一种七叶皂苷的新用图
【专利摘要】本发明提供了一种七叶皂苷及其衍生物在制备治疗中耳炎方面的新用途，更具体地说是治疗化脓性中耳炎、分泌性中耳炎、航空性中耳炎的医药用途。
【专利说明】
一种七叶皂苷的新用途
技术领域
[0001] 本发明涉及医药领域，具体涉及七叶皂苷及其衍生物在制备治疗中耳或内耳炎症 性疾病中的用途。
【背景技术】
[0002] 中耳炎是耳鼻喉科常见疾病，为累及中耳（包括咽鼓管、鼓室、鼓窦及乳突气 房）全部或部分结构的炎性病变，一般临床常见分泌性中耳炎及化脓性中耳炎两大类。 近年研究发现，细菌感染、咽鼓管机械性阻塞及功能障碍、免疫反应等均与中耳炎发生相 关【杨琳，赵守琴.分泌性中耳炎发病机制的研究进展.听力学及言语疾病杂志.2014; 22(3) :328-331】。另外，气压骤变【刀丽梅.航空性中耳炎的现代研究进展.工企医 刊.2014 ;27(1) :605-607】和颅脑放疗【张明洁，刘业海，李慧，等.鼻咽癌放疗后并发分泌 性中耳炎的临床分析[J].中华耳科学杂志，2013,11 (2) :256-258.】亦可诱发中耳炎，航空 性中耳炎在飞行人员耳鼻咽喉住院病症谱和停飞病症谱中均排在第1位。化脓性中耳炎主 要为肺炎球菌、流感嗜血杆菌、溶血性链球菌、葡萄球菌、变形杆菌等感觉中耳粘膜的化脓 性炎症，常继发于上呼吸道感染。通常情况下，针对急性化脓性中耳炎患者，应尽早使用足 量抗生素或其他抗菌药物控制感染，但治疗效果并不理想，大量患者转为慢性化脓性中耳 炎。分泌性中耳炎是，是一种中耳非化脓性病变，临床表现为因中耳积液导致听力下降、耳 闷胀感、上呼吸道感染等症状。各类中耳炎均可影响中耳结构功能，致听力障碍，乃至鼓室 硬化、鼓膜穿孔、听骨坏死等病变，严重影响患者生活质量。对于患有该疾病的儿童，极易造 成听力损失、语言功能障碍等。
[0003] 近年研究表明，急性化脓性中耳炎和急性分泌性中耳炎都与细菌感染有关，常出 现于儿童，早期都有耳痛、听力下降、鼓膜急性充血表现，临床难以区分；有学者认为，各型 中耳炎其实是同一个炎症反应过程在修复、转归不同阶段的表现形式，各型中耳炎可并存， 因此，较多的文献和近年的分类将急性化脓性中耳炎和急性分泌性中耳炎统称为急性中耳 炎（acute otitis media，Α0Μ)。其中最困扰临床的是复发性AOM和顽固性Α0Μ。复发性 AOM是指在6个月内发作3次以上或12个月内发作4次以上，顽固性AOM是指在抗生素治 疗期间仍然持续有中耳感染症状或抗生素治疗结束后1个月内仍然反复发作的AOM【杨名 保，武勇进，郑加创，等.复发性中耳炎中耳渗液细菌生物膜的观察及方法学研究[J].中 华临床医师杂志（电子版），2012,18:078.】。然而，其确切发病机制、抗生素耐药机制以 及反复发作的原因等至今尚未完全明确。2001年Post首次提出感染细菌形成细菌生物 膜（baccterial biofilms，BBF)与感染菌抗生素耐受和分泌性中耳炎发病相关【Post J C. Candidate's Thesis:direct evidence of bacterial biofilms in otitis media[J]. The Laryngoscope，2001，111(12):2083-2094.】〇
