用于治疗增殖性疾病的用作raf激酶抑制剂的1,4－二取代的异喹啉衍生物的制作方法

专利名称：用于治疗增殖性疾病的用作raf激酶抑制剂的1,4－二取代的异喹啉衍生物的制作方法
背景技术：
本发明涉及可以抑制B-RAF激酶--一种在MAP激酶信号传导途径中起作用的丝氨酸/苏氨酸激酶的新化合物、该化合物在治疗其特征在于异常的MAP激酶信号传导途径的疾病例如增殖性疾病如某些癌症中的用途。
发明概述细胞利用各种信号传导途径使细胞外环境的各个方面与细胞核之间建立起联系。许多信号都是通过蛋白激酶传导的，这些蛋白激酶通过转移磷酸根基团激活各种因子。通过抑制适当的激酶活性来破坏信号传导可能会产生临床上的益处，这已经通过伊马替尼--一种bcr-abl激酶抑制剂得到证实，伊马替尼在市场上以其甲磺酸盐的形式以商品名GLEEVECTM(在美国)或GLIVEC销售。
许多生长因子通过MAP激酶信号传导途径将来自细胞外环境的增殖信号传递到细胞核。生长因子激活位于细胞表面的跨膜受体，该受体随后引发级联反应，从而激活RAS并使RAF激酶募集到膜中并在此被激活，其随后激活MEK激酶，MEK激酶随后又激活ERK激酶。激活的ERK激酶可移动至核并在核内激活各种基因转录因子。该途径的异常可导致基因转录和细胞生长发生改变，并通过反向调节细胞凋亡以及传递增殖和血管生成信号引起肿瘤生成。已证实RAF激酶的抑制剂可以在细胞培养物中通过MAP激酶信号传导途径来阻断信号传导。
已知RAF激酶家族具有三个成员，即C-RAF(也被称作RAF-1)、B-RAF和A-RAF。据报道，在人类癌症、包括59％所试验的黑素瘤细胞系中，B-RAF激酶一般通过多个体细胞点突变之一而激活。参见Davies等，Nature，Vol.417，pp.949-954(2002)。本文中所述的化合物是RAF激酶、尤其是C-RAF激酶以及野生型和突变型B-RAF激酶、特别是V599E突变型B-RAF激酶的有效抑制剂。
本发明化合物的RAF激酶抑制性能使其可用作用于治疗特征在于异常的MAP激酶信号传导途径的增殖性疾病的治疗剂，尤其是黑素瘤和具有突变的B-RAF，尤其是其中突变的B-RAF是V599E突变体的其它癌症。本发明还提供了用异喹啉化合物治疗其特征在于突变型B-RAF的其它病症例如具有突变的B-RAF的良性Nevi痣的方法。
发明描述本发明涉及式(I)化合物 其中n是0-2；r是0-2m是0-4；J是未取代的或者被Q取代一次或两次，其中J是芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基，其中芳基是含有6-14个碳原子的芳香族基团，诸如苯基、萘基、芴基和菲基；杂芳基是含有4-14个、特别是5-7个环原子、其中1、2或3个环原子彼此独立地选自N、S和O的芳香族基团，诸如呋喃基、吡喃基、吡啶基、1，2-、1，3-和1，4-嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、三唑基、唑基、喹唑啉基、咪唑基、吡咯基、异唑基、异噻唑基、吲哚基、异二氢吲哚基、喹啉基、异喹啉基、嘌呤基、噌啉基、萘啶基、2，3-二氮杂萘基、异苯并呋喃基、色烯基、嘌呤基、噻蒽基、呫吨基、吖啶基、咔唑基和吩嗪基；环烷基是含有3-8个、优选5-6个环原子的饱和环状基团，诸如环丙基、环戊基和环己基；杂环烷基是含有3-8个、优选5-6个环原子、其中1、2或3个环原子彼此独立地选自N、S和O的饱和环状基团，诸如哌啶基、哌嗪基、咪唑烷基、吡咯烷基和吡唑烷基；Q是选自下列的在1或2个碳原子上的取代基卤素、未取代的或取代的低级烷基、-OR2、-SR2、-N(R)R、-NRS(O)2N(R)R、-NRS(O)2R、-S(O)R2、-S(O)2R2、-OCOR2、-C(O)R2、-CO2R2、-NR-COR2、-CON(R2)R2、-S(O)2N(R2)R2、氰基、三甲基硅烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的杂芳基，诸如取代或未取代的咪唑基和取代或未取代的吡啶基、未取代的或取代的环烷基、未取代的或取代的杂环烷基，诸如取代或未取代的哌啶基、取代或未取代的piperazolyl、取代或未取代的四氢吡喃基和取代或未取代的氮杂环丁烷基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-杂芳基、-C1-4烷基-杂环基、氨基、单-或二-取代的氨基、杂芳基-芳基；R是H、低级烷基或低级烷氧基-烷基；R2是未取代的或取代的烷基、未取代的或取代的环烷基、未取代的或取代的苯基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-杂芳基或-C1-4烷基-杂环烷基；X是键、Y、-N(R)-、-O-、-S-、砜、亚砜、磺酰胺、酰胺或1，3-亚脲基，优选-NH-、-NHC(O)-、-NHC(O)NH-；Y是H、低级烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的环烷基或取代或未取代的杂环烷基；并且Z是氨基、单-或二-取代的氨基、卤素、烷基、取代的烷基、羟基、醚化的或酯化的羟基、硝基、氰基、羧基、酯化的羧基、烷酰基、氨基甲酰基、N-单-或N，N-二-取代的氨基甲酰基、脒基、胍基、巯基、磺基、苯硫基、苯基-低级烷硫基、烷基苯硫基、苯基亚磺酰基、苯基-低级烷基亚磺酰基、烷基苯基亚磺酰基、苯基磺酰基、苯基-低级烷基磺酰基或烷基苯基磺酰基，并且其中，如果存在一个以上的基团Z(m≥2)，则取代基Z相同或不同；或者其中一个或多个N原子带有氧原子的上述化合物的N-氧化物；或其可药用盐。
式(I)化合物可以抑制RAF激酶并且具有基于该性质的药物用途。
在本说明书的上下文内，上下文所用的一般术语优选具有以下含义，除非另有说明。
本文所用的术语“低级”表示含有最多7个(包括7个)、特别是含有最多4个(包括4个)碳原子的基团，所述的基团是直链的或者分支一次或多次。
复数形式的化合物、盐等也包括一种化合物、一种盐等。
存在于例如其中n＝1且R是低级烷基的式(I)化合物(或其N-氧化物)中的不对称碳原子可具有(R)、(S)或(R，S)构型，优选(R)或(S)构型。在双键或环上的取代基可以是顺式(＝Z)或反式(＝E)形式。因此本发明的化合物可以是异构体混合物的形式或者是纯异构体的形式，优选是对映体纯的非对映异构体的形式。
下标r优选是0或1。它还可以是2。
下标n优选是0或1，特别是0。它还可以是2。
下标m优选是0、1或2，特别是0，或者还可以是1。
优选J是含有至少一个、但不超过3个N的杂芳基。
低级烷基尤其是C1-4烷基，例如正丁基、仲丁基、叔丁基、正丙基、异丙基，或者尤其是甲基或乙基，或者在Y是低级烷基的情况下，它尤其是异戊基。低级烷基是未取代的或者被羟基或卤素例如Br、Cl或F、优选F所取代。
芳基优选是含有6-14个碳原子的芳香族基团，特别是苯基、萘基、芴基或菲基，上述基团是未取代的或者被一个或多个取代基、优选最多三个、尤其是一个或两个取代基、特别是选自下列的取代基所取代氨基、单-或二-取代的氨基、卤素、烷基、取代的烷基、羟基、醚化的或酯化的羟基、硝基、氰基、羧基、酯化的羧基、烷酰基、氨基甲酰基、N-单-或N，N-二-取代的氨基甲酰基、脒基、胍、巯基、磺基、苯硫基、苯基-低级烷硫基、烷基苯硫基、苯基亚磺酰基、苯基-低级烷基亚磺酰基、烷基苯基亚磺酰基、苯基磺酰基、苯基-低级烷基磺酰基、烷基苯基磺酰基、低级链烯基诸如乙烯基和苯基、低级烷硫基诸如甲硫基、低级烷酰基诸如乙酰基、低级烷基巯基诸如甲基巯基(-S-CH3)、卤代-低级烷基巯基诸如三氟甲基巯基(-S-CF3)、低级烷基磺酰基、卤代-低级烷基磺酰基诸如特别是三氟甲磺酰基、二羟基硼(-B(OH)2)和杂环基，和连接到环的相邻碳原子上的低级亚烷基二氧基诸如亚甲基二氧基；芳基优选是未取代的或者被一个或两个相同或不同的选自下列的取代基所取代的苯基氨基；低级烷酰基氨基，尤其是乙酰基氨基；卤素，尤其是氟、氯或溴；低级烷基，尤其是甲基或乙基或丙基；卤代-低级烷基，尤其是三氟甲基；羟基；低级烷氧基，尤其是甲氧基或乙氧基；苯基-低级烷氧基，尤其是苄氧基；和氰基，或(与前述取代基二者择一地或额外地)C8-12烷氧基，尤其是正癸氧基；氨基甲酰基；低级烷基氨基甲酰基，诸如N-甲基-或N-叔丁基-氨基甲酰基；低级烷酰基，诸如乙酰基或苯基氧基；卤代-低级烷氧基，诸如三氟甲氧基或1，1，2，2-四氟乙氧基；低级烷氧基羰基，诸如乙氧基羰基；低级烷基巯基诸如甲基巯基；卤代-低级烷基巯基诸如三氟甲基巯基；羟基-低级烷基诸如羟基甲基或1-羟基甲基；低级烷基磺酰基诸如甲磺酰基；卤代-低级烷基磺酰基诸如三氟甲磺酰基、苯基磺酰基、二羟基硼(-B(OH)2)、2-甲基-嘧啶-4-基、唑-5-基、2-甲基-1，3-二氧戊环-2-基、1H-吡唑-3-基或1-甲基-吡唑-3-基；和连接到两个相邻碳原子上的低级亚烷基二氧基诸如亚甲基二氧基，特别是被一个或两个相同或不同的选自下列的取代基所取代低级烷基，尤其是甲基；卤素，尤其是氯或溴；和卤代-低级烷基，尤其是三氟甲基。芳基还优选是萘基。
杂芳基优选是连接环中的不饱和杂环基团，优选单-或二-或三环；其中至少在与式(I)分子的基团相连接的环中有一个或多个、优选1-4个、尤其是1或2个相应芳基的碳原子被选自氮、氧和硫的杂原子所代替，连接环优选含有4-14个、尤其是5-7个环原子；其中杂芳基是未取代的或者被一个或多个、尤其是1-3个相同或不同的选自以上关于芳基所述的取代基所取代；尤其优选选自下列的杂芳基咪唑基、噻吩基、呋喃基、吡喃基、噻蒽基、异苯并呋喃基、苯并呋喃基、色烯基、2H-吡咯基、吡咯基、低级烷基取代的咪唑基、苯并咪唑基、吡唑基、噻唑基、异噻唑基、唑基、异唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、吲嗪基、异吲哚基、3H-吲哚基、吲哚基、吲唑基、三唑基、四唑基、嘌呤基、4H-喹嗪基、异喹啉基、喹啉基、2，3-二氮杂萘基、萘啶基、喹喔啉基、喹唑啉基、噌啉基、蝶啶基、咔唑基、菲啶基、吖啶基、perimidinyl、菲咯啉基和呋咱基，所有这些基团通过含有至少一个杂原子的环连接到式(I-)分子的基团上；吡啶基是特别优选的。还特别优选被卤素、尤其是被氟取代的吲哚基，尤其是6-氟吲哚-3-基。
杂芳基尤其是含有1或2个选自氮、氧和硫的杂原子的5-或6-元的芳香族杂环，所述的杂环是未取代的或者尤其被低级烷基诸如甲基所取代；此外还优选选自2-甲基-嘧啶-4-基、1H-吡唑-3-基和1-甲基-吡唑-3-基的基团。
杂环烷基尤其是含有1或2个选自氮、氧和硫的杂原子的饱和的5-或6-元杂环，所述的杂环是未取代的或者尤其被低级烷基诸如甲基所取代；优选选自唑-5-基和2-甲基-1，3-二氧戊环-2-基的基团。
单-或二-取代的氨基尤其是被一个或两个相同或不同的选自下列的基团所取代的氨基低级烷基诸如甲基；羟基-低级烷基诸如2-羟基乙基；苯基-低级烷基；低级烷酰基诸如乙酰基；苯甲酰基；取代的苯甲酰基，其中苯基是未取代的或者尤其被一个或多个、优选一个或两个选自硝基和氨基或者选自下列的取代基所取代卤素、氨基、N-低级烷基氨基、N，N-二-低级烷基氨基、羟基、氰基、羧基、低级烷氧基羰基、低级烷酰基和氨基甲酰基；和苯基-低级烷氧基羰基，其中苯基是未取代的或者尤其被一个或多个、优选一个或两个选自硝基和氨基或者选自下列的取代基所取代卤素、氨基、N-低级烷基氨基、N，N-二-低级烷基氨基、羟基、氰基、羧基、低级烷氧基羰基、低级烷酰基和氨基甲酰基；并且优选是N-低级烷基氨基，诸如N-甲基氨基或羟基-低级烷基氨基，诸如2-羟基乙基氨基；苯基-低级烷基氨基，诸如苄基氨基；N，N-二-低级烷基氨基、N-苯基-低级烷基-N-低级烷基氨基或N，N-二-低级烷基苯基氨基；低级烷酰基氨基，诸如乙酰基氨基；或者是选自苯甲酰基氨基和苯基-低级烷氧基羰基氨基的取代基，其中在所有情况下苯基是未取代的或者尤其被硝基或氨基或者被卤素、氨基、N-低级烷基氨基、N，N-二-低级烷基氨基、羟基、氰基、羧基、低级烷氧基羰基、低级烷酰基或者被氨基甲酰基所取代，或者与前述基团二者择一地或额外地被氨基羰基氨基所取代。
