专利名称：2－芳基－3－取代吲哚乙酰胺类衍生物,及其医药用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的式I2-芳基3-取代吲哚乙酰胺类衍生物。本发明还涉及式I化合物作为例如抗焦虑药的医药用途。
Erminio等人在1993年公开的WO 93/00334A(R1)中公开了一些具有抗焦虑作用的吲哚酰胺类化合物，在2000年8月9日公开的WO 00/51984中公开了类似的取代吲哚酰哌嗪类化合物且它们具有多种药效作用。
人们认识到取代吲哚酰胺类化合物与MDR受体结合，从而有缓解焦虑的作用。但其作用机理不同于已有的抗焦虑剂如安定、4-氯地西泮、阿吡坦等药物，安定等直接作用在GABA-A受体的相应位点，这些已知抗焦虑剂除了有缓解焦虑的作用，还有其它的作用如抗惊厥、镇静、肌松等作用。因此开发新具有缓解焦虑作用的吲哚酰胺类化合物仍是必要的。
本发明的目的是寻找新的具有抗焦虑作用的取代吲哚酰胺类化合物。
本发明人现已发现式I取代吲哚酰胺衍生物在体外受体结合试验中与MDR受体有非常高的亲和力，且在小鼠高架十字迷合试验中表现出明显的抗焦虑作用，但没有已知抗焦虑药如苯二氮类药物的抗惊厥、镇静、肌松等作用。
另外，本发明化合物还对皮质酮诱导的PC12细胞损伤具有明显的保护作用。用RT-PCR方法测定表明本发明化合物制动应激大鼠的皮层中促皮质激素释放因子的mRNA(CRFmRNA)的表达明显增加，本发明化合物可抑制CRFmRNA的表达，这表明本发明化合物可作用于HPA轴，抑制皮质酮的过量释放，维持机体内环境的稳态平衡，从而显示出其抗应激的效果。
本发明第一方面涉及式(I)化合物或其光学异构体或其可药用盐 或所述化合物的光学异构体或它们的可药用的盐，其中m为0，1，2，3；R1、R2可独立地选自氢、C1-C12烷基、C2-C12不饱和烃基、芳基C1-C6烷基、C1-C6烷氧基C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氧基C1-C3烷基、C1-C6烷氨基C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氨基C1-C3烷基；其中烷基或不饱和烃基可以是直链或支链；n为0、1、2、3或4；R’可独立地选自氢、C1-C6烷基、C2-C6不饱和烃基、C1-C6烷氧基、C2-C6不饱和烃氧基、C1-C6烷氨基C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氨C1-C3烷基、C1-C6烷氧基C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氧基C1-C3烷基、C1-C6羧酸酯基、羟基、胺基、C1-C6烷硫基、二氟甲基、三氟甲基、卤素、硝基、氰基、或N3；其中烷基或不饱和烃基可以是直链或支链；B环可以是6-14个碳原子的芳环或含有自1-3个杂原子如氮、氧或硫的5员或6员环；芳香环还可被多个取代基取代，其中x为0、1、2、3、4或5，R”可独立地选自氢、C1-C6烷基、C2-C6不饱和烃基、C1-C6烷氧基、C2-C6不饱和烃氧基、C1-C6羧酸酯基、C1-C6烷氨基C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氨C1-C3烷基、C1-C6烷氧基C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氧C1-C3烷基、羟基、胺基、烷胺基、C1-C6烷硫基、二氟甲基、三氟甲基、卤素、硝基、氰基；其中烷基或不饱和烃基可以是直链或支链；条件是当A环上n＝2、3或4时，即有2个以上是不为氢的取代基时，B环上x＝0、1、2、3、4或5；
当B环上x＝2、3、4或5时，即有2个以上是不为氢的取代基时，n＝0、1、2、3或4。
本发明再一方面涉及药物组合物，其含有至少一种式I化合物或其光学异构体或其可药用盐，及药用载体或赋形剂。
本发明再一方面涉及式I化合物或其光学异构体或其可药用盐在制备用于预防或治疗焦虑或抗应激药物中用途。
本发明再一方面涉及预防或治疗焦虑症状的方法，其包括将预防或治疗有效量的式I化合物或其光学异构体或其可药用盐给予需要的患者。
本发明再一方面涉及制备式I化合物或其光学异构体或其可药用盐的方法，其包括(a)将式1化合物，其中R，R″，X，B如上定义 与EtOCOCl及Et3N反应，然后与NR1R2反应，生成式2化合物，其中R1，R2，R″，X，B，R如上定义；和 (b)将式2化合物与式3化合物反应， 其中R1，n如上定义，生成式I化合物，如需要，将式I化合物转化为另一种式I化合物或将式I化合物通过色谱、分级结晶、与旋光酸成盐的方法拆分成其光学异构体或用药用酸将式I化合物转化为其药用盐。
根据本发明，优选式I化合物及其光学异构体或其可药用盐，其中n＝0，即A环上无取代基；这时B环上x＝2，3，4或5，R”、m、R1和R2为上述式I所定义。
根据本发明，优选式I化合物及其光学异构体或其可药用盐，其中n＝0，即A环上无取代基；当B环为苯环，x＝2时，R”两个取代基可以处在苯环的2’，3’-、2’，4’-、2’，5’-、2’，6’-、3’，4’-或3’，5’-位；可以分别是C1-C6烷基、C2-C6不饱和烃基、C1-C6烷氧基、C2-C6不饱和烃氧基、C1-C6羧酸酯基、C1-C6烷氨C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氨C1-C3烷基、C1-C6烷氧C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氧C1-C3烷基、羟基、胺基、烷胺基、C1-C6烷硫基、二氟甲基、三氟甲基、卤素、硝基、氰基；其中烷基或不饱和烃基可以是直链或支链；m、R1和R2为上述式I所定义。
根据本发明，优选式I化合物或其可药用盐，其中n＝0，A环上无取代基；其中B环为苯环，x＝2时，两个R”可以处在苯环的2’，3’-、2’，4’-、2’，5’-、2’，6’-、3’，4’-或3’，5’-位；可以分别是C1-C6烷基、C2-C6不饱和烃基、C1-C6烷氧基、C2-C6不饱和烃氧基、C1-C6羧酸酯基、C1-C6烷氨C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氨C1-C3烷基、C1-C6烷氧C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氧C1-C3烷基、羟基、胺基、烷胺基、C1-C6烷硫基、二氟甲基、三氟甲基、卤素、硝基、氰基；其中烷基或不饱和烃基可以是直链或支链；其中m＝1，R1、R2可独立地选自氢、C1-C12的烷基、C2-C12不饱和烃基、芳基C1-C6烷基、C1-C6烷氧C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氧C1-C3烷基、C1-C6烷氨C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氨C1-C3烷基、4-6员饱和环的C1-C6烷基、4-6员不饱和环取代的C1-C6烷基；其中烷基或不饱和烃基可以是直链或支链。
根据本发明，优选式I化合物及其光学异构体或其可药用盐，其中n＝0，A环上无取代基；当B环为苯环，x＝2时，在苯环上R”是2’，4’-二氟、3’，4’-二氯、2’-Cl，4’-CH3、2’-CH3，4’-Cl、2’-F，4’-CH3、2’-CH3，4’-F；
其中m＝1，R1、R2可独立地选自氢、C1-C12的烷基、C2-C12不饱和烃基、芳基C1-C6烷基、C1-C6烷氧C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氧C1-C3烷基、C1-C6烷氨C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氨C1-C3烷基、4-6员饱和环的C1-C6烷基、4-6员不饱和环取代的C1-C6烷基；其中烷基或不饱和烃基可以是直链或支链。
根据本发明，更优选式I化合物及其光学异构体或其可药用盐，其中n＝0，A环上无取代基；当B环为苯环，x＝2时，在苯环上R”是2’，4’-二氟、3’，4’-二氯、2’-Cl，4’-CH3、2’-CH3，4’-Cl、2’-F，4’-CH3、2’-CH3，4’-F；其中m＝1，R1和R2是nC3H7-、nC6H13-、iC3H7-；根据本发明，更特别优选式I化合物，A环上无取代基；B环，R”是2’，4’-二氟；m＝1，R1和R2均为nC3H7-。
