专利名称：：水性酶递送系统的制作方法水性酶递送系统本发明涉及适合用作化妆品和个人护理产品添加剂的稳定的水性和非水性酶递送系统，并涉及包含有效量的至少一种酶的稳定的水性化妆品和个人护理产品，以及酶在娱乐性用水项目中的使用。己知化妆品和个人护理产品包含多种酶，例如，蛋白酶、脂肪酶和氧化酶。蛋白酶能够从皮肤剥脱细胞，因而可用于更新和润湿皮肤，逆转皮肤老化的外部特征。脂肪酶可用于处理皮肤或头发的过度油性，氧化酶可用于破坏黑色素，从而淡化皮肤或漂白头发。许多酶在水性系统中很快失去活性。因此，需要稳定水性化妆品或个人护理产品中的酶。己进行了各种尝试以稳定水性化妆品组合物中的酶，尤其是蛋白酶。US5,830,449A描述了一种用于清洁和/或保护皮肤的化妆品组合物。该组合物包含至少一种酶，例如蛋白酶、脂肪酶或乳过氧化物酶，以及稳定系统，该系统由至少一种多元醇和至少一种丙烯酸或甲基丙烯酸聚合物构成。多元醇可以是甘油或二醇，例如丙二醇或聚乙二醇。US5,935,559A描述了一种用于清洁皮肤或用于对抗皮肤干燥、老化或色素沉着的化妆品组合物。它包含硅油和多元醇的组合，该组合用作稳定系统以维持水敏感性试剂如酶(例如，蛋白酶)的活性。多元醇可以是甘油或二醇，例如丙二醇或聚乙二醇。为制备包含有效量的至少一种酶的化妆品和个人护理产品，更方便的方法是使用水性或非水性酶递送系统，即溶液、乳剂或分散体而非酶粉末。这种酶递送系统操作更容易且吸入风险较小。迄今为止尚未描述在娱乐性用水项目中使用酶。本发明的一个目的是提供适用于制备水性化妆品或个人护理产品的稳定5的水性酶递送系统。本发明的目的还有，提供包含有效量的至少一种酶的稳定的水性化妆品或个人护理产品。发现与甘油的稳定作用相比，含有至少15个碳原子的聚甘油在水性酶递送系统中对酶的稳定作用有所提高。本发明水性酶递送系统包含至少一种酶和具有至少15个碳原子的聚甘油。酶可以是水解酶(EC3)、氧化还原酶(EC1)或包含水解酶和/或氧化还原酶的混合物。水解酶的例子有脂肪酶、酯酶、淀粉酶、纤维素酶和蛋白酶。氧化还原酶的例子有氧化酶和过氧化物酶。优选地，酶选自蛋白酶、脂肪酶、酯酶和氧化酶。更优选地，酶是蛋白酶。甚至更优选地，酶是半胱氨酸蛋白酶。最优选地，酶是木瓜蛋白酶和/或菠萝蛋白酶。可调节水性酶递送系统中酶的浓度，使其适合用作水性化妆品和个人护理产品的添加剂。例如，水性递送系统中木瓜蛋白酶的浓度为100-10,000PU/mg,菠萝蛋白酶的浓度为1-1,000GDU/g，葡萄糖氧化酶的浓度为500-1,000GO/g，脂肪酶的浓度为100-10,000LU/g。蛋白分解单位(PU)被定义为每小时释放一毫克酪氨酸的酶的量。明胶消化单位(GDU)定义为20分钟后在pH值为4.5或5.5条件下从标准明胶释放1毫克氨基氮的酶的量。脂肪酶单位(LU)的确定过程如下丁酸对硝基苯基酯在脂肪酶作用下水解形成硝基酚，在给定时间测量吸收度并与标准相比较。葡萄糖氧化酶活性滴定计量单位(GO)是35°C、50分钟内将3毫克葡萄糖氧化成葡糖酸的酶的量。具有至少15个碳原子的聚甘油可以是单一混合物或它们的混合物。具有至少15个碳原子的聚甘油的例子是五甘油、六甘油、七甘油、八甘油、九甘油和十甘油。优选地，聚甘油含有至少21个碳原子，更优选至少27个碳原子，甚至更优选至少30个碳原子。最优选地，聚甘油是十甘油。水性酶递送系统可包含抗微生物剂，例如Geogard361和NatrulonPC-15。在一个实施方式中，水性酶递送系统还包含多元醇。多元醇可以是最多具有6个碳原子的单体多元醇或聚合多元醇。最多具有6个碳原子的多元醇的例子是甘油、乙二醇、丙二醇、丁二醇和山梨糖醇。聚合多元醇的例子是聚乙二醇200禾口400。