薰衣草抗肿瘤提取物及其组合物的制备方法和医药用图
【专利摘要】本发明属医药技术领域，具体涉及一种维吾尔药薰衣草抗肿瘤提取物及其组合物的制备方法和其在肝癌、肺癌、胃癌、肠癌、胰腺癌、结肠癌、宫颈癌、脑胶质瘤等恶性肿瘤的预防及治疗上的用途。所述的提取物通过如下方法获得：维吾尔药薰衣草经有机溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用体积比100:5的石油醚：丙酮混合溶剂洗脱，继用体积比100:12的石油醚：丙酮混合溶剂洗脱，石油醚：丙酮100:12混合溶剂洗脱液干燥后即得；或先用体积比100:17的石油醚：丙酮混合溶剂洗脱，继用体积比100:30的石油醚：丙酮混合溶剂洗脱，石油醚：丙酮100:30混合溶剂洗脱液干燥后即得。
【专利说明】
薰衣草抗肿瘤提取物及其组合物的制备方法和医药用途
技术领域
[0001] 本发明属医药技术领域，具体涉及一种维吾尔药薰衣草抗肿瘤提取物及其组合物 的制备方法或/和其在肝癌、肺癌、胃癌、肠癌、胰腺癌等恶性肿瘤的预防及治疗上的用途。
【背景技术】
[0002] 本品为唇形科薰衣草属植物，学名Lavand μ La angustifolia Mill。分布于我国 新疆。成年植株既耐低温，又耐高温，在收获季节能耐高温40°C左右。薰衣草是一种性喜干 燥、需水不多的植物，年降雨量在600-800_比较适合。返青期和现蕾期，植株生长较快，需 水量多；开花期需水量少；结实期水量要适宜；冬季休眠期要进行冬灌或有积雪覆盖。薰衣 草属长日照植物，生长发育期要求日照充足，全年要求日照时数在2000h以上。植株若在阴 湿环境中，则会发育不良、衰老较快。薰衣草根系发达，性喜土层深厚、疏松、透气良好而富 含硅钙质的肥沃土壤。酸性或碱性强的土壤及黏性重、排水不良或地下水位高的地块，都不 宜种植。薰衣草具有镇静催眠，解痉，抗菌，神经保护，降脂等功效。
[0003] 本发明通过系统地筛选研究，意外地发现薰衣草提取物具有显著抗肿瘤活性，即 薰衣草提取物对乳腺癌、宫颈癌、肝癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、脑胶质瘤等恶性肿瘤的 具有很好的预防及治疗作用，可以应用于癌症的预防和治疗。
【发明内容】
[0004] 本发明所解决的技术问题是提供一种薰衣草提取物。
[0005] 本发明还提供了以薰衣草提取物为主要活性成分的组合物。
[0006] 本发明同时提供了薰衣草提取物及其组合物的制备和在制备抗肿瘤药物中的应 用。
[0007] 本发明是通过如下技术方案实现的：
[0008] 维吾尔药薰衣草经超声提取，提取液浓缩后，用硅胶（SiO2)柱分离，上样后的硅胶 柱，用石油醚：丙酮混合溶剂梯度洗脱（石油醚：丙酮，比例见表1)，各石油醚：丙酮比例混 合溶剂洗脱液，浓缩，干燥后，利用体外抗肿瘤活性筛选体系测试其抗肿瘤活性，意外地发 现先用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:0-100:5,体积比）洗脱，继用石油醚：丙 酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:6-100:12,体积比）洗脱，石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚： 丙酮，100:6-100:12,体积比）洗脱液干燥后，具有显著地抗肿瘤活性。优选地，先用石油 醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:5,体积比）洗脱，继用石油醚：丙酮混合溶剂（石油 醚：丙酮，100:12,体积比）洗脱，石油醚：丙酮100:12洗脱液干燥即得。本发明的抗肿瘤活 性的化合物，可以通过以上方法，得到富集，从而与其他杂质类成分分离开。该活性提取物 从未见文献报道，其100:6-100:12薄层色谱（TLC)分析表征如图1，TLC分析条件：GF 254娃 胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮=3 :1 :1，显色方法：香草醛浓硫酸显色。
