专利名称：区域选择性合成cci－779的制作方法
背景技术：
本发明提供了适用作抗肿瘤药的CCI-779的区域选择性合成方法。
雷帕霉素在42位与3-羟基-2-(羟甲基)-2-甲基丙酸形成的酯(CCI-779)是雷帕霉素的一种酯，其已证明在体外和体内模型中对于肿瘤生长均具有显著抑制作用。
CCI-779可延缓肿瘤进程或肿瘤复发的时间，其更加典型地是细胞生长抑制剂而非细胞毒剂。CCI-779的作用机理被认为与西罗莫司相类似。CCI-779结合于胞浆蛋白FKBP并与其形成复合物，抑制mTOR酶(雷帕霉素的哺乳动物靶点，也称为FKBP 12-雷帕霉素相关蛋白[FRAP])。抑制mTOP激酶活性就抑制了许多信号转导途径，包括细胞激酶-刺激的细胞增殖，mRNA翻译成若干调节细胞周期G1期的关键蛋白，以及IL-2-诱导的转录，导致抑制细胞周期从G1向S的进程。对于抗癌药而言，CCI-779导致G1-S期阻滞这一机理是新颖的。
在体外，CCI-779已显示抑制大量组织学上不同肿瘤的生长。中枢神经系统(CNS)癌症、白血病(T-细胞)、乳腺癌、前列腺癌和黑色素瘤系均对于CCI-779最为敏感。该化合物在细胞周期的G1期阻止细胞。
已在裸鼠的体内研究中证明CCI-779具有抑制不同组织学类型的人类肿瘤异种移植的活性。神经胶质瘤对于CCI-779特别敏感并且该化合物在裸鼠正位神经胶质瘤模型中具有活性。在体外，生长因子(血小板衍生的)-诱导刺激的人神经胶质瘤细胞系被CCI-779显著地抑制。在体内研究中，裸鼠内的若干人胰腺瘤以及两种乳腺癌系之一也被CCI-779抑制。
雷帕霉素羟基酯(包括CCI-779)的制备和应用描述于美国专利5,362,718中。CCI-779的区域特异性合成描述于美国专利6,277,983中。
根据美国专利5,362,718的描述，通过非-区域选择性酰化雷帕霉素可合成CCI-779。但是，该合成是复杂的，混合有所需的42-酯、31-酯化雷帕霉素以及31，42-二酯化雷帕霉素和未反应的雷帕霉素。
根据美国专利6,277,983的描述，还可通过使用二-(羟甲基)丙酸的缩酮酰化31-甲硅烷醚的雷帕霉素制备CCI-779，随后除去31-甲硅烷醚和二-(羟甲基)丙酸的缩酮保护基。但是，由该立体选择性合成产生的粗42-单酯需要进一步经柱色谱法纯化从而除去残留量的双酯副产物和未反应的雷帕霉素起始原料。
发明简介本发明提供了基于硼酸化学使用3-羟基-2-(羟甲基)-2-甲基丙酸区域选择性合成雷帕霉素42-酯(CCI-779)的方法。本发明克服了使用先前方法制备雷帕霉素42-单酯时的复杂和通常繁重的纯化操作。
本发明的其它方面和优点将根据下面的发明详述轻易地的看出。
发明详述本发明提供了通过使用下式化合物HOOC.CR7R8R9或其混合酸酐酰化雷帕霉素31-甲硅烷醚从而区域选择性合成雷帕霉素42-酯(CCI-779)的方法，其中R7是氢、1-6个碳原子的烷基、2-7个碳原子的链烯基、2-7个碳原子的炔基、-(CR12R13)fOR10、-CF3、-F或-CO2R10；R10是氢、1-6个碳原子的烷基、2-7个碳原子的链烯基、2-7个碳原子的炔基、三苯基甲基、苄基、2-7个碳原子的烷氧甲基、氯乙基或四氢吡喃基；R8和R9一起形成X；X是2-苯基-1，3，2-二噁硼烷(dioxaborinan)-5-基或2-苯基1，3，2-二噁硼烷-4-基，其中苯基可任选取代；R12是R13分别独立是氢、1-6个碳原子的烷基、2-7个碳原子的链烯基、2-7个碳原子的炔基、三氟甲基或-F；以及f＝0-6；生成雷帕霉素42-酯硼酸基(boronate)31-甲硅烷醚。
此后，雷帕霉素31-甲硅烷醚、42-硼酸基在温和酸性条件下水解形成雷帕霉素42-酯硼酸基。该雷帕霉素42-酯硼酸基经适宜的二醇处理。该方法可制备区域特异性雷帕霉素42-酯。
