专利名称：用作ip拮抗剂的咪唑啉－2－基氨基苯基酰胺的制作方法
技术领域：
本发明涉及前列腺素I2(IP)受体拮抗剂和有关的含有它们的药物组合物及其用作治疗剂的方法。
前列腺素或前列腺素类(PG)是一组由膜磷脂衍生的生物活性化合物，其由含有3、4或5个双键的20个碳的必需脂肪酸和一个环戊烷环组成。它们分为用字母D、E、F、G、H或I表示的几个大类，它们的区别在于环戊烷环上的取代情况。这些大类又通过下标1、2或3进一步细分，这些下标反应了它们的脂肪酸前体。因此，PGI2具有双环结构，下标2表示它与花生四烯酸有关。
PGI2(也被称作前列腺环素)作用于血小板和血管以抑制血小板凝集和引起血管扩张，据信这对于血管内环境稳定是非常重要的。曾有人提出PGI2可能与完整血管壁的抗血栓形成特性有关。PGI2还被认为是血管紧张的生理调节剂，其作用是对抗血管收缩剂的作用。由于PGI2在与脓毒性休克有关的低血压中起作用，使得这些血管作用的重要性受到了重视。尽管前列腺素似乎不会直接影响血管的通透性，但PGI2可以通过促进炎症部位的血流而显著增加水肿的形成和白细胞浸润。因此，IP受体拮抗剂可以减轻与脓毒性休克有关的低血压，减轻水肿的形成，并可预防与过度出血有关的病症，例如但不限于血友病和出血。
对啮齿动物的许多体内镇痛研究表明，PGI2在诱导痛觉过敏中起重要作用。同样，体外研究提供了实质性的证据，表明“PGI2选择性”(IP)受体是感觉神经元功能的重要调节剂[Bley等，Trends in PharmacologicalSciences 1998，19(4)，141-147]。由于感觉神经元中的IP受体与腺苷酸环化酶和磷脂酶C的激活有关，并因此与cAMP-依赖型蛋白激酶和蛋白激酶C的激活有关，这些受体可以对离子通道活性和神经递质的释放产生很强的影响。根据最近对缺乏IP受体的转基因小鼠的研究，获得了IP受体在炎性疼痛中起显著作用的证据[Murata等人，Nature 388678-682(1997)]。
除了是痛觉过敏的介质外，已知前列腺素还可由于生理刺激(例如逼尿平滑肌舒张、膀胱粘膜损伤和神经刺激)而在膀胱局部产生[Anderson，Pharmacological Reviews 1993，45(3)，253-308]。PGI2是由人类膀胱所释放的主要的前列腺素。有人提出，前列腺素可能是由膀胱充满所产生的逼尿肌舒张和由膀胱膨胀导致的C传入纤维激活之间的联系物。已有人提出，前列腺素可能与膀胱疾病的病理生理学有关。因此，预期前列腺素IP受体的拮抗剂可用于治疗所述病症。
预期IP受体拮抗剂还可用于呼吸道过敏(其中，由于对过敏原的应答而产生PGI2)或呼吸道病症例如哮喘。
现在对于IP受体拮抗剂以及各种其它药物的心血管副作用的审查越来越严格。许多有前景的IP受体拮抗剂在临床评估过程中由于在临床受试者中出现了室性心律失常、特别是“尖端扭转型”(TdP)心律失常而被淘汰了。已经证实，这些药物导致室性心律失常的机制是对“人体Ether-a-Go-Go”或hERG离子通道的调节。hERG通道是电压激活的内向整流钾通道，并且对心室动作电位的复极化起重要作用。hERG通道的阻断会增加心脏动作电位的持续时间，从而导致心室去极化的延长。由于这种hERG通道调节的潜在致死特性，最终可用作药物的IP受体拮抗剂应不会或仅最小程度地引起hERG通道的抑制。
关于前列腺素及其受体的其它资料记载于Goodman & Gillman′s，ThePharmacological Basis of Therapeutics，第9版，McGraw-Hill，纽约，1996，第26章，601-616页。
本文中所引用的所有出版物、专利和专利申请，无论是上文中所提到的，还是将要在下文中提到的，均全文引入本文作为参考。
本发明提供了用作IP受体拮抗剂的化合物。主题化合物是式I化合物或其可药用盐、溶剂化物或前药
其中R1是芳基或杂芳基；R2是氢、烷基、烷氧基、卤代烷基或卤素；A是-C(O)-NRa-(CRbRc)n-或-NRa-C(O)-(CRbRc)n-；n是1至6；Ra、Rb和Rc彼此独立地是氢或烷基。
本发明进一步涉及药物组合物，该组合物包含与至少一种适当的载体相混合的治疗有效量的至少一种式I化合物或单个的异构体、异构体的外消旋或或非外消旋混合物或其可药用盐或溶剂化物。在优选的实施方案中，药物组合物适于对患有可以通过用IP受体拮抗剂治疗而缓解的疾病的个体给药。
本发明进一步涉及制备式I化合物的方法。一种所述的方法包括将下式的化合物 其中R1、R2和A如本文所定义，与氯代咪唑啉反应以形成式I化合物。
本发明进一步涉及治疗由IP受体拮抗剂介导的疾病的方法，该方法包括向需要所述治疗的个体施用治疗有效量的至少一种式I化合物或其可药用盐、溶剂化物或前药。
本发明进一步涉及治疗的方法，该方法包括向需要所述治疗的个体施用治疗有效量的至少一种式I化合物或单个的异构体、异构体的外消旋或或非外消旋混合物或其可药用盐或溶剂化物。
在本发明的一个实施方案中，需要所述治疗的个体是患有与疼痛、炎症、泌尿道疾病状态、源自过敏或哮喘的呼吸状态、水肿形成或低血压血管疾病有关的疾病状态的个体。在本发明的另一个实施方案中，需要所述治疗的个体是患有与疼痛有关的疾病的个体。
在优选的实施方案中，需要所述治疗的个体患有与IP受体介导的疼痛有关的疾病状态，例如炎性疼痛、神经病性疼痛、癌症疼痛、急性疼痛、慢性疼痛、手术疼痛、牙痛、经前期疼痛、内脏疼痛、烧伤引起的疼痛、偏头痛或丛集性头痛、神经痛、创伤后损伤、与功能性肠疾病例如肠过敏综合症有关的疼痛、痛觉过敏或复杂性区域疼痛综合症。
在另一个优选的实施方案中，需要所述治疗的个体患有与IP受体介导的炎症有关的疾病状态，例如细菌、真菌感染、病毒感染、特发性膀胱炎、过度使用(over-use)、老年、营养不足、前列腺炎或结膜炎疼痛。
在另一个优选的实施方案中，需要所述治疗的个体患有与IP受体介导的泌尿道疾病状态有关的疾病状态，例如膀胱出口阻塞、尿失禁、膀胱容量减小、排尿频繁、紧迫性失禁、压力性失禁、膀胱反应过度、良性前列腺增生(BPH)、前列腺炎、逼尿肌反射亢进、尿频、夜尿、尿急、膀胱活动过度、骨盆过敏、紧迫性失禁、尿道炎、前列腺炎、骨盆疼痛综合征、前列腺痛、膀胱炎或特发性膀胱过敏。
在另一个优选的实施方案中，需要所述治疗的个体患有与IP受体介导的呼吸疾病例如过敏或哮喘有关的疾病状态。
在另一个优选的实施方案中，需要所述治疗的个体患有与IP受体介导的水肿形成或低血压血管疾病有关的疾病状态。
若无另外说明，在本申请、包括说明书和权利要求书中使用的如下术语具有以下给出的定义。必需注意，若在上下文中没有明确的相反指示，在说明书和所附权利要求中使用单数形式也包括复数。
“酰基”(或烷酰基)是指基团-C(O)-R，其中R是本文中所定义的低级烷基。酰基的例子包括但不限于甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基等。
“烷基”是指仅由碳和氢原子构成的含有1至12个碳原子的一价直链或支链的饱和烃基，除非另有说明。烷基的例子包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、正己基、辛基、十二烷基等。
“低级烷基”是指仅由碳和氢原子构成的含有1至6个碳原子的一价直链或支链的饱和烃基，除非另有说明。低级烷基的例子包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、仲丁基、叔丁基、正丁基、正戊基、正己基等。
“亚烷基”是指1至6个碳原子的直链饱和的二价烃基或3至6个碳原子的支链饱和的二价烃基，例如亚甲基、亚乙基、2，2-二甲基亚乙基、亚丙基、2-甲基亚丙基、亚丁基、亚戊基等。
“烷氧基”是指基团-O-R，其中R是本文中所定义的低级烷基。烷氧基的例子包括但不限于甲氧基、乙氧基、异丙氧基等。
“烷氧基烷基”是指式Ra-O-Rb-的部分，其中Ra是烷基且Rb是本文中所定义的亚烷基。示例性的烷氧基烷基包括，例如，2-甲氧基乙基、3-甲氧基丙基、1-甲基-2-甲氧基乙基、1-(2-甲氧基乙基)-3-甲氧基-丙基和1-(2-甲氧基乙基)-3-甲氧基丙基。
“烷基羰基”是指式-R′-R″的部分，其中R′是氧代且R″是本文中所定义的烷基。
“烷基氨基”是指基团-NHRd，其中Rd是本文中所定义的低级烷基。烷基氨基的例子包括但不限于甲基氨基、乙基氨基、丁基氨基等。
“烷基磺酰基”是指基团-SO2Rf，其中Rf是本文中所定义的低级烷基。烷基磺酰基的例子包括但不限于甲磺酰基、乙磺酰基、丙磺酰基等。
“烷基磺酰基烷基”是指式-R′-R″-R的部分，其中R′是烷基、R″是-SO2-且R是本文中所定义的烷基。
“烷基氨磺酰基”是指式-SO2-NHR′的部分，其中R′是本文中所定义的烷基。
“二烷基氨磺酰基”是指式-SO2-NHR′R″的部分，其中R′和R″是本文中所定义的烷基。
“芳基”是指由单-、二-或三环芳环构成的一价环状芳烃部分。芳基可以是任选取代的，如本文中所定义的那样。芳基部分的例子包括但不限于任选取代的苯基、萘基、菲基、芴基、茚基、并环戊二烯基、薁基、氧基二苯基、联苯基、亚甲基二苯基、氨基二苯基、二苯基硫基、二苯基磺酰基、二苯基亚异丙基、苯并二噁烷基、苯并呋喃基、苯并间二氧杂环戊烯基、苯并吡喃基、苯并噁嗪基、苯并噁嗪酮基、苯并哌啶基、苯并哌嗪基、苯并吡咯烷基、苯并吗啉基、亚甲基二氧基苯基、亚乙基二氧基苯基等，包括其部分氢化的衍生物。
“芳氧基”是指基团-O-R’，其中R’是本文中所定义的芳基。芳氧基的例子包括但不限于苯氧基等。
“芳烷基”是指基团-R’R”，其中R’是本文中所定义的亚烷基，R”是本文中所定义的低级芳基。芳烷基的例子包括但不限于苄基、苯基乙基、3-苯基丙基等。
“芳烷基氧基”是指基团-O-R’，其中R’是本文中所定义的芳烷基。芳烷基氧基的例子包括但不限于苄基氧基、苯基乙基氧基等。
“环烷基”是指由一个或多个环构成的一价饱和的碳环基团，其可以任选地被一个或多个独立地选自下列的取代基所取代羟基、氰基、低级烷基、低级烷氧基、烷硫基、卤素、卤代烷基、羟基烷基、硝基、烷氧基羰基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、氨基羰基、羰基氨基、氨基磺酰基、磺酰基氨基和/或三氟甲基，除非另有说明。环烷基的例子包括但不限于环丙基、环丁基、3-乙基环丁基、环戊基、环戊基、环庚基等。
