治疗膀胱癌的药物组合物的制作方法

治疗膀胱癌的药物组合物的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种治疗膀胱癌的药物组合物及其制备方法，本发明药物组合物是以牛膝甾酮、聚藻、桉树果为原料药，配比而成，可按常规制剂工艺制成各种剂型，治疗膀胱癌疗效显著。
【专利说明】
治疗膀胱癌的药物组合物
技术领域
[0001] 本发明属于中药技术领域，尤其涉及一种治疗膀胱癌的药物组合物及其制备方 法。
【背景技术】
[0002] 膀胱癌是泌尿外科最为常见的肿瘤之一，占全身癌症发病率5%，恶性程度较高预 后较差。多中心性发生和高发病率是该疾病的主要病程特征，治疗后如果复发则呈逐级升 高态势。其病因尚不明确，与多种因素有关并且呈多阶段性的发病。因此，探讨膀胱癌的病 因、发生、发展、治疗是我们临床工作者的重要任务，而各种肿瘤的发生发展都和免疫系统 功能有关，现在治疗理念基本是研发的合成西药或者干扰素等。本研究侧重于从免疫学方 面深入研究，目的是能够发现机体的免疫功能及状态与肿瘤的发生、发展及预后密切相关 性。目前针对恶性肿瘤治疗，由于化疗后出现毒副作用，致使肿瘤治疗失败。因此，研究中药 对巨噬细胞的激活作用，提高机体免疫力，以整合医学为指导，配合化疗药物治疗膀胱癌有 望为恶性肿瘤的治疗提供一条新的有效方法，为解决临床实际问题提供理论依据，推动祖 国传统中医药理论以及应用技术的发展，并为调控肿瘤免疫提供新的思路，具有潜在的应 用前景。
[0003] 牛膝留酬（Inokosterone ) :CAS号 15130-85-5，分子式C27H44O7,分子量480.63。【药 理作用】蜕皮激素，降糖。【成分来源】苋科牛膝，日本牛膝根;桑科桑的叶；乌毛蕨科东方狗 脊蕨根茎;菊科刘子菊的根茎。
[0004] 聚藻:本品为小二仙草科狐尾藻属植物穗状狐尾藻Ntruiogtkkyn soucatyn L.的 全草。从4月至10月，隔2个月采收1次，每次采收池塘中1/2的聚藻，晒干或烘干。【性味】味 甘;淡;性寒。【功能主治】清热；凉血、解毒。主热病烦渴;赤白痢;丹毒;疮疖;烫伤。【化学成 份】含大量的脱植基叶绿素(chlorophyllide)。【原形态】穗状狐尾藻多年生沉水草本。 根状茎匍匐，节上生须根。茎圆柱形，伸长，常分枝，依水的深浅不同而长度不一，节间长3-4cm。叶4枚轮生;无柄;深绿色，长椭圆形至披针形，长2-3cm，羽状深裂，裂片线形，细密，13-20余对，互生和近对生。穗状花序顶生，长5-1 Ocm，挺立于水面，果期沉于水中；花单性，4至 多数轮生，雌雄花同株;雄花居上部，苞片绿色，边缘红色，长圆形，小苞片卵形，萼管钟状， 花萼4，卵状三角形，花瓣4，红色变绿，舟状匙形，早落，雄蕊8，淡绿色或黄绿色，长2mm;雌花 生下部，萼管几平截或具浅齿，花瓣4，卵圆形，先端钝，粉红色，早落，子房下位，4室，柱头4， 羽状，向外反转。果球形，直径1.5-3mm，分成4个分果另。花期4-10月。收载于中药大辞典。
[0005] 桉树果:本品为桃金娘科植物蓝桉Eucalyptus globulus Labill.的果实。夏季或 冬季果实成熟时采收，晒干。【性味】味辛;苦;性微温;小毒。【功能主治】理气;健胃；栽疟； 止痒。主食积;腹胀;疟疾;皮炎;癣疮。【原植物形态】蓝桉，常绿大乔木。树皮灰蓝色，往状 剥落;嫩枝略有棱。幼嫩叶对生;叶片卵形，基部心形，无柄，有白粉;成长叶片革质，披针形， 镰状，长15-30cm，宽l-2cm，两面有腺点，叶柄长1.5-3cm，稍扁平。花大，白色，径约4cm，单生 或2-3朵聚生于叶腋内；无花梗或极短;萼管倒圆锥形，长lcm，宽1.3cm，表面有4条突起棱角 和小瘤关突起，被白粉;帽状体稍扁平，中部为圆锥状突起，比萼管短，2层，外层平滑，早落； 雄蕊多数，长8-13_，多列，花丝纤细，着生于花药中部，花药椭圆形，阔耳状纵裂;子房与萼 管合生，花柱长7-8mm，粗大。蒴果半球形，有4棱，宽2-2.5cm，果缘平而宽，果瓣不突出。果期 夏季及冬季。收载于中药大辞典。
[0006] 1个原料药化学结构：
牛膝留酮（Inokosterone ) 〇

【发明内容】

[0007] 本发明的目的是克服【背景技术】的不足，提供一种有效治疗膀胱癌的药物组合物及 其制备方法。
[0008] 本发明是采用如下技术方案实现的： 制成该治疗膀胱癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为： 牛膝留酮26-30重量份聚藻1280-1290重量份桉树果840-846重量份。
[0009] 优选的用于治疗膀胱癌的药物组合物，是由如下重量份的原料药组成： 牛膝留酮28重量份聚藻1285重量份桉树果843重量份。
[0010] -种治疗膀胱癌的药物组合物，其特征在于药物组合物可以采用制剂学的常规方 法制备成片剂或胶囊剂或滴丸。
[0011] -种治疗膀胱癌的药物组合物，其特征在于药物组合物与化学药或中药组成的治 疗膀胱癌药物。
