依次送递酶的系统的制作方法

依次送递酶的系统的制作方法
【专利摘要】本发明提供一种洗衣机，其将用于依次处理织物的依次处理装置与至少第一酶和第二酶相结合，所述装置包括多个单独的、各自含有第一酶和第二酶的室，所述酶从该室中依次分配出来，其特征在于所述第一酶包括蛋白酶，且所述第二酶包括一种或多种脂解酶。
【专利说明】
依次送递酶的系统
[00011 本申请是申请号200880101706. X、申请日2008年6月27日、发明名称"依次送递酶 的系统"的中国专利申请的分案申请。
技术领域
[0002] 本发明涉及酶在洗涤过程中的依次送递。
【背景技术】
[0003] 洗衣过程中使用的酶混合物是已知的。W02000070006中公开了蛋白酶/纤维素组 合。W020050089966、EP1664258、US20050059567 和 US20060172913 中公开了用于除去草以及 蛋上的污渍的酶混合物。

【发明内容】

[0004] 目的是提供一种改进的涉及酶的洗涤/去污方法。由于其他组分发生水解，因此要 提供一种蛋白酶为主要组分之一的酶混合物仍旧非常困难。
[0005] 因此，在第一方面中，本发明提供一种织物洗涤方法，在该方法中用至少两种不同 的酶依次处理织物，所述方法包括步骤：
[0006] 1.用一种或多种蛋白酶处理，之后
[0007] 2.用一种或多种第二酶处理，
[0008] 其特征在于第二步骤中的该种或各种第二酶与第一步骤中的蛋白酶为不同的家 族。
[0009] 优选所述的第二酶包括一种或多种脂解酶。
[0010]在第二方面中，本发明提供一种从织物中除去污渍的方法，其包括步骤：
[0011 ] 1.用一种或多种蛋白酶处理，之后
[0012] 2.用一种或多种第二酶处理，其特征在于第二步骤中的该种或各种第二酶与第一 步骤中的蛋白酶为不同的家族。
[0013] 第二方面的方法的优选特征也是针对第一方面的。
[0014] 在所述步骤之间或者在所述步骤与另一个过程的步骤，例如漂洗步骤之间可能有 时间延迟。
[0015]优选，本发明第二方面的方法为从织物中除去草污的方法。
[0016] 在另一个方面中，本发明提供一种织物洗涤和/或去污套装，其包括至少一个含有 本发明第一方面的第一酶和第二酶的包装，其中该第一酶和第二酶彼此分离，所述包装任 选包括针对本发明第一和/或第二方面的织物洗涤和/或织物去污的使用说明。
[0017] 在进一步的方面中，本发明提供一种洗衣机，其使用于依次处理织物的装置至少 与根据本发明的第一酶和第二酶相结合，所述装置包括多个单独的、各自含有第一酶和第 二酶的室，所述酶从该室中依次被分配出来。
[0018] 所述装置优选包括洗衣机抽屉(屉盒）。
[0019] 在进一步的方面中，本发明提供根据本发明第一方面的第一酶和之后的第二酶依 次用在处理织物的污渍，特别是草污的方法中的用途。
[0020] 所述第一酶和第二酶可以包括单独的酶或酶的混合物。
[0021] 令人惊讶地，上述设置使所述酶在作用时受其他酶的影响最小化。根据预期，最先 加入的蛋白酶可能侵袭额外加入到洗液中的其他酶，从而阻碍对污渍的非蛋白水解性的处 理。然而，由于是依次加入的，因此酶的去污效果得到大大改善。
【具体实施方式】
[0022] 适当的蛋白酶包括来源于动物、植物或微生物源的蛋白酶。优选微生物源。化学改 性或者蛋白质工程的突变体也包括在内。蛋白酶可以为丝氨酸蛋白酶或金属蛋白酶，优选 碱性微生物蛋白酶或胰蛋白酶类蛋白酶。碱性蛋白酶的例子为枯草溶菌素，特别是衍生自 杆菌的那些物质，例如枯草溶菌素 Novo、枯草溶菌素 Carlsberg、枯草溶菌素309、枯草溶菌 素147和枯草溶菌素168(W0 89/06279中进行了描述）。胰蛋白酶类蛋白酶的例子为胰蛋白 酶（例如，来源于猪的或来源于牛的），以及W0 89/06270和W0 94/25583中描述的镰刀霉蛋 白酶。
[0023] 可用的蛋白酶的例子为WO 92/19729、W0 98/20115、W0 98/20116和W0 98/34946 中描述的变体，特别是在下列的一个或多个位置上被取代的变体：27、36、57、76、87、97、 101、104、120、123、167、170、194、206、218、222、224、235 和 274。优选的可商购获得的蛋白酶 包括 Alcalase?、Savinas eTM、Primase?、Dura laseTM、Dyrazym?、Esperase?、Ever lase?、 Polarzyme?和Kannase?、（Novozymes A/S)、MaxataseTM、MaxacalTM、Maxapem?、 ProperaseTM、Purafect?、Purafect 0xP?、FN2? 和 FN3?(Genencor International Inc.) 〇
