一种含小分子添加剂的托特罗定缓释微球制剂及制备方法
【专利摘要】本发明提供了一种含小分子添加剂的托特罗定缓释微球制剂及制备方法，称取托特罗定、小分子添加剂和聚丙交酯-乙交酯加入到0.2-5ml二氯甲烷中溶解，在均质条件下将其注射入水溶液中，保持上述均质条件5分钟，然后以搅拌1000rpm挥发溶剂4小时，用孔径25μm和125μm 筛过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。本发明利用脂肪酸或脂肪酸酯做生物缓释微球制剂的添加剂，使药物能释放近一个月大大减少用药次数，提高药物生物利用度和治疗效果，降低毒副作用，从而极大地减轻广大患者的痛苦，提高其生活质量。聚丙交酯-乙交酯包封托特罗定，延缓了托特罗定的释放，起到缓释的效果。小分子添加剂的加入改变了托特罗定在微球内部的存在及分布形式，进一步延缓托特罗定的释放，并提高载药量。
【专利说明】
一种含小分子添加剂的托特罗定缓释微球制剂及制备方法
技术领域
[0001]本发明提供了一种含小分子添加剂的托特罗定缓释微球制剂，同时还提供了其制备方法，属于医药制备技术领域。【背景技术】
[0002]托特罗定属于3, 3 -二苯基丙胺类毒蕈碱受体拮抗剂，口服药效低，副作用大，例如口干、便秘、消化不良、头痛、眩晕、眼干、尿潴留。其未吸收的部分将产生系统前副作用或相互作用(EP1077912)，肝首过效应也导致药效降低，副作用增加。虽然可以通过普通注射方式给药，但对尿失禁患者长期治疗而言，每日一次或多次的注射方式将增加患者的痛苦和不适。
【发明内容】
[0003]本发明提供了一种含小分子添加剂的托特罗定缓释微球制剂，载药量较高，可释放近一个月，大大减少用药次数，提高药物的生物利用度和治疗效果。
[0004]本发明进一步提供了一种含小分子添加剂的托特罗定缓释微球制剂的制备方法， 适用于工业化生产。
[0005]本发明所述的一种含小分子添加剂的托特罗定缓释微球试剂，其特征在于是由以下药物按重量份数比制成的:1%-20%托特罗定，0.1% - 10%小分子添加剂，余量为生物可降解药用高分子辅料。
[0006]其中，所述的小分子添加剂为分子量小于500道尔顿的小分子脂肪酸或小分子脂肪酸酯。
[0007]所述的小分子脂肪酸为硬脂酸、棕榈酸、十四酸其中的一种。
[0008]所述生物可降解药用高分子材料来自聚丙交酯-乙交酯、聚乳酸、聚己内酯、聚羟基丁酸酯-羟基戊酸酯共聚物其中的一种或其中的两种混合物(1:9_9:1)，其分子量为 3000-50000 道尔顿本发明所述的一种含小分子添加剂的托特罗定缓释微球制剂的制备方法，包括以下步骤:按上述比例称取托特罗定、小分子添加剂和聚丙交酯-乙交酯加入到0.2-5 ml二氯甲烷中溶解，在均质(6000-8000rpm)条件下将其注射入0.3-3%PVA (w/w)的水溶液中，保持上述均质条件5分钟，然后以搅拌lOOOrpm挥发溶剂4小时，用孔径25ym和125ym筛过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。
[0009]本发明制备的含小分子添加剂的托特罗定缓释微球制剂，粒径在50-300 y m，包封率 40-90%。
[0010]本发明的积极效果在于:利用脂肪酸或脂肪酸酯做生物缓释微球制剂的添加剂， 使药物能释放近一个月大大减少用药次数，提高药物生物利用度和治疗效果，降低毒副作用，从而极大地减轻广大患者的痛苦，提高其生活质量。聚丙交酯-乙交酯包封托特罗定，延缓了托特罗定的释放，起到缓释的效果。小分子添加剂的加入改变了托特罗定在微球内部的存在及分布形式，进一步延缓托特罗定的释放，并提高载药量。
【附图说明】
[0011]图1是实施例4所得微球的扫描电镜下的形态照片；
图2是实施例1、实施例2、实施例3、实施例4、实施例5所得的微球在模拟释放液中的累积释放率的折线图；
图3是实施例6、实施例7、实施例8、实施例9、实施例10所得的微球在模拟释放液中的累积释放率的折线图；
图4是实实施例11、实施例12、实施例13、实施例14、实施例15所得的微球在模拟释放液中的累积释放率的折线图；