优选地，聚甘油/多元醇的比例至少为l:10(重量/重量)，更优选聚甘油/多元醇的比例至少为l:l(重量/重量)。最优选该比例大于5:1(重量/重量)。水性酶递送系统可以是溶液、油包水乳剂或水包油乳剂。在一个优选的实施方式中，水性酶递送系统形成溶液。优选地，在形成溶液的水性酶递送系统中，聚甘油和任选的多元醇的总含量至少为40重量％。更优选地，至少为60重量％。最优选地，80重量％。在第二个优选的实施方式中，水性酶递送系统还包含水不混溶性液体，形成油包水乳剂。水不混溶性液体可以是粘稠的脂肪酸酯、粘稠的烃如矿物油、合成油如硅油或它们的混合物。粘稠的脂肪酸酯的例子是Aldo⑧MCT，它是混合的甘油与辛酸和癸酸的酯。优选地，在形成油包水乳剂的水性酶递送系统中，聚甘油和多元醇的总含量至少为5重量％。更优选地，至少为7重量％。最优选地，10重量％。形成油包水乳剂的水性酶递送系统可还包含增稠剂如NovemerEC-I，乳化剂如LonzestMSA(单硬脂酸甘油酯)、LonzestSMS(单硬脂酸山梨糖醇酯)或Pegosperse⑧1750MS(单硬脂酸聚乙二醇酯)。本发明还包括以下方法和过程通过具有至少15个碳原子的聚甘油在水性酶递送系统中稳定酶的方法。制备包含有效量的至少一种酶的溶液形式的水性化妆品或个人护理产品的方法，该方法包括以下步骤将形成溶液的本发明水性酶递送系统加入到化妆品或个人护理产品中。形成溶液的水性化妆品或个人护理产品的例子是沐浴露和香波。通过形成溶液的本发明水性酶递送系统在娱乐性用水项目中处理人皮肤的方法。娱乐性用水项目的例子包括热水盆浴、温泉浴、池浴、治疗性沐浴/池浴、水疗系统、足浴和Jacuzzi⑧涡流池浴。适用于娱乐性用水项目的水性酶递送系统可还包含草药提取物和/或精油。制备包含有效量的至少一种酶的乳剂形式、优选水包油乳剂形式的水性化妆品或个人护理产品的方法，该方法包括以下步骤将本发明水性酶递送系统7加入到化妆品或个人护理产品中。乳剂形式的化妆品或个人护理产品的例子包括乳膏、洗剂、胭脂、粉底、防晒剂、亮白剂、肤色暗化剂和彩妆(make-up)。本发明的目的还有，提供包含有效量的至少一种酶的稳定的水性化妆品或个人护理产品。通过包含有效量的酶和具有至少15个碳原子的聚甘油的本发明水性化妆品或个人护理产品实现上述目的。发现与甘油的稳定作用相比，具有至少15个碳原子的聚甘油在水性化妆品和个人护理产品中对酶的稳定作用有所提高。此外，与包含甘油的水性化妆品和个人护理产品相比，包含有效量的蛋白酶和具有至少15个碳原子的聚甘油的水性化妆品和个人护理产品对人皮肤的润湿作用有所提高。水性化妆品和个人护理产品的例子是沐浴和清洁产品如沐浴露、香波、肥皂，浴后产品如皮肤软化剂、除胼胝剂、剥脱剂、肤色亮白剂，皮肤乳膏和洗剂如手、面部或膝盖处使用以光滑、调理、减轻皱纹、淡化、暗化或保护皮肤免受环境侵袭，卸妆产品，按摩乳膏和洗剂，以及彩妆如胭脂、粉底、彩妆和眼部彩妆。在一个实施方式中，水性化妆品或个人护理产品可还包含多元醇。上文给出的对水性酶递送系统的酶、聚甘油和多元醇的定义和偏好也可应用于本发明水性化妆品和个人护理产品的酶、聚甘油和多元醇。水性化妆品和个人护理产品可以是任何合适的形式，例如溶液、油包水乳剂或水包油乳剂。优选地，将本发明水性化妆品或个人护理产品与水不混溶性液体组合，形成水包油乳剂。以上给出的对水不混溶性液体的定义也适用于本发明水性化妆品和个人护理产品。优选地，聚甘油和任选的多元醇的总含量至少为7%，更优选至少10%，最优选至少15%。本发明还包括以下方法通过本发明水性化妆品或个人护理产品处理人皮肤的方法。优选地，使用包含蛋白酶的本发明水性化妆品或个人护理产品，皮肤处理包括剥脱皮屑8(exfoliate)和润湿皮肤。