卤素尤其是氟、氯、溴或碘，特别是氟、氯或溴，特别是氟和氯。
烷基优选具有最多12个碳原子，尤其是低级烷基，特别是甲基或乙基、正丙基、异丙基或叔丁基。
取代的烷基是上一段中所定义的烷基，尤其是低级烷基，优选甲基，其可含有一个或多个、尤其是最多3个选自下列的取代基卤素，尤其是氟；以及氨基、N-低级烷基氨基、N，N-二-低级烷基氨基、N-低级烷酰基氨基、羟基、烷氧基、氰基、羧基、低级烷氧基羰基和苯基-低级烷氧基羰基。三氟甲基是重要的取代的烷基。
醚化的羟基尤其是C8-20烷氧基，诸如正癸氧基；低级烷氧基(优选的)，诸如甲氧基、乙氧基、异丙氧基或正戊基氧基；苯基-低级烷氧基，诸如苄氧基或苯基氧基；或者与前述基团二者择一地或额外地，C8-20烷氧基，诸如正癸氧基；卤代-低级烷氧基，诸如三氟甲氧基或1，1，2，2-四氟乙氧基。
酯化的羟基尤其是低级烷酰基氧基、苯甲酰基氧基、低级烷氧基羰基氧基，诸如叔丁氧基羰基氧基，或苯基-低级烷氧基羰基氧基，诸如苄氧基羰基氧基。
酯化的羧基尤其是低级烷氧基羰基，诸如叔丁氧基羰基或乙氧基羰基、苯基-低级烷氧基羰基或苯基氧基羰基。
烷酰基尤其是烷基-羰基，特别是低级烷酰基，例如乙酰基。
N-单-或N，N-二-取代的氨基甲酰基尤其在末端氮上被一个或两个取代基低级烷基、苯基-低级烷基或羟基-低级烷基所取代。
烷基苯硫基尤其是低级烷基苯硫基。
烷基苯基亚磺酰基尤其是低级烷基苯基亚磺酰基。
烷基苯基磺酰基尤其是低级烷基苯基磺酰基。
吡啶基Y优选是3-或4-吡啶基。
未取代的或取代的环烷基优选是C3-8环烷基，它是未取代的或者按照与芳基相同的方式、尤其是按照关于苯基的定义进行取代。优选环己基或环戊基或环丙基。还优选4-低级烷基-环己基，诸如4-叔丁基环己基。
如果存在的话，Z优选是氨基；羟基-低级烷基氨基，诸如2-羟基乙基氨基；低级烷酰基氨基，诸如乙酰基氨基；硝基苯甲酰基氨基，诸如3-硝基苯甲酰基氨基；氨基苯甲酰基氨基，诸如4-氨基苯甲酰基氨基；苯基-低级烷氧基羰基氨基，诸如苄氧基羰基氨基；或卤素，诸如溴；优选只存在一个取代基(m＝1)，尤其是刚刚提到的取代基之一，尤其是卤素。非常优选其中Z不存在(m＝0)的式(I)化合物或其N-氧化物。
被连接到两个相邻碳原子上的低级亚烷基二氧基诸如亚甲基二氧基所取代的苯基形式的芳基优选是3，4-亚甲基二氧基苯基。
式(I)化合物的N-氧化物优选是其中的异喹啉环氮或J部分的氮带有氧原子或有一个以上的上述氮原子带有氧原子的N-氧化物。
盐尤其是式(I)化合物或其N-氧化物的可药用盐。
所述的盐为例如具有碱性氮原子的式(I)化合物或其N-氧化物与有机或无机酸形成的酸加成盐，尤其是可药用盐。适当的无机酸是例如氢卤酸诸如盐酸(HCl)；硫酸或磷酸。适当的有机酸是例如羧酸、膦酸、磺酸或氨基磺酸，例如乙酸；丙酸；辛酸；癸酸；月桂酸；乙醇酸；乳酸；2-羟基丁酸；葡糖酸；葡萄糖一元羧酸；富马酸；琥珀酸；己二酸；庚二酸；辛二酸；壬二酸；苹果酸；酒石酸；柠檬酸；葡糖二酸；半乳糖二酸；氨基酸，诸如谷氨酸、天冬氨酸、N-甲基甘氨酸、乙酰基氨基乙酸、N-乙酰基天冬酰胺、N-乙酰基半胱氨酸、丙酮酸、乙酰乙酸、磷酸丝氨酸、2-或3-甘油磷酸、马来酸、羟基马来酸、甲基马来酸、环己烷甲酸、苯甲酸、水扬酸、1-或3-羟基萘基-2-甲酸、3，4，5-三甲氧基苯甲酸、2-苯氧基苯甲酸、2-乙酰氧基苯甲酸、4-氨基水杨酸、邻苯二甲酸、苯基乙酸、葡糖醛酸、半乳糖醛酸、甲-或乙-磺酸、2-羟基乙磺酸、乙烷-1，2-二磺酸、苯磺酸、2-萘磺酸、1，5-萘二磺酸、N-环己基氨基磺酸或N-甲基-、N-乙基-或N-丙基-氨基磺酸或其它有机质子酸诸如抗坏血酸。
当带有负电荷的基团诸如羧基或磺基存在时，还可以与碱形成盐，例如金属或铵盐诸如碱金属、碱土金属盐例如钠、钾、镁或钙盐；与氨或适当的有机胺诸如一元叔胺例如三乙基胺或三(2-羟基乙基)胺或杂环碱例如N-乙基哌啶或N，N′-二甲基-哌嗪形成的盐。
当碱性基团和酸性基团存在于相同分子中时，式(I)化合物或其N-氧化物还可以形成内盐。
对于分离或纯化，还可以使用不可药用盐例如苦味酸盐或高氯酸盐。仅有可药用盐或游离化合物、任选地以药物组合物的形式可以在治疗上使用，因此它们是优选的。
鉴于游离形式与其盐、包括例如那些可在新化合物的纯化过程中用作中间体的盐或者用于对它们进行鉴定的盐形式的新化合物之间的密切关系，所以，如果适当的话，上下文中所指的游离化合物也应该理解成包括相应的盐。
在本发明的一种重要实施方案中，J是如上所定义的芳基，优选杂芳基。因此，本发明的一种重要实施方案涉及式(Ia)的异喹啉化合物 其中可变取代基和参数选择与以上关于式(I)化合物所描述的相同。
优选环成员A、B、D和E均为CH或CQ，并且环成员T是N。
Q与碳连接，优选与A或者与D(r＝1)或者与两者(r＝2)连接，从而当连接有Q时A和/或D是C(-Q)。
本发明的一种令人感兴趣的实施方案是式(Ia)化合物，其中环成员A、B、E和T均为CH或CQ且D是N，或者其中环成员A、B、D和T均为CH或CQ且E是N，或者尤其是其中环成员B、D、E和T均为CH或CQ且A是N。
本发明的另一种尤其令人感兴趣的实施方案是式(Ia)化合物，其中环成员A、B和D均为CH或CQ，并且E和T均为N，或者其中环成员B、E和T均为CH或CQ且A和D均为N，或者其中环成员A、D和T均为CH或CQ且B和E均为N。
本发明的另一种尤其令人感兴趣的实施方案是式(Ia)化合物，其中环成员A和D均为CH或CQ且B、T和E均为N。
本发明的另一种尤其令人感兴趣的实施方案是下列化合物其中J是二环杂芳族环系，诸如吲哚基、异二氢吲哚基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、嘌呤基、噌啉基、萘啶基、2，3-二氮杂萘基、异苯并呋喃基、萘啶基、2，3-二氮杂萘基、色烯基和嘌呤基。二环杂芳族环系可包含Q作为取代基，其可存在于二环环系的任一个或两个环上并且在二环环系的任一个或两个环的一个或两个碳原子上。
本发明化合物可抑制RAF激酶，因此可用于治疗其特征在于异常的MAP激酶信号传导途径的病症和疾病。因此，本发明还涉及治疗其特征在于异常的MAP激酶信号传导途径的病症或疾病的方法，该方法包括向患者施用抑制RAF激酶有效量的式(I)化合物 其中n是0-2；
r是0-2；m是0-4；J是未取代的或者被Q取代一次或两次，其中J是芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基，其中芳基是含有6-14个碳原子的芳香族基团，诸如苯基、萘基、芴基和菲基；杂芳基是含有4-14个、尤其是5-7个环原子、其中1、2或3个环原子彼此独立地选自N、S和O的芳香族基团，诸如呋喃基、吡喃基、吡啶基、1，2-、1，3-和1，4-嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、三唑基、唑基、喹唑啉基、咪唑基、吡咯基、异唑基、异噻唑基、吲哚基、异二氢吲哚基、喹啉基、异喹啉基、嘌呤基、噌啉基、萘啶基、2，3-二氮杂萘基、异苯并呋喃基、色烯基、嘌呤基、噻蒽基、呫吨基、吖啶基、咔唑基和吩嗪基；环烷基是含有3-8个、优选5-6个环原子的环状基团，诸如环己基和环戊基；杂环烷基是含有3-8个、优选5-6个环原子、其中1、2或3个环原子彼此独立地选自N、S和O的环状基团，诸如哌啶基、哌嗪基、咪唑烷基、吡咯烷基和吡唑烷基；Q是选自下列的在1或2个碳原子上的取代基卤素、未取代的或取代的低级烷基、-OR2、-SR2、-N(R)R、-NRS(O)2N(R)R、-NRS(O)2R、-S(O)R2、-S(O)2R2、-OCOR2、-C(O)R2、-CO2R2、-NR-COR2、-CON(R2)R2、-S(O)2N(R2)R2、氰基、三甲基硅烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的杂芳基、未取代的或取代的环烷基、未取代的或取代的杂环烷基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-杂芳基、-C1-4烷基-杂环烷基、-C1-4烷基-环烷基氨基、单-或二-取代的氨基；R是H或低级烷基、低级烷氧基；R2是未取代的或取代的烷基、未取代的或取代的环烷基、未取代的或取代的苯基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-杂芳基或-C1-4烷基-杂环烷基；
X是Y、-N(R)-、-O-、-S-；砜、亚砜、磺酰胺、酰胺或1，3-亚脲基，优选-NH-；并且Y是H、低级烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基或取代或未取代的环烷基；Z是氨基、单-或二-取代的氨基、卤素、烷基、取代的烷基、羟基、醚化的或酯化的羟基、硝基、氰基、羧基、酯化的羧基、烷酰基、氨基甲酰基、N-单-或N，N-二-取代的氨基甲酰基、脒基、胍基、巯基、磺基、苯硫基、苯基-低级烷硫基、烷基苯硫基、苯基亚磺酰基、苯基-低级烷基亚磺酰基、烷基苯基亚磺酰基、苯基磺酰基、苯基-低级烷基磺酰基或烷基苯基磺酰基，并且其中，如果存在一个以上的基团Z(m≥2)，则取代基Z相同或不同；或者其中一个或多个N原子带有氧原子的上述化合物的N-氧化物；或其可药用盐。
患者是患有其特征在于异常的MAP激酶信号传导途径的疾病的哺乳动物、通常是人，其中，异常是指通过MAP激酶途径的信号传导相对于正常细胞而言是过度的。这可通过将特定的抗体活化成信号传导途径的成员，用例如蛋白质印迹分析法或免疫组织化学法测定。
一般地，其特征在于异常的MAP激酶信号传导途径的疾病是增殖性疾病，尤其是表达突变型B-RAF激酶或过度表达野生型B-或C-RAF激酶的癌症。其中可发现突变的B-RAF的癌症包括黑素瘤、结肠直肠癌、卵巢癌、前列腺癌、肾癌、神经胶质瘤、腺癌、肉瘤、乳腺癌和肝癌，优选黑素瘤、结肠直肠癌、卵巢癌、神经胶质瘤、腺癌、肉瘤、乳腺癌和肝癌。B-RAF激酶的突变在黑素瘤中尤其普遍。
按照本发明，从患者获取疾病组织的样本，例如作为活组织检查或切除的结果，然后进行试验以确定是否该组织产生了突变型B-RAF激酶或过度产生了野生型B-或C-RAF激酶。如果试验表明在疾病组织中产生了突变型B-RAF或者过度产生了野生型B-或C-RAF激酶，则通过施用抑制RAF有效量的本文所述的异喹啉化合物对患者进行治疗。然而，如果级联反应中的另一种激酶是传导途径异常的原因的话，也可以用RAF激酶抑制化合物下调MAP激酶信号传导途径。
将组织样本通过本领域通常已知的方法进行试验。例如，B-RAF突变通过等位基因特异性PCR、DHPLC、质谱进行检测，野生型B-或C-RAF的过度表达通过免疫组织化学、免疫荧光法或蛋白质印迹分析法进行检测。检测B-RAF突变的特别有用的方法是实施例A中所述的基于聚合酶链反应的方法。可用类似的方法确定是否级联反应中的其它激酶也发生了突变或过度表达。
本发明的尤其重要的方面涉及治疗黑素瘤的方法，该方法包括(a)对患者的黑素瘤组织进行检测以确定黑素瘤组织是否表达突变型B-RAF；和(b)如果发现黑素瘤组织表达突变型B-RAF，则用抑制RAF激酶有效量的本文所述的异喹啉化合物对患者进行治疗。
一般地，B-RAF突变是记载于以上所引用的Davies等人的文章中的所述的突变之一并且列于表1中。
表1.
