一种治疗烧烫伤的紫珠蒲黄治疗液及其制备方法
【专利摘要】本发明属中药制药领域，涉及一种治疗烧烫伤的紫珠蒲黄治疗液，是将裸花紫珠和蒲黄进行混合水提，提取液浓缩至每毫升提取液含裸花紫珠生药0.08～0.12g，得到紫珠蒲黄水提液；将紫珠蒲黄水提液与壳聚糖溶液混合后水浴，过滤，收集澄清液，分装，灭菌即得紫珠蒲黄液。本发明制备工艺简单，以裸花紫珠与蒲黄为原料进行科学配伍，协同作用，利用加热回流提取，水提液中有效成分的种类多，总有效成分含量高，具有显著的外用治疗烧烫伤作用，具有成本低、活性物质含量高、治疗烧烫伤效果好等特点，具有临床应用的巨大潜力。
【专利说明】
一种治疗烧烫伤的紫珠蒲黄治疗液及其制备方法
技术领域
[0001] 本发明属中药制药领域，涉及一种治疗烧烫伤的中药制剂，具体是一种治疗烧烫 伤的紫珠蒲黄治疗液及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 烧烫伤，古代医籍又称火烧伤、汤火伤、火疮、汤拔火伤等，总称水火烫伤，我国传 统中医药在治疗烧烫伤方面积累了丰富经验。
[0003] 目前，临床使用的治疗烧烫伤药物分为中药制剂、西药制剂以及中西医结合疗法。 常用于治疗烧伤的中药剂型有:油剂，如紫草油、獾油等;膏剂如烧伤药膏、烫伤膏等;散剂： 如烫火药、单味虎杖粉等;膜剂:如烧伤药膜等;水溶剂:如康复新滴剂、复方熊胆液等;喷雾 剂:如烧伤灵、烧伤喷雾剂等;还有霜剂、成膜剂，如复方芦荟霜剂、"白翻花"涂膜剂等。从文 献资料报道分析，在烧伤治疗中，冰片、地榆、大黄、黄连、黄柏、虎杖、乳香、没药、白芷、白芨 等10多味中药的使用频率最高，其中冰片、地榆、紫草、大黄、黄连、黄柏、虎杖具有清热解毒 功效，乳香、没药具有活血祛瘀、消肿生肌功效，白芷具有止痛消肿功效，白芨具有消肿生肌 功效J等等。
[0004] 由于烧伤感染的常见菌不断变迀，加之不同地区用药的不同，病原菌对药物的敏 感性也有不同，所以在临床用药是要根据具体情况而定。西药(化学药)对烧烫伤的作用在 于消炎，抗感染，生肌，促进伤口愈合，促进上皮生长等，包括大量的抗菌药物如青霉素、头 孢、磺胺嘧啶等，此外，西药对于小面积的烧烫伤治疗效果快捷，但是针对大面积的治疗则 显得力不从心，存在成本高和副作用强的缺点。华盛顿烧伤中心Durtschi等发现，常规使用 青霉素的烧伤病人并未能减少早期G +菌蜂窝组织炎，Wickman发现凡使用青霉素 5~7天者， 能更快地促发耐药的0-杆菌感染。磺胺嘧啶银是广泛使用的抗菌外用药，它对控制创面感 染有显著效果，但对细胞的活性亦有一定的损害作用，特别是使用高浓度的磺胺嘧啶银糊 剂或混悬剂，有使创面损害加重之弊。
[0005] 中草药种类繁多，作用不尽相同，各有其独特优势，临床应根据烧烫伤各个时期的 特点，选用不同作用的中草药，同时不断总结经验，进行广泛而深入的实验研究，寻找疗效 好、成本低、毒副作用小的中药制剂。
[0006] 裸花紫珠 (Callicarpa nudiflora Hook.et Arn.)是马鞭草科紫珠属植物，是我 国海南省黎族地区常用的特色民族药，在广东和广西等省地亦有分布，以海南五指山产的 为上品。裸花紫珠以地上干燥部分入药，具有止血消炎、散瘀消肿、解毒、驱风湿之功效，民 间主要用于治疗创伤出血、呼吸道及消化道出血、化脓性炎症等症，外用治烧、烫伤及外伤 出血。现今对裸花紫珠的研究主要集中在止血活性部位的发现、止血功能和止血制剂的保 护等方面。
