专利名称：红豆杉属植物提取物和该提取物的提取方法及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种植物提取物及其提取工艺和作为抗癌药物的应用，具体涉及一种从红豆杉属植物修剪下来的枝叶中提取的抗癌药物的有效成分及其提取工艺和作为抗癌药物的应用。
背景技术：
我国每年死于癌症的病人日趋增多，癌症已经成为当今社会严重危害人体健康的疾病之一。从红豆杉属植物提取的紫杉醇用于治疗癌症，经临床实践证明疗效确切。但是紫杉醇的提取主要来源于红豆杉属植物的树皮中，而且含量极低，结果造成红豆杉属植物的死亡、灭绝。CN 1112433A中公开了一种“红豆杉属植物提取物及其应用”，该提取物中含有紫杉醇，紫杉醇作为药物使用其副作用较大，一般患者难以承受。
发明内容
本发明的目的是提供一种红豆杉属植物提取物和该提取物的提取方法及其应用，它既解决了红豆杉属植物永续利用的问题，又在保证疗效的前提下，提高了红豆杉属植物的利用率，从单一提取紫杉醇利用率不足万分之二提高到千分之五以上。本发明的红豆杉属植物是以东北红豆杉的枝叶为原料提取而成的，它包括下述成分紫杉烷二萜化合物、总木脂素、总黄酮。其提取方法按照下述步骤进行制备a、将红豆杉属植物药材的枝叶用体积浓度为40～95％的乙醇溶剂回提1～3小时，浓缩成原浸膏；b、然后加入原浸膏重量30～80倍的蒸馏水，在60～80℃或超声的条件下溶解原浸膏，静置后过滤离心、沉淀；c、用体积浓度为50～90％的乙醇在60～80℃或超声的条件下提取上述沉淀物，提取三次，乙醇每次的加入量为沉淀物重量的5～15倍，静置后过滤、离心；d、合并乙醇提取液，向提取液中加入乙醇，配制成含醇量为20～40％、体积为上述原浸膏30～70倍的溶液；e、将上述溶液通过大孔吸附树脂层析柱，大孔吸附树脂的用量为原浸膏重量的10～20倍；f、用体积浓度为20～40％的乙醇溶液上柱，冲洗至色淡，乙醇用量为柱体积的8～12倍，流速0.5～1.5柱体积/小时；g、然后用体积浓度为40～60％的乙醇溶液上柱，冲洗至色淡，乙醇用量为柱体积的8～15倍，流速0.5～1.5柱体积/小时；h、再用体积浓度为65～80％的乙醇溶液上柱，冲洗至色淡，乙醇用量为柱体积的10～15倍，流速0.5～1.5柱体积/小时；I、分别收集洗脱液，减压浓缩至干，得到红豆杉属植物的提取物。该提取物可以作为抗癌药物的有效成分。本发明的提取物作为抗癌药物的有效成分使用时，该药物可以按照制药领域中常规方法加工成各种剂型，如注射剂、片剂、胶囊等。本发明的红豆杉属植物提取物是以东北红豆杉为原料精制而成，红豆杉具有防癌抗癌作用，能够抑制癌细胞的生长和发展，同时还能提高人体的循环和代谢功能，使堆集在人体内的病毒通过利尿、排便清除到体外，达到预防癌症的作用，对已得癌症的患者特别是手术后的患者，可减少放疗化疗的副作用，起到辅助治疗的作用。本发明的红豆杉属植物提取物以紫杉烷二萜化合物、总木脂素和总黄酮为主要成分，其中紫杉烷二萜化合物具有独特的抗肿瘤作用，它能与微管蛋白结合形成稳定的稳管束并使被解聚，将癌细胞停止在G2晚期或M期，抑制细胞复制，阻止癌细胞Z增殖；总木脂素具有抗肿瘤的活性；黄酮具有抗氧化作用(清除自由基)和对多种生物酶活性的影响作用；紫杉烷二萜化合物、总木脂素和总黄酮配伍后，不仅提高了药物的疗效，而且具有提高人体免疫力的作用。本发明的药物主要用于治疗肺癌、黑色素瘤、乳腺癌等。