因此，本发明尤其涉及治疗其特征在于突变型B-RAF激酶的疾病的方法，该方法包括检测患者的组织样本中的B-RAF激酶基因或蛋白质的突变，然后用有效的B-RAF激酶抑制化合物、尤其是本文所述的异喹啉化合物对患者进行治疗。
本发明的一个重要方面包括其中的突变型B-RAF激酶表现出表1所述的突变、尤其是V599E突变的那些情况。
本发明的一个尤其重要的方面包括其中的疾病是黑素瘤并且突变型B-RAF激酶表现出表1所述的突变、尤其是V599E突变的那些情况。
本发明方法所用的RAF激酶抑制化合物包括具有有价值的药理学性质的上述式(I)化合物或其N-氧化物。
另一方面，本发明提供了式I化合物作为药物的用途。
在本发明的另一方面，本发明提供了式I化合物在制备用于治疗其特征在于异常的MAP激酶信号传导途径的疾病的药物中的用途，所述的疾病是增殖性疾病，尤其是表达突变型B-RAF激酶或过度表达野生型B-或C-RAF激酶的癌症。
式(I)化合物或其N-氧化物可单独给药或者与一种或多种其它治疗剂一起组合给药，可以使用固定的组合，或者将本发明的化合物与待给药的一种或多种其它治疗剂以时间上交错的方式给药或者彼此独立地给药，或者可以将固定的组合和一种或多种其它治疗剂组合给药。具体地讲，用式(I)化合物或其N-氧化物治疗肿瘤可以与化学疗法(与一种或多种其它化学治疗剂、尤其是细胞抑制剂相组合，或者与激素或具有激素样活性的化合物相组合)、放射疗法、免疫疗法、手术治疗或其组合同时或额外地进行。还可以进行长期治疗，作为辅助治疗与诸如刚才提到的其它治疗方法结合进行。也可用于在切除肿瘤或化学预防性治疗(例如在有风险的患者中)之后维持患者的状况。
可与本发明的化合物联合使用的治疗剂尤其是一种或多种抗增殖的、抑制细胞或细胞毒性的化合物，例如一种或多种选自下列的化学治疗剂多胺生物合成的抑制剂；不同蛋白激酶、尤其是蛋白激酶C或酪氨酸蛋白激酶诸如表皮生长因子受体蛋白酪氨酸激酶的抑制剂；生长因子诸如血管内皮生长因子的抑制剂；细胞因子；负生长调节剂诸如TGF-β或IFN-β、芳香酶抑制剂；激素或激素类似物；和常规细胞抑制剂。
本发明的化合物不仅可用于人类的(预防性的，优选治疗性的)治疗，而且可用于其它温血动物例如商用动物例如啮齿类动物诸如小鼠、兔子或大鼠；或豚鼠。
本发明还涉及式(I)化合物或其N-氧化物在抑制RAF激酶活性中的用途。
式(I)化合物或其N-氧化物还可用于诊断的目的，例如，首先从作为原始“宿主”的温血动物、尤其是人获取肿瘤并将其移植到小鼠中，在加入化合物后测定生长的减弱情况以研究这些肿瘤对所述化合物的敏感性，从而使得在原始宿主中治疗肿瘤疾病的方法可以得到更好的确定。
在以下所述的优选的式(I)化合物组中，可方便地使用源自上述一般定义中的取代基的定义，例如，将一般的定义用更具体的定义或者尤其是被指定为优选的定义所代替；在所有情况中，均优选以上指定为优选的定义或作为例子所提到定义。
优选式(Ia)化合物或其N-氧化物或可药用盐 其中n是0-2；r是0-2；m是0-4；A、B、D、E和T均为CH或CQ或者A、B、D和E均为CH或CQ且T是N或者B、D、E和T均为CH或CQ且A是N或者A、B、T和E均为CH或CQ且D是N或者A、B、D和T均为CH或CQ且E是N或者A、B和D均为CH或CQ且E和T为N或者B、E和T均为CH或CQ且A和D均为N或者A、D和T均为CH或CQ且B和E均为N或者A和D均为CH或CQ且B、E和T均为N；Q是选自下列的在1或2个碳原子上的取代基卤素、未取代的或取代的低级烷基、-OR2、-SR2、-NR2、-NRS(O)2N(R)2、-NRS(O)2R、-S(O)R2、-S(O)2R2、-OCOR2、-C(O)R2、-CO2R2、-NR-COR2、-CON(R2)2、-S(O)2N(R2)2、氰基、三甲基硅烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的杂芳基、未取代的或取代的环烷基、未取代的或取代的杂环烷基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-杂芳基、-C1-4烷基-杂环基、氨基、单-或二-取代的氨基；R是H或低级烷基；R2是未取代的或取代的烷基、未取代的或取代的环烷基、苯基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-杂芳基或-C1-4烷基-杂环烷基；X是Y、-N(R)-、-O-、-S-、砜、亚砜、磺酰胺、酰胺或1，3-亚脲基；Y是H、低级烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的环烷基或取代或未取代的杂环烷基；并且Z是氨基、单-或二-取代的氨基、卤素、烷基、取代的烷基、羟基、醚化的或酯化的羟基、硝基、氰基、羧基、酯化的羧基、烷酰基、氨基甲酰基、N-单-或N，N-二-取代的氨基甲酰基、脒基、胍基、巯基、磺基、苯硫基、苯基-低级烷硫基、烷基苯硫基、苯基亚磺酰基、苯基-低级烷基亚磺酰基、烷基苯基亚磺酰基、苯基磺酰基、苯基-低级烷基磺酰基或烷基苯基磺酰基，并且其中，如果存在一个以上的基团Z(m≥2)，则取代基Z相同或不同。
还优选如下式(Ia)化合物或其N-氧化物或可药用盐其中r是0-2；n是0或1；m是0或1；A、B、D和E均为CH或CQ且T是N或者A、B、T和E均为CH或CQ且D是N或者A、B和D均为CH或CQ且E和T均为N；
Q是选自下列的在1或2个碳原子上的取代基卤素、未取代的或取代的低级烷基、-OR2、-SR2、-NR2、-NRS(O)2N(R)2、-NRS(O)2R、-S(O)R2、-S(O)2R2、-OCOR2、-C(O)R2、-CO2R2、-NR-COR2、-CON(R2)2、-S(O)2N(R2)2、氰基、三甲基硅烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的杂芳基、未取代的或取代的环烷基、未取代的或取代的杂环烷基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-杂芳基、-C1-4烷基-杂环基、氨基、单-或二-取代的氨基；R是H或低级烷基；R2是未取代的或取代的烷基、未取代的或取代的环烷基、苯基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-杂芳基或-C1-4烷基-杂环烷基；X是-NR-、-O-或-S-；Y是未取代的或者被选自下列的一个或两个相同或不同的取代基所取代的苯基氨基；低级烷酰基氨基、卤素、低级烷基、卤代-低级烷基、羟基；低级烷氧基、苯基-低级烷氧基和氰基，或者与前述取代基二者择一地或额外地，低级链烯基、C8-12烷氧基、低级烷氧基羰基、氨基甲酰基、低级烷基氨基甲酰基、低级烷酰基、卤代-低级烷氧基、低级烷氧基羰基、低级烷基巯基、卤代-低级烷基巯基、羟基-低级烷基、低级烷基磺酰基、卤代-低级烷基磺酰基、苯基磺酰基、二羟基硼(-B(OH)2)和低级亚烷基二氧基，或者Y是吡啶基；并且Z是卤素；氨基；N-低级烷基氨基；羟基-低级烷基氨基；苯基-低级烷基氨基；N，N-二-低级烷基氨基；N-苯基-低级烷基-N-低级烷基氨基；N，N-二-低级烷基苯基氨基；低级烷酰基氨基，诸如乙酰基氨基；或选自苯甲酰基氨基和苯基-低级烷氧基羰基氨基的取代基，其中在所有情况下的苯基均是未取代的或者被硝基或者氨基取代，或者还被卤素、氨基、N-低级烷基氨基、N，N-二-低级烷基氨基、羟基、氰基、羧基、低级烷氧基羰基、低级烷酰基或者被氨基甲酰基所取代。
还特别优选如下式(Ia)化合物或其N-氧化物或可药用盐其中r是0-2，优选1；n是0或1；m是1或者特别是0；A、B、D和E均为CH或CQ且T是N或者A、B、T和E均为CH或CQ且D是N或者A、B和D均为CH或CQ且E和T均为N；Q优选与A、与D或者与A和D连接，并且选自卤素、尤其是氟、氯或溴；低级烷基、尤其是甲基或乙基或丙基；羟基；低级烷氧基、尤其是甲氧基或乙氧基；2-羟基乙氧基；2-甲氧基乙氧基；(2-(1H-咪唑-1-基)乙氧基或羟基亚氨基甲基；低级烷酰基，诸如乙酰基或甲酰基；低级烷基巯基，诸如甲基巯基或氨基；N-低级烷基氨基，诸如N-甲基氨基或N-乙基氨基、N-正丙基-或N-异丙基氨基；2-氰基乙基氨基；3-(甲氧基苯基)氨基；3-(4-吗啉基)丙基氨基；3-(吡啶基)甲基氨基；2-(2-吡啶基)乙基氨基；4-(1H-咪唑-1-基)丁基氨基；4-(三氟甲氧基苯基)氨基)；(甲基氨基磺酰基)氨基；(甲基磺酰基)氨基；(四氢-2H-吡喃-4-基)氨基；(四氢-2H-吡喃-4-基)甲基氨基；(四氢-3-呋喃基)氨基；(2-(1H-咪唑-1-基)乙基)氨基或羟基-低级烷基氨基，诸如2-羟基乙基氨基或(2-甲氧基乙基)甲基氨基；2-(2-羟基乙氧基)乙基氨基；螺烷，包括1，4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基；取代或未取代的杂环基，诸如1-氮杂环丁烷基、3-乙氧基羰基-1-氮杂环丁烷基或3-羧基-1-氮杂环丁烷基；或者四氢-2H-1，3-嗪基；二氢-1，2，5-噻嗪-5(6H)-基；四氢-1(2H)-嘧啶基)；3-(乙酰基四氢)-1(2H)-嘧啶基；哌嗪基；4-(2-羟基乙基)-1-哌嗪基；4-(乙氧基羰基)-1-哌嗪基；4-乙酰基-1-哌嗪基；或者尤其是哌啶基、4-(三氟甲基)-1-哌啶基、4-(二氟甲基)-1-哌啶基、4-(苯基甲基)-1-哌啶基、4-苯氧基-1-哌啶基、4-氰基-1-哌啶基、4-甲氧基-1-哌啶基、4-乙氧基羰基-1-哌啶基、4-羟基-1-哌啶基、4-羧基-1-哌啶基、4-(氨基羰基)-1-哌啶基、4-甲硫基-1-哌啶基、4-甲基磺酰基-1-哌啶基、(四氢-2H-吡喃-4-基)氧基或者尤其是4-吗啉基、3，5-二甲基吗啉基或2-苯基-4-吗啉基；R是H或低级烷基，尤其是H或甲基；X是-NR-、-O-或-S-，尤其是-NH-；Y是未取代的或者被选自下列的一个或两个相同或不同的取代基所取代的苯基氨基；低级烷酰基氨基、尤其是乙酰基氨基；卤素、尤其是氟、氯或溴；低级烷基、尤其是叔丁基或甲基、乙基或丙基；卤代-低级烷基、尤其是三氟甲基；羟基；低级烷氧基、尤其是甲氧基或乙氧基；苯基-低级烷氧基、尤其是苄氧基；和氰基或者(与前述取代基二者择一地或额外地)低级链烯基，诸如乙烯基、C8-12烷氧基、尤其是N-癸氧基；低级烷氧基羰基，诸如叔丁氧基羰基；氨基甲酰基；低级烷基氨基甲酰基，诸如N-甲基-或N-叔丁基-氨基甲酰基；低级烷酰基，诸如乙酰基；苯基氧基；卤代-低级烷氧基，诸如三氟甲氧基或1，1，2，2-四氟乙基氧基；低级烷氧基羰基，诸如乙氧基羰基；低级烷基巯基，诸如甲基巯基；卤代-低级烷基巯基，诸如三氟甲基巯基；羟基-低级烷基，诸如羟基甲基或1-羟基甲基；低级烷基磺酰基，诸如甲磺酰基；卤代-低级烷基磺酰基，诸如三氟甲磺酰基；苯基磺酰基；二羟基硼(-B(OH)2)；2-甲基-嘧啶-4-基；唑-5-基；2-甲基-1，3-二氧戊环-2-基；1H-吡唑-3-基；1-甲基-吡唑-3-基；和连接到两个相邻碳原子上的低级亚烷基二氧基，诸如亚甲基二氧基，尤其是被一个或两个选自下列的取代基所取代卤素、诸如氯或溴；低级烷基，诸如甲基；和卤代-低级烷基，诸如三氟甲基或Y是吡啶基，尤其是3-吡啶基或Y尤其是苯基；2-、3-或4-氨基苯基；2-、3-或4-乙酰基氨基苯基；2-、3-或4-氟苯基；2-、3-或4-氯苯基；2-、3-或4-溴苯基；2，3-、2，4-、2，5-或3，4-二氯苯基；氯-氟-苯基，诸如3-氯-4-氟-苯基；或4-氯-2-氟苯氨基；2-、3-或4-甲基苯基；2-、3-或4-乙基苯基；2-、3-或4-丙基苯基；甲基-氟-苯基，诸如3-氟-4-甲基苯基；2-、3-或4-三氟甲基苯基；2-、3-或4-羟基苯基；2-、3-或4-甲氧基苯基；2-、3-或4-乙氧基苯基；甲氧基-氯-苯基，诸如3-氯-4-甲氧基羰基；2-、3-或4-苄氧基苯基；2-、3-或4-氰基苯基；或2-、3-或4-吡啶基或者Y特别是4-氯苯基；2-、3-或4-甲基苯基；4-氯-5-三氟甲基苯基；3-溴-5-三氟甲基苯基或者Y尤其是3，5-二甲基苯基；或者尤其是4-甲基-3-碘苯基、3，4-二(三氟甲基)苯基、3-溴-4-乙基-苯基或3-氯苄基苯基；Z是氨基；N-低级烷基氨基，诸如N-甲基氨基；羟基-低级烷基氨基，诸如2-羟基乙基氨基；苯基-低级烷基氨基，诸如苄基氨基；N，N-二-低级烷基氨基；N-苯基-低级烷基-N-低级烷基氨基；N，N-二-低级烷基苯基氨基；低级烷酰基氨基，诸如乙酰基氨基；或选自苯甲酰基氨基和苯基-低级烷氧基羰基氨基的取代基，其中在所有情况下的苯基均是未取代的或者尤其被硝基或者被氨基取代，或者还被卤素、氨基、N-低级烷基氨基、N，N-二-低级烷基氨基、羟基、氰基、羧基、低级烷氧基羰基、低级烷酰基或者被氨基甲酰基所取代，或者Z是卤素，尤其是溴；特别是氨基、乙酰基氨基、硝基苯甲酰基氨基、氨基苯甲酰基氨基、2-羟基乙基氨基、苄氧基羰基氨基或溴。
特别优选如下式(Ia)化合物或其N-氧化物或可药用盐其中r是1；n是0；m是0；B、D、E和T是CH或CQ且A是N(3-吡啶基)，或者尤其是A、B、D和E均为CH或CQ且T是N(4-吡啶基)；Q是选自下列的优选在一个、或者也可以是两个碳原子上的取代基卤素、尤其是氟或氯；低级烷基、尤其是甲基或乙基或丙基；氨基、N-低级烷基氨基，诸如N-甲基氨基或N-乙基氨基、N-正丙基-或N-异丙基氨基；或2-氰基乙基氨基、3-(甲氧基苯基)氨基或3-(4-吗啉基)丙基氨基、3-(吡啶基)甲基氨基、2-(2-吡啶基)乙基氨基、4-(1H-咪唑-1-基)丁基氨基、4-(三氟甲氧基苯基)氨基)、(甲基氨基磺酰基)氨基、(甲基磺酰基)氨基、(四氢-2H-吡喃-4-基)氨基、(四氢-2H-吡喃-4-基)甲基氨基、(四氢-3-呋喃基)氨基、(2-(1H-咪唑-1-基)乙基)氨基；或羟基-低级烷基氨基，诸如2-羟基乙基氨基、2-(2-羟基乙氧基)乙基氨基、取代或未取代的杂环基、尤其是四氢-1(2H)-嘧啶基)；或3-(乙酰基四氢)-1(2H)-嘧啶基；或哌嗪基、4-(2-羟基乙基)-1-哌嗪基、4-(乙氧基羰基)-1-哌嗪基、4-乙酰基-1-哌嗪基；或尤其是哌啶基、4-(三氟甲基)-1-哌啶基、4-(二氟甲基)-1-哌啶基、4-(苯基甲基)-1-哌啶基、4-苯氧基-1-哌啶基、4-氰基-1-哌啶基、4-甲氧基-1-哌啶基、4-乙氧基羰基-1-哌啶基、4-羟基-1-哌啶基、4-羧基-1-哌啶基、4-(氨基羰基)-1-哌啶基、4-甲硫基-1-哌啶基、4-甲基磺酰基-1-哌啶基；或者尤其是4-吗啉基、3，5-二甲基吗啉基或2-苯基-4-吗啉基；R是H或低级烷基、尤其是H或甲基；X是-NR-、尤其是-NH-；Y是未取代的或者被选自下列的一个或两个相同或不同的取代基所取代的苯基卤素、尤其是氟，特别是氯或溴；低级烷基、尤其是甲基；异丙基和叔丁基；和卤代-低级烷基、尤其是三氟甲基、4-氯苯基、2-、3-或4-甲基苯基、4-氯-5-三氟甲基苯基、3-溴-5-三氟甲基苯基，或者特别是3，5-二甲基苯基；或4-甲基-3-碘苯基、3，4-二(三氟甲基)苯基或3-溴-4-乙基-苯基。
还特别优选如下式(Ia)化合物或其N-氧化物或可药用盐其中r是1；n是0-2；m是0；