[0012] -种治疗膀胱癌的药物组合物的制备方法，其特征在于按如下步骤制备： 原料药的组成和重量份为:牛膝留酮26-30重量份聚藻1280-1290重量份桉树果840-846重量份； 制备方法： (1) 按原料药配比取牛膝留酮、聚藻、桉树果，混匀，用重量百分比浓度39.5%乙醇作为 溶剂，在28.5°C温浸提取，提取次数为15次，每次提取时间为18小时，每次溶剂用量为原料 药总重量的38倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.03，滤过， 药液通过FU-02大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度32%乙醇溶液洗脱FU-02 大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度32%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A; (2) 取步骤(1)药渣A，用重量百分比浓度64%乙醇作为溶剂，加热回流提取18次，每次提 取时间为〇. 7小时，每次溶剂用量为药渣A重量的26倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回 收乙醇，浓缩至相对密度1.11，滤过，药液通过NKA-9大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重 量百分比浓度83%乙醇溶液洗脱NKA-9大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度83%乙醇洗脱 液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B; (3) 将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
[0013] 优选的一种治疗膀胱癌的药物组合物的制备方法，其特征在于按如下步骤制备： 原料药的组成和重量份为:牛膝留酮28重量份聚藻1285重量份桉树果843重量份； 制备方法： (1) 按原料药配比取牛膝留酮、聚藻、桉树果，混匀，用重量百分比浓度39.5%乙醇作为 溶剂，在28.5°C温浸提取，提取次数为15次，每次提取时间为18小时，每次溶剂用量为原料 药总重量的38倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.03，滤过， 药液通过FU-02大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度32%乙醇溶液洗脱FU-02 大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度32%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A; (2) 取步骤(1)药渣A，用重量百分比浓度64%乙醇作为溶剂，加热回流提取18次，每次提 取时间为〇. 7小时，每次溶剂用量为药渣A重量的26倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回 收乙醇，浓缩至相对密度1.11，滤过，药液通过NKA-9大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重 量百分比浓度83%乙醇溶液洗脱NKA-9大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度83%乙醇洗脱 液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B; (3) 将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
[0014] -种治疗膀胱癌的药物组合物的制备方法，其特征在于药物组合物可以采用制剂 学的常规方法制备成片剂或胶囊剂或滴丸。
[0015] -种治疗膀胱癌的药物组合物的制备方法，其特征在于药物组合物与化学药或中 药组成治疗膀胱癌药物。
[0016] 药物组合物治疗膀胱癌疗效显著。
【具体实施方式】
[0017] 实施例1:治疗膀胱癌的药物组合物及其制备方法 治疗膀胱癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为:牛膝留酮28g聚藻1285g桉树 果843g; 制备方法： (1) 按原料药配比取牛膝留酮、聚藻、桉树果，混匀，用重量百分比浓度39.5%乙醇作为 溶剂，在28.5°C温浸提取，提取次数为15次，每次提取时间为18小时，每次溶剂用量为原料 药总重量的38倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.03，滤过， 药液通过FU-02大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度32%乙醇溶液洗脱FU-02 大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度32%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A; (2) 取步骤(1)药渣A，用重量百分比浓度64%乙醇作为溶剂，加热回流提取18次，每次提 取时间为〇. 7小时，每次溶剂用量为药渣A重量的26倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回 收乙醇，浓缩至相对密度1.11，滤过，药液通过NKA-9大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重 量百分比浓度83%乙醇溶液洗脱NKA-9大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度83%乙醇洗脱 液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B; (3) 将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