从雷帕霉素甲硅烷基醚根据本发明方法制备、分离并纯化雷帕霉素42-酯需要一种反-硼化反应，其中化合物的苯基硼酸基部分转化成二醇。该反-硼化后从乙醚庚烷中沉淀出雷帕霉素42-酯。较先前公开的制备雷帕霉素酯或醚的合成路线，本发明的合成路线提供了若干独特的优势；主要在于纯化，降低产品成本，提高安全性，提高生产量并减少生产时间。本发明的方法提供了制备雷帕霉素42-酯(例如，CCI-779)的新方法。消除了在所有大规模批量制备CCI-799中所用的繁重的色谱步骤。消除了美国专利6,277,983中所述的在色谱中所需的大量溶剂，从而降低了产品成本。生产反应时间和资源降低50％。大规模合成CCI-779所需的反应堆大小降低了，从而升高了总生产量。本发明描述的新型反-硼化方法降低了总的加工时间。先前合成方法中最后的二乙基醚纯化也被本发明的嵌入纯化方法所淘汰。
根据本发明，使用式HOOC.CR7R8R9化合物或其混合酸酐酰化31-甲硅烷基醚雷帕霉素，如上所述生成31-甲硅烷基乙基，42-酯硼酸基。在一种实施方案中，使用5-甲基-2-硼酸基[1，3-二噁烷]-5-羧酸(由下面流程
图1中的化合物[A]举例说明)或5-甲基-2-苯基-1，3，2-二噁硼烷-5-羧酸的2，4，6-三氯苯甲酰基混合酸酐酰化雷帕霉素31-甲硅烷基醚。
美国专利6,277,983中提供了一种制备雷帕霉素31-甲硅烷基醚的特别合意的方法。本发明不限于这一获得雷帕霉素31-甲硅烷基醚的方法。但是，目前优选的雷帕霉素31-甲硅烷基醚是雷帕霉素31-O-三甲基甲硅烷基醚。
在一种实施方案中，雷帕霉素31-甲硅烷基醚的特征在于具有下列结构
其中，R选自-O-C＝O.CR7R8R9其中R7是氢、1-6个碳原子的烷基、2-7个碳原子的链烯基、2-7个碳原子的炔基、-(CR12R13)fOR10、-CF3、-F或-CO2R10；R10是氢、1-6个碳原子的烷基、2-7个碳原子的链烯基、2-7个碳原子的炔基、三苯基甲基、苄基、2-7个碳原子的烷氧甲基、氯乙基或四氢吡喃基；R8和R9一起形成X；X是2-苯基-1，3，2-二噁硼烷-5-基或2-苯基1，3，2-二噁硼烷-4-基，其中苯基可任选取代；R12是R13分别独立是氢、1-6个碳原子的烷基、2-7个碳原子的链烯基、2-7个碳原子的炔基、三氟甲基或-F；以及f＝0-6；且其中R′、R″和R相同或不同并选自1-6个碳原子的烷基、苯基和苄基。
本发明提供了新型化合物[A]，其适用于制备CCI-779及其类似物。化合物[A]的制备包括使苯基硼酸与2，2-二(羟甲基)-丙酸在室温混合生成苯基硼烷(borinane)。通常收率＞90％。该反应可以在二氯甲烷中进行，但优选的溶剂是四氢呋喃(THF)。
合意地，苯基硼烷是2-苯基-1，3，2-二噁硼烷-5-羧酸，其中苯基任选被取代。在另一种实施方案中，苯基硼烷是2-苯基-1，3，2-二噁硼烷-4-基，其中苯基任选被取代。苯基上一个特别需要的取代基是烷基，最合意的是C1、C2、C3、C4、C5或C6烷基。其它的芳基-(包括苯基-)硼酸(boronic acid)可用于该反应。包括单、二和三-取代芳基硼酸，其中各取代基相同或不同。芳基上的取代基包括氢、烷基、烷氧基、芳氧基(例如，苯氧基)、芳烷基、硝基、氰基、稠合的苯基比如naphthalylboronic acid。当术语烷基作为基团或基团(比如烷氧基或芳烷基)的部分使用时包括1至12个碳原子例如1-6个碳原子的烷基部分。当术语芳基作为基团或基团(比如芳烷基或芳氧基)的部分使用时意指包括6-10个碳原子的芳香基团，比如苯基或萘基。优选的芳基硼酸是苯基硼酸。