A、B、D和E均为CH或CQ且T是N；Q是选自下列的在一个碳原子上的取代基氨基、N-低级烷基氨基，诸如N-甲基氨基或N-乙基氨基、N-正丙基-或N-异丙基氨基；或2-氰基乙基氨基、3-(甲氧基苯基)氨基、3-(4-吗啉基)丙基氨基、3-(吡啶基)甲基氨基、2-(2-吡啶基)乙基氨基、4-(1H-咪唑-1-基)丁基氨基、4-(三氟甲氧基苯基)氨基)、(甲基氨基磺酰基)氨基、(甲基磺酰基)氨基、(四氢-2H-吡喃-4-基)氨基、(四氢-2H-吡喃-4-基)甲基氨基、(四氢-3-呋喃基)氨基、(2-(1H-咪唑-1-基)乙基)氨基；或羟基-低级烷基氨基，诸如2-羟基乙基氨基、2-(2-羟基乙氧基)乙基氨基、取代或未取代的杂环基、尤其是哌啶基、4-(三氟甲基)-1-哌啶基、4-(二氟甲基)-1-哌啶基、4-(苯基甲基)-1-哌啶基、4-苯氧基-1-哌啶基、4-氰基-1-哌啶基、4-甲氧基-1-哌啶基、4-乙氧基羰基-1-哌啶基、4-羟基-1-哌啶基、4-羧基-1-哌啶基、4-(氨基羰基)-1-哌啶基、4-甲硫基-1-哌啶基、4-甲基磺酰基-1-哌啶基；或者最优选吗啉基；R是H；X是-NR-、尤其是-NH-；并且Y是未取代的或者被下列基团所取代的苯基卤素、尤其是氯、或低级烷基，诸如甲基或三氟甲基或异丙基；或尤其是叔丁基；低级烷氧基、尤其是甲氧基，诸如4-氯苯基、4-甲氧基苯基或4-三氟甲氧基苯基；萘基；未取代的或者被低级烷基、尤其是被叔丁基取代的环己基，诸如4-叔丁基-环己基；未取代的或者被卤素、尤其是被氟取代的吲哚基，尤其是6-氟吲哚-3-基；或低级烷基、尤其是异戊基。
特别是还优选如下式(Ia)化合物或其N-氧化物或可药用盐其中r是1；n是0；m是0；
A、B、D和E均为CH且T是N；R是H；X是-NH-；Y是被一个或两个相同或不同的选自卤素和低级烷基的取代基所取代的苯基。特别优选其中的Y是在4-位上被叔丁基或三氟甲基取代的苯基的化合物；并且Q是选自吗啉基的在一个碳原子上的取代基。
本发明的另一种令人感兴趣的实施方案是式(I)化合物或其N-氧化物或可药用盐 其中n是0-2；r是0-2；m是0-4；J是二环杂芳族环系，诸如吲哚基、异二氢吲哚基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、嘌呤基、噌啉基、萘啶基、2，3-二氮杂萘基、异苯并呋喃基、萘啶基、2，3-二氮杂萘基、色烯基和嘌呤基；Q是在二环环系的任一个或两个环上并且在二环环系的任一个或两个环上的一个或两个碳原子上的取代基，其选自卤素、未取代的或取代的低级烷基、-OR2、-SR2、-NR2、-NRS(O)2N(R)2、-NRS(O)2R、-S(O)R2、-S(O)2R2、-OCOR2、-C(O)R2、-CO2R2、-NR-COR2、-CON(R2)2、-S(O)2N(R2)2、氰基、三甲基硅烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的杂芳基、未取代的或取代的环烷基、未取代的或取代的杂环烷基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-杂芳基、-C1-4烷基-杂环基、氨基、单-或二-取代的氨基；R是H或低级烷基；R2是未取代的或取代的烷基、未取代的或取代的环烷基、苯基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-杂芳基或-C1-4烷基-杂环烷基；X是Y、-N(R)-、-O-、-S-、砜、亚砜、磺酰胺、酰胺或1，3-亚脲基；Y是H、低级烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的环烷基或取代或未取代的杂环烷基；并且Z是氨基、单-或二-取代的氨基、卤素、烷基、取代的烷基、羟基、醚化的或酯化的羟基、硝基、氰基、羧基、酯化的羧基、烷酰基、氨基甲酰基、N-单-或N，N-二-取代的氨基甲酰基、脒基、胍基、巯基、磺基、苯硫基、苯基-低级烷硫基、烷基苯硫基、苯基亚磺酰基、苯基-低级烷基亚磺酰基、烷基苯基亚磺酰基、苯基磺酰基、苯基-低级烷基磺酰基或烷基苯基磺酰基，并且其中，如果存在一个以上的基团Z(m≥2)，则取代基Z相同或不同。
本发明的另一种令人感兴趣的实施方案是式(I)化合物或其N-氧化物或可药用盐其中n是0；r是0；m是0；J是二环杂芳族环系，诸如吲哚基、异二氢吲哚基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、嘌呤基、噌啉基、萘啶基、2，3-二氮杂萘基、异苯并呋喃基、萘啶基、2，3-二氮杂萘基、色烯基和嘌呤基；R是H或低级烷基；X是Y、-N(R)-、-O-、-S-、砜、亚砜、磺酰胺、酰胺或1，3-亚脲基；并且
Y是H、低级烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的环烷基或取代或未取代的杂环烷基。
本发明的另一种令人感兴趣的实施方案是式(I)化合物或其N-氧化物或可药用盐其中n是0；r是0；m是0；J是异喹啉基；X是NH；并且Y是取代或未取代的芳基、尤其是叔丁基苯基、尤其是4-叔丁基苯基。
本发明的化合物可通过本领域已知的关于其它化合物的制备方法来制得，尤其可通过下列方法制得a)将式(II)化合物 其中r、m、A、B、D、E、T、Q和Z如式(Ia)化合物所定义；并且M是离核的离去基团，与式(III)化合物反应 其中n、R、X和Y如式(I)化合物所定义，式(II)和式(III)化合物中不参与反应的官能团是被保护的形式，如果需要的话，将存在的任何保护基团除去，其中，如果存在成盐基团并且能够以盐的形式反应的话，在方法a)中提到的起始化合物还可以是盐的形式；并且，如果需要的话，将式(I)化合物或其N-氧化物转化成不同的式(I)化合物或其N-氧化物，将游离的式(I)化合物或其N-氧化物转化成盐，将所形成的式(I)化合物或其N-氧化物的盐转化成游离化合物或者转化成不同的盐，和/或将式(I)化合物或其N-氧化物的异构体混合物转化成单独的异构体。
方法的详细描述下面更详细地描述了制备方法，其中r、n、m、A、B、D、E、T、Q、R、X、Y和Z如式(Ia)化合物所定义，除非另有说明。
方法a)在式(II)化合物中，离核的离去基团M尤其是卤素，特别是溴、碘，或者特别是氯。
式II化合物和式(III)化合物之间的反应在适当的惰性极性溶剂、尤其是醇例如低级醇、诸如甲醇、丙醇或者特别是乙醇或正丁醇中进行；或者在没有加入溶剂的熔化物中进行，尤其是当反应物之一是液体形式时。反应在升高的温度下、优选在约60℃至回流温度的温度下、例如在回流条件下或者在约90℃至约110℃的温度下进行。还可以将式(III)化合物以盐的形式、例如以与强酸诸如氢卤酸所形成的酸加成盐的形式、例如以盐酸盐的形式使用；或者可在适当的溶剂、例如醚诸如二烷中加入相应的酸例如HCl。
或者，式(II)化合物和式(III)化合物之间的反应还可以在适当的惰性极性溶剂、尤其是醚例如四氢呋喃(THF)中进行；或者在没有加入溶剂的熔化物中进行，尤其是如果反应物之一是以液体形式存在的话。反应在升高的温度下、优选在约80℃至140℃在加压试管中进行。可将式(III)化合物以盐的形式、例如以与强碱、诸如氢氧化钾或氢化钠所形成的碱加成盐的形式使用。
当式(II)和/或(III)化合物中的一种或多种其它官能团例如羧基、羟基、氨基或巯基以被保护的形式存在或者必须以被保护的形式存在(因为不需要它们参与反应)时，所述保护基是在肽化合物的合成中常用的那些基团，但也可以是头孢菌素和青霉素以及核酸衍生物和糖类的合成中通常使用的基团。保护基可早已存在于前体中，以保护所述的官能团不发生不需要的副反应诸如酰化、醚化、酯化、氧化、溶剂分解等。存在于原料中的应避免其发生反应的官能团、尤其是羧基、氨基、羟基和巯基的保护基尤其包括在肽化合物、头孢菌素、青霉素或核酸衍生物和糖类的合成中通常使用的那些保护基(常规保护基)。保护基可早已存在于前体中，以保护所述的官能团不发生不需要的副反应诸如酰化、醚化、酯化、氧化、溶剂分解等。在某些情况下，保护基可使反应选择性地、例如立体选择性地进行。保护基的特征在于它们可以很容易地通过例如溶剂分解、通过还原、通过光解或酶化作用、例如在类似于生理条件的条件下除去，也就是说没有不需要的副反应，并且它们不存在于终产物中。本领域技术人员知道或者可容易地找到适于上下文提到的反应的保护基。
利用保护基对官能团进行保护、保护基本身和除去它们的反应记载于例如标准著作，诸如Protective Groups in Organic Chemistry，McOmie，Ed.，Plenum Press，London & NY(1973)；Protective Groups in OrganicSynthesis，第3版，Greene，Ed.，Wiley，NY(1999)；The Peptides；第3卷，Gross和Meienhofer，Eds.，Academic Press，London & NY(1981)；Methoden der organischen Chemie，Houben Wely，第4版，15/I卷，GeorgThieme Verlag，Ed.，Stuttgart(1974)；Aminosuren，Peptide，Proteine，Jakubke和Jescheit，Eds.，Verlag Chemie，Weinheim，Deerfield Beach和Basle(1982)；和Chemie der KohlenhydrateMonosaccharide undDerivate，Jochen Lehmann，Ed.，Georg Thieme Verlag，Stuttgart(1974)。
实施例中所提到的保护基优选按照类似于上述方法的方法引入并在需要时除去。
其它方法步骤在如果需要的条件下所进行的附加反应步骤中，起始化合物中的不参与反应的官能团以未保护的形式存在，或者以被保护的形式存在，例如通过方法a)中提到的一种或多种保护基进行保护。然后将所有的或某些保护基通过方法a)提到的方法之一除去。
含有成盐基团的式(I)化合物或其N-氧化物的盐类可通过本领域已知的方法制得。例如式(I)化合物或其N-氧化物的酸加成盐例如可通过用酸或适当的阴离子交换试剂处理来得到。还可以将含有两个酸分子的盐类、例如式(I)化合物或其N-氧化物的二卤化物转化成每个式(I)化合物或其N-氧化物含有一个酸分子的盐类、例如转化成一卤化物；这可以例如通过加热至熔融态或者例如通过在高真空及升高的温度例如130-170℃下以固体形式加热从而使每分子的式(I)化合物或其N-氧化物排出一分子的酸来实现。
可将盐类按照常规方式例如通过用适当的碱性试剂、例如用碱金属碳酸盐、碳酸氢盐或氢氧化物例如碳酸钾或氢氧化钠处理而转化成游离化合物。
可将立体异构体混合物例如非对映体的混合物按照本领域已知的方式通过适当的分离方法分离成相应的异构体。例如，可将非对映异构体混合物通过分步结晶、色谱、溶剂分配等分离成单独的非对映异构体。分离可以在原料之一的阶段进行，或者在式(I)化合物的阶段进行。可将对映体通过非对映异构体盐的形成来进行分离，例如通过与对映体纯手性酸形成盐，或者通过色谱法例如通过色谱、例如HPLC在带有手性配体的色谱载体物料上进行分离。
式(I)化合物可转化成相应的N-氧化物。反应用适当的氧化剂、优选过氧化物例如间氯过苯甲酸在适当的溶剂例如卤代烃诸如氯仿或二氯甲烷中或者在低级烷烃羧酸诸如乙酸中、优选在0℃至反应混合物的沸腾温度下、尤其是大约在室温下进行。
式(I)化合物或其N-氧化物(其中Z是低级烷酰基氨基)可水解成相应的氨基化合物(Z＝氨基)，例如通过用无机酸、尤其是HCl在水溶液(还可以加入另外的溶剂)中优选在升高的温度下例如在回流下进行水解。
其中Z是被一个或两个相同或不同的选自低级烷基、羟基-低级烷基和苯基-低级烷基的基团所取代的氨基的式(I)化合物或其N-氧化物可例如通过与低级烷基卤化物、羟基-低级烷基卤化物(如果需要的话其羟基被保护，参见方法a)或苯基-低级烷基卤化物在类似于方法a)提到的反应条件下进行反应而转化成在氨基上被相应取代的化合物。对于氨基Z上的2-羟基-低级烷基取代基的引入，还可以进行从环氧化物例如环氧乙烷开始的加成。加成尤其在水溶液中和/或在极性溶剂诸如醇类例如甲醇、乙醇、异丙醇或乙二醇；醚类诸如二烷；酰胺诸如二甲基甲酰胺；或酚类诸如苯酚的存在下进行；还可以在无水条件下在非极性溶剂诸如苯和甲苯中或者在苯/水乳液中任选地在酸或碱催化剂的存在下例如在碱性溶液诸如氢氧化钠溶液的存在下或者在掺杂肼的固相催化剂诸如氧化铝的存在下、在醚例如二乙醚中通常在约0℃至所述反应混合物的沸腾温度下、优选在20℃至回流温度下、适当时在升高的压力下例如在高压试管中进行，从而可以超过沸腾温度，和/或在惰性气体诸如氮气或氩气下进行。还可以用低级烷烃醛、苯基-低级烷烃醛或羟基-低级烷烃醛(如果需要的话，将其羟基进行保护)还原烷基化氨基Z。还原烷基化优选与氢化一起在催化剂、尤其是贵金属催化剂诸如铂或者尤其是钯(其优选与载体物质诸如碳相结合)或重金属催化剂诸如阮内镍的存在下在常压下或者在0.1-10兆帕(MPa)的压力下进行；或者通过复合氢化物诸如硼氢化物、尤其是碱金属氰基硼氢化物例如氰基硼氢化钠在适宜的酸、优选相对弱的酸诸如低级烷烃羧酸或者尤其是磺酸诸如对甲苯磺酸的存在下、在常规溶剂例如醇诸如甲醇或乙醇或醚例如环状醚诸如THF中在不存在或存在水的条件下进行还原。
在式(I)化合物或其N-氧化物中，氨基Z可通过酰化转化成被低级烷酰基、苯甲酰基、取代的苯甲酰基或者被苯基-低级烷氧基羰基取代的氨基，其中的苯基是未取代的或取代的。相应的酸含有游离的羧基，或者是其反应性酸衍生物的形式、例如衍生的活化酯或反应性酸酐的形式，或者是反应性环状酰胺。反应性酸衍生物还可原位形成。活化酯尤其是在待酯化的基团的连接碳原子部位呈不饱和的酯，例如乙烯基酯类型，诸如乙烯基酯，例如它可通过相应酯与乙酸乙烯酯的酯交换或活化乙烯基酯的方法得到；氨基甲酰基酯，例如它可通过用异唑试剂、1，2-唑处理相应的酸得到或者通过Woodward方法得到；或1-低级烷氧基乙烯基酯，例如它可通过用低级烷氧基乙炔处理相应的酸得到或者通过乙氧基乙炔方法得到；或者脒基类型的酯，诸如N，N′-二取代的脒基酯，例如它可通过用适当的N，N′-二取代的碳二亚胺、例如N，N′-二环己基碳二亚胺或者尤其是N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺处理相应的酸得到，或者通过碳二亚胺方法得到；或者N，N-二取代的脒基酯，例如它可通过用N，N-二取代的氰酰胺处理相应的酸得到，或者通过氰酰胺方法得到；适当的芳基酯、尤其是被亲电取代基适当取代的苯基酯，例如它可通过用适当取代的苯酚例如4-硝基苯酚、4-甲基磺酰基苯酚、2，4，5-三氯苯酚、2，3，4，5，6-五氯苯酚或4-苯基重氮基苯酚在缩合剂诸如N，N′-二环己基碳二亚胺的存在下处理相应的酸得到，或者通过活化芳基酯的方法得到；氰基甲酯，例如它可通过用氯乙腈在碱的存在下处理相应的酸得到，或者通过氰基甲酯方法得到；硫代酸酯、尤其是未取代或取代的，例如硝基-取代的苯硫基酯，例如它可通过用未取代的或取代的、例如硝基取代的苯硫酚处理相应的酸得到，或者通过酸酐或碳二亚胺方法或活化硫醇酯的方法得到；或者尤其是氨基或酰氨基酯，例如它可通过用N-羟基氨基或N-羟基酰氨基化合物例如N-羟基琥珀酰亚胺、N-羟基哌啶、N-羟基邻苯二甲酰亚胺、N-羟基-5-降冰片烯-2，3-二甲酰亚胺、1-羟基苯并三唑或3-羟基-3，4-二氢-1，2，3-苯并三嗪-4-酮处理相应的酸得到，例如通过酸酐或碳二亚胺方法得到，或者通过活化的N-羟基酯的方法得到。还可使用内酯例如γ-内酯。