[0024] 适当的脂肪酶包括来源于细菌或真菌的那些脂肪酶。化学改性的或者蛋白质工程 的突变体也包括在内。可用的脂肪酶的例子包括来源于腐质酶(与Thermomyces同义）的脂 肪酶，例如EP 258 068和EP 305 216中描述的来源于H.lanuginosa(T.lanuginosus)的脂 肪酶，或者W0 96/13580中描述的来源于特异腐质酶的脂肪酶，假单胞菌脂肪酶，例如来源 于类产碱假单胞菌或假产碱假单胞菌(EP 218 272)、葱头假单胞菌(EP 331 376)、斯徒茨 氏假单胞菌(68 1，372,034)、荧光假单胞菌、假单胞菌属30 705株(10 95/06720和10 96/ 27002)、P.wisconsinensis(W0 96/12012)的脂肪酶，芽孢杆菌脂肪酶，例如来源于枯草芽 抱杆菌(Dartois等人（1993)，Biochemica et Biophysica Acta，1131，253_360)、嗜热脂肪 芽孢杆菌(JP 64/744992)或短小芽孢杆菌(W0 91/16422)的脂肪酶。
[0025] 其他例子为脂肪酶变体，例如W0 92/05249、W0 94/01541、EP 407 225、EP 260 105、W0 95/35381、W0 96/00292、W0 95/30744、W0 94/25578、W0 95/14783、W0 95/22615、 W0 97/04079和W0 97/07202中描述的那些物质。
[0026] 优选的可商购获得的脂肪酶包括Lipolase?和Lipolase Ultra?、Lipex? (Novozymes A/S)〇
[0027] 应该理解，酶变体(例如，通过重组技术制得)也包括在术语〃酶〃的含义之内。这种 酶变体的例子在例如EP 251，446(Genencor)、W0 91/00345(Novo Nordisk)、EP 525,610 (Solvay)和W0 94/02618(Gist_Brocades NV)中进行了公开。
[0028] 因此，可以适当地结合在本发明的颗粒中的酶类型包括氧化还原酶（EC 1.转移酶(EC 2.水解酶(EC 3.裂合酶(EC 4.异构酶(EC 5·-·-·-)和连接酶(EC 6·-·-·-)。
[0029] 相对于其他主要洗涤组分而言，可以独立计量加入依次送递的蛋白酶和脂肪分解 酶，或者可以将其与这种组分一起计量加入，但是优选不将蛋白酶与其他酶结合。
[0030] 本发明的依次送递的酶可以与一种或多种表面活性剂和/或任选的其他成份一起 送递，从而依次加入的物质中的至少一种为充分发挥作用的洗衣用清洁和/或护理组合物。 本发明的这种组合物可以为干燥固体或液体形式。所述组合物可以为在使用前稀释、再水 合和/或溶解在溶剂，包括水中的浓缩物。所述组合物还可以为易于使用(通用（in-use))的 组合物。
[0031] 本发明适合用在工业或家用织物洗涤组合物、织物调理组合物以及洗涤和织物调 理两用组合物(所谓的通用洗涤调理组合物）中。本发明还可用于工业或家用非-洗涤剂基 的织物护理组合物，例如喷雾组合物中。
[0032 ]本发明的织物洗涤组合物可以为任何适当的形式，例如粉末、片状粉末、液体或固 体洗涤剂棒。
[0033] 下面将讨论其他预期的成份，包括表面活性剂、助水溶物、防腐剂、填料、助洗剂、 配合剂、聚合物、稳定剂、香料本身、其他洗涤剂成份，或其一种或多种的组合。
[0034] 所述酶可以作为单独的反应性去污剂存在，或者还可以结合其他去污剂。
[0035] 可以将另外的酶作为全部洗涤过程的一部分而计量投入，条件是在本发明的初始 过程（即，用酶，例如蛋白酶和之后的第二或更多的酶，例如脂肪酶处理)之后加入另外的 酶。
[0036] 这种另外的（即，后计量加入的）酶可以包括上述的进一步的蛋白酶和脂肪酶，以 及淀粉酶、纤维素酶、过氧化物酶/氧化酶、果胶酸裂合酶和甘露聚糖酶，或其混合物。 [0037]其他组分还可能包括产角质酶。在EC 3.1.1.74中进行了分类。根据本发明而使用 的产角质酶可以为任何来源。优选的产角质酶为微生物来源，尤其是细菌、真菌或酵母来 源。
[0038] 产角质酶是能够降解角质的酶。在优选的实施方案中，产角质酶衍生自曲霉菌属 菌株，尤其是米曲霉;链格孢属菌株，尤其是甘蓝链格孢;镰孢属菌株，尤其是茄病镰孢、豌 豆腐皮镜抱、Fusarium roseum culmorum或Fusarium roseum sambucium;长懦抱属菌株， 尤其是蒜头长蠕孢;腐质菌属菌株，尤其是特异腐质酶;假单胞菌属菌株，尤其是门多萨假 单胞菌或恶臭假单胞菌;丝核菌属菌株，尤其是茄属丝核菌;链霉菌属菌株，尤其是疮痂病 链霉菌;或单隔孢属菌株，尤其是群生细基格孢。在最优选的实施方案中，产角质酶衍生自 特异腐质酶菌株，尤其是特异腐质酶菌株DSM 180。特异腐质酶产角质酶在W0 96/13580中 有所描述，其经引用而引入。产角质酶可以为变体，例如W0 00/34450和W0 01/92502中描述 的变体之一，其经引用而引入。优选的产角质酶变体包括W0 01 /92502的实施例2中列出的 变体，其就此特别地经引用而引入。