[0009] 维吾尔药薰衣草经超声提取，提取液浓缩后，用硅胶（SiO2)柱分离，上样后的硅胶 柱，用石油醚：丙酮混合溶剂梯度洗脱（石油醚：丙酮，比例见表1)，各石油醚：丙酮比例混 合溶剂洗脱液，浓缩，干燥后，利用体外抗肿瘤活性筛选体系测试其抗肿瘤活性，意外地发 现先用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :17,体积比）洗脱，继用石油醚：丙酮混 合溶剂（石油醚：丙酮，100:20-100:30,体积比）洗脱，石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙 酮，100:20-100:30,体积比）洗脱液干燥后，具有显著地抗肿瘤活性。优选地，先用石油醚： 丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:17,体积比）洗脱，继用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚： 丙酮，100:30,体积比）洗脱，石油醚：丙酮100:30洗脱液干燥即得。本发明的抗肿瘤活性 的化合物，可以通过以上方法，得到富集，从而与其他杂质类成分分离开。该活性提取物从 未见文献报道，其100:20-100:30的TLC分析表征如图2, TLC分析条件：GF254硅胶板，展开 系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮=3 :1 :1，显色方法：香草醛浓硫酸显色。
[0010] 具体，发现过程如下：
[0011] 1、薰衣草超声提取物的制备
[0012] 取维吾尔药薰衣草20g，经100mL甲醇超声提取15min，提取液浓缩后，得提取物 SN0339A，样品I. 3065g，将醇提后的药渣经200ml水煮沸提取2h，提取液浓缩后，得提取物 SN0339B，样品0. 6071g，样品合并共I. 9136g，留样0. 8098g，剩余I. 1038g上柱，拌样硅胶 3g，空白硅胶10g，梯度洗脱溶剂为石油醚-丙酮系统。
[0013] 2、石油醚：丙酮混合溶剂梯度洗脱方法和结果
[0014] 取维吾尔药薰衣草20g，经100mL甲醇超声提取15min，提取液浓缩后，得提取物 SN0339A，样品I. 3065g，将醇提后的药渣经200ml水煮沸提取2h，提取液浓缩后，得提取物 SN0339B，样品0. 6071g，样品合并共I. 9136g，留样0. 8098g，剩余I. 1038g上柱，甲醇溶解， 共用甲醇15ml。上硅胶柱色谱，拌样硅胶3g，空白硅胶10g，玻璃柱内径2. 0cm，石油醚：丙 酮系统梯度洗脱（条件见表1)，柱体积25ml，每个梯度洗脱200ml，得到各个浓度提取洗脱 液的洗脱物，回收溶剂，即得石油醚：丙酮梯度洗脱提取物，收率见表1，TLC分析结果见图 3，TLC分析条件：GF 254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮=3 :1 :1，显色方法：香草 醛浓硫酸显色。
[0015] 表 1
[0017] 3、抗月ΤΓ由怕? 土帅迎刀広州矩术
[0018] 1)实验条件
[0019] a)细胞株信息
[0020] 人肝癌细胞株H印G2购于中国典型培养物保藏中心细胞库。
[0021] b)药品及试剂
[0022] 样品无菌条件下，DMSO溶解配置成母液浓度为100mg/mL，使用时用RPMI-1640培 养液稀释至所需浓度（DMSO彡1%。）。
[0023] RPMI Medium 1640培养基干粉购于美国GIBCO公司。胎牛血清购于北京元亨圣马 生物技术研究所。Trypsin 1 :250、二甲基二苯基四氮唑溴盐（MTT)。
[0024] c)仪器
[0025] CO2培养箱（SANYO,日本）
[0026] 垂直层流洁净工作台（上海上净净化设备有限公司）
[0027] 倒置生物显微镜（重庆光电仪器有限公司）
[0028] 低/高速台式离心机（上海安亭科学仪器厂）
[0029] 电子天平（奥豪斯仪器有限公司）
[0030] 酶标仪（伯乐生命医学产品有限公司）
[0031] 立式压力蒸汽灭菌器（上海申安医疗器械厂）
[0032] 鼓风干燥箱（上海跃进医疗器械厂）
[0033] PH 计（SART0RIUS，德国）
[0034] 2)实验方法和过程
[0035] 人肝癌细胞株H印G2细胞以4000/孔的密度铺于96孔板，每孔100 μ L，12h后使 用。各组分以DMSO溶解为lOOmg/mL储存液，保存于-20°C待用。铺板后12h，观察细胞汇 合率约为40%，加药，浓度均为100 μ g/mL，每个组分3个复孔。每板细胞设立二个对照组 (培养基+细胞；含0. 1% DMSO培养基+细胞），3个空白孔（只有培养基）。加入药物24 小时后，加入20 μ L四甲基偶氮唑盐化学名为3-(4, 5-二甲基噻唑）-2, 5-二苯基四氮唑溴 盐（3-(4, 5-dimethyl_2thiazolyl)-2, 5-diphenyl-tetrazolium bromide，MTT)，继续培养 4小时。完全弃去上清液，加入100 μ L DMS0,混匀使MTT完全溶解，去气泡。490nm测定OD 值。
