腺苷a3受体激动剂的制作方法

专利名称：腺苷a3受体激动剂的制作方法
技术领域：
本发明要求2001年8月8日提交的美国临时专利申请第60/311,069号的优先权，其披露的内容结合于此作为参考。本发明涉及一种新型腺苷A3受体激动剂，其对于治疗神经障碍、心脏疾患、和其它细胞增生紊乱有益。本发明还涉及制备这些化合物的方法，以及含有这些化合物的药物组合物。
背景技术：
腺苷是一种自然产生的核苷，其通过与所有调节重要生理过程的被称为A1、A2a、A2b、和A3的腺苷受体族相互作用发挥生物效应。例如，A1腺苷受体的刺激可缩短持续时间并减少AV节细胞动作电位的振幅，因此，可延长AV节细胞的不应期。这样，A1受体的刺激提供了一种治疗室上性心动过速的方法，包括结内折返性心动过速的终止，以及在心房纤维颤动和心房扑动中心室率的控制。A2A腺苷受体调节冠状血管扩张，A2B受体已交织在肥大细胞激活、哮喘、血管舒张、细胞生长的调节、肠功能、和神经分泌的调节中(参见Adenosine A2BReceptors as Therapeutic Targets(腺苷A2B受体作为治疗目标)，Drug Dev Res 45198；Feoktistov et al..，TrendsPharmacol Sci 19148-153)。A3腺苷受体调节细胞增殖过程。尤其是，作为A3受体激动剂(A3adenosine receptors agonist)的化合物，在治疗和/或预防癌症、心脏病、不育症、肾病、和CNS紊乱有所应用。此外，A3受体激动剂刺激骨髓细胞增殖，从而诱导体内G-CSF的分泌。因此，A3受体激动剂在对抗药物的毒副作用，尤其是诸如白细胞减少和嗜中性白细胞减少症等化学治疗药物的毒副作用方面有益。
对于A3腺苷受体的配体至今还几乎没有报道。某些非选择性N6-取代腺苷衍生物已作为A3受体的激动剂进行了披露，包括APNEA(N6-2-(4-氨苯基)乙基腺苷)，其已经成功地用于碘化形式的放射性配体(Zhou et al.)。然而，典型的黄嘌呤和非黄嘌呤A1和A2受体拮抗剂似乎没有与该受体结合(Zhou et al.)。
因此，希望提供A3受体激动剂的化合物。优选地，该化合物对A3受体有选择性，从而可以避免由于它与其它腺苷受体相互作用而产生的副作用。

发明内容
本发明的一个目的是提供A3受体激动剂。因此，一方面，本发明涉及化学式I的化合物 化学式I其中R1是可选取代的低级烷基，可选取代的环烷基，可选取代的芳基、或可选取代的杂芳基；
X是共价键或可选取代的亚烷基；R2是R4-Z-Y-C≡C-或可选取代的吡唑基其中Y是可选取代的亚烷基，Z是氧、硫、或NH-，而R4是可选取代的芳基或可选取代的杂芳基；以及R3是羟甲基或-C(O)-NR5R6；其中R5和R6独立地是氢或低级烷基；及其药用盐、酯、和药物前体。
本发明的第二个方面涉及药物制剂，包括有效治疗量的化学式I的化合物以及至少一种药用赋形剂。
本发明的第三个方面涉及化学式I的化合物在制备治疗哺乳动物疾病或身体不适的药物上的应用，其可以用A3受体激动剂进行治疗，包括给需要的哺乳动物施加有效治疗剂量的化学式I的化合物。这类疾病包括但不限于癌症、肾脏和心脏缺血、神经退化紊乱、不育症、嗜中性白细胞减少症、肾脏疾病、以及CNS紊乱。
本发明的第四个方面涉及化学式I的化合物的制备方法。
对于化学式I的化合物，优选的一类包括下列这样的化合物，其中R2是可选取代的吡唑-1-基，尤其是其中的R1为可选取代的烷基或可选取代的芳基，R3为羟甲基，而X是共价键。在这些化合物中，优选的组包括下列这样的化合物，其中R2是吡唑-1-基，它被可选取代的低基烷基、酯、氨羰基、可选取代的芳基、或可选取代的杂芳基所取代。
一个优选的亚组包括下列这些化合物，其中R2是吡唑-1-基，它被可选取代的苯基或可选取代的烷基所取代，而R1为可选取代的烷基。更优选的是这样的化合物，其中的R1为1-3个碳原子的低级烷基，而R2是由具有甲氧基或氯取代基的苯基或苄基所取代的吡唑-1-基。
第二个优选的亚组包括下列这些化合物，其中R2是吡唑-1-基，它被可选取代的杂芳基所取代，而R1为可选取代的烷基。更优选的是这样的化合物，其中的R1为1-3个碳原子的低级烷基，而R2是被吡啶取代的吡唑-1-基。
第三个优选的亚组包括下列这些化合物，其中R2是被可选取代的苯基所取代的吡唑-1-基，R1为可选取代的苯基，而X是亚烷基。更优选的是这样的化合物，其中的R1为3-碘代苯基，尤其是X是亚甲基。
第二个优选的类包括下列化合物，其中R2是吡唑-4-基，它被可选取代的苯基或可选取代的烷基所取代，尤其是其中的R1为可选取代的烷基，而X是共价键。更优选的是这样的化合物，其中的R1为低级烷基。
第三个优选的类包括下列化合物，其中R2是R4-Z-Y-C≡C-，尤其是其中的R4是可选取代的苯基，而Y是1、2、或3个碳原子的亚烷基。在这些化合物中，一个优选的组包括下列这些化合物，其中的R4是被甲氧基或氯可选取代的苯基，而Y是亚甲基，R1为可选取代的低级烷基，R3是羟基，X是共价键，而Z是氧。
定义和一般参数本说明书中使用的词和词组通常具有下述规定的含义，除非其含义另有规定。
术语“烷基”指具有1至20个碳原子的单价基支链或无支链的饱和烃链。该术语用诸如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正己基、正癸基、叔癸基等基团来举例说明。
术语“取代的烷基”指1)如上述定义的烷基，具有有1、2、3、4、或5个取代基，优选1至3个取代基，选自由链烯基、炔基、烷氧基、环烷基、环链烯基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、氨羰基、烷氧基羰基氨基、叠氮基、氰基、卤素、羟基、酮基、硫代羰基、羰基、羰基烷基、芳硫基、杂芳硫基、杂环基硫基、硫羟、烷硫基、芳基、芳氧基、杂芳基、氨基磺酰基、氨基羰基氨基、杂芳氧基、杂环基、杂环氧基、羟氨基、烷氧基氨基、硝基、-SO-烷基、-SO-芳基、-SO-杂芳基、-SO2-烷基、-SO2-芳基、和-SO2-杂芳基组成的组。除非定义中另有限定，所有取代基都可选地被1、2、或3个取代基进一步所取代，其选自烷基、羧基、羧基烷基、氨羰基、羟基、烷氧基、卤素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、和-S(O)nR，其中R是烷基、芳基、或杂芳基，而n为0、1、或2；或2)如上述定义的烷基，插入1-10个原子，其独立地选自氧、硫、和NRa-，其中Ra是选自氢、烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂芳基、和杂环基。所有的取代基可选择地进一步被烷基、烷氧基、卤素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、或-S(O)nR取代，其中R是烷基、芳基、或杂芳基，而n为0、1、或2；或3)如上述定义的烷基，具有如上述所定义的1、2、3、4、或5个取代基，并且由如上述所定义的插入1-10个原子。
术语“低基烷基”指具有1、2、3、4、5、或6个碳原子的支链或无支链的饱和烃链的单价基。该术语用诸如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正己基等基团来举例说明。
术语“取代的低基烷基”指如上述所定义的低级烷基，具有1至5个取代基，优选1、2、或3个取代基，如针对取代的烷基所定义，或如以上所定义的低基烷基，其插入1、2、3、4、或5个原子，如针对取代的烷基所定义，或如上述所定义的低基烷基，其具有如上所定义的1、2、3、4、或5个取代基，并插入如上述所定义的1、2、3、4、或5个原子。
术语“亚烷基”指支链或无支链饱和烃链的双基，优选具有1至20个碳原子，更好1至10个碳原子，更优选的是有1、2、3、4、5、或6个碳原子。该术语用诸如亚甲基(-CH2-)，亚乙基(-CH2CH2-)、亚丙基异构体(如，-CH2CH2CH2-和-CH(CH3)CH2-)等基团来举例说明。
术语“低级亚烷基”指支链或无支链饱和烃链的双基，优选具有1、2、3、4、5、或6个碳原子。
术语“取代的亚烷基”指1)如上述定义的亚烷基，具有1、2、3、4、或5个取代基，选自由烷基、链烯基、炔基、烷氧基、环烷基、环链烯基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、氨羰基、烷氧基羰基氨基、叠氮基、氰基、卤素、羟基、酮基、硫代羰基、羰基、羰基烷基、芳硫基、杂芳硫基、杂环基硫基、硫羟、烷硫基、芳基、芳氧基、杂芳基、氨基磺酰基、氨基羰基氨基、杂芳氧基、杂环基、杂环氧基、羟氨基、烷氧基氨基、硝基、-SO-烷基、-SO-芳基、-SO-杂芳基、-SO2-烷基、-SO2-芳基、和-SO2-杂芳基组成的组。除非定义中另有限定，所有取代基都可选地被1、2、或3个取代基进一步所取代，其选自烷基、羧基、羧基烷基、氨羰基、羟基、烷氧基、卤素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、和-S(O)nR，其中R是烷基、芳基、或杂芳基，而n为0、1、或2；或
2)如上述定义的亚烷基，由1-20个原子隔开(插入1-20个原子)，其独立地选自氧、硫、和NRa-，其中Ra是选自氢、可选取代的烷基、环烷基、环链烯基、芳基、杂芳基、和杂环基，或选自羰基、羰基酯、羰基酰胺、和磺酰基；或3)如上述定义的亚烷基，其具有如上述所定义的1、2、3、4、或5个取代基，并且被如上述所定义的1-20个原子隔开。取代的亚烷基的实例是氯亚甲基(-CH(Cl)-)、氨基亚乙基(-CH(NH2)CH2-)、甲氨基亚乙基(-CH(NHMe)CH2-)、2-羧基亚丙基异构体(-CH2CH(CO2H)CH2-)、乙氧基乙基(-CH2CH2O-CH2CH2-)、乙基甲基氨乙基(-CH2CH2N(CH3)CH2CH2-)、1-乙氧基-2-(2-乙氧基-乙氧基)乙烷(-CH2CH2O-CH2CH2-OCH2CH2-OCH2CH2-)等等。
术语“芳烷基”指共价连接于亚烷基的芳基，其中芳基和亚烷基在本文进行定义。“可选取代的芳烷基”指共价连接于可选取代的亚烷基的可选取代的芳基。这类芳烷基通过诸如苄基、苯乙基、3-(4-甲氧基苯基)丙基等举例加以说明。
术语“烷氧基”指基团R-O-，其中R为可选取代的烷基或可选取代的环烷基，或R为基团-Y-Z，其中Y为可选取代的亚烷基，而Z为可选取代的链烯基、可选取代的炔基；或可选取代的环链烯基，其中烷基、链烯基、炔基、环烷基、和环链烯基如在本文中所定义。优选的烷氧基是烷基-O-并包括，作为实例的如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、正戊氧基、正己氧基、1，2-二甲基丁氧基等等。
术语“烷硫基”指基团R-S-，其中R如针对烷氧基所定义。