“环烷基氧基”是指基团-OR′，其中R′是本文中所定义的环烷基。
“环烷基烷基”是指式-R′R″的基团，其中R′是本文中所定义的亚烷基，R″是本文中所定义的环烷基。
“环烷基烷氧基”是指式-OR′R″的基团，其中R′是本文中所定义的亚烷基，R″是本文中所定义的环烷基。
“二烷基氨基”是指基团-NR′R″，其中R′和R″彼此独立地是本文中所定义的低级烷基。二烷基氨基的例子包括但不限于二甲基氨基、甲基乙基氨基、二乙基氨基、甲基丙基氨基等。
“亚乙基二氧基”是指基团-OCH2CH2O-。
“卤素”或“卤代”是指基团氟、溴、氯和/或碘。
“卤代烷基”是指在任何位置被一个或多个本文中所定义的卤素原子所取代的本文所定义的烷基。卤代烷基的例子包括但不限于1，2-二氟丙基、1，2-二氯丙基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基、2，2，2-三氯乙基等。
“杂芳基”是指具有至少一个含有一个、两个或三个选自N、O或S的环杂原子的芳环的5至12个环原子的单环或二环基团，剩下的环原子是C，应当理解，杂芳基的连接点在芳环上。杂芳基环可以是任选取代的，如本文中所定义的那样。杂芳基部分的例子包括但不限于任选取代的咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、噁二唑基、噻二唑基、吡嗪基、噻吩基、苯并噻吩基、噻吩基、呋喃基、吡喃基、吡啶基、吡咯基、吡唑基、嘧啶基、喹啉基、异喹啉基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并硫代吡喃基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噁二唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并吡喃基、吲哚基、异吲哚基、氮杂吲哚基、吲唑基、三唑基、三嗪基、喹喔啉基、嘌呤基、喹唑啉基、喹嗪基、萘啶基、蝶啶基、咔唑基、氮杂基、二氮杂基、丫啶基等，包括其部分氢化的衍生物。
“杂环基”是指由1至3个环构成的含有一个、两个或三个或四个杂原子(选自氮、氧或硫)的一价饱和部分。杂环基环可以是任选取代的，如本文中所定义的那样。杂环基部分的例子包括但不限于任选取代的哌啶基、哌嗪基、高哌嗪基、氮杂基、吡咯烷基、吡唑烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、噁唑烷基、异噁唑烷基、吗啉基、噻唑烷基、异噻唑烷基、奎宁环基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、噻二唑烷基、苯并噻唑烷基、苯并咪唑烷基、二氢呋喃基、四氢呋喃基、二氢吡喃基、四氢吡喃基、硫代吗啉基、硫代吗啉基亚砜、硫代吗啉基砜、二氢喹啉基、二氢异喹啉基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基等。
“杂环基氧基”是指基团-O-R，其中R是本文中所定义的杂环基。
“杂环基烷基氧基”是指基团-O-R′-R″，其中R′是本文中所定义的亚烷基，R″是本文中所定义的杂环基。
“杂环基磺酰基”是指基团-SO2-R′，其中R′是本文中所定义的烷基。
“羟基烷基”是指被一个或多个羟基取代的本文中所定义的烷基。羟基烷基的例子包括但不限于羟基甲基、2-羟基乙基、2-羟基丙基、3-羟基丙基、2-羟基丁基、3-羟基丁基、4-羟基丁基、2，3-二羟基丙基、1-(羟基甲基)-2-羟基乙基、2，3-二羟基-丁基、3，4-二羟基丁基和2-(羟基甲基)-3-羟基丙基等。
“亚甲基二氧基”是指基团-OCH2O-。
“氨磺酰基”是指式-SO2NR′R″的基团，其中R′和R″彼此独立地是氢或烷基。
“磺酰基氨基”是指式-NHR′-SO2-R″的基团，其中R′和R″彼此独立地是氢或本文中所定义的烷基。
“任选的”或“任选地”是指随后描述的事件或情况可以但不是必须发生的，该描述包括其中的事件或情况发生的情况和其中的事件或情况未发生的情况。例如，“任选的键”是指该键可存在或不存在，并且该描述包括单、双或三键。
“任选取代的”，当与“芳基”、“苯基”、“杂芳基”或“杂环基”结合使用时是指独立地被1至4个取代基、优选1或2个选自下列的取代基任选取代的芳基、苯基、杂芳基或杂环基烷基、环烷基、环烷基烷基、杂烷基、羟基烷基、卤素、硝基、氰基、羟基、烷氧基、氨基、酰基氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、卤代烷基、卤代烷氧基、杂烷基、-COR(其中R是氢、烷基、苯基或苯基烷基)、(CR′R″)n-COOR(其中n是0至5的整数，R′和R″独立地是氢或烷基，R是氢、烷基、环烷基、环烷基烷基、苯基或苯基烷基)或-(CR′R″)n-CONRaRb(其中n是0至5的整数、R′和R″独立地是氢或烷基，Ra和Rb彼此独立地是氢、烷基、环烷基、环烷基烷基、苯基或苯基烷基)。
“异构体”是指具有相同的分子式但性质或其原子的连接顺序或其原子的空间排列不同的化合物。其原子的空间排列不同的异构体称为“立体异构体”。彼此互为镜像并且具有旋光性的立体异构体称为“对映体”，彼此不互为镜像的立体异构体称为“非对映体”。
“阻转异构体”是指由于大的基团沿中心键的旋转受阻而引起的旋转受到限制所导致形成的异构体。
“手性异构体”是指有一个手性中心的化合物。它有两个具有相反手性的对映体形式，并且可以以单个对映体或对映体混合物的形式存在。含有等量具有相反手性的单个对映体形式的混合物称为“外消旋混合物”。含有一个以上手性中心的化合物可以以单个的非对映体或非对映体混合物的形式存在，称为“非对映体混合物”。当存在一个手性中心时，可将立体异构体用该手性中心的绝对构型(R或S)来表征。绝对构型是指与手性中心相连的取代基的空间排列。与所述手性中心相连的取代基按照Sequence Ruleof Cahn，Ingold和Prelog.(Cahn等，Angew.Chem.Inter.Edit.1966，5，385；勘误表511；Cahn等，Angew.Chem.1966，78，413；Cahn和Ingold，J.Chem.Soc.(London)1951，612；Cahn等，Experientia 1956，12，81；Cahn，J.Chem.Educ.1964，41，116)排序。
“几何异构体”是指由于其存在着沿双键的旋转受阻而产生的非对映体。这些构型通过前缀顺式和反式或者Z和E而在其命名中进行区分，所述前缀表明依据Cahn-Ingold-Prelog法则基团是在分子中双键的相同一侧还是在相对一侧。
“离去基”是指具有合成有机化学中的常规含义的基团，即，在烷基化条件下可被置换的原子或基团。离去基的例子包括但不限于卤素、烷基-或亚芳基磺酰氧基，例如甲磺酰氧基、乙磺酰氧基、甲硫基、苯磺酰氧基、甲苯磺酰氧基和噻吩基氧基、二卤代膦酰基氧基、任选取代的苄氧基、异丙氧基、酰氧基等。
“保护基”具有合成有机化学中的常规含义，即，可以选择性地阻止多功能基化合物中的一个反应位点，以便化学反应可以在另一个未保护的反应位点上选择性进行的基团。本发明的某些过程依靠保护基阻止反应物中存在的反应性氧原子。用于醇或酚羟基的可接受的保护基(其可以在随后选择性地除去)包括以乙酸酯、卤代烷基碳酸酯、苄基醚、烷基甲硅烷基醚、杂环基醚、甲基或其它烷基醚等的形式保护的基团。用于羧基的保护基团或封闭基团类似于关于羟基所述的那些，优选叔丁基、苄基或甲基酯。保护基的例子可参见Greene等，Protective Groups in Organic Chemistry，1999，J.Wiley，第二版，和Harrison等，Compendium of Synthetic OrganicMethods，1971-1996，Vols.1-8，J.Wiley和Sons。
“氨基保护基”或“N-保护基”是指用来在合成过程中阻止氮原子发生不需要的反应的那些有机基团，其包括但不限于苄基、苄基氧基羰基(苄氧羰基，CBZ)、对甲氧基苄基氧基羰基、对硝基苄基氧基羰基、叔丁氧基羰基(BOC)、三氟乙酰基等。
“脱保护”是指在选择性反应完成后除去保护基的过程。由于其方便或者比较易于除去，一些保护基可能相对于其它保护基是优选的。用于保护的羟基或羧基的脱保护试剂包括碳酸钾或碳酸钠、氢氧化锂的醇溶液、锌的甲醇溶液、乙酸、三氟乙酸、钯催化剂或三溴化硼等。
“惰性有机溶剂”或“惰性溶剂”是指在所描述的反应条件下呈惰性的溶剂，其包括例如苯、甲苯、乙腈、四氢呋喃、N，N-二甲基甲酰胺、氯仿、二氯甲烷、二氯乙烷、二乙醚、乙酸乙酯、丙酮、甲基乙基酮、甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、叔丁醇、二噁烷、吡啶等。除非有相反的指示，本发明的反应中所用的溶剂是惰性溶剂。
“可药用的”是指可用于制备通常是安全、无毒并且在生物学或其它方面均没有不利影响的药物组合物，包括可兽药用的以及可人药用的。
“可药用载体”是指可用于制备药物组合物的、通常是可与组合物的其它成分相容的、对接受者无害并且在生物学或其它方面均没有不利影响的载体，其包括可兽药用的以及可人药用的载体。说明书和权利要求中所用的“可药用载体”均包括一种和一种以上的所述载体。
化合物的“可药用盐”是指可药用的并且具有母体化合物的所需药理学活性的盐。所述的盐例如包括(1)与无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等形成的酸加成盐；或与有机酸例如乙酸、丙酸、己酸、环戊烷丙酸、乙醇酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1，2-乙二磺酸、2-羟基-乙磺酸、苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲基二环-[2.2.2]辛-2-烯-1-甲酸、葡庚糖酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、月桂基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、羟基萘甲酸、水杨酸、硬脂酸、粘康酸等形成的酸加成盐；或者(2)当母体化合物中所存在的酸性质子被金属离子例如碱金属离子、碱土金属离子或铝离子代替时所形成的盐；或与有机碱的配合物。可接受的有机碱包括乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、N-甲基葡糖胺等。可接受的无机碱包括氢氧化铝、氢氧化钙、氢氧化钾、碳酸钠和氢氧化钠等。
