专利名称：3α－烷酰氧基－6β－烷酰氧基莨菪烷类化合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及具有M受体激动活性的3α-烷酰氧基-6β-烷酰氧基莨菪烷类化合物及其制备方法。
莨菪烷生物碱是一类具有8-氮二环[3.2.1]辛烷母核的化合物，在现有技术中是一种公知的M胆碱受体阻断剂，具有抗胆碱活性，临床上应用非常广泛，如东莨菪碱治疗肺结合咳血(翁文锦等，福建医学杂志1984:(2):58)，阿托品治疗老年性慢性房颤(赵振源等，河南医药1984:(1):47)，山莨菪碱治疗过敏性紫癜、急性水肿性胰腺炎(分别参见张志文等，实用内科杂志1984:(1):26，高从光等，中华内科杂志1982:(12):755)均收到良好的效果。
近年来，随着化学、药理及临床研究的深入开展，人们发现在草药包公藤茎中分离得到的莨菪烷类生物碱包公藤甲素(2β-羟基-6β-乙酰氧基-N-去甲莨菪烷)及其类似物的合成物具有M胆碱受体激动活性，但所述的包公藤甲素及其类似物都必须有N-去甲莨菪烷的结构，若不去除莨菪烷母核上氮原子连接的甲基，则所合成的莨菪烷类化合物就没有M胆碱受体激动剂作用。丁维功等，药学学报1993,28(4),302-306揭示了这类具有N-去甲莨菪烷的结构的拟胆碱莨菪烷类生物碱。
本发明旨在提供一种新颖的莨菪烷类化合物，所述的化合物具有M胆碱受体激动活性。
本发明的再一个目的是提供所述化合物的制备方法。
本发明的目的通过下列构思来实现一种莨菪烷类化合物，它具有下式结构 其中
R1和R2是相同的或不同的，当R1和R2相同时，它们为有4-15个碳原子的脂肪烷基；当R1和R2不相同时，R1为甲基；R2为有4-15个碳原子的脂肪烷基。
上述的莨菪烷类化合物通过下列反应流程制备 ⅰ)使3α-羟基-6β-乙酰氧基莨菪烷与盐酸/乙醇溶液反应，得到3α,6β-二羟基莨菪烷盐酸盐；ⅱ)使ⅰ)步骤得到的产物与酰氯反应，得到3α,6β-二烷酰氧基莨菪烷。
当R1和R2不相同时，R1为甲基，该化合物具有下式结构 其中R2为有4-15个碳原子的脂肪烷基。
优选的式Ⅰ和/或式Ⅱ化合物中，R2=CH3(CH2)n,n=4-10的整数。最优选的化合物为3α,6β-二正己酰氧基莨菪烷，3α-正庚酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷，或3α,6β-二正壬酰氧基莨菪烷。
可这样制备式Ⅱ化合物使3α-羟基-6β-乙酰氧基莨菪烷与酰氯反应，得到3α-烷酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷。
本发明具有下列优点1．本发明以莨菪烷类生物碱为母体，通过生物电子等排，疏水性能，抗代谢性能等诸多方面的改进，有目的的进行一系列的结构修饰，合成了系列化合物，经药理筛选，是一类高效的M受体激动剂。
2．本药物采用国产原料及试剂，合成路线简单，反应条件温和，得率较高，成本较低，具有广阔的应用前景。
下面将结合具体实施例对本发明作更详细的阐述，实施例中使用的3α-羟基-6β-乙酰氧基莨菪烷根据谢晶曦等在“山莨菪碱的全合成研究”(科学通报1975,4,197)一文所述的方法得到。实施例中的核磁共振数据用Varian-EM360L型仪测定，质谱用HP5989A GC-MS仪测定。
实施例13α-正戊酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷的制备在50毫升三颈瓶中，加入1克3α-羟基-6β-乙酰氧基莨菪烷、二氯甲烷10毫升，接上回流冷凝管，装上无水氯化钙干燥管。磁力搅拌器搅拌，滴加正戊酰氯0.8毫升。滴加完毕后，加热回流2小时，除去溶剂，加水7毫升，用浓氨水调节pH=9-10，二氯甲烷20毫升分三次萃取，分离出有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，蒸馏除去二氯甲烷，残留物用G60层析柱分离，洗脱剂为丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL检测，展开剂为丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化铋钾为显色剂，Rf=0.58。蒸去溶剂，得到淡黄色油状物的标题产物1.17克，产率为82％。
1H NMRδ(CDCl3):2.03(s,3H,CH3CO),2.52(s,3H,CH3N),0.90[m,3H,(CH2)3CH3],1.10-2.60[m,12H,C2,4,7-H,(CH2)3CH3],3.15(m,1H,C5-H),3.33(m,1H,C1-H),5.06(m,1H,C3-H)5.47(dd,1H,J=4.0,8.0Hz,C6-H)。
MS(m/z):283(M),198,182,122,94。