术语“链烯基”指支链的或无支链的不饱和烃基的单价基，较好具有2至20个碳原子，更好2至10个碳原子，最好2至6个碳原子并且具有1-6个，优选1个，双键(乙烯基)。优选的链烯基包括亚乙基或乙烯基(-CH＝CH2)、1-亚丙基或烯丙基(-CH2CH＝CH2)、异亚丙基(-C(CH3)＝CH2)、双环[2.2.1]庚烯等等。在链烯基与氮相连的情况下，双键不能在氮的α位。
术语“低基链烯基”指如上所定义的链烯基，具有2至6个碳原子。
术语“取代的链烯基”指如上所定义的链烯基，具有1、2、3、4、或5个取代基，而优选1、2、或3个取代基，选自由烷基、链烯基、炔基、烷氧基、环烷基、环链烯基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、氨羰基、烷氧基羰基氨基、叠氮基、氰基、卤素、羟基、酮基、硫代羰基、羰基、羰基烷基、芳硫基、杂芳硫基、杂环基硫基、硫羟、烷硫基、芳基、芳氧基、杂芳基、氨基磺酰基、氨基羰基氨基、杂芳氧基、杂环基、杂环氧基、羟氨基、烷氧基氨基、硝基、-SO-烷基、-SO-芳基、-SO-杂芳基、-SO2-烷基、-SO2-芳基、和-SO2-杂芳基组成的组。除非定义中另有限定，所有取代基都可选地被1、2、或3个取代基进一步所取代，选自烷基、羧基、羧基烷基、氨羰基、羟基、烷氧基、卤素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、和-S(O)nR，其中R是烷基、芳基、或杂芳基，而n为0、1、或2。
术语“炔基”指不饱和烃的单价基，较好具有2至20个碳原子，更好具有2至10个碳原子，最好具有2至6个碳原子，并且具有至少1个、优选1至6个乙炔(三键)不饱和部位。优选的炔基包括乙炔基(-C≡CH)，炔丙基(或丙炔基(-C≡CCH3)等等。在炔基连接于氮的情况下，三键不能在氮的α位。
术语“取代的炔基”指如上所定义的炔基，具有1、2、3、4、或5个取代基，优选1、2、或3个取代基，选自由烷基、链烯基、炔基、烷氧基、环烷基、环链烯基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、氨羰基、烷氧基羰基氨基、叠氮基、氰基、卤素、羟基、酮基、硫代羰基、羧基、羧基烷基、芳硫基、杂芳硫基、杂环基硫基、硫羟、烷硫基、芳基、芳氧基、杂芳基、氨基磺酰基、氨基羰基氨基、杂芳氧基、杂环基、杂环氧基、羟氨基、烷氧基氨基、硝基、-SO-烷基、-SO-芳基、-SO-杂芳基、-SO2-烷基、-SO2-芳基、和-SO2-杂芳基组成的组。除非定义中另有限定，所有取代基都可选地被被1、2、或3个取代基进一步所取代，选自烷基、羧基、羧烷基、氨羰基、羟基、烷氧基、卤素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、和-S(O)nR，其中R是烷基、芳基、或杂芳基，而n为0、1、或2。
术语“氨羧基”指基团-C(O)NRR，其中每个R独立地是氢、烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基，或其中两个R基团一起形成杂环基团(如，吗啉代)。除非定义中另有限定，所有取代基都可选地被1、2、或3个取代基进一步所取代，取代基选自烷基、羧基、羧基烷基、氨羰基、羟基、烷氧基、卤素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、和-S(O)nR，其中R是烷基、芳基、或杂芳基，而n为0、1、或2。
术语“酯”或“羧基酯”指基团-C(O)OR，其中R是烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基，其可选地被烷基、烷氧基、卤素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、或-S(O)nRa进一步取代，其中Ra是烷基、芳基、或杂芳基，而n为0、1、或2。
术语“酰氨基”指基团-NRC(O)R，其中每个R独立地是氢、烷基、芳基、杂芳基、或杂环基。所有取代基可选地被烷基、烷氧基、卤素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、或-S(O)nR进一步取代，其中R是烷基、芳基、或杂芳基，而n为0、1、或2。
术语“酰氧基”指基团-O(O)C-烷基、-O(O)C-环烷基，-O(O)C-芳基、-O(O)C-杂芳基、和-O(O)C-杂环基。除非定义中另有限定，所有取代基都可选地被1、2、或3个取代基进一步所取代，取代基选自烷基、羧基、羧基烷基、氨羰基、羟基、烷氧基、卤素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、和-S(O)nR，其中R是烷基、芳基、或杂芳基，而n为0、1、或2。
术语“芳基”指6至20个碳原子的芳族碳环基团，具有单环(如，苯基)或多环(如，联苯基)、或多个稠合(稠)环(如，萘基或蒽基)。优选的芳基包括苯基和萘基等等。
除非针对芳基取代基的定义另有限定，这类芳基可选地用1、2、3、4、或5个取代基、优选1、2、或3个取代基取代，选自由烷基、链烯基、炔基、烷氧基、环烷基、环链烯基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、氨羰基、烷氧基羧基氨基、叠氮基、氰基、卤素、羟基、酮基、硫代羰基、羧基、羧基烷基、芳硫基、杂芳硫基、杂环基硫基、硫羟、烷硫基、芳基、芳氧基、杂芳基、氨基磺酰基、氨羰基氨基、杂芳氧基、杂环基、杂环氧基、羟氨基、烷氧基氨基、硝基、-SO-烷基、-SO-芳基、-SO-杂芳基、-SO2-烷基、-SO2-芳基、以及-SO2-杂芳基组成的组。除非定义中另有限定，所有取代基可选地被1、2、或3个取代基进一步所取代，选自烷基、羧基、羧烷基、氨羰基、羟基、烷氧基、卤素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、和-S(O)nR，其中R是烷基、芳基、或杂芳基，而n为0、1、或2。
术语“芳氧基”指基团芳基-O-，其中芳基如上所定义，并包括同样如上所定义的可选取代的芳基。术语“芳硫基”指基团R-S-，其中R如针对芳基所定义。
术语“氨基”指基团-NH2。
术语“取代的氨基”指基团-NRR，其中每个R是独立地选自由氢、烷基、环烷基、芳基、杂芳基、和杂环基组成的组，前提是两个R基团不同时为氢，或基团-Y-Z，其中Y为可选取代的亚烷基，而Z为链烯基、环链烯基、或炔基。除非定义中另有限定，所有取代基可选地被1、2、或3个取代基进一步所取代，选自烷基、羧基、羧基烷基、氨羰基、羟基、烷氧基、卤素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、和-S(O)nR，其中R是烷基、芳基、或杂芳基，而n为0、1、或2。
术语“羧基烷基”指基团-C(O)O-烷基、-C(O)O-环烷基，其中烷基和环烷基如上所定义，且可选地进一步由下述基团取代，即烷基、链烯基、炔基、烷氧基、卤素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、或-S(O)nR，其中R是烷基、芳基、或杂芳基，而n为0、1、或2。
术语“环烷基”指3至20个碳原子的环状烃烷基，具有单环或稠环。这类环烷基包括，作为实例的，单环结构如环丙基、环丁基、环戊基、环辛基等等，或稠环结构如金刚烷基、以及双环[2.2.1]庚烷，或芳基稠合于其上的环烷基，例如1，2-二氢化茚及类似物。
术语“取代的环烷基”指环烷基，其具有1、2、3、4、或5个取代基、优选1、2、或3个取代基，其选自由烷基、链烯基、炔基、烷氧基、环烷基、环链烯基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、氨羰基、烷氧即羰基氨基、叠氮基、氰基、卤素、羟基、酮基、硫羰基、羧基、羧基烷基、芳硫基、杂芳硫基、杂环基硫基、硫羟、烷硫基、芳基、芳氧基、杂芳基、氨基磺酰基、氨基羧基氨基、杂芳氧基、杂环基、杂环氧基、羟氨基、烷氧基氨基、硝基、-SO-烷基、-SO-芳基、-SO-杂芳基、-SO2-烷基、-SO2-芳基、和-SO2-杂芳基组成的组。除非定义中另有限定，所有取代基可选地被1、2、或3个取代基进一步所取代，选自烷基、羧基、羧基烷基、氨羰基、羟基、烷氧基、卤素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、和-S(O)nR，其中R是烷基、芳基、或杂芳基，而n为0、1、或2。
术语“卤素”或“卤”指氟基、溴基、氯基、和碘基。
术语“酰基”指基团-C(O)R，其中R为氢、可选取代的烷基、可选取代的环烷基、可选取代的杂环基、可选取代的芳基、和可选取代的杂芳基。
术语“杂芳基”指芳基(即，不饱和的)，在至少一个环内包括1至15个碳原子和1至4个杂原子，这些原子选自氧、氮、和硫。
除非针对杂芳基取代基的定义另有限定，这类杂芳基可选地用1、至5个取代基、优选1、2、或3个取代基取代，取代基选自由烷基、链烯基、炔基、烷氧基、环烷基、环链烯基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、氨羰基、烷氧基羰氨基、叠氮基、氰基、卤素、羟基、酮基、硫代羰基、羧基、羧基烷基(一个烷基酯)、芳硫基、杂芳基、杂芳硫基、杂环基硫基、硫羟、烷硫基、芳基，芳氧基、芳烷基、杂芳基、氨基磺酰基、氨基羧基氨基、杂芳氧基、杂环基、杂环氧基、羟氨基、烷氧基氨基、硝基、-SO-烷基、-SO-芳基、-SO-杂芳基、-SO2-烷基、-SO2-芳基、和-SO2-杂芳基组成的组。除非定义中另有限定，所有取代基可选地被1、2、或3个取代基进一步所取代，选自烷基、羧基、羧基烷基、氨羰基、羟基、烷氧基、卤素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、和-S(O)nR，其中R是烷基、芳基、或杂芳基，而n为0、1、或2。这类杂芳基可具有一个单环(如，吡啶基或呋喃基)或多个稠环(如，中氮茚基、苯并噻唑基、或苯并噻吩基)。含氮杂环和杂芳基的实例包括但不限于吡咯、咪唑、吡唑、吡啶、吡嗪、嘧啶、哒嗪、中氮茚、异吲哚、吲哚、吲唑、嘌呤、喹嗪、异喹啉、喹啉、2，3-二氮杂萘、萘基吡啶、喹喔啉、喹唑啉、肉啉、蝶啶、咔唑、咔啉、菲啶、吖啶、菲咯啉、异噻唑、吩嗪、异噁唑、吩噁嗪、吩噻嗪、咪唑烷、咪唑啉、以及其它含有杂芳基的N-烷氧基-氮的化合物。
对化学式I中R4的定义的一个选择是杂芳基，即一个可选取代的吡唑基。该定义包括吡唑，其连接a)通过吡唑的N1位置，即化学式的吡唑-1-基部分 其中，A代表化学式I的化合物的2-位上附着的点，而R5、R6、和R7独立地是氢或上述杂芳基所示的可选的取代基；以及b)通过吡唑的任一碳原子，即化学式的C-吡唑基 其中A代表化学式I的化合物的2-位上附着的点，而R8、R9、和R10独立地是氢或上述杂芳基所示的可选的取代基。