酸的酸酐可以是对称的，或者优选这些酸的混合型酸酐，例如与无机酸所形成的酸酐，诸如酰卤、尤其是酰氯，例如它可通过用亚硫酰氯、五氯化磷、光气或草酰氯处理相应的酸得到，或者通过酰氯法得到；叠氮化物，例如它可以从相应的酸酯通过相应的酰肼并且用亚硝酸对其进行处理来得到，或者通过叠氮化物法得到；与碳酸半酯，例如碳酸低级烷基半酯、尤其是氯甲酸甲酯所形成的酸酐，例如它可通过用氯甲酸低级烷基酯或者用1-低级烷氧基羰基-2-低级烷氧基-1，2-二氢喹啉处理相应的酸得到，或者通过混合型O-烷基碳酸酐方法得到；或者与二卤代的、尤其是二氯化的磷酸所形成的酸酐，例如它可通过用三氯氧化磷处理相应的酸得到，或者通过三氯氧化磷方法得到；与其它磷酸衍生物所形成的酸酐，例如可通过用N-苯基氨基氯代磷酸苯酯得到的酸酐，或者通过将烷基磷酰胺在磺酸酐和/或减少外消旋的添加剂诸如N-羟基苯并三唑的存在下或者在氰基磷酸二乙酯的存在下反应来得到；或者与磷酸衍生物或有机酸所形成的酸酐，诸如与有机羧酸所形成的混合型酸酐，例如它可通过用未取代的或取代的低级烷烃-或苯基-低级烷烃-羧酸卤化物例如苯基乙酸、新戊酸或三氟乙酰氯处理相应的酸得到，或者通过混合型羧酸酐方法得到；或者与有机磺酸所形成的酸酐，例如它可通过用适当的有机磺酰卤诸如低级烷烃-或芳基-磺酰氯、例如甲磺酰氯或对甲苯磺酰氯处理相应酸的盐诸如碱金属盐来得到，或者通过混合型磺酸酐方法得到；以及对称酸酐，例如它可通过在碳二亚胺或1-二乙基氨基丙炔的存在下缩合相应的酸来得到，或者通过对称酸酐方法得到。适当的环状酰胺尤其是带有芳香性的5-元二氮杂环的酰胺，诸如带有咪唑的酰胺，例如咪唑，例如它可通过用N，N′-羰基二咪唑处理相应的酸得到，或者通过咪唑法得到；或者吡唑，例如3，5-二甲基吡唑，例如它可经酰基肼通过用乙酰基丙酮处理得到，或者通过吡唑酰胺法得到。如上所述，用作酰化剂的羧酸衍生物还可原位形成。例如，N，N′-二取代的脒基酯可通过将式(I)的原料与用作酰化剂的酸的混合物在适当的N，N′-二取代的碳二亚胺例如N，N′-二环己基碳二亚胺或者尤其是N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺的存在下反应来原位得到。此外，用作酰化剂的酸的氨基或酰氨基酯可以在待酰化的式(I)的原料的存在下通过将相应酸和氨基原料的混合物在N，N′-二取代的碳二亚胺例如N，N′-二环己基碳二亚胺和N-羟基胺或N-羟基酰胺例如N-羟基琥珀酰亚胺的存在下、任选地在适宜碱例如4-二甲基氨基吡啶的存在下反应来得到。此外，活化可通过与N，N，N′，N′-四烷基脲化合物诸如O-苯并三唑-1-基-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸盐、O-(1，2-二氢-2-氧代-1-吡啶基)-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸盐(在不存在或存在1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯-(1，5，5)的条件下)或O-(3，4-二氢-4-氧代-1，2，3-苯并三唑啉-3-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸盐反应而原位完成。最后，羧酸的磷酸酐可以通过将烷基磷酸酰胺诸如六甲基磷酸三酰胺在磺酸酐诸如4-甲苯磺酸酐的存在下与盐诸如四氟硼酸盐例如四氟硼酸钠反应，或者与六甲基磷酸三酰胺的不同的衍生物诸如苯并三唑-1-基-氧基-三(二甲基氨基)六氟化、优选在减少外消旋的添加剂诸如N-羟基苯并三唑的存在下反应而原位制得。如果需要的话，加入有机碱、优选叔胺例如三-低级烷基胺，尤其是乙基二异丙基胺，或者更优选三乙基胺和/或杂环碱例如4-二甲基氨基吡啶，或者优选N-甲基吗啉或吡啶。缩合反应优选在惰性、非质子、优选无水溶剂或溶剂混合物中进行，例如在羧酸酰胺例如甲酰胺或二甲基甲酰胺；卤代烃例如二氨甲烷、四氯化碳或氯苯；酮例如丙酮；环状醚例如THF或二烷；酯例如乙酸乙酯或腈例如乙腈或其混合物中，适当时在降低或升高的温度下，例如在约-40℃至约+100℃、优选约-10℃至约+70℃的温度范围内(在使用芳基磺酰基酯的情况下，还可以在约+100-200℃的温度下)、尤其是在10-30℃的温度下，适当时在惰性气氛例如氮或氩气氛下进行。还可以使用含水溶剂例如醇溶剂例如乙醇；或芳烃溶剂例如苯或甲苯。
式(I)化合物中的硝基Z可还原成氨基，例如通过用金属还原或选择性氢化还原；例如通过与硫酸镁/硫酸铵在水/醇混合物诸如甲醇/水中在升高的温度下、例如在30-60℃下反应(参见Synth Commun，Vol.25，No.2，pp.4025-4028(1995))；通过与锌/硼氢化物在酰胺诸如二甲基甲酰胺中、在低于室温的温度下例如在约0℃下反应；通过与1，1′-二辛基-4，4′-联吡啶二溴化物/连四硫酸钠/碳酸钾在水/卤代烃混合物例如水/二氯甲烷混合物中、在升高的温度下、例如在25-35℃下反应(参见Tetrahedron Lett，Vol.34，No.46，pp.7445-7446(1993))；与硼氢化钠在氯化物形式的AmberlyteIRA-400离子交换剂上在醇诸如甲醇/水中、在0-40℃的优选温度下反应(参见Synth Commun，Vol.19，Nos.5/6，pp.805-811(1989))；与硼氢化钾在卤代烃/醇混合物例如二氯甲烷/甲醇中在10-35℃的优选温度下反应(参见Synth Commun，Vol.19，No.17，pp.3047-3050(1989))；与硼氢化钠在二烷中反应；与硼烷在THF中反应；通过在Pd/C的存在下在醇中在0-35℃的优选温度下并且在甲酸铵的存在下氢化(参见Tetrahedron Lett，Vol.25，No.32，pp.3415-3418(1989))；与四氯化钛/氢化铝锂或四氯化钛/镁在醚诸如THF中反应(参见Bull Chem Soc Belg，Vol.97，No.1，pp.51-53(1988))；或者与氯化铁铵/水在升高的温度下、优选在回流下反应。参见Synth.Commun，Vol.22，pp.3189-3195(1992)。
一般方法的条件本文中提到的所有的方法步骤均可以在本领域已知的反应条件、优选在具体提到的反应条件下、在不存在或者通常是存在溶剂或稀释剂、优选对于所用的试剂呈惰性并且是该试剂的溶剂的溶剂或稀释剂的条件下、在不存在或者存在催化剂、缩合剂或中和剂例如离子交换剂诸如阳离子交换剂(例如以H+的形式)的条件下，并且根据反应和/或反应物的性质，在降低的温度、常温或升高的温度下、例如在约-100℃至约190℃、优选约-80℃至约150℃的温度下、例如在-80℃至-60℃、在室温下、在-20℃至40℃或者在所用的溶剂的沸点下、在常压下或者在封闭容器中、适当时在加压下和/或在惰性气氛例如氩气或氮气氛下进行。
在存在成盐基团的情况下，在所有的原料和中间体化合物中都可以存在盐。在所述化合物的反应过程中也可存在盐，条件是不会因此而影响反应。
在反应的所有阶段，所形成的异构体混合物均可分离成单独的异构体例如非对映体或对映体，或者分离成任何所需的异构体的混合物例如外消旋体或非对映异构体混合物，例如采用类似于在“附加的反应步骤”中所述的方法进行分离。
在某些情况下，例如在氢化反应的情况下，可以进行立体选择性反应，从而例如更易于得到单独的异构体。
适于进行特定反应的溶剂包括例如水；酯诸如低级链烷酸低级烷基酯例如乙酸乙酯；醚诸如脂肪醚例如二乙醚或环状醚例如THF；液态芳烃诸如苯或甲苯；醇诸如甲醇、乙醇或1-或2-丙醇；腈诸如乙腈；卤代烃诸如二氯甲烷；酰胺诸如二甲基甲酰胺；碱诸如氮杂环碱例如吡啶；羧酸诸如低级烷烃羧酸例如乙酸；羧酸酐诸如低级链烷酸酐例如乙酸酐；环状、直链或支链烃诸如环己烷、己烷或异戊烷或这些溶剂的混合物例如水溶液，除非在方法的描述中另有说明。所述的溶剂混合物还可用于后处理，例如色谱或分配。
本发明还涉及其中将在任何阶段以中间体形式得到的化合物用作原料并且进行剩余步骤的方法的那些形式，或者该方法在任何阶段被中断，或者原料在反应条件下形成或以反应性衍生物或盐的形式使用，或者将可通过本发明的方法得到的化合物在所述方法条件下制得并且原位进一步加工处理。优选使用可产生上述优选的、尤其是特别优选的、更优选的和/或非常优选的化合物的那些原料。
式(I)化合物或其N-氧化物的制备优选按照与实施例中所述的方法和工艺步骤相类似的方法进行。
式(I)化合物或其N-氧化物、包括其盐还可以以水合物的形式得到，或者它们的晶体可包含例如用于结晶的溶剂(以溶剂化物的形式存在)。
药物组合物、方法和用途本发明还涉及药物组合物，其包含作为活性成分的式(I)化合物或其N-氧化物并且尤其可用于治疗开始所提到的疾病。特别优选可用于肠内诸如鼻内、口腔、直肠或者尤其是口服和非肠道、诸如静脉内、肌内或皮下给药于温血动物、尤其是人的组合物。所述的组合物包含活性成分本身，或者优选还含有可药用载体。活性成分的剂量取决于待治疗的疾病和物种、其年龄、重量和个体条件、个体药动学数据和给药方式。
本发明还涉及用于预防性地或者尤其是治疗性地治疗人或动物体的方法的药物组合物、其制备方法(尤其是以用于治疗肿瘤的组合物的形式)以及治疗上述疾病、尤其是肿瘤疾病、特别是上述的那些疾病的方法。
本发明还涉及式(I)化合物或其N-氧化物用于制备药物组合物的方法和用途，所述药物组合物包含作为活性组分(活性成分)的式(I)化合物或N-氧化物。
优选适宜给药于患有其特征在于异常的MAP激酶信号传导途径的疾病、尤其是肿瘤疾病、特别是黑素瘤的温血动物、尤其是人或商用哺乳动物的药物组合物，该组合物以有效抑制RAF激酶、特别是突变型RAF激酶的量包含式(I)化合物或其N-氧化物或其可药用盐(当存在成盐基团时)和至少一种可药用载体。
还优选用于预防性地或者尤其是治疗性地治疗需要进行治疗、尤其是患有所述疾病的温血动物、尤其是人或商用哺乳动物的肿瘤疾病和其它增殖性疾病的药物组合物，该组合物以有效地预防或者尤其是治疗上述疾病的量包含作为活性成分的新的式(I)化合物或其N-氧化物或其可药用盐。
药物组合物包含约1％至约95％的活性成分，单一剂量形式的剂型优选包含约20％至约90％活性成分，非单一剂量形式的剂型优选包含约5％至约20％的活性成分。单位剂型是例如糖衣丸、片剂、安瓿、小瓶、栓剂或胶囊。其它剂型是例如软膏剂、乳膏、糊剂、泡沫、酊剂、唇膏剂、滴剂、喷雾剂、分散剂等。例子是包含约0.05g至约1.0g活性成分的胶囊。
本发明的药物组合物按照本领域已知的方式例如通过常规混合、造粒、调味、溶解或冷冻干燥方法制得。
优选使用活性成分的溶液，但也可以使用混悬液或分散液，尤其是等渗的水溶液、分散液或混悬液，其中，例如在单独含有活性物质或者还含有载体例如甘露糖醇的冷冻干燥的组合物的情况下，可以在临用前制备这些制剂。药物组合物可以是灭菌的和/或包含赋形剂例如防腐剂、稳定剂、润湿剂和/或乳化剂、增溶剂、用于调节渗透压的盐和/或缓冲剂，并且按照本领域已知的方式制得，例如通过常规的溶解或冷冻干燥过程制得。所提到的溶液或混悬液可包含增加粘度的物质诸如羧基甲基纤维素钠、羧基甲基纤维素、葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮或明胶或增溶剂例如Tween 80[聚氧乙烯(20)脱水山梨糖醇一油酸酯；美国ICI Americas，Inc.的商标]。
油悬浮液包括通常用于注射目的植物油、合成或半合成油作为油成分。可提到尤其是液态脂肪酸酯，它包含作为酸成分的带有8-22个碳原子、尤其是12-22个碳原子的长链脂肪酸，例如月桂酸、十三酸、豆蔻酸、十五酸、棕榈酸、十七酸、硬脂酸、花生酸、二十二酸或相应的不饱和酸例如油酸、反油酸、芥酸、巴西烯酸或亚油酸，任选地加入抗氧化剂例如维生素E、β-胡萝卜素或3，5-二-叔丁基-4-羟基甲苯。这些脂肪酸酯的醇成分具有最多6个碳原子，并且是单羟基或多羟基例如单羟基、二羟基或三羟基醇，例如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇或戊醇或它们的异构体，但尤其是乙二醇和甘油。可提到的脂肪酸酯的例子因此是油酸乙酯、豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、″Labrafil M 2375″(聚氧化乙烯甘油三油酸酯，Gattefossé，Paris)、″Labrafil M 1944 CS″(通过杏仁油的醇解制得的不饱和的聚乙二醇化的甘油酯，并且由甘油酯和聚乙二醇酯所组成；Gattefossé，France)、″Labrasol″(通过TCM的醇解制得的饱和的聚乙二醇化的甘油酯，并且由甘油酯和聚乙二醇酯所组成；Gattefossé，France)和/或″Miglyol 812″(链长度为C8-12的饱和脂肪酸的甘油三酯，Hüls AG，Germany)，但尤其是植物油诸如棉子油、杏仁油、橄榄油、蓖麻油、芝麻油、大豆油，更优选花生油。
注射组合物的制备按照常规方式在无菌条件下进行，也可以将其引入例如安瓿或小瓶中，然后将容器密封。
用于口服给药的药物组合物可以例如通过以下方法得到将活性成分与一种或多种固体载体相混合、将所形成的混合物造粒，适当时加工处理该混合物或颗粒，如果需要的话，适当时将其它赋形剂加入到片剂或糖衣丸的核芯中。
适当的载体尤其是填料诸如糖类例如乳糖、蔗糖、甘露糖醇或山梨糖醇；纤维素制品和/或磷酸钙例如磷酸三钙或磷酸氢钙；以及粘合剂诸如淀粉，例如玉米、小麦、水稻或马铃薯淀粉、甲基纤维素、羟丙甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮；和/或，如果需要的话，崩解剂诸如以上提到的淀粉和羧甲基淀粉；交联的聚乙烯吡咯烷酮、藻酸或其盐诸如藻酸钠。另外的赋形剂尤其是流动调节剂和润滑剂例如硅酸、滑石、硬脂酸或其盐诸如硬脂酸镁或钙和/或聚乙二醇或其衍生物。
可以在糖衣丸的核芯上提供适当的、任选为肠溶的包衣，可以使用浓的糖溶液，其可含有阿拉伯胶、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇和/或二氧化钛，或者使用在适当的有机溶剂或溶剂混合物中的包衣溶液，或者为了制备肠溶包衣，可以使用适当的纤维素制剂诸如乙酰基纤维素邻苯二甲酸酯或羟丙甲基纤维素邻苯二甲酸酯的溶液。可将着色剂或颜料加入到片剂或糖衣丸包衣中，例如为了鉴别的目的或者为了表示活性成分的不同剂量。
用于口服给药的药物组合物还可以是硬明胶胶囊和软密封胶囊，软密封胶囊由明胶和增塑剂诸如甘油或山梨糖醇组成。硬明胶胶囊可含有颗粒形式的活性成分，例如与填料诸如玉米淀粉、粘合剂和/或助流剂诸如滑石或硬脂酸镁以及任选的稳定剂的混合物。在软胶囊中，将活性成分优选溶解或者悬浮在适当的液体赋形剂诸如脂肪油、石蜡油或液态聚乙二醇或乙二醇或丙二醇的脂肪酸酯中，其中还可加入稳定剂和洗涤剂例如聚氧化乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯类型的洗涤剂。
适当的直肠给药的药物组合物是例如由活性成分和栓剂基质的混合物组成的栓剂。适宜的栓剂基质是例如天然的或合成的甘油三酸酯、石蜡烃、聚乙二醇或高级醇。
对于非肠道给药，可以是适当的尤其是水溶性形式例如水溶性盐形式的活性成分的水溶液，或者是含水的注射混悬液，其包含增加粘度的物质例如羧甲基纤维素钠、山梨糖醇和/或葡聚糖；以及，如果需要的话，稳定剂。活性成分、任选地与赋形剂一起，还可以是冷冻干燥物的形式，并且可以在非肠道给药之前通过加入适宜的溶剂而制成溶液。
所用的溶液例如用于非肠道给药的溶液还可用作输液制剂。
优选的防腐剂是例如抗氧化剂诸如抗坏血酸或杀微生物剂诸如山梨酸或苯甲酸。