[0004] 七叶皂苷又称七叶皂苷酸，为从七叶树科七叶树属植物种子提取得到的总皂苷、 β -七叶皂苷或异七叶皂苷等的总称。目前多以总七叶皂苷钠应用于临床，主要含有4种 成分。其中七叶皂苷A和B是β-型七叶皂苷，其结构基本相同，因而七叶皂苷A和B可合 并用结构式（1)表示；而七叶皂苷C和D也互为异构体，属于异性七叶皂苷，又称异七叶皂 苷，可合并结构式（2)来表示。
[0006] 七叶皂苷及其盐在临床上常用于治疗各种原因引起的脑水肿及伴发的脑功能失 调、各种原因（如创伤、烧伤、手术）引起的炎症与肿胀、静脉回流障碍性疾病等，具有很强 的抗炎、抗渗出作用，能明显降低急性炎症的渗出。专利CN103948614A公开了七叶皂苷及 其盐用于在制备α-受体阻滞剂药物和治疗慢性非细菌性前列腺炎药物中的新用途，专 利CN1575797公开了七叶皂苷有其盐在制备治疗手术后肠功能恢复药物中的用途，专利 CN1896092A公开了七叶皂苷赖氨酸盐的制备方法和用途，专利CN1376675A公开了七叶皂 苷精氨酸盐的制备方法及其用途。无论七叶皂苷的碱金属盐还是有机碱盐，其药理活性均 仅与七叶皂苷相关，而与其成盐碱基无关。但七叶皂苷及其盐对中耳炎的治疗作用，未见公 开报道及临床应用。
【发明内容】
[0007] 本发明提供了七叶皂苷及其衍生物在治疗中耳炎中的应用。
[0008] 本发明所述的七叶皂苷衍生物可以是七叶皂苷与有机碱或无机碱金属所成的盐， 其中有机碱优选碱性氨基酸，如精氨酸七叶皂苷；无机碱金属优选七叶皂苷钠。
[0009] 本发明所述的中耳炎为化脓性中耳炎、分泌性中耳炎、航空性中耳炎。
[0010] 本发明所述的七叶皂苷及其衍生物的使用剂量为I-IOOmg(以七叶皂苷钠计）/ 天，优选地5_20mg(以七叶皂苷钠计）/天。
[0011] 本发明所述的七叶皂苷可从天师栗、七叶树果实等植物中提取，也可通过化学方 法制备而成。
[0012] 本发明所述的七叶皂苷及共衍生物在用于治疗中耳炎时，可通过静脉或口服途径 全身给药，亦可采用凝胶剂、滴剂等局部给药。
【具体实施方式】
[0013] 本发明以七叶皂苷钠、精氨酸七叶皂苷为例进行进一步的描述，通过下列试验来 证明七叶皂苷及其衍生物在制备治疗中耳炎中的应用，然而，本发明的范围并不限于下述 实例。本领域的专业人员能够理解，在不背离本发明的精神和范围的前提下，可以对本发明 进行各种变化和修饰。
[0014] 实施例1 :七叶皂苷钠对肺炎链球菌致大鼠急性化脓性中耳炎的治疗作用
[0015] 采用经听泡穿刺注入肺炎链球菌到大鼠中耳腔，复制大鼠化脓性中耳炎，考查七 叶皂苷单用及与抗生素合用对急性化脓性中耳炎的治疗作用。所采用肺炎链球菌系分离培 养自一例急性化脓性中耳炎患者的中耳脓性分泌物。大鼠造模后24小时，采用静脉注射或 滴耳给予七叶皂苷钠，连续给药7天。末次给药后24小时，采用鼓室声导抗测试记录鼓室 导抗图及峰压值，随后无菌操作下用棉签拭取实验耳内积液作细菌培养鉴定。
[0016] 实验期间，所有大鼠行为、饮食、活动均正常，无意外死亡，实验结果表明（见表 1)。静脉注射或外耳内滴入七叶皂苷钠或静脉注射精氨酸七叶皂苷均可明显改善化脓性 中耳炎大鼠鼓室压图异常及鼓室峰压值改变，给药组中耳渗出液细菌培养阳性率亦明显降 低。表明七叶皂苷钠和精氨酸七叶皂苷均对化脓性中耳炎有一定治疗作用。
