专利名称：白桦脂醇和白桦酯酸的提取纯化方法
技术领域：
本发明与用白桦树皮提取白桦酯醇和白桦酯酸的提取纯化方法有关。
背景技术：
白桦脂醇、白桦脂酸是羽扇豆烷型的五环三萜类化合物，具有多种生物活性，如抗肿瘤、抗病毒、抗菌、防止衰老、脱发等，是非常具有运用和开发前景的一类化合物。已有的分离纯化方法多采用有机试剂提取，多次柱层折的方法，操作复杂，得率低，成本高，不适用于工业化大生产的要求。因此其相关产品也未得到开发运用。
发明的内容本发明的目的是提供一种工艺流程简单，生产成本低，生产效率高的白桦脂醇和白桦脂酸的提取纯化方法。
本发明是这样实现的本发明的白桦脂醇的提取纯化方法依次进行如下步骤(1)将粉碎后的白桦树皮加入有机试剂搅拌提取数次，合并提取液，去掉残渣，(2)减压浓缩提取液，放置后过滤，用提取溶剂冲洗沉淀，收集沉淀，去掉滤液，(3)将沉淀溶于甲醇中，加入活性炭回流提取，过滤，(4)收集滤液，减压回收甲醇，收集滤渣，加入二氯甲烷溶解，再加入吡啶和醋酸酐，搅拌若干小时，(5)加入稀酸、碳酸氢盐水溶液，纯水洗涤，收集上层粉末状不溶物，(6)将粉末溶于乙醇或甲醇或异丙醇中放置，析出晶体后过滤，洗涤、干燥所得白桦脂醇晶体。
本发明的方法依次进行如下步骤(1)将白桦脂醇溶于丙酮中，搅拌，加入琼斯试剂或其它氧化剂，反应1-2小时，加入甲醇终止反应，再加入水，真空挥去丙酮，余下的水溶液用溶剂萃取数次，分离溶剂层，洗涤，分离有机层，真空除去溶剂，收集残渣，(2)将残渣溶解于四氢呋喃中，加入硼氢化纳或还原试剂，搅拌，加入稀盐酸终止反应，真空浓缩溶液，加入乙酸乙酯，洗涤，分离有机层，真空除去乙酸乙酯，残渣过硅胶柱，用石油醚，乙酸乙酯进行洗脱，收集洗脱液，减压除去溶剂，真空干燥得白桦酯酸。
本发明的方法依次进行以下步骤(1)将粉碎后的白桦树皮加入2～5倍量的有机试剂搅拌提取2～3次，合并提取液，去掉残渣，(2)在0.01～0.09Mpa下，减压浓缩提取液至原体积的0.15～0.25，在4℃～室温下放置16～24小时，过滤或离心，用1～10倍量的提取溶剂冲洗沉淀，收集沉淀，去掉滤液，(3)将(2)所得沉淀溶于6～20倍量甲醇中，加入0.01～0.1倍量的活性炭，回流提取1～2小时，在60℃～100℃下过滤，(4)收集滤液，在0.01～0.09Mpa下，减压回收甲醇，剩余的残渣加2～20倍量二氯甲烷溶解，再加入0.01～10倍量的吡啶和醋酸酐，室温搅拌16～24小时，(5)依次加入0.01～10倍量1％稀酸(重量百分比)、10％碳酸氢盐水溶液(重量百分比)、纯水进行洗涤，弃去有机层和水层，收集上层粉末状不溶物，(6)将(5)所得粉末溶于1～100倍量乙醇或甲醇或异丙醇中，放冷至4℃～室温，放置0.5～24小时，析出白桦脂醇晶体，过滤，晶体用1～10倍量的醇洗涤3次，所得晶体减压干燥16～24小时，得纯度在80％以上的白桦脂醇。
本发明方法依次进行如下步骤(1)取白桦脂醇溶于1～100倍量的丙酮中，0℃～室温搅拌，加入1～10倍量新鲜配制的琼斯试剂或者其他氧化剂，反应1～2小时后，加入1～100倍量甲醇终止反应，再加入1～100倍量水，真空挥去丙酮，剩余的水溶液用1～100倍量乙酸乙酯萃取2～4次，分离乙酸乙酯层，依次用1～100倍量的水和饱和氯化钠水溶液洗涤，分离有机层，真空除去乙酸乙酯，收集残渣，
(2)将步骤(1)所得残渣溶于1～100倍量四氢呋喃中，加入0.1～10倍量硼氢化钠或者选择性还原试剂，室温搅拌10～24小时，加入0.1～10倍量的2mol/L的稀盐酸终止反应，真空浓缩四氢呋喃至原体积的一半，加入1～100倍量乙酸乙酯，依次用1～100倍量水和饱和氯化钠水溶液洗涤，分离有机层，真空除去乙酸乙酯，残渣过硅胶柱，以石油醚和乙酸乙酯(15∶1～4∶1)进行洗脱，收集洗脱液，减压除去溶剂，真空干燥16～24小时，得白桦脂酸。