通过具有至少15个碳原子的聚甘油在水性化妆品或个人护理产品中稳定酶的方法。本发明的另一个目的是提供适合用作乳剂形式的水性化妆品或个人护理产品以及非水性化妆品或个人护理产品的添加剂的非水性酶递送系统。本发明非水性酶递送系统是至少一种酶在非水性粘稠液体中的分散体。以上给出的对水性酶递送系统中的酶的定义和偏好也适用于非水性递送系统的酶。非水性粘稠液体的例子是粘稠的烃如矿物油、合成油如硅油、酯如脂肪酸酯、醇如聚乙氧基化山梨糖醇以及胺如聚乙烯亚胺。优选地，非水性粘稠液体是矿物油如VersagelM-200。本发明还包括以下方法制备乳剂、优选水包油乳剂形式的水性化妆品或个人护理产品的方法，其中，所述产品包含有效量的至少一种酶，该方法包括将本发明非水性酶递送系统加入到水性化妆品或个人护理产品中的步骤。乳剂形式的水性化妆品或个人护理产品的例子如上所述。制备包含有效量的至少一种酶的非水性化妆品或个人护理产品的方法，该方法包括将本发明非水性酶递送系统加入到非水性化妆品或个人护理产品中的步骤。非水性化妆品和个人护理产品的例子是卸妆产品、体油和浴油。本发明的目的还有，提供在娱乐性用水项目中处理人皮肤的方法。本发明方法包括通过酶在娱乐性用水项目中处理人皮肤。娱乐性用水项目的例子如上所述。优选的娱乐性用水项目是温泉浴(spa)和热水盆浴。上述水性酶递送系统中酶的定义和偏好也适用于在娱乐性用水项目中处理皮肤的酶。沐浴通常伴随着皮肤干燥。意外地发现，娱乐性用水中蛋白酶的存在不仅可以防止皮肤干燥而且具有优良的皮肤润湿作用。优选地，本发明方法包括通过蛋白酶在娱乐性用水中剥脱皮屑和润湿人皮肤。实施例1蛋白酶在溶液形式的水性蛋白酶递送系统中的稳定性。将木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶溶解在十甘油/水(80/20)或甘油/水(80/20)中，木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶的最终浓度分别为200PU/mg和2.3GDU/g。将溶液在37"C下储存8周。2天、l周、2周、4周、6周和8周后通过酪蛋白消化测定蛋白酶的活性。结果如表l所示。蛋白酶在十甘油/水(80/20)中的稳定性优于在甘油/水(80/20)中的稳定性。表l:蛋白酶在溶液形式的水性递送系统中的稳定性<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>縮写nd-没有检测实施例2通过溶液形式的水性蛋白酶递送系统制备水包油乳剂形式的皮屑剥脱和皮肤润湿乳膏。配方l:皮屑剥脱和皮肤润湿乳膏<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>将相1加热至8(TC并加入到80'C下剧烈搅拌的相2中。80'C下剧烈搅拌所得混合液1小时并在搅拌下缓慢冷却至4(TC以下。缓慢加入相3。将混合液的pH值调节至5.8，加入实施例1的水性酶递送系统，即木瓜蛋白酶(200PU/mg)和菠萝蛋白酶(2.3GDU/g)在十甘油/水(80/20)中的溶液。实施例3蛋白酶在皮屑剥脱和皮肤润湿乳膏中的稳定性。将包含7重量％的十甘油的配方1的皮屑剥脱和皮肤润湿乳膏(实施例2)以及与配方l相同、但含有甘油而不是十甘油的对照乳膏在37"下储存8周。1、2、4、6、8周后通过酪蛋白消化测定蛋白酶活性。结果如表2所示。蛋白酶在配方1乳膏中的活性优于在对照乳膏中的活性。<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>实施例4配方1乳膏(实施例2)对人皮肤的皮屑剥脱/皮肤润湿作用用配方1的乳膏及对照乳膏处理人皮肤，对照乳膏与配方1的乳膏相同，区别在于用甘油代替十甘油、不含蛋白酶，或者区别在于用甘油代替十甘油且不含蛋白酶。