[0018] 实施例2:治疗膀胱癌的药物组合物及其制备方法 治疗膀胱癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为:牛膝留酮26g聚藻1290g桉树 果840g; 制备方法： (1) 按原料药配比取牛膝留酮、聚藻、桉树果，混匀，用重量百分比浓度39.5%乙醇作为 溶剂，在28.5°C温浸提取，提取次数为15次，每次提取时间为18小时，每次溶剂用量为原料 药总重量的38倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.03，滤过， 药液通过FU-02大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度32%乙醇溶液洗脱FU-02 大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度32%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A; (2) 取步骤(1)药渣A，用重量百分比浓度64%乙醇作为溶剂，加热回流提取18次，每次提 取时间为〇. 7小时，每次溶剂用量为药渣A重量的26倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回 收乙醇，浓缩至相对密度1.11，滤过，药液通过NKA-9大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重 量百分比浓度83%乙醇溶液洗脱NKA-9大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度83%乙醇洗脱 液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B; (3) 将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
[0019] 实施例3:治疗膀胱癌的药物组合物及其制备方法 治疗膀胱癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为:牛膝留酮30g聚藻1280g桉树 果846g; 制备方法： (1) 按原料药配比取牛膝留酮、聚藻、桉树果，混匀，用重量百分比浓度39.5%乙醇作为 溶剂，在28.5°C温浸提取，提取次数为15次，每次提取时间为18小时，每次溶剂用量为原料 药总重量的38倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.03，滤过， 药液通过FU-02大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度32%乙醇溶液洗脱FU-02 大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度32%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A; (2) 取步骤(1)药渣A，用重量百分比浓度64%乙醇作为溶剂，加热回流提取18次，每次提 取时间为〇. 7小时，每次溶剂用量为药渣A重量的26倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回 收乙醇，浓缩至相对密度1.11，滤过，药液通过NKA-9大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重 量百分比浓度83%乙醇溶液洗脱NKA-9大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度83%乙醇洗脱 液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B; (3) 将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
[0020] 实施例4:片剂的制备 取实施例1药物组合物270g，加入淀粉260，混匀，制粒，干燥，加微晶纤维素170g，硬脂 酸镁2g，混匀，压制成2000片，即得药物组合物片剂。
[0021] 实施例5:胶囊的制备 取实施例2药物组合物210g，加入淀粉189g，混匀，制粒，干燥，整粒，加入适量硬脂酸 镁，混匀，装胶囊1 〇〇〇粒，即得药物组合物胶囊。
[0022]实施例6:滴丸的制备 称取聚乙二醇6000 227g水浴(80°C)加热煮熔，加入实施例3药物组合物13g，充分搅 拌均匀，以液体石蜡为冷却剂，置玻璃管(4*80cm)中，冷却温度为5°C，滴口内外径为7.0/ 2.0 (mm/mm)，滴口距液面为2.5cm，滴速以每分45滴为最佳条件，用棉布吸干滴丸表面的冷 凝剂，即得药物组合物滴丸。
[0023]实验例1:治疗膀胱癌的试验研究 1资料与方法 1.1实验动物及分组 清洁级雌性Fisher344大鼠30只，雌雄各半，由牡丹江医学院实验动物研究中心提供。 实验分为3组，每组10只，即空白对照组、药物组合物组、猪苓多糖组。
[0024] 1.2主要试剂 药物组合物为实施例1药物组合物(批号20150303)、BBN试剂由黑龙江中医药大学购 进。IL-2、VEGF、AQPl、AQP3、β-actin测定试剂盒(哈尔滨海霞试剂有限公司）。
[0025] 1.3主要仪器 电子天平；电热恒温水浴锅(华夏仪器制造厂）；微量移液器(上海易友仪器有限公司）； TD5M-WS型台式低速离心机;全自动酶标仪-WD-2102A酶标仪;PCR扩增仪(PTC-100TM MJ Research公司）；数码凝胶成像分析系统等。
[0026] 1.4造模及给药方法 实验动物随机分为3组，每组10只，即空白对照组、猪苓多糖100mg/kg组、药物组合物 100mg/kg组，大鼠饮用含有0.05%BBN，持续8周，第9周给予含5 %糖精的饮用水和相应实 验组注射干预药物均为至第20周截止。大鼠采血后，把大鼠麻醉于手术台上分离膀胱组织。 [0027] 1.5指标测定 ELI SA法测血清中VEGF、IL-2含量;RT-PCR法测AQP1和AQP3表达情况。