实施例23α-正己酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷的制备在50毫升三颈瓶中，加入1克3α-羟基-6β-乙酰氧基莨菪烷、二氯甲烷10毫升，接上回流冷凝管，装上无水氯化钙干燥管。磁力搅拌器搅拌，滴加正己酰氯0.8毫升。滴加完毕后，加热回流2小时，除去溶剂，加水7毫升，用浓氨水调节pH=9-10，二氯甲烷20毫升分三次萃取，分离出有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，蒸馏除去二氯甲烷，残留物用G60层析柱分离，洗脱剂为丙酮/甲醇=95/5(v/v)，TCL检测，展开剂为丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化铋钾为显色剂，Rf=0.58。蒸去溶剂，得到1.27克淡黄色油状物的标题产物，产率为85％。
1H NMRδ(CDCl3):2.03(s,3H,CH3CO),2.52(s,3H,CH3N),0.90[m,3H,(CH2)4CH3],1.10-2.60[m,14H,C2,4,7-H,(CH2)4CH3],3.13(m,1H,C5-H),3.33(m,1H,C1-H),5.03(m,1H,C3-H),5.43(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):297(M),198,182,122,94。
实施例33α-正庚酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷的制备在50毫升三颈瓶中，加入1克3α-羟基-6β-乙酰氧基莨菪烷、二氯甲烷10毫升，接上回流冷凝管，装上无水氯化钙干燥管。磁力搅拌器搅拌，滴加正庚酰氯0.7毫升。滴加完毕后，加热回流2.5小时，除去溶剂，加水7毫升，用浓氨水调节pH=9-10，二氯甲烷20毫升分三次萃取，分离出有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，蒸馏除去二氯甲烷，残留物用G60层析柱分离，洗脱剂为丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL检测，展开剂为丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化铋钾为显色剂，Rf=0.59。蒸去溶剂，得到淡黄色油状物的标题产物1.26克，产率为80％。
1H NMR δ(CDCl3):2.06(s,3H,CH3CO),2.52(s,3H,CH3N),0.90[m,3H,(CH2)5CH3],1.10-2.65[m,16H,C2,4,7-H,(CH2)5CH3],3.15(m,1H,C5-H),3.40(m,1H,C1-H),5.03(m,1H,C3-H),5.43(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):311(M),198,182,122,94。
实施例43α-正辛酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷的制备在50毫升三颈瓶中，加入1克3α-羟基-6β-乙酰氧基莨菪烷、二氯甲烷10毫升，接上回流冷凝管，装上无水氯化钙干燥管。磁力搅拌器搅拌，滴加正辛酰氯0.7毫升。滴加完毕后，加热回流2.5小时，除去溶剂，加水7毫升，用浓氨水调节pH=9-10，二氯甲烷20毫升分三次萃取，分离出有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，蒸馏除去二氯甲烷，残留物用G60层析柱分离，洗脱剂为丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL检测，展开剂为丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化铋钾为显色剂，Rf=0.60。蒸去溶剂，得到淡黄色油状物的标题产物1.30克，产率为82％。
1H NMRδ(CDCl3):2.06(s,3H,CH3CO),2.51(s,3H,CH3N),0.90[m,3H,(CH2)6CH3],1.18-2.57[m,18H,C2,4,7-H,(CH2)6CH3],3.17(m,1H,C5-H),3.33(m,1H,C1-H),5.03(m,1H,C3-H),5.43(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):325(M),198,182,122,94。
实施例53α-异辛酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷的制备在50毫升三颈瓶中，加入1克3α-羟基-6β-乙酰氧基莨菪烷、二氯甲烷10毫升，接上回流冷凝管，装上无水氯化钙干燥管。磁力搅拌器搅拌，滴加异辛酰氯0.9毫升。滴加完毕后，加热回流2.5小时，除去溶剂，加水7毫升，用浓氨水调节pH=9-10，二氯甲烷20毫升分三次萃取，分离出有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，蒸馏除去二氯甲烷，残留物用G60层析柱分离，洗脱剂为丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL检测，展开剂为丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化铋钾为显色剂，Rf=0.60。蒸去溶剂，得到淡黄色油状物的标题产物1.35克，产率为82％。