[0036]
[0037] 3)实验结果
[0038] 表 2
[0042] 结果发现：本发明优选的技术方案为：维吾尔药薰衣草经超声提取，提取液浓缩 后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :5,体 积比）洗脱，继用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :12,体积比）洗脱，石油醚：丙 酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :12,体积比）洗脱液经回收有机溶剂，干燥，得到高活性提 取物，即为该抗肿瘤的提取物。该活性提取物从未见文献报道，其TLC分析表征如图1。 [0043] 维吾尔药薰衣草经超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先 用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :17,体积比）洗脱，继用石油醚：丙酮混合溶 剂（石油醚：丙酮，100 :30,体积比）洗脱，石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :30， 体积比）洗脱液经回收有机溶剂，干燥，得到高活性提取物，即为该抗肿瘤的提取物。该活 性提取物从未见文献报道，其TLC分析表征如图2。
[0044] 具体，发现过程如下：
[0045] 4、抗肿瘤有效提取物的提取方法研究
[0046] 1)提取溶剂的种类研究
[0047] 分别用甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂、乙醇水混合溶剂等有 机溶剂提取，并测试提取物对人肝癌细胞IfepG2的抗肿瘤活性，结果如下：
[0048]表 3
[0050] 研究结果表明：提取用有机溶剂可以为甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水 混合溶剂、乙醇水混合溶剂。
[0051] 2)提取溶剂的用量研究
[0052] 分别用1、2、5、10、20、30、40、50倍（重量/体积比）有机溶剂提取，并测试提取物 人肝癌细胞ifepG2的抗肿瘤活性，结果如下：
[0053] 表 4
[0056] 提取物提取用有机溶剂用量为药材重量的2-50倍（重量/体积比）。
[0057] 3)干燥方法的研究
[0058] 分别用真空干燥法、冷冻干燥法、鼓风干燥、离心干燥、旋蒸干燥法等方法，对得到 的抗肿瘤活性提取物进行干燥，以含水量、TLC、活性测试为指标，发现真空干燥法、冷冻干 燥法、鼓风干燥、离心干燥、旋蒸干燥法适用于对人肝癌细胞IfepG2抗肿瘤活性提取物进行 干燥，其中，最优为真空干燥法、冷冻干燥法。
[0059] 表 5
[0061] 优选地，薰衣草抗肿瘤提取物的制备方法为：
[0062] 维吾尔药薰衣草经超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先 用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :5,体积比）洗脱2-50倍柱体积，继用石油醚： 丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :12,体积比）洗脱2-50倍柱体积，石油醚：丙酮=100 : 12的混合溶剂洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为该提取物。以上条件最优为先用石油醚： 丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :5,体积比）洗脱10倍柱体积，继用石油醚：丙酮混合溶 剂（石油醚：丙酮，100 :12,体积比）洗脱15倍柱体积。