应当理解，对可药用盐的描述包括其溶剂加成形式或结晶形式，特别是溶剂化物或多晶型。溶剂化物含有化学计算量或非化学计算量的溶剂，经常在结晶过程中形成。当溶剂是水时，则形成水合物，当溶剂是醇时，形成醇化物。多晶型包括化合物的相同元素组成的不同的晶体填充排列。多晶型通常具有不同的X-射线衍射图样、红外光谱、熔点、密度、硬度、晶形、光学和电学性能、稳定性和溶解度。各种因素例如重结晶溶剂、结晶速率和存储温度可能导致单一晶型占优势。
本文中所用的“药理学作用”包括在个体中产生的达到预定治疗目的的作用。在一个优选的实施方案中，药理学作用是指需要所述治疗的个体的治疗。例如，药理学作用可以是导致需要所述治疗的个体的与疼痛、炎症、泌尿道疾病或哮喘有关的疾病状态得到预防、缓解或减轻的作用。在一个优选的实施方案中，药理学作用是指IP受体的活化与患有可通过施用IP受体调节剂、特别是IP受体拮抗剂而治疗的疾病状态的个体的治疗益处有关。
“个体”是指哺乳动物和非哺乳动物。哺乳动物的例子包括但不限于哺乳类中的任何成员人类、非人的灵长类例如黑猩猩和其它猿和猴类；牲畜，例如牛、马、绵羊、山羊和猪；家养动物例如兔子、狗和猫；实验室动物，包括啮齿动物，例如大鼠、小鼠和豚鼠等。非哺乳动物的例子包括但不限于鸟类等。该术语不表示特定的年龄或性别。
“治疗有效量”是指当向个体给药以治疗疾病状态时，足以完成所述对疾病状态的治疗的化合物的量。“治疗有效量”会随着化合物、所治疗的疾病状态、所治疗疾病的严重程度、个体的年龄和相对健康情况、给药途径和给药形式、主治医生或兽医的判断以及其它因素而改变。
疾病状态的“治疗”包括(1)预防疾病状态，即，使可能患病或易患疾病状态但还未经历或显示出疾病症状的个体不出现疾病状态的临床症状。
(2)抑制疾病状态，即阻止疾病状态或其临床症状的发展，或(3)缓解疾病状态，即引起疾病状态或其临床症状的暂时性或永久性的消退。
“疾病状态”是指任何疾病、病症、症状或指征。
可交换使用的“与泌尿道有关的疾病状态”或“泌尿道疾病状态”或“尿路病”或“泌尿道的症状”是指泌尿道的病理性变化或膀胱平滑肌的机能障碍或其神经分布引起的尿的存贮或排空的混乱。泌尿道的症状包括(也被称作逼尿肌活动过度)出口阻塞、出口关闭不全和骨盆过敏。
“出口关闭不全”包括但不限于尿道高运动性、内因性括约肌功能不全或混合型失禁。其在症状上通常表现为压力性尿失禁。
“出口阻塞”包括但不限于良性前列腺增生(BPH)、尿道狭窄疾病、肿瘤等。其在症状上通常表现为阻塞性(低流速、排尿开始困难等)和刺激性的(尿急、耻骨上疼痛等)。
“膀胱活动过度”或“逼肌活动过强”包括但不限于在症状上表现为尿急、尿频、膀胱容量减少、尿失禁等的改变；表现为膀胱容量改变、排尿阈改变、膀胱收缩不稳定、括约肌痉挛状态等的尿动力学改变；以及通常在逼肌反射亢进(神经原性膀胱)中，在病症例如出口梗阻、出口关闭不全、骨盆过敏中，或者在特发性病症例如逼肌不稳定等中表现出的症状。
“骨盆过敏”包括但不限于骨盆疼痛、间质(细胞)膀胱炎、前列腺痛、前列腺炎、外阴痛、尿道炎、睾丸痛等。其症状表现为涉及骨盆区域的疼痛、炎症或不适，并通常包括膀胱活动过度症状。
“疼痛”是指或多或少地局部化的不适、痛苦或剧痛的感觉，是由于刺激特定的神经末梢引起的。可以有许多种类型的疼痛，包括但不限于闪痛、幻肢痛(phantom pain)、麻痛、急性疼痛、炎性疼痛、神经病性疼痛、复杂性区域疼痛、神经痛、神经病等(Dorland′s Illustrated MedicalDictiontary，第28版，W.B.Saunders Company，Philadelphia，PA)。治疗疼痛的目标是减轻治疗对象所感受到的疼痛的严重程度。
“神经病性疼痛”是指由功能性紊乱和/或病理性变化以及外周神经系统的非炎性损害所导致的疼痛。神经病性疼痛的例子包括但不限于热或机械性痛觉过敏、热或机械性触疼、糖尿病性疼痛、entrapment pain等。
“调节剂”是指可以与目标物相互作用的分子，例如化合物。相互作用包括但不限于本文中所定义的激动剂、拮抗剂等。
“激动剂”是指可以提高另一种分子或受体位点的活性的分子，例如化合物、药、酶活化剂或激素。
“拮抗剂”是指可以减弱或阻止另一种分子或受体位点的作用的分子，例如化合物、药、酶抑制剂或激素。
总的来说，本申请中所用的命名法是基于AUTONOM，一种用于产生IUPAC系统命名的Beilstein Institute计算机系统。本文中所示的化学结构利用ISIS，第2.2版制得。在本文的结构中碳、氮或氧上所示的任何开式化合价均表示氢的存在。
正如本领域众所周知的那样，化合物例如式I化合物中的咪唑啉-2-基氨基与咪唑啉-2-亚基氨基呈互变异构平衡
为了方便起见，将所有的式I化合物表示为具有咪唑啉-2-基氨基的结构，但应该理解，两种互变异构形式的化合物均在本发明的范围内。
本发明提供了式I化合物或其可药用盐、溶剂化物或前药 其中R1是芳基或杂芳基；R2是氢、烷基、烷氧基、卤代烷基或卤素；A是-C(O)-NRa-(CRbRc)n-或-NRa-C(O)-(CRbRc)n-；n是1至6；Ra、Rb和Rc彼此独立地是氢或烷基。
当R2是烷基或者含有烷基部分时，以及当R1含有烷基部分时，所述的烷基优选是低级烷基，即，C1-C6烷基，更优选C1-C4烷基。
作为例子而不是限制，芳基或杂芳基R1可以任选地被一个、两个或三个彼此独立地选自下列的取代基所取代烷基、链烯基、烷氧基、任选取代的芳基、任选取代的芳氧基、芳烷基氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、羟基烷基、烷基磺酰基、烷氧基烷基氧基、羟基烷基氧基、硝基、氰基、羟基、环烷基、环烷基氧基、环烷基烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、亚甲基二氧基、亚乙基二氧基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基氧基、任选取代的杂环基磺酰基、任选取代的杂环基烷基氧基、任选取代的杂芳基、氨磺酰基、烷基氨磺酰基、二烷基氨磺酰基或磺酰基氨基。在某些实施方案中，R1是任选地被下列基团取代的苯基烷基、烷氧基、链烯基、任选取代的苯基、任选取代的杂芳基、任选取代的杂环基、卤代烷基、烷氧基、硝基、氰基或卤素。
在某些实施方案中，R1是任选被一个、两个或三个独立地选自下列的取代基取代的苯基烷基、链烯基、烷氧基、任选取代的芳基、任选取代的芳氧基、芳烷基氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、羟基烷基、烷基磺酰基、烷氧基烷基氧基、羟基烷基氧基、硝基、氰基、羟基、环烷基、环烷基氧基、环烷基烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、亚甲基二氧基、亚乙基二氧基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基氧基、任选取代的杂环基磺酰基、任选取代的杂环基烷基氧基、任选取代的杂芳基、氨磺酰基、烷基氨磺酰基、二烷基氨磺酰基或磺酰基氨基。
在某些实施方案中，R1是4-烷氧基苯基。4-烷氧基苯基可以是4-甲氧基-苯基、4-乙氧基苯基、4-丙氧基苯基、4-异丙氧基苯基、4-丁氧基苯基或4-异丁氧基苯基。
在某些实施方案中，R1是4-烷基苯基。4-烷基苯基可以是4-甲基苯基、4-乙基苯基、4-丙基苯基、4-异丙基苯基、4-丁基苯基或4-异丁基苯基。
在某些实施方案中，R1是芳氧基苯基，例如4-苯氧基苯基或其中的苯氧基部分是任选取代的4-苯氧基苯基。
在某些实施方案中，R1是4-环烷基氧基苯基。化合物4-环烷基氧基苯基可以是4-环戊基氧基苯基或4-环庚基氧基苯基。
在某些实施方案中，R1是4-环烷基烷氧基苯基，例如环丙基甲氧基苯基。
在某些实施方案中，R1是4-烷氧基烷基氧基苯基，例如4-(2-甲氧基乙基氧基)-苯基。
在某些实施方案中，R1是4-羟基烷基氧基苯基。4-羟基烷基氧基苯基可以是4-(2-羟基乙基氧基)-苯基、4-(2，3-二羟基丙基氧基)-苯基或4-(3-羟基-2-羟基甲基-丙基氧基)-苯基。
在某些实施方案中，R1是4-二烷基氨基苯基，例如4-(N，N-二乙基氨基)-苯基。
在某些实施方案中，R1是4-卤代苯基，例如4-氟苯基、4-氯苯基或4-溴苯基。
在某些实施方案中，R1是任选取代的4-联苯基。任选取代的4-联苯基可以是4′-氟-4-联苯基、4′-甲氧基-4-联苯基、4′-甲基-4-联苯基、4′-氯-4-联苯基或4-联苯基。
在某些实施方案中，R1是4-氰基苯基。
在某些实施方案中，R1是4-链烯基苯基，例如4-乙烯基-苯基。
在某些实施方案中，R1是4-环烷基苯基，例如4-环己基苯基。
在某些实施方案中，R1是任选取代的4-苄基氧基苯基。
在某些实施方案中，R1是4-二烷基氨磺酰基苯基，例如4-二乙基氨磺酰基苯基或4-二甲基氨磺酰基苯基。
在某些实施方案中，R1是4-烷基氨磺酰基苯基，例如4-乙基氨磺酰基苯基。
在某些实施方案中，R1是4-杂芳基苯基，其中杂芳基部分是任选取代的。4-杂芳基苯基可以是例如任选取代的吡唑基、任选取代的嘧啶基或任选取代的噻吩基。在具体的实施方案中，4-杂芳基苯基可以是任选取代的4-(4-甲基-吡唑-1-基)-苯基、4-(3-甲基-吡唑-1-基)-苯基、4-吡唑-1-基-苯基、4-噻吩-3-基-苯基、4-嘧啶-2-基-苯基或4-(2-氯-噻吩-3-基)-苯基。