[0017] 表1.七叶皂苷钠对急性化脓性中耳炎鼓室声导抗测试结果及中耳积液细菌培养 结果的影响（^ ±5)
[0018]
[0019] 与正常组比较：aP〈0. 01 ;与模型组比较：bP〈0. 01。
[0020] 实施例2 :七叶皂苷钠对金黄色葡萄球菌致豚鼠急性化脓性中耳炎的治疗作用
[0021] 金黄色葡萄球菌是中耳炎主要致病菌之一，采用听泡内反复注射金黄色葡萄球菌 复制豚鼠化脓性中耳炎模型，考察了七叶皂苷钠对慢性化脓性中耳炎所致豚鼠听力障碍的 治疗作用。
[0022] 实验选用听性脑干反射正常健康雄性豚鼠，水合氯醛麻醉后，在显微镜下右侧鼓 膜前下方穿刺，向鼓室内注射制备金黄色葡萄球菌悬液〇. 2ml。正常对照组耳内注入0. 2ml 无菌生理盐水。2天后，同样方法沿前次注射针孔再次向鼓室内注射制备的浓度金黄色葡萄 球菌悬液。再隔2天重复一次，共注射3次。最后1次注射完成24h后，显微镜下观察：豚 鼠右耳鼓室内有脓液，鼓膜显著充血、红肿，细菌培养为接种的金黄色葡萄球菌者作为化脓 性中耳炎模型。随后按表2所示分组给药，连续用药10天后，行听性脑干反应（ABR)测定， ABR的阈值按豚鼠的III波作为标准。结果见表2。实验耳注射金黄色葡萄球菌，复制化脓 性中耳炎后，ABR阈值明显升高，表明实验耳听力异常，静脉注射或滴耳给予七叶皂苷钠或 静脉注射给予精氨酸七叶皂苷后，ABR阈值较模型组明显降低，表明七叶皂苷钠和精氨酸七 叶皂苷均可改善化脓性中耳炎听力障碍。
[0023] 表2.七叶皂苷钠对豚鼠急性化脓性中耳炎ABR阈值的改善作用（
[0026] 与正常组比较：aP〈0. 01 ;与模型组比较：bP〈0. 01。
[0027] 实施例3 :七叶皂苷钠对豚鼠航空性中耳炎的治疗作用
[0028] 于豚鼠左鼻腔放置聚氯乙烯（PVC)管直至鼻咽部，造成同侧鼻腔、鼻窦和鼻咽部 炎症，并通过低压舱模拟航空过程气压改变，建立航空性中耳炎动物模型，考查七叶皂苷钠 对航空性中耳炎的治疗作用。
[0029] 实验选用耳廓反射灵敏，鼓膜完整，结构标志清楚，听性脑干反射正常的健康雄性 豚鼠，水合氯醛麻醉后，用直径2_，长度20_的PVC管自豚鼠左鼻腔插入直至鼻咽部后留 置，正常组行插管后随即移除PVC管。于插管后第二天按表3所示将模型动物分组给药，连 续给药10天，末次给药后24小时，将动物置低压舱，以15m/s的速度上升至5000m高度，停 留5min后以70m/s的速度下降至地面，重复上升、下降3次。24h后，行电耳镜检查鼓动膜 充血情况。参考实施例2方法行听性脑干反应（ABR)测试，结果见表3。
[0030] 表3.七叶皂苷钠对低压舱试验致航空性中耳炎豚鼠鼓膜充血和ABR阈值升高的 影响（)
[0032] 与正常组比较：aP〈0. 01 ;与模型组比较：bP〈0. 01。
[0033] 左侧鼻腔插管后低压舱试验致豚鼠左耳鼓膜严重充血，模型组评分结果明显高于 正常对照组，静脉注射或滴耳给予七叶皂苷钠后，患侧耳鼓膜充血评分明显降低。ABR阈值 测定结果表明模型组ABR阈值明显高于正常组，表明航空性中耳炎可致听力障碍，给予七 叶皂苷钠后，ABR阈值明显降低。本实施例结果证明七叶皂苷钠和精氨酸七叶皂苷均对航 空性中耳炎所致中耳病理性损伤和听力障碍均有明确的改善作用。