步骤(1)中所用的有机试剂为甲苯或氯仿或二氯甲烷或乙酸乙酯或醇，搅拌提取温度为室温～100℃，时间1～24小时。
步骤(1)中所说的氧化剂为高锰酸钾或二氧化锰或重铬酸，步骤(2)中所说的选择性还原试剂为硼氢化锂或三乙基硼氢化锂或氢化三异丁基铝等。
本发明提取纯化工艺流程简单，生产成本低，得率高，适用于工业化大生产，生产效率高。
具体实施例方式实施例1取白桦树皮300g，加入1200ml乙酸乙酯80～90℃提取4h，分别提取两次，合并提取液。滤过或离心滤过，减压浓缩滤液至原体积的0.15或0.2或0.25，在4℃下放置24h。过滤或离心过滤，沉淀再用500ml乙酸乙酯冲洗，得到30g棕黄色固体。将30g固体溶于500ml甲醇中，加入2.0g活性碳混合后，回流提取1h，过滤。滤液减压至0.01或0.05或0.09MPa挥尽甲醇，得残渣25g。将残渣溶于100ml二氯甲烷(内加入5ml吡啶和5ml乙酸酐)，混合液在室温下搅拌24小时。然后依次用重量百分比浓度1％稀盐酸、重量百分比浓度10％NaCO3水溶液和水各10ml洗涤，弃去有机层和水层，收集上层粉末状不溶物，加入100ml乙醇，加热使其溶解，室温放置24小时，析出白桦脂醇晶体，过滤，所得晶体用乙醇10ml洗涤3次，然后真空干燥24小时，得白桦脂醇5.0g。
实施例2取白桦脂醇1g，溶于50ml丙酮中，逐滴加入6.0ml新鲜配置的琼斯试剂，室温搅拌1.5小时后加入甲醇30ml结束反应，持续搅拌5分钟，然后加入40ml水。真空挥去丙酮，剩余的水液用60ml乙酸乙酯萃取两次，分离乙酸乙酯层，依次用水20ml和饱和氯化钠水溶液15ml进行洗涤，滤过，分离有机层，最后真空除去乙酸乙酯，收集残渣。
取上步合成产物500mg，溶于20ml四氢呋喃中，加入400mg硼氢化钠，室温搅拌10小时，加入3.0ml 2mol/L的稀HCL终止反应。真空浓缩四氢呋喃至10ml，再加入50ml乙酸乙酯，依次用水5.0ml和饱和氯化钠溶液5.0ml洗涤.分离有机层，真空除去乙酸乙酯，将剩余的白色残渣过硅胶柱，以石油醚，乙酸乙酯(15∶1或10∶1或4∶1)进行洗脱，收集洗脱液。减压除去溶剂，真空干燥16～24小时，得白桦脂酸375mg。
权利要求
1.一种白桦脂醇的提取纯化方法，其特征在于依次进行如下步骤(1)将粉碎后的白桦树皮加入有机试剂搅拌提取数次，合并提取液，去掉残渣，(2)减压浓缩提取液，放置后过滤，用提取溶剂冲洗沉淀，收集沉淀，去掉滤液，(3)将沉淀溶于甲醇中，加入活性炭回流提取，过滤，(4)收集滤液，减压回收甲醇，收集滤渣，加入二氯甲烷溶解，再加入吡啶和醋酸酐，搅拌若干小时，(5)加入稀酸、碳酸氢盐水溶液，纯水洗涤，收集上层粉末状不溶物，(6)将粉末溶于乙醇或甲醇或异丙醇中放置，析出晶体后过滤，洗涤、干燥所得白桦脂醇晶体。
2.根据权利要求1的方法提取的白桦脂醇合成白桦脂酸的方法，其特征在于依次进行如下步骤(1)将白桦脂醇溶于丙酮中，搅拌，加入琼斯试剂或其它氧化剂，反应1-2小时，加入甲醇终止反应，再加入水，真空挥去丙酮，余下的水溶液用溶剂萃取数次，分离溶剂层，洗涤，分离有机层，真空除去溶剂，收集残渣，(2)将残渣溶解于四氢呋喃中，加入硼氢化纳或还原试剂，搅拌，加入稀盐酸终止反应，真空浓缩溶液，加入乙酸乙酯，洗涤，分离有机层，真空除去乙酸乙酯，残渣过硅胶柱，用石油醚，乙酸乙酯进行洗脱，收集洗脱液，减压除去溶剂，真空干燥得白桦酯酸。