Gh－rh的拮抗类似物(2003)的制作方法

专利名称：Gh－rh的拮抗类似物(2003)的制作方法
技术领域：
本发明部分由Medical Research Service of the Veterans AffairsDepartment的政府支持完成。该政府对本申请具有一定权利(VANo.03-084，2003年7月25日转让)。
本发明涉及新的合成肽，其抑制来自哺乳动物垂体的生长激素的释放并抑制通过直接影响癌细胞抑制人癌症的增殖，以及涉及包含这些新肽的治疗组合物。
背景技术：
生长激素释放激素(GH-RH)是一种属于神经内分泌和胃肠激素的促胰液素/胰高血糖素家族，该家族还包括血管活性肠肽(VIP)，垂体腺苷酸环化酶活化肽(PACAP)和其它。人GH-RH(hGH-RH)肽由44个氨基酸残基组成。GH-RH的产生的已知最佳位点是下丘脑，但是发现各种外周器官也合成它。hGH-RH有时也大量的由多起源的人恶性组织(癌症)产生。
GH-RH发挥各种生理学和病理生理学功能。下丘脑GH-RH是一种内分泌释放激素，其通过特异性GH-RH受体作用在垂体上，调节垂体生长激素(GH)的分泌。GH-RH在垂体外(extrapituitary)组织中的生理功能较不清楚。然而，有越来越多的关于GH-RH在各种癌症中作为自分泌/旁分泌生长因子的作用的证据。不同于表达在垂体中的那些的GH-RH的剪接变体(SV)受体，已经在广泛多种的人癌症和一些正常外周器官中有所描述。肿瘤自分泌/旁分泌GH-RH的作用可以被施加在这些受体上。此外，VIP的受体和其它，如该家族尚未鉴定的受体都可成为局部GH-RH的靶向。
鉴于GH-RH作为GH释放的内分泌调节剂的作用，基于GH-RH的激动和拮抗性类似物的应用，已经设计了新的治疗策略来治疗各种病理条件。
GH是一种具有191个氨基酸的多肽，其刺激不同生长因子，例如胰岛素样生长因子I(IGF-I)，的产生，并因此刺激许多组织(骨骼、结缔组织、肌肉和内脏)的生长和刺激各种生理学活性(增加核酸和蛋白质的合成，并增加脂解作用，但是降低尿素分泌)。垂体GH的释放受由下丘脑分泌的释放因子和抑制因子的控制，主要的释放因子是GH-RH和ghrelin，并且主要的抑制因子是促生长激素抑制素。
GH已涉及数种疾病。GH涉及的一种疾病是肢端巨大症，其中存在过量水平的GH。该疾病的异常增大的面和肢骨，以及心血管症状可通过施用GH-RH拮抗剂进行治疗。涉及GH的另外的疾病是糖尿病性视网膜病和糖尿病性肾病。在这些疾病中分别对视网膜和肾的损伤，导致失明或肾功能的衰退，认为所述损伤是由于GH的分泌过多。可通过施用有效的GH-RH拮抗剂来阻止或减缓该损伤。
在干预这些疾病和其它疾病的努力中，一些研究者已尝试通过应用促生长激素抑制素的类似物，一种GH释放的抑制剂来控制GH和IGF-I的水平。然而，如果单独施用，促生长激素抑制素的类似物没有抑制GH或IGF-I的水平到理想的程度。如果与GH-RH拮抗剂结合施用，促生长激素抑制素类似物将更好地抑制IGF-I水平。
然而，GH-RH拮抗剂主要应用在癌症领域中(综述于Schally AV andVarga JL，Trends Endocrinol Metab10383-391，1999；Schally AV et al，Frontiers Neuroendocrinol 22248-291，2001；Schally AV and Comaru-SchallyAM，inKufe DW，Pollock RE，Weichselbaum RR，Bast Jr.RC，Gansler TS，Holland JF，Frei III E，Eds.Cancer Medicine，第6版.Hamilton，OntarioBC.Decker，Inc.，2003，p.911-926)。GH-RH拮抗剂通过基于垂体GH释放的抑制的间接内分泌机制并导致GH和IGF-I的血清水平减少，以及通过直接影响肿瘤组织来抑制恶性肿瘤的增生。
GH-RH及其肿瘤剪接变体(SV)受体存在于人肺癌、人前列腺癌、人乳腺癌、人卵巢癌、人子宫内膜癌、人胃癌、人肠癌、人胰腺癌、人肾癌和人骨癌中(见Halmos G et al，Proc Natl Acad Sci USA 9710555-10560，2000；Rekasi Z et al，Proc Natl Acad Sci USA 9710561-10566，2000；SchallyAV et al，Frontiers Neuroendocrinol 22248-291，2001；Schally AV andComaru-Schally AM，inKufe DW，Pollock RE，Weichselbaum RR，BastJr.RC，Gansler TS，Holland JF，Frei III E，Eds.Cancer Medicine，第6版.Hamilton，OntarioBC.Decker，Inc.，2003，p.911-926)。肿瘤GH-RH已经显示或猜想其在这些恶性肿瘤中充当自分泌生长因子。GH-RH的拮抗性类似物可抑制GH-RH的刺激活性并在体外施加直接的抗增生作用在癌症细胞上，在体内施加直接的抗增生作用在肿瘤上。GH-RH拮抗剂的直接抗增生作用被施加在肿瘤受体上(结合位点)。除了GH-RH的特异性肿瘤SV受体之外，VIP的受体和其它，如该家族尚未被鉴定的受体是GH-RH拮抗剂的靶向。
除了对血清GH和IGF-I的内分泌抑制影响外，已发现GH-RH拮抗剂减少一些肿瘤生长因子的自分泌和旁分泌产生和/或下调它们的受体。这些生长因子包括IGF-I，IGF-II，GH，血管内皮生长因子(VEGF)，和成纤维细胞生长因子(FGF)。因此，基于这些生长因子的自分泌/旁分泌刺激环(stimulatory loops)的破坏有助于GH-RH拮抗剂作为抗肿瘤药的功效。
IGF-I和IGF-II是对于各种癌症具有有效促有丝分裂作用的自分泌/旁分泌生长因子。IGF-I也是内分泌生长因子，并且认为升高水平的血清IGF-I是发展前列腺癌、肺癌和结肠直肠癌的猖獗风险因子。IGF-I(生长调节素-C)在乳腺癌、前列腺癌、结肠癌、骨肿瘤和其它恶性肿瘤中的涉及已充分建立。但是，通过IGF-II的增殖的自分泌/旁分泌控制也是许多肿瘤中的主要因子。IGF-I和IGF-II通过常见IGF-I受体发挥它们的增殖和抗-调亡效应。IGF-I的受体存在于原发人乳腺癌、前列腺癌、肺癌、结肠癌、脑癌、胰腺癌和肾细胞癌中。在一些实验癌症诸如骨癌、肺癌、前列腺癌、肾癌、乳腺癌、卵巢癌、肠癌、胰腺癌和脑癌中，用GH-RH拮抗剂进行的治疗产生IGF-I和/或IGF-II水平的减少，伴随肿瘤生长的抑制(综述于Schally AV and Varga JL，Trends Endocrinol Metab 10383-391，1999；Schally AV et al，Frontiers Neuroendocrinol 22248-291，2001；Schally AVand Comaru-Schally AM，inKufe DW，Pollock RE，Weichselbaum RR，Bast Jr.RC，Gansler TS，Holland JF，Frei III E，Eds.Cancer Medicine，第6版.Hamilton，OntarioBC.Decker，Inc.，2003，p.911-926)。在一些情形中，IGF-I受体的表达也被GH-RH拮抗剂所减少。因此，取决于IGF-I和IGF-II的内分泌和自分泌/旁分泌刺激环的破坏有助于GH-RH拮抗剂的抗肿瘤效果。
在MXT乳腺癌模型中，用GH-RH拮抗剂进行的处理抑制了肿瘤生长，减少了肿瘤中GH的mRNA水平和GH肽的浓度，并抑制了GH受体的mRNA表达(Szepeshazi K et al，Endocrinology 1424371-4378，2001)。GH显示充当MXT鼠乳腺癌细胞、MCF-7人乳癌细胞和其它肿瘤细胞系的生长因子。因此，GH-RH拮抗剂对局部和血清GH水平的抑制活性有助于它们的抗肿瘤作用。
GH-RH拮抗剂已经显示在人雄激素-敏感型和雄激素不依赖型的前列腺癌模型中抑制VEGF的mRNA水平和蛋白质浓度(Letsch M et al，ProcNatl Acad Sci USA 1001250-1255，2003，Plonowski A et al，Prostate 52173-182，2002)并且这种现象有助于它们的抗肿瘤效果，因为VEGF在新血管形成和各种肿瘤的生长中具有重要刺激作用。而且，发现GH-RH拮抗剂明显地通过体外对这些细胞的直接影响而抑制正常鼠内皮细胞的VEGF分泌和增殖(Siejka A et al，Life Sci 722473-2479，2003)。
科学家们已经研究了GH-RH的各种修饰来阐明GH-RH的结构与其在垂体受体上的活性之间的关系，努力提供具有提高的激动或拮抗性质的合成的同类物。因此，早期确定的是包括1-29个氨基酸残基的GH-RH片段或GH-RH(1-29)是垂体上的生物活性所需的最小序列。该片段保留50％或更多的天然GH-RH的功效。随后，制备了许多基于hGH-RH(1-29)NH2肽的结构的GH-RH的合成类似物。hGH-RH(1-29)NH2具有如下氨基酸序列Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile5-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr10-Arg-Lys-Val-Leu-Gly15-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg20-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp25-Ile-Met-Ser-Arg29-NH2开放文献中的相当多的专利和文章公开了GH-RH的类似物，其充当GH-RH的激动剂(即，发挥作用刺激GH的释放)或作为在垂体上的GH-RH的拮抗剂(即发挥作用抑制GH的释放)。大多数这些肽来自GH-RH(1-29)肽序列，具有有利于它们在垂体受体上增加的激动或拮抗性质的特殊结构修饰。然而，除了一些例外，尚不知道这些类似物将怎样作用在癌症细胞上，所述癌症细胞表达不同于在垂体中发现的那些的GH-RH受体。仅有一些公开的科学研究试图阐明结构-活性关系并鉴定了GH-RH类似物对癌细胞和肿瘤的直接拮抗(或激动)作用(见Rekasi Z et al，Endocrinology 1412120-2128，2000；Halmos G et al，Proc Natl Acad Sci USA 9710555-10560，2000；Rekasi Z et al，Proc Natl Acad Sci USA 9710561-10566，2000；KiarisH et al，Proc Natl Acad Sci USA 99196-200，2002)，并且到目前为止，没有授权的专利已涉及该问题。因此，对于对肿瘤细胞的直接拮抗作用所需的GH-RH类似物的结构特点知道的非常少。
发现第一个描述的GH-RH拮抗剂，[Ac-Tyr1，D-Arg2]hGH-RH(1-29)NH2阻止hGH-RH(1-29)NH2对大鼠垂体前叶腺苷酸环化酶的活化，在文献中，通常将[Ac-Tyr1，D-Arg2]hGH-RH(1-29)NH2称为“标准拮抗剂”。相同的肽在垂体和下丘脑中阻断GH-RH对其受体的作用，并且抑制脉动生长激素分泌。还在临床上评价标准的拮抗剂(Ocampo-Lim B et al，J Clin Endocrinol Metab 814396-4399，1996；Jaffe CAet al，J Clin Endocrinol Metab 82634-637，1997)。大剂量的这种拮抗剂(400μg/kg)在正常的受试者中消除了正常的GH分泌并抑制了针对GH-RH的应答。所述标准GH-RH拮抗剂也减少了具有肢端巨大症的患者的GH水平。然而，对于临床应用来说，需要更多的GH-RH的有效拮抗剂。
下面提及的本发明公开在GH-RH的垂体受体上具有拮抗或激动性质的GH-RH类似物。然而尚没有关于这些类似物是否能在肿瘤细胞上发挥直接的作用的报道和研究。
美国专利4,659,693公开了GH-RH拮抗性类似物，其在GH-RH(1-29)序列的位置2中包含某种N，N′-二烷基-ω-胍基α-氨基酰基残基。
公开的申请WO91/16923综述了通过修饰其氨基酸序列来改变hGH-RH的二级结构的早期尝试。这些早期尝试包括用它们的D-异构体来取代Tyr1，Ala2，Asp3或Asn8；用L-或D-Ser，D-Arg，Asn，Thr，Gln或D-Lys取代Asn8；用Ala取代Ser9以增加所述区域的两亲性；并用Ala或Aib取代Gly15。当在类似物中的R2是D-Arg，并且R8、R9、和R15如上面所示被取代时，认为拮抗活性发生。认为这些拮抗性肽适合于作为药物组合物施用以治疗与过量水平的GH相关的疾病，例如肢端巨大症。
认为美国专利5,084,555的hGH-RH类似物“[Ser9-psi[CH2-NH]-Tyr10]hGH-RH(1-29)”的拮抗活性由介于R9和R10残基之间的假肽键(即，被还原为[CH2-NH]键的肽键)所导致。不过，认为[Ser9-psi[CH2-NH]-Tyr10]hGH-RH(1-29)的拮抗性质比标准拮抗剂，[N-Ac-Tyr1，D-Arg2]hGH-RH(1-29)-NH2要差。
转让给本申请相同的受让人的美国专利5,550,212，美国专利5,942,489，和美国专利6,057,422，公开hGH-RH(1-29)NH2的类似物，认为所述类似物增加拮抗性质并延长关于GH-RH-引起的GH释放的抑制的作用持续时间。认为这些性质由以在GH-RH(1-29)NH2的N端的芳香族或非极性酸取代各种氨基酸并进行酰基化所导致。在美国专利5,942,489和美国专利6,057,422中起重要作用的拮抗剂的肿瘤抑制性质通过使用具有实验性人癌症模型的异种移植物的裸鼠得以证明。注意的是在美国专利5,550,212，和在美国专利5,942,489中，R9一直是Ser，而R11和R20可是Arg，D-Arg，或Cit的任一。在美国专利6,057,422，的情形中，R9可是Arg，Har，Lys，Orn，D-Arg，D-Har，D-Lys，D-Orn，Cit，Nle，Tyr(Me)，Ser，Ala，或Aib的任一，而R11和R20一直是Arg。
发明概述提供了hGH-RH(1-29)NH2和hGH-RH(1-30)NH2的一系列新的合成性类似物。这些类似物抑制来自哺乳动物的垂体的生长激素的释放并通过直接作用于癌细胞而抑制人癌症的增殖。与以前描述的比较，新类似物的更强的抑制功效由各种氨基酸的取代所导致。
本发明主要涉及包括下式的肽R1-A0-A1-A2-Asp-Ala-A5-A6-Thr-A8-A9-A10-A11-A12-Val-Leu-A15-A16-Leu-Ser-A19-A20-A21-A22-Leu-Gln-Asp-Ile-A27-A28-A29-A30-R2其中R1是由下列组成的组的成员a)PhAc，Hca，Dat，IndAc，Ipa，1-Nac，2-Nac，1-Npr，2-Npr，Ibu；CH3(CH2)nCO，或HOOC(CH2)nCO，其中n是2-20的整数，和b)任何其它6-14个碳原子的直链，环状，支链，饱和、不饱和或聚不饱和脂族羧基基团，以及3-8个碳原子的任何碳环或杂环芳香族羧基基团，在杂环中包含多至1个原子的基团S、N和O的每个的，A0是Phe，D-Phe，Arg，D-Arg，或碳-氮单键，
A1是Tyr或His，A2是D-Arg或D-Cit，A5是Ile或Val，A6是Phe，Tyr，Nal，或Phe(Y)，其中Y＝F，Cl，Br，或I，A8是Asn，D-Asn，Cit，D-Cit，Gln，D-Gln，Ser，D-Ser，Thr，D-Thr，Ala，D-Ala，Abu，D-Abu，或Aib，A9是His，D-His，Amp，D-Amp，Gup，或D-Gup，A10是Tyr，Tyr(Et)，Tyr(Me)；Phe(Y)，其中Y＝H，F，Cl，Br，或I；Amp，His，Cha，Chg，Bpa，Dip，Trp，Trp(For)，Tpi，1-Nal，2-Nal，3-Pal，4-Pal，Phe(NH2)，或Phe(NO2)，A11是His，D-His，Arg，D-Arg，Cit，Har，D-Har，Amp，D-Amp，Gup，或D-Gup，A12是Lys，D-Lys，Orn，D-Orn，Har，D-Har，Cit，D-Cit，Nle，或Ala，A15是Gly，Ala，Abu，Aib，Nle，Gln，Cit，或His，A16是Gln或Arg，A19是Ala或Abu，A20是His，D-His，Arg，D-Arg，或Cit，A21是Lys，D-Lys，Orn，D-Orn，Cit，或D-Cit，A22是Leu，Ala或Aib，A27是Met，Leu，Nle，Abu，或D-Arg，A28是Arg，D-Arg，Har，D-Har，Ser，Asn，Asp，Ala，Abu，或Cit，A29是Arg，D-Arg，Har，D-Har，Cit，D-Cit，或Agm，A30是Arg，D-Arg，Har，D-Har，Cit，D-Cit，Agm，或是碳-氮或碳-氧单键，R2是-NH2，-NH-NH2，-NH-OH，-NHR3，-NR3R4，-OH，或-OR3，其中R3和R4是C1-10烷基，C2-10链烯基，C2-10炔烃基，C7-16苯基烷基，-C6H5，或-CH(C6H5)2的任一个；如果A29是Agm，那么A30和R2是不存在的，并且如果A30是Agm，那么R2是不存在的，及其药用盐。
优选的实施方案是在上式中的肽，其中A11和A20的一个或两个是除Arg，D-Arg，或Cit之外的。
具体地，属于该类的主要的肽是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽67[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽68[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，His9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽69[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，AmP9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽70[HOOC(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har28]hGH-RH(1-29)NH2肽71[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽72[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽73[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(PCl)6，Cit8，Amp9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽74[1’-Nac-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Amp9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽75[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Amp9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽76[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Amp9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽77[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Amp9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽78hGH-RH(1-29)NH2肽79[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽80[HOOC(CH2)8CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽81[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽82[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，His20，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽86[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，His20，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽87[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，His20，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽88[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(PCl)6，Ala8，Amp9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，His20，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽89[1-Nac-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽91[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽92[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Cit5，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽93[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，His15，His20，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽94[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽95hGH-RH(1-29)NH2肽96[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽97[CH3(CH2)8CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽98[CH3(CH2)10CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽99[Hca-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽100[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHMe 