一种益肝护肾发酵中药组合物及其应用
【专利摘要】本发明公开了一种益肝护肾发酵中药组合物及其应用，所述组合物主要由苍术、板蓝根、柴胡、黄柏、五味子、茯苓组成，经由有益真菌发酵后，有效成分释放完全，发酵后的组合物和菌株可以一起制成不同剂型，如散剂、超微粉、溶液、颗粒剂、胶囊、片剂、混悬液；本发明所得组合物发酵工艺容易控制，在保健品、药品中可以广泛推广，临床可以替代畜禽用益肝护肾类其他物质的使用，用于畜禽肝肾疾病的预防与治疗。
【专利说明】
一种益肝护肾发酵中药组合物及其应用
技术领域
[0001] 本发明属于中兽药技术领域，特别涉及一种预防、治疗畜禽肝肾疾病含中药组合 物及发酵技术在此组合物中的应用，发酵后的组合物用于畜禽肝肾疾病的防治上的应用。
【背景技术】
[0002] 肝脏是动物机体内最大的代谢和解毒器官，大部分临床用药物都要通过肝脏才能 转化、吸收；另外肝脏还是机体最大的分泌腺体，它在机体的胆汁生成、凝血、免疫、热量产 生及水与电解质的调节中均起着非常重要的作用，可以说肝脏是机体内的一个巨大的"化 工厂"。同时肝脏也是非常重要的屏障机构，所以易受各种致病因素的侵害发生损伤。常见 的生物性致病因素有:细菌、病毒、寄生虫及其细菌和寄生虫的代谢产物等，例如大肠杆菌、 沙门氏菌、禽霍乱、弧菌性肝炎都可以引起肝脏病变;常见的化学性致病因素有:重金属、氯 霉素、利福平、磺胺药等。以及一些维生素、矿物质及微量元素缺乏：如硒、蛋氨酸、鱼肝油 等。以上因素均可对肝脏产生一定的损伤，可引起肝细胞的代谢障碍，导致肝脏变性、坏死、 出血等一系列的病理变化。
[0003] 畜禽的临床解剖检查，都要重点检查肝脏的外观形态、大小、色泽、被膜颜色、有无 出血、有无结节、有无坏死、有无变性等。然后切开肝脏观察切面有无窿突，有无寄生虫，有 无脓肿等变化。肝脏具有生成胆汁、产生热量、免疫防御、解毒、造血等功能，畜禽肝脏受损 会对机体产生巨大的危害。目前市场上保肝护肾产品主要有:化药饲料添加剂、矿物质类、 乌洛托品制剂、喹诺酮类制剂等。各类保肝护肾类药物的特点存在不足。
[0004] 化药饲料添加剂护肝保肾产品，有毒副作用，易造成肝肾代谢残留，对肝肾功能有 损害。
[0005] 矿物质类制剂，含有碳酸钠或碳酸氢钠，能增加喹诺酮类药物对肾脏的毒性。
[0006] 乌洛托品制剂，在酸性条件下起作用，能释放出甲醛而杀菌，可是在酸性条件下很 多药物成盐而沉积在肾脏，对肾脏造成毒害。
[0007] 喹诺酮类制剂，对肾炎有作用，但此类药物本身对肾脏有毒害作用。
[0008] 目前市场上治疗畜禽肝肾疾病以以上药物为主，纯中药制剂为稀缺。应用纯中药 保肝护肾，无残留、无耐药性，适合用户的选择，市场前景很可观。
[0009] 发明人根据保肝护肾重要中药的筛选，批量考察了保肝解毒的中草药，如:灵芝、 龙胆草、决明子、黄苓、茵陈、芦荟、泽泻、水牛角、青黛、半枝莲等。确定了本中药组合物，组 合物由苍术、板蓝根、柴胡、黄柏、五味子、茯苓六味组成。选苍术为君药，用以燥湿健脾，加 强运化水湿，减少水液在肾的滞留，缓解肾脏肿胀;选板蓝根为臣药，泻心火以缓解心阳对 肾阴的炽灼之力，促进肾阴与肾阳的平衡，快速恢复"肾主水、分清泌池"的功能;选柴胡、五 味子为佐药，配合君药苍术泻肝火以纠正肝木疏泄偏胜之弊，使脾运趋于正常，减少腹泻的 发生;选黄柏、茯苓为使药，引领众药入肾兼能泻相火、除湿热、养肾阴，大大促进"肾主水、 分清泌池"之功能的恢复。
[0010]组合物经过真菌或细菌发酵后，药效释放更为全面，保证畜禽摄入足量的药物，快 速达到治疗效果，组合物组方合理、发酵工艺新颖，生产的产品具有可靠性、安全性，在畜禽 生产上有着广阔的利用前景。
【发明内容】
[0011] 发明人经过深入、细致试验，成功开发出了一种益肝护肾发酵中药组合物及其应 用，并用实验证明了其疗效。本发明的重点是利用发酵，使药物充分释放，获得的发酵后的 中药组合物不用与真菌分离，可以直接加工成临床可以接受的制剂类型。本发明能有效解 决畜禽肝肾问题。本发明无残留、无不良影响，对畜禽发病久、各种类型引起的肝肾损伤均 有良好效果。