[0039] 优选的商业产角质酶包括N0V0ZYM? 51032(可购自Novozymes A/S，丹麦）。
[0040] 其他组分还可以包括如EC 3.1.1.4和/或EC 3.1.1.32所分类的磷脂肪酶。如本文 中所用的，术语磷脂肪酶为对磷脂具有活性的酶。磷脂，例如卵磷脂或磷脂酰胆碱由在外部 (sn-Ι)和中部（sn-2)位置上被两个脂肪酸酯化且在第三个位置上被磷酸所酯化的甘油组 成;反过来，磷酸可以被酯化为氨基醇。磷脂肪酶是参与磷脂水解的酶。可以对若干种磷脂 肪酶的活性进行区分，其包括使一个脂肪酰基(分别位于sn-l和Sn-2位上)水解形成溶血磷 脂的磷脂肪酶心和知;和能够水解溶血磷脂中剩余的脂肪酰基的溶血磷脂肪酶(或磷脂肪酶 B)。磷脂肪酶C和磷脂肪酶D(磷酸二酯酶)分别释放二酰基甘油或磷脂酸。
[0041] 术语磷脂肪酶包括具有磷脂肪酶活性的酶，所述活性为例如磷脂肪酶AUiSAs)、 磷脂肪酶B活性、磷脂肪酶C活性或磷脂肪酶D活性。本文中所用的术语"磷脂肪酶A"与本发 明的酶相结合意图覆盖具有磷脂肪酶A4P/或磷脂肪酶知活性的酶。磷脂肪酶活性还可以由 具有其他活性的酶，例如具有磷脂肪酶活性的脂肪酶提供。磷脂肪酶活性可以例如来源于 具有磷脂肪酶次活性的脂肪酶。在本发明的其他实施方案中，磷脂肪酶的酶活性由基本上 只具有磷脂肪酶活性的酶提供，并且其中所述磷脂肪酶的酶活性不是次活性。
[0042] 磷脂肪酶可以为任何来源，例如动物来源(例如，哺乳动物），如来源于胰脏(例如， 牛或猪的胰脏），或者来源于蛇的毒液或蜜蜂的毒液。优选，磷脂肪酶可以为微生物来源，例 如来源于丝状真菌、酵母或细菌，例如曲霉属或种，如黑曲霉；网柄菌属，如盘基网柄菌;毛 霉菌属，如爪哇毛霉、蜂毛霉、细孢毛霉;脉孢菌属，如链孢霉;根霉菌属，如微小根毛霉;酒 曲菌属，如少根根霉、日本根霉、葡枝根霉;核盘菌属，如油菜菌核菌;发癣菌属，例如红色毛 癣菌;维氏核盘菌属，如W. sclerotiorum;芽孢杆菌属，如巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌;朽1 檬酸杆菌属，如弗氏梓檬酸杆菌；肠杆菌属，如产气肠杆菌、阴沟愛德华肠杆菌、迟钝肠杆 菌;欧文氏菌属，如冰河活性细菌;埃希氏杆菌属，例如大肠杆菌;克雷伯氏菌属，如克雷伯 氏肺炎菌;变形杆菌属，如普通变形杆菌;普罗威登斯菌属，如斯氏普罗成登斯菌;沙门氏菌 属，如鼠伤寒沙门氏菌;沙雷氏菌属，如解凝沙雷菌、粘质沙雷菌;志贺氏菌属，如弗氏志贺 囷；链霉囷属，如紫红链霉囷；耶尔森氏囷属，如小肠结肠炎耶尔森氏囷。因此，憐脂肪酶可 以为真菌，例如来源于果囊菌亚纲，如镰刀菌属，如大刀镰孢株、异孢镰孢株、苜蓿根腐病菌 株，或者尖孢镰刀菌株。磷脂肪酶还可以来源于属于曲霉属的丝状真菌株，例如泡盛曲酶 株、臭曲霉株、日本曲霉株、黑色曲霉株或米曲霉株。
[0043] 优选的磷脂肪酶衍生自腐质酶株，特别是柔毛腐质酶。磷脂肪酶可以为变体，例 如TO 00/32758中公开的变体之一，该文献经引用而引入。优选的磷脂肪酶变体包括W0 00/ 32758的实施例5中所列的变体，该文献就此特别地经引用而引入。在另一个优选的实施方 案中，磷脂肪酶为W0 04/111216中描述的一个，特别是在实施例1中所列的变体。
[0044]优选，磷脂肪酶衍生自镰刀菌株，特别是尖孢镰刀菌。磷脂肪酶可以为W0 98/ 026057中所提及的、衍生自尖孢镰刀菌DSM 2672的一个，或其变体。
[0045] 磷脂肪酶优选为磷脂肪酶AKEC.3.1.1.32)或磷脂肪酶A2(EC. 3.1.1.4.)。
[0046] 商用磷脂肪酶的例子包括LECITASE?和LECITASE? ULTRA、YIELSMAX或LIPOPAN F (可购自 NovozymesA/S，丹麦）。
[0047] 适当的淀粉酶(α和/或β)包括来源于细菌或真菌的淀粉酶。化学改性或者蛋白质 工程突变体也包括在内。淀粉酶包括例如由芽孢杆菌属，例如特殊的地衣形芽孢杆菌株获 得的α-淀粉酶，GB 1，296,839中对其进行了更详细地描述，或者得自于W0 95/026397或TO 00/060060中公开的嗜碱性芽孢杆菌株的α-淀粉酶。
[0048] 可用的淀粉酶的例子为WO 94/02597、W0 94/18314、W0 96/23873、W0 97/43424、 TO 01/066712、TO 02/010355、W0 02/031124和PCT/DK2005/000469(所述文献全部经引用 而引入)中描述的变体。