简言之，优选雷帕霉素在31和42位经氯化三甲基甲硅烷二-甲硅烷化，随后经稀硫酸区域选择性在42位脱甲硅烷化。分离的产物在42-位经衍生于2-苯基硼酸基酸的酸酐酰化。加入二甲基氨基吡啶作为催化剂以驱使反应完全。该反应需要～3当量的混合酸酐以消耗所有的31-三甲基甲硅烷基雷帕霉素。反应操作完成后，所得溶液贮存于0至10℃以备后面步骤所需。置于丙酮溶液中，其产物将经分裂形成化合物[B]。这没有任何问题，因为下一步骤将水解甲硅烷基官能团。于0至10℃在丙酮中83天后几乎完全转化(＜3％)为[B]。
形成混合酸酐后接着REACTIR(ASI Applied Systems)。该REACTIR(ASI Applied Systems)系统是为了实时的、现场分析各种化学反应而特别设计的方法。考虑到由羧酸和酰氯形成了混合酸酐，该反应非常适于用红外波谱(IR)监测。IR是检测羰基官能团存在的有效方法，在REACTIR情况下，可有效地监测羰基官能团的出现或消失。在通常的REACTIR(ASI Applied Systems)过程中，化合物[A]与二异丙基乙基氨基在二氯甲烷中混合并在冰浴中冷却至0-5℃。采集IR波谱作为背景扫描。然后加入2，4，6-三氯苯甲酰氯。采集第二个IT波谱扫描作为T＝0min(即，反应开始)。该试验设置为每隔5分钟采集IR波谱持续5hr，维持浴温0-5℃。关键的特征谱带为1818cm-1、1741cm-1和1031cm-1。当将酰氯加至化合物[A]和二异丙基乙基氨基的混合物时(T＝0min)，波谱显示基本没有峰信号。但是，羰基和酸酐(C-O-C)频率区随时间增加，表明形成了混合酸酐。
该混合酸酐反应可在乙酸乙酯、叔丁基甲基醚、二乙基醚和四氢呋喃中进行，但该反应更加缓慢。优选溶剂是二氯甲烷，因为其便于反应完全。对于该反应，DMAP是优选的碱催化剂。其它可用的碱是吡咯烷并吡啶、N-甲基咪唑和吡啶。
该混合酸酐不稳定且低温现场制备。其在-5至0℃可在长达48hr内稳定。其可以在-50至20℃制备但优选温度范围为-6至5℃。在偶合反应之前老化该混合酸酐8hr。加入31-三甲基甲硅烷基(TMS)雷帕霉素偶合部分之前优选放置4至5hr。
该偶合反应可以在-20℃至20℃进行但优选的温度范围为-11℃至-5℃。在较高温度下，该反应变得更加缓慢且会需要更多的混合酸酐以使反应完全。在较低温度下，虽然反应较长但混合酸酐更加稳定。该反应通常在12至17hr内完成。
在3-步骤1-反应容器顺序中制备、分离和纯化化合物[B]。该反应的关键因素是选用丙酮作为溶剂。该制备中可使用其它溶剂包括二乙基醚、已经、乙酸乙酯、THF、叔丁基甲基醚和二氯甲烷。目前，丙酮是优选的溶剂。
由此，将31-三甲基甲硅烷基CCI-779硼酸基([D])溶解于丙酮中形成浓缩液。但是，在某些实施方案中，可使用单相酸水溶液/有机溶剂体系进行水解。
31-三甲基甲硅烷基的水解(提供[B])在温和的酸性条件下进行。由此，所选择的有机溶剂(例如，丙酮)与稀无机酸比如硫酸盐酸或磷酸混合。适宜的稀无机酸的浓度例如在约0.1N至约3N范围内，或约0.2N至2N，或约0.5N。典型地，该步骤在约25℃或更低温度下进行，或约-5℃至约10℃，或约0℃至约5℃。合意地，该步骤在pH5至6中进行。任选地，在碳酸氢钠和/或乙酸存在下或将适宜的缓冲剂例如乙酸钠加入该混合物中以调节或维持所需范围的pH。
在下面的实施例中，该水解反应在0至5℃使用0.5N硫酸。该反应通常在5至6小时内完成且通过简单的过滤可轻易地得到化合物[B]。但是，步优选使用氟化物试剂除去31-三甲基甲硅烷基，因为会形成分解产物。
雷帕霉素42-硼酸基酯是新型的中间体，适用于本发明制备雷帕霉素42-酯的方法。在一种实施方案中，该中间体是与5-甲基-2-苯基-1，3，2-二氧杂硼烷-5-羧酸形成的雷帕霉素42-酯。