根据本发明，优选式I化合物及其光学异构体或其可药用盐，其中A环上m＝1，R’是1个不为氢的取代基，这取代基可以连接于吲哚环的4，5，6或7-位，可以是C1-C6烷基、C2-C6不饱和烃基、C1-C6烷氧基、C2-C6不饱和烃氧基、、C1-C6烷氨C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氨C1-C3烷基、C1-C6烷氧C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氧C1-C3烷基、C1-C6羧酸酯基、羟基、胺基、C1-C6烷硫基、二氟甲基、三氟甲基、卤素、硝基、氰基、或N3；其中烷基或不饱和烃基可以是直链或支链；这时B环上x＝2，3，4或5，R”是2个以上不为氢的取代基；R”、m、R1和R2为上述式I所定义。
根据本发明，优选式I化合物及其光学异构体或其可药用盐，其中A环上m＝1，R’是1个不为氢的取代基，这取代基可以连接于吲哚环的4，5，6或7-位，可以是C1-C6烷基、C2-C6不饱和烃基、C1-C6烷氧基、C2-C6不饱和烃氧基、、C1-C6烷氨C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氨C1-C3烷基、C1-C6烷氧C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氧C1-C3烷基、C1-C6羧酸酯基、羟基、胺基、C1-C6烷硫基、二氟甲基、三氟甲基、卤素、硝基、氰基、或N3；其中烷基或不饱和烃基可以是直链或支链；可以连接于吲哚环的4，5，6或7-位；其中B为苯环，x＝2，2个R”可以处在苯环的2’，3’-、2’，4’-、2’，5’-、2’，6’-、3’，4’-或3’，5’-位；可以分别选自C1-C6烷基、C2-C6不饱和烃基、C1-C6烷氧基、C2-C6不饱和烃氧基、C1-C6羧酸酯基、C1-C6烷氨C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氨C1-C3烷基、C1-C6烷氧C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氧C1-C3烷基、羟基、胺基、烷胺基、C1-C6烷硫基、二氟甲基、三氟甲基、卤素、硝基、氰基；其中烷基或不饱和烃基可以是直链或支链；m、R1和R2为上述式I所定义。
根据本发明，更为优选式I化合物及其光学异构体的化合物或其可药用盐，其中A环上n＝1，其中R’是5-F、5-Cl、5-Br、7-F、7-Cl、7-Br、5-CH3、5-C2H5、5-OCH3、5-NO2；其中B环为苯环，x＝2，2个R”可以处在苯环的2’，3’-、2’，4’-、2’，5’-、2’，6’-、3’，4’-或3’，5’-位；可以分别选自C1-C6烷基、C2-C6不饱和烃基、C1-C6烷氧基、C2-C6不饱和烃氧基、C1-C6羧酸酯基、C1-C6烷氨C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氨C1-C3烷基、C1-C6烷氧C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氧C1-C3烷基、羟基、胺基、烷胺基、C1-C6烷硫基、二氟甲基、三氟甲基、卤素、硝基、氰基；其中烷基或不饱和烃基可以是直链或支链；其中m＝1，R1、R2可独立地选自氢、C1-C12的烷基、C2-C12不饱和烃基、芳基C1-C6烷基、C1-C6烷氧C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氧C1-C3烷基、C1-C6烷氨C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氨C1-C3烷基、4-6员饱和环的C1-C6烷基、4-6员不饱和环取代的C1-C6烷基；其中烷基或不饱和烃基可以是直链或支链。
根据本发明，更为优选式I化合物及其光学异构体的化合物或其可药用盐，其中A环上n＝1，其中R’是5-F、5-Cl、5-Br、7-F、7-Cl、7-Br、5-CH3、5-C2H5、5-OCH3、5-NO2；其中B环为苯环，x＝2，R”是2’，4’-二氟、3’，4’-二氯、2’-Cl，4’-CH3、2’-CH3，4’-Cl、2’-F，4’-CH3、2’-CH3，4’-F；其中m＝1，R1、R2可独立地选自氢、C1-C12的烷基、C2-C12不饱和烃基、芳基C1-C6烷基、C1-C6烷氧C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氧C1-C3烷基、C1-C6烷氨C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氨C1-C3烷基、4-6员饱和环的C1-C6烷基、4-6员不饱和环取代的C1-C6烷基；其中烷基或不饱和烃基可以是直链或支链。
根据本发明，更为优选式I化合物及其光学异构体的化合物或其可药用盐，其中A环上n＝1，R’是5-F、5-Cl、5-Br、7-F、7-Cl、7-Br、5-CH3、5-C2H5、5-OCH3、5-NO2；其中B环为苯环，x＝2，R”分别是2’，4’-二氟、3’，4’-二氯、2’-Cl，4’-CH3、2’-CH3，4’-Cl、2’-F，4’-CH3、2’-CH3，4’-F；其中m＝1，R1和R2均是nC3H7-、nC6H13-、iC3H7-。
根据本发明，特别更为优选式I化合物，A环上R’是5-Br，B环为苯环，R”是3’，4’-二氯，m＝1，R1和R2均为nC3H7-。
根据本发明，优选式I化合物及其光学异构体的化合物或其可药用盐中，其中A环上n＝2，3或4，R’是2个3个或4个不为氢的取代基，这几个不为氢的取代基可以独立地选自C1-C6烷基、C2-C6不饱和烃基、C1-C6烷氧基、C2-C6不饱和烃氧基、C1-C6烷氨C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氨C1-C3烷基、C1-C6烷氧C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氧C1-C3烷基、C1-C6羧酸酯基、羟基、胺基、C1-C6烷硫基、二氟甲基、三氟甲基、卤素、硝基、氰基、或N3，其中烷基或不饱和烃基可以是直链或支链；可以连接于吲哚环的4，5，6或7-位；其中x可以是0，1，2，3，4或5；B环、m、R”、R1和R2为上述式I所定义根据本发明，优选式I化合物及其光学异构体的化合物或其可药用盐中，其中A环上n＝2，R’是2个不为氢的取代基，这2个不为氢的取代基可以独立地选自C1-C6烷基、C2-C6不饱和烃基、C1-C6烷氧基、C2-C6不饱和烃氧基、C1-C6烷氨C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氨C1-C3烷基、C1-C6烷氧C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氧C1-C3烷基、C1-C6羧酸酯基、羟基、胺基、C1-C6烷硫基、二氟甲基、三氟甲基、卤素、硝基、氰基、或N3，其中烷基或不饱和烃基可以是直链或支链；可以连接于吲哚环的4，5，6或7-位；其中x可以是0，1，2，3，4或5；B环、m、R”、R1和R2为上述式I所定义根据本发明，优选式I化合物及其光学异构体的化合物或其可药用盐中，其中A环上n＝2，R’是2个不为氢的取代基，这2个不为氢的取代基可以连接于吲哚环的4，5-、4，6-、4，7-、5，6-、5，7-，6，7-位；这2个不为氢的取代基可以独立地选自C1-C6烷基、C2-C6不饱和烃基、C1-C6烷氧基、C2-C6不饱和烃氧基、C1-C6烷氨C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氨C1-C3烷基、C1-C6烷氧C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氧C1-C3烷基、C1-C6羧酸酯基、羟基、胺基、C1-C6烷硫基、二氟甲基、三氟甲基、卤素、硝基、氰基、或N3，其中烷基或不饱和烃基可以是直链或支链；可以连接于吲哚环的4，5，6或7-位；其中B环是苯环，x可以是0，1，2，3，4或5；m、R”、R1和R2为上述式I所定义。
