一种雄黄的微生物浸出液的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于微生物浸矿技术，具体涉及雄黄的微生物浸出液的制备方法。
【背景技术】
[0002]近年来一项高新技术一一微生物浸矿技术已经朝气蓬勃发展起来。它是借助某些微生物的催化作用，使矿石中的金属溶解的湿法冶金过程，目前这项技术已成功运用于许多硫化矿物，如硫化猛矿、硫化铜矿、硫化金矿、硫化铀矿和硫化镲矿等。雄黄是一种硫化矿物，存在溶解度小、生物利用度低、毒性大等问题。
[0003]氧化亚铁硫杆菌(Th1bacillus ferrooxidans, T.f)是一种革兰氏阴性菌，具有化能自养、好气、嗜酸、适于中温环境等特性，广泛存在于酸性矿山水及含铁或硫的酸性环境中。
【发明内容】
[0004]鉴于此，本发明目的在于提供一种雄黄的微生物浸出液的制备方法，该方法是利用微生物浸矿技术，制备雄黄的微生物浸出液。
[0005]为解决以上技术问题，本发明提供的技术方案是，提供一种雄黄的微生物浸出液的制备方法，所述微生物为氧化亚铁硫杆菌，包括以下步骤:
[0006]a)菌种筛选
[0007]从酸性矿水中分离筛选出氧化亚铁硫杆菌，
[0008]b)嗜酸氧化亚铁硫杆菌的培养
[0009]取雄黄粉0.1g加入含有10ml浸出用9K培养基摇瓶中作为能源，按3 X 18 ?πιΓ1的浓度，10%的接种量加入氧化亚铁硫杆菌，于25°C、摇床125rpm恒温振荡培养2_3天，培养液颜色逐渐变红；
[0010]c)雄黄的微生物浸出液的制备
[0011]雄黄的微生物炮制在不含铁的9K培养基中进行，室温30 °C，130rpm摇床上培养30天，初始Fe2+浓度为1.0g.L—1;将炮制液3000rpm离心弃沉淀，上清液12000rpm离心两次去除溶液中的氧化亚铁硫杆菌，使用EDTA钠盐络合溶液中的部分离子并调节溶液pH值至7.2，然后过0.22 μ m滤膜除菌得到雄黄的微生物浸出液。
[0012]优选地，所述雄黄粉的目度为100目。
[0013]与现有技术相比，上述技术方案中的一个技术方案具有如下优点:
[0014]本发明对氧化亚铁硫杆菌进行了驯化，对矿物药雄黄具有明显的浸出作用，能够较大限度地降解雄黄，实验结果表明，雄黄经氧化亚铁硫杆菌浸出30天后，As离子浓度达到986.2 μ g/ml，远远高于水飞的As离子浓度是82.7 μ g/ml。氧化亚铁硫杆菌广泛存在于酸性矿山水及含铁或硫的酸性环境中，通过简单的实验就可以分离提取得到，无需进行生物保藏。
【具体实施方式】
[0015]下面结合一个具体实施例进行说明。
[0016]氧化亚铁硫杆菌广泛存在于酸性矿山水及含铁或硫的酸性环境中，本实施例所用氧化亚铁硫杆菌是从矿区酸性矿水中分离筛选得到。
[0017]取0.lg 100目雄黄粉加入含有10ml浸出用9K培养基摇瓶中作为能源，按3X 18 ^mr1的浓度，10%的接种量加入氧化亚铁硫杆菌，于25°C、摇床125rpm恒温振荡培养2-3天，培养液颜色逐渐变红。9K液体培养基:(NH4)2SO4, 3.0g ;KC1，0.1g ;Κ2ΗΡ04，0.5g ；MgSO4.7Η20，0.5g ；Ca(NO3)2,0.0lg ；FeS04.7H20，44.78g ;蒸馏水，100mL ；ρΗ1.8，121 °C 灭菌15min，加入经过滤除菌的质量分数为14.7%的FeSO4.7H20溶液300ml，5mol/LH2S0jjf节pH值为1.70。
[0018]雄黄的微生物炮制在不含铁的9K培养基中进行，初始Fe2+浓度为1.0g.L'培养温度为30°C，在130rpm摇床上培养30天。9K无铁液体培养基:(NH4)2S043g，KCl 0.1g,K2HPO40.5g，MgSO4.7H20 0.5g，Ca(NO3)20.0lg，蒸馏水 1000ml，5mol/LH2S04调节 pH 值为
1.70，121°C灭菌 15min。
[0019]炮制完成后，将炮制液3000rpm离心弃沉淀，上清液12000rpm离心两次去除溶液中的氧化亚铁硫杆菌，使用EDTA钠盐络合溶液中的部分离子并调节溶液pH值至7.2，然后过0.22 μ m滤膜除菌得到雄黄的微生物浸出液。
[0020]将浸出液稀释后，利用电感耦合等离子体原子发射光谱测定浸出液中砷浓度，实验结果表明，As离子浓度达到986.2 μ g/ml，远远高于水飞的As离子浓度是82.7 μ g/ml ο
【主权项】
1.一种雄黄的微生物浸出液的制备方法，所述微生物为氧化亚铁硫杆菌，其特征在于，包括以下步骤: a)菌种筛选 从酸性矿水中分离筛选出氧化亚铁硫杆菌， b)嗜酸氧化亚铁硫杆菌的培养 取雄黄粉0.1g加入含有10ml浸出用9K培养基摇瓶中作为能源，按3X 18 ?πιΓ1的浓度，10%的接种量加入氧化亚铁硫杆菌，于25°C、摇床125rpm恒温振荡培养2_3天，培养液颜色变红； c)雄黄的微生物浸出液的制备 雄黄的微生物炮制在不含铁的9K培养基中进行，室温30 °C，130rpm摇床上培养30天，初始Fe2+浓度为1.0g吨―1;将炮制液3000rpm离心弃沉淀，上清液12000rpm离心两次去除溶液中的氧化亚铁硫杆菌，使用EDTA钠盐络合溶液中的离子并调节溶液pH值至7.2，然后过0.22 μ m滤膜除菌得到雄黄的微生物浸出液。
2.根据权利要求1所述的雄黄的微生物浸出液的制备方法，其特征在于，所述雄黄粉的目度为100目。
【专利摘要】本发明公开一种雄黄的微生物浸出液的制备方法，所述微生物为氧化亚铁硫杆菌，包括以下步骤：菌种筛选、嗜酸氧化亚铁硫杆菌的培养、雄黄的微生物浸出液的制备三个步骤，本发明对氧化亚铁硫杆菌进行了驯化，对矿物药雄黄具有明显的浸出作用，能够较大限度地降解雄黄，实验结果表明，雄黄经氧化亚铁硫杆菌浸出30天后，As离子浓度达到986.2μg/ml，远远高于水飞的As离子浓度是82.7μg/ml。氧化亚铁硫杆菌广泛存在于酸性矿山水及含铁或硫的酸性环境中，通过简单的实验就可以分离提取得到。
【IPC分类】C22B3-18
【公开号】CN104561542
【申请号】CN201410682323
【发明人】金京勋
【申请人】苏州嘉禧萝生物科技有限公司
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2014年11月24日