在一种实施方案中，本发明提供式I的雷帕霉素42-酯硼酸基化合物 其中R选自-O-C＝O.CR7R8R9其中R7是氢、1-6个碳原子的烷基、2-7个碳原子的链烯基、2-7个碳原子的炔基、-(CR12R13)fOR10、-CF3、-F或-CO2R10；R10是氢、1-6个碳原子的烷基、2-7个碳原子的链烯基、2-7个碳原子的炔基、三苯基甲基、苄基、2-7个碳原子的烷氧甲基、氯乙基或四氢吡喃基；R8和R9一起形成X；X是2-苯基-1，3，2-二噁硼烷-5-基或2-苯基1，3，2-二噁硼烷-4-基，其中苯基可任选取代；R12是R13分别独立是氢、1-6个碳原子的烷基、2-7个碳原子的链烯基、2-7个碳原子的炔基、三氟甲基或-F；以及f＝0-6；在本发明方法的该期，根据本发明方法制备的雷帕霉素42-酯硼酸基通常作为该化合物的B和C异构体存在。[下面举例说明例示性化合物[B]的这两种异构体]。在该期，B∶C异构体的比例通常＜10∶1。本发明人已发现B异构体较C异构体更易于结晶且在丙酮中溶解度更低。为了利用这些性质，本发明人已证明在pH 5至6的乙酸钠缓冲液中，B∶C异构体比率可提高至高于20∶1。通过提高这一比率，可增加化合物[B]的回收。由此，将B∶C异构体比率提高至至少1∶1，更合意地，高于5∶1，高于10∶1，高于15∶1，高于20∶1，最优约25∶1。加入碳酸氢钠以中和硫酸并调节pH至7至8。然后加入乙酸形成乙酸钠并降低pH至5-6。放置该反应混合物16h后，异构体比率变为～25∶1。可使用其它缓冲剂比如乙酸钾和乙酸锌但优选乙酸钠。
[B]B异构体 [B]C异构体混合物经过滤、洗涤和干燥得到粗化合物[B]。母液主要包含C异构体，二酯副产物和与结晶的粗雷帕霉素起始原料相关的其它未知杂质。
为了便于获得纯净产物，此时监测粗化合物[B]中雷帕霉素的水平是很关键的。通过高效液相色谱法测定的雷帕霉素的含量通常为～5％(面积％)。重结晶使得雷帕霉素含量降低至＜0.7％。在适宜的溶剂比如丙酮中纯化可降低雷帕霉素水平。如流程图中所说明的，化合物[B]是固态的白色粉末，在室温下稳定。
该反应可在溶剂比如醚溶剂或优选THF中进行，使用叔丁基甲基醚或甲苯稀释反应混合物并应用水萃取法除去过量二醇和二醇-硼酸基副产物。二醇和二醇-硼酸基均是水溶性的。所优选的方法除去了水萃取物。所优选的方法包括简单的过滤步骤。该方法包括在THF、叔丁基甲基醚或乙腈中溶解化合物[B]，加入二醇并在室温混合3h。稀释该溶剂得到泡沫/油状的反应混合物。加入醚并使用庚烷共沉淀产物。可重复该方法从而由化合物[B]生成CCI-779，收率为80％至90％。
使用二醇的初步处理除去反应混合物中的大部分苯基硼酸。残存的余量苯基硼酸可通过使用二醇的附加处理轻易地净化。该操作所得终化合物[C]表明苯基硼酸含量是可接受的。在反硼化处理中可使用过量的二醇单优选1至5摩尔当量的量。该反-硼化的收率为86％。从雷帕霉素的总收率为47％至50％。
许多1，2-、1，3-、1，4-和1，5-二醇可用于实现该反硼化。优选烷基取代的二醇比如2-甲基-2，4-戊二醇。二乙醇胺或固载聚苯乙烯二乙醇胺(PS-DEAM)是适用的。还可使用羧酸试剂比如草酸、丙二酸、酒石酸、邻苯二甲酸和水杨酸实现反硼化。2，2-二(羟甲基)丙酸是有效的但无法从终产物中除去。
在下面的流程图中举例说明该方法。该流程图仅是举例性的并不限于本发明。
5-甲基-2-苯基-1，3，2-二噁硼烷(dioxaborinane)-5-羧酸的制备，[A]向2，2-二(羟甲基)丙酸(131g，0.98摩尔)的四氢呋喃(500ml)悬浮液中加入苯基硼酸的四氢呋喃(500ml)溶液。搅拌该混合物3h并加入甲苯(1.0L)。通过与甲苯共沸蒸馏除去水。加入庚烷(500ml)以沉淀产物，加热回流并冷却。过滤该混合物并经庚烷(2×300ml)洗涤。于70-75℃真空干燥固体至恒重，收率为94％。1H NMRδ(DMSO-d6)7.65(d，2H，Ar)，7.40(m，3H，Ar)，4.35(d，2H，CH2)，3.92(d，2H，CH2)，1.17(s，3H，CH3).