[0028] 1.6数据处理 所得数据采用方差分析两均数间t检验，SPSS18.0软件分析，各组数据由x±s表示，P〈 0.05为具有统计学意义。
[0029] 2 结果 药物组合物对膀胱癌大鼠肿瘤抑制效果显著，其可以提高血清中IL-2含量，减少VEGF 含量水平，同时下调AQPl和AQP3基因表达，具体结果见表1，表2。
[0030] 表1药物组合物对大鼠外周血清中IL_2、VEGF(x土 s) 注:*与空白对照组比P〈〇. 01。
【主权项】
1. 一种治疗膀胱癌的药物组合物，其特征在于制成该药物组合物的原料药的组成和重 量份为： 牛膝留酮26-30重量份聚藻1280-1290重量份桉树果840-846重量份。2. 根据权利要求1所述一种治疗膀胱癌的药物组合物，其特征在于制成该药物组合物 的原料药的组成和重量份为： 牛膝留酮28重量份聚藻1285重量份桉树果843重量份。3. 根据权利要求1所述一种治疗膀胱癌的药物组合物，其特征在于药物组合物可以采 用制剂学的常规方法制备成片剂或胶囊剂或滴丸。4. 根据权利要求1所述一种治疗膀胱癌的药物组合物，其特征在于药物组合物与化学 药或中药组成的治疗膀胱癌药物。5. -种治疗膀胱癌的药物组合物的制备方法，其特征在于按如下步骤制备： 原料药的组成和重量份为：牛膝留酮26-30重量份聚藻1280-1290重量份桉树果840-846重量份； 制备方法： (1) 按原料药配比取牛膝留酮、聚藻、桉树果，混匀，用重量百分比浓度39.5%乙醇作为 溶剂，在28.5°C温浸提取，提取次数为15次，每次提取时间为18小时，每次溶剂用量为原料 药总重量的38倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.03，滤过， 药液通过FU-02大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度32%乙醇溶液洗脱FU-02 大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度32%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A; (2) 取步骤（1)药渣A，用重量百分比浓度64%乙醇作为溶剂，加热回流提取18次，每次提 取时间为〇. 7小时，每次溶剂用量为药渣A重量的26倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回 收乙醇，浓缩至相对密度1.11，滤过，药液通过NKA-9大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重 量百分比浓度83%乙醇溶液洗脱NKA-9大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度83%乙醇洗脱 液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B; (3) 将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。6. 根据权利要求5所述一种治疗膀胱癌的药物组合物的制备方法，其特征在于按如下 步骤制备： 原料药的组成和重量份为:牛膝留酮28重量份聚藻1285重量份桉树果843重量份； 制备方法： (1) 按原料药配比取牛膝留酮、聚藻、桉树果，混匀，用重量百分比浓度39.5%乙醇作为 溶剂，在28.5°C温浸提取，提取次数为15次，每次提取时间为18小时，每次溶剂用量为原料 药总重量的38倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.03，滤过， 药液通过FU-02大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度32%乙醇溶液洗脱FU-02 大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度32%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A; (2) 取步骤（1)药渣A，用重量百分比浓度64%乙醇作为溶剂，加热回流提取18次，每次提 取时间为〇. 7小时，每次溶剂用量为药渣A重量的26倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回 收乙醇，浓缩至相对密度1.11，滤过，药液通过NKA-9大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重 量百分比浓度83%乙醇溶液洗脱NKA-9大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度83%乙醇洗脱 液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B; (3)将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。7. 根据权利要求5所述一种治疗膀胱癌的药物组合物的制备方法，其特征在于药物组 合物可以采用制剂学的常规方法制备成片剂或胶囊剂或滴丸。8. 根据权利要求5所述一种治疗膀胱癌的药物组合物的制备方法，其特征在于药物组 合物与化学药或中药组成治疗膀胱癌药物。
【文档编号】A61K36/61GK106074715SQ201610501343
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年6月30日
【发明人】不公告发明人
【申请人】济南星懿医药技术有限公司