[0007] 蒲黄(Pollen Typhae)为香蒲科植物水烛香蒲Typha angustifolia L.东方香蒲 Typha orientalis Presl或同属植物的干燥花粉。蒲黄为经典中药，《神农本草经》列为上 品，味甘，微辛，性凉，有凉血止血、活血祛瘀、止痛等功效，主治血瘀所致经闭、痛经、产后瘀 滞腹痛、跌打损伤和各种出血证。现代研究认为，黄酮苷类化合物为蒲黄发挥改善微循环、 止血、收敛的主要活性物质。
【发明内容】
[0008] 本发明的目的是提供一种治疗烧烫伤的紫珠蒲黄治疗液及其制备方法，将裸花紫 珠与蒲黄进行科学配伍，协同作用，经提取的水提液活性物质得率高，经过临床观察，该水 提液具有显著的外用治疗烧烫伤作用，具有临床应用的巨大潜力。
[0009] 一种治疗烧烫伤的紫珠蒲黄治疗液，是将裸花紫珠和蒲黄进行混合水提，提取液 浓缩至每毫升提取液含裸花紫珠生药0.08~0.12g，得到紫珠蒲黄水提液;将紫珠蒲黄水提 液与壳聚糖溶液混合后水浴，过滤，收集澄清液得到紫珠蒲黄治疗液，其中裸花紫珠和蒲黄 的重量比为:裸花紫珠:蒲黄=10:1~3;所述壳聚糖溶液是将壳聚糖粉末加入1 %冰醋酸溶 液中溶解而制得。
[0010] -种上述紫珠蒲黄治疗液的制备方法，其具体步骤如下：
[0011] 1)按配比分别取裸花紫珠和蒲黄，将裸花紫珠粉碎后按质量体积比为裸花紫珠： 水=1:15~20的比例加水浸泡2~4h，加入蒲黄，加热回流提取，过滤；反复加热回流提取2 ~4次，合并提取液，浓缩至每毫升提取液含裸花紫珠生药0.08~0.12g，得到紫珠蒲黄水提 液。
[0012] 2)取壳聚糖粉末加入1 %冰醋酸溶液中，配成含壳聚糖质量分数为1~3%的溶液 (壳聚糖/1 %醋酸=1~3 %，w/v)，静置20~25h，过滤即得壳聚糖溶液。
[0013] 3)在紫珠蒲黄水提液中加入壳聚糖溶液，壳聚糖溶液的加入量按体积比计为紫珠 蒲黄水提液的8~12%，60~70°(：水浴，10(^/1^11，搅拌1~311，静置12~1511。
[0014] 4)过滤，收集澄清液，分装，灭菌即得紫珠蒲黄液。
[0015] 本发明制备工艺简单，以裸花紫珠与蒲黄为原料进行科学配伍，协同作用，利用加 热回流提取，水提液中有效成分的种类多，总有效成分含量高，具有显著的外用治疗烧烫伤 作用，具有成本低、活性物质含量高、治疗烧烫伤效果好等特点，具有临床应用的巨大潜力。
【附图说明】
[0016] 图1是受试动物第1天和第12天创面对照图。
[0017]图2是第12天各组动物病理切片对照图。
【具体实施方式】
[0018] 下面结合实施例，对本发明的【具体实施方式】作进一步详细描述。以下实施例用于 说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
[0019] -、紫珠蒲黄治疗液的制备
[0020] 实施例一
[0021] 裸花紫珠 1.0 kg，粉碎，以15L水浸泡2h，加入蒲黄100g，100°C加热回流提取Ih，过 滤，滤渣再加15L水加热回流提取2次，每次lh，合并三次滤液，减压加热回流浓缩至每毫升 水提液含裸花紫珠生药0.1g，得到IOL水提液。加入IL壳聚糖溶液(壳聚糖/1 %醋酸=1 %， w/v)，65 °C水浴，lOOr/min搅拌Ih，澄清12h，过滤，分装灭菌得紫珠蒲黄治疗液8L(生药含量 0· llg/mL)ο
[0022] 实施例二