使用5-甲基-2-苯基基-1，3，2-二噁硼烷-5-羧酸制备雷帕霉素42酯，[B]如美国专利6,277,983(2001)所述，向3L烧瓶装入雷帕霉素(100g，0.104摩尔)并溶解于乙酸乙酯(1.50L)中。将该溶液冷却至5-10℃。加入咪唑(30g，0.44摩尔，4.23eq.)并溶解。在氮气保护下，于30-40min内加入氯化三甲基甲硅烷(44g，0.405摩尔，4.0eq.)，在加入的同时维持温度0-5℃。维持该混合物至少0.5h。使用TLC监测该反应(30∶70丙酮∶庚烷洗脱剂)。当所有的雷帕霉素消耗尽后结束该反应。
移出两至三滴反应混合物并保留作为31，42-二(三甲基甲硅烷基)雷帕霉素参考标准。在0.5h内向该3L烧瓶中加入0.5N硫酸(300mL)，维持温度0-5℃。剧烈搅拌该混合物并维持5h。通过薄层色谱法(TLC)监测该反应(30∶70丙酮∶庚烷洗脱剂)。当基本上没有31，42-二(三甲基甲硅烷基)雷帕霉素存在时结束该反应。分离各层并再使用乙酸乙酯(500mL)萃取下面的水层。合并的有机层经饱和盐水(500mL)和饱和碳酸氢钠(2×200mL)洗涤直至达到pH 8。该有机层经水(2×500mL)和盐水(500mL)洗涤直至pH 6～7。该溶液经硫酸镁(100g)干燥30min，过滤入2L烧瓶中并浓缩至135ml体积。加入乙酸乙酯(500ml)并浓缩至135ml体积。使用乙酸乙酯(500ml)再次对于水相进行重复。加入二氯甲烷(300ml)并保留该溶液直至后面步骤的需要。
向装有机械搅拌棒的3L烧瓶装入化合物[A](75g，0.341摩尔)和二氯甲烷(400mL)。在20分钟内逐滴加入二异丙基乙基胺(66.1g，0.51摩尔)并使用二氯甲烷(25mL)冲洗。加入2，4，6-三氯苯甲酰氯(80g，0.328摩尔)并使用二氯甲烷(25mL)冲洗。该混合物于0-5℃维持4h，冷却至-10±5℃。
将31-三甲基甲硅烷基雷帕霉素溶液加入包含混合酸酐的3L烧瓶中并使用二氯甲烷(25mL)冲洗。制备二甲基氨基吡啶(48.5g，0.397摩尔)的二氯甲烷(150mL)溶液并在1.5h内加入，维持温度＜-8℃，使用二氯甲烷冲洗(25mL)。于-11至-5℃维持该混合物12h。维持温度＜10℃，使用1N硫酸(600ml)猝灭该反应混合物。搅拌该混合物并维持30分钟。上面水层的pH≤2。分离各层，下面有机层经盐水(450ml)、饱和碳酸氢钠(500mL)洗涤直至pH≥8。有机层经水(450ml)洗涤直至pH 6-7。浓缩溶液，加入丙酮(250ml)并浓缩。使用另一份丙酮(250ml)重复并浓缩。
该溶液经丙酮稀释。在30分钟内逐滴加入0.5N硫酸(500mL)，维持锅温(pot temperature)0-5℃。维持该混合物至少5h，期间，产物从溶液中沉淀出来。在30分钟内逐滴加入碳酸氢钠水溶液(30g溶于375ml水)，维持锅温0-5℃；维持该混合物至少30分钟。加入乙酸(25ml)直至pH为5-6，维持锅温＜10℃。将该混合物升至室温并维持16h。过滤固体产物并使用水(2×100ml)随后使用1∶1丙酮∶水(2×100ml)洗涤。滤饼在丙酮(375ml)中纯化得到65g(根据雷帕霉素的总收率为58％)产物[B]。LC/MS在阳离子模式下使用电喷射界面提供分子离子[M+Na]＝1138.5原子量单位(amu).