在某些实施方案中，R1是4-杂环基苯基，其中杂环基部分是任选取代的。4-杂环基苯基可以是吗啉基苯基、硫代吗啉基苯基、1，1-二氧基硫代吗啉基苯基、任选取代的哌嗪基苯基或任选取代的哌啶基苯基。在具体的实施方案中，4-杂环基苯基可以是4-吗啉-4-基-苯基、4-(4-甲酸乙酯-哌嗪-1-基)-苯基、4-(4-乙磺酰基-哌嗪-1-基)-苯基、4-(4-丙烷-2-磺酰基-哌嗪-1-基)-苯基、4-(4-甲磺酰基-哌嗪-1-基)-苯基、4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基、4-(4-乙基-哌嗪-1-基)-苯基、4-(4-甲氧基哌啶-1-基)-苯基、4-(8-氮杂螺[4.5]癸-8-基)-苯基、4-哌嗪-1-基-苯基、4-甲基-哌啶-1-基-苯基、4-吡咯烷-1-基-苯基、4-羟基-哌啶-1-基-苯基或4-哌啶-1-基苯基。
在某些实施方案中，R1是4-杂环基氧基苯基，其中杂环基部分是任选取代的。4-杂环基氧基苯基可以是四氢吡喃基氧基苯基或任选取代的哌啶-4-基氧基-苯基。在具体的实施方案中，4-杂环基氧基苯基可以是4-(四氢吡喃-4-基氧基)-苯基、4-(哌啶-4-基氧基)-苯基、4-(1-乙基-哌啶-4-基氧基)-苯基或4-(1-甲酸乙酯-哌啶-4-基氧基)-苯基。
在某些实施方案中，R1是4-杂环基烷基氧基苯基，其中杂环基部分是任选取代的。4-杂环基烷基氧基苯基可以是四氢吡喃基甲氧基苯基或任选取代的哌啶基甲基氧基苯基。在具体的实施方案中，4-杂环基烷基氧基苯基可以是4-(四氢吡喃-2-基甲氧基)-苯基、4-(哌啶-4-基甲氧基)-苯基、4-(1-[乙基氨基甲酰基]-哌啶-4-基-甲氧基)-苯基、4-(1-甲磺酰基-哌啶-4-基甲氧基)-苯基、4-(1-甲酸乙酯-哌啶-4-基甲氧基)-苯基、4-(1-甲基-哌啶-4-基甲氧基)-苯基或4-(1-乙基-哌啶-4-基甲氧基)-苯基。
在某些实施方案中，R1是4-杂环基磺酰基苯基，其中杂环基部分是任选取代的。4-杂环基磺酰基苯基可以是吗啉基磺酰基苯基、硫代吗啉基磺酰基苯基、1，1-二氧基硫代吗啉基磺酰基苯基、任选取代的哌嗪基磺酰基苯基或任选取代的哌啶基磺酰基苯基。在具体的实施方案中，4-杂环基磺酰基苯基可以是4-(吗啉-4-磺酰基)-苯基、4-(4-甲基-哌嗪-1-磺酰基)-苯基、4-(哌啶-1-磺酰基)-苯基或4-(4-甲基-哌啶-1-磺酰基)-苯基。
在某些实施方案中，A是-C(O)-NRa-(CRbRc)n-。在具体的实施方案中，n是1。在具体的实施方案中，Rb和Rc是氢。
在某些实施方案中，A是-NRa-C(O)-(CRbRc)n-。在具体的实施方案中，n是1。在具体的实施方案中，Ra是氢，Rb和Rc彼此独立地是氢或烷基。
在本发明的某些实施方案中，化合物可以是式II或其可药用盐、溶剂化物或前药 其中R1是任选取代的芳基或任选取代的杂芳基；R2是氢、烷基、烷氧基、卤代烷基或卤素；
R3和R4彼此独立地是氢或烷氧基羰基；A是-C(O)-NRa-(CRbRc)n-或-NRa-C(O)-(CRbRc)n-；n是1至6；Ra是氢、烷基或环烷基；并且Rb和Rc彼此独立地是氢或烷基。
在其中R3或R4或两者均是烷氧基羰基的本发明的实施方案中，R3和R4可以是乙氧基羰基。
在其中R1是任选取代的苯基的本发明的实施方案中，本发明的化合物更具体地是在式III的范围内 其中p是0至4；R4是烷基、链烯基、烷氧基、任选取代的芳基、任选取代的芳氧基、芳烷基氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、羟基烷基、烷基磺酰基、烷氧基烷基氧基、羟基烷基氧基、硝基、氰基、羟基、环烷基、环烷基氧基、环烷基烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、亚甲基二氧基、亚乙基二氧基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基氧基、任选取代的杂环基磺酰基、任选取代的杂环基烷基氧基、任选取代的杂芳基、氨磺酰基、烷基氨磺酰基、二烷基氨磺酰基或磺酰基氨基。
Ra、Rb和Rc彼此独立地是氢、烷基或环烷基；优选Rb和Rc是氢；并且n和R2如以上所定义。更优选p是0或1。
当R4、Ra、Rb和Rc中的任何一个是烷基或者含有烷基部分时，所述的烷基优选是低级烷基，即，C1-C6烷基，更优选C1-C4烷基。
在另一个实施方案中，主题化合物可以是式IV
其中n、p、R2、R4、Ra、Rb和Rc如以上所定义。
在某些实施方案中，本发明的化合物可以是式V 其中R4和Ra如以上所定义。
在某些式V的实施方案中，Ra可以是氢、烷基或环丙基。
在某些式V的实施方案中，R4可以是烷基、链烯基、烷氧基、任选取代的芳基、任选取代的芳氧基、芳烷基氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、羟基烷基、烷基磺酰基、烷氧基烷基氧基、羟基烷基氧基、硝基、氰基、羟基、环烷基、环烷基氧基、环烷基烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、亚甲基二氧基、亚乙基二氧基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基氧基、任选取代的杂环基磺酰基、任选取代的杂环基烷基氧基、任选取代的杂芳基、氨磺酰基、烷基氨磺酰基、二烷基氨磺酰基或磺酰基氨基。
在其中R4是烷氧基的实施方案中，烷氧基可以是甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基或异丁氧基。
在其中R4是烷基的实施方案中，烷基可以是甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基或异丁基。
在其中R4是芳氧基的实施方案中，R4可以是苯氧基。
在其中R4是环烷基氧基的实施方案中，环烷基氧基可以是环戊基氧基或环庚基氧基。
在其中R4是环烷基烷氧基的实施方案中，R4可以是环丙基甲氧基。
在其中R4是烷氧基烷基氧基的实施方案中，R4可以是2-甲氧基乙基氧基。
在其中R4是羟基烷基氧基的实施方案中，R4可以是2-羟基乙基氧基、2，3-二羟基丙基氧基或3-羟基-2-羟甲基-丙基氧基。
在其中R4是二烷基氨基的实施方案中，R4可以是N，N-二乙基氨基。
在其中R4是卤素的实施方案中，R4可以是氟、氯或溴。
在其中R4是任选取代的苯基的实施方案中，任选取代的苯基可以是4-氟-苯基、4-甲氧基苯基、4-甲基苯基、4-氯苯基或苯基。
在某些实施方案中，R4可以是氰基。
在某些实施方案中，R4可以是链烯基，例如乙烯基。
在某些实施方案中，R4可以是环烷基，例如环己基。
在其中R4是任选取代的芳氧基的实施方案中，R4可以是苄基氧基。
在某些实施方案中，R4可以是二烷基氨磺酰基，例如二乙基氨磺酰基或二甲基氨磺酰基。
在某些实施方案中，R4可以是烷基氨磺酰基，例如乙基氨磺酰基。
在某些实施方案中，R4是杂芳基，其中杂芳基部分是任选取代的，例如任选取代的吡唑基、任选取代的嘧啶基或任选取代的噻吩基。在具体的实施方案中，R4可以是任选取代的甲基-吡唑-1-基、3-甲基-吡唑-1-基、吡唑-1-基、噻吩-3-基、嘧啶-2-基或2-氯-噻吩-3-基。
在某些实施方案中，R4是杂环基，其中杂环基部分是任选取代的，例如吗啉基、硫代吗啉基、1，1-二氧基硫代吗啉基、任选取代的哌嗪基或任选取代的哌啶基。在具体的实施方案中，R4可以是吗啉基、甲酸酯哌嗪-1-基、乙磺酰基-哌嗪-1-基、丙烷-2-磺酰基-哌嗪-1-基、甲磺酰基-哌嗪-1-基、甲基-哌嗪-1-基、乙基-哌嗪-1-基、甲氧基哌啶-1-基、8-氮杂-螺[4.5]癸-8-基、哌嗪-1-基、甲基-哌啶-1-基、吡咯烷-1-基、羟基-哌啶-1-基或哌啶-1-基。
在某些实施方案中，R4是杂环基氧基，其中杂环基部分是任选取代的，例如任选取代的四氢吡喃基氧基或任选取代的哌啶基氧基。在具体的实施方案中，R4可以是四氢吡喃基氧基、哌啶基氧基、1-乙基-哌啶基氧基或1-甲酸乙酯-哌啶基氧基。
在某些实施方案中，R4是杂环基烷基氧基，其中杂环基部分是任选取代的，例如任选取代的四氢吡喃基甲氧基或任选取代的哌啶基甲基氧基。在具体的实施方案中，R4可以是四氢吡喃-2-基甲氧基、哌啶基甲氧基、1-[乙基氨基甲酰基]-哌啶基甲氧基、1-甲磺酰基-哌啶基甲氧基、1-甲酸乙酯-哌啶基甲氧基、1-甲基-哌啶基甲氧基或1-乙基-哌啶基甲氧基。
在某些实施方案中，R4是杂环基磺酰基，其中杂环基部分是任选取代的，例如任选取代的吗啉基磺酰基、任选取代的硫代吗啉基、任选取代的1，1-二氧基硫代吗啉基、任选取代的哌嗪基磺酰基或任选取代的哌啶基磺酰基。在具体的实施方案中，R4可以是吗啉-磺酰基、甲基-哌嗪-1-磺酰基、哌啶-1-磺酰基或甲基-哌啶-1-磺酰基。
在某些实施方案中，本发明提供了选自下列的化合物N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基-氨基)-苄基]-4-甲氧基-苯甲酰胺；(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基)-{4-[(4-甲氧基-苯甲酰基氨基)-甲基]-苯基}-氨基甲酸乙酯2N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基]-2，4-二氟-苯甲酰胺；N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基]-4-氟-苯甲酰胺；4-氯-N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基]-苯甲酰胺；N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基]-4-噻吩-3-基-苯甲酰胺；N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基]-4-(2-甲氧基-乙氧基)-苯甲酰胺；N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基]-4-(四氢-吡喃-4-基氧基)-苯甲酰胺；4-{4-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基氨基甲酰基]-苯氧基}-哌啶-1-甲酸乙酯2N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基]-4-吡唑-1-基-苯甲酰胺；N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基]-4-(3-甲基-吡唑-1-基)-苯甲酰胺；N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基]-4-甲氧基-N-甲基-苯甲酰胺；