图5是实施例16、实施例17、实施例18、实施例19、实施例20、实施例21、实施例22所得的微球在模拟释放液中的累积释放率的折线图；
图6是实施例4、实施例23所得的微球在比格犬体内药时曲线；
图7为缓释微球在比格犬内的累计释放率的折线图。
[0012]具体实施例方式
以下将通过实施例来进一步说明本发明所述的一种含小分子添加剂的托特罗定缓释微球的制备方法和缓释效果，但以下实施例不对本发明构成任何限制。以下实施例中微球的粒径采用本领域技术人员熟悉的L2000型全自动激光粒度仪(Beckman coulter公司)测定。含量采用高效液相色谱法(HPLC)测定，方法按照文献方法，例如可以按照中国新药杂志，2012，21 ( 23)所公开。血药浓度测定采用LC-MS-MS法，例如可以按照中国药科大学学报，2005，36(6): 546-550。
[0013]实施例1
称取52.9mg托特罗定、300.0 mg 7525 7E PLGA，将上述称取物质加入到0.5 ml 二氯甲烷中溶解，在均质(6000-8000rpm)条件下将其注射入50 ml 0.5%PVA (w/w)的水溶液中，保持上述均质条件5分钟，然后以搅拌100rpm挥发溶剂4小时，用孔径25 μπι和125 μ m筛过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。制备得含药8.6%的微球，包埋率57%，测得粒径为50-300 μπι。缓释微球在模拟释放液中的累积释放率的折线图见图2。
[0014]实施例2
称取52.9mg托特罗定、300.0 mg 7525 7E PLGA,0.3 mg硬脂酸，将上述称取物质加入到0.5 ml 二氯甲烷中溶解，在均质(6000-8000rpm)条件下将其注射入50 ml 0.5%PVA(w/w)的水溶液中，保持上述均质条件5分钟，然后以搅拌100rpm挥发溶剂4小时，用孔径25 μ m和125 μ m筛过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。制备得含药9.4%的微球，包埋率63%，测得粒径为50-300 μπι。缓释微球在模拟释放液中的累积释放率的折线图见图2。
[0015]实施例3
称取52.9mg托特罗定、300.0 mg 7525 7E PLGA、1.5 mg硬脂酸丁酯，将上述称取物质加入到0.5 ml 二氯甲烷中溶解，在均质(6000-8000rpm)条件下将其注射入50 ml0.5%PVA(w/w)的水溶液中，保持上述均质条件5分钟，然后以搅拌100rpm挥发溶剂4小时，用孔径25 μπι和125 μπι筛过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。制备得含药10.3%的微球，包埋率68.7%，测得粒径为50-300 μ m0缓释微球在模拟释放液中的累积释放率的折线图见图2。
[0016]实施例4
称取52.9mg托特罗定、300.0 mg 7525 7E PLGA,3 mg硬脂酸丁酯，将上述称取物质加入到0.5 ml 二氯甲烷中溶解，在均质(6000-8000rpm)条件下将其注射入50 ml 0.5%PVA(w/w)的水溶液中，保持上述均质条件5分钟，然后以搅拌100rpm挥发溶剂4小时，用孔径25 μπι和125 μπι筛过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。制备得含药13.3%的微球，包埋率89%，测得粒径为50-300 μπι。缓释微球在模拟释放液中的累积释放率的折线图见图2。缓释微球在比格犬内药时曲线见图6。缓释微球在比格犬内的累计释放率的折线图见图7。缓释微球扫描电镜照片见图1。
[0017]实施例5
称取52.9mg托特罗定、300.0 mg 7525 7E PLGA,30 mg硬脂酸丁酯，将上述称取物质加入到0.5 ml 二氯甲烷中溶解，在均质(6000-8000rpm)条件下将其注射入50 ml 0.5%PVA(w/w)的水溶液中，保持上述均质条件5分钟，然后以搅拌100rpm挥发溶剂4小时，用孔径25 μπι和125 μπι筛过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。制备得含药10.5%的微球，包埋率70%，测得粒径为50-300 μπι。缓释微球在模拟释放液中的累积释放率的折线图见图2。