[0063] 维吾尔药薰衣草经超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，用 石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :17,体积比）洗脱洗脱2-50倍柱体积，继用石 油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :30,体积比）洗脱洗脱2-50倍柱体积，石油醚：丙 酮=100 :30的混合溶剂洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为该提取物。以上条件最优为先 用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :17,体积比）洗脱20倍柱体积，继用石油醚： 丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :30,体积比）洗脱25倍柱体积。其中，
[0064] 1)提取物提取用有机溶剂可以为甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶 剂、乙醇水混合溶剂，最优条件为甲醇和95%乙醇。提取物提取用有机溶剂用量为药材重量 的2-50倍（重量/体积比）。
[0065] 2)提取物干燥方法可以为真空干燥法、冷冻干燥法、鼓风干燥、离心干燥、旋蒸干 燥法等，最优为真空干燥法、冷冻干燥法。
[0066] 5.薰衣草抗肿瘤有效提取物（洗脱液为100:20-30时干燥获得的提取物）的抗肿 瘤活性研究
[0067] 利用各种肿瘤细胞，如肝癌、肺癌、胃癌、肠癌、胰腺癌等恶性肿瘤细胞株，分别测 试薰衣草抗肿瘤提取物的抗肿瘤活性，IC5。结果如下： ΓΠΠββ? (λ
[0071] 因此，我们发现，薰衣草抗肿瘤提取物具备抗肿瘤活性，可望用于各种肿瘤如肝 癌、肺癌、胃癌、肠癌、胰腺癌等恶性肿瘤的预防及治疗。
[0072] 6、薰衣草抗肿瘤有效提取物的组合物及其制备方法研究
[0073] 1)固体分散体
[0074] 处方
[0076] 制备方法：
[0077] 称取薰衣草提取物和载体聚乙烯吡咯烷酮（PVP)按比例、1 :2、1 :4、1 :6的质量比 分别放入烧杯中，加入无水乙醇，磁力搅拌器搅拌至薰衣草提取物和载体完全溶解，转入旋 蒸仪中除去有机溶剂，干燥，粉碎过80目筛，即得薰衣草提取物PVP包合物。
[0078] 2)环糊精包合物
[0079] 处方：
[0081] 制备方法：
[0082] 将β -环糊精与1~5倍水研匀，加薰衣草提取物（水难溶性的应先溶于少量有 机溶剂中）充分研磨至成糊状物，低温干燥即得。
[0083] 3)分散片处方：
[0085] 制备方法：
[0086] 1.薰衣草提取物淀粉分散体的制备，精密称取薰衣草提取物提取物，加入适量的 十二烷基硫酸钠，用70%的乙醇溶解加入等比例的可溶性淀粉混合均匀后，在70°C的温度 下蒸干，粉碎，过100目筛；
[0087] 2.称取处方量，薰衣草提取物淀粉分散体，交联聚维酮，预胶化淀粉，用70 %乙 醇做湿润剂，边加入边搅拌，制成湿颗粒过14目筛，室温下放置15min后，60°C烘箱烘干 45min，16目筛整粒，加入滑石粉和微分硅胶，混合均匀后，压片。
[0088] 7、薰衣草抗肿瘤有效提取物的检测方法研究
[0089] 我们发现，可以用薄层色谱的方法，很好地检测和标示薰衣草抗肿瘤有效提取物 的特征。见图1，图2。
[0090] 具体条件为：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮=3 :1 :1，显色方 法：香草醛浓硫酸显色。
【附图说明】：
[0091] 图I HepG2抑制活性提取物的TLC色谱图；
[0092] 图2 HepG2抑制活性提取物的TLC色谱图；
[0093] 图3薰衣草得到的化学组分的TLC色谱图。
【具体实施方式】
[0094] 以下实施例表示本发明的实用性，本发明不受此限制。
[0095] 实施例1 :
[0096] 取维吾尔药薰衣草20g，经100mL甲醇超声提取15min，提取液浓缩后，得提取物 SN0339A，将醇提后的药渣经200ml水煮沸提取2h，提取液浓缩后，得提取物SN0339B，将 SN0339A，SN0339B合并上样，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（2. Ocm内径小柱），先用石 油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :5,体积比）洗脱10倍柱体积，继用石油醚：丙酮 混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :12,体积比）洗脱15倍柱体积，石油醚：丙酮混合溶剂（石 油醚：丙酮，100 :12,体积比）洗脱液经回收有机溶剂，真空干燥，即为该提取物，收率为 0· 1%〇