该药对手术后的患者服用效果明显，可替代或配合放、化疗进行治疗，对患者肺癌症状的改善主要表现在止咳、止血、止痛作用上，而且效果显著。同时对患者的食欲、体质等也有显著的改善。本发明是利用红豆杉属植物枝叶新的药用部位制成的药物，它含有多种抗癌有效成份，具有得率高、成本低等特点，其抗癌效果不低于紫杉醇，同时又实现了红豆杉属植物的永续利用，而且副作用极低。在保证疗效的前提下，提高了红豆杉属植物的利用率，从单一提取紫杉醇利用率不足万分之二提高到千分之五以上，利用率提高25倍以上。
具体实施例方式具体实施方式
一本实施方式的红豆杉属植物提取物是以东北红豆杉的枝叶为原料提取而成的，它包括下述成分紫杉烷二萜化合物、总木脂素、总黄酮。所述紫杉烷二萜化合物占三种成分总体积的18～68％、总木脂素占三种成分总体积的14～61％、总黄酮占三种成分总体积的10～50％。所述紫杉烷二萜化合物包括紫杉宁、紫杉宁B、10-去乙酰基巴卡亭III、柑桔素、10-去乙酰基紫杉宁B和紫杉云亭A；所述总木脂素包括铁杉脂素；所述总黄酮包括山奈酚。
具体实施例方式
二本实施方式的红豆杉属植物提取物按照下述步骤进行制备a、将红豆杉属植物药材的枝叶用体积浓度为40～95％的乙醇溶剂回提1～3小时，浓缩成原浸膏；b、然后加入原浸膏重量30～80倍的蒸馏水，在60～80℃或超声的条件下溶解原浸膏，静置后过滤离心、沉淀；c、用体积浓度为50～90％的乙醇在60～80℃或超声的条件下提取上述沉淀物，提取三次，乙醇每次的加入量为沉淀物重量的5～15倍，静置后过滤、离心；d、合并乙醇提取液，向提取液中加入乙醇，配制成含醇量为20～40％、体积为上述原浸膏30～70倍的溶液；e、将上述溶液通过大孔吸附树脂层析柱，大孔吸附树脂的用量为原浸膏重量的10～20倍；f、用体积浓度为20～40％的乙醇溶液上柱，冲洗至色淡，乙醇用量为柱体积的8～12倍，流速0.5～1.5柱体积/小时；g、然后用体积浓度为40～60％的乙醇溶液上柱，冲洗至色淡，乙醇用量为柱体积的8～15倍，流速0.5～1.5柱体积/小时；h、再用体积浓度为65～80％的乙醇溶液上柱，冲洗至色淡，乙醇用量为柱体积的10～15倍，流速0.5～1.5柱体积/小时；I、分别收集洗脱液，减压浓缩至干，得到红豆杉属植物的提取物，即作为抗癌药物的有效成分，收率为20～70％，其中各成分的收率为紫杉烷二萜化合物8～25％、总木脂素7～20％、总黄酮5～15％，上述成分经红外、紫外、核磁共振，质谱检测，其结构式为紫杉宁 紫杉云亭A
紫杉宁B 10-去乙酰基巴卡亭III 10-去乙酰基紫杉宁B山奈酚 铁杉脂素 柑桔素具体实施方式
三本实施方式的红豆杉属植物提取物作为治疗肺癌、黑色素瘤、乳腺癌的抗癌药物的有效成分。
药效学实验综述一、病例选择的标准1、肺癌40例，其中男性22例，女性18例，年龄最小29岁，最大55岁，平均年龄43岁，病程最短2年，最长10年。
2、乳腺癌32例，均为女性，年龄最小33岁，最大54岁，平均年龄44岁，病程最短1年，最长11年。
3、黑色素瘤25例，其中男性20例，女性5例，年龄最小44岁，最大62岁，平均年龄50岁，病程最短5年，最长20年。
二、疾病的诊断标准
1、肺癌咳嗽、痰中带血、胸痛、气促。
2、乳腺癌疼痛或感觉一侧或两侧乳房胀满、乳头溢液。
3、黑色素瘤迅速长大的黑色素结节。
三、用药所含成份由红豆杉属植物提取物制成的注射剂(500mg)。
