Fe3O4MNPs磁性。
[0037]采用热重分析(TGA)进一步证实酯化胆酸修饰到Fe304-MNPs表面，并测定了表面修饰剂的含量。Fe3OfMNPs，APTES-Fe3OfMNPs和TC-APTES-Fe304-MNPs的热重曲线如图6所示。Fe3O4-MNPs在120 °C左右出现了首次失重，这是Fe3O4-MNPs表面吸附的溶剂(水或乙醇)挥发造成的。APTES-Fe3O4-MNPs在200-700°C范围内首先失重除去表面吸附溶剂后，接着由于3-氨基丙基的热分解失重，失重率为4.7%。热重分析APTES成功修饰到Fe3O4-MNPs表面。TC-APTES-Fe304-MNPs的失重曲线在155°C-275°C以下的失重(3.6%)归结为3-氨基丙基的热分解失重;在275 0C-600°C之间存在一个显著的失重(3.7 % )过程，这是由于修饰到磁纳米材料上的酯化胆酸等有机结构的热分解造成的。TC-APTES-Fe304-MNPs的失重曲线没有出现增重的过程，说明TC-APTES-Fe304-MNPs包覆Fe3O4MNPs后不容易被氧化，稳定性有了很大提高。通过分析及计算表明，酯化胆酸成功修饰到Fe3O4MNPs表面，修饰量为36.75mg/g。
[0038]实施例2:pH对TC-APTES-Fe3OfMNPs载药性能的影响
[0039]称取7份2mg的TC-APTES-Fe3O4-MNPs，分别加入4mL不同pH(3-9)磷酸缓冲液和4mL浓度为1X10—5mol/L的药物DOX。超声lOmin，溶液在室温下振荡24小时。反应完毕后，磁滞分离，上清液于491nm处测定其荧光强度。处理数据，探究pH对TC-APTES-Fe304-MNPs的载药性能的影响(TC-APTES-Fe3O4-MNPs对药物EPI载药性能的实验同DOX)。如图7所示，当pH < 8时，TC-APTES-Fe3O4-MNPs对DOX和EPI的负载量随着pH的增大而增大，且在pH=7时，负载量明显增加。pH为8-9时，负载量又稍有下降。综上所述，中性条件更有利于TC-APTES-Fe3O4-MNPs对药物的负载。因此选用PH=7.4来探究TC-APTES-Fe304-MNPs对药物(DOX或EPI)的负载作用。
[0040]实施例3:TC-APTES-Fe304-MNPs与盐酸阿霉素(DOX)或盐酸表阿霉素(EPI)制备包合物
[0041 ] 称取20mg TC-APTES-Fe3OfMNPs,加入4mLpH= 7.4的磷酸缓冲溶液中，超声混匀，再加入4mL浓度为10—5mol/L的DOX，在室温下超声1min，振荡24小时;磁滞分离(上清液稀释一定倍数后测定其荧光强度，确定包合物中药物含量)，沉淀在60°C下真空干燥12小时，得到TC-APTES-Fe3O4-MNPs与药物DOX的包合物(EPI包合物的制备条件同DOX包合物的制备)。上清液于491nm处测定其荧光强度，计算得到DOX和EPI包合物实际载药量分别为198.44mg/g和198.6mg/g。
[0042]实施例4:包合物DOX和EPI的体外释放研究
[0043]称取2份2mg的DOX包合物和2份2mg的EPI包合物，分别加入pH = 5和pH= 7.4的PB缓冲溶液各15mL。在37°C的水浴中计时释放，每隔一定时间取上清液测其荧光，计算其累计释放率。如图8所示，pH= 5时，DOX和EPI的累计释放率分别达到42.5%和45% ; pH=7.4时，DOX和EPI的累计释放率分别为18%和10%。对比释放数据可以看出，药物释放具有一定的pH依赖性。DOX和EPI的释放过程均分为两个阶段。在60min内释放曲线的斜率很大，说明此时释放速率较快，这可能是由于吸附在载体表明的DOX和EPI，由于浓度差产生扩散引起的。之后变化较缓慢，7小时左右达到平台。说明载体外围吸附的DOX和EPI达到了扩散平衡。pH= 5的缓冲液中药物释放率比pH=7.4的释放率高。这是由于中性条件下，药物和载体之间的氢键作用力较强;酸性条件下，药物和载体之间的作用力较弱，有利于药物释放。
[0044]实施例5:药物包合物进入HepG2肝癌细胞的研究
[0045]将EPI包合体和D0X包合体与人肝癌细胞HepG2分别孵育0.5h、lh、2h和4h，用荧光倒置显微镜观察其在细胞中的分布(如图9)。由图可知:随着时间的增长，逐渐在肝癌细胞的细胞质中观察到红色荧光并不断增大，证明包合体成功的进入细胞，并在不断释放药物。进一步通过流式细胞仪测定了EPI包合体和DOX包合体分别与细胞共孵育0.5h、lh、2h和4h的荧光强度(如图10)。其中，EPI包合体对应的荧光强度平均值分别为34.14、44.17、50.56、57.39。0(^包合体对应的荧光强度平均值分别为34.41、40.14、47.12、48.73。表明1'(:-APTES-Fe3O4-MNPs复合体是很好的药物载体，而且EPI效果更好。