4-(4-苯磺酰基-哌嗪-1-基)-N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基]-苯甲酰胺；4-{4-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基氨基甲酰基]-苯基}-哌嗪-1-甲酸乙酯；N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基]-4-三氟甲基-苯甲酰胺；和N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基]-4-嘧啶-2-基-苯甲酰胺。
本发明的代表性化合物示于表1中。
表1
本发明的化合物可以通过以下所示和描述的示例性合成反应方案中所描述的方法来制备。
在制备这些化合物中所用的原料和试剂通常可以从商业途径例如Aldrich Chemical Co.获得，或者可以通过本领域技术人员已知的方法，按照参考文献例如Fieser and Fieser′s Reagents for Organic Synthesis；Wiley& SonsNew York，1991，第1-20卷；Rodd′s Chemistry of CarbonCompounds，Elsevier Science Publishers，1989，第1-5卷和增刊以及Organic Reactions，Wiley & Sons纽约，1991，第1-40卷中所描述的方法制得。以下合成反应方案仅仅是对可以合成本发明化合物的某些方法的举例说明，参照本申请所公开的内容，本领域的技术人员可以对这些合成反应方案进行各种改变或提出改变方案。
如果需要，合成反应方案的原料和中间体可以用常规的技术进行分离和纯化，这些技术包括但不限于过滤、蒸馏、结晶、色谱法等。这些物质可以用常规的方法进行鉴定，包括物理常数和光谱数据。
若无相反指示，本文中所描述的反应优选在常压下、在约-78℃至约150℃、更优选约0℃至约125℃的温度范围内、并且最优选且最方便地是在室温(或环境温度)、例如约20℃下进行。
方案A和B描述了用于生成本发明化合物的两种方法。方案A举例说明了制备式II的具体化合物的优选方法，其中X是卤素或其它离去基，n、p、R2、Ra、Rb和Rc如本文所定义。方案A的方法是示例性的，合成本发明化合物的其它合成路线对于本领域技术人员是显而易见的。
方案A在方案A的步骤1中，将氨基烷基芳基胺a与芳酰卤b反应得到芳基酰胺化合物c。步骤1是可在温和条件下提供定量或接近定量收率的直接缩合反应，其利用各种氨基烷基芳基胺例如4-氨基甲基-苯基胺和各种芳酰卤。将芳酰卤b用任选取代的苯甲酰卤表示。大多数取代的苯甲酸化合物是可购买的，并且在该步骤中可使用所述化合物的酰基氯化合物。芳酰卤b还可包括其它类型的芳酰卤，包括萘羰基卤化物例如萘-1-羰基卤化物和萘-2-羰基卤化物，它们可以是任选取代的。在本发明的其它实施方案中，芳酰卤b可以用各种杂芳酰卤例如喹啉-5-羰基卤化物、喹啉-6-羰基卤化物、异喹啉-5-羰基卤化物、异喹啉-6-羰基卤化物、异烟酰卤、嘧啶-4-羰基卤化物、呋喃-3-羰基卤化物、噻吩-3-羰基卤化物等所代替，它们本身又可以被任选地取代。还可用于代替芳酰卤b的是取代的苯甲酸酐和杂芳族羧酸酐。
然后将步骤1的芳基酰胺化合物c在步骤2中与2-氯咪唑啉硫酸盐在极性质子溶剂的条件下加热得到式II的咪唑啉基氨基取代的芳基酰胺。
对方案A的方法进行各种改变是可能的。当取代基R2和/或R4与步骤1或步骤2不相容或者对其敏感时，可使用适当的保护基策略。就此而言，可以使用多种众所周知的保护基方案。例如，Greene等在ProtectingGroups in Organic Synthesis，第3版，Wiley & Sons，1999中描述了示例性的保护基策略。在某些实施方案中，尽管通常不是优选的，氯代咪唑啉可以首先与氨基烷基苯胺a反应，只要将氨基进行适当的保护以防止不需要的反应即可。然后将形成的产物脱保护或部分地脱保护并且与芳酰卤b反应得到咪唑啉基氨基取代的芳基酰胺II。
方案B举例说明了制备式III的实施方案的化合物的优选方法，其中n、p、R2、Ra、Rb和Rc如本文所述。
方案B在方案B的步骤1中，将芳基胺e与硝基芳基烷基羧酸f在碳二亚胺例如EDC(1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸)的存在下反应得到硝基取代的芳基酰胺化合物g。在该步骤中所用的芳基胺e可包含任选取代的苯基胺，其中的大多数是可购买的，或任选取代的萘基胺例如萘-1-基胺或萘-2-基胺。另外，化合物e还可包含任选取代的杂芳基胺例如吡啶-4-基胺、嘧啶-5-基胺、喹啉-5-基胺、喹啉-6-基胺、异喹啉-5-基胺、异喹啉-6-基胺、噻吩-3-基胺、呋喃-3-基胺等。
将步骤1的硝基取代的芳基酰胺g在步骤2中还原得到氨基芳基烷基羧酸h。步骤2的还原可以利用铂或钯催化剂在活性碳上在氢气的存在下在温和条件下进行。
然后将步骤2的氨基芳基烷基羧酸化合物h在步骤3中与2-氯咪唑啉硫酸盐在极性质子溶剂条件下加热得到式III的咪唑啉基氨基取代的芳基酰胺。
方案B的方法与方案A的方法一样仅仅是示例性的，许多另外的方法和改变对于本领域技术人员来说是显而易见的。例如，步骤1的硝基取代的芳基酰胺化合物g可以用其中氨基被保护的氨基芳基烷基羧酸化合物代替。在这种情况下，步骤2涉及脱保护得到游离的氨基而不是硝基的还原。在方案B的方法的另一种改变中，将氨基取代的芳基酰胺化合物首先与氯代咪唑啉反应，然后利用适当的保护策略将形成的产物与芳基胺e反应得到芳基酰胺III。
本发明的化合物是IP受体调节剂，尤其是IP受体拮抗剂，因此对IP受体具有选择性的拮抗剂活性。预期这些化合物(以及含有它们的组合物)可用于预防和治疗哺乳动物、特别是人类的各种疾病。此外，本发明的化合物不具有或仅显示很弱的hERG通道抑制作用，因此预计不会引起不需要的心血管副作用。
本发明的化合物尤其具有体内抗炎和/或镇痛特性，因此，它们可用于治疗与各种原因引起的疼痛有关的疾病状态，包括但不限于炎性疼痛、手术疼痛、内脏疼痛、牙痛、经前期疼痛、中枢疼痛、烧伤引起的疼痛、偏头痛或丛集性头痛、神经损伤、神经炎、神经痛、中毒、局部缺血性损伤、间质性膀胱炎、癌症疼痛、病毒、寄生虫或细菌感染、创伤后损伤(包括骨折和运动损伤)以及与功能性肠疾病例如肠过敏性综合症有关的疼痛。
本发明的化合物还可用于各种原因引起的炎症，包括但不限于细菌、真菌或病毒感染、类风湿性关节炎、骨关节炎、手术、膀胱感染或特发性膀胱炎、过度使用(over-use)、老年或营养不足、前列腺炎和结膜炎。
本发明的化合物还可用于治疗与膀胱出口阻塞和尿失禁病症有关的泌尿道的疾病状态有关的疾病状态，例如膀胱出口阻塞、尿失禁、膀胱容量减小、排尿频繁、紧迫性尿失禁、压力性失禁、膀胱反应过度、良性前列腺增生(BPH)、前列腺炎、逼尿肌反射亢进、尿频、夜尿、尿急、膀胱活动过度、骨盆过敏、紧迫性尿失禁、尿道炎、前列腺炎、骨盆疼痛综合征、前列腺痛、膀胱炎和特发性膀胱过敏以及其它与膀胱活动过度有关的症状。
本发明的化合物还可用于治疗低血压性血管疾病，例如与脓毒性休克有关的低血压。
此外，本发明的化合物还可用于治疗呼吸疾病，例如过敏和哮喘。
这些以及其它的治疗用途记载于例如Goodman & Gilman′s，ThePharmacological Basis of Therapeutics，第10版，McGraw-Hill，纽约，2001，第26章；和Coleman，药理学评论，1994，46205-229。
本发明化合物的抗炎/镇痛活性可通过体内试验，例如分别在以下实施例中更详细描述的大鼠角叉菜胶诱导的机械痛觉过敏爪试验和大鼠完全弗氏佐剂诱导的机械痛觉过敏试验来测定。抑制膀胱收缩的活性可以通过体内试验例如分别在以下实施例中更详细描述的对通过等容膀胱膨胀诱导的大鼠膀胱收缩的抑制作用和对容量诱导的(volume-induced)大鼠收缩的抑制作用来测定。抑制脓毒性休克的活性可以通过体内试验例如在以下实施例中更详细描述的在大鼠中逆转由内毒素引起的低血压的试验来测定。本发明的化合物对hERG通道的抑制作用可以按照实施例中所述的方法来测定。
本发明包括含有至少一种本发明的化合物或其单个的异构体、异构体的外消旋或非外消旋混合物或其可药用盐或溶剂化物以及至少一种可药用载体和任选地其它治疗和/或预防成分的药物组合物。
总的来说，本发明的化合物可以通过用于具有类似用途之药物的任何可接受的给药方式以治疗有效量给药。适宜的剂量范围通常为每天1-500mg，优选每天1-100mg，最优选每天1-30mg，这取决于多种因素，例如所治疗疾病的严重程度、个体的年龄和相对健康情况、所用化合物的效力、给药途径和形式、给药所针对的适应症、参与治疗的医生的偏好和经验。治疗所述疾病的普通技术人员不用过多的经验就可以根据其本人的知识和本申请所公开的内容确定出本发明化合物对于给定疾病的治疗有效量。
通常，本发明的化合物以药物制剂的形式给药，包括适于口服(包括颊部和舌下)、直肠、鼻、局部、肺、阴道或胃肠外(包括肌肉内、动脉内、鞘内、皮下和静脉内)给药的形式，或是适于通过吸入或吹入给药的形式。优选的给药方式通常是采用常规每日剂量方案的口服给药，可以根据疾病的程度对该每日剂量方案进行调整。
本发明的化合物，与一种或多种常规的辅剂、载体或稀释剂一起，可以制成药物组合物和单位剂量的形式。药物组合物和单位剂量形式可以含有常规比例的常规成分，可以含或不含另外的活性化合物或活性成分，并且单位剂量形式可以含有与所要采用的预定的每日剂量范围相称的任何适宜有效量的活性成分。药物组合物可以是固体，例如片剂或填充的胶囊、半固体、粉剂、缓释制剂或液体，例如溶液剂、混悬剂、乳剂、酏剂或用于口服的填充胶囊；或是用于直肠或阴道给药的栓剂形式；或是用于胃肠外应用的无菌可注射溶液。因此，每片含有约一(1)毫克活性成分，或更宽地，约0.01至约一百(100)毫克活性成分的制剂是适宜的代表性单位剂量形式。