优选的是可选取代的吡唑-1-基和可选取代的吡唑-4-基。优选的取代基是氢、可选取代的芳基、可选取代的芳烷基、可选取代的杂芳基、和可选取代的杂芳烷基。
术语“杂芳氧基”指基团杂芳基-O-。
术语“杂环基”指单价饱和或部分不饱和基团，具有单环或多个稠环，在环内具有1至40个碳原子和1至10个杂原子，优选1至4个杂原子，这些杂原子选自氮、硫、磷、和/或氧。
除非针对杂环取代基的定义另有限制，这类杂环基可选地用1至5个、优选1、2、或3个取代基取代，其选自由烷基、链烯基、炔基、烷氧基、环烷基、环链烯基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、氨羰基、烷氧基羰氨基、叠氮基、氰基、卤素、羟基、酮基、硫代羰基、羧基、羧基烷基、芳硫基、杂芳硫基、杂环基硫基、硫羟、烷硫基、芳基、芳氧基、氨基磺酰基、杂芳氧基、杂环基、杂环氧基、羟氨基、烷氧基氨基、硝基、-SO-烷基、-SO-芳基、-SO-杂芳基、-SO2-烷基、-SO2-芳基、和-SO2-杂芳基组成的组。除非定义中另有限制，所有取代基可选地被1、2、或3个取代基进一步所取代，其选自烷基、羧基、羧基烷基、氨羰基、羟基、烷氧基、卤素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、和-S(O)nR，其中R是烷基、芳基、或杂芳基，而n为0、1、或2。杂环基可以具有单环或多个稠环。优选的杂环包括四氢呋喃基、吗啉代、哌啶基等等。
术语“硫羟(巯基thiol)”指基团-SH。
术语“取代的烷基硫”指基团-S-取代的烷基。
术语“杂芳基硫羟(heteroarylthiol)”指基团-S-杂芳基，其中，杂芳基如上所定义，包括同样如上所定义的可选取代的杂芳基。
术语“亚砜”指基团-S(O)R，其中R为烷基、芳基、或杂芳基。“取代的亚砜”指基团-S(O)R，其中R为取代的烷基、取代的芳基、或取代的杂芳基，如本文所定义。
术语“砜”指基团-S(O)2R，其中R为烷基、芳基、或杂芳基。“取代的砜”指基团-S(O)2R，其中R为取代的烷基、取代的芳基、或取代的杂芳基，如本文所定义。
术语“酮”指基团-C(O)-。术语“硫代羰基”指基团-C(S)-。术语“羧基”指基团-C(O)-OH。
“可选的”或“可选地”指随后描述的事件或情况可能发生或可能不发生，并且该描述包括其中所述事件或情况发生的例子以及不发生的例子。
术语“化学式I的化合物”指包含本发明披露的化合物、和该类化合物的药用盐、药用酯、以及药物前体。
术语“治疗有效量”指化学式I的化合物的量，当给予需要这类治疗的哺乳动物时，其足以达到治疗目的，如下面所定义。治疗有效量会随受治疗者和要治疗的疾病状态、受治疗者的体重和年龄、疾病状态的严重程度、给药方式等等不同而不同，其对熟悉该领域的技术人员而言，很容易加以确定。
术语“治疗”或“处理”指对哺乳动物的疾病的任何治疗，包括(i)预防疾病，也就是说，使得疾病的临床症状不显现；(ii)抑制疾病，也就是说，阻止临床症状的发展；和/或(iii)缓解疾病，也就是说，使临床症状消退(减轻)。
在许多情况下，由于存在氨基和/或羧基或类似的基团，本发明的化合物可以形成酸式和/或碱式盐。术语“药用盐(药学上可接受的盐)”是指这样的盐，其保留化学式I的化合物的生物功效和性能，并且其并不是在生物上或其他方面不理想的。药用碱加成盐可以通过无机碱和有机碱来制备。衍生自无机碱的盐，包括，仅作为例子的，钠盐、钾盐、锂盐、铵盐、钙盐、和镁盐。衍生自有机碱的盐，包括但不限于伯胺、仲胺、以及叔胺的盐，例如烷基胺、二烷基胺、三烷基胺、取代的烷基胺、二(取代的烷基)胺、三(取代的烷基)胺、烯基胺、二烯基胺、三烯基胺、取代的烯基胺、二(取代的烯基)胺、三(取代的烯基)胺、环烷基胺、二(环烷基)胺、三(环烷基)胺、取代的环烷基胺、二取代的环烷基胺、三取代的环烷基胺、环烯基胺、二(环烯基)胺、三(环烯基)胺、取代的环烯基胺、二取代的环烯基胺、三取代的环烯基胺、芳基胺、二芳基胺、三芳基胺、杂芳基胺、二杂芳基胺、三杂芳基胺、杂环胺、二杂环胺、三杂环胺、混合的二胺和三胺，其中在胺上的至少两个取代基不同并且选自由烷基、取代的烷基、链烯基、取代的链烯基、环烷基、取代的环烷基、环烯基、取代的环烯基、芳基、杂芳基、杂环、以及类似物组成的组。还包括下述胺，即其中两个或三个取代基，与氨基氮一起，形成杂环基或杂芳基。
适合胺的特定实例包括，仅作为例子的如，异丙胺、三甲胺、二乙胺、三(异丙基)胺、三(正丙基)胺、乙醇胺、2-二甲氨基乙醇、三甲胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡碱、普鲁卡因、海巴明(hydrabamine)、胆碱、甜菜碱、1，2-乙二胺、葡糖胺、N-烷基葡糖胺、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶、吗啉、N-乙基哌啶以及类似物。
药用酸加成盐可以通过无机酸和有机酸来制备。衍生自无机酸的盐包括盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、以及类似物的盐。衍生自有机酸的盐包括乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、丙二酸、丁二酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉硅酸、苯乙醇酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸、以及类似物的盐。
在本文所用的“药用载体(药学上可接受的载体)”包括任何和所有的溶剂、分散介质、包衣、抗菌剂和抗真菌剂、等渗和吸收延迟剂、以及类似物。这类在药物活性物质方面的介质和药剂的应用是本技术领域所熟知的。除了在任何与活性成分不相容的常规介质和药剂范围内，可以设想其在治疗组合物方面的应用。辅助活性成分也可以结合到该组合物中。
命名法本发明的化合物的命名和编号是以化学式I的代表性的化合物进行举例说明，其中，R1为甲基，R2为4-(4-甲氧基苯基)吡唑-1-基，R3为羟甲基，而X为共价键 其被命名为(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺-3，4-二醇(英文名称(4S，2R，3R，5R)-5-(hydroxymethyl)-2-{2-[4-(4-methoxyphenyl)pyrazolyl]-6-(methylamino)purin-9-yl}oxolane-3，4-diol)
化学式I的化合物的合成化学式I的化合物，其中R2为可选取代的吡唑-1-基的制备方法示于反应图解I中。
反应图解I 化学式I其中Ac为乙酰基，而X为共价键或可选取代的亚烷基。
步骤1-化学式(2)的制备化学式(2)的化合物是通过化学式(1)的化合物的6-氯的取代而制成，其制备描述见J.F.Gorster and R.K.Robins，Org.Chem.1966，Vol.31，3258-62。化学式(1)的化合物与化学式为R1XNH2的化合物在碱存在的情况下进行反应，其中X为共价键或可选取代的亚烷基。反应在惰性质子溶剂，如甲醇、乙醇、正丁醇、以及其类似物溶剂中于室温和回流温度之间进行约12至48小时。当反应基本完全时，用常规方法分离化学式(2)的产物，例如在减压下除去溶剂，接着在硅胶上层析(色谱分离，chromatography)残余物。
步骤2-化学式(3)的化合物的制备化学式(2)的化合物通过与水合肼反应被转化成化学式(3)的化合物。反应在没有溶剂，或可选地在质子溶剂如乙醇中于室温和回流温度之间进行约12至48小时。当反应基本完全时，用常规方法分离化学式(3)的产物，例如在减压下除去溶剂并用醚研磨产物。可替换地，化学式(3)的化合物在下一步未经提纯而被使用。
步骤3-化学式I的化合物的制备化学式(3)的化合物通过与化学式(4)的可选取代的1，3-丙二酮衍生物反应被转化为化学式I的化合物。反应通过将化学式(3)的化合物悬浮在质子溶剂(优选乙醇)中，加入化学式(4)的化合物并回流混合物约2至16小时来完成。当反应基本完全时，用常规方法，例如滤出产物，分离化学式I的化合物。
例如，从化学式(4)的化合物开始，其中R5和R7为氢，而R6为4-甲氧基苯基，获得化学式I的化合物，其中R2为4-甲氧基苯基吡唑-1-基。从化学式(4)的化合物开始，其中R5和R7为氢，而R6为-CO2Et，获得化学式I的化合物，其中R2为4-乙氧羰基吡唑-1-基。然后，该酯基在碱性条件下水解得到游离酸，再通过本领域技术人员所熟知的方法或通过反应图解IA所示的方法被转化成诸如可选取代的氨化物的酸的衍生物。
反应图解IA 化学式I，其中R6为乙氧基羰基 化学式I，其中R6为氨基步骤1-化学式I的化合物的保护，其中R6为乙氧基羰基化学式I的化合物，其中R6为乙氧基羰基，溶解在极性溶剂中，优选DMF，并加入咪唑和氯化叔丁基二甲基甲硅烷(tertiarybutyldimethylsilyl chloride)。反应在50-100℃的温度下约进行12至48小时。当反应基本完全时，用常规方法分离产物，例如在减压下除去溶剂，接着在硅胶上闪点层析(flash chromatography)残余物。
步骤2-乙基酯水解成羧酸将步骤1所得的产物悬浮在水、醇、和强碱的混合物中，优选地，在甲醇中的氢氧化钾。反应在0-40℃的温度下，优选约25℃的温度下进行约2至5天，优选约3天。当反应基本完全时，在减压下除去溶剂，残余物被酸化至pH值约为5，并用常规方法，例如过滤来分离产物。
步骤3-酰胺的制备将步骤2所得的产物溶解在惰性溶剂中，优选二氯甲烷，向其中加入HBTU、HOBt、N-甲基吗啉、催化量的DMAP、以及化学式为HNRR的可选取代的氨化物，如上所定义。反应在0-40℃的温度下，优选约25℃的温度下进行约8至48小时，优选约24小时。当反应基本完全时，用常规方法分离产物。
步骤4-去保护将步骤2所得的产物用氟化胺的甲醇溶液进行处理。反应在约回流温度下进行大约8至48小时，优选约24小时。当反应基本完全时，在减压下除去溶剂，残余物被酸化至pH值约为5，并用常规方法，例如通过制备TLC来分离产物。
化学式I的化合物，其中R2为可选取代的吡唑-4-基的制备方法示于反应图解II中。制备吡唑-4-基衍生物的本方法以及其它一般方法参见美国专利第6,214,807号，其全部披露于此一作为参考。
反应图解II 化学式I化学式(5)起始原料的制备通过本领域技术人员所熟知的方法来完成。化学式(9)的中间体的制备如下所示。
化学式(a)的1，3-二酮与肼在适当的溶剂中缩合获得化学式(b)的吡唑，将其用化学式为R8Hal(卤化R8)的合适卤化物进行N-烷基化生成化学式(c)的化合物。用强碱在4位形成的阴离子经碘急冷获得化学式(9)的4-碘衍生物(F.Effenberger et.al.J.Org.Chem.(1984)，49，4687)。