根据本发明，优选式I化合物及其光学异构体的化合物或其可药用盐中，其中A环上n＝2，R’可以是4，7-二氟、5，7-二氟或4，7-二氯；R”是2’，4’-二氟、3’，4’-二氯、2’-Cl，4’-CH3、2’-CH3，4’-Cl、2’-F，4’-CH3、2’-CH3，4’-F；其中B环是苯环，x可以是0，1，2，3，4或5；m、R”、R1和R2为上述式I所定义。
根据本发明，优选式I化合物及其光学异构体的化合物或其可药用盐中，其中A环上n＝2，R’可以是4，7-二氟、5，7-二氟或4，7-二氯；R”是2’，4’-二氟、3’，4’-二氯、2’-Cl，4’-CH3、2’-CH3，4’-Cl、2’-F，4’-CH3、2’-CH3，4’-F；其中B环为苯环，x为2，两个取代基可处在苯环的2’，3’-、2’，4’-、2’，5’-、2’，6’-、3’，4’-或3’，5’-位；可以独立地选自C1-C6烷基、C2-C6不饱和烃基、C1-C6烷氧基、C2-C6不饱和烃氧基、C1-C6羧酸酯基、C1-C6烷氨C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氨C1-C3烷基、C1-C6烷氧C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氧C1-C3烷基、羟基、胺基、烷胺基、C1-C6烷硫基、二氟甲基、三氟甲基、卤素、硝基、氰基；其中烷基或不饱和烃基可以是直链或支链；m、R1和R2为上述式I所定义。
根据本发明，优选式I化合物及其光学异构体的化合物或其可药用盐中，其中A环上n＝2，R’可以是4，7-二氟、5，7-二氟或4，7-二氯；R”是2’，4’-二氟、3’，4’-二氯、2’-Cl，4’-CH3、2’-CH3，4’-Cl、2’-F，4’-CH3、2’-CH3，4’-F；其中B环为苯环，x为2，其中R”是2’，4’-二氟、3’，4’-二氯、2’-Cl，4’-CH3、2’-CH3，4’-Cl、2’-F，4’-CH3、2’-CH3，4’-F；其中m＝1，R1、R2可独立地选自氢、C1-C12的烷基、C2-C12不饱和烃基、芳基C1-C6烷基、C1-C6烷氧C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氧C1-C3烷基、C1-C6烷氨C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氨C1-C3烷基、4-6员饱和环的C1-C6烷基、4-6员不饱和环取代的C1-C6烷基，R1、R2可与氮原子组成4-6员饱和环，或R1、R2可与氮原子组成4-6员不饱和环；其中烷基或不饱和烃基可以是直链或支链；根据本发明，优选式I化合物及其光学异构体的化合物或其可药用盐中，其中A环上n＝2，R’可以是4，7-二氟、5，7-二氟或4，7-二氯；B环为苯环，x为2，其中R”是2’，4’-二氟、3’，4’-二氯、2’-Cl，4’-CH3、2’-CH3，4’-Cl、2’-F，4’-CH3、2’-CH3，4’-F；
m＝1，R1和R2是nC3H7-、nC6H13-、iC3H7-。
根据本发明，特别优选式I化合物，R’是5，7-二氟，R”是2’，4’-二氟，R1和R2分别是nC6H13-。
根据本发明，本发明的式I化合物或其光学异构体或其可药用盐可通过下面反应路线制备。
反应路线 用于合成本发明化合物式I的起始原料I系由相应的未取代或取代芳环(例如苯或萘环)和琥珀酸酐经傅-克反应制备得到{参考文献[1]《Org.Synthesis》coll.Vol.II81～83；[2]李述文，范如霖编译，上海科技出版社出版《实用有机化学手册》254～257}，或通过相应取代芳醛在氰离子催化下经亲核性加成到丙烯氰的双键上，然后酸性水解制备得到(Steter H，Kuhlmann H.The catalyzed nueleophilic additionof aldehydes to electrophilic double bonds.Org.Reactions1991，40，407-496)。3-取代芳甲酰丙酸(1)在-40℃时和氯甲酸乙酯在二乙胺存在下反应生成缩酯，再在-20℃时和相应的胺反应生成酰胺(2)。然后经Fischer吲哚合成法将2和相应的取代芳肼在氯化锌或多聚磷酸催化下制得目标化合物，即式I化合物{参考文献[1]李述文，范如霖编译，上海科技出版社出版《实用有机化学手册》460～461；[2]《OrganicSynthesis》coll.Vol.III725～726；[3]Ishii H，Murakami Y et al.Fischer Indolization and Its Related Compounds VIII.Formation of4-Aminoindole Derivatives on the Fischer Indolization of 2-Methoxyphenylhydrazone Derivatives.Chem Pharm Bμll，1974，22(9)1981～1989}。所得式I化合物通过用乙酰乙酯和正己烷(1∶1)重结晶或用硅胶色谱(洗脱液∶乙酰乙酯∶石油醚＝5∶1)进行纯化或分离。取代芳环和取代苯肼为市售或参考常用的有机合成手册合成得到。
下面提到的所有百分比均质量百分比。
分析仪器元素分析CARLD ERBA-1106型IR Nicoletmaga-IRTMsepectromet 550型NMR JNM-GX400、BRUKER ARX400和INOVA-600型仪器；MS Zabspec型仪器；熔点测定采用天津分析仪器厂的RY-1型熔点测定仪，温度计未经校正。
用于合成本发明化合物的起始原料和试剂很容易得到，即从市场购得、通过文献方法制备或按下述实施例中列举的方法制备。
根据本发明，本发明式I化合物可单独或以组合物形式给予，本发明含式I化合物的药物组合物可以口服或非肠道或局部途径给药。当药物组合物以口服途径给药时，其可是片剂，胶囊，缓释片剂或胶囊，颗粒剂，粉剂，混悬液，溶液等。当药物组合物以非肠道途径给药时，其可是注射剂，冻干粉针剂等。当本发明组合物局部给药时，可例如为栓剂。
下面的实施例是对本发明的进一步描述，但其不意味着对本发明的任何限制。
生物活性试验本发明化合物对[3H]pK11195结合的抑制作用500μl反应体系2nM3HPK11195，本发明化合物I1，I20，I21和I22，它们的制备见后面实施例，[3H]PK11195 10μm，受体膜蛋白(1.25mg/ml)，30℃避光反应30分钟。滤膜于80℃干烤2小时，液闪计数抑制率％＝[1-CPM(药物)-CPM(非特异结合)1×100％CPM(总结合)-CPM(非特异结合)实验结果列于表1。括号中数字为受试化合物的浓度，单位为M。
表1 化合物对[3H]PK11195结合的抑制作用编号 NR1R2(R’)n (R”)x DBI受体抑制率％(C)R1实施例27化合物 N(n-C6H13)2H 4’-F 89(10-5)I1N(n-C3H7)2H 2’，4’-二氟 100(10-5)I20N(n-C3H7)25-Br3’，4’-二氯 97(10-7)I21N(n-C3H7)25-Br2’，4’-二氟 94(10-7)I22N(n-C3H7)25-NO22’，4’-二氟 100(10-5)表1中数据表明本发明化合物对DBI受体有很好的抑制率。小鼠高架十字迷宫实验用0.5％CMC-Na溶解药物制成混悬液，腹腔注射受试药物(本发明化合物)15分钟后，将其放于迷宫中央区，摄像机距迷宫中央区1米，与电脑显示器相连，电脑自动记录5分钟内动物进入开臂与闭臂的次数；在开臂内的运动时间。以此作为评价焦虑的指标。实验结果见表2、3。
表2 I1小鼠高架十字迷宫实验结果剂量mg/kg 动物数n 入开臂百分率％入开臂时间百分率％0.5 9 26.07±14.87 6.55±7.731 1041.38±22.32*29.27±29.465 9 20.39±22.87 24.32±41.6010 8 36.07±16.48 68.75±47.1625 9 29.25±14.1 15.11±22.50对照(0.5％羧甲基纤维素钠) 10 18.24±17.27 20.81±41.75*p＜0.05
表3 I20小鼠高架十字迷宫实验结果剂量mg/kg 动物数n 入开臂百分率％ 入开臂时间百分率％0.518 26.85±26.27 13.99±21.261 10 42.86±18.90 47.25±41.58*5 10 40.5±31.5443.85±39.6710 10 35.28±22.52 23.44±24.9625 10 20.44±22.50 9.14±14.09对照(0.5％羧甲基纤维素钠)10 25.64±10.55 9.33±8.45*p＜0.05以上结果表明，I1和I201mg/kg腹腔注射后均显著增加小鼠进入开臂的次数百分率或入开臂后停留时间的百分率，显示了抗焦虑作用。防己毒素(PTX)致惊厥试验本发明化合物对印防己毒素(PTX)诱发惊厥的影响小鼠18～22克，随即分组，腹腔注射I1、I2、I20，30分钟后，给小鼠腹腔注射印防己毒素(PTX)3.5mg/kg，记录20分钟内动物发生惊厥的潜伏期和持续时间。观察化合物拮抗印防己毒素(PTX)诱发的惊厥作用。实验结果见表4。