[0012] -种益肝护肾发酵中药组合物及其应用，包括苍术、板蓝根、柴胡、黄柏、五味子、 茯苓。
[0013] -种益肝护肾发酵中药组合物及其应用，各组成成分按重量份数计为:苍术2~6 份、板蓝根2~6份、柴胡1~4份、黄柏0.5~3份、五味子1~4份、茯苳1~3份。
[0014] 所述组合物各组成成分按重量份数计为:苍术4份、板蓝根4份、柴胡2份、黄柏1份、 五味子2份、茯苳2份。
[0015] 所述一种益肝护肾发酵中药组合物及其应用，其特征在于组合物可用真菌发酵， 真菌可以选自香菇、木耳、草菇、银耳、灵芝中的一种。
[0016] 所述的一种益肝护肾发酵中药组合物及其应用，其特征在于发酵过程是通过下述 步骤完成的：
[0017] ⑴将中药组合物进行粉碎，粉碎后的粒径在20-200目，混合。
[0018] ⑵粉碎后的中药混合物加水，控制混合物的湿度在40 % -80 %之前；
[0019] (3)上述混合物在115°C的条件下灭菌30min;
[0020] (4)按照1 %-15 %的接种量接种真菌进行发酵，调节混合物的pH值在3.5-8.0之 间；
[0021] (5)真菌发酵时间控制在4-8天。
[0022] 所述组合物可以制备为方便畜禽使用的各种剂型，包括散剂、超微粉、溶液、颗粒 剂、胶囊、片剂、混悬液。
[0023]本发明的有益效果是：
[0024] 1、组方合理，治防结合，方中诸药联合应用，无引起食品安全隐患的药物残，畜禽 对此不产生耐药性，标本兼治；
[0025] 2、所述中药组合物，根据畜禽不同的饲喂习惯，可制成易溶于水的口服液、颗粒剂 供畜禽使用，制成散剂供拌料使用。
[0026] 3、中药采用发酵法进行处理，可以使有效物质更充分释放，避免了中药材有效成 分的浪费。
【具体实施方式】
[0027] 结合以下实施例可以观察到本发明的有益性质，这些实施例是说明性的，不会对 本发明构成限制。
[0028] 实施例1畜禽肝肾保健用中药散剂的配制
[0029 ] I、配方组成:苍术6kg、板蓝根6kg、柴胡4kg、黄柏3kg、五味子4kg、茯苳3kg。
[0030] 2、制备成散剂:先将中药组合物按配方称取，分别粉碎，过40目筛;粉碎后药物边 搅拌边加水，控制湿度在80% ;然后放入高压灭菌柜内，在115°C的条件下灭菌30min;
[0031] 按照15%的接种量接种灵芝孢子进行发酵;发酵时间为5天，发酵温度为30°C，发 酵结束烘干本混合物。混合物进行粉碎，即得益肝护肾散剂25kg。
[0032] 3.临床应用:适用范围适用于春初、各阶段畜禽需要增强肝脏功能阶段。用法用量 为，增强肝脏机能用，本品每2.5kg拌料1吨;发生肝肾疾病后进行治疗，本品每5kg拌料1吨； 建议连用5-7天。
[0033] 实施例2畜禽肝肾疾病用中药口服液的配制
[0034] 1、配方组成:苍术20kg、板蓝根20kg、柴胡10kg、黄柏5kg、五味子10kg、茯苳10kg。
[0035] 2.制备成口服液:先将中药组合物按配方称取，分别粉碎，过80目筛;粉碎后药物 边搅拌边加水，控制湿度在40% ;然后放入高压灭菌柜内，在115°C的条件下灭菌30min;
[0036] 按照1 %的接种量接种木耳子实体，调节发酵温度为32°C，发酵时间为5天;发酵结 束后，在上述混合物中加750L水，浸泡4小时，煎煮两次，第一次4小时；分离出上清后，在中 药混合物中加600kg水，进行第二次煎煮，煎煮时间为2小时。每次沸后保持微沸状态，两次 药液混匀合并过滤后，减压浓缩回收至溶液浓度为lg/ml(每ml溶液含Ig生药材），冷藏24小 时，在线超速离心机，去除沉淀和不溶物;滤液再冷藏24小时后，进行离心，最后流通蒸汽灭 菌30分钟，灌装，即得。