肽101[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽102[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽103[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽104[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Phe(pNO2)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽105[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(PCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt肽106[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽107[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽108hGH-RH(1-29)NH2肽109[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt肽110[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽111[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Phe(pNO2)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽112[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽113[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt肽114[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Phe(pNO2)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽115[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽116[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Phe(pNO2)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽117[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽118[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Phe(pNO2)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt肽119[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽120[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Phe(pNO2)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orr21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽121不属于前述类别的结构式的紧密相关的肽包括hGH-RH(1-29)NH2肽2[HOOC(CH2)4CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽3[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽4[HOOC(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽5[CH3(CH2)8CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽6[HOOC(CH2)8CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽7[CH3(CH2)10CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nla27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽8[HOOC(CH2)10CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽9[CH3(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽10[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽11[CH3(CH2)14CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽12[HOOC(CH2)14CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽13[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，Har28，D-Arg29]hGH-RH(1-29)NH2肽14hGH-RH(1-29)NH2肽15[CH3(CH2)14CO-Phe0，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽16[CH3(CH2)14CO-D-Phe0，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽17[PhAc-Arg0，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽18[PhAc-D-Arg0，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽19[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Abu9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽21[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Cit9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽22[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Arg9，Abu15，Nle27，Har28，D-Arg29]hGH-RH(1-29)NH2肽23[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Cit9，Abu15，Nle27，Har28，D-Arg29]hGH-RH(1-29)NH2肽24[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Cit9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽25[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，D-Ala8，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽26[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Abu8，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽27[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(PCl)5，Cit9，Abu15，Nle27，Har28，D-Arg29]hGH-RH(1-29)NH2肽28hGH-RH(1-29)NH2肽30[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Amp10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽31[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，His10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽32[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Cha10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽33[PhAc-Tyr1，D-Arg2，phe(pCl)6，Har9，Tpi10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽34[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，2-Nal10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽35[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Dip10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽36[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Phe(pNH2)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽37[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Trp10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽38[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Phe(pNO2)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽39[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，3-Pal10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽40[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Et)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽41[PhAc-His1，D-Arg2，Tyr6，Har9，Bpa10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽42hGH-RH(1-29)NH2肽43[Hca-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt肽45[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt肽46[Hca-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt肽47[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt肽48[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Aib15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt肽49[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Orn12，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽50[Hca-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Agm29]hGH-RH(1-29)肽51[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Agm29]hGH-RH(1-29)肽52[Hca-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29，Har30]hGH-RH(1-30)NH2肽53[Dat-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29，Har30]hGH-RH(1-30)NH2肽54[lpa-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29，Har30]hGH-RH(1-30)NH2肽55[Hca-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29，Har30]hGH-RH(1-30)NHEt 肽56hGH-RH(1-30)NH2肽57[Hca-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28、Har29，D-Arg30]hGH-RH(1-30)NH2肽58[Hca-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29，Agm30]hGH-RH(1-30)肽59[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29，Agm30]hGH-RH(1-30)肽60[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9、Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽62[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Har11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽63[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Amp1，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽64[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Cit11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽65[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，His27，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽84[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，His20，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽85[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Cit15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽90要注意的是，天然GH-RH分子的30-44的氨基酸残基似乎不是活性所必需的，它们的鉴定似乎也不是必要的。因此，看来将这些另外的氨基酸残基的一些或所有添加到本发明的hGH-RH(1-29)NH2和hGH-RH(1-30)NH2类似物的C-端将不会影响这些类似物作为GH-RH拮抗剂的功效。如果将这些氨基酸的一些或所有添加到hGH-RH(1-29)NH2类似物的C端，被添加的氨基酸残基可与天然hGH-RH序列的残基30-44相同，或是其适当的等价物。
合成方法通过合适的方法诸如通过专有固相合成技术，通过部分固相技术，通过片段缩合或通过经典溶液相合成来合成合成的肽。
当本发明的类似物通过固相方法进行合成时，C-端残基(本文，A29或A30)适当地与惰性固体支持物(树脂)连接而对于其α氨基基团(和，如果合适，对于其侧链官能团)具有保护基。完成该步骤后，将α氨基保护基团从锚定的氨基酸残基去除，并且下一个具有其被合适保护的α氨基基团(以及任何合适的侧链官能团)的氨基酸残基，分别地A28或A29，被加入，等等。每个残基被加入后，N-端保护基被去除，但是侧链保护基尚未被去除。在所有的理想氨基酸已经以合适的顺序被连接后，所述肽从支持物上裂解下来并在针对序列中的残基具有最小破坏性的条件下，没有所有的侧链保护基。随后是合成产物的认真纯化和细心鉴定，从而确保理想的结构确实是获得的那个。
特别优选的是在偶联步骤过程中用酸性或碱性敏感保护基来保护氨基酸的α氨基功能。这些保护基应该具有在肽连接形成条件中稳定的特性，而可容易地被去除，不会破坏生长的肽链和对包含其中的手性中心的任何具有外消旋作用。适合的α氨基保护基是Boc和Fmoc。
医学应用可以将hGH-RH拮抗剂肽，或这些肽的盐配制在包含其有效量的药用剂型中，并出于治疗或诊断目的施用于人或动物。可将所述肽用于抑制GH水平并治疗与过量水平的GH相关的疾病，例如糖尿病性视网膜病和肾病，和肢端巨大症。还提供通过将本发明的组合物施用于需要这些治疗的个体来治疗这些疾病的方法。然而，GH-RH拮抗剂的主要应用是在癌症领域，例如人肺癌、人前列腺癌、人乳腺癌、人卵巢癌、人子宫内膜癌、人胃癌、人结肠癌、人胰腺癌、人肾癌、人骨癌和人脑癌中，所述癌症中存在GH-RH、IGF-I/IGF-II、，或GH的受体，并且依赖于通过生长因子诸如GH-RH，IGF-I，IGF-II，GH，或VEGF的刺激。
优选的实施方案的详述A.简写用于限定所述肽的命名法由IUPAC-IUB生化命名委员会规定，其中按照常规表示，在N-端的氨基基团表示左侧而在C-端的羧基基团表示右侧。用于本文时，术语“天然氨基酸”意为发现于天然存在的蛋白质中的常见的，天然存在的L-氨基酸之一Gly，Ala，Val，Leu，Ile，Ser，Thr，Iys，Arg，Asp，Asn，Glu，Gln，Cys，Met，Phe，Tyr，Pro，Trp和His。当天然氨基酸残基具有异构形式时，本文表示的是L-形式的氨基酸，除了另外特别指出。
还将非编码的氨基酸，或氨基酸类似物结合到GH-RH拮抗剂中。(“非编码”的氨基酸是不在发现于天然存在的蛋白质中的约20种天然氨基酸中的那些氨基酸)。当这些非编码氨基酸，或氨基酸类似物，具有异构形式，其表示的是L-形式的氨基酸，除非另外特别指出。
用于本文的缩写Abu α-氨基丁酸Ac 乙酰基AcOH乙酸Ac2O 乙酸酐Agm 胍基丁胺Aib α-氨基异丁酸All 烯丙基Alloc烯丙氧基羰基Amp 对位-脒基-苯丙氨酸Bpa 对位-苯甲酰基-苯丙氨酸Boc 叔-丁氧基羰基
Bom 苄氧基甲基2BrZ 2-溴-苄氧基羰基Bzl 苯甲基Cha 环己基丙氨酸Chg 环己基甘氨酸cHx 环己基Cit 瓜氨酸(2-氨基-5-脲基戊酸)2ClZ 2-氯-苄氧基羰基Dat 去氨基酪氨酸DCM 二氯甲烷DIC N，N′-二异丙基碳二亚胺DIEA 异丙基乙胺Dip (3，3-二苯基)丙氨酸DMF 甲基甲酰胺Et 乙基Fm 芴基甲基Fmoc 芴基甲氧基羰基For 甲酰GH 生长激素GH-RHGH释放激素Gup 对位-胍基-苯丙氨酸Har 高精氨酸HBTU 2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-tetramethyluronium六氟磷酸酯Hca 氢化肉桂酰基Hca-OH 氢化肉硅酸hGH-RH 人GH-RHHOBt 1-羟基苯并三唑HPLC 高效液相色谱
Ibu 异丁酰IndAc吲哚-3-乙酰基Ipa 吲哚-3-丙酰MBHA 对位-甲基二苯甲基胺Me 甲基MeOH甲醇MeCN乙腈Nac 萘基乙酰基Nal 萘基丙氨酸Nle 正亮氨酸NMM N-甲基吗啉Npr 萘基丙酰Orn 鸟氨酸Pal 比啶基丙氨酸PAM 苯基乙酰氨基甲基Ph 苯基PhAc 苯基乙酰基PhAc-OH 苯基乙酸Phe(pCl) 对位-氯-苯丙氨酸Phe(pNH2) 对位-氨基-苯丙氨酸Phe(pNO2) 对位-硝基-苯丙氨酸rGH-RH 大鼠GH-RHRP-HPLC 反相HPLCSPA 对-磺酰基-苯氧基乙酰基TFA 三氟乙酸Tos 对位-甲苯磺酰Tpi 1，2，3，4-四氢norharman-3-羧酸Tyr(Me) O-甲基-酪氨酸Tyr(Et) O-乙基-酪氨酸Z苄氧基羰基
B.GH-RH类似物对本发明的hGH-RH类似物进行设计以在垂体水平，和/或在肿瘤水平上增加拮抗效应。这些类似物中的一些，诸如肽4，肽7，肽21，肽30，肽31，肽37，肽41，肽42，肽62，肽67，和肽69具有高内分泌拮抗性效能，在体外和体内导致对由hGH-RH(1-29)NH2刺激的GH释放的非常有效和长期持续的抑制，并显示对垂体GH-RH受体的高结合亲和性。一些类似物，诸如肽4，肽5，肽7，肽11，肽22，肽35，肽36，肽39，肽41，肽62，肽67，肽69，肽70，肽72，肽76，肽77，肽79，肽80，肽86，肽95，肽96，和肽97，显示升高的肿瘤抑制效能并显示针对GH-RH的肿瘤受体的非常高的结合亲和性。还对本发明的肽进行设计以增加它们的化学和代谢稳定性。
具体地，优选下面的具有显著生物活性的实施方案[CH3(CH2)4CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽2[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽4[HOOC(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽5[CH3(CH2)8CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽6hGH-RH(1-29)NH2肽7[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽11[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，Har28，D-Arg29]hGH-RH(1-29)NH2肽14[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，Har28，D-Arg29]hGH-RH(1-29)NH2肽15[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽21[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Cit9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽22[PhAc-Tyr1，D Arg2，Phe(pCl)6，Abu8，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽27[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Abu15，Nle27，Har28，D-Arg29]hGH-RH(1-29)NH2肽28[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Amp10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽30[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Amp10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽31[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，2-Nal10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽35[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Dip10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽36[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Phe(pNH2)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽37hGH-RH(1-29)NH2肽39[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Et)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽41[PhAc-His1，D-Arg2，Tyr6，Har9，Bpa10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽42[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt肽46[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽62[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽67[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har28]hGH-RH(1-29)NH2肽68[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(PCl)6，His9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽69[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽70[HOOC(CH2)8CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-2g)NH2肽71[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽72[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽73[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Amp9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽74hGH-RH(1-29)NH2肽75[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Amp9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽76[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Am