表4 I1、I20和I2小鼠对印防己毒素(PTX)诱发惊厥的影响化合物 剂量 动物数 潜伏期 持续时间(mg/Kg) n (秒)(秒)对照(0.5％羧甲基纤维素钠) 8 710.1±217.5 22.8±8.8I2020 8 760.5±291.9 11.67±9.58I2010 8 900.2±299.6 17.5±10.0I201 8 791.5±190.1 20.9±14.4I120 8 560.6±103.3 28.0±8.2I110 8 781.1±351.4 19.5±6.7I210 7 546.7±73.3 20.6±11.5
以上结果表明，I1和I20腹腔注射1-20mg/Kg，以及I2腹腔注射10mg/Kg均无拮抗印防己毒素的致惊厥作用。小鼠自主活动性试验活动室为35×30×22cm有机玻璃敞箱，箱底为不反光黑色橡胶铺垫。采用垂直日光灯为光源，摄像监视器置于四个箱体中央上方1m处，摄像现场通过显示器显示，用VIDEOMEX-V图像解析仪记录并分析数据。药物腹腔注射15分钟后，放入活动箱，电脑记录在10分钟内动物的运动距离与运动时间和休息时间。实验结果见表5。
表5 I1，I20对小鼠自主活动性的影响化合物 动物 运动距离运动时间(秒)刻板运动时间休息时间(剂量mg/Kg) 数n(cm) (秒) (秒)(0.5％羧甲基纤维素钠) 12 919.5±541.7 178.1±79.6217.5±56.9 182.8±66.7I2020 10 647.9±342.6 172.5±77.7129.1±118.0 256.6±64.8I2010 10 670.9±227.9 151.9±217.5 217.5±40.1 226.8±64.8I120 8 648.0±317.9 157.1±62.8215.1±66.9 189.6±73.4I110 8 844.5±581.9 190.9±73.1221.0±57.4 154.0±62.5*为抗焦虑有效剂量。
上述结果表明，I1和I2010-20mg/Kg腹腔注射后不影响小鼠自主活动，未显示中枢镇静作用。对皮质酮诱导PC12细胞损伤的保护作用大鼠肾上腺噬铬细胞瘤株PC12细胞用含5％马血清和5％胎牛血清的DMEM(含谷氨酰胺100μg/ml和抗生素)培养液以2×105/ml的密度接种于96孔培养板，每孔为100μl，37℃，5％CO2条件下培养3～4天，参照文献[4]方法稍加改动，吸去细胞液，换上含相应浓度药物的无血清DMEM(高糖)，20分钟后加入2×10-4μM/L皮质酮，细胞继续培养48h后，每孔加入2.5mg/ml的MTT溶液20μl，培养2.5h后小心吸去培养液，每孔加入10％SDS溶液(提前用0.15mol/L NaOH调ph至4.8)100μl，待蓝色颗粒完全溶解后(12～16h)，用MCC/340型多孔扫描分光光度计测定标本在570nm处的光密度值，用于定量反映活细胞数。
采用SAS软件进行数据处理，实验数据以X±s表示，多组间比较采用方差分析与Dunnett’s t检验。实验结果见表6表6 I20对皮质酮诱导PC12细胞损伤的保护作用药物浓度 紫外吸收OD值(A570nm)正常对照 0.304±0.036*皮质酮(2×10-4M) 0.264±0.010I205μM+皮质酮 0.252±0.212I202μM+皮质酮 0.278±0.052I201μM+皮质酮 0.408±0.079**I200.2μM+皮质酮0.393±0.089**I200.1μM+皮质酮0.395±0.032**X±s(n＝7)*P＜0.05，**P＜0.01与皮质酮组比较。
上述结果显示，I20在0.1-5μM.L-1浓度下，可剂量依赖性地保护PC12细胞，使其不受皮质酮的损伤。对应激大鼠皮层CRFmRNA表达的抑制性影响大鼠制动应激每次3小时，连续3天，给药组第三天制动2.5小时后腹腔注射I20，随后制动0.5小时，立即断头分离脑皮层，用Gibicol公司Trizol试剂盒提取皮层总RNA。将总RNA反转录成cDNA后，行PCR扩增，同时设β-actin为内标。扩增产物上样于1.5％琼脂糖电泳，电泳图谱用凝胶成像系统扫描，CRFmRNA表达量用CRF mRNA与β-actin mRNA条带光密度的比值来表示。
CRF引物序列为5-CAG AAC AAC AGT GCG GGC TCA-35-GGA AAA AGT TAG CCG CAG CCT-3PCR扩增条件为94℃ 3min；94℃ 30s，50℃ 45s，72℃ 1min(34个循环)；72℃，10min结果见表7表7 I20对应激大鼠皮层CRFmRNA表达的影响处理 表达量(CRF/-βactin比率)正常大鼠 0.441±0.194应激大鼠 0.494±0.204应激大鼠+I20(10mg/Kg) 0.385±0.126**应激大鼠+I20(15mg/Kg) 0.302±0.111**X±s(n＝7)**P＜0.05，与应激组比较上述结果表明，应激大鼠皮层CRFmRNA表达增加，I2010和15mg/Kg可抑制应激大鼠皮层CRFmRNA的表达。
I1熔点142～143℃；元素分析(C22H24F2N2O)计算值(％)C71.35 H6.53N7.56，实验值(％)C71.18 H6.43 N7.47；IR(KBr)3220，2966，1626，1260cm-1；1HNMR(CDCl3，300MHz)8.28(s，1H)，7.67(d，1H)，7.61(q，1H)，7.36(d，1H)，7.28(t，1H)，7.15(t，1H)，6.97(m，2H)，3.84(s，2H)，3.26，3.13(tt，4H)，1.65(b，4H)，0.819、0.713(tt，6H)；MS(m/z)471(M++1)。
同样制备方法制得化合物I2、I5、I6、I7、I8、I9、I10。部分理化数据见表8。
表8 理化数据表 编号 NR1R2(R’)n (R”)xMp(℃) 分子式 M.W. MSI1N(n-C3H7)2H 2’，4’-二氟 142～143 C22H24F2N2O 370 371(M++1)I2N(n-C6H13)2H 2’，4’-二氟 132～134 C28H36F2N2O454 455(M++1)I5N(n-C6H13)2H 2’-Cl，4’-CH3112～114 C29H39ClN2O 466 467(M++1)I6N(n-C6H13)2H 2’-CH3，4’-Cl124～125 C29H39ClN2O 466 467(M++1)I7N(n-C3H7)2H 2’-Cl，4’-CH3171～172 C23H27ClN2O 382 383(M++1)I8N(n-C3H7)2H 2’-CH3，4’-Cl174 C23H27ClN2O 382 383(M++1)I9N[CH(CH3)2]2H 2’-Cl，4’-CH3237～238 C23H27ClN2O 382 383(M++1)I10N[CH(CH3)2]2H 2’-CH3，4’-Cl265～266 C23H27ClN2O 382 383(M++1)N，N-二-正己基-1H-2-(2’，4’-二氟)苯基-3-吲哚乙酰胺(I2)的制备按实施例1所述相同方法，待反应混合物冷后加入50ml水，滤集固体，以乙酸乙酯重结晶的得I2白色固体，熔点132～134℃；元素分析(C28H36F2N2O)计算值(％)C74.01 H7.93 N6.17，实验值(％)C74.11H7.95N6.22；IR(KBr)3250，2940，1620cm-1；1HNMR(CDCl3，400MHz)8.34(s，1H)，7.66(d，1H)，7.57(q，1H)，7.32(d，1H)，7.19(t，1H)，7.11(t，1H)，6.95(m，2H)，3.8(s，2H，)，3.27，3.13(tt，4H)，1.43-0.83(m，22H)；MS(m/z)455(M++1)。N，N-二-正己基-1H-2-(2’-氯，4’-甲基)苯基-3-吲哚乙酰胺(I5)的制备按实施例1所述相同方法，待反应混合物冷后用硅胶柱进行分离(层析液乙酸乙酯∶石油醚＝5∶1)，得I5白色固体，经乙酸乙酯重结晶，熔点112～114℃；元素分析(C29H39ClN2O)计算值(％)C74.57 H8.42N6.00，实验值(％)C74.86 H8.58 N5.89；IR(KBr)3210，2927，1619，1456cm-1；1HNMR(CDCl3，400MHz)7.95(s，1H)，7.76(d，1H)，7.35～7.12(m，6H)，3.65(s，2H)，3.23(s，2H)，3.01(s，2H)，2.26(s，3H)，1.39～0.84(m，24H)；MS(m/z)467(M++1)。