一种蛴螬中可抗呼吸道合胞病毒的有效部位及制备方法
【专利摘要】本发明属于中药活性成分生产提取工艺，涉及蛴螬抗呼吸道合胞病毒有效部位提取分离的新工艺以及在制药领域的新用途，具体涉及利用抗病毒追踪的方式提取制备蛴螬抗呼吸道合胞病毒的有效部位。具体步骤包括蒸馏水、75%乙醇、乙酸乙酯回流提取蛴螬，水提醇沉，醇提水沉，抗病毒，溶解沉淀，处理D101、DM130、X?5、AB?8、HPD100大孔树脂，上样于大孔树脂，不同浓度梯度洗脱，每200ml接一瓶每个浓度梯度洗脱至无色，每个洗脱液进行抗病毒确定有效部位。本发明采用了抗病毒追踪的方法发现了蛴螬中抗呼吸道合胞病毒的有效部位，该有效部位对呼吸道合胞病毒具有较好的抵抗作用。
【专利说明】一种蛴螬中可抗呼吸道合胞病毒的有效部位及制备方法
[0001]
技术领域
[0002]本发明涉及中药活性成分生产提取工艺，涉及蛴螬抗病毒有效部位提取的新思路新方法以及在制药领域的新用途，具体涉及利用抗病毒追踪的方式提取分离纯化蛴螬抗呼吸道合胞病毒的有效部位。
【背景技术】
[0003]最近几年以来世界各地都受到了各种病毒的入侵，比如SARS病毒，甲型HlNl等，每次病毒的爆发都会引起人类的恐慌以及死亡。所以找到合适的抗病毒药物迫在眉睫。
[0004]呼吸道合胞病毒是导致婴幼儿急性下呼吸道感染最重要的病原体之一，还可引起间质性肺炎及毛细支气管炎等同时也可以引起老年人和免疫缺陷病人住院和肺炎死亡。
[0005]呼吸道合胞病毒早在50年前就备受关注，但是目前仍缺乏对其有效的预防治疗措施。利巴韦林是广谱的对呼吸道合胞病毒有一定疗效的抗病毒药物。然而，研究发现，经过呼吸道合胞病毒感染的棉鼠模型出现了利巴韦林的抵抗株，并且对患者和医务人员有潜在毒性，所以只有出现严重的RSV感染患者是才使用此药物，因此探索对呼吸道合胞病毒具有抑制作用的新物质为时代所必需。
[0006]蛴螬在传统医学中有着悠久的应用历史，可以破瘀血，消肿止痛，明目，主治丹毒、目翳，痈疽痔漏。现代药理学研究表明，蛴螬具有治疗眼疾、抗肿瘤、保肝、抗菌的作用。
[0007]蛴螬对呼吸道合胞病毒具有一定的治疗作用，实验表明蛴螬提取的有效部位对呼吸道合胞病毒有很好的治疗作用。
【发明内容】
[0008]本发明所要解决的技术问题是明确了蛴螬抗呼吸道合胞病毒的有效部位，并为该有效部位的分离提取提供了一种利用抗病毒追踪的方式制备蛴螬抗病毒有效部位的新方法。该有效部位从金龟子科动物蛴螬中提取分离得到可以用于呼吸道合胞病毒感染的治疗。该方法可以较为简便的对以上有效部位进行分离提取。
[0009]本发明的优点是，本发明首次分离出了蛴螬中具有抗呼吸道合胞病毒的有效部位，并发明了一种抗病毒追踪的方法对该有效部位进行了制备，此分离方法目的性强，简单节省了大量的人力物力，优于传统的系统分离。制备得到的有效部位对呼吸道合胞病毒具有较好的治疗作用。
[0010]本发明蛴螬抗呼吸道合胞病毒的有效部位为水提醇沉的沉淀，该有效部位的制备方法，包括如下步骤:
(I)取一定量的蛴螬药材分别用10倍的水、10倍的75%乙醇、8倍的乙酸乙酯加热回流提取2次，每次2h。合并两次的提取液减压浓缩回收溶剂，浓缩至每毫升药液含有I克的药材，然后做体外抗呼吸道合胞病毒试验，发现蛴螬水提取物抗呼吸道合胞病毒的效果最好。
[0011](2)将(I)中的水提取物后加乙醇调节乙醇的浓度为70%，静置24小时。过滤得到沉淀和上清液。
[0012](3)将上清液回收乙醇，将沉淀用水溶解，分别进行抗病毒实验。实验显示沉淀的抗病毒效果较好。
[0013](4)分别取一定的0101、乂-5、01130^8-8、册0100大孔吸附树脂、用95%的乙醇浸泡24小时，之后装柱，用蒸馏水洗至无醇味，然后用5倍柱体积5%的盐酸水溶液进行冲洗浸泡3个小时，之后用蒸馏水冲至PH等于7，再用5倍柱体积的5%的NaOH水溶液进行冲洗浸泡3个小时，之后用蒸馏水冲至PH等于7，备用。
[0014](5)取(3)中的沉淀分别上样于处理好的上述五种大孔树脂柱，分别用水，25%乙醇，50%乙醇，75%乙醇，95%乙醇进行冲洗，每个洗脱液中每200ml接一瓶，并且冲洗到没有颜色之后再换下一个洗脱液。
[0015](6)将上述接到的样品进行抗病毒实验。实验显示蛴螬水提醇沉的沉淀过DlOl大孔树脂柱后的水I号2号抗病毒效果很好。
【具体实施方式】
[0016]实例1(1)称取一定量的蛴螬加10倍量加热回流提取两次，每次2h，合并两次提取液，减压浓缩至每毫升药液含有I克的药材，加乙醇调节溶液乙醇的浓度为70%，静置24小时。
[0017](2)将(I)得到的醇沉液减压抽滤，得到沉淀，将沉淀用蒸馏水超声溶解。
[0018](3)将(2)得到的溶液上样于处理好的DlOl大孔吸附树脂，用水进行冲洗，每200ml
接一瓶，冲洗至无色。
[0019](4)将(3)中得到的溶液进行体外抗病毒实验，实验结果显示水I号2号其抗病毒效果较好。
【主权项】
1.一种蛴螬中具有抗呼吸道合胞病毒作用的有效部位以及一种利用抗病毒追踪的方式提取分离纯化该有效部位的工艺方法，在每一步的提取分离之后要进行抗病毒追踪出有效部位的所在，首先利用水提醇沉，其次利用DlOl大孔树脂分离得到蛴螬抗病毒的有效部位。2.根据权利要求1所述提取分离方法，其特征在于蛴螬水回流提取的料液比为1:10，提取次数为两次，提取时间为每次2h。3.根据权利要求1所述提取分离方法，其特征在于水提液的浓缩液浓度为Iml药液含有I g的药材，醇沉浓度为70%，醇沉时间为24小时。4.根据权利要求1所述提取分离方法，其特征在于醇沉之后进行减压抽滤，得到沉淀和上清液，然后进行抗病毒实验得到沉淀为抗病毒有效部位。5.根据权利要求1所述提取分离方法，其特征在于所用的大孔树脂型号为DlOl，洗脱液为水，25%乙醇，50%乙醇，75%乙醇，95%乙醇，每200ml接一瓶，每个梯度冲至无色。6.根据权利要求1所述提取分离方法，其特征在于将洗脱液进行抗病毒实验，得到I，2号为有效部位。
【文档编号】A61P31/14GK105998082SQ201610558453
【公开日】2016年10月12日
【申请日】2016年7月16日
【发明人】周长征, 张加泽, 王清, 牛文斐, 侯宝山
【申请人】周长征