[0023] 裸花紫珠 1.0 kg，粉碎，以20L水浸泡2h，加入蒲黄200g，100°C加热回流提取2h，过 滤，滤渣再加20L水加热回流提取2次，每次2h，合并三次滤液，减压加热回流浓缩至每毫升 水提液含裸花紫珠生药0.09g，得到13L水提液。加入1.5L壳聚糖溶液(壳聚糖/1%醋酸= 3 %，w/v)，70 °C水浴，100r/min搅拌Ih，澄清14h，过滤，分装灭菌得紫珠蒲黄治疗液12L(生 药含量 0.10g/mL)。
[0024] 实施例三
[0025] 裸花紫珠 1.0 kg，粉碎，以18L水浸泡2h，加入蒲黄250g，100°C加热回流提取Ih，过 滤，滤渣再加18L水加热回流提取2次，每次lh，合并三次滤液，减压加热回流浓缩至每毫升 水提取液含裸花紫珠生药〇. 12g，得到12L水提液。加入1.3L壳聚糖溶液(壳聚糖/1 %醋酸= 2 %，w/v)，60 °C水浴，100r/min搅拌Ih，澄清12h，过滤，分装灭菌得紫珠蒲黄治疗液11L (生 药含量 0.12g/mL)。
[0026] 二、紫珠蒲黄液抑菌活性观察
[0027] 采用液体培养基法测定MIC，考察紫珠蒲黄治疗液与裸花紫珠水煎液对烧烫伤临 床常见分离细菌的抗菌活性。
[0028] 1.供试液配置:取灭菌试管10只，分别加入2mL肉汤液体培养基编号为1-10,取浓 缩药液2ml加入1号试管，混勾，从1号管中取2ml加入2号管，依次稀释，第10管中吸出2ml弃 去。取11号试管加入2ml肉汤液体培养基做空白对照。
[0029] 2.菌种准备:取18小时培养的各菌营养肉汤培养物，用肉汤将此菌原液浊度调整 到光学上相当于0.5麦氏标准管（可用光度计或目测），0.5麦氏标准的培养物约含1~2 X 108CFU/ml，通过10倍稀释0.5麦氏标准菌液可得到细菌应用液。得到的菌种应用液尽量在 15min内使用。
[0030] 3.分别取0.1ml菌种应用液加入1~11号小试管中，37°C恒温箱中培养18小时。比 较各管菌种生长情况，如受试药颜色不透明，无法比较，再用接种环从各试管中取一环分别 接种到MH平皿上，培养18小时观察有无细菌生长，以细菌不生长的最高药物稀释度为该药 的最低抑菌浓度(MIC) HC抑菌观察结果见表1。
[0031 ] 表1紫珠蒲黄液与裸花紫珠水煎液抑菌效果比较(m!?/mL，n = 3)
[0033] 4.抑菌活性根据MIC抑菌观察结果(见表1)，表明紫珠蒲黄液较传统的裸花紫珠水 煎液对化脓性链球菌、大肠杆菌和铜绿假单胞菌的抑菌活力增强，对金黄色葡萄球菌和伤 寒沙门氏菌活力相当。在整体预防和治疗烧烫伤后感染并发症临床效果增强。
[0034]三、紫珠蒲黄治疗液治疗烧烫伤疗效观察
[0035] 1 .实验动物：雄性新西兰兔2 0只，体质量2~2 . 5 k g，实验动物合格证号： 44005900002274,实验动物使用合格证号：44005900002274，均由广州中医药大学实验动物 中心提供。
[0036] 2.实验药品：磺胺嘧啶银乳膏，由新乡市华信药业有限公司提供，批号：150306;水 合氯醛，由天津市科密欧化学试剂有限公司提供，批号= 20130325,用蒸馏水配制成10%水 合氯醛溶液;速眠新注射液，由吉林省敦化市圣达动物药品有限公司提供，批号：150128;实 施例一提供的紫珠蒲黄治疗液。
[0037] 3.模型制作及分组:实验开始前，新西兰兔背部剃毛，以速眠新和水合氯醛混麻， 用长直钳夹住面积为3cmX 3cm的64层纱布浸入100°C开水5分钟，取出，立即置于待烫部位 皮肤，上压500g质量的水晶后开始计时15秒，造模后单笼饲养。
[0038] 动物分组及处理：
[0039]空白组(3只）：不作烫伤处理；