p9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽77[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Amp9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽78[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽79[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽80[HOOC(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15；Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽81[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽82[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，His20，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽84[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，His20，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽85[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，His20，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽86[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，His20，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽87[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，His20，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽88hGH-RH(1-29)NH2肽89[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Cit15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽90[1-Nac-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽91[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽92[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Cit15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽93[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，His15，His20，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽94[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽95[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽96[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽97[CH3(CH2)8CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽98[CH3(CH2)10CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽99[Hca-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽100[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHMe 肽101hGH-RH(1-29)NH2肽102[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽103[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽104[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(PCl)6，Ala8，His9，Phe(pNO2)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽105[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽106[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp8，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽107[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽108[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Phe(pNO2)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽109[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt肽110[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽111[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(PCl)6，Ala8，AmP9，Phe(pNO2)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽112[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽113[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽114hGH-RH(1-29)NHEt肽115[HODC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽116[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Phe(pNO2)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽117[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽118[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(PCl)6，Ala8，Amp9，Phe(pNO2)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽119[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]GH-RH(1-29)NHEt 肽120[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，phe(pNO2)10，His11，Orn12，Abu15，His20，On21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽121三十个非常优选的实施方案具有式CH3(CH2)6CO-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Ash8-Arg9-Tyr10-Arg11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽4HOOC(CH2)6CO-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Asn8-Arg9-Tyr10-Arg11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽5HOOC(CH2)8CO-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Asn8-Arg9-Tyr10-Arg11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽7HOOC(CH2)12CO-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(PCl)6-Thr7-Asn8-Arg9-Tyr10-Arg11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽11
PhAc-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Cit8-Arg9-Tyr10-Arg11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽21PhAc-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Cit8-Cit9-Tyr10-Arg11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽22PhAc-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Asn8-Arg9-Amp10-Arg11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽30PhAc-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Asn8-Har9-Amp10-Arg11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽31PhAc-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Asn8-Har9-2-Nal10-Arg11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽35PhAc-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Asn8-Har9-Dip10-Arg11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽36PhAc-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-phe(pCl)6-Thr7-Asn8-Har8-Phe(pNH2)10-Arg11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽37PhAc-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Asn8-Har9-Phe(pNO2)10-Arg11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽39PhAc-Tyr1-D--Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Asn8-Har9-Tyr(Et)10-Arg11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽41PhAc-His1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Tyr6-Thr7-Asn8-Har9-Bpa10-Arg11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽42
PhAc-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Asn8-Har9-Tyr(Me)10-Arg11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NHEt肽46PhAc-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Asn8-Har9-Tyr(Me)10-His11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽62PhAc-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Asn8-Amp9-Tyr(Me)10-Arg11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽67PhAc-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Asn8-His9-Tyr(Me)10-Arg11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽69CH3(CH2)6CO-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Asn8-Amp9-Tyr(Me)10-Arg11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽70HOOC(CH2)12CO-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Asn8-Amp9-Tyr(Me)10-Arg11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln15-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽72CH3(CH2)6CO-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Cit8-Amp9-Tyr(Me)10-His11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽76HOOC(CH2)12CO-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Cit8-Amp9-Tyr(Me)10-His11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽77CH3(CH2)6CO-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Cit8-His9-Tyr(Et)10-His11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽79CH3(CH2)6CO-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-phe(pCl)6-Thr7-Ala8-His9-Tyr(Et)10-His11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽80
HOOC(CH2)12CO-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Ala8-His9Tyr(Et)10-His11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽82CH3(CH2)6CO-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Ala8-His9-Tyr(Et)10-His11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-His20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽86CH3(CH2)6CO-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Asn8-His9-Tyr(Et)10-His11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽92CH3(CH2)6CO-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Ala8-His9-Tyr(Et)10-His11-Orn12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Orn21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽95CH3(CH2)6CO-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Ala8-His9-Tyr(Et)10-His11-Orn12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-His20-Orn21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽96CH3(CH2)6CO-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Ala8-His9-Tyr(Et)10-His11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NHEt 肽97在已充分确定的常规下，这些可被简写为如下[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽4[HOOC(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽5[HOOC(CH2)8CO7Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽7[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽11[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(PCl)6，Cit8，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽21hGH-RH(1-29)NH2肽22[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Amp10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-2g)NH2肽30[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Amp10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽31[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har8，2-Nal10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽35[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Dip10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽36[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Phe(pNH2)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽37[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Phe(pNO2)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽39[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Et)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽41[PhAc His1，D-Arg2，Tyr6，Har9，Bpa10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽42[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt肽46[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽62[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽67[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，His9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽69hGH-RH(1-29)NH2肽70[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽72[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Amp9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽76[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Amp9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽77[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽79[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽80[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽82[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，His20，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽86[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽92[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽95[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽96[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽97C.制备的方法1.合成的综述通过合适的方法合成肽，诸如通过专有固相技术、部分固相技术、片段缩合或经典溶液相合成。例如，专有固相合成的技术在书“Solid PhasePeptide Synthesis”，J.M.Stewart和J.D.Young，Pierce Chem.Company，Rockford，Illinois，1984(2nd.ed.)，和M.Bodanszky，“Principles of PeptideSynthesis”，Springer Verlag，1984中提及。尽管还可以使用如以前提到的本领域其它等价的化学合成方法，优选使用固相合成诸如通常由Merrifield，J.Am.Chem.Soc.，85 p.2149(1963)所描述的，来对所述hGH-RH拮抗剂肽进行制备。
用在它们的α氨基基团被保护的氨基酸进行合成。优选地，将尿烷类型的保护基(Boc或Fmoc)用于α氨基基团的保护。
在固相合成中，通过化学键将在C-端形成终肽的氨酰基基团的N-α-保护的氨基酸部分与聚合树脂支持物连接起来。在偶联反应完成后，α氨基保护基被选择性地移去以容许随后的偶联反应在氨基端发生，优选地，当N-α-保护基是Boc时，以50％的在DCM中的TFA进行，或当N-α-保护基是Fmoc时，以20％在DMF中的哌啶进行。将具有相似地Boc或Fmoc-保护的α氨基基团的剩余的氨基酸逐步偶联到树脂上的前述氨基酸的游离氨基基团以获得需要的肽序列。因为氨基酸残基与C-端残基的α氨基基团偶联，合成hGH-RH类似物肽的生长开始于C-端并向N-端进展。当已经获得理想的序列时，在N-端对所述肽进行酰基化，并将其从支持聚合物移去。
过量(2.5或3当量)使用每个被保护的氨基酸并且通常偶联反应在DCM、DMF或其混合物中进行。在每个阶段，以(水合)茚三酮反应监测偶联反应完成的程度。在确定不完全偶联的情形中，在偶联下一个氨基酸之前或在去除α氨基保护基之前，重复所述偶联程序，通过未反应氨基基团的酰基化进行加帽。
典型的合成周期显示于表I和表II中。
表I
使用Boc-策略的典型合成周期的方案
表II使用Fmoc-策略的典型合成周期的方案
合成完成后，可使用肽化学中众所周知的方法来实现肽从树脂上的裂解。
2.支持聚合物的选择可在多种支持聚合物，即MBHA、Merrified、PAM、Rink酰胺或Wang树脂上合成hGH-RH拮抗剂肽。所述肽还可在氨基甲基，MBHA或其它已经用适合的接头先进行衍生化的树脂上进行合成。这些接头的实例是对于C-端羧基基团的连接而言的碱-不稳定的4-羟基甲基苯甲酸(HMBA)接头或容许胍基丁胺通过其胍基基团进行连接的酸-不稳定对位-磺酰基-苯氧基乙酰基(SPA)接头。