[0018]实施例6
称取52.9mg托特罗定、300.0 mg 5050 5E PLGA，将上述称取物质加入到0.5 ml 二氯甲烷中溶解，在均质(6000-8000rpm)条件下将其注射入50 ml 0.5%PVA (w/w)的水溶液中，保持上述均质条件5分钟，然后以搅拌100rpm挥发溶剂4小时，用孔径25 μπι和125 μπι筛过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。制备得含药7.8%的微球，包埋率52%，测得粒径为50-300 μπι。缓释微球在模拟释放液中的累积释放率的折线图见图3。
[0019]实施例7
称取52.9mg托特罗定、300.0 mg 5050 5E PLGA,0.3 mg硬脂酸丁酯，将上述称取物质加入到0.5 ml 二氯甲烷中溶解，在均质(6000-8000rpm)条件下将其注射入50 ml0.5%PVA(w/w)的水溶液中，保持上述均质条件5分钟，然后以搅拌100rpm挥发溶剂4小时，用孔径25 μ m和125 μ m筛过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。制备得含药7.2%的微球，包埋率48%，测得粒径为50-300 μ m0缓释微球在模拟释放液中的累积释放率的折线图见图3。
[0020]实施例8
称取52.9mg托特罗定、300.0 mg,5050 5E PLGA、1.5 mg硬脂酸丁酯，将上述称取物质加入到0.5 ml 二氯甲烷中溶解，在均质(6000-8000rpm)条件下将其注射入50 ml0.5%PVA(w/w)的水溶液中，保持上述均质条件5分钟，然后以搅拌100rpm挥发溶剂4小时，用孔径25 μπι和125 μπι筛过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。制备得含药8.1%的微球，包埋率54%，测得粒径为50-300 μπι。缓释微球在模拟释放液中的累积释放率的折线图见图3。
[0021]实施例9
称取52.9mg托特罗定、300.0 mg 5050 5E PLGA,3 mg硬脂酸丁酯，将上述称取物质加入到0.5 ml 二氯甲烷中溶解，在均质(6000-8000rpm)条件下将其注射入50 ml 0.5%PVA(w/w)的水溶液中，保持上述均质条件5分钟，然后以搅拌100rpm挥发溶剂4小时，用孔径25 μ m和125 μ m筛过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。制备得含药9.3%的微球，包埋率62%，测得粒径为50-300 μπι。缓释微球在模拟释放液中的累积释放率的折线图见图3。
[0022]实施例10
称取52.9mg托特罗定300.0 mg, 5050 5E PLGA, 30 mg硬脂酸丁酯，将上述称取物质加入到0.5 ml 二氯甲烷中溶解，在均质(6000-8000rpm)条件下将其注射入50 ml 0.5%PVA(w/w)的水溶液中，保持上述均质条件5分钟，然后以搅拌100rpm挥发溶剂4小时，用孔径25 μπι和125 μπι筛过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。制备得含药10.7%的微球，包埋率71%，测得粒径为50-300 μπι。缓释微球在模拟释放液中的累积释放率的折线图见图3。
[0023]实施例11
称取52.9mg托特罗定、300.0 mg 5050 4.5A PLGA，将上述称取物质加入到0.5 ml 二氯甲烷中溶解，在均质(6000-8000rpm)条件下将其注射入50 ml 0.5%PVA (w/w)的水溶液中，保持上述均质条件5分钟，然后以搅拌100rpm挥发溶剂4小时，用孔径25 μπι和125 μ m筛过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。制备得含药9.5%的微球，包埋率634%，测得粒径为50-300 μπι。缓释微球在模拟释放液中的累积释放率的折线图见图4。