化学式(9)的碘吡唑在有铜盐或无铜盐的存在的情况下，通过与化学式(8)的化合物进行钯介体偶合而被转化成相应的化学式(10)的化合物(K.Kato et.al.J.Org.Chem.1997，62，6833-6841；Palladium Reagents and Catalysts-Innovations in Organic Synthesis，Tsuji，John Wiley and Sons，1995)。化学式(7)三丁基锡衍生物的合成在以前已有所描述(K.Kato et.al.J.Org.Chem.1997，62，6833-6841)，如以上反应图解II所示。
化学式I的化合物，其中R2为乙炔基衍生物的制备方法示于反应图解III。
反应图解III 化学式I其中R8代表可选取代的芳基或芳烷基，而Z为氧、硫、或-NH-。
步骤1-化学式(12)的化合物的制备起始的化学式(11)的化合物(2-碘腺苷)按照文献的步骤由鸟(嘌呤核)苷经四个步骤制得(M.J.Robins et.al.Can.J.Chem.(1981)，59，2601-2607；J.F.Cerster et.al.Org.Synthesis，242-243；V.Nair et.al.，J.Org.Chem.，(1988)，53，3051-3057)。
化学式(12)的化合物是通过化学式(11)的化合物6-氯取代基的置换，与化学式为R1XNH2的化合物，其中X为共价键或可选取代的亚烷基，在碱存在的情况下反应，用与以上所示化学式(2)的化合物的制备相同的方式而制备。
步骤2-化学式I的制备化学式I的化合物，其中R2为乙炔基衍生物，通过与化学式(13)的适当的取代的乙炔基衍生物反应由化学式(12)的化合物制得。反应在极性溶剂，优选DMF，在碘化铜和二氯双(三苯基膦)钯(II)催化剂的作用下，在约50-100℃的温度下，优选在一个密闭试管中进行约2至16小时。当反应基本完全时，化学式I的产物用常规方法，如薄层层析(thin layer chromatography)经分离而得到。
优选方法和最后的步骤本发明的化合物可以按照以下的最后步骤制备。
1.化学式(3)的化合物 与化学式(4)的化合物接触
2.化学式(8)的化合物 与化学式(9)的化合物接触 并且将产物与具有弱酸，如氟化胺接触，以除去保护基团。
3.化学式(12)的化合物
与化学式(13)的化合物在铜盐和催化剂存在下进行接触 用途、测试、和给药一般用途化学式I的化合物可有效治疗对给予A3腺苷受体(激动剂)起反应的疾病。这类疾病包括但不限于细胞增殖过程的调节。尤其是，作为A3受体激动剂的化合物在治疗和/或预防癌症、心脏病(包括作为缺血-再灌注剂的使用)、不育症、肾脏疾病、和CNS紊乱等方面有一定效用。此外，它们在对抗药物的毒副作用，尤其是诸如白细胞减少症和嗜中性白细胞减少症等化学治疗药物的毒副作用方面有一定作用。
测试如在上文作为参考的那些专利和专利申请中、以及在下面的实施例中所描述的，进行了活性试验，这些试验通过本领域技术人员熟知的方法来进行。
药物组合物化学式I的化合物通常以药物组合物的形式给予。因此本发明提供的药物组合物，其包括，作为有效成分的一种或多种化学式I的化合物、或者其药用盐或酯、以及一种或多种药用赋形剂、载体，包括惰性固体稀释剂和充填剂，稀释剂，包括无菌水溶液和各种有机溶剂，渗透促进剂、增溶剂、和佐剂。化学式I的化合物可单独或与其它治疗药剂一起给予。这类组合物是用制药技术领域熟知的方法进行制备(例如，参见Remington’s Pharmaceutical Sciences，Mace Publishing Co.，Philadelphia，PA 17thEd.(1985)和“ModernPharmaceutics”，Marcel Dekker，Inc.3rdEd.(G.S.Banker & C.T.Rhodes，Eds.)。
给药化学式I的化合物可通过任何具有相似效用的可接受的给药方式、以单剂量或多剂量给予，例如，正如在那些作为参考文件的专利和专利申请中所描述的，包括直肠、口腔、鼻内、和经皮途径，通过动脉内注射、静脉内给药、腹膜内给药、胃肠道外给药、肌内给药、皮下给药、口服、局部给药，一般作为吸入剂，或者通过浸渍或涂覆装置诸如支架(stent)，例如，或插入动脉的圆柱形聚合物给药。
一种给药方式为胃肠外给药，尤其是通过注射。本发明新型的组合物可结合于其中用于注射给药的形式，包括水或油悬浮液、或乳浊液，采用芝麻油、玉米油、棉子油、或花生油、以及酏剂、甘露醇、右旋糖、或无菌水溶液，以及类似的药物载体。通常也将盐水溶液用于注射，但在本发明中是较少优选的。也可以使用乙醇、丙三醇、丙二醇、液态聚乙二醇等(以及其合适的混合物)、环糊精衍生物、和植物油。适当的流动性可以通过如下方法来保持，诸如包衣的使用，如卵磷脂，在分散的情况下通过保持所需要的颗粒尺寸，以及通过使用表面活性剂。可以通过使用各种抗菌剂和抗真菌剂来预防微生物的作用，例如，对羟基苯甲酸酯类(parabens)、氯代丁醇、苯酚、山梨酸、乙基汞硫代水杨酸钠、以及类似物。
可注射的无菌溶液的制备如下在具有如上文所列举的各种其它成分的适当溶剂中加入所需量的化学式I的化合物，如需要，继之以过滤灭菌。一般，分散剂的制备如下将各种经灭菌的活性成分加入无菌载体中，其包括基本的分散介质和以上所列举的所需的其它成分。在无菌粉末用于制备可注射无菌溶液的情况下，优选的制备方法是采用真空干燥和冰冻干燥技术，其从先前无菌过滤的溶液产生活性成分粉末以及任何额外的所需成分的粉末。
口服给药是给予化学式I的化合物的另一种途径。给药可通过胶囊或肠溶衣片剂、或类似物。在制备包括化学式I的至少一种化合物的药物组合物时，活性成分通常用赋形剂稀释和/或封装在这样的载体中以致可以呈现胶囊剂、小药囊、纸、或其它包装物形式。当赋形剂用作稀释剂时，它可以是固体、半固体、或液体(如上述)，就活性成分而言，其其赋形剂、载体、或介质的作用。因此，该组合物的形式可以是片剂、丸剂、散剂、锭剂、小药囊、扁囊剂、酏剂、悬浮剂、乳剂、溶液、糖浆剂、气雾剂(作为固体或在液体介质中)、含有例如高达10％重量活性化合物的软膏剂、软胶囊剂和硬胶囊剂、可注射无菌溶液、以及无菌封装的散剂。
合适赋形剂的一些例子包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯树胶、磷酸钙、藻酸盐、黄芪胶、明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、无菌水、糖浆、以及甲基纤维素。配方也包括润滑剂如滑石粉、硬脂酸镁、和矿物油；湿润剂；乳化剂和悬浮剂；防腐剂如羟苯甲酯和羟苯丙酯；甜味剂；以及增香剂。
通过采用本领域熟知的方法可以配制出本发明的组合物，在对患者给药后，可提供活性组分的快速、持续、或延缓释放。用于口服给药的控释给药系统包括含有聚合物涂布的贮囊或药物-聚合物基体配方的渗透泵系统和溶解系统。控释系统的实例在美国专利第3,845,770号、第4,326,525号、第4,902514号、和第5,616,345号中给出。本发明使用方法的另一个配方采用透皮递药装置(“贴剂”)。这类透皮贴剂可用于提供本发明化合物在受控量下的连续或不连续注入。用于递药的透皮贴剂的结构和使用是本领域熟知的。例如，参见美国专利第5,023,252号、第4,992,445号、和第5,001,139号。这类贴剂构成用于连续、脉冲、或按需要给药。
这些组合物优选配制成单位剂型。术语“单位剂型”指物理上分离的单位，适用于人类和其它哺乳动物的单位剂量，每个单位包括预定量的活性材料，其经计算以产生所希望的治疗效应，以及合适的药物赋形剂(例如，片剂、胶囊剂、和针剂)。化学式I的化合物在宽剂量范围内是有效的，并且通常给予有效药物量。优选地，对于口服给药而言，每剂量单位含有10mg至2g的化学式I的化合物，更优选的是10至700mg，而对于胃肠外给药来说，优选的是10至700mg的化学式I的化合物，更优选的是约50至200mg。然而，需要理解的是，实际给予的化学式I的化合物的量将由医生根据相关的情况决定，包括要治疗的疾病、选择的给药途径、给予的实际化合物及其相对活性、每个患者的年龄、体重和反应、患者症状的严重程度、以及类似情况。
为了制备片剂这样的固体组合物，主要的活性成分与药物赋形剂混合形成含有本发明化合物的均相混合物的固体预制剂组合物。当提到这些预制剂组合物为均相时，它是指活性成分均匀地分散到整个组合物中，从而使该组合物可以容易地细分成等效的单位剂型，如片剂、丸剂、和胶囊剂。
本发明的片剂或丸剂可以进行包衣或或通过其它方式进行混合以提供剂型，其具有作用时间长，或保护免受胃的酸性条件的作用的优点。例如，片剂或丸剂可包括内部剂量成分和外部剂量成分，后者以包封的形式裹住前者。这两种成分可用肠溶层隔开，该肠溶层用于阻止成分在胃中的崩解并使得内部成分完整无损地送入十二指肠或被延缓释放。各种材料都可用于肠溶层或包衣，这些材料包括许多高分子酸以及高分子酸与紫胶、十六烷醇、和乙酸纤维素的混合物。
用于吸入剂或吹入剂的组合物包括药用溶液或有机溶剂、或其混合物、以及粉末。液体或固体组合物可以包含适当的如上文所述的药用赋形剂。优选地，这些组合物可通过口服或鼻吸入途径给予，产生局部或系统的效应。存在于优选的药用溶剂中的组合物可通过使用惰性气体进行雾化。雾化的溶液可通过雾化装置直接吸入或者雾化装置与面罩吸入器、或间歇式正压呼吸机相连。从以适当方式递送成分的装置可给予溶液、悬浮剂、或粉末组合物优选口服或鼻内给药。
下述实施例是用来说明本发明的优选实施例。对于本领域技术人员而言，在遵照发明者披露的有代表性的技术的实施例中所披露的技术可在本发明实施中得以很好应用，因此认为其构成了实施的优选方式。然而，本领域技术人员应认识到，根据本发明披露的内容，在不偏离本发明精神和范围的情况下，可以对所披露的特定实施例进行许多改变并，获得相同或相似的技术效果。
实施例1化学式(2)的化合物的制备A.化学式(2)的化合物的制备，其中R1为甲基，而X为共价键
3，4-二乙酰氧基-2-(2，6-二氯嘌呤-9-基)-5-(2-氧代丙氧基)四氢呋喃，化学式(1)的化合物(1mmol)悬浮在1∶4的甲基胺/MeOH的混合物中，该混合物在室温下搅拌24小时。减压下除去溶剂，残余物在醚中研磨，得到(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(甲氨基)嘌呤-9-基]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇(酚)，即白色固体状化学式(2)的化合物。
