专利名称：美容嫩肤液的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种中药美容制剂，特别涉及一种由鲜益母草和鲜白芷的汁液组成的美容嫩肤液。
背景技术：
益母草味苦、辛，性微寒，主归肝、心、膀胱经。主要有活血、去瘀、调经等功能，为妇科经产良药。其在美容方面的功效也早有运用和记载陈藏器日其入面药，能治粉刺，使人颜面光泽；唐天后武则天亦用“炼益母泽通法”。但是还未见将其制成美容嫩肤制剂的报道。
发明内容
本发明的目的是以益母草为主要原料，辅以其它中草药，制成中药美容制剂——美容嫩肤液。该嫩肤液无毒，对皮肤无刺激，对皮肤黑色素有抑制作用和抗皮肤衰老作用。
本发明的一种中药美容嫩肤制剂，主要由鲜益母草榨出的汁液和鲜白芷榨出的汁液组成，其鲜益母草榨出的汁液和鲜白芷榨出的汁液体积比为1∶1。
本发明的中药美容嫩肤制剂的制备方法是，先将等质量鲜益母草和鲜白芷分别榨出汁液，然后按榨出的鲜益母草汁液和鲜白芷汁液体积比为1∶1混合均匀，即制得中药美容嫩肤制剂—美容嫩肤液。
经过实验证明，本发明的美容嫩肤液对B-16黑素瘤细胞株抑制率达17.2％，对在黑素生成过程中起着至关重要的作用的酪氨酸酶活性呈抑制作用，有防止皮肤衰老作用趋向，有促进真皮中成纤维细胞分裂及其合成和分泌胶原蛋白和弹性蛋白的能力，促进了皮肤弹性活力的恢复，无毒，对皮肤无刺激，对痢疾、金黄色葡萄球菌有抑菌作用；对绿脓杆菌、大肠、变形菌无抑菌作用
图1为本发明的美容嫩肤液的制备工艺流程本嫩肤液的制备工艺首先将等质量的鲜益母草和鲜白芷分别榨出汁液，然后将榨出的鲜益母草汁液和鲜白芷汁液按体积比为1∶1混合，即制得美容嫩肤液。
具体实施例方式
实施例1美容嫩肤液的制备取洗净晾干的鲜益母草和鲜白芷各500克，分别榨出汁液，得到鲜益母草汁液150毫升，鲜白芷汁液50毫升，然后取鲜益母草汁液50毫升和鲜白芷汁液50毫升混合均匀，即制得中药美容嫩肤制剂—美容嫩肤液100毫升，每毫升含生药6.65克。
用实施例1制得的美容嫩肤液做实施例2～实施例8实验实施例2美容嫩肤液对B-16黑素瘤细胞株抑制率实验实验材料和方法
1、实验材料(1)、试剂采用中国典型培养物保藏中心(CCTCC武汉大学细胞库)提供的B-16黑素瘤细胞株，美国GIBCO的RPMI1640培养基(RPMImedium1640，Gibcobrl；琼脂糖，华美生物工程公司)，美国SIGMA的胰蛋白酶(TYPSIN)，武汉市北郊农场的胎牛血清(FatalBovine Serum，FBS)，美国SIGMA的噻唑蓝(甲基噻唑基四唑MTT)和北京北化精细化学公司产的二甲基亚砜(DMSO)为实验材料。
(2)、药物高剂量相当于生药33毫克/毫升；中剂量相当于生药的3.3毫克/毫升；低剂量相当于生药的0.33毫克/毫升。
2、实验方法(1)、RPMI1640培养液称10.4克粉末(市售进口产品一般为一包)，溶于1000毫升三蒸水中，按200ul/毫升和100ul/毫升分别加入青霉素及链霉素，待溶解后通入CO2约5分钟，至液体呈柠檬色后加入0.3克/升谷氨酰胺，或先用1N HCl调至pH6.8以下，后用浓度为1当量NaOH调至pH7.2～pH7.4；用无菌玻璃滤器或金属滤器0.22μm微孔滤膜过滤除菌，按所需量分装，置4℃低温保存。
(2)、质量浓度为0.25％胰蛋白酶用pH7.6无血清1640配制，0.22μm微膜孔过滤。
(3)、甲基噻唑基四唑液37℃水浴中溶解于0.01毫升/升，PH 7.4的磷酸缓冲液(PBS)，浓度为5毫克/毫升，0.22μm微膜孔过滤，置棕色小瓶中，4℃保存。
(4)、B-16黑素瘤细胞株的培养B-16黑素瘤细胞株用质量浓度为0.25％胰蛋白酶消化2分钟，然后加入RPM1640培养基，用吸管反复吹打，分别加入卡氏培养瓶置PCS-100电脑C细胞培养传代培养，一般2-3天传一代待细胞汇合作以后制备成细胞悬液备用。
(5)、MTT法检测B-16细胞株的生长抑制率1)、检测原理活细胞的线粒体中琥珀胶氢酶能使外源性的甲基噻唑基四唑还原为难溶的蓝色结晶物，而死细胞无此功能，二甲基亚砜能溶解细胞中的紫色结晶物，用酶联免疫法检测在490纳米波长处测定吸光度值，可间接地反映活细胞数量。
2)、检测步骤①质量浓度为0.25％胰蛋白酶消化培养的B-16细胞株，将RPMI1640常规培养基配成的细胞悬液以7×103个/孔种入96孔板，培养板周边的孔不加入细胞，防止有边缘效应，另留空白孔调零，以只加细胞不加中药作空白对照；②待细胞贴壁后，分别加入含生药33毫克/毫升(30ul/孔)3孔，3.3毫克/毫升(30ul/孔)3孔和0.33毫克/毫升(30ul/孔)3孔，培养基培养48小时后弃培养基。
