专利名称：茶多酚混合物的分离方法
技术领域：
本发明涉及一种茶多酚混合物的分离方法，特别是从茶叶粗提物中提取纯化EGEG的方法。
背景技术：
研究表明，茶叶有效成分中抗氧化活性最强的为EGEG，虽然含量高，但分离纯化困难，因而价格昂贵；现有的生产方法采用制备色谱原理，从成本上看，树脂填料非常昂贵，用此方法进行产业化生产尚不现实。
发明内容
本发明的目的在于提供一种茶多酚混合物的分离方法，它是用工业化规模树脂分离法生产EGEG的方法；其设备简单，产品成本核算低，产品纯度高，适应规模化生产需要。本发明是这样实现的它包括树脂柱准备，洗脱分离，酸化浓缩，干燥等步骤(1)将中极性或弱极性吸附树脂，干法装入带保温层的树脂柱，然后，采用减压法将配好的60℃洗脱液从下部吸入树脂柱，洗脱液液面高于树脂法5cm后，停止进液，改由上部直接自上而缓慢进洗脱液，接收流出液超过2倍树脂体积后，加快进液，至树脂层稳定悬浮树脂时停止，树脂柱准备完毕；(2)茶叶茶多酚粗提粉(多酚含量大于90％)，用洗脱液溶解，保温在60℃，上样，至流出液多酚成分检测出，采用60℃洗脱液洗脱树脂层。收集洗脱注并用高效液相色谱法检测多酚纯度。EGEG含量达到98％以上时，收集集中洗脱液，否则将洗脱液升温至60℃后重复本步骤，循环流经色谱柱，至达到要求；(3)达到纯度要求的洗脱液填加柠檬酸作保护剂后，进行真空干燥或冷冻干燥得到EGEG含量98％以上纯度产品；与现有技术相比，本发明具有工艺简单、生成成本低、产品纯度高、附加值高的特点，适宜工业化生产，综合利用了茶叶提取物产品，本发明已通过工业化生产试验验证。
本发明的实施例1(1)取LSA-7树脂100毫升，干法填充在20×150树脂柱，树脂柱外用保温层覆盖保温。上部按真空从下部进温度为60℃的乙醇∶水＝90∶10的洗脱液，至液面高出树脂层2厘米，关进液口，取消真空。从上口流加洗脱液，然后打开下口流出液。流出液流速为1BV/H，至流出液为2BV时，停止进洗脱液。
(2)10克茶多酚含量为92％的茶叶提取物用100毫升洗脱液溶解，升温至60℃后，进样到色谱柱后，用60℃洗脱液冲洗吸附柱，检测流出液EGEG浓度为93.4％。收集流出液至其中无EGEG止。
(3)将流出液按步骤(2)方法重新上柱吸附洗脱，检测流出液中EGEG纯度为98.3％。收集流出液，至流出液中无EGEG检出，收集流出液5000毫升。
(4)将EGEG纯度为98.3％的流出液加柠檬酸0.2克，搅拌溶解后，真空减压60℃下回收乙醇，继续浓缩至膏状，真空干燥得4.32克无色粉末EGEG纯度98.8％，以原料中EGEG含量计收率95.4％。
本发明的实施例2(1)取SIPI-49树脂100毫升，干法填充在20×150树脂柱，树脂柱外用保温层覆盖保温。上部按真空从下部进温度为60℃的丙醇∶水＝90∶10的洗脱液，至液面高出树脂层2厘米，关进液口，取消真空。从上口流加洗脱液，然后打开下口流出液。流出液流速为1BV/H，至流出液为2BV时，停止进洗脱液。
(2)10克茶多酚含量为92％的茶叶提取物用100毫升洗脱液溶解，升温至60℃后，进样到色谱柱后，用60℃洗脱液冲洗吸附柱，检测流出液EGEG浓度为95.6％。收集流出液至其中无EGEG止。
(3)将流出液按步骤(2)方法重新上柱吸附洗脱，检测流出液中EGEG纯度为98.7％。收集流出液，至流出液中无EGEG检出，收集流出液5400毫升。
(4)将EGEG纯度为98.7％的流出液加柠檬酸0.1克，搅拌溶解后，真空减压60℃下回收丙醇，继续浓缩至膏状，真空干燥得4.67克无色粉末EGEG纯度98.2％，以原料中EGEG含量计收率94.3％。
权利要求
1.一种茶多酚混合物的分离方法，特别是从高纯度茶多酚中分离纯化表棓儿茶素、没食子酸酯(EGEG)的方法，它包括树脂柱的填添，循环色谱或模拟移动床色谱分离及结晶干燥等步骤，其待征在于(1)所用层析分离填料为全盛中极性或弱极性吸附树脂，如聚丙烯酸或其酯类联树脂，型号有LSA-7，IIPD-800，SIPI-40；(2)将树脂填料直接干法装入带保温层树脂柱，然后采用减压法从下部吸入定量洗脱液，然后采用正向自上而下冲洗树脂层，并用60℃洗脱液平衡树脂柱；(3)将茶叶提取物，即总茶多酚溶解在洗脱液中，升温至60℃，上样，液态上样后，用60℃洗脱液洗脱树脂柱，流出液用HPLC检测EGEG含量，未达要求纯度则升温后循环上样；(4)装置可循环色谱柱或胜模拟移动床色谱系统进行分离；(5)洗脱液组成为丙醇、异甲醇、乙醇分别混合与水的不同体积比的混合液，体积比从100∶0至50∶50；(6)树脂柱的再生采用洗脱液反向逆流真空进液后，再按(1)方式平衡、稳定；(7)达到指标的洗脱液填加柠檬酸混合后低温真空蒸发，回收有机溶剂，得浓膏后喷雾干燥或真空干燥或冷冻干燥，得成品。
全文摘要
本发明公开了一种茶多酚混合物的分离方法，包括树脂柱的准备、循环色谱分离、结晶干燥等步骤，具有工艺简单、生成成本低、产品纯度高、附加值高，并可适宜工业化生产等优势，综合利用了茶叶提取物产品，本发明已通过工业化生产试验验证。
文档编号C07C69/00GK1546485SQ20031011118
公开日2004年11月17日 申请日期2003年12月12日 优先权日2003年12月12日
发明者汤华钊 申请人:贵州家诚药业有限责任公司