[0097] 实施例2 :
[0098] 取维吾尔药薰衣草20g，经100mL乙醇超声提取15min，提取液浓缩后，得提取物 SN0339A，将醇提后的药渣经200ml水煮沸提取2h，提取液浓缩后，得提取物SN0339B，将 SN0339A，SN0339B合并上样，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（2. Ocm内径小柱），先用石 油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :5,体积比）洗脱10倍柱体积，继用石油醚：丙酮 混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :12,体积比）洗脱15倍柱体积，石油醚：丙酮混合溶剂（石 油醚：丙酮，100 :12,体积比）洗脱液经回收有机溶剂，冷冻干燥，即为该提取物，收率为 0· 087%〇
[0099] 实施例3 :
[0100] 取维吾尔药薰衣草20g，经100mL丙酮超声提取15min，提取液浓缩后，得提取物 SN0339A，将醇提后的药渣经200ml水煮沸提取2h，提取液浓缩后，得提取物SN0339B，将 SN0339A，SN0339B合并上样，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（2. Ocm内径小柱），先用石 油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :5,体积比）洗脱10倍柱体积，继用石油醚：丙酮 混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :12,体积比）洗脱15倍柱体积，石油醚：丙酮混合溶剂（石 油醚：丙酮，100 :12,体积比）洗脱液经回收有机溶剂，鼓风干燥，即为该提取物，收率为 0· 063%〇
[0101] 实施例4:
[0102] 取维吾尔药薰衣草20g，经100mL氯仿超声提取15min，提取液浓缩后，得提取物 SN0339A，将醇提后的药渣经200ml水煮沸提取2h，提取液浓缩后，得提取物SN0339B，将 SN0339A，SN0339B合并上样，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（2. Ocm内径小柱），先用石 油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :5,体积比）洗脱10倍柱体积，继用石油醚：丙酮 混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :12,体积比）洗脱15倍柱体积，石油醚：丙酮混合溶剂（石 油醚：丙酮，100 :12,体积比）洗脱液经回收有机溶剂，离心干燥，即为该提取物，收率为 0. 055%。
[0103] 实施例5 :
[0104] 取维吾尔药薰衣草20g，经100mL乙酸乙酯超声提取15min，提取液浓缩后，得提 取物SN0339A，将醇提后的药渣经200ml水煮沸提取2h，提取液浓缩后，得提取物SN0339B， 将SN0339A，SN0339B合并上样，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（2. Ocm内径小柱），先用石 油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :5,体积比）洗脱10倍柱体积，继用石油醚：丙酮 混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :12,体积比）洗脱15倍柱体积，石油醚：丙酮混合溶剂（石 油醚：丙酮，100 :12,体积比）洗脱液经回收有机溶剂，旋蒸干燥，即为该提取物，收率为 0. 064%。
[0105] 实施例6 :
[0106] 取维吾尔药薰衣草20g，经100mL甲醇水混合溶剂（甲醇：水=1:1)超声提取 15min，提取液浓缩后，得提取物SN0339A，将醇提后的药渣经200ml水煮沸提取2h，提取液 浓缩后，得提取物SN0339B，将SN0339A，SN0339B合并上样，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱 (2. Ocm内径小柱），先用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :5,体积比）洗脱10倍 柱体积，继用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :12,体积比）洗脱15倍柱体积，石 油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :12,体积比）洗脱液经回收有机溶剂，冷冻干燥， 即为该提取物，收率为〇. 079 %。