当使用Boc策略合成具有酰胺化的C-端的肽时，优选的树脂是MBHA。可通过表I描述的标准DIC-介导的偶联方法来完成C-末端氨基酸与该树脂的连接。
为了制备具有C-端乙基酰胺(-NHEt)修饰的肽，可与Boc策略结合使用Merrifield树脂或HMBA-MBHA树脂。通过于升高的温度下由氟化钾(KF)或铯盐介导的偶联来将C-端氨基酸填充到Merrifield树脂上。
对于在C-端的具有Agm的肽的合成，优选支持相是MBHA树脂或氨基甲基树脂。Boc-Agm的胍基基团通过稳定的，但可容易裂解的接头诸如对位-磺酰基-苯氧基乙酰基(SPA)部分来将Boc-Agm的胍基基团与支持聚合物进行连接。使α-氨基-Boc-保护的Agm与氯磺酰基苯氧基乙酸Cl-SO2-C6H4-O-CH2-COOH反应以形成Boc-Agm-SO2-C6H4-O-CH2-COOH。然后使用DIC或HBTU-HOBt-DIEA作为活化试剂将该化合物与支持聚合物，例如MBHA树脂偶联以产生Boc-Agm-SPA-MBHA。
3.使用氨基酸衍生物双官能氨基酸，即不具有侧链官能团的那些，大多数以它们的N-αBoc-或Fmoc-衍生物的形式使用以进行合成。因此，将Boc-Gly-OH或Fmoc-Gly-OH典型地用于结合Gly残基。天然存在的双官能氨基酸是Gly，Ala，Val，Leu，Ile，Phe和Pro，并且用在本发明中的一些众所周知的非编码双官能氨基酸是Abu，Aib，和Nle。
所述肽的一些氨基酸残基具有侧链官能团，所述官能团与用于偶联或去保护的试剂具有反应性。当这些侧链基团存在时，合适的保护基与这些官能团连接以在用于形成肽的反应中阻止不理想的化学反应发生。在选择特定侧链保护基中遵循如下的通用规则(a)在偶联条件下，保护基优选地保留其保护性质并且不分裂，(b)在合成的每个步骤中，保护基在去除α氨基保护基的条件下应该是稳定的，(c)侧链保护基在所需氨基酸序列的合成结束后，在将不会不理想地改变肽链的反应条件下必须是可去除的。
当将Boc-氨基酸用在合成中时，反应性侧链官能团可以如下被保护对于Arg和Har，Tos或硝基(NO2)；对于Asp和Glu，cHx或Fm；对于His，Bom；对于Lys和Orn，2ClZ或Fmoc；对于Ser和Thr，Bzl；对于Trp，For；和对于Tyr，2BrZ。Asn和Gln的侧链不被保护。在Fmoc合成的情形中，反应性侧链官能团可被如下的其它合适保护基所保护对于Arg和Har，2，2，4，6，7-五甲基-二氢苯并呋喃-5-磺酰基(Pbf)或bis-Boc；对于Asp和Glu，叔-丁基(tBu)；对于Asn和Gln，没有保护基或三苯甲基(Trt)保护；对于His，Trt；对于Lys和Orn，Boc或4-甲氧基三苯甲基(Mmt)；对于Ser和Thr，tBu或Trt；对于Trp，Boc，和对于Tyr，tBu或2-氯三苯甲基(2ClTrt)。
除了上述提及的广泛了解的编码和非编码氨基酸，本申请的一些肽包含较少见的非编码氨基酸诸如对位-脒基-苯丙氨酸(Amp)；对位-胍基-苯丙氨酸(Gup)；环己基丙氨酸(Cha)；1，2，3，4-tetrahydronorharman-3-羧酸(Tpi)；(2-萘基)丙氨酸(2-Nal)；(3，3-二苯基)丙氨酸(Dip)；对位-氨基-苯丙氨酸[Phe(pNH2)]；对位-硝基-苯丙氨酸[Phe(pNO2)]；(3-吡啶基)丙氨酸(3-Pal)；O-乙基-酪氨酸[Tyr(Et)]；和对位-苯甲酰基-苯丙氨酸(Bpa)。还通过偶联合适的保护氨基酸衍生物来将这些氨基酸残基结合到肽中。可以使用的这些被保护的氨基酸衍生物的非-排外列表如下Boc-Amp(Alloc)-OH，Boc-Amp-OH，Fmoc-Amp(Alloc)-OH，Fmoc-Amp-OH，Boc-Gup(Tos)-OH，Boc-Gup-OH，Fmoc-Gup(Boc)2-OH，Fmoc-Gup-OH，Boc-Cha-OH，Boc-Tpi-OH，Boc-2-Nal-OH，Boc-Dip-OH，Boc-Phe(pNH-Z)-OH，Boc-Phe(pNO2)-OH，Boc-3-Pal-OH，Boc-Tyr(Et)-OH，和Boc-Bpa-OH。上述提及的非编码氨基酸的被保护衍生物可通常从一些商业供应者获得，所述商业供应者包括Bachem(King of Prussia，PA)，Peptides International(Louisville，KY)，Novabiochem(San Diego，CA)，Advanced Chem Tech(Louisville，KY)，和RSP Amino Acid Analogues DBA(Worcester，MA)。
4.氨基酸残基的逐步偶联利用上述提及的支持聚合物并在填充C-端氨基酸或Agm残基后，所述肽本身可适当地以常规方式通过固相合成进行合成。关于树脂-结合游离氨基酸残基，每个被保护的氨基酸以约三倍摩尔过量进行偶联，并且所述偶联可以在介质诸如DMF-DCM(1∶1)或在单独的DMF或DCM中进行。合适偶联试剂的选择在本领域技术人员范围中。作为偶联试剂，特别合适的是N，N′-二异丙基碳二亚胺(DIC)，或当DIEA存在时，与HOBt结合的HBTU。在合成的每个阶段偶联反应的成功优选地通过水合茚三酮反应进行监测。在不完全偶联发生的情形中，在去除α氨基保护基前，重复偶联程序，或使用加帽试剂对树脂结合的未反应氨基残基进行乙酰化。合适的加帽试剂是1-乙酰基咪唑和Ac2O-吡啶。
以与以前的偶联相同的方式完成用单羧酸对肽的N-端进行的最终乙酰化，不同的是用合适的羧酸取代氨基酸。当二羧酸与N-端连接时，理想的是仅有一个-COOH基团与肽的氨基端反应(即，制备这些酸的单酰胺)，可将各个二羧酸的酐用于偶联。许多二羧酸的环酐是可商购的；在其它情形中，通过用DIC处理来制备这些酸的预形成酐并将其用于偶联。
5.肽从支持聚合物上的裂解和侧链保护基的去除当合成结束时，所述肽从支持相上裂解下来并且其侧链保护基被去除。
通过Boc策略在MBHA，Merrifield，或PAM树脂上制备具有酰胺化的C-端(-CONH2)或具有C-端的羧基基团(-COOH)的肽的情形中，通过用试剂诸如液体氟化氢(HF)的处理来使肽从树脂上去除。对于在Boc-Agm-SPA-MBHA树脂上合成肽的情形也是这样。在一些情形中，液体HF也裂解所有的剩余侧链保护基。然而，如果对于HF处理具有抗性的侧链保护基出现在肽上，应该进行另外的裂解步骤以去除这些保护基。因此，在HF处理之前或之后，通过用20％的在DMF中的哌啶进行处理来去除Fm和Fmoc保护基，同时通过用Pd(PPh3)4催化剂和亲核清除剂来去除All和Alloc基团。
适当地，在0℃用混和物对干燥和被保护的肽-树脂处理60-120分钟以从树脂上裂解肽并去除HF-不稳定侧链保护基，所述混合物由每克肽-树脂的1.0mL的m-甲酚和10mL的无水氟化氢组成。在氮气流和真空下去除氟化氢后，用醚沉淀游离的肽，过滤，用醚和乙酸乙酯洗涤，用50％的乙酸抽提并进行冷冻干燥。
通过Boc策略在Merrifield或HMBA-MBHA树脂上制备具有乙酰胺(-NHEt)C-端的肽的情形中，被保护的肽首先通过乙胺(EtNH2)介导的氨解从树脂上裂解下来。适当地，将液体EtNH2转移到冷的、厚壁的玻璃烧瓶中，所述烧瓶包含干燥和被保护的肽-树脂。液体EtNH2的量应足以覆盖肽-树脂。将所述烧瓶塞住，并于室温用液体EtNH2摇动3.5小时从而容许反应发生。此后，将烧瓶以干冰浴冷却、打开并过滤液体EtNH2，留下固体残余物包含树脂和裂解的肽的混合物，所述肽仍旧具有连接的保护基。如上所述，将固体残余物进行干燥并进行HF处理，从而去除所述肽的侧链保护基。
6.纯化使用肽化学中众所周知的方法来实现粗肽的纯化。例如，使用Vydac218TP510反相柱(10×250mm，用C18硅胶包装，300孔大小，5μm颗粒大小)(The Separations Group Inc.，Hesperia，CA)，可以在具有KnauerUV光度计和Kipp和Zonen BD40记录器的MacRabbit HPLC系统(RaininInstrument Co.Inc.，Woburn，MA)上进行纯化。用溶剂系统来洗脱所述柱，所述溶剂系统由(A)0.1％水性TFA和(B)以线性梯度模式(例如，在120分钟内，30-55％B)的在70％水性MeCN中的0.1％TEA。在220nm监测洗脱物，并使用Hewlett-Packard Model HP-1090液相色谱仪通过分析HPLC来检测级分并将其进行合并以给出最大的纯度。利用等度洗脱在Vydac218TP52反向柱(2×250mm，C18，300A，5μm)上进行分析HPLC，所述等度洗脱具有由上述的(A)和(B)组成的溶剂系统。在220和280nm检测峰。通过分析HPLC判断所述肽是基本纯的(＞95％)。通过电雾化质谱法来检查分子量，并通过氨基酸分析来证实预期的氨基酸组成。
D.药物组成和施用模式本发明的肽可以以药用，非毒性盐诸如酸式加成盐的形式进行施用。这些酸式加成盐的例子是盐酸化物、氢溴化物、硫酸盐、磷酸盐、延胡索酸盐、gluconate、单宁酸盐、马来酸盐、乙酸盐、三氟醋酸盐、柠檬酸盐、苯甲酸盐、琥珀酸盐、藻酸盐、双羟萘酸盐、苹果酸盐、抗坏血酸盐、酒石酸盐等。特别优选的拮抗剂是低溶解度的盐，例如双羟萘酸盐等。这些显示活性的长持续时间。
本发明的化合物通过皮下(s.c.)、肌内(i.m.)或静脉内(i.v)；鼻内或肺部吸入；通过透皮传递；或以配制自可生物降解的适合聚合物(诸如D，L-丙交酯-共乙交酯)的储存形式(例如，微胶囊、微颗粒或圆柱杆样植入物)适当地施用给受试者人或动物，前者两个储存形式是优选的。其它等价的施用方式也在本发明的范围内，即，持续滴注、皮肤贴片、贮存注射剂、灌输泵和时间释放模式诸如微胶囊等。施用以任何生理接受的可注射载体进行，生理盐水是可接受的，尽管还可以使用其它本领域已知的载体。
所述肽优选地通过肠胃外、肌内、皮下或静脉内与药用载体诸如等渗盐水进行施用。或者，将所述肽作为具有合适载体的鼻内喷雾剂或通过肺部吸入进行施用。一种施用的合适路径是作为包含分散的拮抗性化合物的微胶囊、微颗粒或圆柱杆状植入物的储存形式，其配制自生物可降解的适合聚合物，例如聚-丙交酯-共乙交酯。
所需的肽的量取决于药物组合物的类型和施用的模式。在人受试者接受GH-RH拮抗剂的溶液的情形中，通过i.m.或s.c.注射，或以鼻内喷雾剂或肺部吸入的形式进行施用，如果一天一次或分成2-4次施用/天，典型的剂量介于2-20mg/天/患者之间。当将GH-RH拮抗剂通过静脉内施用给人患者时，典型的剂量在8-80μg/kg体重/天范围内，其被分成1-4丸剂注射/天或被给药作持续输注。当使用GH-RH拮抗剂的储存制剂，例如通过双羟萘酸盐或低溶解度的其它盐的i.m.注射，或通过包含分散在可生物降解的聚合物中的拮抗性化合物的微胶囊、微颗粒或植入物的i.m.或s.c.施用时，典型的剂量介于1-10mg拮抗剂/天/患者之间。
E.GH-RH拮抗剂的治疗性应用预期GH-RH拮抗剂的最重要的治疗性应用在肿瘤学和内分泌学的领域内。一些GH-RH拮抗剂主要在垂体水平上作用并且具有更强内分泌作用，抑制GH-RH-引起的GH释放，并最终减少GH和IGF-I的血清水平。其它GH-RH拮抗剂通过阻断GH-RH的肿瘤受体，减少各种自分泌/旁分泌肿瘤生长因子(诸如IGF-I、IGF-II、GH、VEGF、FGF)产生和/或下调它们的受体主要在肿瘤水平上起作用，并因此在肿瘤生长上发挥更强的抑制作用。还可将这些拮抗剂用作载体系统，其与肿瘤定位或治疗的放射性核连接，或与化疗剂或毒素缀合。这些杂合化合物可出于诊断或治疗的目的活性地靶向癌症。其它的GH-RH拮抗剂通过多种作用机制，即同时通过内分泌机制和直接作用于肿瘤发挥作用。因此，各种GH-RH拮抗剂的主要治疗指示基于它们的优先的作用机制而不同。
可将对垂体具有拮抗作用的GH-RH的类似物用在抑制GH和IGF-I的血清水平是有利的情形中。因此，它们对于以过量产生GH和IGF-I为特征的内分泌疾病的产生，以及表达IGF-I，IGF-II或GH的受体的癌症的治疗，和被这些生长因子刺激的增生是指示性的。
促生长激素抑制素类似物和GH拮抗剂还在治疗由GH和IGF-I引起的内分泌疾病中是有用的。然而，GH-RH拮抗剂提供独特的治疗优势，这在促生长激素抑制素类似物和GH拮抗剂的应用中是不可获得的。这些优势是由于GH-RH拮抗剂作用的多种机制，即除了抑制GH和IGF-I的内分泌轴，它们施加不依赖于GH-和IGF-I的对肿瘤和其它靶向位点的直接影响。GH-RH拮抗剂可单独给药或与促生长激素抑制素类似物一起，以一种更彻底抑制GH和IGF-I水平的组合给药。GH拮抗剂的一种不理想的副作用是血清GH水平通过反馈机制升高，其可通过GH-RH拮抗剂的施用得以避免。
由过量生长激素引起的一种疾病是肢端巨大症，其表现是面和肢端骨的异常增大。GH-RH拮抗剂可缓和肢端巨大症的临床表现，例如面和肢端骨的增大，心脏的增大和心血管系统的其它结构和功能异常。还可将GH-RH拮抗剂用于治疗糖尿病性视网膜病(糖尿病中失明的主要原因)和糖尿病性肾病，其中认为眼和肾的损伤分别是由于GH导致。糖尿病患者还可从由GH-RH拮抗剂引起的增加的胰岛素敏感性中获益，其是一种与减少GH和IGF-I水平的这些化合物的能力联系的效果。此外，由于它们抑制GH释放，还可将GH-RH拮抗剂用于减缓肌肉营养失调的进展。
具有抗生长因子特性的药物诸如GH-RH拮抗剂还在控制或减缓一些在疾病的临床病理学过程中的进展中是有益的，所述疾病诸如先天肺纤维化、全身硬化症和肥大性心肌症，其中现存的医用治疗提供的相对较少。此外，没有药物治疗显示在减少经皮腔内冠状动脉成形术(percutaneoustransluminal coronary angioplasty)(PTCA)后的再狭窄的发生中是有效的并且必须设计新的方法，包括应用GH-RH拮抗剂。还可结合促黄体生成激素释放激素(LH-RH)激动剂或拮抗剂使用GH-RH拮抗剂来治疗一些妇科疾病，诸如肌瘤、子宫内膜异位症和多囊卵巢综合征。GH-RH拮抗剂还在治疗良性前列腺肥大(BPH)，和其它正常器官的增生性和良性增生疾病中是有用的，在所述器官中，存在GH-RH受体。
然而，GH-RH拮抗剂的主要应用在癌症领域中。GH-RH拮抗剂，特别是在肿瘤水平上具有强直接作用的那些，对于抑制原发肿瘤的生长和抑制它们的转移传播是指示性的。由于GH-RH拮抗剂的抗增生作用是通过一些机制施加的，这些化合物对于治疗大量癌症是有用的，所述癌症诸如依赖于由GH-RH、IGF-I、IGF-II、GH、VEGF、和FGF刺激的自分泌/旁分泌和内分泌的那些。
GH-RH拮抗剂对于治疗肿瘤是有用的，所述肿瘤表达GH-RH受体并且将GH-RH用作自分泌/旁分泌生长因子。这些恶性肿瘤包括，但不限于，肺癌、前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、胃癌、肠癌、胰腺癌、肾癌、骨癌、肝癌，以及成胶质细胞瘤、嗜铬细胞瘤、黑素瘤和淋巴瘤。通过阻断GH-RH的肿瘤受体，这些拮抗剂阻止GH-RH的刺激作用，导致肿瘤生长的抑制。
GH-RH拮抗剂超过促生长激素抑制素类似物的一个优势基于GH-RH拮抗剂可被用于抑制肿瘤的事实，所述肿瘤不具有促生长激素抑制素受体但表达GH-RH的肿瘤受体，例如人成骨肉瘤。
可利用GH-RH拮抗剂治疗恶性肿瘤，所述恶性肿瘤表达IGF-I受体并取决于IGF-I和/或IGF-II作为生长因子。这些恶性肿瘤包括，特别是肺癌、前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、胃癌、结肠直肠癌、胰腺癌、肾癌、和肝癌、肉瘤和脑肿瘤。GH-RH拮抗剂减少血清IGF-I水平、抑制肿瘤组织中IGF-I和/或IGF-II的自分泌/旁分泌产生、并下调IGF-I受体的表达水平的能力对于癌症治疗是有利的。
可利用GH-RH拮抗剂来治疗乳腺癌和其它类型的癌症，它们依赖于GH作为生长因子。GH-RH拮抗剂减少血清GH水平、抑制GH的自分泌产生并下调GH受体表达的能力有益于(beneficiate)某些乳腺癌和其它类型的肿瘤的治疗。
鉴于它们对通过肿瘤组织和正常内皮细胞合成VEGF的抑制活性，并考虑到它们对内皮细胞的抗增生作用，GH-RH拮抗剂作为血管生成的抑制剂是有用的。因此GH-RH拮抗剂可对于治疗那些强烈依赖于VEGF和新血管生成(neoangiogenesis)的肿瘤是有益的。
实施例本发明结合如下的实施例进行描述，所述实施例仅出于举例说明的目的提出。在实施例中，除非特别指出，使用L-构象的光学活性保护氨基酸。
随后的实施例提出通过固相技术合成新GH-RH拮抗剂的合适方法。
实施例1CH3(CH2)6CO-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Ala8-His9-Tyr(Et)10-His11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2(肽80){[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2}使用手动固相肽合成装置以逐步方式进行合成。简言之，用5％的在DCM中的DIEA来中和对位-甲基二苯甲基胺(MBHA)树脂(Bachem，Kingof Prussia，PA)(720mg，0.50mmol)，并按照表I中所述方法进行洗涤。在手动固相肽合成装置中用中和的树脂和DIC(235μL，1.5mmol)来摇动Boc-Har(NO2)-OH(500mg，1.5mmol)在DMF-DCM(1∶1)中的溶液1小时。在通过阴性水合茚三酮试验证实偶联反应完成后，进行表I中的去保护和中和程序从而去除Boc保护基并制备肽-树脂以进行下一个氨基酸的偶联。继续进行合成并通过显示的(indicated)顺序将下面的被保护氨基酸偶联到树脂上以获得所需的肽序列来逐步形成肽链Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ))-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Et)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH。
这些被保护的氨基酸残基(也常可获自Bachem)按照已充分接受的常规来在上面表示。特定氨基酸的侧链官能团的合适的保护基出现在括号内。上式中的OH基团表示每个残基的羧基端是游离的。
以DIC(235μL，1.5mmol)来偶联被保护的氨基酸(每个1.5mmol)，除了Boc-Asn-OH和Boc-Gln-OH以它们的预形成的HOBt酯进行偶联。从Tyr1除去Nα-Boc保护基后，使用DIC(235μL，1.5mmol)作为偶联剂来用辛酸[CH3(CH2)6COOH](475μL，3mmol)来过夜酰化肽。
为了将所述肽从树脂上裂解下来并对其进行去保护，将130mg的干燥肽树脂部分与0.5mL的m-甲酚和5mL的氟化氢(HF)于0℃一起进行搅拌达2小时。在氮气流下和在真空中蒸发HF后，用无水二乙醚和乙酸乙酯洗涤所述残余物。将裂解的和去保护的肽溶解在50％的乙酸中并通过过滤从树脂中进行分离。用水稀释和冷冻干燥后，获得75mg的粗制产物。
使用具有Supelco Discovery HS C18反相柱(2.1mm×5cm，以C18硅胶封装，120孔大小，3μm颗粒大小)(Supelco，Bellefonte，PA)和线性梯度洗脱剂(例如，40-70％B)的Hewlett-Packard Model HP-1090液相色谱仪以溶剂系统使用分析HPLC来检查粗肽，所述溶剂系统由(A)0.1％水性TFA和(B)在70％水性MeCN中的0.1％的TFA组成。为了通过半制备HPLC进行纯化，将75mg的粗肽溶解在AcOH/H2O中，搅拌，过滤并应用在Beckman Ultraprep ODS柱(21.2mm×15cm，用C18硅胶封装，300孔大小，10μm颗粒大小)。所述柱以线性梯度模式(例如，在120分钟内的40-60％B)使用上述的溶剂系统进行洗脱；流速10mL/分钟。在220nm监测洗脱，并通过分析HPLC来检测所述级分。将纯度高于95％的级分合并并进行冷冻干燥从而得到7.7mg纯产物。以0.2ml/min的流速使用等度洗脱在上述Supelco C18反相柱上进行分析HPLC，所述等度洗脱具有上述的溶剂系统。在220和280nm监测峰。通过分析HPLC判断所述产物是基本纯(＞95％)的。通过电雾化质谱法检查分子量，并通过氨基酸分析来证实预期的氨基酸组成。
肽2，肽4，肽6，肽8，肽10，肽12，肽14，肽16，肽17，肽79，肽86，肽92，肽93，肽94，肽95，肽96，肽104，和肽105以与肽80相同的方式进行合成，除了这些肽在它们的N-端还包含其它的氨基酸取代和其它的起源自脂肪酸的酰基部分。
对于肽2的合成，其化学结构是[CH3(CH2)4CO-Tyr1，D-Arg2Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序(indicated order)偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)4COOH进行酰化。
对于肽4的合成，其化学结构是[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)6COOH进行酰化。
对于肽6的合成，其化学结构是[CH3(CH2)8CO-Tyr1，D-Arg2Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)8COOH进行酰化。
对于肽8的合成，其化学结构是[CH3(CH2)10CO-Tyr1，D-Arg2Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)10COOH进行酰化。
对于肽10的合成，其化学结构是[CH3(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)12COOH进行酰化。
对于肽12的合成，其化学结构是[CH3(CH2)14CO-Tyr1，D-Arg2Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)14COOH进行酰化。
对于肽14的合成，其化学结构是[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，Har28，D-Arg29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)6COOH进行酰化。
对于肽16的合成，其化学结构是[CH3(CH2)14CO-Phe0，D-Arg2Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Phe-OH，随后用CH3(CH2)14COOH进行酰化。
对于肽17的合成，其化学结构是[CH3(CH2)14CO-D-Phe0，D-Arg2Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-D-Phe-OH，随后用CH3(CH2)14COOH进行酰化。
对于肽79的合成，其化学结构是[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2Phe(pCl)6，Cit8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Et)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Cit-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)6COOH进行酰化。
对于肽86的合成，其化学结构是[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，His20，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Et)-OH，Boc-His(Bom)OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)6COOH进行酰化。
对于肽92的合成，其化学结构是[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2Phe(pCl)6，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Et)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)6COOH进行酰化。
对于肽93的合成，其化学结构是[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2Phe(pCl)6，Ala8，His9，Cit15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Cit-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)6COOH进行酰化。
对于肽94的合成，其化学结构是[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，His15，His20，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Et)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)6COOH进行酰化。
对于肽95的合成，其化学结构是[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Et)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)6COOH进行酰化。
对于肽96的合成，其化学结构是[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Et)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)6COOH进行酰化。