B.化学式(2)的化合物的制备，改变R1和X类似地，按照上述1A的步骤，但用丙胺和3-碘苯胺代替甲胺，制备以下化学式(2)的化合物(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(丙氨基)嘌呤-9-基]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；以及(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(3-碘苯胺基)嘌呤-9-基]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇。
C.化学式(2)的化合物的制备，改变R1和X类似地，按照上述1A的步骤，但用化学式R1XNH2的其它化合物代替甲胺，制备以下化学式(2)的化合物(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(乙氨基)嘌呤-9-基]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(正丙基氨基)嘌呤-9-基]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(环丙基氨基)嘌呤-9-基]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(环丙基甲氨基)嘌呤-9-基]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(环戊基氨基)嘌呤-9-基]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；
(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(苯胺基嘌呤-9-基)]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(4-氯苄氨基)嘌呤-9-基]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(苄氨基)嘌呤-9-基]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(2-氟苄氨基)嘌呤-9-基]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(吡啶-2-基氨基)嘌呤-9-基]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；以及(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(吡咯-3-基氨基)嘌呤-9-基]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；D.化学式(2)化合物的制备，改变R1和X类似地，按照上述1A的步骤，但用化学式R1XNH2的其它化合物代替甲胺，制备化学式(2)的其它化合物。
实施例2化学式(3)的化合物的制备A.化学式(3)的化合物的制备，其中R1为甲基，而X为共价键
(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(甲氨基)嘌呤-9-基]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇，化学式(2)的化合物(0.5mmol)悬浮在水合肼(5mL)的混合物中，混合物在室温下搅拌24小时。减压下除去肼，残余物在醚中研磨并过滤，得到(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼基-6-(甲氨基)嘌呤-9-基]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇，即白色固体状化学式(3)的化合物。
B.化学式(3)的化合物的制备，变化R1和X类似地，按照上述2A的步骤，但用化学式(2)的丙胺和3-碘苯胺代替2-[2-氯-6-甲氨基嘌呤-9-基]-5-羟甲基四氢呋喃-3，4-二醇，制备以下化学式(3)的化合物(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼-6-(正丙基氨基)嘌呤-9-基]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；以及(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼-6-(3-碘苯胺基)嘌呤-9-基]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇。
C.化学式(3)的化合物的制备，变化R1和X类似地，按照上述2A的步骤，但用化学式(2)的其它化合物代替2-[2-氯-6-甲氨基嘌呤-9-基]-5-羟甲基四氢呋喃-3，4-二醇，制备以下化学式(3)的化合物(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼-6-(乙氨基)嘌呤-9-基]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼-6-(环丙基氨基)嘌呤-9-基]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼-6-(环丙基甲氨基)嘌呤-9-基]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼-6-(环戊基氨基)嘌呤-9-基]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼-6-(苯胺基嘌呤-9-基)-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；
(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼-6-(4-氯苄氨基)嘌呤-9-基]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼-6-(苄氨基)嘌呤-9-基]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼-6-(2-氟苄氨基)嘌呤-9-基]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼-6-(吡啶-2-基氨基)嘌呤-9-基]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼-6-(吡咯-3-基氨基)嘌呤-9-基]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇。
D.化学式(3)化合物的制备，不同的R1和X类似地，按照上述2A的步骤，但用化学式(2)的其它化合物代替2-[2-氯-6-甲氨基嘌呤-9-基]-5-羟甲基四氢呋喃-3，4-二醇，制备化学式(3)的其它化合物。
实施例3化学式(I)的化合物的制备A.化学式(I)的化合物的制备，其中R1为甲基，R2为4-(4-甲氧基苯基)吡唑-1-基，而X为共价键 化学式I
(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼-6-(甲胺)嘌呤-9-基]-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇(0.5mmol)悬浮在3mL乙醇中，并向悬浮液中加入化学式(4)的化合物2-(4-甲氧基苯基)丙醛。该混合物加热回流5小时，并将形成的沉淀过滤收集，用乙醇和醚洗涤，以得到(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(甲胺)嘌呤-9-基}-草脲胺(oxolane)-3，4-二醇，即化学式I的化合物，Ms，455.43(M+1)。
B.化学式I化合物的制备，变化R1、R2、和X类似地，按照上述3A的步骤，但用化学式(3)的其它化合物可选代替2-[2-肼-6-甲氨基嘌呤-9-基]-5-羟甲基四氢呋喃-3，4-二醇，并用化学式(4)的其它化合物可选代替2-(4-甲氧基苯基)丙醛制备以下化学式I的化合物(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(4-乙氧基羰基)吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(4-乙氧基羰基)吡唑基]-6-(正丙基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(4-乙氧基羰基)吡唑基]-6-(3-碘苄基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(3-乙氧基羰基)吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(4-乙氧基羰基)吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(3-乙氧基羰基)吡唑基]-6-(3-碘苄基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(酰氨基)吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；
(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(甲基酰氨基)吡唑基]-6-(正丙基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(乙基酰氨基)吡唑基]-6-(3-碘苄基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(丙基酰氨基)吡唑基]-6-(3-碘苄基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(环戊基酰氨基)吡唑基]-6-(3-碘苄基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(乙基酰氨基)吡唑基]-6-(3-碘苄基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(4-甲基苯基)吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(4-甲基苯基)吡唑基]-6-(环戊基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(正丙基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(3-碘苄基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(4-氯苯基)吡唑基]-6-(3-碘苄基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[4-(嘧啶-5-基)吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[4-(嘧啶-5-基)吡唑基]-6-(3-碘苄基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[4-(吡啶-2-基)吡唑基]-6-(正丙基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[4-(吡啶-2-基)吡唑基]-6-(3-碘苄基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；