[0037] 3.临床应用:适用范围适用于春末夏初、各阶段畜禽。用法用量为，防止肝肾疾病 时，本品每1-3L兑水1吨;发生肝肾后进行治疗，本品每2-5L兑水1吨;建议连用5-7天。
[0038] 实施例3畜禽肝肾疾病用中药超微粉的配制
[0039] 1、配方组成:苍术40kg、板蓝根40kg、柴胡20kg、黄柏10kg、五味子20kg、茯苳20kg。
[0040] 2、制备成溶液:先将中药组合物按配方称取，分别粉碎，过200目筛;粉碎后药物边 搅拌边加水，控制湿度在60% ;然后放入高压灭菌柜内，在115°C的条件下灭菌30min;
[0041] 按照10%的接种量接种灵芝孢子，调节发酵温度为30°C，发酵时间为7天;发酵结 束后，混合物进行超微粉碎，使混合物全部能通过300目筛，即得益肝护肾超微粉130kg。
[0042] 3、临床应用:适用范围适用于快速生产阶段、使用化药控制常发疾病的、各阶段畜 禽。用法用量为，防止肝肾疾病时，本品每〇. 5-2克拌料1公斤;发生肝肾后进行治疗，本品每 1-3克拌料1公斤;建议连用5-7天。
[0043] 实施例4、实施例产品有效成分的含量比较试验
[0044] 1、发酵前后组合物总多糖的影响
[0045] 发酵液中总多糖含量测定原理:利用硫酸-蒽酮分光光度法在室温下测定发酵液 中总糖含量。
[0046] 1.1试剂与溶液
[0047] 纯化水、浓硫酸、苯酚、3%苯酚溶液:称取3g苯酚，置于100mL容量瓶内，以适量水 溶解，以水稀释至刻度，摇匀，即得。
[0048] 1.2设备仪器
[0049]电子天平感量0.1 mg FA2004天津天马衡基仪器有限公司；紫外分光光度计Icm石 英比色皿。
[0050] 1.3操作步骤
[00511 1.3.1对照品溶液的制备
[0052]精密称取在105°C干燥至恒重的无水葡萄糖O.lg，置100mL量瓶中，加水溶解并稀 释至刻度，摇匀，精密量取l〇ml，置200ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得(每1ml含葡萄糖50 yg)〇
[0053] 1.3.2供试品溶液的制备
[0054]实施例1产品发酵前后留样，分别精密称取本实施例1发酵前后产品各5g，置500ml 量瓶中，加水并稀释至刻度，60°C超声提取1小时，即得供试品溶液。
[0055] 1.3.3 测定法
[0056]别精密量取对照品溶液与供试品溶液各2ml，分别置具塞试管中，加入3%苯酚溶 液2ml，摇匀，冲入硫酸9ml，摇匀、放置至室温，立即测定，照分光光度法，在490nm波长处分 别测定吸光度，计算，即得。
[0057] 1.4测定结果
[0058] 实施例1产品在接种茯苓孢子之前留样与接种发酵后的留样，经过提取与多糖含 量测定，得到的多糖含量对比表如下。
[0059] 表1发酵对多糖提取率的影响
[0061 ]~注表示差异极显著，下同。
[0062] 2、发酵前后组合物中盐酸小檗碱含量测定
[0063]照高效液相色谱法测定。
[0064]色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.1%磷酸 溶液-十二烷基硫酸钠(50:50:0.1)为流动相;检测波长为265nm。理论板数按盐酸小檗碱峰 计算应不低于4000。
[0065] 对照品溶液的制备精密称取盐酸小檗碱对照品适量，加流动相制成每1ml含0.1 mg 的溶液，即得。
[0066] 供试品溶液的制备精密量称取实施例2发酵前仅同法煎煮与发酵后煎煮溶液各 5ml，置IOml容量瓶中加水稀释置刻度，摇匀，过滤，取续滤液，即得。
[0067] 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各IOul，注入液相色谱仪，测定，即 得。