[0024]实施例12
称取52.9mg托特罗定、300.0 mg 5050 4.5A PLGA,0.3 mg棕榈酸异丙酯，将上述称取物质加入到0.5 ml 二氯甲烷中溶解，在均质(6000-8000rpm)条件下将其注射入50 ml
0.5%PVA(w/w)的水溶液中，保持上述均质条件5分钟，然后以搅拌100rpm挥发溶剂4小时，用孔径25 μπι和125 μπι筛过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。制备得含药9.1%的微球，包埋率61%，测得粒径为50-300 μ m0缓释微球在模拟释放液中的累积释放率的折线图见图4。
[0025]实施例13
称取52.9mg托特罗定、300.0 mg 5050 4.5A PLGA,3 mg棕榈酸异丙酯，将上述称取物质加入到0.5 ml 二氯甲烷中溶解，在均质(6000-8000rpm)条件下将其注射入50 ml
0.5%PVA(w/w)的水溶液中，保持上述均质条件5分钟，然后以搅拌100rpm挥发溶剂4小时，用孔径25 μ m和125 μ m筛过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。制备得含药8.4%的微球，包埋率56%，测得粒径为50-300 μπι。缓释微球在模拟释放液中的累积释放率的折线图见图4。
[0026]实施例14
称称取52.9mg托特罗定、300.0 mg 5050 4.5A PLGA、30mg棕榈酸异丙酯，将上述称取物质加入到0.5 ml 二氯甲烷中溶解，在均质(6000-8000rpm)条件下将其注射入50 ml
0.5%PVA(w/w)的水溶液中，保持上述均质条件5分钟，然后以搅拌100rpm挥发溶剂4小时，用孔径25 μ m和125 μ m筛过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。制备得含药8.6%的微球，包埋率57%，测得粒径为50-300 μ m0缓释微球在模拟释放液中的累积释放率的折线图见图4。
[0027]实施例15
称称取52.9mg托特罗定、300.0 mg 5050 4.5A PLGA、1mg硬脂酸丁酯，将上述称取物质加入到0.5 ml 二氯甲烷中溶解，在均质(6000-8000rpm)条件下将其注射入50 ml0.5%PVA(w/w)的水溶液中，保持上述均质条件5分钟，然后以搅拌100rpm挥发溶剂4小时，用孔径25 μ m和125 μ m筛过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。制备得含药7.9%的微球，包埋率53%，测得粒径为50-300 μπι。缓释微球在模拟释放液中的累积释放率的折线图见图4。
[0028]实施例16
称称取52.9mg托特罗定、300.0 mg 7525 7E PLGA、1mg硬脂酸丁酯，将上述称取物质加入到0.5 ml 二氯甲烷中溶解，在均质(6000-8000rpm)条件下将其注射入50 ml 0.5%PVA(w/w)的水溶液中，保持上述均质条件5分钟，然后以搅拌100rpm挥发溶剂4小时，用孔径25 μπι和125 μπι筛过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。制备得含药12.4%的微球，包埋率82%，测得粒径为50-300 μπι。缓释微球在模拟释放液中的累积释放率的折线图见图5。
[0029]实施例17
称取52.9mg托特罗定、300.0 mg 7525 7E PLGA,3 mg十四酸，将上述称取物质加入到0.5 ml 二氯甲烷中溶解，在均质(6000-8000rpm)条件下将其注射入50 ml 0.5%PVA(w/w)的水溶液中，保持上述均质条件5分钟，然后以搅拌100rpm挥发溶剂4小时，用孔径25 μπι和125 μπι筛过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。制备得含药7.7%的微球，包埋率51%，测得粒径为50-300 μπι。缓释微球在模拟释放液中的累积释放率的折线图见图5。