使用2，2-二(羟甲基)-丙酸制备雷帕霉素，[C]将化合物[B](200g，0.179摩尔)溶解于四氢呋喃(600ml)中，加入2-甲基-2，4-戊二醇(42.3g，0.358摩尔，2.0eq.)并至少搅拌该混合物3h。浓缩该反应混合物至发泡。加入二乙基醚(1.0L)并搅拌该混合物2h。在1h内逐滴加入庚烷并搅拌该混合物1h。过滤该混合物并使用庚烷(500ml)洗涤固体产物。将固体再溶解于丙酮(400ml)中，再次使用溶于丙酮(200ml)中的2-甲基-2，4-戊二醇(21.1g，0.179摩尔，1eq.)处理，通过0.2微米筒式过滤器使澄清，并使用丙酮冲洗(200ml)。浓缩该溶液至发泡，加入二乙基醚(1.0L)(其通过0.2微米筒式过滤器预过滤)并搅拌混合物2h。通过加入预过滤的庚烷(1.0L)共沉淀混合物。过滤沉淀的固体并使用乙醚∶庚烷(2×500ml)洗涤。干燥(55～60℃，10mm Hg，至少24h)固体得到159g(86％)产物[C]。LC/MS在阳离子模式下使用APCI提供分子离子[M+NH4]＝1047.0amu。产物(CCI-779)的1H NMR与美国专利5,362,718(1994)实施例11中描述的产物相同。
所有专利、专利申请、文章或本文引用的其它文献在此引入作为参考。本领域技术人员将明了对于本文所述具体实施方案可进行修改而没有偏离本发明的范围。
权利要求
1.一种制备雷帕霉素42-酯的方法，其包括(a)使用下式化合物HOOC.CR7R8R9或其混合酸酐酰化雷帕霉素31-甲硅烷醚，其中R7是氢、1-6个碳原子的烷基、2-7个碳原子的链烯基、2-7个碳原子的炔基、-(CR12R13)fOR10、-CF3、-F或-CO2R10；R10是氢、1-6个碳原子的烷基、2-7个碳原子的链烯基、2-7个碳原子的炔基、三苯基甲基、苄基、2-7个碳原子的烷氧甲基、氯乙基或四氢吡喃基；R8和R9一起形成X；X是2-苯基-1，3，2-二噁硼烷-5-基或2-苯基-1，3，2-二噁硼烷-4-基，其中苯基可任选取代；R12是R13分别独立是氢、1-6个碳原子的烷基、2-7个碳原子的链烯基、2-7个碳原子的炔基、三氟甲基或-F；以及f＝0-6；生成雷帕霉素42-酯硼酸基31-甲硅烷醚；(b)在温和酸性条件下选择性水解42-硼酸基31-甲硅烷醚形成雷帕霉素42-酯硼酸基；以及(c)经适宜的二醇处理该雷帕霉素42-酯硼酸基得到雷帕霉素42-酯。
2.根据权利要求1的方法，其中所制备的雷帕霉素42-酯是CCI-779，且其中所述的酰化步骤(a)包括使用5-甲基-2-苯基-1，3，2-二噁硼烷-5-羧酸或5-甲基-2-苯基-1，3，2-二噁硼烷-5-羧酸的混合酸酐酰化雷帕霉素31-甲硅烷醚从而得到雷帕霉素31-O-甲硅基醚、42-酯硼酸基4
3.根据权利要求1或权利要求2的方法，其中31-甲硅烷基醚为下式基团-OSiR’R”R其中，R’、R”和R相同或不同，选自1-6个碳原子的烷基、苯基和苄基。
4.根据权利要求1至3任一项的方法，其中31-甲硅烷基醚是三甲基甲硅烷基醚。
5.根据权利要求1至4任一项的方法，其中酰化步骤(a)采用5-甲基-2苯基-1，3，2-二噁硼烷-5-羧酸进行。
6.根据权利要求1至4任一项的方法，其中酰化步骤(a)使用5-甲基-2苯基-1，3，2-二噁硼烷-5-羧酸的2，4，6-三氯苯甲酰混合酸酐进行。
7.根据权利要求1至6任一项的方法，其中步骤(a)中的酰化在低于约20℃进行。
8.根据权利要求7中的方法，其在约-50℃至约20℃的温度下进行。