(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[4-(吡啶-4-基)吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[4-(吡啶-4-基)吡唑基]-6-(3-碘苄基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[4-(吡啶-2-基)吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[4-(苯并噁唑-2-基)吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[4-(苯并噁唑-2-基)吡唑基]-6-(3-碘苄基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[4-(吡啶-2-基)吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[4-(喹啉-2-基)吡唑基]-6-(3-甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[4-(异喹啉-1-基)吡唑基]-6-(3-碘苄基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[3，5-二甲基吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-正丁基-3，5-二甲基吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；以及(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-正丙基-3，5-二甲基吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇。
C.化学式I的化合物的制备，改变R1，R2和X类似地，按照上述3A的步骤，但用化学式(3)的其它化合物可选代替2-(2-肼-6-甲氨基嘌呤-9-基)-5-羟甲基四氢呋喃-3，4-二醇，并用化学式(4)的其它化合物可选代替2-(4-甲氧基苯基)丙醛制备以下化学式I的化合物
(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(乙氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(乙氧基羰基)吡唑基}-6-(乙氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(正丙基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(环丙基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(环丙基甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(丙基酰氨基)吡唑基]-6-(环丙基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(苯胺基嘌呤-9-基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[(吡啶-4-基)吡唑基}-6-(3-碘苄基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(苄氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(2-氟苄氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(吡咯-2-基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；以及(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(吡咯-3-基甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇。
D.化学式I的化合物的制备，变化R1、R2、和X类似地，按照上述3A的步骤，但用化学式(3)的其它化合物可选代替2-(2-肼-6-甲氨基嘌呤-9-基)-5-羟甲基四氢呋喃-3，4-二醇，并用化学式(4)的其它化合物可选代替2-(4-甲氧基苯基)丙醛制备以下化学式I的化合物实施例4化学式(12)的化合物的制备A.化学式(12)的化合物的制备，其中R1为甲基 40％的水合甲胺(1mL)与2-碘腺苷(100mg)的混合物在甲醇(2mL)中于室温下搅拌12小时。过滤沉淀物，用醚洗涤并在真空下干燥，得到化学式(11)的化合物，2-碘-6-甲氨基腺苷。
B.化学式(12)的化合物的制备，变化R1类似地，按照上述4A的步骤，但用化学式R1NH2的其它胺取代甲胺，制备以下化学式(11)的化合物2-碘-6-正丙基氨基腺苷；和2-碘-6-(3-碘苄基)氨基腺苷。
C.化学式(12)的化合物的制备，变化R1类似地，按照上述4A的步骤，但用化学式HNRR的其它胺取代甲胺，制备以下化学式(11)的化合物2-碘-6-乙基氨基腺苷；2-碘-6-异丙基氨基腺苷；
2-碘-6-正己基氨基腺苷；2-碘-6-环丙基氨基腺苷；2-碘-6-环戊基氨基腺苷；2-碘-6-(3-羟基环戊基)氨基腺苷；2-碘-6-环戊基甲氨基腺苷；2-碘-6-苯基氨基腺苷；2-碘-6-苄基氨基腺苷；2-碘-6-(4-甲氧基苄基)氨基腺苷；2-碘-6-(4-氟苄基)氨基腺苷；2-碘-6-(吡啶-3-基)氨基腺苷；以及2-碘-6-(呋喃-2-基)氨基腺苷。
D.化学式(12)的化合物的制备，变化R1类似地，按照上述4A的步骤，但用化学式HNRR的其它胺替代甲胺，制备化学式(11)的其它化合物。
实施例5化学式I的化合物的制备A.化学式I的化合物的制备，其中R1为甲基，R2为3-苯氧基丙炔-1-基，而R8为苯基
在23℃下将溶于N，N-二甲基甲酰胺(1ml)和三乙基胺(0.021mL，0.16mmol)的2-碘-6-甲氨基腺苷(50mg)和丙-2-炔基羟苯(0.022mL，0.16mmol)的溶液中加入碘化铜(5mg，0.026mmol)和二氯双-(三苯基膦)钯(II)(22mg，0.031mmol)的催化剂。在一个密闭的反应小瓶中于80℃搅拌6小时，反应(物)在真空下被浓缩，而残余物用预备的薄层色谱(二氯甲烷∶甲醇9∶1)提纯以得到(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[6-(甲氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌呤-9-基]-草脲胺(oxolane)-3，4-二醇，即化学式I的化合物，MS412.1(M+1)。
B.化学式I的化合物的制备，变化R2类似地，按照上述5A的步骤，但用化学式(7)的其它化合物代替丙-2-炔基羟苯，制备化学式I的以下化合物(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[2-(3-羟基-3-苯基丙-1-炔基)-6-(甲氨基)嘌呤-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-{2-[3-(4-氯苯氧基)丙-1-炔基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；以及(4S，2R，3R，5R)-2-{2-[3-(2-甲氧基苯氧基)丙-1-炔基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}-5-(羟甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇。
C.化学式I的化合物的制备，变化R1、R2、和X类似地，按照上述5A的步骤，但用化学式(7)的其它化合物代替丙-2-炔基羟苯，制备化学式I的以下化合物(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[6-(乙氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌呤-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[6-(正丙基氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌呤-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[6-(异丙基氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌呤-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；