[0030]实施例18
称取52.9mg托特罗定、300.0 mg 7525 7E PLGA、10 mg十四酸，将上述称取物质加入到0.5 ml 二氯甲烷中溶解，在均质(6000-8000rpm)条件下将其注射入50 ml 0.5%PVA(w/w)的水溶液中，保持上述均质条件5分钟，然后以搅拌100rpm挥发溶剂4小时，用孔径25 μπι和125 μπι筛过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。制备得含药7.2%的微球，包埋率48%，测得粒径为50-300 μπι。缓释微球在模拟释放液中的累积释放率的折线图见图5。
[0031]实施例19
称取52.9mg托特罗定、300.0 mg 7525 7E PLGA,3 mg硬脂酸，将上述称取物质加入到0.5 ml 二氯甲烷中溶解，在均质(6000-8000rpm)条件下将其注射入50 ml 0.5%PVA(w/w)的水溶液中，保持上述均质条件5分钟，然后以搅拌100rpm挥发溶剂4小时，用孔径25 μπι和125 μπι筛过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。制备得含药7.3%的微球，包埋率49%，测得粒径为50-300 μπι。缓释微球在模拟释放液中的累积释放率的折线图见图5。
[0032]实施例20
称取52.9mg托特罗定、300.0 mg 7525 7E PLGA、10 mg硬脂酸，将上述称取物质加入到0.5 ml 二氯甲烷中溶解，在均质(6000-8000rpm)条件下将其注射入50 ml 0.5%PVA(w/w)的水溶液中，保持上述均质条件5分钟，然后以搅拌100rpm挥发溶剂4小时，用孔径25 μπι和125 μπι筛过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。制备得含药8.5%的微球，包埋率57%，测得粒径为50-300 μπι。缓释微球在模拟释放液中的累积释放率的折线图见图5。
[0033]实施例21
称取52.9mg托特罗定、300.0 mg 7525 7E PLGA,3 mg棕榈酸，将上述称取物质加入到0.5 ml 二氯甲烷中溶解，在均质(6000-8000rpm)条件下将其注射入50 ml 0.5%PVA(w/w)的水溶液中，保持上述均质条件5分钟，然后以搅拌100rpm挥发溶剂4小时，用孔径25 μπι和125 μπι筛过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。制备得含药8.2%的微球，包埋率55%，测得粒径为50-300 ym。缓释微球在模拟释放液中的累积释放率的折线图见图5。
[0034]实施例22称取52.9mg托特罗定、300.0 mg 7525 7E PLGA、10 mg棕榈酸，将上述称取物质加入到0.5 ml二氯甲烷中溶解，在均质(6000-8000rpm)条件下将其注射入50 ml 0.5%PVA(w/ w)的水溶液中，保持上述均质条件5分钟，然后以搅拌lOOOrpm挥发溶剂4小时，用孔径 25 ym和125 ym筛过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。制备得含药7.9%的微球，包埋率 52%，测得粒径为50-300 ym。缓释微球在模拟释放液中的累积释放率的折线图见图5。
[0035]实施例23称取52.9mg托特罗定、300.0 mg 503H PLGA、3 mg硬脂酸丁酯，将上述称取物质加入到0.5 ml二氯甲烷中溶解，在均质(6000-8000rpm)条件下将其注射入50 ml 0.5%PVA(w/ w)的水溶液中，保持上述均质条件5分钟，然后以搅拌lOOOrpm挥发溶剂4小时，用孔径 25 ym和125 ym筛过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。制备得含药6.2%的微球，包埋率 41%，测得粒径为50-300 ym。缓释微球在模拟释放液中的累积释放率的折线图见图4。缓释微球在比格犬内的累计释放率的折线图见图6。缓释微球在比格犬内的累计释放率的折线图见图7。