9.根据权利要求1至9任一项的方法，其中步骤(a)在包含二氯甲烷的溶剂中进行。
10.根据权利要求1至9任一项的方法，其中步骤(b)中的酸是稀无机酸。
11.根据权利要求10的方法，其中酸是硫酸、盐酸或磷酸。
12.根据权利要求11的方法，其中步骤(b)中所用的酸是硫酸。
13.根据权利要求10至12任一项的方法，其中步骤(b)中所用的酸约为0.1N至约3N。
14.根据权利要求13的方法，其中步骤(b)中所用的酸约为0.2N至约2N。
15.根据权利要求13或14的方法，其中步骤(b)中所用的酸约为0.5N。
16.根据权利要求1至15任一项的方法，其中步骤(b)在单相酸水溶液/有机溶剂体系中进行。
17.根据权利要求16的方法，其中有机溶剂是丙酮。
18.根据权利要求1至17任一项的方法，其中步骤(b)在约20℃或更低的温度下进行。
19.根据权利要求18的方法，其中步骤(b)在约-5℃至约10℃的温度下进行。
20.根据权利要求18或权利要求19的方法，其中步骤(b)在约0℃至约5℃的温度下进行。
21.根据权利要求1至20任一项的方法，其中步骤(c)中所用的二醇是1，2-、1，3-、1，4-或1，5二醇。
22.根据权利要求21的方法，其中二醇是2-甲基-2，4-戊二醇。
23.根据权利要求1至22任一项的方法，其中步骤(c)中所用的二醇的量约为1至约5摩尔当量。
24.根据权利要求1至23任一项的方法，其中步骤(c)在约-5℃至约+25℃的温度下进行。
25.根据权利要求1至24任一项的方法，其中步骤(c)在四氢呋喃溶剂存在下进行。
26.根据权利要求1至24任一项的方法，其在醚溶剂存在下进行。
27.根据权利要求1的方法，其中雷帕霉素31-O-三甲基甲硅烷基醚、42-酯硼酸基为 其中，R是-O-C＝O.CR7R8R9，其中R7是氢、1-6个碳原子的烷基、2-7个碳原子的链烯基、2-7个碳原子的炔基、-(CR12R13)fOR10、-CF3、-F或-CO2R10；R10是氢、1-6个碳原子的烷基、2-7个碳原子的链烯基、2-7个碳原子的炔基、三苯基甲基、苄基、2-7个碳原子的烷氧甲基、氯乙基或四氢吡喃基；R8和R9一起形成X；X是2-苯基-1，3，2-二噁硼烷-5-基或2-苯基1，3，2-二噁硼烷-4-基，其中苯基可任选取代；R12是R13分别独立是氢、1-6个碳原子的烷基、2-7个碳原子的链烯基、2-7个碳原子的炔基、三氟甲基或-F；以及f＝0-6。
28.根据权利要求1的方法，其中雷帕霉素42-硼酸基为 其中，R是-O-C＝O.CR7R8R9，其中R7是氢、1-6个碳原子的烷基、2-7个碳原子的链烯基、2-7个碳原子的炔基、-(CR12R13)fOR10、-CF3、-F或-CO2R10；R10是氢、1-6个碳原子的烷基、2-7个碳原子的链烯基、2-7个碳原子的炔基、三苯基甲基、苄基、2-7个碳原子的烷氧甲基、氯乙基或四氢吡喃基；R8和R9一起形成X；X是2-苯基-1，3，2-二噁硼烷-5-基或2-苯基-1，3，2-二噁硼烷-4-基，其中苯基可任选取代；R12是R13分别独立是氢、1-6个碳原子的烷基、2-7个碳原子的链烯基、2-7个碳原子的炔基、三氟甲基或-F；以及f＝0-6。
29.一种制备下式化合物的方法 其包括使用适宜的二醇处理31-甲硅烷基醚、雷帕霉素42-硼酸基酯。
30.根据权利要求29的方法，其中所用的二醇是1，2-、1，3-、1，4-和1，5二醇。
31.根据权利要求29或权利要求30的方法，其中二醇是2-甲基-2，4-戊二醇。