[0049] 可商购获得的淀粉酶为Duramyl?、Termamy l?、Termamyl Ultra?、Natal as e?、 StainzymeTM、Fungamyl?和BAN?(Novozymes A/S)、Rapidase?和Purastar?(产自Genencor International Inc.)〇
[0050] 适当的纤维素酶包括来源于细菌或真菌的那些纤维素酶。化学改性或蛋白质工程 突变体也包括在内。适当的纤维素酶包括来源于芽胞杆菌属、假单胞菌属、腐殖菌属、镰刀 菌属、梭孢壳菌属、枝顶孢属的纤维素酶，例如US 4,435,307、US 5,648,263、US 5,691， 178、US 5,776,757、W0 89/09259、W0 96/029397和TO 98/012307中公开的由特异腐殖酶、 太瑞斯梭孢壳酶、漆酶和尖孢镰刀菌制备的真菌纤维素酶。
[0051]特别适当的纤维素酶为具有色彩护理好处的碱性或中性纤维素酶。这种纤维素酶 的例子EP 0 495 257、EP 0 531 372、W0 96/11262、W0 96/29397、W0 98/08940中描述的纤 维素酶。其他例子为纤维素酶变体，例如WO 94/07998、EP 0 531 315、US 5,457,046、US 5， 686，593、US 5,763，254、W0 95/24471、W0 98/12307和PCT/DK98/00299中描述的那些变体。
[0052] 可商购获得的纤维素酶包括 Cel luzymeTM、CarezymeTM、EndolaseTM、Renozyme? (Novozymes A/S)、Clazinase?和Puradax HA?(Genenco;r International Inc.)，^PKAC_ 500(B)?(Kao Corporation)〇
[0053] 适当的过氧化物酶/氧化酶包括植物、细菌或真菌来源的那些酶。化学改性或蛋白 质工程突变体也包括在内。可用的过氧化物酶的例子包括来源于鬼伞属，如灰盖鬼伞的过 氧化物酶，及如W0 93/24618、W0 95/10602和W0 98/15257中所描述的其变体。可商购获得 的过氧化物酶包括Guardzyme?和Novozym? 51004(Novozymes A/S)〇
[0054] 果胶酸裂合酶的例子包括由不同的细菌属，例如欧文氏菌属、假单胞菌属克雷伯 氏菌属和黄单孢菌属克隆而来的果胶酸裂合酶，以及由枯草杆菌(Nasser等人，（1993)FEBS Letts · 335 :319-326)和芽抱杆菌YA-14(Kim等人，（1994)Biosci · Biotech · Biochem. 58: 947-949)克隆而来的果胶酸裂合酶。还描述了对由下述菌制备的、在pH范围8-10内具有最 大活性的果胶酸裂合酶的纯化:短小芽孢杆菌(Dave and Vaughn(1971)J.Bacteriol. 108: 166-174)、多粘芽抱杆菌（Nagel和Vaughn(1961)Arch · Biochem.Biophys · 93:344-352)、嗜 热脂肪芽抱杆菌(Karbassi和Vaughn( 1980)Can. J.Microbiol · 26:377-384)、嗜喊芽抱杆菌 (Hasegawa和Nagel(1966)J.Food Sci · 31:838-845)和嗜喊芽抱杆菌RK9(Kelly和Fogarty (1978)Can.J.Microbiol. 24:1164-1172)。上述的任何一种，以及二价阳离子-独立的和/或 热稳定的果胶酸裂合酶可以用于实践本发明。在优选的实施方案中，果胶酸裂合酶包括 Heffron等人在（1995) Mol · Plant-Microbe Interact · 8 : 331-334和 Henris sat等人在 (1995)Plant Physiol. 107:963-976中公开的果胶酸裂合酶氨基酸序列。特别预期的果胶 酸裂合酶在W0 99/27083和W0 99/27084中进行了公开。其他特别预期的衍生自地衣形芽孢 杆菌的果胶酸裂合酶在US专利11〇.6,284,524(该文献经引用而引入）中进行了公开。特别预 期的果胶酸裂合酶变体在W0 02/006442中进行了公开，特别的是W0 02/006442(该文献经 引用而引入)的实施例中公开的变体。
[0055] 可商购获得的碱性果胶酸盐裂合酶的例子包括BI0PREP?和SC0URZYME? L，其得 自 Novozymes A/S，丹麦。