每天一次用乳膏处理皮肤持续11天，每天在处理前测定皮肤表面的导电性。蛋白酶剥脱皮肤外层死皮，同时暴露出下层新生的皮肤细胞。这些新的皮肤细胞的水合程度比剥脱的细胞的水合程度更高，因而能更有效地导电。结果如表3所示。表3:用乳膏处理皮肤后皮肤表面的水分含量皮屑剥脱/皮肤润湿乳<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>实施例5用于润湿人皮肤的蛋白酶在娱乐性用水项目中的应用4(TC，在模拟温泉浴条件下，即在含有0.04PU/mg木瓜蛋白酶和加入6ppmBr2作为杀毒剂的水中浸润人皮肤15分钟。15分钟浸润后1小时，通过测量其导电性来确定皮肤水分含量。第一次15分钟浸润后5小时，在相同的模拟温泉浴条件下再次浸润15分钟，第二次15分钟浸润后16小时，测定皮肤水分含量。作为对照，还测定了在不含蛋白酶的相同条件下浸润的皮肤水分含量。结果如表4所示。表4:用含蛋白酶的水处理皮肤后皮肤的水分含量水包含的组分与处理之前的皮肤水分含量相比，皮肤水分含量的变化[%]第一次15分钟浸润后1小时第二次15分钟浸润后16小时无蛋白酶-6.8-12.2蛋白酶15.826.0实施例6制备适用于热浴盆的水性蛋白酶递送系统。12配方2:适用于热浴盆的水性蛋白酶递送系统成分[重量％]十甘油80.00木瓜蛋白酶(62,000PU/g)2.80菠萝蛋白酶(33，000GDU/g)0.10草药提取物0.10精油0.50水16.25Geogard3610.25将木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶的水溶液加入到十甘油中。将pH值调节至6.4，加入草药提取物、精油和Geogard361。实施例7制备适用于热浴盆或温泉浴的水性蛋白酶/脂肪酶递送系统配方3:适用于热浴盆和温泉浴的水性蛋白酶/脂肪酶递送系统<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>将硼砂加入到木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶和脂肪酶的水溶液中。将该溶液加入到十甘油中。将pH值调节至6.4，加入草药提取物、精油和Geogard361。实施例8制备含十甘油和有效量的氧化酶的皮肤亮白乳膏<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>将相1加热至8(TC并加入到8(TC下剧烈搅拌的相2中。8(TC下剧烈搅拌所得混合液1小时并在搅拌下缓慢冷却至4CTC以下。缓慢加入相3。将混合液的pH值调节至5.8，加入相4。实施例9制备油包水乳剂形式的水性蛋白酶递送系统组合物l:油包水乳剂形式的水性蛋白酶递送系统成分[重量％]相1AldoMCT40.00Pegosperse1750MS1.50LonzestMSA3.00LonzestSMS5.00相2十甘油7.00水42.00相3NovemerEC-11.00相4Geogar鹏3610.50相5木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶将相1加热至8(TC并加入到8(TC下剧烈搅拌的相2中。8(TC下剧烈搅拌所得混合液1小时并在搅拌下缓慢冷却至4(TC以下。缓慢加入相3和相4。将乳剂的pH值调节至5.8,加入木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶的粉末，使其最终活性分别为200PU/mg和2.3GDU/g。