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于依次进行以下步骤(1)将粉碎后的白桦树皮加入2～5倍量的有机试剂搅拌提取2～3次，合并提取液，去掉残渣，(2)在0.01～0.09Mpa下，减压浓缩提取液至原体积的0.15～0.25，在4℃～室温下放置16～24小时，过滤或离心，用1～10倍量的提取溶剂冲洗沉淀，收集沉淀，去掉滤液，(3)将(2)所得沉淀溶于6～20倍量甲醇中，加入0.01～0.1倍量的活性炭，回流提取1～2小时，在60℃～100℃下过滤，(4)收集滤液，在0.01～0.09Mpa下，减压回收甲醇，剩余的残渣加2～20倍量二氯甲烷溶解，再加入0.01～10倍量的吡啶和醋酸酐，室温搅拌16～24小时，(5)依次加入0.01～10倍量1％稀酸(重量百分比)、10％碳酸氢盐水溶液(重量百分比)、纯水进行洗涤，弃去有机层和水层，收集上层粉末状不溶物，(6)将(5)所得粉末溶于1～100倍量乙醇或甲醇或异丙醇中，放冷至4℃～室温，放置0.5～24小时，析出白桦脂醇晶体，过滤，晶体用1～10倍量的醇洗涤3次，所得晶体减压干燥16～24小时，得纯度在80％以上的白桦脂醇。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于依次进行如下步骤(1)取白桦脂醇溶于1～100倍量的丙酮中，0℃～室温搅拌，加入1～10倍量新鲜配制的琼斯试剂或者其他氧化剂，反应1～2小时后，加入1～100倍量甲醇终止反应，再加入1～100倍量水，真空挥去丙酮，剩余的水溶液用1～100倍量乙酸乙酯萃取2～4次，分离乙酸乙酯层，依次用1～100倍量的水和饱和氯化钠水溶液洗涤，分离有机层，真空除去乙酸乙酯，收集残渣，(2)将步骤(1)所得残渣溶于1～100倍量四氢呋喃中，加入0.1～10倍量硼氢化钠或者选择性还原试剂，室温搅拌10～24小时，加入0.1～10倍量的2mol/L的稀盐酸终止反应，真空浓缩四氢呋喃至原体积的一半，加入1～100倍量乙酸乙酯，依次用1～100倍量水和饱和氯化钠水溶液洗涤，分离有机层，真空除去乙酸乙酯，残渣过硅胶柱，以石油醚和乙酸乙酯(15∶1～4∶1)进行洗脱，收集洗脱液，减压除去溶剂，真空干燥16～24小时，得白桦脂酸。
5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于步骤(1)中所用的有机试剂为甲苯或氯仿或二氯甲烷或乙酸乙酯或醇，搅拌提取温度为室温～100℃，时间1～24小时。
6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于步骤(1)中所说的氧化剂为高锰酸钾或二氧化锰或重铬酸，步骤(2)中所说的选择性还原试剂为硼氢化锂或三乙基硼氢化锂或氢化三异丁基铝等。
全文摘要
本发明白桦脂醇的提取纯化方法、白桦酯酸合成方法，依次进行如下步骤(1)将粉碎后的白桦树皮加入有机试剂搅拌提取数次，合并提取液，去掉残渣，(2)减压浓缩提取液，放置后过滤，用提取溶剂冲洗沉淀，收集沉淀，去掉滤液，(3)将沉淀溶于甲醇中，加入活性炭回流提取，过滤，(4)收集滤液，减压回收甲醇，收集滤渣，加入二氯甲烷溶解，再加入吡啶和醋酸酐，搅拌若干小时，(5)加入稀酸、碳酸氢盐水溶液，纯水洗涤，收集上层粉末状不溶物，(6)将粉末溶于乙醇或甲醇或异丙醇中放置，析出晶体后过滤，洗涤、干燥所得白桦脂醇晶体。将白桦脂醇溶于丙酮中加水，真空挥去丙酮，水溶液萃取数次，收集残渣溶于四氢呋喃，加入乙酸乙酯，残渣过硅胶柱，洗脱液干燥得白桦酯酸。
文档编号C07J63/00GK1634972SQ20041008122
公开日2005年7月6日 申请日期2004年11月12日 优先权日2004年11月12日
发明者夏宇江, 王先均, 潘廖明, 张慧明, 胡智梅 申请人:张梅