[0056]甘露聚糖酶(EC 3.2.1.78)的例子包括来源于细菌和真菌的甘露聚糖酶。在特殊 的实施方案中，甘露聚糖酶衍生自丝状真菌属曲霉株，优选黑曲霉或刺孢曲霉（WO 94/ 25576) 10 93/24622中公开了从里氏木酶中分离出来的甘露聚糖酶。甘露聚糖酶还可以从 若干细菌，包括杆菌有机物中分离出来。例如，Talbot等人在Appl.Environ.Microbiol .，56 卷，11期，3505-3510页（1990)中描述了衍生自嗜热脂肪芽孢杆菌的β-甘露聚糖酶。Mendoza 等人在World J.Microbiol .Biotech·，10卷，5期，551-555页（1994)中描述了衍生自枯草芽 孢杆菌的β-甘露聚糖酶。
[0057] JP-A-03047076中公开了衍生自嗜碱性芽孢杆菌的β-甘露聚糖酶。JP-A-63056289 中描述了碱性、热稳定的甘露聚糖酶的制备。JP-A-63036775涉及产生β-甘露聚糖酶和β-甘露糖苷酶的芽孢杆菌微生物。JP-A-08051975中公开了来源于嗜碱的芽孢杆菌AM-001的 碱性β-甘露聚糖酶。W0 97/11164中公开了来源于淀粉液化芽孢杆菌的纯化的甘露聚糖酶。 TO 91/18974中描述了半纤维素酶，例如葡聚糖酶、木聚糖酶或甘露聚糖酶活性分子。预期 的是衍生自W0 99/64619中公开的Bacillus agaradhaerens、地衣形芽孢杆菌、耐盐嗜碱芽 孢杆菌、克劳氏芽孢杆菌、嗜碱芽孢杆菌和特异腐质酶的碱性家族5和26的甘露聚糖酶。特 别预期的是W0 99/64619的实施例中涉及的嗜碱性芽孢杆菌甘露聚糖酶，该文献经引用而 引入。
[0058] 可商购获得的甘露聚糖酶的例子包括Mannaway?，可购自Novozymes A/S Denmark〇
[0059] 可以使用常规的稳定剂，例如多元醇，如丙二醇或甘油，糖或糖醇，乳酸，硼酸或硼 酸衍生物，例如芳香族硼酸酯，或者苯基硼酸衍生物，例如4-甲酰基苯基硼酸对组合物中存 在的任何酶进行稳定化作用，并且可以按照W0 92/19709和W0 92/19708中的描述将组合物 制成制剂。
[0060] 织物洗涤组合物可以包含选自下组的织物洗涤物质：无皂阴离子表面活性剂、非 离子表面活性剂、肥皂、两性表面活性剂、两性离子表面活性剂及其混合物。
[0061] 适合在家用或工业用自动织物洗衣机中使用的洗涤剂组合物通常含有阴离子无 皂表面活性剂或非离子表面活性剂，或者由这两种物质按照所属领域熟练技术人员已知的 适当比例进行组合，任选地与肥皂混合。
[0062] 许多适当的洗涤活性的化合物都是可以获得的并且在文献，例如"Surface-Active Agents and Detergents"，〗和II卷， Schwartz，Perry&Berch中进行了充分描述。 [0063 ] 表面活性剂在组合物中的存在水平可以为0.1 % -60 %重量。
[0064]适当的非离子表面活性剂对所属领域熟练技术人员而言是公知的，其包括烷基苯 磺酸盐、伯和仲烷基硫酸盐，尤其是(：8-&5伯烷基硫酸盐;烷基醚硫酸盐;烯烃磺酸盐;烷基 二甲苯磺酸盐、二烷基磺基琥珀酸盐;醚羧酸盐;羟乙基磺酸盐;肌氨酸盐;脂肪酸酯磺酸酯 及其混合物。通常优选钠盐。如果其中包括所述物质，则基于织物处理组合物计，所述组合 物通常含有约1 % -约50 %，优选10wt % -40wt %的阴离子表面活性剂，例如直链烷基苯磺酸 盐、α-烯烃磺酸盐、烷基硫酸盐(脂肪醇硫酸盐）、醇乙氧基硫酸盐、仲烷磺酸盐、α-磺基脂肪 酸甲酯、烷基-或烯基琥珀酸或肥皂。优选的表面活性剂为烷基醚硫酸盐和烷氧基化的烷基 非离子表面活性剂与烷基磺酸盐或烷基醚硫酸盐的混合物。
[0065]优选的烷基醚硫酸盐为C8-C15烷基并且有2-10摩尔发生了乙氧基化作用 (ethoxlation)。优选的烷基硫酸盐为烷基苯磺酸盐，尤其是烷基链长为C8_C15的直链烷基 苯硫酸盐。用于阴离子表面活性剂的反离子通常为钠，但是还可以使用其他反离子，例如 TEA或铵。适当的阴离子表面活性物质可以购自市场，其名称为'Genapol'?，产自Clariant。
[0066] 非离子表面活性剂对所属领域熟练技术人员来说也是公知的，其包括伯和仲醇乙 氧化物，尤其是每摩尔醇中平均具有1-20摩尔氧化乙烯的、乙氧基化的C 8-C2Q脂肪醇，更尤 其是每摩尔醇中平均具有1-10摩尔氧化乙烯的、乙氧基化的C 1Q-C15伯和仲脂肪醇。非乙氧 基化的非离子表面活性剂包括烷基多苷、甘油单醚和多羟基酰胺(glucamide)。还可以使用 非离子表面活性剂的混合物。如果其中包括所述物质，则所述组合物通常含有约0.2%-约 40%，优选l-20wt%，更优选5-15wt%的非离子表面活性剂，例如醇乙氧基化物、壬基酚乙 氧基化物、烷基多苷、烷基二甲基胺氧化物、乙氧化脂肪酸单乙醇酰胺、脂肪酸单乙醇酰胺、 葡糖胺的多羟基烷基脂肪酸酰胺或N-酰基N-烷基衍生物（"glucamides"）。