N，N-二-正己基-1H-2-(2’-甲基，4’-氯)苯基-3-吲哚乙酰胺(I6)的制备按实施例1所述相同方法，待反应混合物冷后用硅胶柱进行分离(层析液乙酸乙酯∶石油醚＝5∶1)，得I6白色固体，经乙酸乙酯重结晶，熔点124～125℃；元素分析(C29H39ClN2O)计算值(％)C74.57 H8.42N6.00，实验值(％)C74.71 H8.67 N5.70；IR(KBr)3209，2927，1618，1456cm-1；1HNMR(CDCl3，400MHz)8.15(s，1H)，7.76(d，1H)，7.35～7.12(m，6H)，3.65(s，2H)，3.23(s，2H)，3.01(s，2H)，2.26(s，3H)，1.39～0.84(m，24H)；MS(m/z)467(M++1)。N，N-二-正丙基-1H-2-(2’-氯，4’-甲基)苯基-3-吲哚乙酰胺(I7)的制备按实施例1所述相同方法，待反应混合物冷后用硅胶柱进行分离(层析液乙酸乙酯∶石油醚＝5∶1)，得I7白色固体，经乙酸乙酯重结晶，熔点171～172℃；元素分析(C23H27ClN2O)计算值(％)C72.14 H7.11N7.32，实验值(％)C72.04 H7.08 N7.23；IR(KBr)3205，2960，1614，1456cm-1；1HNMR(CDCl3，400MHz，ppm)8.12(s，1H)，7.54(d，1H)，7.33～7.12(m，6H)，3.63(s，2H)，3.23(t，2H)，3.02(t，2H)，2.25(s，3H)，1.41(m，4H)，0.82(t，3H)，0.67(t，3H)；MS(m/z)383(M++1)。N，N-二-正丙基-1H-2-(2’-甲基，4’-氯)苯基-3-吲哚乙酰胺(I8)的制备按实施例1所述相同方法，待反应混合物冷后用硅胶柱进行分离(层析液乙酸乙酯∶石油醚＝5∶1)，得I8白色固体，经乙酸乙酯重结晶，熔点174℃；元素分析(C23H27ClN2O)计算值(％)C72.14 H7.11 N7.32，实验值(％)C72.10 H7.18 N7.35；IR(KBr)3236，2967，1616，1456cm-1；1HNMR(CDCl3，400MHz，ppm)8.23(s，1H)，7.79(d，1H)，7.42～7.11(m，6H)，3.76(s，2H)3.24(t，2H)，3.05(t，2H)，2.41(s，3H)，1.44(q，2H)，1.40(q，2H)，0.82(t，3H)，0.67(t，3H)；MS(m/z)383(M++1)。N，N-二-异丙基-1H-2-(2’-氯，4’-甲基)苯基-3-吲哚乙酰胺(I9)的制备按实施例1所述相同方法，待反应混合物冷后用硅胶柱进行分离(层析液乙酸乙酯∶石油醚＝5∶1)，得I9白色固体，熔点237～238℃；IR(KBr)3237，2929，1616，1448；1HNMR(CDCl3，400MHz，ppm)7.92(s，1H)，7.78(d，1H)，7.34～7.10(m，6H)，3.65(s，2H)3.77(m，1H)，3.25(m，1H)，2.25(s，3H)，1.33(d，3H)，0.83(s，3H)；MS(m/z)383(M++1)。N，N-二-正丙基-1H-2-(2’-甲基，4’-氯)苯基-3-吲哚乙酰胺(I10)的制备按实施例1所述相同方法，待反应混合物冷后用硅胶柱进行分离(层析液乙酸乙酯∶石油醚＝5∶1)，得I10白色固体，熔点265～266℃；IR(KBr)3224，2966，1615，1456cm-1；1HNMR(CDCl3，400MHz，ppm)8.21(s，1H)，7.77(d，1H)，7.38～7.10(m，6H)，3.96(s，2H)3.83(m，1H)，3.28(m，1H)，2.40(s，3H)，1.33(d，3H)，0.82(s，3H)；MS(m/z)383(M++1)。
I17熔点79～80℃；1HNMR(CDCl3，600MHz，ppm)8.366(s，1H)，7.585(s，1H)，7.480(s，2H)，7.392(d，1H)，7.262(d，1H)，7.235～7.077(m，3H)，3.839(s，2H)，3.344(t，2H)，3.224(t，2H)，1.599～0.852(m，22H)；MS(m/z)487(M++1)。 同法制得化合物I22-I25，I28-I33，I37-I39，I41-I42，I46-I47，I49-I56，I58-I61，I64-I66，I69-I78，I82-I84，I86-I89，I92，I94-I96和I98的结晶(相应苯肼为市售)。理化数据见表9。 表9 理化数据表编号 NR1R2(R’)n (R”)x Mp(℃)分子式 M.W. MSI17N(n-C6H13)2H 3’，4’-二氯 79～80 C28H36Cl2N2O486 487(M++1)I22N(n-C6H13)25-F 2’，4’-二氟 175～176 C28H35F3N2O 472 473(M++1)I23N(n-C3H7)25-F 2’，4’-二氟 145～146 C22H23F3N2O 388 389(M++)I24N(n-C6H13)25-F 2’-Cl，4’-CH385～86 C29H38ClFN2O 484 485(M++1)I25N(n-C3H7)25-F 2’-Cl，4’-CH3158～159 C23H26ClFN2O 400 401(M++1)I28N(n-C6H13)25-F 3’，4’-二氯 75～76C28H35FCl2N2O 504 505(M++1)I29N(n-C3H7)25-F 3’，4’-二氯 174～175 C22H23FCl2N2O 420 421(M++1)I30N(n-C6H13)25-Cl 2’，4’-二氟 70～71C28H35ClF2N2O 488 489(M++1)I31N(n-C3H7)25-Cl 2’，4’-二氟 141～142 C22H23ClF2N2O 404 405(M++1)I32N(n-C6H13)25-Cl 3’，4’-二氯 71～72C28H35Cl3N2O 520 521(M++1)I33N(n-C3H7)25-Cl 3’，4’-二氯 178～179 C22H23Cl3N2O 436 437(M++1)I37N(n-C6H13)25-Cl 2’-F，4’-CH381～82C29H38ClFN2O484 485(M++1)I38N(n-C3H7)25-Cl 2’-F，4’-CH3122～123 C23H26FCLN2O400 401(M++1)I39N(n-C3H7)25-Cl 2’-Cl，4’-CH3165～166 C23H26Cl2N2O 416 417(M++1)I41N(n-C6H13)25-Br 2’，4’-二氟 74～75C28H35BrF2N2O 532 532.9*I42N(n-C6H13)25-Br 3’，4’-二氯 110～111 C28H35BrCl2N2O 566 567I46N(n-C3H7)25-Br 2’-CH3，4’-Cl 173～174 C23H26BrClN2O 460 463*I47N(n-C6H13)27-F 2’，4’-二氟 69～70C28H35F3N2O472 473(M++)I49N(n-C3H7)27-F 3’，4’-二氯 186～187 C22H23Cl2FN2O 420 421(M++1)I50N(n-C6H13)27-F 3’，4’-二氯 108～109 C28H35Cl2FN2O 504 505(M++1)I51N(n-C6H13)27-F 2’-Cl，4’-CH368C29H38ClFN2O484 485(M++1)I52N(n-C3H7)27-F 2’-Cl，4’-CH3121～122 C23H26ClFN2O400 401(M++1)I53N(n-C6H13)27-Cl 2’，4’-二氟 85～86C28H35ClF2N2O 488 489(M++1)I54N(n-C3H7)27-Cl 2’，4’-二氟 87～88C22H23ClF2N2O 404 405(M++1)I55N(n-C3H7)27-Cl 3’，4’-二氯 184～185 C22H23Cl3N2OI56N(n-C6H13)27-Cl 3’，4’-二氯 