[0046]实施例6: TC-APTES-Fe3O4-MNPs复合体细胞毒性评价及载药包合物对H印G2细胞杀死率的测定
[0047]如图11所示，用MTT法评价了 TC-APTES-Fe3O4-MNPs复合体的细胞毒性。在不同浓度下，良好的细胞存活率证明了复合体没有细胞毒性，说明该载体有优越的生物相容性。当载药包合物进入HepG2肝癌细胞，随着DOX包合物和EPI包合物浓度的增大，细胞活性在显著降低。此外EPI包合物的细胞杀死率明显高于D0X，这是由于药物释放的程度不同造成的。以上结果表明TC-APTES-Fe3O4-MNPs是一种无毒、生物相容性好、有效的DOX和EPI药物运载体。
【主权项】
1.一种酯化胆酸/Fe3O4磁性纳米复合体，其特征在于，通过包括如下步骤的方法制备得到: (I )Fe304_MNPs的制备:将摩尔比为I: 1.5-2的FeCl2.4Η20和FeCl3.6Η20置于反应器中，加入反应器容量1/3-2/3的二次水，氮气保护下加热、搅拌至溶解，同时滴加浓氨水将反应液的PH调至9.5-10.5，机械搅拌反应1.5-3小时，冷却至室温，磁滞分离，黑褐色沉淀用二次水洗涤，再用乙醇洗涤至中性，40-70 °C真空干燥12小时，得到Fe3O4-MNPs; (2)3-氨基丙基三乙氧基硅烷(APTES)修饰的Fe3O4-MNPs的制备:取摩尔比为90-110:1的Fe3O4-MNPs和APTES，先将Fe3O4-MNPs超声分散在乙醇溶液中，氮气保护下加入APTES，室温下机械搅拌7_8h，反应停止后磁滞分离，弃去上清液，沉淀用无水乙醇洗涤3次，40-70 °C真空干燥12小时，得到APTES-Fe3O4-MNPs ； (3)甲酸修饰胆酸的制备:将胆酸溶解在甲酸溶液中，在50-60°C下，搅拌反应5-6小时后，产物旋转蒸发去除溶剂，所得固体过柱提纯;40-70°C真空干燥12小时，得到甲酸修饰的酯化胆酸(TC)，密封保存； (4)酯化胆酸/Fe3O4磁性纳米复合体的制备:将酯化胆酸溶解于无水二氯甲烷中，加入缩水剂二环己基碳二亚胺、催化剂4-二甲氨基吡啶，搅拌lOmin，所述酯化胆酸、缩水剂和催化剂的摩尔比为1: 0.9-1.2:0.8-1.2;同时称取酯化胆酸质量18-22%的APTES-Fe3O4-MNPs溶于无水二氯甲烷溶液中，超声使其均匀分散后加入到上述酯化胆酸溶液中，室温反应过夜;所得产物过滤，用二氯甲烷漂洗，再分别用二次水、饱和碳酸氢钠、二次水洗涤;40-70°C真空干燥12小时，得到TC-APTES-Fe304-MNPs。2.如权利要求1所述的酯化胆酸/Fe3O4磁性纳米复合体，其特征在于，所述步骤(I)中反应液的pH调至10，机械搅拌转速800r/min，反应2小时。3.如权利要求1所述的酯化胆酸/Fe3O4磁性纳米复合体，其特征在于，所述步骤(2)中机械搅拌转速800r/min。4.如权利要求1所述的酯化胆酸/Fe3O4磁性纳米复合体，其特征在于，所述步骤(3)中在55 °C下，搅拌反应5-6小时。5.如权利要求1所述的酯化胆酸/Fe3O4磁性纳米复合体，其特征在于，所述步骤(3)中过柱提纯的展开剂为乙醇:二氯甲烷= 2:98。6.如权利要求1所述的酯化胆酸/Fe3O4磁性纳米复合体，其特征在于，所述步骤(4)中APTES-Fe3O4-MNPs的量为酯化胆酸质量的20%。7.如权利要求1所述的酯化胆酸/Fe3O4磁性纳米复合体，其特征在于，所述步骤(I)、(2)、(3)或(4)中真空干燥温度为60°C。8.如权利要求1所述的酯化胆酸/Fe3O4磁性纳米复合体在制备抗肿瘤靶向药物中的应用。9.一种酯化胆酸/Fe3O4磁性纳米复合体与盐酸阿霉素(DOX)的包合物，通过如下方法制得: 将权利要求1所述TC-APTES-Fe3O4-MNPs加入pH = 7.4的磷酸缓冲溶液中，超声混匀，再加入浓度为10—3mol/L的药物DOX或EPI，缓冲溶液和药物的体积比1:1，复合体与药物的质量比为3-5: I;在室温下超声1min，振荡24小时;磁滞分离，沉淀在60°C下真空干燥12小时，得到TC-APTES-Fe3O4-MNP s与药物DOX的包合物。10.—种酯化胆酸/Fe304磁性纳米复合体与盐酸表阿霉素(EPI)的包合物，通过如下方法制得: 将权利要求1所述TC-APTES-Fe3O4-MNPs加入pH = 7.4的磷酸缓冲溶液中，超声混匀，再加入浓度为10—3mol/L的药物DOX或EPI，缓冲溶液和药物的体积比1:1，复合体与药物的质量比为3-5: I;在室温下超声1min，振荡24小时;磁滞分离，沉淀在60°C下真空干燥12小时，得到TC-APTES-Fe3O4-MNPs 与 EPI 的包合物。
【文档编号】A61K47/48GK105903030SQ201610255261
【公开日】2016年8月31日
【申请日】2016年4月22日
【发明人】梁文婷, 李丹, 赵美玲, 弓韬, 董川, 双少敏
【申请人】山西大学