1H NMRδ(CDCl3):2.06(s,3H,CH3CO),2.53(s,3H,CH3N),0.90[m,6H,(CH2)4CH(CH3)2],1.10-2.70[m,15H,C2,4,7-H,(CH2)4CH(CH3)2],3.25(m,1H,C5-H),3.47(m,1H,C1-H),5.10(m,1H,C3-H),5.47(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):325(M),198,182,122,94。
实施例63α-[2-乙基丁酰氧基]-6β-乙酰氧基莨菪烷的制备在50毫升三颈瓶中，加入1克3α-羟基-6β-乙酰氧基莨菪烷、二氯甲烷10毫升，接上回流冷凝管，装上无水氯化钙干燥管。磁力搅拌器搅拌，滴加2-乙基丁酰氯0.8毫升。滴加完毕后，加热回流2.5小时，除去溶剂，加水7毫升，用浓氨水调节pH=9-10，二氯甲烷20毫升分三次萃取，分离出有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，蒸馏除去二氯甲烷，残留物用G60层析柱分离，洗脱剂为丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL检测，展开剂为丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化铋钾为显色剂，Rf=0.60。蒸去溶剂，得到淡黄色油状物的标题产物1.17克，产率为78％。
1H NMRδ(CDCl3):2.06(s,3H,CH3CO),2.51(s,3H,CH3N),0.93[m,6H,CH(CH2CH3)2],1.13-2.63[m,11H,C2,4,7-H,CH(CH2CH3)2],3.17(m,1H,C5-H),3.33(m,1H,C1-H),5.07(m,1H,C3-H),5.47(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):297(M),198,182,122,94。
实施例73α-正壬酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷的制备在50毫升三颈瓶中，加入1克3α-羟基-6β-乙酰氧基莨菪烷、二氯甲烷10毫升，接上回流冷凝管，装上无水氯化钙干燥管。磁力搅拌器搅拌，滴加正壬酰氯0.7毫升。滴加完毕后，加热回流2.5小时，除去溶剂，加水7毫升，用浓氨水调节pH=9-10，二氯甲烷20毫升分三次萃取，分离出有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，蒸馏除去二氯甲烷，残留物用G60层析柱分离，洗脱剂为丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL检测，展开剂为丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化铋钾为显色剂，Rf=0.60。蒸去溶剂，得到淡黄色油状物的标题产物1.39克，产率为81％。
1H NMRδ(CDCl3):2.06(s,3H,CH3CO),2.52(s,3H,CH3N),0.90[m,3H,(CH2)7CH3],1.10-2.70[m,20H,C2,4,7-H,(CH2)7CH3],3.17(m,1H,C5-H),3.36(m,1H,C1-H),5.03(m,1H,C3-H),5.43(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):339(M),198,182,122,94。
实施例83α-正癸酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷的制备在50毫升三颈瓶中，加入1克3α-羟基-6β-乙酰氧基莨菪烷、二氯甲烷10毫升，接上回流冷凝管，装上无水氯化钙干燥管。磁力搅拌器搅拌，滴加正癸酰氯0.8毫升。滴加完毕后，加热回流2.5小时，除去溶剂，加水7毫升，用浓氨水调节pH=9-10，二氯甲烷20毫升分三次萃取，分离出有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，蒸馏除去二氯甲烷，残留物用G60层析柱分离，洗脱剂为丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL检测，展开剂为丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化铋钾为显色剂，Rf=0.60。蒸去溶剂，得到淡黄色油状物的标题产物1.34克，产率为75％。