本发明的化合物可以配制成各种口服给药剂量形式。药物组合物和剂量形式可以含有本发明的化合物或其可药用盐作为活性成分。可药用载体可以是固体或液体。固体形式的制剂包括散剂、片剂、丸剂、胶囊、扁囊剂、栓剂和可分散的颗粒剂。固体载体可以是一种或多种还起稀释剂、矫味剂、增溶剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、防腐剂、片剂崩解剂或包封材料作用的物质。在散剂中，载体通常是细分散的固体，它是与细分散的活性成分的混合物。在片剂中，通常将活性成分与适当比例的具有所需粘合能力的载体混合然后压制成所需的形状和大小。散剂和片剂优选含有约百分之一(1)至约七十(70)的活性化合物。适宜的载体包括但不限于碳酸镁、硬脂酸镁、滑石、糖、乳糖、果胶、糊精、淀粉、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、低熔点的蜡、可可脂等。术语“制剂”还包括活性化合物与用包封材料作为载体的制剂，从而提供活性成分(含或不含载体)被载体包围的胶囊。同样，还包括扁囊剂和锭剂。片剂、散剂、胶囊、丸剂、扁囊剂和锭剂可以是适于口服给药的固体形式。
其它适于口服给药的形式包括液体形式的制剂，包括乳剂、糖浆、酏剂、含水溶液、含水混悬液或是用于在临用之前转化成液体形式制剂的固体形式的制剂。乳剂可以在溶液中制备，例如在丙二醇的水溶液中制备，或者可以含有乳化剂例如卵磷脂、脱水山梨醇一油酸酯或金合欢胶。含水溶液可以通过将活性成分溶于水并加入适宜的着色剂、矫味剂、稳定剂和增稠剂来制备。含水悬浮液可以通过将细分散的活性成分分散在含有粘性材料例如天然或和合成的树胶、树脂、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和其它公知的悬浮剂的水中来制备。固体形式的制剂包括溶液剂、混悬液和乳剂，并且除活性成分外，其中还可以含有着色剂、矫味剂、稳定剂、缓冲剂、人工和天然甜味剂、分散剂、增稠剂、增溶剂等。
本发明的化合物可以配制成用于胃肠外给药(例如，通过注射，例如通过快速浓注或连续输注)的形式并以单位剂量的形式存在于安瓿、预填充的注射器、小容积的输注容器或含有防腐剂的多剂量容器中。组合物可以是在油或含水溶媒例如聚乙二醇水溶液中的混悬剂、溶液剂或乳剂的形式。油或非水载体、稀释剂、溶剂或溶媒的例子包括丙二醇、聚乙二醇、植物油(例如橄榄油)和可注射的有机酯(例如油酸乙酯)，并可含有药物辅剂如防腐剂、湿润剂、乳化剂或助悬剂、稳定剂和/或分散剂。或者，活性成分可以是用于在临用前用适宜的溶媒如无菌、无热源的水构建的粉末形式，该形式通过无菌分离无菌固体或通过冻干溶液得到。
可将本发明的化合物配制成软膏、霜剂或洗剂或透皮贴剂的形式用于向表皮局部给药。软膏和霜剂可以用例如水或油基配制并加入适宜的增稠剂和/或胶凝剂。洗剂可以用水和油基配制并通常也含有一种或多种乳化剂、稳定剂、分散剂、助悬剂、增稠剂或着色剂。适于在口腔内局部给药的组合物包括在矫味基质(通常是蔗糖和金合欢胶或黄蓍胶)中含有活性成分的锭剂；在惰性基质如明胶和甘油或蔗糖和金合欢胶中含有活性成分的香锭；在适宜的液体载体中含有活性成分的漱口水。
还可将本发明的化合物配制成用于以栓剂给药的形式。首先将低熔点的蜡、例如脂肪酸甘油酯的混合物或可可脂熔融，然后通过例如搅拌将活性成分均匀地分散。然后将熔融的均匀混合物倒入适宜大小的模具中，使其冷却固化。
还可将本发明的化合物配制成用于阴道给药的形式。适宜的形式包括含有活性成分和本领域已知的载体的阴道栓、棉塞、霜剂、凝胶、糊剂、泡沫剂或喷雾剂。
本发明的化合物还可配制成用于经鼻给药的形式。将溶液或混悬液通过常规方法例如滴管、吸管或喷雾器直接施用到鼻腔内。该制剂可以是单剂量或多剂量的形式。在后一种的滴管或吸管的情况下，可以通过患者自己施用适宜的、预定体积的溶液或混悬液来完成。在喷雾剂的情况下，可以通过例如计量雾化喷雾泵来实现。
本发明的化合物还可以配制成用于气雾剂给药的形式，特别是向呼吸道、包括鼻内给药。化合物通常应具有较小的粒度，例如五(5)微米或更小。这样的粒度可以通过本领域已知的方法来达到，例如通过微粉化。将活性化合物置于含有适宜的抛射剂例如氯氟化碳(CFC)，例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷或二氯四氟乙烷或二氧化碳或其它适宜气体的预先加压的包装内。气雾剂还可以含有表面活性剂例如卵磷脂。药物的剂量可以通过计量阀来控制。或者，可将活性成分以干粉、例如化合物在适宜的粉末基质例如乳糖、淀粉、淀粉衍生物例如羟丙甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)中的混合物的形式来提供。粉末载体可以在鼻腔内形成凝胶。粉末组合物可以以单位剂量形式例如明胶胶囊或药筒或凸泡包装的形式提供，可以借助吸入器通过这些形式施用粉末。
当需要时，制剂可用适用于缓释或控释给药活性组分的肠溶包衣制备。
药物制剂优选单位剂量形式。在这些形式中，制剂被进一步分成含有适宜量活性成分的单位剂量。单位剂量形式可以是包装的制剂、含有不连续量的制剂的包装，例如小袋装的片剂、胶囊和在小瓶或安瓿内的粉末。此外，单位剂量形式还可以是胶囊、片剂、扁囊剂或锭剂本身，或者可以是适宜数量的任何这些包装形式。
其它适宜的药物载体及其制剂记载于RemingtonThe Science和Practice of Pharmacy l 995，E.W.Martin编，Mack Publishing Company，第19版，Easton，Pennsylvania。在实施例11-17中描述了含有本发明化合物的代表性药物制剂。
给出如下制备方法和实施例是为了使本领域的技术人员能够更清楚地理解和实践本发明。不应将其看作是对本发明范围的限定，它们仅仅是对本发明的举例说明和本发明的代表性例子。
已经努力确保关于所用数值(例如数量、温度等)的准确性，但是某些实验误差和偏差当然还由于差异例如校准、数值的舍入等而被允许。
实施例给出如下制备方法和实施例是为了使本领域的技术人员能够更清楚地理解和实践本发明。不应将其看作是对本发明范围的限定，它们仅仅是对本发明的举例说明和本发明的代表性例子。
实施例1N-[4-(咪唑啉-2-亚基氨基)-苄基]-4-甲氧基-苯甲酰胺步骤1N-(4-氨基苄基)-4-甲氧基苯甲酰胺
向4-氨基苄基胺(7.14g，58.4mmol)的二氯甲烷(120mL)溶液中于0℃及N2下加入三乙基胺(16.4mL，118mmol)和对茴香酰氯(10g，58.4mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中。使混合物达到25℃，搅拌16小时，然后倒在水/冰(约200mL)上。将形成的悬浮液搅拌15分钟，然后滤出白色固体并干燥。重量15g(100％收率)。
步骤2N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基]-4-甲氧基苯甲酰胺 将N-(4-氨基苄基)-4-甲氧基苯甲酰胺(15g，58.4mmol)、2-氯咪唑啉硫酸盐(15.2g，74mmol)和2-丙醇(380mL)的混合物在N2下加热回流2.5小时。将混合物冷却至0℃并过滤，将滤液浓缩至干。向形成的残余物中加入10％氢氧化钠水溶液以达到pH 13-14。将形成的悬浮液过滤，将固体N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基]-4-甲氧基苯甲酰胺用二氯甲烷结晶。重量11.9g(61.4％收率)。mp160.3-160.6℃。
通过以上方法制备的另外的化合物如表1所示。
实施例22-[4-(咪唑啉-2-亚基氨基)-苯基]-N-(4-甲氧基-苯基)-乙酰胺步骤1N-(4-氨基苄基)4-甲氧基苯甲酰胺
将对甲氧基苯胺(4.92g，40mmol)、4-硝基苯基乙酸(7.25g，40mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)(11.5g，60mmol)的混合物在吡啶(40mL)中于室温下搅拌过夜。蒸发溶剂，然后加入HCl(1M，50mL)。将形成的产物过滤，用水和乙醚洗涤，然后用乙醇重结晶得到N-(4-甲氧基-苯基)-2-(4-硝基-苯基)-乙酰胺(9.6g，84％)。
步骤22-(4-氨基-苯基)-N-(4-甲氧基-苯基)-乙酰胺 将N-(4-甲氧基-苯基)-2-(4-硝基-苯基)-乙酰胺(859mg，3mmol)、5％钯碳(16mg)和EtOH(20mL)的混合物在氢气氛(1atm)下搅拌5小时。滤出催化剂，蒸发溶剂得到2-(4-氨基-苯基)-N-(4-甲氧基-苯基)-乙酰胺(732mg，95％)。
步骤32-[4-(咪唑啉-2-亚基氨基)-苯基]-N-(4-甲氧基-苯基)-乙酰胺盐酸盐 利用以上实施例1的方法，将2-(4-氨基-苯基)-N-(4-甲氧基-苯基)-乙酰胺(732mg)用2-氯咪唑啉硫酸盐处理得到2-[4-(咪唑啉-2-亚基氨基)-苯基]-N-(4-甲氧基-苯基)-乙酰胺盐酸盐(10％)；质谱M+H314。
通过以上方法制备的另外的化合物如表1所示。
实施例3制剂通过各种途径给药的药物制剂可按照下表中所示的配方进行配制。在表格中所用的”活性成分”或”活性化合物”是指一种或多种的式I化合物或其可药用盐、溶剂化物或前药。
用于口服的组合物
将各成分混合然后分装到胶囊中，每粒胶囊含有约100mg；一粒胶囊接近一个总的日剂量。
用于口服的组合物
将各成分混合然后用溶剂例如甲醇制粒。然后将配料干燥并用适宜的压片机制成片剂(含有约20mg活性化合物)。
用于口服的组合物
将各成分混合形成用于口服的混悬液。
胃肠外制剂
将活性成分溶于一部分注射用水。然后在搅拌下加入足够量的氯化钠将溶液调至等渗。用剩余的注射用水使溶液达到重量，用0.2微米的膜滤器过滤，然后在无菌条件下包装。
栓剂制剂