本发明尤其涉及治疗其特征在于异常的MAP激酶信号传导途径的病理学状态、尤其是对RAF激酶的抑制有响应的疾病、尤其是相应的肿瘤疾病的方法。可将式(I)化合物或其N-氧化物本身或者以药物组合物的形式、优选以有效治疗上述疾病的量预防性地或治疗性地施用于需要所述治疗的温血动物例如人，所述化合物尤其是以药物组合物的形式使用。在体重约为70kg的情况下，给药的日剂量是约0.1g至约5g、优选约0.5g至约2g本发明的化合物。
用于各个具体病例的优选剂量、药物制剂(药物)的组成和制备如上所述。
原料所用的原料和所选择的反应条件优选是得到优选的上述化合物的原料和反应条件。
式(II)和(III)的原料是已知的，可以通过本领域已知的方法制得，或者是可购买的；它们尤其可通过与实施例所述的相类似的方法制得。
在原料的制备中，如果需要的话，所存在的不参与反应的任何官能团均可以是被保护的形式。优选的保护基、它们的引入及其除去记载于方法a)或实施例中。除所述的原料和中间体外，如果存在成盐基团并且所述的反应能够用盐来进行的话，还可以将其盐进行反应。因此，如果适当并且可能的情况下，上下文所指的原料还包括它们的盐。
Negishi反应方案 Negishi，King和Okukado，J Org Chem，Vol.42，pp.1821-1823(1977)和Stanforth，Tetrahedron Lett，Vol.54，Nos.3/4，pp.263-303(1998)。
关于上述方案的各个步骤，步骤1涉及将式(IV)化合物在钯介导的两种适宜的偶联试剂的交叉偶联反应中、优选在Negishi条件下进行反应。式(IV)化合物的钯介导的偶联在下列物质的存在下进行1)有机金属试剂，优选有机锂试剂诸如正丁基锂；2)卤化锌诸如溴化锌；3)钯试剂诸如四(三苯基膦)-钯(0)；4)适当的偶联试剂，诸如表2中定义的J-Q的溴化物、氯化物、碘化物或三氟甲磺酸酯；和5)有机溶剂，优选醚，更优选环状醚诸如THF，在-78℃至25℃的温度下，优选在-78℃下反应10分钟至48小时。
步骤2涉及式(II)化合物与式(III)化合物的反应 其中n、R、X和Y如式(I)化合物中所定义，如果需要的话，式(II)和式(III)化合物中未参与反应的官能团是被保护的形式，然后将存在的任何保护基团除去，其中如果存在成盐基团并且能够以盐的形式进行反应的话，在方法a)中提到的起始化合物还可以是盐的形式；
并且，如果需要的话，将所形成的式(Ia)化合物或其N-氧化物转化成不同的式(Ia)化合物或其N-氧化物，将游离的式(Ia)化合物或其N-氧化物转化成盐，将所形成的式(Ia)化合物或其N-氧化物的盐转化成游离化合物或者转化成不同的盐，和/或将式(Ia)的异构体化合物或其N-氧化物的混合物转化成单独的异构体。
式(II)化合物和式(III)化合物之间的反应在适当的惰性极性溶剂、尤其是醇例如低级醇、诸如甲醇、丙醇或者特别是乙醇或正丁醇中进行；或者在没有加入溶剂的熔化物中进行，尤其是当反应物之一是液体形式时。反应在升高的温度下、优选在约60℃至回流温度的温度下、例如在回流条件下或者在约60℃-110℃的温度下进行。还可以将式(III)化合物以盐的形式、例如以与强酸诸如卤化氢所形成的酸加成盐的形式、例如以盐酸盐的形式使用；或者在适当的溶剂、例如醚诸如二烷中加入相应的酸例如HCl。
或者，式(II)化合物和式(III)化合物之间的反应还可以在适当的惰性极性溶剂、尤其是醚例如四氢呋喃(THF)中进行；或者在没有加入溶剂的熔化物中进行，尤其是如果反应物之一以液体形式存在的话。反应在升高的温度下、优选在约80℃至140℃下在加压试管中进行。可将式(III)化合物以盐的形式、例如以与强碱、诸如氢氧化钾或氢化钠所形成的碱加成盐的形式使用。
Suzuki反应方案 步骤1涉及式(V)化合物与式(III)化合物的反应 其中n、R、X和Y如式(I)化合物所定义，如果需要的话，式(V)和式(III)化合物中未参与反应的官能团是被保护的形式，然后将存在的任何保护基团除去，其中如果存在成盐基团并且能够以盐的形式进行反应的话，在方法a)中提到的起始化合物还可以是盐的形式。
式(V)化合物和式(III)化合物之间的反应在适当的惰性极性溶剂、尤其是醇例如低级醇、诸如甲醇、丙醇或者特别是乙醇或正丁醇中进行；或者在没有加入溶剂的熔化物中进行，尤其是当反应物之一是液体形式时。反应在升高的温度下、优选在约60℃至回流温度的温度下、例如在回流条件下或者在约60℃-110℃的温度下进行。还可以将式(III)化合物以盐的形式、例如以与强酸诸如卤化氢所形成的酸加成盐的形式、例如以盐酸盐的形式使用；或者在适当的溶剂、例如醚诸如二烷中加入相应的酸例如HCl。
或者，式(V)化合物和式(III)化合物之间的反应还可以在适当的惰性极性溶剂、尤其是醚例如四氢呋喃(THF)中进行；或者在没有加入溶剂的熔化物中进行，尤其是如果反应物之一以液体形式存在的话。反应在升高的温度下、优选在约80℃至140℃下在加压试管中进行。可将式(III)化合物以盐的形式、例如以与强碱、诸如氢氧化钾或氢化钠所形成的碱加成盐的形式使用。
步骤2涉及在亲电卤化剂、优选苯基三甲基三溴化铵的存在下在惰性极性溶剂、优选THF中、在0℃至溶剂的回流温度的温度下、优选在室温下将式(VI)化合物的异喹啉基母核卤化、尤其是溴化1小时至24小时、优选12小时以得到式(VII)化合物。
步骤3涉及硼酸中间体的制备。反应在下述物质的存在下进行1)有机金属试剂，优选有机锂试剂诸如正丁基锂；2)亲电硼源，诸如二(频那醇)二硼或者诸如硼酸三烷基酯诸如硼酸三异丙酯；和3)极性有机溶剂，优选醚，更优选环状醚诸如THF，在-78℃至25℃的温度下，优选在-78℃下反应10分钟至48小时、优选4.5小时以得到式(VIII)化合物。
步骤4涉及钯介导的两种适当的偶联试剂的交叉偶联反应，优选在Suzuki条件下进行。钯介导的偶联在下述物质的存在下进行1)适当的Suzuki交叉偶联试剂，诸如表2中所定义的J-Q的溴化物、氯化物、碘化物或三氟甲磺酸酯；2)钯试剂，诸如四(三苯基膦)-钯(0)或二氯化二(三苯基膦)-钯(II)；3)碱，诸如碳酸钾；和4)极性有机溶剂，诸如醚或二甲基甲酰胺，优选在60℃下偶联10分钟至48小时以得到式(Ia)化合物，该化合物可以是终产物或中间体化合物。
如果A、B、E、D或T带有离去基团的话，式(Ia)化合物可充当中间体化合物。在这种情况下，可与胺、氧或硫亲核试剂反应以置换离去基团，形成式(Ia)的另一种最终化合物。该合成包括式(Ia)化合物(其中Q包含反应基团)与式(Q-H)化合物(其中Q选自OR2、-SR2、-NR2、-NRS(O)2N(R)2、-NRS(O)2R)在适当的惰性极性溶剂、尤其是醇例如低级醇诸如甲醇、丙醇或者尤其是乙醇或正丁醇中或者在没有加入溶剂的熔化物中发生反应，尤其是如果反应物之一以液体形式存在的话。反应在升高的温度下、优选在约60℃至回流温度的温度下、例如在回流条件下或者在约90℃至约110℃的温度下进行。可将式(Q)化合物以盐的形式、例如以与强酸诸如卤化氢所形成的酸加成盐的形式、例如以盐酸盐的形式使用。
或者，以上所定义的式(Ia)化合物和式(Q-H)化合物之间的反应还可以在适当的惰性极性溶剂、尤其是醚例如THF中进行，或者在没有加入溶剂的熔化物中进行，尤其是如果反应物之一以液体形式存在的话。反应在升高的温度下、优选在约80℃至140℃下在加压试管中进行。可将式(III)化合物以盐的形式、例如以与强碱、诸如氢氧化钾或氢化钠所形成的碱加成盐的形式使用。
其它原料是已知的，可以通过本领域已知的方法制得，或者是可购买的，或者尤其可通过与实施例所述的相类似的方法制得。
以下实施例用于解释本发明但并不限制本发明的范围。
实施例1(4-叔丁基-苯基)-[6-氟-4-(2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-异喹啉-1-基]-胺将(4-叔丁基-苯基)-[6-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-异喹啉-1-基]-胺溶于二乙醚(3mL)和2，4-二氯嘧啶(117mg，0.785mmol)，然后加入K2CO3(291mg，2.141mmol)并将溶液脱气10分钟。加入约10mg Pd(PPh3)4并将混合物于60℃在搅拌下加热过夜。向混合物中加入水，然后用二乙醚萃取。将溶液通过硅胶垫，然后通过蒸发浓缩。向浓缩液中加入1mL吗啉，然后在80℃下加热过夜。将混合物旋转蒸发并通过制备型TLC和制备型HPLC纯化(35-65％CH3CN/水，含0.1％TFA)。将残余物溶于乙酸乙酯，用饱和NaHCO3、盐水洗涤，然后用MgSO4干燥。除去溶剂得到棕色固体(6mg)。M+H+＝458.25。
1H NMR(300MHz)(DMSO)；δ1.31(s，9H)，3.70(m，4H)，3.77(m，4H)，7.02(d，1H，J＝5.14Hz)，7.38(d，2H，J＝8.44Hz)，7.59(m，1H)，7.72(d，2H，J＝8.80Hz)，8.30(m，2H)，8.47(d，1H，J＝5.14Hz)，8.72(dd，1H，J＝5.87，9.17Hz)，9.51(s，1H)。
原料按照以下方法制得1a)1-氯-6-氟-异喹啉将6-氟-2H-异喹啉-1-酮(1.3g，7.97mmol)(其制备可参见PCT/GB02/00514和WO 02/062816)在CH3CN(20mL)和POCl3(3.7g，23.9mmol)中形成悬浮液。滴加4N HCl(2mL)的二烷(2mL)溶液。将形成的混合物于50℃在搅拌下加热过夜。将反应混合物倒入饱和NaHCO3溶液中并用乙酸乙酯萃取。将有机层浓缩得到橙色固体(1.1g，78％)。M+H+＝181.8。
1H NMR(300MHz)(CDCl3)；δ7.42(m，2H)，8.26(m，3H)。
1b)(4-叔丁基-苯基)-(6-氟-异喹啉-1-基)-胺将1-氯-6-氟-异喹啉(1g，6.13mmol)溶于n-BuOH(20mL)和4-叔丁基-苯胺(1.1g，6.74mmol)。滴加4N HCl(1mL)的二烷(1mL)溶液。将形成的混合物在80℃下加热过夜。将混合物旋转蒸发，将残余物溶于乙酸乙酯，用饱和NaHCO3、盐水洗涤，然后用MgSO4干燥。除去溶质，真空浓缩后将有机层进一步通过硅胶柱纯化(己烷90％至10％乙酸乙酯/己烷)得到黄色固体(900mg，56％)。M+H+＝295.3。
1H NMR(300MHz)(DMSO)；δ1.29(s，9H)，7.13(d，1H，J＝6Hz)，7.34(d，2H，J＝8.67Hz)，7.50(m，1H)，7.60(dd，1H，J＝2.64，9.8Hz)，7.72(d，2H，8.67Hz)，7.96(d，1H，5.65Hz)，8.61(dd，1H，J＝5.46，9.23Hz)，9.16(s，1H)。
1c)(4-溴-6-氟-异喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺将(4-叔丁基-苯基)-(6-氟-异喹啉-1-基)-胺(2.17g，7.37mmol)溶于THF(30mL)。在0℃下分批加入PhMe3NBr3(2.93g，7.81mmol)。蒸发THF并将形成的固体溶于二氯甲烷和水(均为200mL)。将有机层用水(50mL，两次)和盐水(50mL，一次)洗涤。分离出有机相，用Na2SO4干燥，真空浓缩得到浅棕色固体(2.75g，99％)。M+H+＝375.2。
1H NMR(300MHz)(DMSO)；δ1.29(s，9H)，7.36(d，2H，J＝8.67Hz)，7.65(dd，4H，J＝7.35，8.85Hz)，8.17(s，1H)，8.70(dd，1H，J＝5.27，9.42Hz)，9.38(s，1H)。
1d)(4-叔丁基-苯基)-[6-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-异喹啉-1-基]-胺将(4-溴-6-氟-异喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺(500mg，1.34mmol)溶于DMF(10mL)。加入二(频那醇)二硼(748mg，2.93mmol)和KOAc(391mg，4.019mmol)。将溶液用N2脱气10分钟。加入[(CH5H4P(C6H5)2)2Fe]PdCl2然后于80℃在搅拌下加热过夜。将水(10mL)加入到混合物中，然后用乙醚萃取。将乙醚层通过硅胶垫，然后旋转蒸发得到棕色固体。M+H+＝421.3。该固体不经进一步纯化即可用于制备实施例1。
实施例2[4-(2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-异喹啉-1-基]-(3-三氟甲基氧基-苯基)-胺向1-氯-4-(2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-异喹啉(0.06g，1.84×10-4m)的正丁醇(30mL)溶液中加入间三氟甲氧基苯胺(0.10g，5.65×10-4m)和一滴浓HCl。将混合物在100℃下加热7小时，然后冷却至室温。将混合物真空浓缩，然后溶于二氯甲烷(75mL)。将有机相用碳酸氢钠的饱和溶液、盐水洗涤，用硫酸镁干燥，然后浓缩得到浅橙色油。将该油通过快速色谱纯化(SiO2己烷/乙酸乙酯)。收集浅黄色油并用己烷结晶，m.p.105-106℃。CHN分析计算值％C61.67；％H4.31；％N14.98。实测值％C61.70；％H4.04；％N14.93。
原料按照以下方法制得
2a)2-甲硫基-尿嘧啶向冷却至0-5℃的2-巯基尿嘧啶(78.00g，0.609mol)的水(160mL)和异丙醇(80mL)悬浮液中滴加30％氢氧化钠溶液(48.7g，1.22mol水溶液，160mL)。在2小时内滴加碘甲烷(41.7mL，0.669mol)的异丙醇(150mL)溶液。将混合物升温至室温并搅拌1小时。将混合物真空浓缩至一半的体积，冷却至5℃，然后用浓HCl酸化至pH 6.5。将固体沉淀物通过过滤收集，用冷水洗涤，真空干燥得到70g白色固体(81％)。M+H1＝142。
1H NMR(DMSO)；δ12.8(bs，1H)，7.90(d，1H)，6.07(d，1H)，2.37(s，3H)。
2b)2-吗啉-4-基-嘧啶-4-醇向2-甲硫基尿嘧啶(4.0g，0.0281mol)中加入吗啉(3.05g，0.035mol)。将混合物在145℃下加热2小时，然后冷却至室温。将固体用乙醇结晶。收集白色的针状物(2.0g)。第二批结晶约重0.50g(49％)。M+H1＝181。
1H NMR(CDCl3)；δ12.1(bs，1H)，7.85(d，1H)，5.79(d，1H)，3.75(m，8H)。
2c)4-(4-溴-嘧啶-2-基)-吗啉将2-吗啉-4-基-嘧啶-4-醇(6.08g，33.6mmol)和三溴氧化磷(12.5g，43.7mmol)在330mL MeCN中的混合物加热回流1小时。将反应液冷却至室温，浓缩至一半的体积，然后倒在冰上。将形成的混合物用饱和NaHCO3溶液中和，然后用二氯甲烷萃取。将有机相用饱和NaCl(水溶液)洗涤，用无水MgSO4干燥，过滤，浓缩，然后干燥得到米白色固体(7.11g，87％)。M+H1＝245.97。
1H NMR(CDCl3)；δ8.05(d，1H)，6.70(d，1H)，3.75(m，8H)。
