专利名称：一种百里香精油的生产方法
技术领域：
本发明涉及精油生产领域，尤其涉及一种百里香精油的生产方法。
背景技术：
百里香为唇形科百里香属植物的统称，其精油主要作用成分是百里酚和香芹酚， 可广泛用于医疗、美容、烹饪及食品等领域。人们利用百里香精油的历史悠久，埃及人用来防腐尸体，罗马人用来抗菌，希腊人用来帮助消化，地中海人用来治疗呼吸困难及顽强的皮肤病等等，我国西部人民早已有用百里香除去牛羊肉膻气的传统。随着对百里香研究的不断深入，百里香精油具有较大的开发潜力，其潜在应用价值体现于对霉菌有良好的抑制作用、刺激白细胞增殖、强化神经、活化脑细胞、提高记忆力和注意力，也能提振低落的情绪、 精疲力竭的感觉、以及挫败的沮丧感等。目前，百里香精油的生产主要以大田百里香为原料，主要采用水蒸气蒸馏法、有机溶剂萃取法或超临界二氧化碳流体萃取法等进行精油的提取，但是，采用现有技术生产的百里香精油提取率较低，为满足市场需求，原料的取得需要大量耕地进行种植，生产周期长，受气候和环境影响较大，不利于大量生产。
发明内容
本发明实施例所要解决的技术问题在于，提供一种百里香精油的生产方法，以提高百里香精油的含量，缩短生产周期，并适于大量工业化生产。为了解决上述技术问题，本发明实施例提出了一种百里香精油的生产方法，包括
通过百里香种子发芽得到百里香无菌苗；
将所述百里香无菌苗切成带有腋芽的茎段，并将该茎段接种于不定芽诱导培养基中， 得到不定芽；
将所述不定芽切成小段，并将该小段接种到增殖培养基中，得到百里香组培苗，所述增殖培养基中配置一定浓度的氯化钠；
采用水蒸气蒸馏法对所述百里香组培苗的干样进行处理，得到百里香精油。本发明实施例通过提供一种百里香精油的生产方法，其对通过百里香种子发芽得到的百里香无菌苗进行不定芽诱导培养、增殖培养后获得百里香组培苗，然后采用水蒸气蒸馏法对百里香组培苗的干样进行处理得到百里香精油，由于在增殖培养时在增殖培养基中配置有一定浓度的氯化钠，从而大大提高了百里香精油的含量，使该生产方法适于工业化生产，上述百里香组培苗采用植物离体培养技术，节约了宝贵的土地资源，避免了环境的破坏，并大大缩短了百里香精油的生产周期，实现了巨大的经济效益和社会效益。
图1是本发明实施例的百里香精油的生产方法的流程图。
图2是本发明实施例中的百里香实生苗中所提取百里香精油的总离子流图。图3是本发明实施例中未采用氯化钠的增殖培养基所培育出的百里香组培苗中所提取百里香精油的总离子流图。图4是本发明实施例中采用浓度为0. 5g/L的氯化钠的增殖培养基所培育出的百里香组培苗中所提取百里香精油的总离子流图。
具体实施例方式下面结合附图，对本发明实施例进行详细说明。图1是本发明实施例的百里香精油的生产方法的流程图，参照该图，该方法主要包括
101，通过百里香种子发芽得到百里香无菌苗，具体地，可将百里香种子在1/2MS培养基上发芽得到百里香无菌苗；
102，将百里香无菌苗切成带有腋芽的茎段，并将该茎段接种于不定芽诱导培养基中， 得到不定芽，具体地，可选取培养6周左右且生长健康的无菌苗，将其切成3cm左右且带有腋芽的茎段，并将茎段接种于不定芽诱导培养基中以诱导腋芽产生不定芽，其中，不定芽诱导培养基以MS为基本培养基，添加有不同浓度的其他组分，包括吲哚乙酸、6-苄基腺嘌呤、 0. 6%的琼脂和3%的蔗糖；
103，将不定芽切成小段，并将该小段接种到增殖培养基中，得到百里香组培苗，所述增殖培养基中配置一定浓度的氯化钠，具体地，切取Ig上述诱导的不定芽接种到增殖培养基中以诱导不定芽增殖，而增殖培养基以MS、0. 25mg/L的萘乙酸及0. 25mg/L的6-苄基腺嘌呤为基本培养基，添加有不同浓度的其他组分，包括0. 25-1. 25g/L的氯化钠、0. 6%的琼脂和3%的蔗糖，这样，由于在增殖培养时在增殖培养基中配置有一定浓度的氯化钠，从而大大提高了百里香精油的含量，使该生产方法适于工业化生产；
104，采用水蒸气蒸馏法对百里香组培苗的干样进行处理，得到百里香精油，具体地， 可对百里香组培苗在23°C下阴干得到干样并放置到4°C的冰箱里储存，之后可取干样 20-30g，对该干样进行粉碎，并将得到的碎片置于IL圆底烧瓶中，以质量体积比1 :10 (m/ ν)加入蒸馏水及数粒玻璃珠，在微沸状态下蒸馏2. 5-3小时后得到百里香精油，并将百里香精油保存于anlAgilent样品瓶中，放置在4°C冰箱中待测。精油成分测定可采用气质联用分析技术，具体地，可采用气质联用仪器所带有的标准数据库搜索鉴定其中分离的物质，具体参数如下
色谱条件色谱柱HP-5MS，5%苯甲基聚硅氧烷弹性石英毛细管柱(尺寸为 30mX 0. 25謹X 0. 25 μ m)，进样口温度250°C，柱室温度初始以70°C保持5min之后以8°C / min的升温速率升至150°C后保持lOmin，之后进行第二次升温，从10°C升至250°C后保持 8min，载气采用高纯氦气，柱前压8. UI3Si,流速lml/min，分流比37:1 ；