将各成分在蒸汽浴上熔融并混合在一起，然后倒入容量为2.5g总重量的模具中。
局部制剂
将除水之外的所有成分混合并在搅拌下加热至约60℃。然后在剧烈搅拌下加入足够量的约60℃的水使各成分乳化，然后加入适量的水至约100g。
鼻喷雾制剂制备多种含有约0.025-0.5％活性化合物的含水混悬液作为鼻喷雾制剂。这些制剂任选地含有非活性成分，例如微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、葡萄糖等。可以加入盐酸来调节pH值。可将鼻喷雾制剂通过每次操作时通常可以递送约50-100微升制剂的鼻喷雾计量泵来给药。一般的给药方案是每4-12小时喷雾2-4次。
实施例4体外人血小板IP受体放射性配体结合试验该实施例的试验用于测定潜在的药物对其预定靶点的结合亲和性的强度。
对于测试的每一药物，用迭代曲线拟合方法测定对结合产生50％抑制的浓度(IC50)和Hill斜率。如果放射性配体的Kd是已知的，则按照Cheng& Prusoff(1973)的方法测定各药物的抑制解离常数(Ki)。对于该受体，在该实施例条件下的典型Kd为1E-8M。通常给出Ki的负对数(pKi)。
用纯净水制备如下缓冲液溶解缓冲液10mM Tris-HCl，1.0mM EDTA(二钠) pH 7.5，4℃试验缓冲液20mM Tris-HCl，5.0mM MgCl2pH 7.4，25℃洗涤缓冲液20mM Tris-HCl，5.0mM MgCl2pH 7.4，4℃1.膜制备将250ml血小板富集的血浆转移到250ml离心管中，然后在20℃下以6000g旋转10分钟。然后将血小板重新悬浮在IP溶解缓冲液中并用Polytron匀浆化(设置7，1×20秒，暴发式的)，使最终体积达到180ml，然后于4℃下以40000g离心15分钟。然后将沉积物重新悬浮在IP试验缓冲液中，通过BCA法(Pierce)测定蛋白质密度，然后在2.0ml的小瓶中于-80℃下保存以用于随后的试验。
为了获得至少80％的特异性结合，在竞争性实验中使用50μg蛋白/试验试管。最终的放射性配体浓度为1-3E-8M。
2.竞争试验将膜于室温下融化，然后在试验缓冲液中稀释至适宜的浓度。向试验试管中首先加入缓冲液、药物、放射性配体，最后加入膜。将试验试管于25℃保温60分钟。将试验试管用Packard Top Count 96孔细胞收集器过滤到用0.3％PEI预处理的玻璃纤维滤垫(GF/B)上。将试管用冰冷的20mMTris-HCl，5mM MgCl2，pH＝7.4冲洗3次(3×0.5ml/样品)。通过液体闪烁计数测定结合的放射性。
利用以上方法，本发明的化合物对于IP受体具有亲和性。例如，化合物4-(2-氯-噻吩-3-基)-N-[4-(4，5--二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基]-苯甲酰胺的pKi值(10μg)约为9.73。
实施例5角叉菜胶诱导的机械痛觉过敏试验通过角叉菜胶诱导的机械痛觉过敏试验，通过测定对角叉菜胶诱导的大鼠爪痛觉过敏的抑制作用，使用Randall和Selitto [Archives ofInternational Pharmacodynamics 11409-419(1957)]和Vinegar等[Journalof Pharmacology和Experimental Therapeutics 16696-103(1969)]所描述的方法的改良形式来测定本发明化合物的抗炎/镇痛活性。
将雄性Sprague-Dawley大鼠(130-150g)称重然后随机分到治疗组(n＝10)中。为了诱导机械痛觉过敏，将大鼠用氟烷轻度麻醉然后在左后爪的趾面上施用1％角叉菜胶或载体1(100μl)。在试验前1小时对大鼠施用载体(10ml/kg，口服或1ml/kg，静脉内)或本发明的化合物(1、3、10、30和100mg/kg，口服)或(0.3、1.0、3.0和10mg/kg，静脉内)。用Analgesy-meter(UGO BASILE，Biological Research Apparatus，Comerio，意大利)测定机械痛觉过敏。将用载体或角叉菜胶处理过的后爪置于仪器的圆顶上，趾面朝下。然后向爪的背侧面施加不断增加的力。将大鼠撤回爪子、挣扎或发出叫声时的力看作是终点。
用单向方差分析对爪撤回力(RESP)在各治疗组之间进行比较。用Fisher′s LSD策略和Dunn′s法进行药物治疗组与载体组的成对比较。计算各动物的机械痛觉过敏的抑制百分比，用如下S型模型评估平均ID50值％抑制＝100/(1+exp((ID50-剂量)/N))其中ID50是抑制最大响应(即，该模型中的100％)的一半所需要的化合物的剂量，N是曲率参数。本发明的化合物在该试验中具有活性。
实施例6完全弗氏佐剂诱导的机械痛觉过敏试验还可以用佐剂诱导的大鼠关节炎疼痛模型来测定本发明化合物的抗炎/镇痛活性，其中用Hylden等[Pain 37229-243(1989)]所描述的方法的改良形式，通过动物对于对发炎爪子的挤压的反应对疼痛进行评估。所述的改良包括评估的是痛觉过敏而不是脊髓神经元活性的改变。
简单地讲，将大鼠称重然后随机分到治疗组中。为了诱导机械痛觉过敏，将大鼠用氟烷轻度麻醉然后在左后爪的趾面内施用100μl完全弗氏佐剂或盐水。24小时后，向大鼠口服给药水(载体)或本发明的化合物，1小时后进行试验。用Analgesy-meter(UGO BASILE，Biological ResearchApparatus，Comerio，意大利)测定机械痛觉过敏。将用盐水或角叉菜胶处理过的后爪置于仪器的圆顶上，趾面朝下。然后向爪的背侧面施加不断增加的力。将大鼠撤回爪子、挣扎或发出叫声时的力看作是终点。用单向方差分析对爪撤回力在各治疗组之间进行比较。用如下公式对各动物计算抑制百分比100×((c/d-c/v)÷(s/v-c/v))其中c/d是在施用药物的动物中用角叉菜胶处理的爪子的爪撤回力；c/v是在施用载体的动物中用角叉菜胶处理的爪子的爪撤回力；s/v是在施用载体的动物中用盐水处理的爪子的爪撤回力。用学生t检验测定显著性。本发明的化合物在该试验中具有活性。
实施例7对通过等容膀胱膨胀诱导的大鼠膀胱收缩的抑制作用采用Maggi等[J.Pharm and Exper.Therapeutics 230500-513(1984)]所描述的方法的改良形式来测定对膀胱收缩的抑制作用。
简单地讲，将雄性Sprague-Dawley大鼠(200-250g)称重然后随机分到治疗组中。通过尿道向膀胱内插入导管以诱导膀胱收缩，然后输入温热的盐水(5ml)。在约30％的动物中产生了有节奏的收缩。将本发明的化合物(0.1、0.3或1mg/kg)在开始规律性节奏收缩时通过静脉内给药。然后测定对节奏性收缩的影响。本发明的化合物在该试验中具有活性。
实施例8对容量诱导的大鼠收缩的抑制作用采用Hegde等人，1996年国际节制协会第26届年会会议记录(Proceedings of the 26th Annual Meeting of the International ContinenceSociety 1996)(8月27-30日)，摘要126中所描述的方法的改良形式来测定对膀胱收缩的抑制作用。
将雌性Sprague-Dawley大鼠用尿烷麻醉然后装配用于静脉内给药以及在某些情况下用于测定动脉压、心率和膀胱内压力的仪器。在另一组动物中测定试验化合物对容量诱导的膀胱收缩的影响。通过将膀胱内充满盐水来诱导容量诱导的反射性膀胱收缩。
将试验化合物以累积的方式以10分钟为间隔进行静脉内给药。在研究结束时给药阿托品(0.3mg/kg，静脉内)作为阳性对照。本发明的化合物在该试验中具有活性。
实施例9在大鼠中逆转由内毒素引起的低血压脓毒性休克，有时称为内毒素性休克，是由于在血流中存在感染性物质、特别是细菌性内毒素所引起的，其特征是低血压和器官功能障碍。许多脓毒性休克的症状、特别是低血压，可以通过施用细菌性内毒素在大鼠中引发。因此，化合物抑制由内毒素引起的低血压的能力可以预示该化合物在治疗脓毒性或内毒素性休克中的用途。
本发明化合物在治疗脓毒性或内毒素性休克中的活性通过用Giral等[British Journal of Pharmacology 1181223-1231(1969)]所描述的方法的改良形式测定在大鼠中逆转由内毒素引起的低血压来确定。
简单地讲，将成年大鼠(＞200g)用吸入麻醉剂麻醉然后对股动脉和股静脉进行插管，分别用于插入血压传感器和给药管。在仍处于麻醉剂的影响下时，将其置于Mayo限制器内。在从麻醉中恢复过来并且在心率和血压稳定后(通常需要约30分钟)，静脉内给药内毒素(50mg/kg大肠杆菌(E.Coli)和25mg/kg沙门氏菌(Salmonella))。监测血压和心率的变化。1小时后，静脉内给药本发明的化合物或载体，然后对心血管参数继续监测3小时。将反应用恢复到起始舒张血压的百分比表示。用学生t检验测定显著性。本发明的化合物在该试验中具有活性。
实施例10hERG钾通道药理学筛选按照Hamill等人[Pflügers Arch.39185-100(1981)]报道的方法测定主题化合物对于在CHO-K1细胞中表达的重组hERG钾通道的影响。
用以下溶液在培养的细胞系中分离钾电流细胞外(mM)NaCl(150)、KCl(4)、HEPES(10)、CaCl2(1.2)、MgCl2(1)，用NaOH调节至pH7.4；细胞内(mM)KCl(140)、HEPES(10)、EGTA(5)、MgCl2(6)、ATP-Na2(5)，用KOH调节至pH7.2。
用全细胞膜薄片箝定技术记录来自于表达人类hERG通道的CHO.K1细胞的钾电流。将每个细胞保持在-80mV的负箝定电位下。在每个实验开始时，通过获得电流-电压的关系来表征电流。将细胞从-80mV至+40mV去极化1秒钟，然后是300ms的复极化至电位-120至+20mV(以20mV的增值)。刺激频率为0.1Hz。测定不同试验电位的峰尾电流幅度以得到电流-电压的关系。