[0068] 表2发酵对盐酸小檗碱提取率的影响
[0070]由上述实验可以得出，有益真菌发酵中药后，中药组合物中的多糖、盐酸小檗碱含 量有显著提高。
[0071 ]实施例5、实施例2 口服液临床应用试验方案 [0072] 1.试验目的：
[0073]通过本发明实施例2样品在临床上的应用，确定产品对禽常见肝肾疾病的预防、治 疗作用，如滥用药物、病毒性和细菌性疾病引起的鸡肝脏肿大、肝炎、脂肪肝、花斑肾等肝肾 疾病。
[0074] 2 _实验方案
[0075] 2.1试验对象
[0076] 试验选取日龄相近、上述肝肾发病征兆相近的鸡群，以20日龄为主。随机分为两 组，试验组、对照组。试验组单独使用实施例2 口服液，对照组不使用任何药物或按常规用药 方式进行投药;实验做和对照组尽量只在益肝护肾药品上不同，其他给药相同。详细记录， 按常规要求进行饲养管理和免疫。
[0077] 2.2试验材料本次试验的实验品由瑞普(天津)生物药业有限公司研发中心提供， 试验样品：实施例2口服液，250ml/瓶，批号：20160525。对照组使用药物北京某厂家的肝肾 康，按2000斤水/瓶常规用药。
[0078] 2.3试验方法对照组和试验组均采用试验鸡厂一贯的饲养标准和日粮。试验组给 药方法:饮水给药的用法用量是:试验组使用实施例2 口服液按每250ml (-瓶)本品兑水500 斤，进行集中饮水，每日一次，连用5天。用药5天比较鸡群死亡率、料肉比、肝肾疾病控制及 恢复情况和精神状态等。药物使用过程中详细记录疾病控制情况、鸡群变化、耗料量变化 等。
[0079] 3实验结果
[0080]实验组鸡共有15000只鸡，实验组鸡群用完实施例2中药口服液后，大群鸡呼吸道 明显减轻，粪便变软，而且不拉稀，剖检肾肿胀现象消失，肺水肿现象消失，吃料也明显的上 涨（用药前，此批鸡的耗料量差两天跟上正常料；用药后耗料能跟上天，即和正常日龄鸡耗 料一样）；对照组为用北京某兽药厂肝肾康产品，对照组鸡共八千只鸡，用完药后鸡群的精 神状态见好，但仍有5%可见的拉稀现象，说明肾脏的未完全恢复，由此判断实验组药物对 疾病鸡的消肿程度好于对照组。
【主权项】
1. 一种益肝护肾发酵中药组合物，其特征是所述组合物包含以下成分:苍术、板蓝根、 柴胡、黄柏、五味子、茯苳。2. 根据权利要求1所述的一种益肝护肾发酵中药组合物，其特征在于所述组合物各组 成成分按重量份数计为:苍术2~6份、板蓝根2~6份、柴胡1~4份、黄柏0.5~3份、五味子1 ~4份、茯苓1~3份。3. 根据权利要求2所述的一种益肝护肾发酵中药组合物，其特征在于所述组合物各组 成成分按重量份数计为:苍术4份、板蓝根4份、柴胡2份、黄柏1份、五味子2份、茯苓2份。4. 根据权利要求1所述的一种益肝护肾发酵中药组合物，其特征在于组合物用真菌发 酵，真菌为香菇、木耳、草菇、银耳、灵芝中的一种。5. 根据权利要求1-4任一所述的一种益肝护肾发酵中药组合物，其特征在于发酵过程 是通过下述步骤完成的： (1) 将中药组合物粉碎，粉碎后的粒径在20-200目，混合； (2) 粉碎后的中药混合物加水，控制混合物的湿度在40 %-80 %之前； (3) 上述混合物在115°C的条件下灭菌30min; (4) 按照1 %-15 %的接种量接种真菌进行发酵，调节混合物的pH值在3.5-8.0之间； (5) 发酵时间在4-8天。6. 根据权利要求1至7任一所述的一种益肝护肾发酵中药组合物，其特征在于所述组合 物制备为散剂或超微粉或溶液或颗粒剂或胶囊或片剂或混悬液，供临床使用。
【文档编号】A61P13/12GK106074827SQ201610768059
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年8月30日
【发明人】刘桂兰, 史德胜, 刘爱玲, 李旭东, 夏雪林, 刘拓
【申请人】瑞普（天津）生物药业有限公司