1H NMRδ(CDCl3):2.03(s,3H,CH3CO),2.52(s,3H,CH3N),0.90[m,3H,(CH2)8CH3],1.10-2.66[m,22H,C2,4,7-H,(CH2)8CH3],3.17(m,1H,C5-H),3.33(m,1H,C1-H),5.00(m,1H,C3-H),5.40(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):353(M),198,182,122,94。
实施例93α-十一酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷的制备在50毫升三颈瓶中，加入1克3α-羟基-6β-乙酰氧基莨菪烷、二氯甲烷10毫升，接上回流冷凝管，装上无水氯化钙干燥管。磁力搅拌器搅拌，滴加正十一酰氯0.9毫升。滴加完毕后，加热回流3小时，除去溶剂，加水7毫升，用浓氨水调节pH=9-10，二氯甲烷20毫升分三次萃取，分离出有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，蒸馏除去二氯甲烷，残留物用G60层析柱分离，洗脱剂为丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL检测,展开剂为丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化铋钾为显色剂，Rf=0.60。蒸去溶剂，得到淡黄色油状物的标题产物1.33克，产率为72％。
1H NMRδ(CDCl3):2.00(s,3H,CH3CO),2.46(s,3H,CH3N),0.83[m,3H,(CH2)9CH3],1.00-2.60[m,24H,C2,4,7-H,(CH2)9CH3],3.10(m,1H,C5-H),3.30(m,1H,C1-H),5.03(m,1H,C3-H),5.43(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):367(M),198,182,122,94。
实施例103α-十二酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷的制备在50毫升三颈瓶中，加入1克3α-羟基-6β-乙酰氧基莨菪烷、二氯甲烷10毫升，接上回流冷凝管，装上无水氯化钙干燥管。磁力搅拌器搅拌，滴加正十二酰氯0.9毫升。滴加完毕后，加热回流3小时，除去溶剂，加水7毫升，用浓氨水调节pH=9-10，二氯甲烷20毫升分三次萃取，分离出有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，蒸馏除去二氯甲烷，残留物用G60层析柱分离，洗脱剂为丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL检测，展开剂为丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化铋钾为显色剂，Rf=0.61。蒸去溶剂，得到淡黄色油状物的标题产物1.48克，产率为67％。
1H NMRδ(CDCl3):2.03(s,3H,CH3CO),2.52(s,3H,CH3N)0.90[m,3H,(CH2)10CH3],1.10-2.60[m,26H,C2,4,7-H,(CH2)10CH3],3.10(m,1H,C5-H),3.30(m,1H,C1-H),5.03(m,1H,C3-H),5.43(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):381(M),198,182,122,94。
实施例113α-十六酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷的制备在50毫升三颈瓶中，加入1克3α-羟基-6β-乙酰氧基莨菪烷、二氯甲烷10毫升，接上回流冷凝管，装上无水氯化钙干燥管。磁力搅拌器搅拌，滴加正十六酰氯0.9毫升。滴加完毕后，加热回流3小时，除去溶剂，加水7毫升，用浓氨水调节pH=9-10，二氯甲烷20毫升分三次萃取，分离出有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，蒸馏除去二氯甲烷，残留物用G60层析柱分离，洗脱剂为丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL检测，展开剂为丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化铋钾为显色剂，Rf=0.61。蒸去溶剂，得到淡黄色油状物的标题产物1.48克，产率为67％。
1H NMRδ(CDCl3):2.06(s,3H,CH3CO),2.54(s,3H,CH3N),0.90[m,3H,(CH2)14CH3],1.10-2.60,[m,32H,C2,4,7-H,(CH2)14CH3],3.13(m,1H,C5-H),3.35(m,1H,C1-H),5.03(m,1H,C3-H)5.43(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):437(M),198,182,122,94。