(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[6-(正己基氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌呤-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[6-(环丙基氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌呤-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[6-(环戊基氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌呤-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[6-(3-羟基环戊基氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[6-(环戊基甲氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌呤-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[6-(苯基氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌呤-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[6-(苄氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌呤-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[6-(4-甲氧基苄氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌呤-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[6-(4-氟苄氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[6-(吡啶-3-基氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌呤-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；以及(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[6-(呋喃-2-基氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌呤-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇。
D.化学式I的化合物的制备，变化R1、R2、和X类似地，按照上述5A的步骤，但用化学式(7)的其它化合物代替丙-2-炔基羟苯，制备其它化学式I的化合物。
实施例6类似地，按照上述反应图解II的步骤，如美国专利第6,214,807号所述，制备化学式I的以下化合物，其中R2为可选取代的C-吡唑(1-{9-[(4S，2R，3R，5R)-3，4-二羟基-5-(羟甲基)草脲胺(oxolan)-2-基]-6-(甲氨基)嘌呤-2-基}吡唑-4-基)-N-(4-氯苯基)酰胺；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[1-苄基吡唑-4-基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[1-苄基吡唑-4-基]-6-(正丙基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[1-苄基吡唑-4-基]-6-(3-碘苯基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；以下实施例说明代表性的含有化学式I的化合物的药剂的制备，例如那些根据实施例1制备的化合物。
实施例7制备含有以下成分的硬质凝胶胶囊含量成分(mg/胶囊)活性成分 30.0淀粉 305.0硬脂酸镁 5.0混合以上成分并填充进入硬质凝胶胶囊中。
实施例8用以下成分制备片剂含量成分 (mg/片剂)活性成分25.0纤维素，微晶200.0胶体二氧化硅10.0硬脂酸 5.0将组分混合并挤压以形成片剂。
实施例9制备含有以下成分的干粉吸入剂型成分重量％活性成分 5乳糖 95将活性成分与乳糖混合，而混合物则加入干粉吸入装置。
实施例10每个含有30mg活性成分的片剂的制备如下含量成分(mg/药剂)活性成分30.0mg
淀粉 45.0mg微晶纤维素35.0mg聚乙烯吡咯烷酮(作为10％的无菌水溶液)4.0mg羧甲基钠淀粉 4.5mg硬脂酸镁 0.5mg滑石粉1.0mg合计 120mg活性成分、淀粉、和纤维素通过一个20目美国筛(No.20meshU.S.sieve)并彻底地进行混合。聚乙烯吡咯烷酮溶液与生成的粉末混合，然后通过一个16目美国筛(No.16mesh U.S.sieve)。如此制备的颗粒在50℃至60℃干燥，并通过一个16目美国筛。先前通过30目美国筛的羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁、和滑石粉加入到颗粒中，混合后，在压片机上进行挤压以得到每个重量为120mg的片剂。
实施例11每个含有25mg活性成分的栓剂的制备如下成分含量活性成分25mg饱和脂肪酸甘油酯2,000mg活性成分通过60目美国筛并悬浮在饱和脂肪酸甘油酯中，该脂肪酸甘油酯利用所需的最低热量进行熔化。然后将混合物注入公称2.0g的栓剂摸具中并使其冷却。
实施例12每个含有50mg活性成分/5.0mL剂量的混悬剂的制备如下成分含量活性成分 50.0mg黄原胶4.0mg羧甲基纤维素钠(11％)微晶纤维素(89％) 50.0mg蔗糖 1.75g苯甲酸钠 10.0mg香料和着色剂按所需之量纯净水，达5.0mL将活性成分、蔗糖、和黄原胶进行混合，通过10目美国筛，然后与先前制备的微晶纤维素和羧甲基纤维素钠的水溶液混合。搅拌加入用水稀释的苯甲酸钠、香料、与着色剂。然后加入足够的水以生成所需要的容积。
实施例13皮下剂型可制备如下成分量活性成分5.0mg玉米油 1.0mL
实施例14制备注射用制剂，其具有下述组分成分含量活性成分 2.0mg/ml甘露醇，美国药典(USP)50mg/ml葡糖酸，美国药典(USP)适量(PH5-6)水(蒸馏，无菌) 适量至1.0ml氮气，美国处方集(NF) 适量实施例15制备了局部用制剂，其具有下述组分成分克活性成分0.2-10山梨糖醇酯类(Span60) 2.0吐温(Tween60) 2.0矿物油5.0凡士林0.10羟苯甲酸甲酯(methyl paraben) 0.15对羟苯甲酸丙酯(propyl paraben)0.05BHA(丁基化羟基苯甲醚) 0.01水适量至100
除水之外，合并所有上述其他成分并加热到60℃，同时搅拌。然后，在60℃下加入足量的水，同时剧烈搅拌，以便对成分进行乳化，然后加入适量至100g的水。
实施例16缓释组合物重量 优选最优选的成分范围(％) 范围(％)范围(％)活性成分 50-95 70-90 75微晶纤维素(充填剂)1-35 5-1510.6甲基丙烯酸共聚物 1-35 5-12.5 10.0氢氧化钠 0.1-1.0 0.2-0.6 0.4羟丙基甲基纤维素 0.5-5.0 1-3 2.0硬脂酸镁 0.5-5.0 1-3 2.0本发明的缓释剂型的制备如下将化合物和pH依赖粘合剂以及任何可选的赋形剂紧密混合(干混)。然后，在强碱水溶液存在的情况下粒化干混的混合物，该强碱水溶液被喷射入混合的粉末中。干燥颗粒，筛选，与可选的润滑剂(诸如滑石粉或硬脂酸镁)混合，并压制成片剂。优选的强碱水溶液为碱金属氢氧化物溶液，诸如氢氧化钠或氢氧化钾，优选氢氧化钠水(可选地含有高达25％的水混溶溶剂，如低级醇类)。
生成的片剂可以用可选的成膜剂进行包衣，以便于鉴定(分辨)、味道掩盖、和便于吞服。成膜剂通常存在的量位片剂重量的2％至4％之间。适当的成膜剂在本领域是熟知的，并且包括羟丙基甲基纤维素、阳离子甲基丙烯酸酯共聚物(二甲基氨乙基甲基丙烯酸酯/甲基丁基甲基丙烯酸酯共聚物-EudragitE-Rhm.Pharma)，以及类似物。这些成膜剂可选地包含着色剂、增塑剂、和其它辅助成分。
优选地，压制片剂具有足以承受8Kp压力的硬度。片剂大小将主要取决于片剂中化合物的量。这些片剂将包括300至1100mg的复合游离碱。优选地，这些片剂将包括400-600mg、650-850mg、以及900-1100mg的复合游离碱。
为了改变溶解速率，需控制含粉末化合物的湿混时间。优选地，整个粉末混合时间，即粉末暴露于氢氧化钠溶液的时间为1至10分钟，优选为2至5分钟。在成粒后，将颗粒从成粒机中移走并放置在流化床干燥器中在约60℃进行干燥。
缩写词Gpp(NH)p5’-脒基-酰亚胺二磷酸酯(5’-guanylyl-imididodiphosphate)R-PIA苯基异丙基腺苷TEM缓冲液包含50mM Tris、1mM乙二胺四乙酸(EDTA)、和10mM MgCl2的缓冲液试剂腺苷脱氨基酶自Boehringer Mannheim BiochemicalsIndianapolis，IN购买。R-PIA、DMSO、和咯利普兰(rolipram)从Sigma-RBI(Natick，MA)获得。
粘合测定(Binding Assavs)细胞培养由人类腺苷A3受体稳定地转染的CHO细胞(中国仓鼠卵巢细胞)，利用达尔伯克改良伊格尔培养基(DMEM)，在陪替氏培养皿中以单(细胞)层生长，其中是在95％的空气和5％的CO2的潮湿环境中进行的，该达尔伯克改良伊格尔培养基含有2.5μgml-1的两性酶素B、100Uml-1的青霉素G、0.1mgml-1的链霉素硫酸盐、和5％胎牛血清。通过在无二价阳离子并含有1mM EDTA的汉克斯平衡盐溶液(HBSS)中将细胞每周进行次代培养两次。然后，这些细胞在密度为每平皿1.2×105个细胞的生长培养基中接种，在大约1天预融合的4天后进行试验。
膜制备附粘的细胞用HBSS(2×10ml)洗涤2次，在4℃下5ml的50mM的pH值为7.4的三-HCl(Tris-HCl)缓冲液中，借助橡胶淀帚刮净平皿(plate)，并且悬液均化10s(秒)。然后，将该悬液在27,000xg离心10分钟。通过如上所述的涡流和离心使颗粒(pellet)再次悬浮在均化的缓冲液中。最终的颗粒再次悬浮在1vol的50mM的pH值为7.4的含有5mM MgCl2的三-HCl缓冲液中，用于粘合测定。对于[35S]GTPγS的粘合测定，最终的颗粒再次悬浮在pH值为7.4的50mM的三-HCl缓冲液中，该缓冲液含有5mM MgCl2、100mMNaCl、和1mM二硫苏糖醇。然后，将该膜悬浮体置于液氮中10分钟、融化并用于测定。以牛血清白蛋白为标准，用BradfordTM测定装置测定蛋白质含量。
竞争性粘合测定测定化学式I的化合物以确定它们对于人类腺苷A3受体的亲和性，该受体位于由CHO细胞析取的膜。简单地说，0.2mg细胞膜用具有恒定混合的腺苷脱氨基酶和50mM的Tris缓冲液(pH值＝7.4)培育。2μL连续稀释的本发明化合物DMSO储液，其浓度范围从0至100μM至10nM。该控制仅接受2μL的DMSO，然后是[3H]苯基异丙基腺苷(3H PIA)、A3受体激动剂，溶解在Tris缓冲液(50mM，pH值＝7.4)中并加入到细胞(最终浓度为2nM)。在23℃培育2小时后，过滤溶液，并将过滤盘放置在闪烁鸡尾酒(scintillation cocktail)中。用本发明的竞争性粘合组合物代替[3H]苯基异丙基腺苷的测定通过闪烁计数确定。