[0036]通过以下实验例证明本发明的积极效果:以小分子脂肪酸酯和脂肪酸做为添加剂、载药量为15%的托特罗定长效缓释微球制剂释放更为平稳、释放周期由原来的两周延长至40天。
[0037]通过乳化溶剂挥发法制备的以7525 7E PLGA为基质、添加硬脂酸丁酯的托特罗定微球的体外释放试验，采用实施例1-5和实施例16的微球，通过模拟体内条件进行释放试验，见附图2和附图5。
[0038]通过乳化溶剂挥发法制备的以5050 5E PLGA为基质、添加硬脂酸丁酯的托特罗定微球的体外释放试验，采用实施例6-10的微球，通过模拟体内条件进行释放试验，见附图3〇
[0039]通过乳化溶剂挥发法制备的以5050 4.5A PLGA为基质、添加棕榈酸异丙酯或添加硬脂酸丁酯的托特罗定微球的体外释放试验，采用实施例11-15的微球，通过模拟体内条件进行释放试验，见附图4。
[0040]通过乳化溶剂挥发法制备的以7525 7E PLGA为基质、添加十四酸或硬脂酸或棕榈酸的托特罗定微球的体外释放试验，采用实施例17-22的微球，通过模拟体内条件进行释放试验，见附图5。
[0041]托特罗定微球的比格犬体内实验，采用实施例4和23,可以得出结论，两批次微球体内释放行为不同的主要原因为PLGA型号不同，次要原因是添加添不同，见附图6和附图 1。
[0042]根据本发明人等的研究，采用一定pH值(pH 7.4)的缓冲溶液(磷酸盐缓冲溶液)， 药物释放行为与体内类似，因此虽然其环境与人体内环境不完全相同，但是大致认为可以表现体内的释放模式。
[0043]实验仪器:恒温振荡器、离心机。
[0044]实验条件:温度:37±0.5°C，转速:120rpm。
[0045]实验方法:精密称取实验样品约1.5 mg，置于容积为50 ml的具盖塑料离心管中，加40 ml释放介质(pH=7.4磷酸盐缓冲溶液)置于恒温摇床中，维持一定的温度和转速，按时间点取样。
[0046]取样方法:离心管在4500 rpm条件下离心5min，精确吸取20 ml溶液，同时向离心管中再补加20ml的释放介质，取出液用HPLC检测。
[0047]取样时间点(天):0、0? 125、1、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、 34、38、42、46,50其中第0天是指给药当天的给药前的药物浓度。
[0048]结论:本实验发明的利用脂肪酸或脂肪酸酯做生物缓释微球制剂的添加剂，使药物能释放近一个月，大大减少了用药次数，提高治疗效果，降低毒副作用，从而极大地减轻广大患者的痛苦，提高其生活质量。
【主权项】
1.一种含小分子添加剂的托特罗定缓释微球试剂，其特征在于是由以下药物按重量份数比制成的: 1%-20%托特罗定，0.1% - 10%小分子添加剂，余量为生物可降解药用高分子辅料； 所述的小分子添加剂为分子量小于500道尔顿的小分子脂肪酸或小分子脂肪酸酯； 所述的小分子脂肪酸为硬脂酸、棕榈酸、十四酸其中的一种； 所述生物可降解药用高分子材料来自聚丙交酯-乙交酯、聚乳酸、聚己内酯、聚羟基丁酸酯-羟基戊酸酯共聚物其中的一种或其中的两种混合物(1:9-9:1)，其分子量为3000-50000 道尔顿。2.权利要求1述的一种含小分子添加剂的托特罗定缓释微球制剂的制备方法，包括以下步骤: 按上述比例称取托特罗定、小分子添加剂和聚丙交酯-乙交酯加入到0.2-5 ml 二氯甲烷中溶解，在均质(6000-8000rpm)条件下将其注射入0.3_3%PVA (w/w)的水溶液中，保持上述均质条件5分钟，然后以搅拌100rpm挥发溶剂4小时，用孔径25μηι和125 μπι筛过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。
【文档编号】A61P13/00GK105997887SQ201510612201
【公开日】2016年10月12日
【申请日】2015年9月24日
【发明人】李又欣, 赵金龙, 孙凤英, 刘喜明, 王晨晖, 余昌会
【申请人】吉林大学