质谱条件接口温度280°C，电离方式EI，电子能量70eV，离子源温度250°C，四极杆温度130°C，调谐方式为标准调谐，质量扫描方式SCAN，溶剂延迟3min，扫描范围35-550amu。上述气质联用分析方法主要是用HP-5MS色谱柱对色谱分离条件进行优化，确定了最佳的分离条件，然后进行百里香精油的气质联用分析，获得百里香精油的总离子流色谱图(TIC)，进一步地，可利用该气质联用仪器所配备的Nist2008质谱库进行检索，再对所得的谱图进行人工核对和补充检索，然后用面积归一法测得各组分的百分含量，其中就包含百里香精油的含量。具体测得数据如下，其中引入了百里香实生苗的检测，以及未采用氯化钠的增殖培养基所培育出的百里香组培苗的检测
1、百里香实生苗，即可以101所得的百里香无菌苗作为检测对象，其通过水蒸气蒸馏法所得百里香精油之后，采用上述气质联用分析技术所得的百里香精油的总离子流图可如图2所示，通过面积归一法测得百里香精油的含量即为1. 02% ；
2、为了对比分析，本实施例中引入了另一种增殖培养基，其以MS为基本培养基，添加有不同浓度的其他组分，包括0-0. 5mg/L的萘乙酸、0-2. Omg/L的6-苄基腺嘌呤、0. 6%的琼脂和3%的蔗糖，其中未配置氯化钠，其得到的组培苗通过水蒸气蒸馏法所得百里香精油之后，采用上述气质联用分析技术所得的百里香精油的总离子流图可如图3所示，通过面积归一法测得百里香精油的含量即为0. 15% ；
3、本实施例104所得百里香精油的总离子流图可如图4所示，通过面积归一法测得百里香精油的含量即为0. 20%。不难理解，上述百里香组培苗采用101-103描述的植物离体培养技术，上述第1点所述百里香实生苗较第3点所述百里香组培苗在单位时间内产量低，由于百里香组培苗产量高，使得第3点较第1点来讲，节约了宝贵的土地资源，避免了环境的破坏，并大大缩短了百里香精油的生产周期，实现了巨大的经济效益和社会效益；而对比第2点与第3点，不难看出，由于在增殖培养时在增殖培养基中配置有一定浓度的氯化钠，从而大大提高了百里香精油的含量，使该生产方法适于工业化生产。以上所述是本发明的具体实施方式
，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也视为本发明的保护范围。
权利要求
1.一种百里香精油的生产方法，其特征在于，包括通过百里香种子发芽得到百里香无菌苗；将所述百里香无菌苗切成带有腋芽的茎段，并将该茎段接种于不定芽诱导培养基中， 得到不定芽；将所述不定芽切成小段，并将该小段接种到增殖培养基中，得到百里香组培苗，所述增殖培养基中配置一定浓度的氯化钠；采用水蒸气蒸馏法对所述百里香组培苗的干样进行处理，得到百里香精油。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述增殖培养基为混合有MS、0.25mg/L的萘乙酸、0. 25mg/L的6-苄基腺嘌呤、0. 25-1. 25g/L的氯化钠、0. 6%的琼脂和3%的蔗糖的培养基。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，采用水蒸气蒸馏法对所述百里香组培苗的干样进行处理具体为对所述百里香组培苗在23°C下阴干得到所述干样，对该干样进行粉碎，并将得到的碎片置于圆底烧瓶中，以质量体积比1 :10加入蒸馏水及玻璃珠，在微沸状态下蒸馏2. 5-3小时后得到所述百里香精油。
4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，通过百里香种子发芽得到百里香无菌苗具体为将所述百里香种子在1/2MS培养基上发芽得到所述百里香无菌苗。
5.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，所述不定芽诱导培养基为混合有MSJ引哚乙酸、6-苄基腺嘌呤、0. 6%的琼脂和3%的蔗糖的培养基。
全文摘要
本发明实施例公开了一种百里香精油的生产方法，其对通过百里香种子发芽得到的百里香无菌苗进行不定芽诱导培养、增殖培养后获得百里香组培苗，然后采用水蒸气蒸馏法对百里香组培苗的干样进行处理得到百里香精油，由于在增殖培养时在增殖培养基中配置有一定浓度的氯化钠，从而大大提高了百里香精油的含量，使该生产方法适于工业化生产，上述百里香组培苗采用植物离体培养技术，节约了宝贵的土地资源，避免了环境的破坏，并大大缩短了百里香精油的生产周期，实现了巨大的经济效益和社会效益。
文档编号C11B9/02GK102295995SQ201110194130
公开日2011年12月28日 申请日期2011年7月12日 优先权日2011年7月12日
发明者徐世千, 李建国, 李晓东, 杨莉 申请人:深圳职业技术学院