由取代试验生成的数据通常用称为取代曲线的S形曲线进行拟合，即专门结合的放射性标记的配位体与log[取代剂]M的百分比。该曲线拐点的的横坐标给出IC50值，即取代或抑制专门结合的50％放射性配位体的取代剂浓度。IC50是取代剂对于受体的抑制剂或的亲和常数(Ki)量度。如果取代属竞争型，则IC50与Ki的关系如下Ki＝IC50/(1+[C*]/Kd*这就是Cheng-Prusoff等式(Biochem.Pharmacol，223099(1973))其中，[C*]是放射性配位体的浓度，而Kd*是其离解常数。
实施例17[35S]GTPγS的粘合测定腺苷A3激动剂刺激[35S]GTPγS粘合的能力通过Lorenzen et al.(1996 Mol.Pharmacol.49915)所述的方法的修改方法来测定。简单地说，与CHO细胞(30-50μg)分离的膜在0.1ml体积的溶液中培育，该溶液包括50mM的Tris-HCl缓冲液(pH值＝7.4)、5mMMgCl2、100mM NaCl、和1mM二硫苏糖醇、0.2单位ml-1腺苷脱氨基酶、0.5％BSA、1mM EDTA、10mM GDP、和0.3nM[35S]GTPγS。加入不同浓度的PIA或假定的A3激动剂，而细胞在30℃培育90分钟。通过向一些膜悬浮体中加入10μM的GTPγS来测定非特性粘合。在培育末期，过滤各悬液并按如上所述测定残留的放射性。
实施例18cAMP测定化合物抑制弗司扣林(forskolin)刺激的cAMP积累的能力通过培育CHO1细胞来测定，该细胞置于底部清洁的96井(well)微量滴定平皿中，在37℃40ul浓度在每井104至106个细胞之间的HBSS中(5％CO2和95％湿度)。CHO细胞用不同浓度下假定的腺苷A3受体的激动剂在咯利普兰(50uM)和5uM弗司扣林存在下于37℃培育10分钟。细胞经5ul的10％十二烷基三甲基溴化胺处理并随后用微盘晃动器晃动后，细胞立即溶解。
通过Harper和Brooker(1975.J.Cyclic nucleotide Res 1207)所述的放射性免疫测定方法的修改方法测定上清液中cAMP含量。简单地讲，上清液的等分试样(0.01mL)与以下物质混合，即0.04mL的HBSS、含有10mmol/L CaCl2的0.05mL 50mmol/L醋酸钠缓冲液(pH值为6.2)、[125I]ScAMP-TME(12500dpm)、以及0.05mL的抗-cAMP抗体(1∶2000稀释于蒸馏水中的0.1％的牛血清清蛋白)。然后，将样品在4℃培育16小时。培育末期，每个管中加入70μl50％(wt/vol)的羟基磷灰石悬浮液。轻轻搅拌悬浮液，然后在4℃培育10分钟。吸收了抗体结合放射性的羟基磷灰石被收集至玻璃纤维过滤器中，该收集通过使用Brandel细胞收集器依靠真空过滤而实现。由过滤器保留的放射性用微克(gamma)自动取样计数器计数。结果表示为总[I125I]ScAMP结合(bound)减去非特性[125I]ScAMP-TME结合的量(即，在3μmol/L未标记的cAMP存在下[I125I]ScAMP结合的量)。
尽管本发明已经参照其特定的实施例进行了说明，但是，对于本领域的技术人员来说，在不偏离本发明真实精神和范围的情况下，可以有各种变更和等同替换。此外，在本发明的精神和范围内可以进行许多变更以适应特定的场合、材料、物质的组和物、工艺、一个工艺步骤或多个工艺步骤。所有这些等变更都由本申请的保护范围的内容涵盖。上文引用的所有专利和出版物结合于此作为参考。
权利要求
1.一种化学式I的化合物 化学式I其中，R1是可选取代的低级烷基、可选取代的环烷基、可选取代的芳基、或可选取代的杂芳基；X是共价键或可选取代的亚烷基；R2是R4-Z-Y-C≡C-或可选取代的吡唑基其中Y是可选取代的亚烷基，Z是氧、硫或-NH-，而R4是可选取代的芳基或可选取代的杂芳基；以及R3是羟甲基或-C(O)-NR5R6；其中R5和R6独立地是氢或低级烷基。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中R2是可选取代的吡唑-1-基。
3.根据权利要求2所述的化合物，R1是可选取代的烷基或可选取代的芳基，而R3是羟甲基。
4.根据权利要求3所述的化合物，其中R2是由可选取代的低基烷基、酯、氨羰基、可选取代的芳基、或可选取代的杂芳基所取代的吡唑-1-基。
5.根据权利要求4所述的化合物，其中吡唑-1-基由可选取代的苯基或可选取代的苄基取代。
6.根据权利要求5所述的化合物，其中R1是可选取代的低级烷基，而X是共价键。
7.根据权利要求6所述的化合物，其中R1是甲基，而R2是4-(4-甲氧基苯基)吡唑-1-基，即(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺-3，4-二醇。
8.根据权利要求6所述的化合物，其中R1是正丙基，而R2是4-(4-甲氧基苯基)吡唑-1-基，即(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(正丙基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺-3，4-二醇。
9.根据权利要求6所述的化合物，其中R1是甲基，而R2是4-(4-氯苄基氨羰基)吡唑-1-基，即(1-{9-[(4S，2R，3R，5R)-3，4-二羟基-5-(羟甲基)草脲胺-2-基]-6-(甲氨基)嘌呤-2-基}吡唑-4-基)-N-(4-氯苯基)羧酰胺。
10.根据权利要求6所述的化合物，其中R1是甲基，而R2是4-(4-氯苄基氨羰基)吡唑-1-基，即(1-{9-[(4S，2R，3R，5R)-3，4-二羟基-5-(羟甲基)草脲胺-2-基]-6-(甲氨基)嘌呤-2-基}吡唑-4-基)-N-(4-氯苯基)羧酰胺。
11.根据权利要求4所述的化合物，其中R2是由可选取代的杂芳基取代的吡唑-1-基。
12.根据权利要求11所述的化合物，其中R1是正丙基，而R2是4-(吡啶-2-基)吡唑-1-基，即(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-[4-(吡啶-2-基)吡唑基]-6-(正丙基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺-3，4-二醇。
13.根据权利要求5所述的化合物，其中R1是可选取代的芳基，而X是亚烷基。
14.根据权利要求13所述的化合物，其中R1是3-碘苄基，而R2是4-(4-甲氧基苯基)吡唑-1-基，即(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[4-(4-(甲氧基苯基)吡唑基)-6-(3-碘苄氨基)嘌呤-9-基]草脲胺-3，4-二醇。
15.根据权利要求1所述的化合物，其中R2是可选取代的吡唑-4-基。
16.根据权利要求15所述的化合物，其中R1是可选取代的烷基或可选取代的芳基，R3是羟甲基，而X是共价键。
17.根据权利要求16所述的化合物，其中R1是甲基，R2是1-苄基吡唑-4-基，R3是羟甲基，而X是共价键，即(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[1-苄基吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺-3，4-二醇。
18.根据权利要求16所述的化合物，其中R1是正丙基，R2是1-苄基吡唑-4-基，R3是羟甲基，而X是共价键，即(4S，2R，3R，5R)-5-(羟甲基)-2-{2-[1-苄基吡唑基]-6-(正丙氨基)嘌呤-9-基}草脲胺-3，4-二醇。
19.根据权利要求1所述的化合物，其中R2是R4-Z-Y-C≡C-。
20.根据权利要求19所述的化合物，其中R4是可选取代的苯基，而Y是1-3个碳原子的亚烷基。
21.根据权利要求20所述的化合物，其中R4是由甲氧基或氯基可选取代的苯基，而Y是亚甲基。
22.根据权利要求21所述的化合物，其中R1是可选取代的烷基，X是共价键，而R3是羟甲基。
23.根据权利要求22所述的化合物，其中R1是甲基，R4是苯基，而Z是氧，即2-羟甲基-5-[6-甲基氨基-2-(3-苯氧基丙炔-1-基)嘌呤-9-基]-四氢呋喃-3，4-二醇。
24.一种可通过A3腺腺苷受体激动剂的治疗缓解的哺乳动物疾病状态的治疗方法，所述方法包括给予需要的哺乳动物有效治疗剂量的权利要求1所述的化合物。
25.根据权利要求24所述的方法，其中所述疾病状态是癌症。
26.根据权利要求24所述的方法，其中所述疾病状态是嗜中性白细胞减少症。
27.一种药物组合物，包括至少一种药用赋形剂，以及治疗有效剂量的权利要求1所述的化合物。
28.一种制备化学式I化合物的方法 化学式I其中，R2是可选取代的吡唑-1-基；包括将化学式(3)的化合物 与化学式(4)的化合物接触
29.根据权利要求28所述的方法，其中反应可在以下惰性溶剂中完成，所述惰性溶剂选自甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、和叔丁醇。
30.一种制备化学式I化合物的方法 化学式I其中，R2是可选取代的吡唑-4-基；包括化学式(8)的化合物 与化学式(9)的化合物 在溶于惰性溶剂的钯络合物和铜盐的存在下接触，并将产物与弱酸接触。
31.根据权利要求30所述的方法，其中所述钯络合物为Pd(PPh3)4，所述铜盐为CuI，所述惰性溶剂为N，N-二甲基甲酰胺，而所述弱酸为氟化胺。
32.一种制备权利要求1所述的化合物的方法，其中R2是R4-Z-Y-C≡C-；包括在惰性溶剂中，将化学式(12)的化合物 与化学式(13)的化合物 在弱碱、铜盐、及钯催化剂的存在下接触。
33.根据权利要求32所述的方法，其中所述惰性溶剂为N，N-二甲基甲酰胺，所述碱为三乙基胺，所述铜盐为碘化铜，所述钯催化剂为二氯双-(三苯膦)钯(II)。
全文摘要
本发明涉及化学式I的新型化合物，该化合物是A3腺苷受体激动剂，该化合物对于治疗诸如癌症、心脏缺血、白细胞减少、和嗜中性白细胞减少症等各种疾病状态有益。化学式(I)中，R
文档编号C07H19/173GK1538972SQ02815486
公开日2004年10月20日 申请日期2002年8月6日 优先权日2001年8月8日
发明者埃尔法蒂赫·埃尔扎因, 文卡塔·帕勒, 维布哈夫·瓦尔凯赫特卡, 杰夫·扎布沃茨基, 帕勒, 埃尔法蒂赫 埃尔扎因, 夫 瓦尔凯赫特卡, 扎布沃茨基 申请人:Cv医药有限公司