对于肽104的合成，其化学结构是[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2Phe(pCl)6，Ala8，His9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Dip-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)6COOH进行酰化。
对于肽105的合成，其化学结构是[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2Phe(pCl)6，Ala8，His9，Phe(pNO2)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Phe(pNO2)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)6COOH进行酰化。
肽2，肽4，肽6，肽8，肽10，肽12，肽14，肽16，肽17，肽79，肽86，肽92，肽93，肽94，肽95，肽96，肽104，和肽105的HF裂解和去保护，以及通过半制备HPLC的随后纯化如肽80的情形所述进行。通过分析HPLC判断纯化的化合物是基本(＞95％)纯的。通过电雾化质谱法检查它们的分子量并通过氨基酸分析证实预期的氨基酸组成。
实施例IIHOOC(CH2)12CO-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Asn8-Arg9-Tyr10-Arg11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2(肽11){[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2}使用手动固相肽合成装置以逐步方式进行合成。简言之，用5％的在DCM中的DIEA来中和MBHA树脂(Bachem，King of Prussia，PA)(720mg，0.50mmol)，并按照表I中所述方法进行洗涤。在手动固相肽合成装置中用中和的树脂和DIC(235μL，1.5mmol)来摇动Boc-Har(NO2)-OH(500mg，1.5mmol)在DMF-DCM(1∶1)中的溶液1小时。在通过阴性水合茚三酮试验证实偶联反应完成后，进行表I中所述的去保护和中和程序从而去除Boc保护基并制备肽-树脂以进行下一个氨基酸的偶联。继续进行合成并通过以显示的顺序将下面的被保护氨基酸偶联到树脂上从而获得所需的肽序列来逐步形成肽链Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH。以DIC(235μL，1.5mmol)来偶联被保护的氨基酸(每个1.5mmol)，除了Boc-Asn-OH和Boc-Gln-OH以它们的预形成的HOBt酯进行偶联。
从Tyr1去除Nα-Boc保护基后，将肽用如下制备的预形成的1，12-十二烷二羧酸的对称酐进行酰化。为了合成在0.5mmol等级上的肽，将388mg(1.5mmol)的1，12-十二烷二羧酸[HOOC(CH2)12COOH]溶解在5-10mL的DMF-DCM(1∶1)中，将235μL(1.5mmol)的DIC加入该溶液中，并且所述混合物容许在室温保持30分钟。该阶段后，将混合物转移到包含在Tyr1具有游离氨基末端的肽-树脂的合成容器中，并进行酰化过夜。
为了从树脂裂解肽，并对其进行去保护，将274mg的干燥的肽树脂的部分与0.5mL m-甲酚和5mL氟化氢(HF)一起于0℃搅拌2小时。在氮气流下和真空中蒸发HF后，用无水二乙醚和乙酸乙酯洗涤所述残余物。将裂解的和去保护的肽溶解在50％乙酸并通过过滤分离所述树脂。用水稀释和冷冻干燥后，获得160mg的粗产物。
使用具有Supelco Discovery HS C18反相柱(2.1mm×5cm，以C18硅胶封装，120孔大小，3μm颗粒大小)(Supelco，Bellefonte，PA)和线性梯度洗脱剂(例如，50-80％B)的Hewlett-Packard Model HP-1090液相色谱仪以溶剂系统使用分析HPLC来检查粗肽，所述溶剂系统由(A)0.1％水性TFA和(B)在70％水性MeCN中的0.1％的TFA组成。为了通过半制备HPLC进行纯化，将160mg的粗肽溶解在AcOH/H2O中，搅拌，过滤并应用在Beckman Ultraprep ODS柱(21.2mm×15cm，用C18硅胶封装，300孔大小，10μm颗粒大小)。所述柱以线性梯度模式(例如，在120分钟内的50-70％B)使用上述的溶剂系统进行洗脱；流速10mL/分钟。在220nm监测洗脱，并通过分析HPLC来检测所述级分。将纯度高于95％的级分合并并进行冷冻干燥从而得到6.0mg纯产物。以0.2ml/min的流速使用等度洗脱在上述Supelco C18反相柱上进行分析HPLC，所述等度洗脱具有上述的溶剂系统。在220和280nm监测峰。通过分析HPLC判断所述产物是基本纯(＞95％)的。通过电雾化质谱法检查分子量，并通过氨基酸分析来证实预期的氨基酸组成。
肽3，肽5，肽7，肽9，肽13，肽25，肽81，肽82，肽88，肽102，肽108和肽109以与肽11相同的方式进行合成，除了这些肽在它们的N-端还包含其它的氨基酸取代和其它的起源自二羧酸的酰基部分。
对于肽3的合成，其化学结构是[HOOC(CH2)4CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，
将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用HOOC(CH2)4COOH进行酰化。
对于肽5的合成，其化学结构是[HOOC(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用HOOC(CH2)6COOH进行酰化。
对于肽7的合成，其化学结构是[HOOC(CH2)8CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc--yr(2BrZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用HOOC(CH2)8COOH进行酰化。
对于肽9的合成，其化学结构是[HOOC(CH2)10CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用HOOC(CH2)10COOH进行酰化。
对于肽13的合成，其化学结构是[HOOC(CH2)14CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用HOOC(CH2)14COOH进行酰化。
对于肽25的合成，其化学结构是[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Cit9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Cit-OH，Boc-Cit-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用HOOC(CH2)12COOH进行酰化。
对于肽81的合成，其化学结构是[HOOC(CH2)8CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，
将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Et)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用HOOC(CH2)8COOH进行酰化。
对于肽82的合成，其化学结构是[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Et)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用HOOC(CH2)12COOH进行酰化。
对于肽88的合成，其化学结构是[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，His20，Nle27，D-Arg28，Hay29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Et)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用HOOC(CH2)12COOH进行酰化。
对于肽102的合成，其化学结构是[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Et)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用HOOC(CH2)12COOH进行酰化。
对于肽108的合成，其化学结构是[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Dip-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用HOOC(CH2)12COOH进行酰化。
对于肽109的合成，其化学结构是[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Phe(pNO2)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Phe(pNO2)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用HOOC(CH2)12COOH进行酰化。
肽3，肽5，肽7，肽9，肽13，肽25，肽81，肽82，肽88，肽102，肽108，和肽109的HF裂解和去保护，以及通过半制备HPLC的随后纯化如肽11的情形所述进行。通过分析HPLC判断纯化的化合物是基本(＞95％)纯的。通过电雾化质谱法检查它们的分子量并通过氨基酸分析证实预期的氨基酸组成。
实施例IIIPhAc-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Asn8-Har9-Tyr(Me)10-His11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2(肽62){[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2}使用手动固相肽合成装置以逐步方式进行合成。简言之，用5％的在DCM中的DIEA来中和对位-甲基二苯甲基胺(MBHA)树脂(Bachem，Kingof Prussia，PA)(720mg，0.50mmol)，并按照表I中所述方法进行洗涤。在手动固相肽合成装置中用中和的树脂和DIC(235μL，1.5mmol)来摇动Boc-Har(NO2)-OH(500mg，1.5mmol)在DMF-DCM(1∶1)中的溶液1小时。在通过阴性水合茚三酮试验证实偶联反应完成后，进行表I中所述的去保护和中和程序从而去除Boc保护基并制备肽-树脂以进行下一个氨基酸的偶联。继续进行合成并通过将下面的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到树脂上从而获得所需的肽序列来逐步形成肽链Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ))-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH。以DIC(235μL，1.5mmol)来偶联被保护的氨基酸(每个1.5mmol)，除了Boc-Asn-OH和Boc-Gln-OH以它们的预形成的HOBt酯进行偶联。从Tyr1除去Nα-Boc保护基后，使用DIC(313μL，2mmol)以苯乙酸(PhAc-OH)(272mg，2mmol)对所述肽进行酰化。
为了将所述肽从树脂上裂解下来并对其进行去保护，于0℃将286mg的干燥肽树脂部分与0.5mL的m-甲酚和5mL的氟化氢(HF)一起进行搅拌达2小时。在氮气流下和在真空中蒸发HF后，用无水二乙醚和乙酸乙酯洗涤所述残余物。将裂解的和去保护的肽溶解在50％的乙酸中并通过过滤从树脂中进行分离。用水稀释和冷冻干燥后，获得155mg的粗制产物。
使用具有Supelco Discovery HS C18反相柱(2.1mm×5cm，以C18硅胶封装，120孔大小，3μm颗粒大小)(Supelco，Bellefonte，PA)和线性梯度洗脱剂(例如，40-70％B)的Hewlett-Packard Model HP-1090液相色谱仪以溶剂系统使用分析HPLC来检查粗肽，所述溶剂系统由(A)0.1％水性TFA和(B)在70％水性MeCN中的0.1％的TFA组成。为了通过半制备HPLC进行纯化，将155mg的粗肽溶解在AcOH/H2O中，搅拌，过滤并应用在Beckman Ultraprep ODS柱(21.2mm×15cm，用C18硅胶封装，300孔大小，10μm颗粒大小)。所述柱以线性梯度模式(例如，在120分钟内的40-60％B)使用上述的溶剂系统进行洗脱；流速12mL/分钟。在220nm监测洗脱，并通过分析HPLC来检测所述级分。将纯度高于95％的级分合并并进行冷冻干燥从而得到13.3mg纯产物。以0.2ml/min的流速使用等度洗脱在上述Supelco C18反相柱上进行分析HPLC，所述等度洗脱具有上述的溶剂系统。在220和280nm监测峰。通过分析HPLC判断所述产物是基本纯(＞95％)的。通过电雾化质谱法检查分子量，并通过氨基酸分析来证实预期的氨基酸组成。
肽15，肽18，肽19，肽21，肽22，肽23，肽24，肽26，肽27，肽28，肽32，肽33，肽34，肽35，肽36，肽37，肽38，肽39，肽40，肽41，肽42，肽43，肽53，肽54，肽55，肽57，肽58，肽63，肽65，肽69，肽84，肽85，肽90，和肽91以与肽62相同的方式进行合成，除了这些肽还包含其它的取代。
对于肽15的合成，其化学结构是[PhAc-Tyrl，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，Har28，D-Arg29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽18的合成，其化学结构是[PhAc-Arg0，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽19的合成，其化学结构是[PhAc-D-Arg0，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽21的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Cit-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH ，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽22的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Cit9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Cit-OH，Boc-Cit-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽23的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Arg9，Abu15，Nle27，Har28，D-Arg29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Cit-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽24的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Cit9，Abu15，Nle27，Har28，D-Arg29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Cit-OH，Boc-Cit-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽26的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，D-Ala8，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-D-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽27的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Abu8，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽28的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit9，Abu15，Nle27，Har28，D-Arg29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2Clz)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Cit-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAC-OH进行酰化。
对于肽32的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，His10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽33的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Cha10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Cha-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽34的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tpi10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tpi-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽35的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，2-Nal10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Aug(Tos)-OH，Boc-2-Nal-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽36的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Dip10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Dip-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽37的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Phe(pNH2)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Phe(pNH-Z)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽38的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Trp10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Trp(For)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽39的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Phe(pNO2)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Phe(pNO2)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽40的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，3-Pal10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(-Tos)-OH，Boc-3-Pal-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽41的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Et)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(Et)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽42的合成，其化学结构是[PhAc-His1，D-Arg2，Tyr6，Har9，Bpa10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Bpa-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-His(Bom)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽43的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Har12，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH ，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽53的合成，其化学结构是[Hca-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29，Har30]hGH-RH(1-3O)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用氢化肉桂酸(Hca-OH)进行酰化。
对于肽54的合成，其化学结构是[Dat-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29，Har30]hGH-RH(1-30)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用脱-氨基-酪氨酸(Dat)进行酰化。
对于肽55的合成，其化学结构是[Ipa-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29，Har30]hGH-RH(1-30)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用吲哚-3-丙酸(Ipa-OH)进行酰化。
对于肽57的合成，其化学结构是[Hca-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，D-Arg29，Har30]hGH-RH(1-30)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用Hca-OH进行酰化。
对于肽58的合成，其化学结构是[Hca-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29，D-Arg30]hGH-RH(1-3O)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用Hca-OH进行酰化。
对于肽63的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Har11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽65的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Cit11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Cit-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽69的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，His9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽84的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，His20，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽85的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，His20，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽90的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Cit15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Cit-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽91的合成，其化学结构是[1-Nac-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Et)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用1-萘乙酸(1-Nac-OH)进行酰化。