[0040] 模型组(7只）：做烫伤，不给药，第1次造模后处死2只取材作HE染色观察，第2次造 模后取1只兔子活检，取烫伤部位作HE染色观察；
[0041] 磺胺嘧啶银乳膏阳性组(下称阳性组，5只）：每天上、午涂抹乳膏各1次，用药量约 2g，连续12天；
[0042] 紫珠蒲黄治疗液供试组(下称供试组，5只）：上、下午各用用中药喷淋创烫伤部位， 中药完全覆盖创面，连续12天；
[0043] 检测:每天换药时拍照观察成痂状况，痂下积液可采用低位开口引流，保持创面干 燥。治疗结束后，在创缘取组织作HE染色观察。
[0044] 4.实验结果
[0045] (1)大体观察:各组动物造模后均能正常苏醒，第1天食欲较差，第2天开始逐渐恢 复正常，观察12天，动物均存活。依据创面愈合直观观察，阳性组和供试组显著优于模型组。 结果见图1。
[0046] (2)病理观察:对试验第12天动物皮肤组织进行病理切片观察，结果见图2,正常空 白对照组，皮肤整体结构基本正常，无明显病变;无明显炎症细胞浸润和坏死;模型组皮肤 大部分表皮糜烂坏死脱落，外围可见脱落碎肩（如浅黑色箭头所示），真皮处可见红细胞外 溢，伴大量炎症细胞浸润(如黑色箭头所示）；阳性对照组皮肤表皮上结痂，皮肤可见毛囊角 化过度(如黑色箭头所示），真皮处可见少量炎症细胞浸润(如浅黑色箭头所示）；紫珠蒲黄 治疗液供试组皮肤部分表皮呈带状(如黑色箭头所示），组织无其他明显病变，基本正常。
[0047]结果表明：磺胺嘧啶银乳膏阳性组和紫珠蒲黄治疗液供试组对II度烫伤兔模型治 疗效果显著优于模型组，且认为对创面的修复紫珠蒲黄治疗液组效果优于阳性组。
[0048]以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人 员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰 也应视为本发明的保护范围。
【主权项】
1. 一种治疗烧烫伤的紫珠蒲黄治疗液，其特征是将裸花紫珠和蒲黄进行混合水提，提 取液浓缩至每毫升提取液含裸花紫珠生药0.08~0.12g，得到紫珠蒲黄水提液;将紫珠蒲黄 水提液与壳聚糖溶液混合后水浴，过滤，收集澄清液得到紫珠蒲黄治疗液，其中裸花紫珠和 蒲黄的重量比为:裸花紫珠:蒲黄=10:1~3;所述壳聚糖溶液是将壳聚糖粉末加入1 %冰醋 酸溶液中溶解而制得。2. -种权利要求1所述的紫珠蒲黄治疗液的制备方法，其特征在于，其具体步骤如下： 1) 按配比分别取裸花紫珠和蒲黄，将裸花紫珠粉碎后按质量体积比为裸花紫珠:水= 1:15~20的比例加水浸泡2~4h，加入蒲黄，加热回流提取，过滤；反复加热回流提取2~4 次，合并提取液，浓缩至每毫升提取液含裸花紫珠生药〇. 08~0.12g，得到紫珠蒲黄水提液； 2) 取壳聚糖粉末加入1 %冰醋酸溶液中，配成含壳聚糖质量分数为1~3%的溶液，静置 20~25h，过滤即得壳聚糖溶液； 3) 在紫珠蒲黄水提液中加入壳聚糖溶液，壳聚糖溶液的加入量按体积比计为紫珠蒲黄 水提液的8~12%，60~70°(：水浴，10(^/1^11，搅拌1~311，静置12~1511 ; 4) 过滤，收集澄清液，分装，灭菌即得紫珠蒲黄液。
【文档编号】A61P17/02GK105943743SQ201610461982
【公开日】2016年9月21日
【申请日】2016年6月22日
【发明人】易博, 冯世秀, 李鸿明, 林海, 徐文彤, 苏东兰
【申请人】中国人民解放军第八七中心医院, 中国人民解放军第一八七中心医院