2d)4-溴-1-氯-异喹啉向4-溴异喹啉(52.08g，0.250mol)的二氯甲烷(600mL)溶液中加入间氯过苯甲酸(64.47g，0.250mol)。将混合物搅拌2.5小时。向混合物中加入1.5g间氯过苯甲酸并将混合物搅拌30分钟。将溶液用1N NaOH、盐水洗涤，然后用硫酸钠干燥。除去溶剂得到白色固体。将固体用热丙酮结晶得到32.22g(57.6％)白色固体。1H，13C NMR与结构一致。将N-氧化物(15.75g，0.0703mol)溶于氯仿(50mL)并在冰浴中冷却。滴加三氯氧化磷(20mL)，然后将混合物升温至室温，然后加热回流1.5小时。将混合物冷却至室温，然后倒在冰上。将含水混合物用NaHCO3中和至pH 7-8，然后用氯仿萃取。将有机相用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并除去溶剂。将残余物通过快速色谱纯化(SiO2/5％乙酸乙酯/己烷)。收集得到12.22g(72％)。M+H1＝389。
1H NMR；δ8.50(s，1H)，8.40(d，1H)，8.20(d，1H)，7.92(t，1H)，7.79(t，1H)。
2e)4-硼酸-1-氯-异喹啉向-74℃的4-溴-1-氯-异喹啉(1.25g，5.2mmol)的无水THF(30mL)溶液中在45分钟内滴加n-BuLi(2.5M的己烷溶液，2.3mL，5.7mmol)。滴加硼酸三异丙酯(1.4mL，6.1mmol)，然后将混合物在-74℃下搅拌2小时。升温至室温后，通过注射器用水终止反应。浓缩含水混合物后，将反应液用1NHCl(水溶液)酸化至pH约为1，得到白色固体。将固体产物通过过滤收集并干燥(760mg，71％)。M+H1＝207.9。
1H NMR(DMSO-d6)；δ8.72(bs，2H)，8.53(d，1H)，8.47(s，1H)，8.31(d，1H)，7.90(t，1H)，7.80(t，1H)。
2f)1-氯-4-(2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-异喹啉在一个大的密封试管中将4-(4-溴-嘧啶-2-基)-吗啉(3.7g，15.0mmol)(参见实施例2c)和4-硼酸-1-氯-异喹啉(6.2g，29.9mmol)溶于含有3mL EtOH的60mL乙二醇二甲基醚(DME)。加入Na2CO3(6.1g，57.8mmol)的20mL水溶液，然后将N2通入红色的溶液中5分钟。加入PdCl2(PPh3)2催化剂(2.1g，3.0mmol)，将混合物在95℃下加热4.5小时。冷却后，加入水，将产物用CH2Cl2萃取。将有机层用饱和NaCl(水溶液)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。利用Biotage快速硅胶柱色谱纯化，用10-20％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱得到白色固体状产物(1.8g，37％)，m.p.180.5-180.6℃。M+H1＝327.1。
1H NMR(CDCl3)δ8.48(t，2H)，8.43(s，1H)，8.36(d，1H)，7.77(m，2H)，6.83(d，1H)，3.89(t，4H)，3.80(t，4H)。CHN分析计算值％C62.48，％H4.63，％N17.15，％Cl10.85。实测值％C62.32，％H4.58，％N16.99，％Cl10.81。将该固体用于制备实施例2。
实施例3(4-叔丁基-苯基)-{4-[2-(4-三氟甲基-哌啶-1-基)-嘧啶-4-基]-异喹啉-1-基}-胺向(4-叔丁基苯基)-[4-(2-氯嘧啶-4-基)-异喹啉-1-基]胺(0.07g，1.80×10-4m)的正丁醇(30mL)溶液中加入4-三氟甲基哌啶(0.07g，4.57×10-4m)和三乙基胺(0.50mL)。将混合物在100℃下加热16小时，然后冷却至室温。将混合物真空浓缩，然后溶于二氯甲烷(75mL)。将有机相用碳酸氢钠的饱和溶液、盐水洗涤，用硫酸镁干燥，然后浓缩得到油状物。将该油状物通过快速色谱纯化(SiO275％己烷/25％乙酸乙酯)。将浅黄色油状物收集并用乙醚结晶，m.p.179-180℃。CHN分析计算值％C68.89；％H5.98；％N13.85。实测值％C68.91；％H5.73；％N13.73。
3a)(4-叔丁基-苯基)-异喹啉-1-基-胺向带有磁力搅拌器的1L圆底烧瓶中加入100mL正丁醇和9.5mL(110.2mmol)浓HCl。向其中加入2-氯异喹啉(15.01g；91.74mmol)和16.6mL4-叔丁基苯胺(14.94g，100.1mmol)。将混合物在70℃下加热3小时。真空蒸发正丁醇，然后将形成的糖浆状混合物与戊烷混合。滤出所形成的白色固体并干燥。将该固体溶于乙酸乙酯和二氯甲烷，然后用碳酸氢钠调至弱碱性。将有机层干燥并浓缩得到20g(78.9％)白色固体状的(4-叔丁基-苯基)-异喹啉-1-基-胺。MS 277.2m+1(100％)。
1H NMR(DMSO)；δ8.08(d，1H)，7.90(d，3H)，7.72(d，1H)，7.57(m，4H)，7.37(d，2H)，1.32(s，9H)。
3b)(4-溴-异喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺在1L圆底烧瓶中将(4-叔丁基-苯基)-异喹啉-1-基-胺(18.7g，67.7mmol)与100mL THF混合，然后在冰浴中冷却。在2小时内向其中滴加溶于200mL THF的苯基三甲基三溴化铵(25.12g，66.47mmol)。将反应液升温至室温过夜。将反应混合物在搅拌下倒入2L己烷中。将该固体过滤，干燥并溶于二氯甲烷。将溶液用2×250mL饱和碳酸氢钠溶液洗涤，然后用1×250mL水洗涤。将有机溶液干燥并浓缩。将该固体与己烷混合，过滤，干燥得到近黄色固体状的19.8g(82.3％)(4-溴-异喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺。MS 355M+(100％)。
1H NMR(DMSO)；δ8.23(s，1H)，8.08(d，1H)，7.73(t，1H)，7.56(m，3H)，7.38(d，2H)，7.07(bs，1H)，1.33(s，9H)。
3c)(4-硼酸-异喹啉-1-基)-(4-叔丁基苯基)-胺向-74℃的(4-溴-异喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺(10.3g，29.0mmol)的无水THF(130mL)溶液中在1小时内滴加n-BuLi(2.5M的己烷溶液，30.0mL，75.0mmol)。滴加硼酸三异丙酯(8.0mL，34.7mmol)，然后将混合物在-74℃下搅拌4.5小时。升温至室温后，通过注射器用20mL水终止反应。浓缩至含水混合物后，将反应液用1N HC1(水溶液)酸化至pH约为1，得到白色固体。将固体产物通过过滤收集并干燥(6.74g，73％)。
1H NMR(DMSO-d6)；δ11.59(s，1H)，8.95(d，1H)，8.72(d，1H)，8.61(宽s)，8.01(t，1H)，7.82(t，1H)，7.76(s，1H)，7.62(d，2H)，7.50(d，2H)，1.36(s，9H)；MS 321.3m/z(M+H)。
3d)(4-叔丁基-苯基)-[4-(2-氯嘧啶-4-基)-异喹啉-1-基]-胺在一个大的密封试管中将2，4-二氯嘧啶(1.54g，10.3mmol)和(4-硼酸-异喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺(3.00g，9.37mmol)在45mL乙二醇DME中混合。加入PdCl2(PPh3)2催化剂(0.66g，0.94mmol)和3.0M Na2CO3水溶液(12.5mL，37.5mmol)，然后向溶液中通入N2气泡5分钟。然后将反应混合物在85-90℃下加热2.5小时。冷却后，除去溶剂并将水(15mL)加入到该混合物中。将产物用CH2Cl2(3×200mL)萃取，用饱和NaCl(水溶液)(3×200mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过快速柱色谱纯化(15-20％乙酸乙酯的己烷溶液)，然后用EtOAc/己烷重结晶得到纯净的绿色产物(1.81g，4.66mmol)，收率为50％。m.p.257.3-258.4℃。CHN分析计算值％C71.04，％H5.44，％N14.41，％Cl9.12。实测值％C70.80，％H5.60，％N14.35，％Cl8.99。
1H NMR(DMSO-d6)；δ9.58(s，1H)，8.80(d，1H)，8.64(d，1H)，8.50(d，1H)，8.35(s，1H)，7.90(d，1H)，7.82(t，1H)，7.76(d，2H)，7.71(t，1H)，7.39(d，2H)，1.31(s，9H)；MS 389.2，387.3m/z(M+H，M-H)。
实施例4[4，7’]联异喹啉-1-基-(4-叔丁基-苯基)-胺将1-氯-[4，7′]联异喹啉(5.0g，17.2mmol)、4-叔丁基苯胺(4.0mL，1.5当量)和4.0M HCl/二烷(6.45mL/1.5当量)的EtOH(100mL)悬浮液在80℃下在密封试管中搅拌20小时。然后将反应混合物冷却，浓缩得到黄色油。向该油中加入EtOAc并用3N NaOH中和。分离出有机相，干燥(MgSO4)，然后浓缩得到粗产物。将该粗产物通过硅胶纯化。依次用9∶1己烷/EtOAc和4∶1己烷/EtOAc洗脱。分离得到黄色固体状纯产物4.5g(65％)；m.p.217-219℃。
1H NMR(DMSO-d6)δ9.40(s，1H)，9.31(s，1H)，8.67(d，1H)，8.57(d，1H)，8.24(s，1H)，8.09(d，1H)，8.04(s，1H)，7.92(m，2H)，7.80(m，2H)，7.73(m，2H)，7.37(d，2H)，1.31(s，9H)；MS 404.21m/z(M+H)。
4a)1-氯-[4，7′]联异喹啉将4-溴-1-氯异喹啉(参见实施例2d)(5.0g，20.7mmol)的150mL THF溶液冷却至-78℃。滴加n-BuLi(1.6M的己烷溶液)(15mL，24mmol)并将反应温度维持在-78℃～-68℃。将反应混合物在-78℃下搅拌30分钟。将ZnBr2(在80℃下真空干燥)(6.5g，24.9mmol)溶于50mL THF，然后在-78℃下将其缓慢转移到上述混合物中。将溶液在-78℃下搅拌40分钟，然后通过移去冷却浴升温至室温。加入Pd(PPh3)4(2.4g，2.1mmol)，然后加入三氟甲磺酸异喹啉-7-基酯(5.7g，20.7mmol)的50mL THF溶液。将反应混合物在60℃下加热30分钟，然后浓缩。将形成的油状物溶于二氯甲烷，用饱和NaHCO3洗涤。分离出有机相，干燥(MgSO4)，浓缩得到黄色固体。将固体通过过滤收集，依次用乙醚和己烷洗涤，然后真空干燥。得到5.68g(94％)黄色固体。m.p.169.0-169.6℃。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.44(s，1H)；8.61(d，1H，J＝5.6Hz)；8.45-8.43(m，1H)；8.40(s，1H)；8.34(s，1H)；8.18(d，1H，J＝8.1Hz)；7.97-7.90(m，5H)ppm。API-MS，m/z 291.14([M+H]+，计算值291.06)。
实施例52-{4-[1-(4-叔丁基-苯基氨基)-异喹啉-4-基]-嘧啶-2-基氨基}-乙醇将(4-叔丁基-苯基)-[4-(2-氯嘧啶-4-基)-异喹啉-1-基]-胺9(参见化合物3d)(20mg，0.0515mmol)和2-羟基乙基胺(50mg)溶于正丁醇，然后在80℃下在密封试管中加热16小时。加入10mL DCM并将溶液用NH4Cl(10mL)、水和盐水洗涤。进行有机色谱(SiO2，10-60％EtOAc-己烷梯度洗脱)得到产物(21mg，99％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)；δ8.31(d，J＝9.0Hz，1H)，8.21(d，J＝6.0Hz，1H)，7.98(s，1H)，7.62(t，J＝6.0Hz，1H)，7.53(t，J＝6.0Hz，1H)，7.45(d，J＝9.0Hz，2H)，7.31(d，J＝9.0Hz，2H)，6.77(d，J＝6.0Hz，1H)，3.64(t，J＝6.0Hz，1H)，3.47(t，J＝6.0Hz，1H)，1.24(s，9H)。HRMS ESI m/z 414.2277(M+H+，C25H27ON5要求414.2294).HPLC，C18反相柱，梯度10-90％MeCN-H2O UV-250nM，保留时间9.41分钟。
实施例6(4-叔丁基-苯基)-(4-喹唑啉-6-基-异喹啉-1-基)-胺在密封试管中将NaH(60％)(0.62g，15.52mmol)加入到4-叔丁基-苯胺(1.16g，7.76mmol)的75mL THF溶液中，然后在室温下搅拌30分钟。加入6-(1-氯-异喹啉-4-基)-喹唑啉(1.5g，5.18mmol)。将反应混合物在80℃下加热4小时。然后用水终止反应。将反应混合物用DCM萃取。将合并的有机相用硫酸钠干燥并浓缩。将残余物用DCM和EtOAc重结晶得到0.8g黄色固体。将母液进一步通过色谱纯化(25-50％EA/H)得到0.5g黄色固体。通过NMR证明这两种固体均为所需产物。收率是62％。将产物用NMR、MS、m.p进行表征。
1H NMR(DMSO，500MHz)；δ9.68(s，1H)，9.35(s，1H)，9.32(s，1H)，8.66(d，J＝8.4771Hz，1H)，8.28(s，1H)，8.18-8.13(m，2H)，9.05(s，1H)，7.82-7.18(m，3H)，7.38(s，2H)，1.31(s，9H)；m.p.213-214.5℃。API-MS m/z405.15([M+H]+，计算值405.20)。
6a)6-碘喹唑啉向喹唑啉(2.1g，16.13mmol)的浓H2SO4(16mL)溶液中在0℃下加入NIS(5.4g，24mmol)。将反应混合物搅拌10分钟，然后升温至室温并搅拌15小时。补加NIS(2.0g.8.9mmol)并将混合物继续搅拌5小时。将反应混合物倒在碎冰(80g)上，然后搅拌1小时。将溶液过滤，用浓NH3水将pH调节至7，然后在0℃下继续搅拌1小时，然后将其过滤，用冰冷的水洗涤。将固体风干得到3.4g(87％)所需产物。
1H NMR(400MHz，DMSO)；δ9.57(s，1H)，9.43(s，1H)，8.65(s，1H)，8.29(d，J＝8.0Hz，1H)，7.81(d，J＝8.0Hz，1H)，MS ESI m/z 256M+H+，C6H3IN4。
6b)6-(1-氯-异喹啉-4-基)-喹唑啉将4-溴-1-氯-异喹啉(参见化合物2d)(4.74g，19.52mmol)的300mLTHF溶液冷却至-72℃。滴加n-BuLi(2.5M的己烷溶液)(9.37mL，23.42mmol)并将反应温度在-70℃～-68℃下维持30分钟。将ZnBr2(4.84mg，21.47mmol)溶于50mL THF，然后在-70℃下将其缓慢转移到上述混合物中。将溶液在-70℃下搅拌20分钟，然后升温至室温。将Pd(PPh3)4(2.25g，1.95mmol)和6-碘喹唑啉(5g，19.52mmol)的4mL THF溶液按顺序滴加到反应混合物中。然后将反应混合物在60℃下加热30分钟，然后在室温下保持过夜。将反应混合物用NH4Cl终止反应，然后用乙酸乙酯萃取。通过过滤收集白色固体(4.0g)。将有机溶液用饱和NH4Cl、盐水洗涤，然后用硫酸钠干燥。将溶液浓缩至有白色固体从溶液中析出。将该固体通过过滤收集，用乙醚洗涤并真空干燥。得到1.53g固体。收率是97.6％。
