专利名称：抑制透明质酸酶活性的添加剂及其制备方法
抑制透明质酸酶活性的添加剂及其制备方法技术领域
本发明属于化妆品添加剂制作领域，特别是从木瓜中提取的抑制透明质酸酶作用的添加剂。
背景技术：
透明质酸酶是透明质酸的特异性裂解酶，而透明质酸广泛地存在于动物的各种组织中，在机体内显示出多种重要的生理功能，如润滑关节、调节蛋白质的运转、促进创伤愈合等。更为重要的是，它具有良好的保湿作用，在保湿的同时，又是良好的透皮吸收促进齐 。 含透明质酸的化妆品目前在国际上被公认为“仿生化妆品”、“第四代化妆品”。透明质酸酶是I型过敏反应和肿瘤细胞增殖的参与者，它与炎症、造敏有强相关性。因此，抑制透明质酸酶的活性，既能使透明质酸不被分解以维持其正常的生理功能，又能达到抗炎、抗过敏、 抗肿瘤的功效。另外，在含有透明质酸的制剂(特别地，如美容增强剂和组织填充剂)中加入抑制透明质酸酶活性的添加剂，能够增强制剂作用的持久性，避免规律性地重复给药。所以，抑制透明质酸酶活性的添加剂的开发在制药、保键品、化妆品行业具有重要意义。
目前，己报道的透明质酸酶抑制剂根据其化学结构可分为蛋白质类、葡糖氨基聚糖类、多糖类、生物碱、萜类等。它们主要提取自蛇毒、动植物器官、微生物或经人工合成制得。但是，大批量制备所需成本较高。发明内容
针对现有技术存在的上述问题，本发明的目的在于提供一种从木瓜中提取的以高分子量多酚和单宁酸为活性成分的透明质酸酶抑制剂，提供一种成本低、得率高、纯度高、 制备过程简单安全易行、生产周期短，易于批量制备和工业化生产的抑制透明质酸酶活性的添加剂制备方法。
为了实现本发明的上述目的，本发明提供了如下的技术方案抑制透明质酸酶活性的添加剂，含有高分子量多酚和单宁酸。所述的抑制透明质酸酶活性的添加剂的制备方法，是将光皮木瓜采用纤维素酶解方法处理，提取出高分子量多酚和单宁酸，并将单宁酸溶于含有ρΗ=6的HAc- NaAc缓冲溶液的90%的甲醇或乙醇溶液中， 50°C水浴中密闭水解12小时，在48°C下减压蒸干，溶于甲醇或乙醇后经葡聚糖凝胶柱洗脱得PGG粗品；用Y-环糊精作为包合物，包合木瓜中的S0D;再经大孔吸附树脂分离纯化，用水、10%、20%、30%、400/6甲醇或乙醇水溶液梯度洗脱，收集洗脱液，浓缩、干燥即可。
通过本发明的活性评价试验结果表明，光皮木瓜提取物中的高分子量多酚和单宁酸对透明质酸酶活性的抑制作用显著强于阳性对照色甘酸钠，可作为一个很好的透明质酸酶抑制剂，添加入含有透明质酸的制剂中，增强药品、化妆品或保健品的稳定性、持久性和活性。此外，可用于制备抗过敏和抗炎的化妆品，或防止和改善炎症的药品或保键品。
与现有技术相比，本发明的方法具有下述的优点I.本发明是从木瓜中提取高分子量多酚和单宁酸，它们作为原料制备抑制透明质酸酶活性的添加剂。
2.本发明用Y-环糊精作为包合物，包合木瓜中的S0D，提高木瓜中SOD成活率闻。
3.本发明水解溶液为弱酸，温度为50°C，无有机溶剂的残留，安全，简单易行、成本低。
4.本发明使用的柱层析填充剂为聚苯乙烯型大孔吸附树脂和葡聚糖凝胶，填充剂材料可以重复使用。
具体实施方式
取从光皮木瓜中提取的单宁酸，溶于含有HAc-NaAc缓冲溶液(PH=6)的低级醇一水溶液中，50°C水浴中密闭水解12小时。水解液应在48°C下减压蒸干后再溶于低级醇,经葡聚糖凝胶柱层析分离，用含水低级醇(乙醇或甲醇)洗脱，单宁酸质量(g)，HAc- NaAc缓冲溶液(mL)和低级醇(主要指甲醇或乙醇)(mL)的比例为I :1. 5 13. 5。采用3%的Y-环糊精包合木瓜S0D，经加热(50°C，45分钟)处理、酸处理(PH=L 7，15分钟)，收率高，纯度大于90%，无有机溶剂的残留，可直接用作为制药，保健品及化妆品的原料或其添加剂。
权利要求
1.抑制透明质酸酶活性的添加剂及其制备方法，其特征在于从木瓜中提取的以高分子量多酚和单宁酸为活性成分的透明质酸酶抑制剂，其技术方案为将光皮木瓜采用纤维素酶解方法处理，提取出高分子量多酚和单宁酸，并将单宁酸溶于含有pH=6的HAc- NaAc 缓冲溶液的90%的甲醇或乙醇溶液中，50°C水浴中密闭水解12小时，在48°C下减压蒸干，溶于甲醇或乙醇后经葡聚糖凝胶柱洗脱得PGG粗品；用Y-环糊精作为包合物，包合木瓜中的 SOD ；再经大孔吸附树脂分离纯化，用水、10%、20%、30%、400/6甲醇或乙醇水溶液梯度洗脱， 收集洗脱液，浓缩、干燥即可。
2.根据权利要求I所述的抑制透明质酸酶活性的添加剂及其制备方法，其特征在于 所述的透明质酸酶抑制剂还包含木瓜S0D，其中用Y -环糊精作为包合物，提高SOD活性。
全文摘要
本发明是从木瓜中提取的抑制透明质酸酶作用的添加剂，属于化妆品添加剂制作领域。将光皮木瓜采用纤维素酶解方法处理，提取出高分子量多酚和单宁酸，并将单宁酸溶于含有pH=6的HAc-NaAc缓冲溶液的90%的甲醇或乙醇溶液中，50℃水浴中密闭水解12小时，在48℃下减压蒸干，溶于甲醇或乙醇后经葡聚糖凝胶柱洗脱得PGG粗品；再经大孔吸附树脂分离纯化，用水、10%、20%、30%、400/6甲醇或乙醇水溶液梯度洗脱，收集洗脱液，浓缩、干燥即可。水解溶液为弱酸，温度为50℃，无有机溶剂的残留，安全，简单易行、成本低。
文档编号A61Q19/00GK102935043SQ201210495829
公开日2013年2月20日 申请日期2012年11月29日 优先权日2012年11月29日
发明者王艳妹 申请人:晓健科技(大连)有限公司