实施例10蛋白酶在油包水乳剂形式的水性蛋白酶递送系统中的稳定性将实施例9的蛋白酶递送系统在37T:下储存。2天和1、2、4、6、8周后通过酪蛋白消化测定蛋白酶活性。将与实施例9相同但包含甘油而不是十甘油、或者根本不包含稳定剂的对照乳剂也在37X:下储存。此外，将木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶在十甘油/水(7/93)或甘油/水(7/93)中的溶液也在37t:下储存作为对照。结果如表5所示。蛋白酶在实施例9蛋白酶递送系统中的稳定性优于在对照中的稳定性。15表5:蛋白酶在各种水性蛋白酶递送系统中的稳定性<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>相2油包水乳剂形式中的脂肪酶2.0在pH值为7.2条件下，将相2加入到相1中。实施例12制备水包油乳剂形式的皮肤亮白乳膏16组合物4:皮肤亮白乳膏<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>相4油包水乳剂中的葡萄糖氧化酶[500U/g]2.00将相1加热至8(TC并加入到8(TC下剧烈搅拌的相2中。8(TC下剧烈搅拌所得混合液1小时并在搅拌下缓慢冷却至4(TC以下。缓慢加入相3。将混合液的pH值调节至5.5，加入相4。实施例13蛋白酶在矿物油中分散体形式的非水性蛋白酶递送系统将木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶分散在VersagelM-200中，木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶的最终浓度分别为200PU/mg和2.3GDU/g。将该溶液在37'C下储存8周。2天、1周、2周、4周、6周和8周后通过酪蛋白消化测定蛋白酶的活性。蛋白酶在十甘油/水(80/20)中的溶液和蛋白酶在甘油/水(80/20)中的溶液也在37"C下储存8周。将蛋白酶在VersagelM-200中的稳定性与蛋白酶在甘油/水(80/20)中的稳定性进行比较。表6:蛋白酶在各种酶递送系统中的稳定性<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>縮写nd:没有检测实施例14通过实施例13的非水性蛋白酶递送系统制备皮屑剥脱和皮肤润湿乳膏配方8:皮屑剥脱/皮肤润湿乳膏<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>Versagel-M200中的分散体将相1加热至8(TC并加入到8(TC下剧烈搅拌的相2中。8(TC下剧烈搅拌所得混合液1小时并在搅拌下缓慢冷却至4(TC以下。缓慢加入相3。将混合液的pH值调节至5.5，加入相4。权利要求1.一种水性酶递送系统，所述水性酶递送系统包含至少一种酶和具有至少15个碳原子的聚甘油。2.如权利要求1所述的水性酶递送系统，其特征在于，所述酶选自蛋白酶、脂肪酶、酯酶或氧化酶。3.如权利要求1或2所述的水性酶递送系统，其特征在于，所述系统还包含多元醇。4.如权利要求3所述的酶递送系统，其特征在于，所述聚甘油/多元醇的比例至少为l:10(重量/重量)。5.如权利要求l-4中任一项所述的水性酶递送系统，其特征在于，所述系统形成溶液。6.如权利要求5所述的水性递送系统，其特征在于，所述聚甘油和任选的多元醇的总含量至少为40重量％。7.如权利要求1-4中任一项所述的水性递送系统，其特征在于，所述系统还包含水不混溶性液体并形成油包水乳剂。