肽15，肽18，肽19，肽21，肽22，肽23，肽24，肽26，肽27，肽28，肽32，肽33，肽34，肽35，肽36，肽37，肽38，肽39，肽40，肽41，肽42，肽43，肽53，肽54，肽55，肽57，肽58，肽63，肽65，肽69，肽84，肽85，肽90，和肽91的HF裂解和去保护，以及通过半制备HPLC的随后纯化如肽62的情形所述进行。通过分析HPLC判断纯化的化合物是基本(＞95％)纯的。通过电雾化质谱法检查它们的分子量并通过氨基酸分析证实预期的氨基酸组成。
实施例IVPhAc-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Asn8-Amp9-Tyr(Me)10-Arg11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2
(肽67){[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2}使用手动固相肽合成装置以逐步方式进行合成。简言之，用5％的在DCM中的DIEA来中和对位-甲基二苯甲基胺(MBHA)树脂(Bachem，Kingof Prussia，PA)(720mg，0.50mmol)，并按照表I中所述方法进行洗涤。在手动固相肽合成装置中用中和的树脂和DIC(235μL，1.5mmol)来摇动Boc-Har(NO2)-OH(500mg，1.5mmol)在DMF-DCM(1∶1)中的溶液1小时。在通过阴性水合茚三酮试验证实偶联反应完成后，进行表I中所述的去保护和中和程序从而去除Boc保护基并制备肽-树脂以进行下一个氨基酸的偶联。继续进行合成并通过将下面的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到树脂上从而获得所需的肽序列来逐步形成肽链。Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ))-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-Amp(Alloc)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH。被保护的、非编码氨基酸Boc-Amp(Alloc)-OH可商购自RSPAmino AcidAnalogue，Inc.(Worcester，MA)。用DIC(235μL，1.5mmol)偶联被保护的氨基酸(每个1.5mmol)，除了Boc-Amp(Alloc)-OH、Boc-Asn-OH和Boc-Gln-OH是用569mgHBTU+203mgHOBt+522μLDIEA(1.5∶1.5∶3mmol)进行偶联的。从Tyr1去除Nα-Boc保护基后，使用DIC(313μL，2mmol)用苯乙酸(PhAc-OH)(272mg，2mmol)对肽进行酰化。将仍旧附着所有的侧链保护基的得到的肽基树脂用DCM洗涤3次，用MeOH洗涤3次，并在高真空下干燥。
然后，通过使用Novabiochem(San Diego，CA)Catalog 2002/2003描述的方法，使肽-树脂经历Pd(O)-催化的Alloc保护基从肽链的Amp9残基的去除。将具有0.033mmol估计肽含量的255mg的肽基树脂部分称重放入测试试管中，并将试管用橡胶隔膜密封。将测试试管用氩气(Ar)流冲洗，所述氩气从插入通过隔膜的针传递。将116mg Pd(PPh3)4(0.1mmol，或3当量，相对于肽基树脂上存在的Alloc基团)称重，放入另一个干燥的测试试管中，加入4-5mL的CHCl3-AcOH-N-甲基吗啉(37∶2∶1vol∶vol∶vol)，通过将Ar气流鼓泡通过溶液而将催化剂溶解，并将试管用橡胶隔膜封口。使用Ar冲洗的不透气的注射器将所述溶液转移到包含所述树脂的试管中，将得到的混合物保持不变2小时，其间偶而轻微搅拌。接下来，将所述树脂转移到烧结的玻璃漏斗中并用O.5％的在DMF中的DIEA(用于中和树脂)和在DMF中的铜锌灵(O.5％w/w)(用于去除催化剂)连续洗涤。用MeOH进行另一次洗涤后，在肽的HF裂解之前将所述树脂再次进行干燥。
如实施例I-III所述，通过HF处理获得肽从MBHA树脂的裂解，其伴随剩余的保护基的去除。如在实施例I-III中所描述进行的，随后的进展和HPLC纯化产生11.6mg的纯肽67(通过分析HPLC的＞95％的纯度)。通过电雾化质谱法检测分子量，并通过氨基酸分析证实预期的氨基酸组成。
以与肽67相同的方式合成肽30，肽31，肽64，肽68，肽73，肽74，和肽75，除了这些肽还包含其它的取代。
对于肽30的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Amp10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Amp(Alloc)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽31的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Amp10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OHBoc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Amp(Alloc)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽64的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Amp11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Amp(Alloc)-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽68的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Amp(Alloc)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(B2l)-OH，Boc-Phe(pCl)H，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽73的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-Amp(Alloc)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽74的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Amp9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-Amp(Alloc)-OH，Boc-Cit-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽75的合成，其化学结构是[1-Nac-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Amp9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-Amp(Alloc)-OH，Boc-Cit-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用1-萘乙酸(1-Nac-OH)进行酰化。
肽30，肽31，肽64，肽68，肽73，肽74，和肽75的去保护，从树脂上裂解，以及通过半制备HPLC的随后纯化如肽67的情形所述进行。通过分析HPLC判断纯化的化合物是基本(＞95％)纯的。通过电雾化质谱法检测它们的分子量并通过氨基酸分析证实预期的氨基酸组成。
实施例VPhAc-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Asn8-Har9-Tyr(Me)10-Arg11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NHEt(肽46){[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt}使用手动固相肽合成装置以逐步方式进行合成。简言之，将Merrifield树脂(Bachem，King of Prussia，PA)(3.0g，具有0.6mmol/g的取代)在DCM中进行预溶胀，用DMF洗涤3次，然后加入2390mg Boc-Har(Tos)-OH(5.4mmol，对应于3x摩尔过量)在20-30mL DMF中的溶液和314mg固体KF(5.4mmol，3x摩尔过量)，从而将第一个氨基酸填充到树脂上。于80℃用上述混合物摇动所述树脂达4小时，接着过滤所述树脂并用如下将其进行洗涤3x DMF，3x DMF-水(1∶1)(以去除KF)，3x DMF，3x DCM，和3x MeOH。将树脂在真空中干燥24小时从而达到恒重。具有填充的第一个氨基酸的干燥树脂[Boc-Har(Tos)-Merrifield树脂]的重量超过3.5g，说明填充的产率多于70％。
将1.5g的Boc-Har(Tos)-Merrifield树脂(约0.5mmol)在DCM中进行预溶胀，并在用50％的在DCM中的TFA去保护和用5％的在DCM中的DIEA中和后，通过将如下的被保护的氨基酸以显示的顺序偶联到树脂上从而获得所需的肽序列来逐步形成肽链Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-Har(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH。在此合成中，使用Boc-Har(Tos)-OH取代Boc-Har(NO2)-OH，因为已知硝基保护的胍基基团被碱诸如使用在该合成中的乙胺攻击并且关于Boc-Har(NO2)-OH，可发生Har到Lys的部分分解。用DIC(235μL，1.5mmol)对被保护的氨基酸(每个1.5mmol)进行偶联，除了Boc-Asn-OH和Boc-Gln-OH，它们是用预形成的HOBt酯进行偶联的。在将Nα-Boc保护基从Tyr1去除后，使用DIC(313μL，2mmol)用苯乙酸(PhAc-OH)(272mg，2mmol)对所述肽进行酰化，将其用DCM和MeOH进行洗涤，并进行干燥。
为了通过乙胺(EtNH2)介导的氨解将被保护的肽从树脂上裂解下来，并获得在其C-端具有乙酰胺修饰(-NHEt)的肽，将250mg的干燥肽树脂部分加入由厚壁玻璃制成的圆底烧瓶中，将烧瓶置于在良好通风的通风橱中的无水冰甲醇冷却浴中，并将液体EtNH2(b.p.＝16.6℃，来自Aldrich，在金属圆筒中传递)以足够覆盖肽树脂的量转移到烧瓶中。将所述烧瓶塞住，加温到室温(注意在里面形成的压力)，并摇动3小时30分钟从而使反应发生。在该阶段后，将烧瓶再次置于冷浴中，打开，并将液体EtNH2过滤除去，余下固体残余物，其包含树脂和裂解的肽的混合物，所述肽仍旧具有附着的保护基。在该程序后，使固体残余物经过真空过夜以去除任何残余的EtNH2和吸附的湿气。
将包含裂解的、被保护的肽的干燥残余物置于HF处理装置中并在作为清除剂的0.5mL的m-甲酚存在时，通过用5mL的HF在0℃达2小时来进行保护基的HF裂解。在氮气流下和真空中蒸发HF后，用无水二乙醚和乙酸乙酯洗涤所述残余物。将裂解的和去保护的肽溶解在50％乙酸中并通过过滤分离树脂。用水稀释和冷冻干燥后，典型地获得90-110mg的粗制产物。
通过半制备HPLC来纯化所述肽并如实施例I-III所述通过分析HPLC来检测洗脱的级分。将具有超过95％纯度的级分进行合并并将其进行冷冻干燥从而获得5-10mg的纯肽46。通过电雾化质谱法来检测分子量，并通过氨基酸分析证实预期的氨基酸组成。
以与肽46相同的方式来合成肽45，肽47，肽48，肽49，肽50，肽56，肽97，肽98，肽99，肽100，肽101，肽106，肽110，肽113，肽114，肽115，肽118，肽119，肽120，和肽121，除了这些肽还包含其它的取代。
对于肽45的合成，其化学结构是[Hca-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]；hGH-RH(1-29)NHEt，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到Merrifield树脂上Boc-Har(Tos)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-Har(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用Hca-OH进行酰化。
对于肽47的合成，其化学结构是[Hca-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]；hGH-RH(1-29)NHEt，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到Merrifield树脂上Boc-Har(Tos)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用Hca-OH进行酰化。
对于肽48的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]；hGH-RH(1-29)NHEt，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到Merrifield树脂上Boc-Har(Tos)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-oH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽49的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Aib15，Nle27，D-Arg28，Har29]；hGH-RH(1-29)NHEt，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到Merrifield树脂上Boc-Har(Tos)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Aib-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-Har(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽50的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Orn12，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到Merrifield树脂上Boc-Har(Tos)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-Har(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽56的合成，其化学结构是[Hca-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29，Har30]hGH-RH(1-30)NHEt，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到Merrfield树脂上Boc-Har(Tos)-OH，Boc-Har(Tos)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-Har(Tos)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用Hca-OH进行酰化。
对于肽97的合成，其化学结构是[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到Merrifield树脂上Boc-Har(Tos)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Et)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)6COOH进行酰化。
对于肽98的合成，其化学结构是[CH3(CH2)8CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到Merrifield树脂上Boc-Har(Tos)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Et)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)8COOH进行酰化。
对于肽99的合成，其化学结构是[CH3(CH2)10CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到Merrifield树脂上Boc-Har(Tos)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Et)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)10COOH进行酰化。
对于肽100的合成，其化学结构是[Hca-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到Merrifield树脂上Boc-Har(Tos)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Et)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用Hca-OH进行酰化。
对于肽101的合成，其化学结构是[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHMe，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到Merrifield树脂上Boc-Har(Tos)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Et)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)6COOH进行酰化。
对于肽106的合成，其化学结构是[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到Merrifield树脂上Boc-Har(Tos)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Et)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)6COOH进行酰化。
对于肽110的合成，其化学结构是[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到Merrifield树脂上Boc-Har(Tos)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Et)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用HOOC(CH2)12COOH进行酰化。
对于肽113的合成，其化学结构是[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到Merrifield树脂上Boc-Har(Tos)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Et)-OH，Boc-Amp-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)6COOH进行酰化。
对于肽114的合成，其化学结构是[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到Merrifield树脂上Boc-Har(Tos)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Orn(2ClZ)-0H，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Dip-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)6COOH进行酰化。
对于肽115的合成，其化学结构是[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Phe(pNO2)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到Merrifield树脂上Boc-Har(Tos)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Phe(pNO2)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)6COOH进行酰化。
对于肽118的合成，其化学结构是[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到Merrifield树脂上Boc-Har(Tos)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Dip-OH，Boc-Amp-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)6COOH进行酰化。
对于肽119的合成，其化学结构是[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Phe(pNO2)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到Merrfield树脂上Boc-Har(Tos)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OHBoc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Phe(pNO2)-OH，Boc-Amp-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)6COOH进行酰化。
对于肽120的合成，其化学结构是[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到Merrifield树脂上Boc-Har(Tos)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Dip-OH，Boc-Amp-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用HOOC(CH2)12COOH进行酰化。
对于肽121的合成，其化学结构是[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Phe(pNO2)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到Merrifield树脂上Boc-Har(Tos)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Phe(pNO2)-OH，Boc-Amp-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用HOOC(CH2)12COOH进行酰化。
如肽46的情形所述进行肽45，肽47，肽48，肽49，肽50，肽56，肽97，肽98，肽99，肽100，肽106，肽110，肽113，肽114，肽115，肽118，肽119，肽120，和肽121的乙胺介导的从树脂上的裂解，以及肽101的甲胺介导的从树脂上的裂解，接着通过HF的去保护，和通过半制备HPLC进行的随后的纯化。通过分析HPLC判断纯化的化合物是基本(＞95％)纯的。通过电雾化质谱法来检测它们的分子量并通过氨基酸分析来证实预期的氨基酸组成。