[0107] 实施例7 :
[0108] 取维吾尔药薰衣草20g，经100mL乙醇水混合溶剂（乙醇：水=1:1)超声提取 15min，提取液浓缩后，得提取物SN0339A，将醇提后的药渣经200ml水煮沸提取2h，提取液 浓缩后，得提取物SN0339B，将SN0339A，SN0339B合并上样，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱 (2. Ocm内径小柱），先用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :5,体积比）洗脱10倍 柱体积，继用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :12,体积比）洗脱15倍柱体积，石 油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :12,体积比）洗脱液经回收有机溶剂，真空干燥， 即为该提取物，收率为〇. 076 %。
[0109] 实施例8 :
[0110] 取维吾尔药薰衣草20g，经100mL乙醇水混合溶剂（乙醇：水=90:10)超声提取 15min，提取液浓缩后，得提取物SN0339A，将醇提后的药渣经200ml水煮沸提取2h，提取液 浓缩后，得提取物SN0339B，将SN0339A，SN0339B合并上样，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱 (2. Ocm内径小柱），先用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :5,体积比）洗脱10倍 柱体积，继用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :12,体积比）洗脱15倍柱体积，石 油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :12,体积比）洗脱液经回收有机溶剂，冷冻干燥， 即为该提取物，收率为〇. 091 %。
[0111] 实施例9:
[0112] 取维吾尔药薰衣草20g，经100mL甲醇超声提取15min，提取液浓缩后，得提取物 SN0339A，将醇提后的药渣经200ml水煮沸提取2h，提取液浓缩后，得提取物SN0339B，将 SN0339A，SN0339B合并上样，用硅胶（SiO2)柱分离，上样后的硅胶柱（2. Ocm内径小柱），先 用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :17,体积比）洗脱20倍柱体积，继用石油醚： 丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :30,体积比）洗脱30倍柱体积，石油醚：丙酮混合溶剂 (石油醚：丙酮，100 :30,体积比）洗脱液经回收有机溶剂，真空干燥，即为该提取物，收率为 0· 3%〇
[0113] 实施例10 :
[0114] 取维吾尔药薰衣草20g，经100mL乙醇超声提取15min，提取液浓缩后，得提取物 SN0339A，将醇提后的药渣经200ml水煮沸提取2h，提取液浓缩后，得提取物SN0339B，将 SN0339A，SN0339B合并上样，用硅胶（SiO2)柱分离，上样后的硅胶柱（2. Ocm内径小柱），先 用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :17,体积比）洗脱20倍柱体积，继用石油醚： 丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :30,体积比）洗脱30倍柱体积，石油醚：丙酮混合溶剂 (石油醚：丙酮，100 :30,体积比）洗脱液经回收有机溶剂，冷冻干燥，即为该提取物，收率为 0· 26%〇
[0115] 实施例11 :
