一种草菇液体菌种制备的方法
【技术领域】
[0001] 一种草菇液体菌种制备的方法，属于食用菌栽培学领域。
【背景技术】
[0002] 草葫[Volvariellavolvacea(Bull,exFr. )Sing.]，又名荀脚葫、兰花葫、 麻菇、杆菇、南华菇、贡菇、家生菇等，国外又称草菇为"中国蘑菇"。隶属于真菌门 (Eumycota)、担子菌纲（Basidiomycetes)，伞菌目（Agaricales)，光柄葫科（Pluteaceae)， 苞脚菇属（Volvariella)。草菇是热带和亚热带地区广泛栽培的食用菌。它不仅味道鲜 美，而且营养价值很高。据测定，干草菇蛋白质含量为37. 13%，明显高于一般的蔬菜，每百 克鲜草菇含维生素C206. 27毫克，比富含维生素C而著名的柚、橙、番茄、辣椒都高，居于水 果蔬菜之首，此外，草菇中还含有包括人体必需的8种氨基酸在内的17种氨基酸等物质。
[0003] 草菇性寒、味甘，具有补脾益气、清暑去热、发乳肥孩、护肝健胃及解毒之功效，常 食草菇，有利于降血压，抗肿瘤，增强机体抗病，加速伤口的愈合。现代医学研宄表明，草菇 含有异构蛋白，可增强人体免疫机能，降低胆固醇含量，预防动脉粥样化。草菇中含有一种 叫民种蛋白的物质，有抗癌作用，它还含有氮浸出物和嘌呤碱，又能抑制癌细胞的生长。
[0004]中国是草菇的生产消费大国，此外，日本、泰国、越南、马来西亚等国草菇的栽培也 很普遍。过去我国的草菇生产区主要集中在广东、浙江、福建等南方沿海各省。近20年来， 我国的草菇生产有了很大的发展，北方各省利用麦秸、棉子皮、种过其它蘑菇的菌糠进行草 菇栽培，创造了适合北方气候特点的多科栽培模式。草菇产品的销售主要有2个方面：一个 是加工成盐渍去皮草菇出口日本等因素，这种产品多年来在国际市场上畅销不衰。草菇的 另一个销售市场是内销，草菇的国内销售市场潜力巨大。广州果菜公司就在广州江南蔬菜 批发市场附近，建了广州最大的草菇批发市场(长堤草菇交易市场)。随着人们生活水平的 不断提高，草菇罐头在北方的销量也逐年增加。
[0005] 面对入世给食用菌产业带来的机遇和挑战与技术落后现状，我们必须在技术上有 所突破和创新。因此这迫切需要用液体菌种来代替固体菌种的栽培。我们着眼于进行草菇 深层发酵技术的研宄，改变了传统的用固体菌种生产的方法。我们经过几年的研宄、反复实 验终于研宄成功了草菇液体菌种规模化生产新技术，该技术不仅可以大大缩短菌种的制种 时间，提高菌种质量，降低菌种生产成本，提高子实体品质、产品质量和商品价值等等，而且 投资少，技术易掌握，适合我国国情，具有很高的推广价值。
【发明内容】
[0006] 1.草葫液体培养碳氮源的优选 1材料与方法 1. 1材料 1. 1. 1菌种草菇V11(l，引自江苏高邮市食用菌研宄所。
[0007] 1. 1. 2母种培养基 马铃薯 20%，葡萄糖 2%，麦麸 3%，蛋白胨 0. 15%，KH2P040. 2%，MgS04 ? 7H20 0. 15%.，琼 脂2%。
[0008] 1. 1. 3-级摇瓶培养基 马铃薯 5%，蔗糖 2%，蛋白胨 0. 15%，麦麸 3%，KH2P040. 1%，MgS04 0 . 05%，VBA 001% 1. 1. 4碳源供试培养基 蛋白胨0. 5%，KH2P040. 05%，MgS040. 1%，VB10. 001%，碳源。分别用2%的葡萄糖、乳糖、果 糖、麦芽糖、蔗糖、红糖和淀粉替换其中的碳源。
[0009] 1. 1. 5氮源供试培养基 葡萄糖2%，KH2P04 0? 05%，MgS04 0? 1%，VB10. 001%，氮源。分别用0? 5%的蛋白胨、牛肉 膏、酵母膏、KN03、甘氨酸和谷氨酸替换其中的氮源。_ 1. 1. 6无机盐供试培养基 将葡萄糖2%，蛋白胨0. 5%，VBA 001%培养基中的MgS04 ? 7H20,分别用0. 2%的ZnS04、 KH2P04、CaCI2、MgS04 ? 7H20 和Fe2 (S04) 3替换。