实施例VIHca-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Asn8-Har9-Tyr(Me)10-Arg11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-Agm30肽59{[Hca-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29，Agm30]hGH-RH(1-30)}使用手动固相肽合成装置以逐步方式进行合成。合成的起始材料是具有0.3mmol/g取代的Boc-精胺-NG-磺酰基-苯氧基乙酰基-MBHA(Boc-Agm-SPA-MBHA)树脂，其商购自California Peptide Research，Inc.(Napa，CA)。该树脂的合成已经在美国专利号4,914,189和科学文献中(Zarandi M，Serfozo P，Zsigo J，Bokser L，Janaky T，Olsen DB，Bajusz S，Schally AV，Int.J.Peptide Protein Res.39211-217，1992)进行描述，特此并入作为参考。简言之，将Boc-Agm-SPA-MBHA树脂(1.67g，0.50mmol)在DCM中进行预溶胀，接着进行表I描述的去保护和中和方法从而去除Boc保护基并制备肽-树脂以进行下一个氨基酸的偶联。持续进行合成，并通过以显示的顺序将如下的被保护的氨基酸偶联到树脂上从而获得需要的肽序列来逐步形成肽链Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH。用DIC(235μL，1.5mmol)偶联被保护的氨基酸(每个1.5mmol)，除了Boc-Asn-OH和Boc-Gln-OH以它们的预形成的HOBt酯进行偶联。从Tyr1去除Nα-Boc保护基后，使用DIC(313μL，2mmol)以氢化肉桂酸(Hca-OH)(300mg，2mmol)对所述肽进行酰化。
为了将肽从树脂上裂解下来并对其进行去保护，将250mg的干燥肽树脂与0.5mL的m-甲酚和5mL的氟化氢(HF)于0℃搅拌2小时。在氮气流下和在真空中蒸发HF后，用无水二乙醚和乙酸乙酯洗涤所述残余物。将裂解的和去保护的肽溶解在50％乙酸中并通过过滤将其从树脂分离。用水稀释并且冷冻干燥后，典型地获得100-110mg的粗制产物。
如实施例I-III中所述，通过半制备HPLC纯化所述肽并通过分析HPLC检测洗脱的级分。将高于95％纯度的级分合并并进行冷冻干燥以得到5-10mg的纯肽59。通过电雾化质谱法来检测分子量，并通过氨基酸分析来证实预测的氨基酸组成。
肽51、肽52和肽60以与肽59相同的方式进行合成，除了这些肽还包含其它的取代。
对于肽51的合成，其化学结构是[Hca-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Agrm29]hGH-RH(1-29)，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到Boc-Agm-SPA-MBHA树脂上Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，BocGln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2Clz)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用Hca-OH进行酰化。
对于肽52的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Agm29]hGH-RH(1-29)，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到Boc-Agm-SPA-MBHA树脂上Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
对于肽60的合成，其化学结构是[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29，Agm30]hGH-RH(1-30)，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到Boc-Agm-SPA-MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-Har(NO2)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用PhAc-OH进行酰化。
肽51、肽52和肽60的HF裂解和去保护，以及随后通过半制备HPLC进行的纯化如肽59情形所述进行。通过分析HPLC判断纯化的化合物是基本(＞95％)纯的。通过电雾化质谱法检测它们的分子量，并通过氨基酸分析证实预期的氨基酸组成。
实施例VIICH3(CH2)6CO-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Asn8-Amp9-Tyr(Me)10-Arg11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽70{[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2}将N-端酰基部分偶联到肽-树脂之前的所有合成步骤如实施例IV描述进行。从Tyr1去除Nα-Boc保护基后，使用DIC(235μL，1.5mmol)作为偶联剂，用辛酸[CH3(CH2)6COOH](475uL，3mmol)将所述肽(0.5mmol)酰化过夜。将得到的仍旧附着所有的侧链保护基的肽基树脂用DCM洗涤3次，用MeOH洗涤3次，并在高真空下进行干燥。
随后，如实施例IV所述，使肽基树脂经过Pd(0)-催化的Alloc保护基从肽链的Amp9残基上的去除。接着在肽的HF裂解之前，用MeOH洗涤肽树脂并进行干燥。
如实施例I-III所述，通过HF处理，实现从MBHA树脂裂解所述肽，伴随剩余保护基的去除。如实施例I-III所述进行随后的进展和HPLC纯化。在以HF处理300mg干燥肽基树脂后，得到192mg的粗冻干肽，其HPLC纯化产生17.1mg的纯肽70(通过分析HPLC＞95％的纯度)。通过电雾化质谱法检测分子量，并通过氨基酸分析证实预期的氨基酸组成。
肽76，肽78，肽87，肽103，肽111，和肽112以与肽70相同的方式进行合成，除了这些肽还包含其它的取代。
对于肽76的合成，其化学结构是[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Amp9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-Amp(Alloc)-OH，Boc-Cit-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)6COOH进行酰化。
对于肽78的合成，其化学结构是[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Amp9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Et)-OH，Boc-Amp(Alloc)-OH，Boc-Cit-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)6COOH进行酰化。
对于肽87的合成，其化学结构是[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，His20，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Et)-OH，Boc-Amp(Alloc)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)6COOH进行酰化。
对于肽103的合成，其化学结构是[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Et)-OH，Boc-Amp(Alloc)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)6COOH进行酰化。
对于肽111的合成，其化学结构是[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Dip-OH，Boc-Amp(Alloc)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)6COOH进行酰化。
对于肽112的合成，其化学结构是[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Phe(pNO2)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2，将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom}-OH，Boc-Phe(pNO2)-OH，Boc-Amp(Alloc)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用CH3(CH2)6COOH进行酰化。
肽76，肽78，肽87，肽103，肽111，和肽112的去保护，从树脂上裂解以及随后的通过半制备HPLC的纯化如肽70的情形所述进行。通过分析HPLC判断纯化的化合物是基本(＞95％)纯的。通过电雾化质谱法来检测分子量，并通过氨基酸分析证实预期的氨基酸组成。
实施例VIIIHOOC(CH2)12CO-Tyr1-D-Arg2-Asp3-Ala4-Ile5-Phe(pCl)6-Thr7-Asn8-Amp9-Tyr(Me)10-Arg11-Lys12-Val13-Leu14-Abu15-Gln16-Leu17-Ser18-Ala19-Arg20-Lys21-Leu22-Leu23-Gln24-Asp25-Ile26-Nle27-D-Arg28-Har29-NH2肽72{[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2}在将N-端酰基部分与肽-树脂偶联前所有的合成步骤如实施例IV所述进行。在从Tyr1去除Nα-Boc保护基后，用如下制备的预形成的1，12-十二烷二羧酸的对称酐对所述肽进行酰化。对于在0.5mmol规模的肽的合成，将388mg(1.5mmol)的1，12-十二烷二羧酸[HOOC(CH2)12COOH]溶解在5-10mL的DMF-DCM(1∶1)中，将235μL(1.5mmol)的DIC加入该溶液中，并且该混合物容许在室温保持30分钟。在该阶段后，将混合物转移到合成容器中，所述容器包含在Tyr1上具有游离氨基端的肽-树脂，并将酰化进行过夜。得到的仍旧附着所有的侧链保护基的肽基树脂用DCM洗涤3次，用MeOH洗涤3次，并在高真空下干燥。
随后，如实施例IV所述，使肽基树脂经过Pd(0)催化的Alloc保护基从肽链Amp9残基上的去除。然后在肽的HF裂解之前，用MeOH对肽树脂进行洗涤并进行干燥。
如实施例I-III所述，以HF处理实现肽从MBHA树脂上的裂解，伴随剩余保护基的去除。如实施例I-III所述进行随后的进展和HPLC纯化。对150mg干燥肽基树脂进行HF处理后，获得82mg的粗制冻干肽，对其进行的HPLC纯化产生2.5mg的纯肽72(通过分析HPLC，＞95％的纯度)。通过电雾化质谱法检测分子量，并通过氨基酸分析证实预期的氨基酸组成。
肽71、肽77、肽89、肽107、肽116和肽117以与肽72相同的方式进行合成，除了这些肽还包含其它的取代。
对于肽71的合成，其化学结构是[HOOC(CH2)8CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-Amp(Alloc)-OH，Boc-Asn-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用HOOC(CH2)8COOH进行酰化。
对于肽77的合成，其化学结构是[HOOC(CH2)12CO-ryr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Amp9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Me)-OH，Boc-Amp(Alloc)-OH，Boc-Cit-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用HOOC(CH2)12COOH进行酰化。
对于肽89的合成，其化学结构是[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，His20，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH、Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Et)-OH，Boc-Amp(Alloc)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boo-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用HOOC(CH2)12COOH进行酰化。
对于肽107的合成，其化学结构是[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Tyr(Et)-OH，Boc-Amp(Alloc)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用HOOC(CH2)12COOH进行酰化。
对于肽116的合成，其化学结构是[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Dip-OH，Boc-Amp(Alloc)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用HOOC(CH2)12COOH进行酰化。
对于肽117的合成，其化学结构是[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Phe(pNO2)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2将如下的被保护氨基酸以显示的顺序偶联到MBHA树脂上Boc-Har(NO2)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Nle-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Abu-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Val-OH，Boc-Orn(2ClZ)-OH，Boc-His(Bom)-OH，Boc-Phe(pNO2)-OH，Boc-Amp(Alloc)-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Phe(pCl)-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Ala-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，Boc-D-Arg(Tos)-OH，Boc-Tyr(2BrZ)-OH，随后用HOOC(CH2)12COOH进行酰化。
肽71、肽77、肽89、肽107、肽116、和肽117的去保护、从树脂上裂解，以及通过半制备HPLC进行的随后的纯化如肽72的情形所述进行。通过分析HPLC判断所述纯化的化合物是基本(95％)纯的。通过电雾化质谱法检测它们的分子量并通过氨基酸分析证实预期的氨基酸组成。
实施例IX肌内注射剂的水溶液hGH-RH(1-29)NH2(肽67) 500.0mg明胶，不产抗原的 5.0mg注射用水q.s. 加到100.0ml将明胶和GH-RH拮抗剂肽67溶解在注射用水中，接着将所述溶液过滤灭菌。
实施例X长效肌内可注射制剂(芝麻油凝胶)[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2(肽80) 10.0mg一硬脂酸铝，USP 20.0mg芝麻油q.s. 加到1.0mL将一硬脂酸铝与芝麻油结合并加热到125℃，伴随搅拌直到澄清黄色溶液形成。接着将该混合物进行高压灭菌并使其冷却。接着，将GH-RH拮抗剂肽80以无菌条件粉状加入。特别优选的拮抗剂是低溶解度的盐，例如双羟萘酸盐(pamoate salt)等。这些拮抗剂显示活性的长持续时间。
实施例XI长效肌内(IM)可注射可生物降解聚合物微胶囊微胶囊由如下制成25/75乙交酯/丙交酯共聚物(0.5特性粘数) 99％[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2(肽96) 1％将25mg的上述微胶囊悬浮在1.0mL的如下赋形剂中右旋糖5.0％CMC，钠 0.5％
苄醇 0.9％Tween 80 0.1％水，纯化的q.s.加到100％实施例XII内分泌中的生物学活性和肿瘤学试验在体外和体内的试验中测试本发明的肽的抑制hGH-RH(1-29)NH2诱导的GH释放的能力。还测量了化合物与肿瘤GH-RH受体的结合亲和性。所述肽的抗肿瘤活性和它们对血清IGF-I以及肿瘤IGF系统的抑制作用在各种癌症模型中在体内进行了评价。
超融合(Superfused)大鼠垂体系统在前面描述的试验中(S.Vigh和A.V Schally，Peptides 5241-347，1984)体外检验具有修饰的类似物(Z.Rekasi和A.V.Schally，P.N.A.S.902146-2149，1993)。
简言之，以不同浓度的肽将细胞预培养9分钟(3mL)。紧接着培养后，将1nM hGH-RH(1-29)NH2施用3分钟(1mL)
。为了检测类似物的拮抗性作用的持续时间，在30，60，90，和120分钟后应用1nM hGH-RH(1-29)NH23分钟[30，60，90，120分钟应答]。评价GH应答的净总值(Netintegral values)。比较GH应答并将其表示作由1nM GH-RH(1-29)NH2诱导的起始GH应答的百分比。与[Ac-Tyr1，D-Arg2，hGH-RH(1-29)NH2，“标准拮抗剂”比较新拮抗剂的作用。
GH，IGF-I，和IGF-II的放射性免疫试验(RIA)使用由National Hormone and Pituitary Program，Baltimore，Maryland提供的材料通过双抗放射性免疫试验测量在未稀释的和稀释的超融合样品的等分试样中的大鼠GH水平。用我们的研究所(V.Csemus和A.V.Schally，In Neuroendocrine Research Methods，Harwood Academic(Greenstein，B.D.ed.，London，pp.71-109，1991)开发的计算机程序分析RIA的结果，将其并入作为参考。
为了测量血清中的GH和IGF-I水平，以及肿瘤的细胞溶质级分中的IGF-I和IGF-II浓度，如所述(Braczkowski R，Schally AV，Plonowski A，VargaJL，Groot K，Krupa M，Armatis P，Cancer 951735-1745，2002)收集血液样品和肿瘤样品并进行处理，特此并入作为参考。简言之，对血液样品进行离心以分离血清，并对肿瘤进行搅匀，离心以分离细胞溶质级分。然后，通过双抗RIA方法来测量血清GH。在通过RIA测量前，使用酸-乙醇冷沉淀方法将IGF-I和IGF-II从血清和细胞溶质级分中进行抽提，所述冷沉淀方法去除大部分IGF结合蛋白，所述IGF结合蛋白可干扰RIA。使用作为标准的IGF-I和山羊抗-IGF-I抗体(都来自DSL Inc.，Webster，TX)，通过RIA来测量IGF-I浓度。使用作为标准的人重组IGF-II(Bachem)和抗-IGF-II单克隆抗体(Amano International Enzyme，Troy，VA)，通过RIA来测量IGF-II浓度。
在所有的RIA测量中，试验间变化少于15％并且试验内变化少于10％。
肿瘤GH-RH受体结合试验将具有125I-标记的GH-RH拮抗剂JV-1-42的配体竞争试验用于确定GH-RH类似物与在人PC-3前列腺肿瘤的膜级分上的GH-RH受体同种型的结合亲和性。已经详细描述了使用的方法(Halmos G，Schally AV，Varga JL，Plonowski A，Rekasi Z，Czompoly T，Proc Natl Acad Sci USA 9710555-10560，2000；Halmos G，Schally AV，Czompoly T，Krupa M，Varga JL，Rekasi Z，J Clin Endocrinol Metab 874707-4714，2002)，特此并入作为参考。简言之，通过氯胺-T方法来制备JV-1-42的放射性碘标记的衍生物。将作为裸鼠中异种移植物培养的PC-3肿瘤用于制备粗制膜。用[125I]JV-1-42培养PC-3膜匀浆并将增加浓度(10-12-10-6M)的非放射性活性拮抗剂肽作为竞争剂。通过离心分离沉淀物并在γ-计数器中计算放射性。通过Ki(抑制剂-受体复合物的解离常数)估计最终结合亲和性并通过Munson和Rodbard(P.J.Munson和D.Rodbard，Anal.Biochem.107220-239，1980)的配体PC和McPherson计算机程序确定。将与参照肽诸如JV-1-36或JV-1-38比较的相对亲和性(R.A.)计算为参照肽的Ki与测试的GH-RH拮抗剂的Ki的比率。
超融合试验的结果将在超融合大鼠垂体系统中测试的体外拮抗活性的结果归纳于表III中。通过这些数据可见，如与标准的拮抗剂比较，分子中存在的取代导致体外对GH-RH-激发的GH释放的大大增加和延长的抑制作用表III对在超融合大鼠垂体系统中的GH释放的抑制
*参照化合物，美国专利6,057,422的主题物肿瘤GH-RH受体结合试验的结果如分别在表IV和表V中所见，与参照化合物的结合亲和性比较，分子中存在的取代导致它们与PC-3肿瘤膜上的GH-RH受体同种型结合亲和性的基本增加。
表IV.
GH-RH拮抗剂与在PC-3人前列腺癌上的膜受体的相对亲和性(R.A.)
*参照化合物，美国专利6,057,422的主题物表VGH-RH拮抗剂与在PC-3人前列腺癌上的膜受体的相对亲和性(R.A.)
*参照化合物，美国专利6,057,422的主题物GH-RH拮抗剂对裸鼠中PC-3人前列腺癌异种移植物的影响实验1在两胁上将3mm3的PC-3人激素不依赖型前列腺癌组织块s.c.移植在雄性裸鼠中。当肿瘤达到约50mm3的体积时，将小鼠分成5个实验组，每组7-8只动物并如下接受单一每日注射达28天1.对照(赋形剂溶液)；2.JV-1-38(10μg/日s.c.)；3肽31(10μg/日s.c.)；4.肽67(10μg/日s.c.)；5.肽62(10μg/日s.c.)。每周测量肿瘤体积两次。实验在第29天结束，在异氟烷麻醉下将小鼠处死。将得到的肿瘤清洁、称重并快速冷冻直到进一步的分析。从腹部主动脉收集躯干血并分离血清进行IGF-I的RIA测量。通过双尾t-检验来进行测量结果的统计分析；将数据表示为平均值±S.E.。
实验2实验2与实验1类似，不同的是当PC-3肿瘤的体积长到约30mm3时，实验2开始。这时，将动物分成8个实验组，每组8只动物，并如下接受单一每日注射达28天1.对照(赋形剂溶液)；2.JV-1-38(10μg/日s.c.)；3.肽46(5μg/日s.c.)；4.肽77(5μg/日s.c)；5.肽76(5μg/日s.c.)；6.肽70(5μg/日s.c.)；7.肽79(5μg/日s.c.)；8.肽80(5μg/日s.c.)。实验2另外的细节与实验1相同。
实验3在两胁上将3mm3的PC-3人激素不依赖型前列腺癌组织块s.c.移植在雄性裸鼠中。当肿瘤达到约65mm3的体积时，将小鼠分成7个实验组，每组8-9只动物并如下接受单一每日注射达28天1.对照(赋形剂溶液)；2.JV-1-38(10μg/日s.c.)；3肽35(10μg/日s.c.)；4.肽36(10μg/日s.c.)；5.肽37(10μg/日s.c.)，6肽39(10μg/日s.c.)；7肽41(10μg/日s.c.)。每周测量肿瘤体积两次。实验在第28天结束，在异氟烷麻醉下将小鼠处死。将得到的肿瘤清洁、称重并快速冷冻直到进一步的分析。从腹部主动脉收集躯干血并分离血清进行IGF-I的RIA测量。通过ANOVA随后Fisher检验来进行测量结果的统计分析；将数据表示为平均值±S.E.。
实验4实验4的所有实验细节与实验3相同，但具有下面的不同。当肿瘤达到约55mm3的体积时，将小鼠分成5个实验组，每组8-9只动物并如下接受单一每日注射达28天1.对照(赋形剂溶液)；2.肽80(5μg/日s.c.)；3.肽86(5μg/日s.c.)；4.肽95(5μg/日s.c.)；5.肽96(5μg/日s.c.)。
实验4的另外的细节与实验3相同。
结果实验1在测试的GH-RH拮抗剂中，肽67和肽62对PC-3肿瘤生长的抑制作用比参照肽JV-1-38，美国专利6,057,422的主题物要更强(表VI)。与JV-1-38(表VII)比较，本发明的肽还更有效地抑制血清中IGF-I的水平和肿瘤中IGF-II的水平。
表VI.
实验1用GH-RH拮抗剂进行的处理对裸鼠中PC-3人前列腺癌异种移植物的影响
*p＜0.05相对于对照表VII实验1用GH-RH拮抗剂进行的处理对具有PC-3人前列腺癌异种移植物的裸鼠中的IGF-I的血清水平和IGF-II肿瘤浓度的影响
N.I.没有研究实验2以5μg/天的剂量使用的本发明的肽46、肽77、肽76、肽70、肽79和肽80减少PC-3癌症的肿瘤体积和肿瘤重量20-64％，并增加肿瘤体积倍增时间多至对照值的101％(表VIII)。肽77、肽70、肽79、和肽80的作用对一个或多个这些肿瘤参数具有统计学上的显著性。相反，参照肽JV-1-38，美国专利6,057,422的主题物，当以10μg/天的双倍剂量使用时，没有减少肿瘤体积，并仅对PC-3肿瘤的重量产生10％的轻微和不显著的抑制(表VIII)。此外，本发明的肽70、肽79和肽80显著减少血清IGF-I水平达31％-42％，但是肽JV-1-38没有作用(表IX)。
表VIII实验2用GH-RH拮抗剂进行的处理对裸鼠中PC-3人前列腺癌异种移植物的影响
*p＜0.05相对于对照；#p＜0.05相对于JV-1-38表IX实验2用GH-RH拮抗剂进行的处理对具有PC-3人前列腺癌异种移植物的裸鼠中的IGF-I的血清水平的影响