③吸弃旧液，加磷酸缓冲液洗1次，加入甲基噻唑基四唑溶液20毫升，37℃，5％CO2继续培养4小时，终止培养。
④吸净孔内培养液弃之，加入二甲基亚砜100ul/孔，振荡10分钟，使结晶充分溶解。
⑤在酶联免疫检测仪上(490纳米波长)测定各孔吸光度光密度OD值，OD值与活细胞成正比。
⑥根据公式计算细胞生长抑制率细胞生长抑制率＝(空白对照OD值-实验组OD值)/空白对照组OD值×100％。
主要技术与性能指标
模数混合型控制电路，双DSP完成数据采集、数学计算和控制指令信号的产生。电流跟踪采用模拟式控制，具有很好的快速性。
主要技术与性能指标
正常对照组，每组10只。
(2)、给药方法给大鼠背部脱毛；前三组大鼠背部脱毛处，分别均匀涂抹嫩肤液、维生素E胶囊和生理盐水，并均用保鲜膜保护2小时，每日1次，连续给药30天。
(3)、取材及检测方法于第31天断颈处死动物，取背部涂药处皮肤，用质量浓度为20％甲醛溶液固定，常规石蜡包埋切片，苏木精(hematoxylin)和伊红(eosin)染色法(HE染色)，在光电显微镜下进行成纤维细胞计数。每片计数200个细胞，记录其中成纤维细胞数目。
结果涂抹嫩肤液的大鼠皮肤组织中，成纤维细胞数明显增加，与模型组比较，有高显著性差异(t＝4.62，P＜0.001)。结果如表4表4嫩肤液对衰老大鼠皮肤中成纤维细胞含量影响(X±S)
与模型组相比较以△表示，△(P＜0.05)，△△(P＜0.01)；与正常组相比较以▲表示，▲(P＜0.05)，▲▲(P＜0.01)；与阳性组相比较以*表示，*(P＜0.05)，**(P＜0.01)；结论据文献报道，自然老化的皮肤其成纤维细胞减少，胶原和弹性纤维合成能力下降。因此，成纤维细胞减少，皮肤弹性降低是皮肤衰老的重要标志。本实验结果提示嫩肤液对真皮中成纤维细胞产生了刺激作用，促进了成纤维细胞分裂及其合成和分泌胶原蛋白和弹性蛋白的能力，促进了皮肤弹性活力的恢复。
实施例6美容嫩肤液对家兔完整皮肤和破损皮肤的急性毒性试验实验材料和方法1、实验材料(1)、药物实施例1的嫩肤液嫩肤液。
(2)、动物健康成年白色家兔(由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供，合格证号JJLA2004-038)，雌雄各半，体重1.5千克左右。
2、实验方法(1)、将6只家兔随机分为2组，A组赋形剂组；B组嫩肤液大剂量组(含生药6.65克/毫升)。常规给家兔背部脱毛，去毛面积约为体表面积的10％(约150cm2)。去毛后24小时给脱毛部位涂药，24小时内涂药2次。给药24小时后，用温水除去残留的药物，观察1、24、48、72小时至第七日。每日观察并记录动物的体重、皮肤毛发、眼和粘膜的变化、呼吸、中枢神经系统、四肢活动等表现。
(2)、另取6只家兔，分组情况、给药剂量及用药途径同前。用400号细砂纸在脱毛部位造成擦伤，使皮肤出现密集出血点，立即在擦伤部位涂药，观察指标同前并与对照组比较。
主要技术与性能指标
模数混合型控制电路，双DSP完成数据采集、数学计算和控制指令信号的产生。电流跟踪采用模拟式控制，具有很好的快速性。
主要技术与性能指标
模数混合型控制电路，双DSP完成数据采集、数学计算和控制指令信号的产生。电流跟踪采用模拟式控制，具有很好的快速性。
权利要求
1.一种中药美容嫩肤制剂，其特征在于主要由鲜益母草榨出的汁液和鲜白芷榨出的汁液组成，其鲜益母草榨出的汁液和鲜白芷榨出的汁液体积比为1∶1。
2.权利要求1所述的中药美容嫩肤制剂的制备方法，其特征在于，先将等质量鲜益母草和鲜白芷分别榨出汁液，然后按榨出的鲜益母草汁液和鲜白芷汁液体积比为1∶1混合均匀，制得中药美容嫩肤制剂—美容嫩肤液。
全文摘要
本发明提出了一种中药美容嫩肤制剂。该制剂的制备方法是，先将等质量鲜益母草和鲜白芷分别榨出汁液，然后按榨出的鲜益母草汁液和鲜白芷汁液体积比为1∶1混合均匀，即制得中药美容嫩肤制剂一美容嫩肤液。经过实验证明，本发明的美容嫩肤液对B－16黑素瘤细胞株抑制率达17.2％，对在黑素生成过程中起着至关重要的作用的酪氨酸酶活性呈抑制作用，有防止皮肤衰老作用趋向，有促进真皮中成纤维细胞分裂及其合成和分泌胶原蛋白和弹性蛋白的能力，促进了皮肤弹性活力的恢复，无毒，对皮肤无刺激，对痢疾、金黄色葡萄球菌有抑菌作用；对绿脓杆菌、大肠、变形菌无抑菌作用。
文档编号A61Q19/00GK1839795SQ20061001826
公开日2006年10月4日 申请日期2006年1月19日 优先权日2006年1月19日
发明者张介眉, 张耕 申请人:张介眉