实施例123α,6β-二正己酰氧基莨菪烷的制备a)3α,6β-二羟基莨菪烷盐酸盐的制备在50毫升圆底烧瓶中加入3α-羟基-6β-乙酰氧基莨菪烷1克，95％乙醇10毫升，盐酸0.4毫升，水1毫升。装上回流冷凝管，磁力搅拌器搅拌下，加热回流8小时，改成减压蒸馏装置，除去溶剂，得到淡褐色固体0.75克。产率95％b)3α,6β-二正己酰氧基莨菪烷的制备在50毫升圆底烧瓶中，加入1克实施例12a)制备的3α,6β-二羟基莨菪烷盐酸盐，二氯甲烷15毫升，接上回流冷凝管，装上无水氯化钙干燥管。磁力搅拌器搅拌，滴加1.8毫升正己酰氯，滴加完毕后，加热回流5小时，除去溶剂，加水10毫升，用浓氨水调节pH=9-10，二氯甲烷30毫升分三次萃取，分离出有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，蒸馏除去二氯甲烷，残留物用G60层析柱分离，洗脱剂为丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL检测，展开剂为丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化铋钾为显色剂，Rf=0.61。蒸去溶剂，得到淡黄色油状物的标题产物1.28克，产率为70％。
1H NMRδ(CDCl3):2.52(s,3H,CH3N),0.87{m,6H,[(CH2)4CH3]2},1.26-2.58{m,22H,C2,4,7-H,[(CH2)4CH3]2},3.13(m,1H,C5-H),3.33(m,1H,C1-H),5.00(m,1H,C3-H),5.43(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):353(M),254,238,122,95。
实施例133α,6β-二正庚酰氧基莨菪烷的制备在50毫升圆底烧瓶中，加入1克实施例12a)制备的3α,6β-二羟基莨菪烷盐酸盐，二氯甲烷15毫升，接上回流冷凝管，装上无水氯化钙干燥管。磁力搅拌器搅拌，滴加1.8毫升正庚酰氯，滴加完毕后，加热回流5小时，除去溶剂，加水10毫升，用浓氨水调节pH=9-10，二氯甲烷30毫升分三次萃取，分离出有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，蒸馏除去二氯甲烷，残留物用G60层析柱分离，洗脱剂为丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL检测，展开剂为丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化铋钾为显色剂，Rf=0.61。蒸去溶剂，得到淡黄色油状物的标题产物1.41克，产率为71％。
1H NMRδ(CDCl3):2.51(s,3H,CH3N),0.90{m,6H,[(CH2)5CH3]2},1.10-2.60{m,26H,C2,4,7-H,[(CH2)5CH3]2},3.23(m,1H,C5-H),3.45(m,1H,C1-H),5.03(m,1H,C3-H),5.48(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):381(M),268,252,122,95。
实施例143α,6β-二正辛酰氧基莨菪烷的制备在50毫升圆底烧瓶中，加入1克实施例12a)制备的3α,6β-二羟基莨菪烷盐酸盐，二氯甲烷15毫升，接上回流冷凝管，装上无水氯化钙干燥管。磁力搅拌器搅拌，滴加1.7毫升正辛酰氯，滴加完毕后，加热回流5小时，除去溶剂，加水10毫升，用浓氨水调节pH=9-10，二氯甲烷30毫升分三次萃取，分离出有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，蒸馏除去二氯甲烷，残留物用G60层析柱分离，洗脱剂为丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL检测，展开剂为丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化铋钾为显色剂，Rf=0.62。蒸去溶剂，得到淡黄色油状物的标题产物1.51克，产率为71％。
1H NMRδ(CDCl3):2.52(s,3H,CH3N),0.90{m,6H,[(CH2)6CH3]2},1.10-2.60{m,30H,C2,4,7-H,[(CH2)6CH3]2},3.15(m,1H,C5-H),3.33(m,1H,C1-H),5.03(m,1H,C3-H),5.43(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):409(M),282,266,122,95。