[0067] 可用的非离子表面活性剂包括伯和仲醇乙氧化物，特别是平均每摩尔醇具有1-35 摩尔氧化乙烯的、乙氧基化的C8-C 2Q脂肪族醇，更特别的是平均每摩尔醇具有1-10摩尔氧化 乙烯的、乙氧基化的C1Q-C 15伯和仲脂肪族醇。
[0068] 可以使用更高水平的表面活性剂（高达近乎100%)，但这样可能使制剂中留给助 洗剂和其他组分的空间很小，而且可能产生需要做特殊加工的粘性产物。
[0069] 组合物中可以包括助水溶物。术语"助水溶物"通常指能够提高某些微溶有机化合 物的溶解度，优选水溶性的化合物。助水溶物的例子包括二甲苯磺酸钠，SCM。
[0070] 组合物可以包含溶剂，例如水，或者有机溶剂，例如异丙醇或甘油醚。溶剂通常存 在于液体或凝胶组合物中。
[0071] 组合物可以含有金属螯合剂，例如碳酸盐、碳酸氢盐和倍半碳酸盐。所述金属螯合 剂可以为漂白稳定剂（即，重金属多价螯合剂）。适当的漂白稳定剂包括乙二胺四乙酸盐 (EDTA)、二乙基三胺五乙酸盐（DTPA)、乙二胺二琥珀酸盐（EDDS)，和多膦酸酯，例如 Dequests(Trade Mark)、乙二胺四亚甲基膦酸酯（EDTMP)和二乙基三胺五亚甲基磷酸酯 (DETPMP)。通常，金属螯合剂并不存在于组合物部分中，因为如果金属离子失效则可能损害 微生物功能。
[0072] 助洗剂材料可以选自1)钙多价螯合剂材料，2)沉淀材料，3)钙离子交换材料，及4) 其混合物。
[0073]钙多价螯合助洗剂材料的例子包括碱金属多磷酸盐，例如三聚磷酸钠，和有机多 价螯合剂，例如乙二胺四乙酸。
[0074]沉淀助洗剂材料的例子包括正磷酸钠和碳酸钠。
[0075]钙离子交换助洗剂材料的例子包括各种类型的水不溶性的结晶或无定形铝硅酸 盐，其中最为人所知的代表是沸石，例如沸石A、沸石B(还称作沸石P)、沸石C、沸石X、沸石Y 以及沸石P-如ΕΡ-Α-0，384，070中描述的类型。
[0076]所述组合物还可以含有0-65%的助洗剂或配合剂，乙二胺四乙酸、二乙基三胺五 乙酸、烷基-或烯基琥珀酸、次氮基三乙酸或下面提及的另一种助洗剂。许多助洗剂为漂白_ 稳定剂，这是由于其能够配合金属离子的原因。
[0077] 如果存在助洗剂，则所述组合物可以适当地含有少于20%wt，优选少于10重量％， 最优选少于1 〇 % wt的洗涤助洗剂。
[0078]所述组合物可以含有作为助洗剂的结晶铝硅酸盐，优选碱金属铝硅酸盐，更优选 铝硅酸钠。其通常以少于15%w的水平存在。铝硅酸盐为具有下述通式的物质：
[0079] 0.8-1.5Μ20 · AI2O3 · 0.8-6S1O2
[0080] 其中Μ为单价阳离子，优选钠。这些物质含有一些结合水，并且具有至少50mg CaO/ g的钙离子交换能力。在上式中优选的铝硅酸钠含有1.5-3.5个Si02单元。如文献中详细描 述地，其可以通过硅酸钠与铝酸钠之间的反应容易地制备。表面活性剂与铝硅酸盐(如果存 在)之间的比例优选大于5:2，更优选大于3:1。
[0081] 还可以使用磷酸盐助洗剂代替或者附加于铝硅酸盐助洗剂。在该领域中，术语"磷 酸盐"包括二磷酸盐、三磷酸盐和膦酸盐类。其他形式的助洗剂包括硅酸盐，例如可溶性硅 酸盐、偏娃酸盐、层状娃酸盐(例如，产自Hoechst的SKS-6)。
[0082] 为了降低制剂成本，可以采用碳酸盐(包括碳酸氢盐和倍半碳酸盐)和/或柠檬酸 盐作为助洗剂。
[0083]所述组合物可以包含一种或多种聚合物。例子为羧甲基纤维素、聚（乙烯基吡咯烷 酮）、聚（乙二醇）、聚（乙烯醇）、聚（乙烯基吡啶-N-氧化物）、聚（乙烯基咪唑）、聚羧酸盐，例 如聚丙烯酸盐、马来酸/丙烯酸共聚物和月桂基甲基丙烯酸盐/丙烯酸共聚物。
[0084]现今的洗涤剂组合物通常采用聚合物作为所谓的"染料-迀移抑制剂"。这些物质 防止染料的迀移，尤其是在长期的浸泡期间内。任何适当的染料-迀移抑制剂均可以根据本 发明来使用。通常，这种染料-迀移抑制剂包括聚乙烯吡咯烷酮聚合物、聚胺N-氧化物聚合 物、N-乙烯基吡咯烷酮和N-乙烯基咪唑的共聚物、酞菁锰、过氧化物酶及其混合物。
[0085]优选含氮的、结合染料的DTI聚合物。在这些物质中，优选环状胺，例如乙烯基吡咯 烷酮和/或乙烯基咪唑的聚合物和共聚物。