采用另一种方案来研究化合物对hERG电流的影响。将细胞从-80mV至+20mV去极化500ms，然后在-40mV下复极化500ms，随后是200ms的超极化脉冲至-120mV。在超极化脉冲的终点，将细胞返回到-80mV的箝定电位。利用Axon Instruments的pClamp 8.0软件以Clampex方式，以0.1Hz的频率(每10秒钟1个刺激)收集数据点。在已记录到5分钟的稳定基线后开始施用药物。以5或10分钟一组收集数据。对于给定的药物浓度，刺激的数量以及由此产生的数据的组数取决于药物达到平衡的速度。
如果化合物对电流幅度有影响，则通过将缓冲液返回到对照溶液中来检查该影响的可逆性。洗除影响电流的化合物，在完全恢复后向同一细胞施用更高浓度的化合物。
利用全细胞膜薄片箝定技术在室温下(20-22℃)从单个细胞记录与电压有关的钾电流。利用膜片箝放大器(例如Axopatch 200；Axon Instruments)将细胞电压箝定，所述膜片箝放大器通过计算机经由Digidata 1200界面(Axon Instruments)控制。在该实施例中所用的电压箝方案利用PClamp软件(第7版或以后的版本；Axon Instruments)产生。将全细胞电流低通滤波(1-2kHz，4-极Bessel)、数字化(10kHz)并存储在磁性介质上以利用PClamp软件，Microcal Origin和Prism进行脱机分析。
利用Clampfit软件测定外向电流的峰值振幅以测得峰值振幅。将诱发的内部尾电流的峰值振幅用单指数函数拟合f(t)=Σi=1nAie(-t/τi)+C]]>其中A表示峰值电流，C是平顶或反峰，τ是时间常数。采用具有四点修匀函数的Chebyshev求解方法。在拟合了尾电流并测定了峰值振幅后，以与对照峰的峰值振幅相比的改变％测定化合物的效果。利用MicrocalOrigin和Prism软件计算出统计学数据，将结果以平均值+/-平均值的标准误差报告。对于每种化合物的测试，每个化合物浓度需要最少3个细胞。
将已知的可以抑制hERG钾通道的化合物西沙必利用作标准化合物，产生西沙必利的全浓度响应曲线以与主题化合物相比较。
利用以上试验，本发明的化合物没有显著地抑制hERG钾通道。特别地，对于代表性化合物N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基-氨基)-苄基]-4-甲氧基-苯甲酰胺，hERG外向电流抑制百分数在1μM是4.3±4.4％，在10μM是10.8±7.2％。
虽然参照具体的实施方案对本发明进行了描述，但本领域技术人员应当理解，可以进行各种改变和等同物的替换而不超出本发明的实质和范围。此外，可以进行多种改变以使特定的情况、材料、组合物、方法、工艺步骤与本发明的实质和范围相适应。所有这些改变均包括在所附权利要求所定义的范围内。
权利要求
1.式I化合物或其可药用盐、溶剂化物或前药 其中R1是芳基或杂芳基；R2是氢、烷基、烷氧基、卤代烷基或卤素；A是-C(O)-NRa-(CRbRc)n-或-NRa-C(O)-(CRbRc)n-；n是1至6；Ra、Rb和Rc彼此独立地是氢或烷基。
2.式II化合物或其可药用盐、溶剂化物或前药 其中R1是任选取代的芳基或任选取代的杂芳基；R2是氢、烷基、烷氧基、卤代烷基或卤素；R3和R4彼此独立地是氢或烷氧基羰基；A是-C(O)-NRa-(CRbRc)n-或-NRa-C(O)-(CRbRc)n-；n是1至6；Ra是氢、烷基或环烷基；并且Rb和Rc彼此独立地是氢或烷基。
3.权利要求2的化合物，其中A是-C(O)-NRa-(CRbRc)n-。
4.权利要求2的化合物，其中A是-NRa-C(O)-(CRbRc)n-。
5.权利要求3或4的化合物，其中R1是任选地被一个、两个或三个独立地选自下列的取代基所取代的苯基烷基、链烯基、烷氧基、任选取代的芳基、任选取代的芳氧基、芳烷基氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、羟基烷基、烷基磺酰基、烷氧基烷基氧基、羟基烷基氧基、硝基、氰基、羟基、环烷基、环烷基氧基、环烷基烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、亚甲基二氧基、亚乙基二氧基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基氧基、任选取代的杂环基磺酰基、任选取代的杂环基烷基氧基、任选取代的杂芳基、氨磺酰基、烷基氨磺酰基、二烷基氨磺酰基或磺酰基氨基。
6.权利要求1的化合物，其中所述化合物是式III化合物 其中p是0至4；R4是烷基、链烯基、烷氧基、任选取代的芳基、任选取代的芳氧基、芳烷基氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、羟基烷基、烷基磺酰基、烷氧基烷基氧基、羟基烷基氧基、硝基、氰基、羟基、环烷基、环烷基氧基、环烷基烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、亚甲基二氧基、亚乙基二氧基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基氧基、任选取代的杂环基磺酰基、任选取代的杂环基烷基氧基、任选取代的杂芳基、氨磺酰基、烷基氨磺酰基、二烷基氨磺酰基或磺酰基氨基；Ra是氢、烷基或环烷基；Rb和Rc彼此独立地是氢或烷基；并且n和R2如权利要求1中的定义。
7.权利要求1的化合物，其中所述的化合物是式IV化合物 其中p是0至4；R4是烷基、链烯基、烷氧基、任选取代的芳基、任选取代的芳氧基、芳烷基氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、羟基烷基、烷基磺酰基、烷氧基烷基氧基、羟基烷基氧基、硝基、氰基、羟基、环烷基、环烷基氧基、环烷基烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、亚甲基二氧基、亚乙基二氧基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基氧基、任选取代的杂环基磺酰基、任选取代的杂环基烷基氧基、任选取代的杂芳基、氨磺酰基、烷基氨磺酰基、二烷基氨磺酰基或磺酰基氨基；Ra是氢、烷基或环烷基；Rb和Rc彼此独立地是氢或烷基；并且n和R2如权利要求1中的定义。
8.权利要求5的化合物，其中所述的化合物是式V的化合物 其中R4和Ra如权利要求5中的定义。
9.权利要求1的式I化合物，其选自下列化合物N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基-氨基)-苄基]-4-甲氧基-苯甲酰胺；(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基)-{4-[(4-甲氧基-苯甲酰基氨基)-甲基]-苯基}-氨基甲酸乙酯；N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基]-2，4-二氟-苯甲酰胺；N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基]-4-氟-苯甲酰胺；4-氯-N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基]-苯甲酰胺；N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基]-4-噻吩-3-基-苯甲酰胺；N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基]-4-(2-甲氧基-乙氧基)-苯甲酰胺；N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基]-4-(四氢-吡喃-4-基氧基)-苯甲酰胺；4-{4-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基氨基甲酰基]-苯氧基}-哌啶-1-甲酸乙酯；N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基]-4-吡唑-1-基-苯甲酰胺；N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基]-4-(3-甲基-吡唑-1-基)-苯甲酰胺；N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基]-4-甲氧基-N-甲基-苯甲酰胺；4-(4-苯磺酰基-哌嗪-1-基)-N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基]-苯甲酰胺；4-{4-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基氨基甲酰基]-苯基}-哌嗪-1-甲酸乙酯；N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基]-4-三氟甲基-苯甲酰胺；和N-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基氨基)-苄基]-4-嘧啶-2-基-苯甲酰胺。
10.用作治疗活性物质的权利要求1至9中的任何一项所述的化合物。
11.一种药物组合物，其含有与至少一种可药用载体相混合的治疗有效量的至少一种权利要求1的式I化合物。
12.治疗由IP受体拮抗剂介导的疾病的方法，该方法包括对需要所述治疗的个体施用治疗有效量的至少一种权利要求1的式I化合物。
13.权利要求1至9中的任何一项所述的化合物在生产用于控制由IP受体拮抗剂介导的疾病的药物中的用途。
14.制备权利要求1的式I化合物的方法，所述的方法包括将下式化合物 与氯代咪唑啉反应以形成式I化合物。
15.通过权利要求14的方法制备的化合物。
16.上文所述的本发明。
全文摘要
式I所示的可以作为IP受体调节剂、特别是IP受体拮抗剂的化合物，其中A、R
文档编号C07D233/54GK1780617SQ200480011778
公开日2006年5月31日 申请日期2004年4月21日 优先权日2003年5月1日
发明者A·贾汗吉尔, P·F·凯兹, F·J·罗裴茨-塔比阿, C·奥扬 申请人:弗·哈夫曼-拉罗切有限公司