8.如权利要求7所述的水性递送系统，其特征在于，所述聚甘油和任选的多元醇的总含量至少为5重量％。9.一种通过具有至少15个碳原子的聚甘油在水性酶递送系统中稳定酶的方法。10.—种制备包含有效量的至少一种酶的溶液形式的水性化妆品或个人护理产品的方法，所述方法包括将如权利要求5或6所述的水性酶递送系统加入到化妆品或个人护理产品中的步骤。11.一种通过如权利要求5或6所述的水性酶递送系统在娱乐性用水项目中处理人皮肤的方法。12.—种制备包含有效量的至少一种酶的乳剂形式水性化妆品或个人护理产品的方法，所述方法包括将如权利要求5-8中任一项所述的水性酶递送系统加入到化妆品或个人护理产品中的步骤。13.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述化妆品和个人护理产品是水包油乳剂。14.一种水性化妆品或个人护理产品，所述产品包含有效量的至少一种酶和具有至少15个碳原子的聚甘油。15.如权利要求14所述的水性化妆品或个人护理产品，其特征在于，所述酶选自蛋白酶、脂肪酶、酯酶或氧化酶。16.如权利要求14或15所述的水性化妆品或个人护理产品，其特征在于，所述产品还包含多元醇。17.如权利要求16所述的水性化妆品或个人护理产品，其特征在于，所述聚甘油/多元醇的比例至少为l:10(重量/重量)。18.如权利要求14-17中任一项所述的水性化妆品或个人护理产品，其特征在于，所述产品是水包油乳剂。19.如权利要求18所述的水性化妆品或个人护理产品，其特征在于，所述聚甘油和任选的多元醇的总含量至少为7重量％。20.—种通过如权利要求14-19中任一项所述水性化妆品或个人护理产品处理人皮肤的方法。21.如权利要求20所述的方法，其特征在于，所述酶是蛋白酶，对所述皮肤进行的处理是剥脱皮屑和润湿皮肤处理。22.—种通过具有至少15个碳原子的聚甘油在水性化妆品或个人护理产品中稳定酶的方法。23.—种非水性酶递送系统，所述系统是至少一种酶在非水性粘稠液体中的分散体。24.如权利要求24所述的非水性酶递送系统，其特征在于，所述酶选自蛋白酶、脂肪酶、酯酶或氧化酶。25.如权利要求23或24所述的非水性酶递送系统，其特征在于，所述非水性液体是矿物油。26.—种制备包含有效量的至少一种酶的乳剂形式的水性化妆品或个人护理产品的方法，所述方法包括将如权利要求23-25中任一项所述的水性酶递送系统加入到化妆品或个人护理产品中的步骤。27.如权利要求26所述的方法，其特征在于，所述化妆品和个人护理产品是水包油乳剂。28.—种制备包含有效量的至少一种酶的非水性化妆品或个人护理产品的方法，所述方法包括将如权利要求23-25中任一项所述的水性酶递送系统加入到化妆品或个人护理产品中的步骤。29.—种用于在娱乐性用水项目中通过酶处理人皮肤的方法。30.如权利要求29所述的方法，其特征在于，所述酶选自蛋白酶、脂肪酶、酯酶或氧化酶。31.如权利要求29或30所述的方法，其特征在于，所述娱乐性用水项目是热水盆浴或温泉浴。32.如权利要求29-31中任一项所述的方法，其特征在于，所述酶是蛋白酶，对所述皮肤进行的处理是剥脱皮屑和润湿皮肤处理。全文摘要提供了包含至少一种稳定的酶和具有至少15个碳原子的聚甘油的水性酶递送系统及水性化妆品和个人护理产品。此外，还提供了稳定的非水性酶递送系统，该系统是至少一种酶在非水性粘稠液体中的分散体，以及在娱乐性用水项目中通过酶处理人皮肤的方法。文档编号A61Q1/14GK101668851SQ200580028350公开日2010年3月10日申请日期2005年1月17日优先权日2004年8月19日发明者J·古斯,V·伦特纳申请人:隆萨股份公司