[0116] 取维吾尔药薰衣草20g，经100mL丙酮超声提取15min，提取液浓缩后，得提取物 SN0339A，将醇提后的药渣经200ml水煮沸提取2h，提取液浓缩后，得提取物SN0339B，将 SN0339A，SN0339B合并上样，用硅胶（SiO2)柱分离，上样后的硅胶柱（2. Ocm内径小柱），先 用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :17,体积比）洗脱20倍柱体积，继用石油醚： 丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :30,体积比）洗脱30倍柱体积，石油醚：丙酮混合溶剂 (石油醚：丙酮，100 :30,体积比）洗脱液经回收有机溶剂，鼓风干燥，即为该提取物，收率为 0· 20%〇
[0117] 实施例12 :
[0118] 取维吾尔药薰衣草20g，经100mL氯仿超声提取15min，提取液浓缩后，得提取物 SN0339A，将醇提后的药渣经200ml水煮沸提取2h，提取液浓缩后，得提取物SN0339B，将 SN0339A，SN0339B合并上样，用硅胶（SiO2)柱分离，上样后的硅胶柱（2. Ocm内径小柱），先 用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :17,体积比）洗脱20倍柱体积，继用石油醚： 丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :30,体积比）洗脱30倍柱体积，石油醚：丙酮混合溶剂 (石油醚：丙酮，100 :30,体积比）洗脱液经回收有机溶剂，离心干燥，即为该提取物，收率为 0· 19%〇
[0119] 实施例13 :
[0120] 取维吾尔药薰衣草20g，经100mL乙酸乙酯超声提取15min，提取液浓缩后，得提取 物SN0339A，将醇提后的药渣经200ml水煮沸提取2h，提取液浓缩后，得提取物SN0339B，将 SN0339A，SN0339B合并上样，用硅胶（SiO2)柱分离，上样后的硅胶柱（2. Ocm内径小柱），先 用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :17,体积比）洗脱20倍柱体积，继用石油醚： 丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :30,体积比）洗脱30倍柱体积，石油醚：丙酮混合溶剂 (石油醚：丙酮，100 :30,体积比）洗脱液经回收有机溶剂，旋蒸干燥，即为该提取物，收率为 0· 21%〇
[0121] 实施例14:
[0122] 取维吾尔药薰衣草20g，经100mL甲醇水混合溶剂（甲醇：水=1:1)超声提取 15min，提取液浓缩后，得提取物SN0339A，将醇提后的药渣经200ml水煮沸提取2h，提取液 浓缩后，得提取物SN0339B，将SN0339A，SN0339B合并上样，用硅胶（SiO 2)柱分离，上样后的 硅胶柱（2. Ocm内径小柱），先用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :17,体积比）洗 脱20倍柱体积，继用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :30,体积比）洗脱30倍柱 体积，石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :30,体积比）洗脱液经回收有机溶剂，冷 冻干燥，即为该提取物，收率为〇. 24%。
[0123] 实施例15 :
[0124] 取维吾尔药薰衣草20g，经100mL乙醇水混合溶剂（乙醇：水=1:1)超声提取 15min，提取液浓缩后，得提取物SN0339A，将醇提后的药渣经200ml水煮沸提取2h，提取液 浓缩后，得提取物SN0339B，将SN0339A，SN0339B合并上样，用硅胶（SiO 2)柱分离，上样后的 硅胶柱（2. Ocm内径小柱），先用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :17,体积比）洗 脱20倍柱体积，继用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :30,体积比）洗脱30倍柱 体积，石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :30,体积比）洗脱液经回收有机溶剂，真 空干燥，即为该提取物，收率为〇. 23%。
[0125] 实施例16 :