实施例153α,6β-二正壬酰氧基莨菪烷的制备在50毫升圆底烧瓶中，加入1克实施例12a)制备的3α,6β-二羟基莨菪烷盐酸盐，二氯甲烷15毫升，接上回流冷凝管，装上无水氯化钙干燥管。磁力搅拌器搅拌，滴加1.6毫升正壬酰氯，滴加完毕后，加热回流5小时，除去溶剂，加水10毫升，用浓氨水调节pH=9-10，二氯甲烷30毫升分三次萃取，分离出有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，蒸馏除去二氯甲烷，残留物用G60层析柱分离，洗脱剂为丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL检测，展开剂为丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化铋钾为显色剂，Rf=0.62。蒸去溶剂，得到淡黄色油状物的标题产物1.66克，产率为73％。
1H NMRδ(CDCl3):2.53(s,3H,CH3N),0.90{m,6H,[(CH2)7CH3]2},1.16-2.55{m,34H,C2,4,7-H,[(CH2)7CH3]2},3.17(m,1H,C5-H),3.34(m,1H,C1-H),5.06(m,1H,C3-H),5.43(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):437(M),296,280,122,95。
试验1离体平滑肌受体分析法取荷兰种豚鼠，体重250-300克，雌雄不限，猛击头部至昏迷，自回盲部上端5厘米处取回肠一段，浸于Kreb’s液中，洗去内容物，剪去肠系膜，套在直径为7厘米的玻璃棒上，用一小棉签自肠系膜处与肠段成切线方向剥离纵肠肌，使之与内层环肌分离。取1.5厘米长的肌束，一端固定于通气钩上，另一端连接于肌力换能器上，置于恒温37±1℃浴池内，负荷为350毫克，并持续通入95％O2+5％CO2，描记等张收缩曲线。用累积浓度-效应曲线法进行样品对豚鼠离体纵肠肌收缩的量-效关系的研究，所得的量效曲线按D/R式(改良Lineweaver-Burk式)，使之求得提供样品pD2和最大效应(E最大)。
以上样品引起纵肠肌收缩均可被非特异性M受体阻断药阿托品所竞争性拮抗，提示实施例中样品属M受体激动剂。
试验2转人M受体亚型CHO细胞的放射配基试验用转人M受体亚型m1,m2的CHO细胞系培养于EME培养基(含10％小牛血清、4微摩尔/升谷氨酸、0.1微摩尔/升脯氨酸以及青霉素、链霉素各1000单位)。待培养瓶细胞长满后，弃培养基，用PBS(pH7.4)缓冲液洗两次，加冰冷的磷酸缓冲液刮下细胞，用Teflon玻璃匀浆器匀浆，20,000g离心20分钟，沉淀再次匀浆成细胞膜悬浮液。饱和曲线每一反应管的蛋白量分别为0.06mg(m1)、0.10mg(m2),3H-QNB浓度从0.05-0.5nmol/l(ml)或0.8nmol/L(m2)，非特异结合管加0.1微摩尔/升阿托品。竞争曲线用选择性M1拮抗剂为PZP和选择性M2拮抗剂methotramine，浓度范围均为10-7摩尔/升至10-4摩尔/升。
数据处理分别用单位点质量作用定律和单位点竞争结合模型。
结果实施例3IC50:m1=170+14nM,m2=580±50nM提示实施例3样品对M1受体激动作用具有相对选择性。
试验3小鼠毒性试验(LD50测定)取体重20±2克的健康昆明种小鼠50只，随机分成5组，每组10只(雌雄各半)，于受试前一日晚禁食，按预试剂量间隔分别腹腔注射不等浓度的实施例3样品(0.5ml/20克)，即观察动物反应和死亡情况，延续7天。按Blisss法计算半数致死量(LD50)。中毒反应为湿粪、小便失禁、流涎、呼吸急促以及兴奋、抽搐等副交感亢进表现。实施例3样品LD50为622(508-762)mg/kg。
以上结果证明所测样品化合物属高效M受体激动剂。
权利要求
1．一种莨菪烷类化合物，它具有下式结构 其中R1和R2是相同的或不同的，当R1和R2相同时，它们为有4-15个碳原子的脂肪烷基；当R1和R2不相同时，R1为甲基；R2为有4-15个碳原子的脂肪烷基。
2．根据权利要求1所述的化合物，其中R1和R2相同，为有4-15个碳原子的脂肪烷基。
3．根据权利要求1所述的化合物，其中当R1和R2不相同时，它具有下式结构 其中R2为有4-15个碳原子的脂肪烷基。
4．根据权利要求3所述的化合物，其中R2=CH3(CH2)n,n=4-10的整数。
5．根据权利要求1所述的化合物，其中所述的化合物是选自下列的化合物3α,6β-二正己酰氧基莨菪烷，3α-正庚酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷，或3α,6β-二正壬酰氧基莨菪烷。
6．如权利要求2所述的化合物的制备方法，该方法包括ⅰ)使3α-羟基-6β-乙酰氧基莨菪烷与盐酸/乙醇溶液反应，得到3α,6β-二羟基莨菪烷盐酸盐；ⅱ)使ⅰ)步骤得到的产物与酰氯RCOCl反应，其中R=R1=R2，得到3α,6β-二烷酰氧基莨菪烷。
7．如权利要求3所述化合物的制备方法，该方法包括使3α-羟基-6β-乙酰氧基莨菪烷与酰氯RCOCl反应，其中R=R2，得到3α-烷酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷。
全文摘要
本发明揭示了一种莨菪烷类化合物,其中R
文档编号C07D451/00GK1323798SQ0011568
公开日2001年11月28日 申请日期2000年5月15日 优先权日2000年5月15日
发明者刘慧中, 陆阳, 陈红专, 崔永耀 申请人:上海第二医科大学