[0034] 实施例4 :七叶皂苷钠对分泌性中耳炎的治疗作用
[0035] 分泌性中耳炎是一种常见耳部疾病，以耳胀闷感、耳痛、传导性耳聋、耳鸣为主要 临床表现，又名非化脓性中耳炎、卡他性中耳炎、渗出性中耳炎、浆液性中耳炎、粘液性中耳 炎、胶耳等。本病发病率有增高趋势，国外健康普查报道发病率均在10%以上，成人及儿童 均可发病，但以儿童多见，是儿童最常见致聋原因。其确切发病机制不详，但感染和局部变 态反应等可能参与了本病发生过程。
[0036] 采用中耳内接种灭活肺炎链球菌复制分泌性中耳炎模型，考察七叶皂苷钠对分泌 性中耳炎的治疗作用。
[0037] 本实验选用肺炎链球菌系分离培养自一例急性化脓性中耳炎患者的中耳脓性分 泌物。实验前取出该菌株于血琼脂斜面上37°C培养24h，用无菌生理盐水洗下肺炎链球菌 制成细菌悬液，并用721型分光光度计调整细菌密度为IX IO8CFUAiI。接种前水浴65°C 30 分钟灭活细菌，并做细菌培养确保无细菌生长后备用。
[0038] 实验选用耳廓反射灵敏，鼓膜完整，结构标志清楚，听性脑干反射正常健康雄性豚 鼠，水合氯醛麻醉后，在显微镜下右侧鼓膜前下方穿刺，向鼓室内注射灭活肺炎链球菌悬液 0. 2ml，左耳作为对照耳，注入0. 2ml无菌生理盐水。5天后行耳内窥镜检查，鼓室有积液为 造模成功。取造模成功者，按下表4所示分组给药。末次给药后24h，各组动物行听性脑 干反应（ABR)测定。结果见表4,模型组ABR阈值较正常对照组明显升高，差异有统计学 意义（P〈0. 01)，表明鼓室注射灭活肺炎链球菌所致分泌性中耳炎可致听力障碍。静脉注 射给药或滴耳给予七叶皂苷钠，或静脉注射精氨酸七叶皂苷各组ABR阈值明显低于模型组 (P〈0. 01)，表明七听皂苷钠或精氨酸七叶皂苷对分泌性中耳炎具有治疗作用。
[0039] 表4.七叶皂苷对灭活肺炎链球菌致豚鼠分泌性中耳炎ABR阈值的改善作用 (A· ± S )
[0041] 与正常组比较：aP〈0. 01 ;与模型组比较：bP〈0. 01。
【主权项】
1. 七叶皂苷及其衍生物在制备治疗中耳炎方面的用途。2. 根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述的中耳炎为化脓性中耳炎、分泌性中 耳炎、航空性中耳炎中的任意一种。3. 根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述的七叶皂苷衍生物为七叶皂苷与有 机碱或无机碱形成的盐。4. 根据权利要求3所述的用途，其特征在于：所述七叶皂苷与无机碱形成的盐优选七 叶皂苷钠。5. 根据权利要求3所述的用途，其特征在于：所述的七叶皂苷与有机碱形成的盐优选 精氨酸七叶皂苷。6. 根据权利要求1-5任一项所述的用途，其特征在于：七叶皂苷及其衍生物的使用剂 量为l-100mg(以七叶皂苷钠计）/天，优选地5-20mg(以七叶皂苷钠计）/天。
【文档编号】A61K31/704GK105982907SQ201510076067
【公开日】2016年10月5日
【申请日】2015年2月12日
【发明人】王振华, 郑庆印, 傅风华, 杨小平, 宋艳芹, 崔香
【申请人】山东国际生物科技园发展有限公司