[0086] 适用于本发明的聚胺N-氧化物聚合物含有具有下列结构式的单元:R-Ax-P;其中P 为可聚合单元，N-0基团可以连接到该单元上，或者所述N-0基团可以形成可聚合单元的一 部分;A为下列结构之一:-%(0)-、-(：(0)0-、-3-、-0-、4= ;1为0或1;1?为脂肪族、乙氧化脂 肪族、芳香族、杂环和脂环族基团或其组合，N-0基团的氮原子可以连接在其上或者所述N-0基团为这些基团的一部分，或者所述基团可以连接在这两个单元上。优选的聚胺N-氧化物 为其中R为杂环基团，例如吡啶、啦咯、咪唑、啦咯烷、哌啶及其衍生物的物质。N-0基团可以 由下列通式所代表:^0)(1^)0-3或= ^0)(1^)(^，小其中各个f独立地代表脂肪族、芳香 族、杂环或脂环族基团或其组合;并且N-0基团的氮原子可以连接在任意的上述基团上或者 形成其的一部分。聚胺N-氧化物的胺氧化物单元的pKa < 10，优选pKa < 7，更优选pKa < 6。
[0087] 可以使用任何聚合物主链，条件是所形成的胺氧化物为水溶性的并且具有染料迀 移抑制性质。适当的聚合主链的例子为聚乙烯、聚亚烷基、聚酯、聚醚、聚酰胺、聚酰亚胺、聚 丙烯酸酯及其混合物。这些聚合物包括无规或嵌段共聚物，其中的一个单体类型为胺N-氧 化物，另一个单体类型为N-氧化物。胺N-氧化物聚合物的胺与胺N-氧化物比例通常为10:1_ 1:1，000,000。但是，聚胺氧化物聚合物中存在的胺氧化物基团的数量可以依据适当的共聚 作用或者适当的N-氧化物程度而变。可以得到几乎任何聚合程度的聚胺氧化物。通常，平均 分子量为500-1，000，000;更优选1，000-500，000;最优选5，000-100，000。该优选的物质种 类在本文中被称作"PVN0"。优选的聚胺N-氧化物为平均分子量约50，000且胺与胺N-氧化物 之比约1:4的聚(4-乙烯基吡啶-N-氧化物）。
[0088]还优选N-乙烯基吡咯烷酮和N-乙烯基咪唑聚合物的共聚物(作为一种类别，称作 "PVPVI"）。优选，所述PVPVI的平均分子量为5，000-1，000，000，更优选5，000-200，000，最优 选 10,000-20,000,所述分子量按照Barth等人在Chemical Analysis，113卷，〃Modern Methods of Polymer Characterization〃中所作的描述，通过光散射法来确定。优选的 PVPVI共聚物通常具有1:1-0.2:1的N-乙烯基咪唑与N-乙烯基吡咯烷酮摩尔比，更优选0.8: 1-0.3:1，最优选0.6:1-0.4:1。这些共聚物可以为直链的或者支链的。适当的PVPVI共聚物 包括Sokalan (TM) HP56,其可商购自 BASF，Ludwigshafen，德国。
[0089]作为染料迀移抑制剂，同样优选的是平均分子量为约5，000-约400，000,优选约5， 000-约2000,000，更优选约5,000-约50,000的聚乙烯基吡咯烷酮聚合物(^?〃）。？￥?的上 述性质已经公开于例如EP-A-262,897和EP-A-256,696中。适当的PVP聚合物包括Sokalan (TM)HP50，其可商购自BASF。含有PVP的组合物还可以含有平均分子量为约500-约100，000， 优选约1，〇〇〇-约10，〇〇〇的聚乙二醇(〃PEG〃）。优选，基于ppm计，在洗涤液中送递的PEG与PVP 的比例为约2:1-约50:1，更优选约3:1-约10:1。
[0090]作为染料迀移抑制剂，同样适当的是由改性聚乙烯亚胺聚合物类物质获得的那些 抑制剂，其如例如W0-A-0005334中所公开的情况。这些改性聚乙烯亚胺聚合物是水溶性的 或者可分散的改性聚胺。下列文献对改性聚胺作了进一步的公开:1^4-4,548,744;1^-八-4，597，898;US-A-4，877，896;US-A-4，891，160;US-A-4，976，879;US-A-5，415，807;GB-A-1， 537，288;GB-A-1，498，520;DE-A-2829022;和JP-A-06313271。
[0091]优选，根据本发明的组合物包含选自下组的染料迀移抑制剂:聚乙烯基吡啶N-氧 化物(PVN0)、聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)、聚乙烯基咪唑、N-乙烯基吡咯烷酮和N-乙烯基咪唑 共聚物(PVPVI )，其共聚物，及其混合物。
[0092]本发明组合物中的染料迀移抑制剂的量为组合物重量的0.01 -10 %，优选0.02-5%，更优选 0.03-2%。
[0093]所述组合物还可以含有其他洗涤剂成份，例如织物调理剂，包括粘土、泡沫促进 剂、抑泡剂(抗-泡剂）、防腐剂、污垢悬浮剂、污垢再沉淀抑制剂、其他染料、抗微生物剂、光 学增白剂、晦暗抑制剂或香料。
[0094] 可以使用自动式洗衣机的分配抽屉来依次计量投入酶，例如，使用预洗室计量投 入蛋白酶，而主洗室用于计量投入脂肪酶。
[0095] 本发明还可以用在手洗操作中，这种操作无需其他装置，简单地将酶依次加入到 洗涤各物品的洗涤液中即可完成。
[0096] 但是，手洗操作可以涉及洗涤工具，例如涤气装置，并且可以按照本发明的顺序将 所述组合物直接施用于所述工具，之后将所述工具用于清洗衣物。