32.根据权利要求29至31任一项的方法，其中所用的二醇的量约为1至约5摩尔当量。
33.根据权利要求29至32任一项的方法，其在约-5℃至约+25℃的温度下进行。
34.根据权利要求29至33任一项的方法，其在四氢呋喃溶剂存在下进行。
35.根据权利要求29至33任一项的方法，其在醚溶剂存在下进行。
36.一种制备5-甲基-2-苯基-1，3，2-二噁硼烷-5-羧酸的方法，其包括使2，2-二(羟甲基)丙酸与苯基硼酸反应。
37.根据权利要求36的方法，其在四氢呋喃溶剂存在下进行。
38.一种提高下式化合物纯度的方法 在溶剂中所包含的异构体B和C的比率＜约10∶1B异构体 和C异构体包括调节溶液pH至约5至约6。
39.根据权利要求38的方法，其在丙酮溶剂存在下进行。
40.根据权利要求38或权利要求39的方法，其在乙酸钠缓冲剂存在下进行。
41.根据权利要求38或权利要求39的方法，其在碳酸氢钠和乙酸存在下进行。
42.下式(I)化合物 其中R选自-O-C＝O.CR7R8R9，其中R7是氢、1-6个碳原子的烷基、2-7个碳原子的链烯基、2-7个碳原子的炔基、-(CR12R13)fOR10、-CF3、-F或-CO2R10；R10是氢、1-6个碳原子的烷基、2-7个碳原子的链烯基、2-7个碳原子的炔基、三苯基甲基、苄基、2-7个碳原子的烷氧甲基、氯乙基或四氢吡喃基；R8和R9一起形成X；X是2-苯基-1，3，2-二噁硼烷-5-基或2-苯基-1，3，2-二噁硼烷-4-基，其中苯基可任选取代；R12是R13分别独立是氢、1-6个碳原子的烷基、2-7个碳原子的链烯基、2-7个碳原子的炔基、三氟甲基或-F；以及f＝0-6。
43.一种化合物 其中R选自-O-C＝O.CR7R8R9，其中R7是氢、1-6个碳原子的烷基、2-7个碳原子的链烯基、2-7个碳原子的炔基、-(CR12R13)fOR10、-CF3、-F或-CO2R10；R10是氢、1-6个碳原子的烷基、2-7个碳原子的链烯基、2-7个碳原子的炔基、三苯基甲基、苄基、2-7个碳原子的烷氧甲基、氯乙基或四氢吡喃基；R8和R9一起形成X；X是2-苯基-1，3，2-二噁硼烷-5-基或2-苯基-1，3，2-二噁硼烷-4-基，其中苯基可任选取代；R12是R13分别独立是氢、1-6个碳原子的烷基、2-7个碳原子的链烯基、2-7个碳原子的炔基、三氟甲基或-F；以及f＝0-6；且其中R′、R″和R相同或不同并选自1-6个碳原子的烷基、苯基和苄基。
44.一种化合物，其是与5-甲基-2-苯基1，3，2-二噁硼烷-5-羧酸形成的雷帕霉素42-酯。
45.一种化合物，其是与5-甲基-2-苯基1，3，2-二噁硼烷-5-羧酸形成的雷帕霉素31-O-三甲基甲硅烷基醚、42-酯。
46.下式化合物HO-O＝C.CR7R8R9或其混合酸酐衍生物，其中R7、R8和R9如权利要求1定义。
47.根据权利要求46的化合物，其是5-甲基-2-苯基1，3，2-二噁硼烷-5-羧酸，其中苯基任选被取代；或其2，4，6-三氯苯甲酰混合酸酐衍生物。
48.根据权利要求46的化合物，其是5-甲基-2-苯基1，3，2-二噁硼烷-5-羧酸或其2，4，6-三氯苯甲酰混合酸酐衍生物。
全文摘要
提供了一种基于硼酸基化学区域选择性合成CCI－779的方法。还提供了适用于该方法中的新型中间体。
文档编号C07F5/02GK1829722SQ200480021794
公开日2006年9月6日 申请日期2004年7月15日 优先权日2003年8月7日
发明者W·楚, C·-C·肖 申请人:惠氏公司