四、用药方法7～10天为一疗程，每天注射一次。
五、疗效的判断标准1、痊愈症状完全消失。
2、显效症状明显好转。
3、有效症状基本好转。
4、无效症状没有改变。
六、疗效结果分析
药效学初步研究发现125mg/kg的情况下，应红豆杉属植物提取物作为抗癌药物的应用的疗效达68％，未见任何毒性，其治疗指数要大于紫杉醇，有效情况下的毒性明显低于紫杉醇。
权利要求
1.红豆杉属植物提取物，其特征在于它是以东北红豆杉的枝叶为原料精制而成的，它包括下述成分紫杉烷二萜化合物、总木脂素、总黄酮。
2.根据权利要求1所述的红豆杉属植物提取物，其特征在于紫杉烷二萜化合物占三种成分总体积的18～68％、总木脂素占三种成分总体积的14～61％、总黄酮占三种成分总体积的10～50％。
3.根据权利要求1或2所述的红豆杉属植物提取物，其特征在于所述紫杉烷二萜化合物包括紫杉宁、紫杉宁B、10-去乙酰基巴卡亭III、柑桔素、10-去乙酰基紫杉宁B和紫杉云亭A。
4.根据权利要求1或2所述的红豆杉属植物提取物，其特征在于所述总木脂素包括铁杉脂素。
5.根据权利要求1或2所述的红豆杉属植物提取物，其特征在于所述总黄酮包括山奈酚。
6.红豆杉属植物提取物的提取方法，其特征在于它按照下述步骤进行制备a、将红豆杉属植物药材的枝叶用体积浓度为40～95％的乙醇溶剂回提1～3小时，浓缩成原浸膏；b、然后加入原浸膏重量30～80倍的蒸馏水，在60～80℃或超声的条件下溶解原浸膏，静置后过滤离心、沉淀；c、用体积浓度为50～90％的乙醇在60～80℃或超声的条件下提取上述沉淀物，提取三次，乙醇每次的加入量为沉淀物重量的5～15倍，静置后过滤、离心；d、合并乙醇提取液，向提取液中加入乙醇，配制成含醇量为20～40％、体积为上述原浸膏30～70倍的溶液；e、将上述溶液通过大孔吸附树脂层析柱，大孔吸附树脂的用量为原浸膏重量的10～20倍；f、用体积浓度为20～40％的乙醇溶液上柱，冲洗至色淡，乙醇用量为柱体积的8～12倍，流速0.5～1.5柱体积/小时；g、然后用体积浓度为40～60％的乙醇溶液上柱，冲洗至色淡，乙醇用量为柱体积的8～15倍，流速0.5～1.5柱体积/小时；h、再用体积浓度为65～80％的乙醇溶液上柱，冲洗至色淡，乙醇用量为柱体积的10～15倍，流速0.5～1.5柱体积/小时；I、分别收集洗脱液，减压浓缩至干，得到红豆杉属植物的提取物。
7.红豆杉属植物提取物的应用，其特征在于它作为治疗肺癌、黑色素瘤、乳腺癌的抗癌药物的有效成分。
全文摘要
红豆杉属于植物提取物和该提取物的提取方法及其应用，它涉及一种植物提取物及其提取工艺和作为抗癌药物的应用。本发明的红豆杉属植物提取物是以东北红豆杉的枝叶为原料提取而成的，它包括下述成分紫杉烷二萜化合物、总木脂素、总黄酮。红豆杉的枝叶经浓缩、提取后，减压浓缩得到红豆杉属植物提取物，该提取物可以作为抗癌药物的有效成分。本发明是利用红豆杉属植物枝叶新的药用部位制成的药物，它含有多种抗癌有效成分，具有得率高、成本低等特点，其抗癌效果不低于紫杉醇，同时又实现了红豆杉属植物的永续利用，而且副作用极低。在保证疗效的前提下，利用率提高25倍以上。
文档编号C07D305/14GK1594247SQ200410043649
公开日2005年3月16日 申请日期2004年6月23日 优先权日2004年6月23日
发明者王志国 申请人:黑龙江省紫杉科技股份有限公司