88～89C28H35Cl3N2O 520 521(M++1)I58N(n-C3H7)27-Cl 2’-Cl，4’-CH3143～144 C23H26Cl2N2O 416 416.9I59N(n-C6H13)27-Br 2’，4’-二氟 69～70C28H35BrF2N2O 532 533(M++1)I60N(n-C6H13)27-Br 3’，4’-二氯 97～98C28H35BrCl2N2O 566 567(M++1)I61N(n-C3H7)27-Br 3’，4’-二氯 170～171 C22H23BrCl2N2O 482 483(M++1)I64N(n-C3H7)27-Br 2’-Cl，4’-CH3152 C23H26BrClN2O 460 462.9*I65N(n-C6H13)25-CH33’，4’-二氯 74C29H38Cl2N2O 500 501(M++1)I66N(n-C3H7)25-CH33’，4’-二氯 175～176 C23H26Cl2N2O 416 417(M++1)I69N(n-C6H13)25-OCH33’，4’-二氯 98～99C29H38Cl2N2O2516 517(M++1)I70N(n-C3H7)25-NO22’，4’-二氟 146～147.5 C22H23F2N3O3415 416(M++1)I71N(n-C6H13)27-C2H53’，4’-二氯 70～71 C30H40Cl2N2O 514 515(M++1)I72N(n-C3H7)27-C2H53’，4’-二氯 119～120 C24H28Cl2N2O 430 431(M++1)I73N(n-C6H13)24，7-二氟 3’，4’-二氯 90～91 C28H34Cl2F2N2O522 523(M++1)I74N(n-C3H7)24，7-二氟 3’，4’-二氯 185～186 C22H22Cl2F2N2O438 439(M++1)I75N(n-C3H7)24，7-二氯 2’，4’-二氟 89～90 C22H22Cl2F2N2O438 439(M++1)I76N(n-C6H13)24，7-二氯 2’，4’-二氟 110～111 C28H34Cl2F2N2O522 523(M++1)I77N(n-C6H13)24，7-二氯 3’，4’-二氯 120～121 C28H34Cl4N2O 554 556(M++1)I78N(n-C3H7)24，7-二氯 3’，4’-二氯 222～223 C22H22Cl4N2O 470 473*I82N(n-C6H13)24，7-二氯 2’-Cl，4’-CH3125～126 C29H37Cl3N2O 534 535(M++1)I83N(n-C3H7)24，7-二氯 2’-Cl，4’-CH3181～182 C23H25Cl3N2O 450 450.9I84N(n-C6H13)25，7-二氟 2’，4’-二氟 67～68 C28H34F4N2O490 491(M++1)I86N(n-C3H7)25，7-二氟 2’-Cl，4’-CH3107～108 C23H25ClF2N2O 418 419(M++1)I87N(n-C3H7)2H 2’-CH3，4’-F 153～155 C23H27FN2O 366 367(M++1)I88N(n-C3H7)25-F 2’-F，4’-CH3148～149 C23H26F2N2O384 385(M++1)I89N(n-C3H7)27-F 2’-CH3，4’-F 147～148 C23H26F2N2O384 385(M++1)I92N(n-C3H7)27-Cl 2’-CH3，4’-F 141～143 C23H26ClFN2O400 401(M++1)I94N(n-C3H7)25-Br 2’-CH3，4’-F 132～133 C23H26BrFN2O444 445(M++1)I95N(n-C3H7)27-Br 2’-CH3，4’-F 130～131 C23H26BrFN2O444 445(M++1)I96N(n-C3H7)25，7-二氟 2’-CH3，4’-F 188～190 C23H25F3N2O402 403(M++1)I98N(n-C3H7)24，7-二氯 2’-CH3，4’-F 190～191 C23H25Cl2FN2O 434 435(M++1)*MS值系同位素值和M++1峰N，N-二-正己基-1H-2-(2’，4’-二氟)苯基-5-氟-3-吲哚乙酰胺(I22)的制备按实施例2所述方法制备。待反应混合物冷后用硅胶柱进行分离(层析液乙酸乙酯∶石油醚＝5∶1)，得I22白色固体，熔点175～176℃；1HNMR(CDCl3，600MHz，ppm)9.213(s，1H)，7.346(d，1H)，7.315(d，1H)，7.169(d，1H)，7.020(t，1H)，6.799(m，1H)，6.664(m，1H)，3.721(s，2H)，3.457(t，2H)，3.355(t，2H)，1.709～0.920(m，10H)；MS(m/z)473(M++1)。N，N-二-正己基-1H-2-(3’，4’-二氯)苯基-5-氟-3-吲哚乙酰胺(I28)的制备按实施例2所述方法制备。待反应混合物冷后用硅胶柱进行分离(层析液乙酸乙酯∶石油醚＝5∶1)，得I28白色固体，熔点75～76℃；1HNMR(CDCl3，600MHz，ppm)9.063(s，1H)，7.381(m，3H)，7.222(d，1H)，6.928(t，1H)，6.872(d，1H)，3.728(s，2H)，3.428(t，2H)，3.330(t，2H)，1.622～0.868(m，22H)；MS(m/z)505(M++1)。N，N-二-正丙基-1H-2-(3’，4’-二氯)苯基-5-氟-3-吲哚乙酰胺(I29)的制备按实施例2所述方法制备。待反应混合物冷后用硅胶柱进行分离(层析液乙酸乙酯∶石油醚＝5∶1)，得I29白色固体，熔点174～175℃；元素分析(C22H23Cl2FN2O)计算值(％)C62.71 H5.50 N6.65，实验值(％)C62.52 H5.26 N6.40；1HNMR(CDCl3，600MHz)9.213(s，1H)，7.341(d，1H)，7.308(d，1H)，7.160(q，1H)，6.875(q，1H)，6.648(t，1H)，3.721(s，2H，)，3.745，3.343(tt，4H)，1.685(m，4H)，0.984，0.933(tt，6H)；MS(m/z)421(M+1)。N，N-二-正己基-1H-2-(3’，4’-二氯)苯基-5-氯-3-吲哚乙酰胺(I32)的制备按实施例2所述方法制备。待反应混合物冷后用硅胶柱进行分离(层析液乙酸乙酯∶石油醚＝5∶1)，得I32白色固体，熔点71～72℃；1HNMR(CDCl3，600MHz，ppm)9.242(s，1H)，7.339(d，3H)，7.186(d，1H)，6.885(d，1H)，6.800(d，1H)，3.717(s，2H)，3.470(t，2H)，3.347(t，2H)，1.644～0.882(m，22H)；MS(m/z)521(M++1)。N，N-二-正丙基-1H-2-(3’，4’-二氯)苯基-7-氟-3-吲哚乙酰胺(I49)的制备按实施例2所述方法制备。待反应混合物冷后用硅胶柱进行分离(层析液乙酸乙酯∶石油醚＝5∶1)，得I49白色固体，熔点186～187℃；1HNMR(CDCl3，600MHz，ppm)8.897(s，1H)，7.545(d，m)，7.423(d，2H)，7.279(d，1H)，6.965(m，1H)，6.772(m，1H)，3.792(s，2H)，3.382(t，2H)，3.288(t，2H)，1.640～0.879(m，10H)；MS(m/z)421(M++1)。N，N-二-正己基-1H-2-(3’，4’-二氯)苯基-7-氟-3-吲哚乙酰胺(I50)的制备按实施例2所述方法制备。待反应混合物冷后用硅胶柱进行分离(层析液乙酸乙酯∶石油醚＝5∶1)，得I50白色固体，熔点108～109℃；1HNMR(CDCl3，600MHz，ppm)8.646(s，1H)，7.584(s，1H)，7.483(d，1H)，7.379(d，1H)，7.335(t，1H)，7.260(m，1H)，6.989(m，1H)，3.859(s，2H)，3.345(t，2H)，3.210(t，2H)，1.874～0.850(m，22H)；MS(m/z)505(M++1)。N，N-二-正己基-1H-2-(3’，4’-二氯)苯基-7-氯-3-吲哚乙酰胺(I56)的制备按实施例2所述方法制备。