**p＜0.01相对于对照；***p＜0.001相对于对照.
实验3在10μg/天的剂量上，所有被测试的肽显著抑制PC-3肿瘤的生长。肽35、肽36和肽39比参照肽JV-1-38具有更有效的抗肿瘤效果(表X)。
表X实验3用GH-RH拮抗剂进行的处理对裸鼠中PC-3人前列腺癌异种移植物的影响
*p＜0.05相对于对照；**p＜0.01相对于对照实验4以5μg/天的剂量施用的所有的四个肽显著抑制裸鼠中的PC-3肿瘤的生长。肽96在该实验中具有最强的抗肿瘤作用(表XI)。拮抗剂还抑制了所有的处理组中的血清IGF-I水平，肽86和肽96的效果具有统计学上的显著性(表XII)。
实验4用GH-RH拮抗剂进行的处理对裸鼠中的PC-3人前列腺癌异种移植物的影响
*p＜0.05相对于对照；**p＜0.01相对于对照表XII实验4实验4用GH-RH拮抗剂进行的处理对具有PC-3人前列腺癌异种移植物的裸鼠中的IGF-I的血清水平的影响
*p＜0.05相对于对照GH-RH拮抗剂对裸鼠中HT-29人结肠癌异种移植物的影响将HT-29人结肠癌sc移植到雄性裸鼠中。移植19天后，将小鼠分成两组，每组10只动物，并开始处理。在处理组中的小鼠以10μg/天的剂量接受肽67sc.单一每日注射达62天，而将对照组用赋形剂溶剂进行注射。常规测量肿瘤，并计算肿瘤体积。在实验结束时，处死小鼠并测量肿瘤重量。
结果与对照组相比，用肽67处理62天导致裸鼠中生长的HT-29肿瘤中体积的56.3％和重量的53.9％的显著抑制(表XIII)。
表XIII用GH-RH拮抗剂肽67进行的处理对裸鼠中HT-29人结肠癌异种移植物的影响
*p＜0.05相对于对照GH-RH拮抗剂对异种移植到裸鼠中的DMS-153人小细胞肺癌(SCLC)的影响用3mm3的DMS-153人SCLC组织块对雄性裸鼠进行s.c.植入。当肿瘤的体积达到约100mm3时，将小鼠分成3个实验组，每组6-8只动物并接受如下处理达6周组1(对照)，赋形剂溶液；组2，肽67(10μg/天s.c.)；组3，肽31(10μg/天s.c.)。一周两次记录肿瘤体积。处理结束时，用异氟烷将小鼠麻醉，用断头术将其杀死，收集躯干血进行血清IGF-I的测量，切除肿瘤并进行称重。将数据表示为平均值±S.E。通过一种方式ANOVA和Student-Newman-Keuls检验来评价数据。
结果与对照相比，接受GH-RH拮抗剂，肽67或肽31的处理的动物的肿瘤重量明显减少(表XIV)。接受肽67的组的肿瘤体积还明显更小。此外，与在对照动物中的那些相比，两种拮抗剂显著减少IGF-I的血清水平(表XIV)。IGF-II的mRNA的表达被两种拮抗剂同样地抑制，表达的水平是在对照组中是100±1.5％，和在用肽67处理组中是78.0±44.3％以及在接受肽31组中是42.7±18.5％。肽31对IGF-II mRNA表达的抑制影响具有统计学上的显著性(p＜0.01相对于对照)。
表XIV用GH-RH拮抗剂进行的处理对裸鼠中DMS-153人SCLC异种移植物和血清IGF-I水平的影响
*P＜0.05相对于对照GH-RH拮抗剂对异种移植到裸鼠中的H-69人SCLC的影响用3mm3的H-69人SCLC组织块对雄性裸鼠进行s.c.植入。当肿瘤的体积达到约80mm3时，将小鼠分成4个实验组，每组7-8只动物并接受如下处理达4周组1(对照)，赋形剂溶液；组2，肽67(10μg/天s.c.)；组3，肽31(10μg/天s.c.)；组4，肽72(10μg/天s.c.)。一周两次记录肿瘤体积。处理结束时，用异氟烷将小鼠麻醉，以断头术将其杀死，切除肿瘤并进行称重。将数据表示为平均值±S.E。通过一种方式ANOVA和Student-Newman-Keuls检验来评价数据。
结果以10μg/天的剂量单一每日注射给药的所有的GH-RH拮抗剂明显抑制裸鼠中H-69肿瘤的生长。在测试的化合物中，肽72具有最强的抗增生效果(表XV)。
表XV用GH-RH拮抗剂进行的处理对裸鼠中的H-69人SCLC异种移植物的影响
*p＜0.001相对于对照
权利要求
1.一种肽，选自具有下式的组R1-A0-A1-A2-Asp-Ala-A5-A6-Thr-A8-A9-A10-A11-A12-Val-Leu-A15-A16-Leu-Ser-A19-A20-A21-A22-Leu-Gln-Asp-Ile-A27-A28-A29-A30-R2其中R1是由下列组成的组的成员a)PhAc，Hca，Dat，IndAc，Ipa，1-Nac，2-Nac，1-Npr，2-Npr，Ibu；CH3(CH2)nCO，或HOOC(CH2)nCO，其中n是2-20的整数，和b)任何其它2-30个碳原子的直链、支链、饱和、不饱和或聚不饱和脂族羧基基团，以及3-8个碳原子的任何碳环或杂环芳香族羧基基团，在杂环中包含基团S、N和O的至少一个原子，A0是Phe，D-Phe，Arg，D-Arg，或碳-氮单键，A1是Tyr或His，A2是D-Arg或D-Cit，A5是Ile或Val，A6是Phe，Tyr，Nal，或Phe(Y)，其中Y＝F，Cl，Br，或I，A8是Asn，D-Asn，Cit，D-Cit，Gln，D-Gln，Ser，D-Ser，Thr，D-Thr，Ala，D-Ala，Abu，D-Abu，或Aib，A9是His，D-His，Amp，D-Amp，Gup，或D-Gup，A10是Tyr，Tyr(Et)，Tyr(Me)；Phe(Y)，其中Y＝H，F，Cl，Br，或I；Amp，His，Cha，Chg，Bpa，Dip，Trp，Trp(For)，Tpi，1-Nal，2-Nal，3-Pal，4-Pal，Phe(NH2)，或Pbe(NO2)，A11是His，D-His，Arg，D-Arg，Cit，Har，D-Har，Amp，D-Amp，Gup，或D-Gup，A12是Lys，D-Lys，Orn，D-Orn，Har，D-Har，Cit，D-Cit，Nle，或Ala，A15是Gly，Ala，Abu，Aib，Nle，Gln，Cit，或His，A16是Gln或Arg，A19是Ala或Abu，A20是His，D-His，Arg，D-Arg，或Cit，A21是Lys，D-Lys，Orn，D-Orn，Cit，或D-Cit，A22是Leu，Ala或Aib，A27是Met，Leu，Nle，Abu，或D-Arg，A28是Arg，D-Arg，Har，D-Har，Ser，Asn，Asp，Ala，Abu，或Cit，A29是Arg，D-Arg，Har，D-Har，Cit，D-Cit，或Agm，A30是Arg，D-Arg，Har，D-Har，Cit，D-Cit，Agm，或是碳-氮或碳-氧单键，R2是-NH2，-NH-NH2，-NH-OH，-NHR3，-NR3R4，-OH，或-OR3，其中R3和R4是C1-10烷基，C2-10链烯基，C2-10炔烃基，C7-16苯基烷基，-C6H5，或-CH(C6H5)2的任一个；如果A29是Agm，那么A30和R2是不存在的，并且如果A30是Agm，那么R2是不存在的，及其药用盐。
2.权利要求1的化合物，其中A11和A20的一个或两个是除了Arg、D-Arg、或Cit之外的。
3.权利要求1的化合物，其选自由下列组成的组[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽67[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽68[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，His9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽69[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽70[HOOC(CH2)8CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽71[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-28)NH2肽72[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽73[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Amp9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽74[1-Nac-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Amp9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽75[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Amp9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽76[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Amp9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽77[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Amp9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽78[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽79[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽80[HOOC(CH2)8CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽81[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽82[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，His20，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽86[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，His20，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽87[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，His20，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽88[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，His20，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽89[1-Nac-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，HaR29]hGH-RH(1-29)NH2肽91[CH3(CH2)6-CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽92[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Cit15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽93[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，His15，His20，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽94[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽95[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽96[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt肽97[CH3(CH2)8CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽98[CH3(CH2)10CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽99[Hca-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽100[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHMe 肽101[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽102[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽103[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-2g)NH2肽104[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Phe(pNO2)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽105[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽106[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽107[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽108[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(PCl)6，Ala8，His9，Phe(pNO2)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽109[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽110[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽111[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Phe(pNO2)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽112[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽113[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt肽114[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Phe(pNO2)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽115[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Ahg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽116[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Phe(pNO2)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽117[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，HaR29]hGH-RH(1-2g)NHEt肽118[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Phe(pNO2)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽119[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Dip10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽120[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，Amp9，Phe(pNO2)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽121。
4.权利要求3的化合物，其选自由下列组成的组[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽67[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，His8，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽69[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽70[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Amp9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽72[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Amp9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽76[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Amp9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽77[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽79[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽80[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，His20，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽86[CH3(CH2)5CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽95[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Orn12，Abu15，His20，Orn21，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽96[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Ala8，His9，Tyr(Et)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt 肽97 。5.一种化合物，其选自由下列组成的组中[CH3(CH2)4CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽2[HOOC(CH2)4CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽3[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽4[HOOC(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽5[CH3(CH2)8CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽6[HOOC(CH2)8CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽7[CH3(CH2)10CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽8[HOOC(CH2)10CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽9[CH3(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽10[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽11[CH3(CH2)14CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽12[HOOC(CH2)14CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽13[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，Har28，D-Arg29]hGH-RH(1-29)NH2肽14[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，Har28，D-Arg29]hGH-RH(1-29)NH2肽15[CH3(CH2)14CO-Phe0，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nla27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽16[CH3(CH2)14CO-D-Phe0，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nlr27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽17[PhAc-Arg0，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽18[PhAc-D-Arg0，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽19[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽21[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Cit9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽22[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Arg9，Abu15，Nle27，HaR28，D-Arg29]hGH-RH(1-29)NH2肽23[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Cit9，Abu15，Nle27，Har28，D-Arg29]hGH-RH(1-29)NH2肽24[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Cit9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽25[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，D-Ala8，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽26[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Abu8，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽27[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit9，Abu15，Nle27，Har28，D-Arg29]hGH-RH(1-29)NH2肽28[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Amp10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽30[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Amp10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽31[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，His10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽32[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Cha10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽33[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tpi10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽34[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，2-Nal10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽35[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Dip10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽36[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Phe(pNH2)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽37[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Trp10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽38[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(PCl)6，Har9，Phe(pNO2)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽39[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，3-Pal10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]GH-RH(1-29)NH2肽40[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Et)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽41[PhAc-His1，D-Arg2，Tyr6，Har9，Bpa10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽42[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Har12，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽43[Hca-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt肽45[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt肽46[Hca-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt肽47[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt肽48[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Aib15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt肽49[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Orn12，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NHEt肽50[Hca-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Agm29]hGH-RH(1-29)肽51[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Agm29]hGH-RH(1-29)肽52[Hca-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29，Har30]hGH-RH(1-30)NH2肽53[Dat-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29，Har30]hGH-RH(1-30)NH2肽54[Ipa-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29，Har30]hGH-RH(1-30)NH2肽55[Hca-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29，Har30]hGH-RH(1-30)NHEt肽56[Hca-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，D-Arg29，Har30]hGH-RH(1-30)NH2肽57[Hca-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29，D-Arg30]hGH-RH(1-30)NH2肽58[Hca-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29，Agm30]hGH-RH(1-30)肽59[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29，Agm30]hGH-RH(1-30)肽60[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽62[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Har11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽63[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Amp11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽64[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Cit11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽65[PhAc-Tyr2，D-Arg3，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，Abu15，His20，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽84[PhAc-Tyr1，D-Arg3，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，His20，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽85[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Cit15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽90 。
6.权利要求5的肽，其选自由下列组成的组中[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29)hGH-RH(1-29)NH2肽4[HOOC(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽5[HOOC(CH2)8CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽7[HOOC(CH2)12CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽11[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Cit9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽22[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，2-Nal10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽35[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Dip10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽36[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Phe(pNO2)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽39[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Et)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽41[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽62。
7，权利要求5的肽，其选自由下列组成的组中[CH3(CH2)6CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽4[HOOC(CH2)8CO-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽7[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Cit8，Arg9，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽21[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Arg9，Amp10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽30[PhAc-Tyr1，D-Arg2，phe(pCl)6，Har9，Amp10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽31[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Phe(pNH2)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽37[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Et)10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽41[PhAc-His1，D-Arg2，Tyr6，Har9，Bpa10，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽42[PhAc-Tyr1，D-Arg2，Phe(pCl)6，Har9，Tyr(Me)10，His11，Abu15，Nle27，D-Arg28，Har29]hGH-RH(1-29)NH2肽62
8.权利要求1或5的任一项的化合物在制备药物组合物中的应用，所述药物组合物用于在需要抑制GH水平的患者中抑制GH水平。
9.权利要求1或5的任一项的化合物在制备药物组合物中的应用，所述药物组合物抑制患者的肿瘤组织中的IGF-I或IGF-II的水平，所述患者患有携带IGF-I受体的癌症。
10.权利要求1或5的任一项的化合物在制备药物组合物中的应用，所述药物组合物抑制患有癌症的患者的肿瘤组织中的VEGF水平。
11.权利要求1或5的任一项的化合物在制备药物组合物中的应用，所述药物组合物用于在需要抑制IGF-I水平的患者中抑制IGF-I水平。
12.权利要求1或5的任一项的化合物在制备药物组合物中的应用，所述药物组合物抑制患者中的血清IGF-I水平，所述患者患有携带IGF-I的受体的癌症。
13.权利要求1或5的任一项的化合物在制备药物组合物中的应用，所述药物组合物抑制患者中的GH水平，所述患者具有携带IGF-I或GH的受体的癌症。
14.权利要求1或5的任一项的化合物在制备药物组合物中的应用，所述药物组合物阻断患者中的GH-RH受体，所述患者患有携带GH-RH的受体的癌症。
15.在需要抑制GH水平的患者中抑制GH水平的方法，其通过给所述患者施用抑制有效量的权利要求1或5的任一项的化合物来进行。
16.在患有癌症的患者肿瘤组织中抑制IGF-I或IGF-II水平的方法，所述癌症携带IGF-I的受体，所述方法通过给所述患者施用抑制有效量的权利要求1或5的任一项的化合物进行。
17.抑制患有癌症的患者肿瘤组织中的VEGF的水平的方法，其通过给所述患者施用抑制有效量的权利要求1或5的任一项的化合物进行。
18.在需要抑制IGF-I水平的患者中抑制IGF-I水平的方法，其通过给所述患者施用抑制有效量的权利要求1或5的任一项的化合物进行。
19.在患有癌症的患者中抑制血清IGF-I的水平的方法，所述癌症携带IGF-I的受体，所述方法通过给所述患者施用抑制有效量的权利要求1或5的任一项的化合物进行。
20.在患有癌症的患者中抑制GH的水平的方法，所述癌症携带IGF-I或GH的受体，所述方法通过给所述患者施用抑制有效量的权利要求1或5的任一项的化合物进行。
21.治疗患有癌症的患者的方法，所述癌症携带GH-RH的受体，所述方法通过向所述患者施用有效封闭所述GH-RH受体的量的权利要求1或5任一项的化合物进行。
22.一种抑制患者中GH的水平的可通过药理学给药的组合物，其基本由权利要求1或5的化合物和药用载体组成。
23.一种抑制患者肿瘤组织中IGF-I或IGF-II的水平的可通过药理学给药的组合物，其基本由权利要求1，或5的化合物和药用载体组成，所述患者患有携带IGF-I受体的癌症。
24.一种抑制患有癌症的患者肿瘤组织中VEGF的水平的可通过药理学给药的组合物，其基本由权利要求1或5的化合物和药用载体组成。
25.一种抑制患者中IGF-I的水平的可通过药理学给药的组合物，其基本由权利要求1或5的化合物和药用载体组成。
26.一种抑制患者GH的水平的可通过药理学给药的组合物，其基本由权利要求1或5的化合物和药用载体组成，所述患者患有携带IGF-I或GH的受体的癌症。
27.一种抑制患者的IGF-I的水平的可通过药理学给药的组合物，其基本由权利要求1或5的化合物和药用载体组成，所述患者患有携带IGF-I的受体的癌症。
28.一种封闭患者中GH-RH的受体的可通过药理学给药的组合物，其基本由权利要求1或5的化合物和药用载体组成，所述患者患有携带GH-RH受体的癌症。
全文摘要
提供一系列新的hGII－RII(1－29)NH
文档编号C07K14/435GK1871020SQ200480022286
公开日2006年11月29日 申请日期2004年7月26日 优先权日2003年8月5日
发明者A·V·沙利, J·瓦格加, M·扎兰蒂, 蔡仁治 申请人:图兰恩教育基金管理人, 美国退伍军人事务部