[0126] 取维吾尔药薰衣草20g，经100mL乙醇水混合溶剂（乙醇：水=90:10)超声提取 15min，提取液浓缩后，得提取物SN0339A，将醇提后的药渣经200ml水煮沸提取2h，提取液 浓缩后，得提取物SN0339B，将SN0339A，SN0339B合并上样，用硅胶（SiO 2)柱分离，上样后的 硅胶柱（2. Ocm内径小柱），先用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :17,体积比）洗 脱20倍柱体积，继用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :30,体积比）洗脱30倍柱 体积，石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100 :30,体积比）洗脱液经回收有机溶剂，冷 冻干燥，即为该提取物，收率为〇. 26%。
[0127] 实施例17 :固体分散体
[0128] 称取薰衣草提取物和载体聚乙烯吡咯烷酮（PVP)按比例、1 :2、1 :4、1 :6的质量比 分别放入烧杯中，加入无水乙醇，磁力搅拌器搅拌至薰衣草提取物和载体完全溶解，转入旋 蒸仪中除去有机溶剂，干燥，粉碎过80目筛，即得薰衣草提取物PVP包合物。
[0129] 实施例18 :环糊精包合物
[0130] 将β -环糊精与1~5倍水研匀，加薰衣草提取物（水难溶性的应先溶于少量有 机溶剂中）充分研磨至成糊状物，低温干燥即得。
[0131] 实施例19 :分散片
[0132] 1.称取干燥的薰衣草提取物，加入适量的十二烷基硫酸钠，使用70%的乙醇充分 溶解，加入水溶性淀粉与薰衣草提取物（1 :1)，搅拌混合均匀，在70°C下干燥，粉碎，过100 目筛，得薰衣草提取物分散体。
[0133] 2.精密称取处方量，薰衣草提取物分散体，交联聚维酮，可压性淀粉，用70 %乙醇 做湿润剂，边加入边搅拌，14目筛制成湿颗粒，室温下放置15min后，70°C烘箱烘干45min， 16目筛整粒，加入滑石粉和微分硅胶，混合均匀后，压片。
【主权项】
1. 一种维吾尔药薰衣草提取物，其特征为维吾尔药薰衣草经溶剂超声提取，提取液 浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用体积比100:0-100:5的石油醚-丙酮混 合溶剂洗脱，继用体积比100:6-100:12的石油醚-丙酮混合溶剂洗脱，石油醚-丙酮 100:6-100:12混合溶剂洗脱液经回收有机溶剂，干燥即得；或先用体积比100:17的石油 醚-丙酮混合溶剂洗脱，继用体积比100:20-100:30的石油醚-丙酮混合溶剂洗脱，石油 醚-丙酮100:20-100:30混合溶剂洗脱液经回收有机溶剂，干燥即得。2. 如权利要求1所述的一种维吾尔药薰衣草提取物，其特征为，所述的提取用有机溶 剂为甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂或乙醇水混合溶剂，优选甲醇或95% 乙醇，提取用有机溶剂用量为药材重量的2-50倍(重量/体积比)。3. 如权利要求1所述维的维吾尔药薰衣草提取物，其特征为，洗脱液的用量为2-50倍 柱体积。4. 如权利要求1所述的维吾尔药薰衣草提取物，其特征为，先用体积比100:5的石油 醚-丙酮混合溶剂洗脱10倍柱体积，继用体积比100:12的石油醚-丙酮混合溶剂洗脱15 倍柱体积。5. 如权利要求1所述的维吾尔药薰衣草提取物，其特征为，先用体积比100:17的石油 醚-丙酮混合溶剂洗脱20倍柱体积，继用体积比100:30的石油醚-丙酮混合溶剂洗脱25 倍柱体积。6. -种药物组合物，其特征在于，包含权利要求1-5任何一项所述的薰衣草提取物和 药学上可接受的载体。7. -种药物制剂，其特征在于，包含权利要求1-5任何一项所述的薰衣草提取物或权 利要求6所述的药物组合物。8. 如权利要求7所述的药物制剂，其特征在于，所述的制剂为固体分散体、环糊精包合 物、分散片。9. 权利要求1-5任何一项所述提取物或权利要求6所述的组合物或权利要求7所述 的药物制剂在制备抗肿瘤药物中的应用，所述的肿瘤为脑胶质瘤、乳腺癌、肺癌、胃癌、结肠 癌、胰腺癌、宫颈癌或肝癌。10. 如权利要求1-5任何一项所述的维吾尔药薰衣草提取物，其特征在于，用TLC法检 测，其色谱条件为：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮=3 :1 :1，显色方法：香 草醛浓硫酸显色。
【文档编号】A61P35/00GK105982956SQ201510081943
【公开日】2016年10月5日
【申请日】2015年2月15日
【发明人】王金辉, 黄健, 张萃
【申请人】沈阳药科大学