待反应混合物冷后用硅胶柱进行分离(层析液乙酸乙酯∶石油醚＝5∶1)，得I56白色固体，熔点88～89℃；1HNMR(CDCl3，600MHz，ppm)8.389(s，1H)，7.646(d，1H)，7.531(d，1H)，7.444(m，1H)，7.258(t，1H)，7.184(m，1H)，7.062(m，1H)，3.836(s，2H)，3.331(t，2H)，3.194(t，2H)，1.479～0.837(m，22H)；MS(m/z)521(M++1)。N，N-二-正己基-1H-2-(3’，4’-二氯)苯基-7-溴-3-吲哚乙酰胺(I60)的制备按实施例2所述方法制备。待反应混合物冷后用硅胶柱进行分离(层析液乙酸乙酯∶石油醚＝5∶1)，得I60白色固体，熔点97～98℃；1HNMR(CDCl3，600MHz，ppm)8.346(s，1H)，7.644(d，1H)，7.574(m，1H)，7.439(m，1H)，7.334(t，1H)，7.254(m，1H)， 6.996(m，1H)，3.818(s，2H)，3.329(t，2H)，3.192(t，2H)，1.480～0.836(m，22H)；MS(m/z)567(M++1)。N，N-二-正丙基-1H-2-(3’，4’-二氯)苯基-7-溴-3-吲哚乙酰胺(I61)的制备按实施例2所述方法制备。待反应混合物冷后用硅胶柱进行分离(层析液乙酸乙酯∶石油醚＝5∶1)，得I61白色固体，熔点170～171℃；1HNMR(CDCl3，600MHz，ppm)8.330(s，1H)，7.646(s，1H)，7.557(t，1H)，7.445(m，1H)，7.341(d，1H)，7.255(m，1H)， 6.994(s，1H)，3.869(s，2H)，3.312(d，2H)，3.193(s，2H)，1.875～0.796(m，22H)；MS(m/z)483(M++1)。N，N-二-正己基-1H-2-(3’，4’-二氯)苯基-5-甲基-3-吲哚乙酰胺(I65)的制备按实施例2所述方法制备。待反应混合物冷后用硅胶柱进行分离(层析液乙酸乙酯∶石油醚＝5∶1)，得I65白色固体，熔点74℃；1HNMR(CDCl3，600MHz，ppm)8.146(s，1H)，7.586(d，1H)，7.494(d，1H)，7.395(d，1H)，7.262(t，1H)，7.181(m，1H)，6.997(m，1H)，3.837(s，2H)，3.349(t，2H)，3.213(t，2H)，1.502～0.857(m，20H)；MS(m/z)501(M++1)。N，N-二-正丙基-1H-2-(3’，4’-二氯)苯基-5-甲基-3-吲哚乙酰胺(I66)的制备按实施例2所述方法制备。待反应混合物冷后用硅胶柱进行分离(层析液乙酸乙酯∶石油醚＝5∶1)，得I66白色固体，熔点175～176℃；1HNMR(CDCl3，600MHz，ppm)8.274(s，1H)，7.564(d，1H)，7.470(m，1H)，7.370(d，1H)，7.268(t，1H)，7.132(d，1H)，6.964(m，1H)，3.832(s，2H)，3.361(t，2H)，3.253(t，2H)，1.606～0.813(m，10H)；MS(m/z)417(M++1)。N，N-二-正己基-1H-2-(3’，4’-二氯)苯基-5-甲氧基-3-吲哚乙酰胺(I69)的制备按实施例2所述方法制备。待反应混合物冷后用硅胶柱进行分离(层析液乙酸乙酯∶石油醚＝5∶1)，得I69白色固体，熔点98～99℃；1HNMR(CDCl3，600MHz，ppm)8.243(s，1H)，7.559(s，1H)，7.479(d，1H)，7.362(m，1H)，7.141(t，1H)，7.054(m，1H)6.807(m，1H)，3.815(s，2H)，3.347(t，2H)，3.192(t，2H)，1.650～0.851(m，22H)；MS(m/z)517(M++1)。N，N-二-正丙基-1H-2-(2’，4’-二氟)苯基-5-硝基-3-吲哚乙酰胺(I70)的制备按实施例2所述方法制备。待反应混合物冷后，加入50ml水，滤集固体，以乙酸乙酯重结晶得I70橙色固体，熔点146～147.5℃；元素分析(C22H23F2N3O3)计算值(％)C63.61 H5.54 N10.12，实验值(％)C63.43H5.26 N10.02；IR(KBr)3250，2950，1630，1260cm-1；1HNMR(CDCl3，400MHz)9.34(s，1H)，8.42(d，1H)，7.7(q，1H)，7.24(m，1H)，7.07(d，1H)，6.85(m，2H)，3.77(s，2H，)，3.6(tt，4H)，1.627(m，4H)，0.92(t，6H)；MS(m/z)416(M++1)。N，N-二-正己基-1H-2-(3’，4’-二氯)苯基-7-乙基-3-吲哚乙酰胺(I71)的制备按实施例2所述方法制备。待反应混合物冷后用硅胶柱进行分离(层析液乙酸乙酯∶石油醚＝5∶1)，得I71白色固体，熔点70～71℃；1HNMR(CDCl3，600MHz，ppm)8.126(s，1H)，7.622(d，1H)，7.508(d，1H)，7.494(d，1H)，7.259(m，2H)，7.081(m，1H)，3.855(s，2H)，3.327(t，2H)，3.213(t，2H)，1.874～0.834(m，10H)；MS(m/z)515(M++1)。N，N-二-正丙基-1H-2-(3’，4’-二氯)苯基-7-乙基-3-吲哚乙酰胺(I72)的制备按实施例2所述方法制备。待反应混合物冷后用硅胶柱进行分离(层析液乙酸乙酯∶石油醚＝5∶1)，得I72白色固体，熔点119～120℃；1HNMR(CDCl3，600MHz，ppm)8.519(s，1H)，7.563(d，1H)，7.438(d，1H)，7.378(d，1H)，7.268(s，1H)，7.040(m，1H)，6.930(d，1H)，3.830(s，2H)，3.375(t，2H)，3.293(t，2H)，1.633～0.843(m，10H)；MS(m/z)431(M++1)。N，N-二-正己基-1H-2-(3’，4’-二氯)苯基-4，7-二氟-3-吲哚乙酰胺(I73)的制备按实施例2所述方法制备。待反应混合物冷后用硅胶柱进行分离(层析液乙酸乙酯∶石油醚＝5∶1)，得I73白色固体，熔点90～91℃；1HNMR(CDCl3，600MHz，ppm)8.944(s，1H)，7.512(s，1H)，7.435(d，1H)，7.327(m，1H)，7.316(t，1H)，7.269(m，1H)，3.737(s，2H)，3.400(t，2H)，3.279(t，2H)，1.803～0.863(m，22H)；MS(m/z)523(M++1)。N，N-二-正丙基-1H-2-(3’，4’-二氯)苯基-4，7-二氟-3-吲哚乙酰胺(I74)的制备按实施例2所述方法制备。待反应混合物冷后用硅胶柱进行分离(层析液乙酸乙酯∶石油醚＝5∶1)，得I74白色固体，熔点185～186℃；1HNMR(CDCl3，600MHz，ppm)9.479(s，1H)，7.425(s，1H)，7.341(d，1H)，7.255(m，1H)，6.884(t，1H)，6.482(m，1H)，3.697(s，2H)，3.439(t，2H)，3.339(t，2H)，1.693～0.837(m，10H)；MS(m/z)439(M++1)。
取3-(3，4-二氯)苯酰基-丙酸2.5g(0.01mol)和三乙胺3g(0.03mol)溶在25ml的四氢呋喃中，冷却至-40℃。搅拌下滴入氯甲酸乙酯1.1g(0.01mol)，溶液在-20℃下继续反应半小时，然后加入二正丙胺1g(0.01mol)，在室温下继续搅拌一小时。所得悬浊液用硅胶柱进行层析分离(层析液乙酸乙酯∶石油醚＝2∶1)，收集洗脱液，减压蒸干，得到酰胺。酰胺中加入苯肼2.2g(0.02mol)，与15克无水氯化锌粉末混合，加40ml乙醇回流一小时。冷后用硅胶柱进行分离(层析液乙酸乙酯∶石油醚＝5∶1)，得I16白色固体。
I16的熔点185～186℃；元素分析(C22H23ClN2O)计算值(％)C65.68H5.76 N6.96，实验值(％)C65.59 H5.75 N6.86；IR(KBr)3268，2962，1625，1457cm-1；1HNMR(CDCl3，400MHz，ppm)8.67(s，1H)，7.50(s，1H)，7.49～7.01(m，6H)，3.83(s，2H) 3.36(t，2H)，3.26(t，2H)，1.60(m，4H)，0.88(m，6H)；MS(m/z)403(M+1)。
同法制得I20、I21的结晶(相应苯肼为市售)。部分理化数据见表10。