[0010] 1. 1. 7农副产品水解液供试培养基： 将麦麸4%，葡萄糖2%，土豆5%，KH2P040. 1%，MgS04 0 . 05%，VBA 001%培养基中的麦麸， 分别用等量的玉米馇、黄豆渣和淀粉替换。
[0011] 1.2 方法 1. 2. 1培养基制备 马铃薯削皮后切成长条状，与麦麸一起放入水中，煮沸后维持25min左右。八层纱 布过滤后取滤液，然后分别加入各药品，定容。趁热将培养基分装入试管，装量为试管的 1/4~1/3,在0. 15mPa，121°C灭菌0. 5h取出摆斜面。液体培养基分装于500ml锥形瓶，每瓶 装 150ml，121°C灭菌 0? 5h.。
[0012] 1.2. 2菌种活化 将保藏的草菇菌种无菌操作接至试管斜面上，30°C下培养一周左右，此时菌丝长满斜 面，即可使用。
[0013] 1. 2. 3液体菌种的制备 1. 2. 3. 1接种一级摇瓶：无菌操作从斜面上取大小相近的0. 5cmX0. 5cm的母种块， 接种于液体培养基中（菌块要薄，少带培养基，尽量使菌块漂浮在液面上)。每瓶接种3块。 25°C静置24h，然后置于30°C，220r/min左右旋转式摇床上培养5天左右。
[0014]1. 2. 3. 2接种二级摇瓶无菌操作，接种量为10%，置于旋转式摇床上30°C，220r/ min培养3天。每组设3次重复。
[0015] 1.2. 4结果处理 ①菌球体积比的测定将发酵液倒入量筒中，充分静止后，测量菌球体积，计算其体积 比。
[0016] ②菌球的大小测定用移液管从量筒中分别吸取1ml发酵液放入3个培养皿中， 培养皿下方衬以方格纸，测量菌球直径。
[0017] ③菌丝生长量的测定将发酵液用脱脂棉过滤后，再用蒸馏水冲洗数次，沥干， 然后在60°C烘箱中烘干至恒重，用电子分析天平称重。 2结果与分析 2. 1不同的碳源对草菇液体培养的影响 2. 1. 1最适碳源的筛选结果(见表1): 表1不同碳源对草菇液体培养的影响
【主权项】
1. 一种草菇液体菌种制备的方法，其特征在于草菇液体培养基的最优配方是蔗糖2%， 蛋白胨 2%，麦麸 4%，无机盐MgS04 0 . 05%，KH2P04 0. 1%，再加VBi0. 001%。
2. -种草菇液体菌种制备的方法，其特征在于最适宜草菇深层培养的条件是：温度 为30~33°C，pH为6.0~7.0,粘度为添加0. 2%的琼脂，接种量为10~15%左右，瓶装量为 180mL/500mL，转速为 220r/min左右。
【专利摘要】一种草菇液体菌种制备的方法，草菇[Volvariella volvacea (Bull.ex.Fr.) Sing.] 又名兰花菇﹑苞脚菇等，是一种生长在热带和亚热带的炎热夏季的菇类，也是我国重要的食用菌，我国产量居世界首位。在我国，主要产在广东和福建等省。近年来，在华东和华北一带草菇生产迅猛发展，由于菌株的命名比较混乱，目前传统的食用菌制种和栽培方式已不能满足市场对食用菌产品的需求。用大规模工业化生产方式来生产某些食用菌菌丝体已成为食用菌生产的一个新途径，因此发酵技术在食用菌上的应用便应运而生。为筛选出适合栽培的优良品种，更好的指导生产，对这一带常用的6个菌株进行了综合研究，对6个菌株进行了菌丝生长速度、菌株间的拮抗性、CMC酶相对活性、同工酶和抗霉性等特性的研究。
【IPC分类】A01G1-04, C05G1-00
【公开号】CN104710206
【申请号】CN201310291383
【发明人】蔡德华, 张萍
【申请人】鲁东大学
【公开日】2015年6月17日
【申请日】2013年7月12日