[0097] 还可以对所述工具或装置进行浸泡和/或可以将其用作送递装置，用以在本发明 的洗涤/去污(优选去除草污)方法中送递所述酶。
[0098] 本发明的非限制性实施方案的例子
[0099] 实施例1
[0100] 对蛋白酶和脂肪酶去除草污的洗涤评价(振荡式涤垢仪）
[0101 ] 按照下述方式评价洗涤效果:在洗涤剂溶液中用蛋白酶(Savinase 12TXT)和脂肪 酶(Lipex 100T和lipolase 100T)以单一酶、组合和依次(洗涤2次)处理的方式洗涤被草污 染的聚酯样品(wf k30A)。
[0102] 被草污染的样品的制备:在洁净的棉织物样品上剧烈摩擦草地的杂草块以产生均 匀的深绿色圆形污渍，从而手工制得具有相应污渍的消费品。
[0103] 洗涤:在机械搅拌下，将草污样品（7X7cm)放置在振荡式涤垢仪浴盆中，使样品制 剂的组分(表1)处于11去矿物质水中并在37 °C下培养30分钟。在t = 15分钟时停止搅拌，用 11去矿物质水漂洗所有污渍，将所有污渍都转移至第二轮酶的洗浴盆中。再持续搅拌15分 钟。在自来水中漂洗样品、展开并使其在黑暗、室温下过夜干燥。
[0104] 评价:使用Hunterlab UltraScan VIS反射度分光光度计在410nm处测量样品的色 彩反射度。结果表达为Δ反射度=(R?備g-R?麟酶-(R?備g-R麵t)^照，其中R为410nm处的反射 度，其使用生成的CIE L*a*b*(CIELAB)值。
[0105] 表1.制剂组成
[0106]
[0107] 整
[0108] 在振荡式涤垢仪中，savinase、savinase和脂肪酶，以及savinase和之后的脂肪酶 在低FH(rae)下对棉线的洗涤效果。所有污渍都用表面活性剂洗涤。酶蛋白质的总浓度=1μ g/ml〇
[0109]
[0110] 表中显示依次计量加入蛋白酶，之后再投放脂肪酶时，如何大大地改善了污渍的 去除。
[0111] 实施例2
[0112] 对蛋白酶和脂肪酶去除草污的洗涤评价(微量滴定仪）
[0113] 按照下述方式评价洗涤效果:在洗涤剂溶液中用蛋白酶(Savinase 12TXT)和脂肪 酶(Lipex 100T)以单一酶、组合酶和依次(洗涤2次)处理的方式洗涤被草污染的棉质试验 用布。
[0114] 被草污染的棉质试验用布的制备:使用指甲刷在洁净的棉织物上剧烈摩擦混杂的 草(与水3:1的比例），用聚酯织物进行预滤，从而手工制得具有相应污渍的消费品。
[0115] 洗涤:在搅拌（1150rpm)下，将被草污染的试验用布放置在微量滴定仪的板中，使 样品制剂的组分(表1)处于200μ1去矿物质水中并于37°C下在环形振荡器中培养30分钟。这 次试验了低水硬度(FH60)和高水硬度(FH40)的情况。在t = 15分钟时暂停搅拌，用200μ1去 矿物质水漂洗所有污渍，并将其暴露于第二轮酶的溶液中。再持续搅拌15分钟。在自来水中 漂洗样品2次，将其在黑暗、45°C下放置至少3小时以使其干燥。
[0116] 评价:使用平台反射度分光光度计测量样品在410nm处的色彩反射度。结果表达为 Δ反射度=(Rjmg-R臟)酶-(R臟g-R臟)对照，其中R为41 Onm处的反射度，其使用生成的CIE L*a*b*(CIELAB)值(表3和4)。
[0117]
[0118] 表3在微量滴定仪的板中，savinase、savinase和脂肪酶，以及savinase和之后的 脂肪酶在低FH(rae)下对棉线的洗涤效果。所有的污渍都用表面活性剂洗涤。酶蛋白质的总 浓度=1或40μg/ml。S-L，savinase，之后再用脂肪酶。
[0119]
[0120]
[0121] 表4在微量滴定仪的板中，savinase、savinase和脂肪酶，以及脂肪酶和之后的 savinase在高FH(FH40)下对棉线的洗涤效果。所有的污渍都用表面活性剂洗涤。酶蛋白质 的总浓度=1或40yg/m；LS-L，savinase，之后再用脂肪酶。
[0122] 当然可以理解，并不意图将本发明限制于上述实施方案的细节中，这些实施方案 仅仅是以实施例方式来进行描述的。
【主权项】
1. 一种洗衣机，其将用于依次处理织物的依次处理装置与至少第一酶和第二酶相结 合，所述装置包括多个单独的、各自含有第一酶和第二酶的室，所述酶从该室中依次分配出 来，其特征在于所述第一酶包括蛋白酶，且所述第二酶包括一种或多种脂解酶。2. 权利要求1的洗衣机，其中所述的依次处理装置包括洗衣机抽屉。
【文档编号】C11D3/386GK105887421SQ201610102346
【公开日】2016年8月24日
【申请日】2008年6月27日
【发明人】P.科特萨基斯, N.J.帕里
【申请人】荷兰联合利华有限公司