表10 理化数据表 NR1R2R3、R4、R5R’ Mp 分子式 M.W. MS编号 或R6℃I16N(n-C3H7)2H 3’，4’-二氯 185～186 C22H24Cl2N2O 402403(M++1)I20N(n-C3H7)25-Br3’，4’-二氯 115～116 C22H23BrCl2N2O480483*I21N(n-C3H7)25-Br2’，4’-二氟 132～133 C22H23BrF2N2O 448449(M++1)*MS值系同位素值和M++1峰N，N-二-正丙基-1H-2-(3’，4’-二氯)苯基-5-溴-3-吲哚乙酰胺(I20)的制备按实施例3所述相同方法进行。待反应混合物冷后用硅胶柱进行分离(层析液乙酸乙酯∶石油醚＝5∶1)，经乙酸乙酯重结晶得I20白色固体，熔点115～116℃；元素分析(C22H23BrCl2N2O)计算值(％)C65.68 H5.76N6.96，实验值(％)C65.59 H5.75 N6.86；IR(KBr)3268，2929，1625，1457；1HNMR(CDCl3，400MHz，ppm)9.43(s，1H)，7.45(s，1H)，7.23～6.67(m，6H)，3.72(s，2H)3.46(t，2H)，3.35(t，2H)，1.72(m，4H)，0.96(m，6H)；MS(m/z)483(Br同位素M++1)。N，N-二-正丙基-1H-2-(2’，4’-二氟)苯基-5-溴-3-吲哚乙酰胺(I21)的制备按实施例3所述相同方法进行。待反应混合物冷后用硅胶柱进行分离(层析液乙酸乙酯∶石油醚＝5∶1)，经乙酸乙酯重结晶得I21白色固体，熔点132～133℃；元素分析(C22H23BrFl2N2O)计算值(％)C58.81 H5.16N6.23，实验值(％)C59.20 H5.15 N5.98；IR(KBr)3253，2964，1625，1450；1HNMR(CDCl3，400MHz，ppm)9.43(s，1H)，7.45(s，1H)，7.23～6.67(m，6H)，3.72(s，2H)3.46(t，2H)，3.35(t，2H)，1.72(m，4H)，0.96(m，6H)；MS(m/z)449(Br同位素M++1)。
权利要求
1.式(I)化合物及其光学异构体或其可药用盐， 其中m为0，1，2，3；R1、R2可独立地选自氢、C1-C12的烷基、C2-C12不饱和烃基、芳基C1-C6烷基、C1-C6烷氧C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氧C1-C3烷基、C1-C6烷氨C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氨C1-C3烷基、4-6员饱和环的C1-C6烷基、4-6员不饱和环取代的C1-C6烷基，R1、R2可与氮原子组成4-6员饱和环，或R1、R2可与氮原子组成4-6员不饱和环；其中烷基或不饱和烃基可以是直链或支链；n为0、1、2、3或4；R’可独立地选自氢、C1-C6烷基、C2-C6不饱和烃基、C1-C6烷氧基、C2-C6不饱和烃氧基、C1-C6烷氨C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氨C1-C3烷基、C1-C6烷氧C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氧C1-C3烷基、C1-C6羧酸酯基、羟基、胺基、C1-C6烷硫基、二氟甲基、三氟甲基、卤素、硝基、氰基、或N3；其中烷基或不饱和烃基可以是直链或支链；B环可以是6-14个碳原子的芳环或含有自1-3个杂原子如氮、氧或硫的5员或6员环；芳香环还可被多个取代基取代，其中x为0、1、2、3、4或5，R”可独立地选自氢、C1-C6烷基、C2-C6不饱和烃基、C1-C6烷氧基、C2-C6不饱和烃氧基、C1-C6羧酸酯基、C1-C6烷氨C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氨C1-C3烷基、C1-C6烷氧C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氧C1-C3烷基、羟基、胺基、烷胺基、C1-C6烷硫基、二氟甲基、三氟甲基、卤素、硝基、氰基；其中烷基或不饱和烃基可以是直链或支链；条件是当A环上n＝2、3或4时，即有2个以上是不为氢的取代基时，B环上x＝0、1、2、3、4或5；当B环上x＝2、3、4或5时，即有2个以上是不为氢的取代基时，n＝0、1、2、3或4。
2.根据权利要求1的化合物及其光学异构体或其可药用盐，其中m＝0或1，R’是氢或是不为氢的1个取代基，这个不为氢的取代基可以是C1-C6烷基、C2-C6不饱和烃基、C1-C6烷氧基、C2-C6不饱和烃氧基、、C1-C6烷氨C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氨C1-C3烷基、C1-C6烷氧C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氧C1-C3烷基、C1-C6羧酸酯基、羟基、胺基、C1-C6烷硫基、二氟甲基、三氟甲基、卤素、硝基、氰基、或N3；其中烷基或不饱和烃基可以是直链或支链；可以连接于吲哚环的4，5，6或7-位；这时x＝2，3，4或5，R”是2个以上不为氢的取代基；B环、m、R”、R1和R2如权利要求1所述。
3.根据权利要求2的化合物及其光学异构体或其可药用盐，其中，n＝0，即R’为氢；B环为苯环、x＝2，其中R”是2’，4’-二氟、3’，4’-二氯、2’-Cl，4’-CH3、2’-CH3，4’-Cl、2’-F，4’-CH3、2’-CH3，4’-F；m＝1，R1和R2是nC3H7-、nC6H13-、iC3H7-。
4.根据权利要求3的化合物，其中R”是2’，4’-二氟，R1和R2分别是nC3H7-。
5.根据权利要求2的化合物及其光学异构体或其可药用盐，其中n＝1，R’是5-F、5-Cl、5-Br、7-F、7-Cl、7-Br、5-CH3、5-C2H5、5-OCH3、5-NO2；R”是2’，4’-二氟、3’，4’-二氯、2’-Cl，4’-CH3、2’-CH3，4’-Cl、2’-F，4’-CH3、2’-CH3，4’-F；B环为苯环、x＝2，其中R”分别是2’，4’-二氟、3’，4’-二氯、2’-Cl，4’-CH3、2’-CH3，4’-Cl、2’-F，4’-CH3、2’-CH3，4’-F；m＝1，R1和R2是nC3H7-、nC6H13-、iC3H7-。
6.根据权利要求5的化合物，其中R’是5-Br，R”是3’，4’-二氯，R1和R2分别是nC3H7-。
7.根据权利要求1的化合物及其光学异构体或其可药用盐，其中n＝2，R’是2个不为氢的取代基，这2个不为氢的取代基可以独立地是C1-C6烷基、C2-C6不饱和烃基、C1-C6烷氧基、C2-C6不饱和烃氧基、C1-C6烷氨C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氨C1-C3烷基、C1-C6烷氧C1-C3烷基、C2-C6不饱和烃氧C1-C3烷基、C1-C6羧酸酯基、羟基、胺基、C1-C6烷硫基、二氟甲基、三氟甲基、卤素、硝基、氰基、或N3，其中烷基或不饱和烃基可以是直链或支链；可以连接于吲哚环的4，5，6或7-位；这时x可以是0，1，2，3，4或5；B环、m、R”、R1和R2如权利要求1所述。
8.根据权利要求7的化合物及其光学异构体或其可药用盐，其中n＝2，R’是4，7-二氟、5，7-二氟或4，7-二氯；R”是2’，4’-二氟、3’，4’-二氯、2’-Cl，4’-CH3、2’-CH3，4’-Cl、2’-F，4’-CH3、2’-CH3，4’-F；B环为苯环，这时x为2，其中R”是2’，4’-二氟、3’，4’-二氯、2’-Cl，4’-CH3、2’-CH3，4’-Cl、2’-F，4’-CH3、2’-CH3，4’-F；m＝1，R1和R2是nC3H7-、nC6H13-、iC3H7-。
9.根据权利要求8的化合物，其中R’是5，7-二氟，R”是2’，4’-二氟，R1和R2分别是nC6H13-。
10.药物的组合物，其含有至少一个权利要求1-9任一要求的式I的化合物或其光学异构体或其药用盐和可药用赋形剂或载体。
全文摘要
式I所述化合物及其光学异构体或其可药用盐,其中R
文档编号C07D209/18GK1380287SQ0111680
公开日2002年11月20日 申请日期2001年4月17日 优先权日2001年4月17日
发明者姚霞君, 周勇, 杨洪菊, 殷明昭, 晏忠, 龚正华, 罗质璞, 恽榴红, 李云峰 申请人:中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所