1H NMR(DMSO，400MHz)；δ9.73(s，1H)，9.40(s，1H)，8.48-8.44(m，1H)，8.42(s，1H)，8.40(s，1H)，8.21(s，3H)，7.96-7.9(m，3H)。API-MS m/z292.02([M+H]+，计算值292.06)。
实施例7[4，7′]联异喹啉-1-基-(2-叔丁基-嘧啶-5-基)-胺在密封试管中将NaH(60％的油状液)(0.60g，15.2mmol)加入到5-氨基-2-叔丁基嘧啶(1.14g，7.6mmol)的75mL THF溶液中，然后在室温下搅拌30分钟。然后一次性加入1-氯-[4，7′]联异喹啉(参见化合物4a)(2.0g，6.9mmol)。将反应液在110℃下加热18小时，冷却，用水终止反应，然后真空除去挥发物。将残余物溶于DCM，用水和盐水洗涤。将有机相用硫酸钠干燥，真空除去挥发物。将残余物通过硅胶色谱纯化(25-50％EtOAc的己烷溶液)得到1.53g(55％)浅黄色固体；m.p.231.1-232.0℃。
1H NMR(300MHz，CDCl3)；δ9.34(s，1H)；9.19(s，2H)；8.60(d，1H，J＝5.7Hz)；8.09-8.13(m，3H)；7.98(d，1H，J＝8.3Hz)；7.83-7.91(m，2H)；7.77(d，1H，J＝5.7Hz)；7.68-7.71(m，2H)；7.15(s，1H)；1.48(s，9H)ppm。API-MS，m/z 406.15([M+H]+，计算值406.19)。
实施例8(4-叔丁基-2-氟-苯基)-[4-(2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-异喹啉-1-基]-胺按照实施例2所述的方法将4-叔丁基-2-氟-苯基胺偶联到1-氯-4-(2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-异喹啉上API-MS，m/z 458.50([M+H]+，计算值458.22)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.51(d，1H，J＝7.54Hz)，8.42(m，2H)，8.36(s，1H)，8.02(d，1H，J＝7.91Hz)，7.70(m，1H)，7.63(m，1H)，7.46(d，1H，J＝3.01Hz)，7.21(m，2H)，6.84(d，1H，J＝5.27Hz)，3.89(m，4H)，3.80(t，4H，J＝4.71Hz)1.33(s，9H)。
8a)N-(4-叔丁基-2-氟-苯基)-乙酰胺将N-(4-叔丁基-苯基)-乙酰胺(191mg，1mmol)和1-氯甲基-4-氟-1，4-二氮杂二环[2.2.2]辛烷二-(四氟硼酸盐)(355mg，1mmol)的乙腈(10mL)溶液在N2气氛下回流16小时。将反应液冷却并真空除去挥发物。将残余物用CH2Cl2(20mL)稀释，用H2O(10mL)、饱和NaHSO4(10mL)、盐水(10mL)洗涤，然后用Na2SO4干燥。将干燥剂过滤并真空除去挥发物。将残余物通过硅胶色谱纯化(5％EtOAc的己烷溶液)得到白色结晶状的70mg N-(4-叔丁基-2-氟-苯基)-乙酰胺；mp 163.5-164.7℃。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.02(t，1H，J＝8.02Hz)，7.46(br s，1H)，7.05-6.97(m，2H)，2.12(s，3H)，1.20(s，9H)。
8b)4-叔丁基-2-氟-苯基胺将N-(4-叔丁基-2-氟-苯基)-乙酰胺(70mg，0.33mmol)溶于EtOH(2mL)和1N HCl(10mL，0.01mmol)，然后加热回流72小时。将反应液冷却至室温并真空除去挥发物。将留下的水溶液用1×5mL Et2O洗涤，用饱和NaHCO3碱化，用3×5mL CH2Cl2萃取。将有机萃取液合并，然后用Na2SO4干燥。除去挥发物得到30mg(54％)黄色油状产物4-叔丁基-2-氟-苯基胺。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.00(m，1H)，6.94(m，1H)，6.71(m，1H)，3.59(br s，2H)，1.26(s，9H)。
实施例9(6-叔丁基-吡啶-3-基)-[4-(2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-异喹啉-1-基]-胺按照实施例2所述的方法将6-叔丁基-吡啶-3-基胺偶联到1-氯-4-(2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-异喹啉上API-MS，m/z 441.44([M+H]+，计算值441.23)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.72(d，1H，J＝2.64Hz)，8.51(d，1H，J＝7.91Hz)，8.43(d，1H，J＝4.90Hz)，8.32(s，1H)，8.24(dd，1H，J＝8.48，2.83Hz)，8.03(d，1H，J＝8.29Hz)，7.72(t，1H，J＝7.16Hz)，7.63(t，1H，J＝6.97Hz)，7.39(d，1H，J＝8.67Hz)，7.28(s，1H)，6.83(d，1H，J＝4.90Hz)，3.84(m，8H)，1.40(s，9H)。
9a)N′-(6-叔丁基-吡啶-3-基)-肼盐酸盐将N′-(6-叔丁基-吡啶-3-基)-肼二甲酸叔丁酯(Tet.Lett.2000，41，3025-3028)(2.45g，6.7mmol)的异丙醇(100mL)和4.0M HCl/二烷(16.7mL，67mmol)溶液加热回流18小时，然后冷却并用乙醚(200mL)研制。将沉淀出的产物过滤，用25mL无水乙醚洗涤，然后干燥得到浅黄色固体状的1.2g(88％)标题化合物；mp 210.1-212.6℃。API-MS，m/z 166.18([M+H]+，计算值166.13)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.45(d，1H，J＝2.53Hz)，8.08(dd，1H，J＝9.10，2.53Hz)，7.93(d，1H，J＝9.1Hz)，1.44(s，9H)。
9b)6-叔丁基-吡啶-3-基胺将锌粉(3.13g，48mmol)一次性加入到N′-(6-叔丁基-吡啶-3-基)-肼盐酸盐(1.2g，6.0mmol)的甲醇(30mL)和4M HCl/二烷(12mL，48mmol)溶液中，然后将该溶液在室温下搅拌2天，直至消耗尽原料肼。通过旋转蒸发除去挥发物，然后将残余物用40mL 28％氨水处理。然后将产物用乙醚(3×30mL)萃取，与盐水一起振荡，用Mg2SO4干燥并过滤。除去挥发物得到橙色固体状的0.802g(89％)产物；mp 61.5-62.7℃。API-MS，m/z 151.16([M+H]+，计算值151.11)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.07(d，1H，J＝2.64Hz)，7.12(d，1H，J＝8.29Hz)，6.94(dd，1H，J＝8.48，2.83Hz)，3.55(s，2H)，1.32(s，9H)。
实施例10[4，7′]联异喹啉-1-基-(6-叔丁基-吡啶-3-基)-胺按照实施例7所述的方法将6-叔丁基-吡啶-3-基胺偶联到1-氯-[4，7′]联异喹啉上。API-MS，m/z 405.17([M+H]+，计算值405.20)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.32(s，1H)，8.80(s，1H)，8.59(d，1H，J＝5.65Hz)，8.33(d，1H，J＝5.63Hz)，8.13(s，2H)，8.08(s，1H)，7.96(d，1H，J＝8.69)，7.85(m，2H)，7.75(d，1H，J＝5.65Hz)，7.67(m，2H)，7.41(d，1H，J＝8.67)，1.41(s，9H)。
实施例11[4，7′]联异喹啉-1-基-(5-异丙烯基-吡啶-2-基)-胺将5-异丙烯基-吡啶-2-基胺与1-氯-[4，7′]联异喹啉按照实施例7所述的方法反应。
11a)2-(6-氟-吡啶-3-基)-丙-2-醇将5-溴-2-氟-吡啶(5.0g，28.4mmol)的乙醚(300mL)溶液冷却至-78℃，然后在搅拌下滴加2.5M n-BuLi的己烷溶液(11.9mL，29.8mmol)。将反应继续搅拌15分钟，然后滴加丙酮(10.4mL，142mmol)。将反应液升温至室温，然后用饱和NH4Cl(5mL)终止反应。将反应液用饱和NH4Cl(50mL)、H2O(50mL)、盐水(50mL)洗涤，然后用MgSO4干燥。将干燥剂过滤，真空除去挥发物得到澄清油状的4.1g(93％)产物2-(6-氟-吡啶-3-基)-丙-2-醇。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.32(d，1H，J＝2.26)，7.93(m，1H)，6.89(dd，1H，J＝8.85，2.83)，1.26(s，6H)。
11b)2-氟-5-异丙烯基-吡啶将2-(6-氟-吡啶-3-基)-丙-2-醇(8.3g，53.5mmol)和p-TSA一水合物(0.46g，2.7mmol)的甲苯(500mL)溶液用Dean-Stark分离器和冷凝器回流至收集到理论量的水。然后将反应液冷却，用饱和NaHCO3(3×50mL)萃取。除去挥发物得到淡黄色油状的7.30g(99％)产物。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.21(d，1H，J＝2.53)，7.77(m，1H)，6.81(dd，1H，J＝8.34，2.78)，5.28(s，1H)，5.09(s，1H)，2.08(s，3H)。
11c)5-异丙烯基-吡啶-2-基胺将2-氟-5-异丙烯基-吡啶(6.3g，45.9mmol)的二烷(30mL)溶液和浓氢氧化铵(178mL，1.37mol)一起在玻璃压力瓶中于150℃下加热48小时。然后将反应液冷却，用Et2O(3×100mL)萃取。将萃取液合并，用盐水洗涤(100mL)，用MgSO4干燥并过滤。除去挥发物，将残余物通过硅胶色谱纯化(50％EtOAc的己烷溶液)。将含有产物的级分合并，真空除去挥发物得到无色油状的3.6g(58％)产物。API-MS，m/z 135.14([M+H]+，计算值135.08)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.19(d，1H，J＝1.88)，7.58(dd，1H，J＝8.67，2.26)，6.47(d，1H，J＝8.67)，5.25(s，1H)，4.46(br s，2H)，2.10(s，3H)。
实施例12[4，7′]联异喹啉-1-基-(5-异丙基-吡啶-2-基)-胺将5-异丙基-吡啶-2-基胺与1-氯-[4，7′]联异喹啉按照实施例7所述的方法反应。
12a)5-异丙基-吡啶-2-基胺向5-异丙烯基-吡啶-2-基胺(1.2g，8.9mmol)的乙醇(30mL)溶液中加入100mg 10％Pd/C，然后将形成的悬浮液在氢气氛下(1atm)剧烈搅拌18小时。然后将反应液通过硅藻土过滤，除去挥发物得到无色油状的1.0g(82％)产物。API-MS，m/z 137.14([M+H]+，计算值137.10)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.94(d，1H，J＝2.26)；7.32(dd，1H，J＝8.48，2.45)；6.47(d，1H，J＝7.91)；4.27(br s，2H)；4.46(br s，2H)；2.81(m，1H)；1.21(d，6H，J＝6.78)。
实施例134-(2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-异喹啉-1-基胺向压力瓶中加入1-氯-4-(2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-异喹啉(658mg，2.0mmol)、浓NH4OH(10mL)和二烷(10mL)。将压力瓶密封，然后在120℃下加热24小时。冷却后，将反应混合物浓缩然后与水混合，过滤，将固体在高真空下干燥。收率541mg(88％)；mp 254.8-255.8℃。
13C NMR(100MHz，CDCl3)δ165.31，161.62，158.97，158.42，144.74，134.53，130.79，125.94，124.66，124.59，118.80，116.79，109.86，66.37，44.36。
实施例144-甲氧基-N-[4-(2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-异喹啉-1-基]-苯甲酰胺将4-(2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-异喹啉-1-基胺和4-甲基吗啉(36μL，0.327mmol)的80％THF/DMA溶液在冰浴中冷却，然后滴加对茴香酰氯(46μL，0.326mmol)。将反应混合物升温至室温，与水混合，用CH2Cl2萃取，用Na2SO4干燥并过滤。将残余物通过快速色谱用100％CH2Cl2至20％EtOAc/CH2Cl2纯化。收率14.6mg(10.1％)MS 442.15M+1，440.16M-1。
实施例15(4-叔丁基-苯基)-[4-(4-吗啉-4-基-喹唑啉-6-基)-异喹啉-1-基]-胺向微波反应瓶中加入(4-硼酸-异喹啉-1-基)-(4-叔丁基苯基)-胺(120.9mg，0.38mmol，1.2当量)、K2CO3(128.7mg，0.93mmol，3当量)、6-溴-4-吗啉-4-基-喹唑啉(92.5mg，0.31mmol，1当量)和4∶1 DME∶H2O(5mL)。向该混合物中通入氮气。加入PdCl2(PPh3)2(47.8mg，0.068mmol，0.22当量)并将该瓶密封。将其在微波加热下于120℃加热30分钟。将残余物与CH2Cl2混合，然后用盐水洗涤。将有机相用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过快速色谱用EtOAc/CH2Cl2纯化。收率40.1mg(26.4％)490.4M+1，488M-1。
13C NMR(75MHz，CDCl3)δ163.58，153.04，151.60，149.99，145.16，140.5，136.23，134.63，134.17，129.34，127.5，125.69，124.92，124.40，124.07，123.5，121.0，119.71，17.18，115.82，65.72，49.70，49.26，33.33，30.41。
实施例16(4-叔丁基-苯基)-[4-(2-甲基氨基-嘧啶-4-基)-异喹啉-1-基]-胺将(4-叔丁基-苯基)-[4-(2-氯嘧啶-4-基)-异喹啉-1-基]-胺(20mg，0.0515mmol)、MeNH2HCl(4.2mg，1.2当量)和Et3N(10mg)的正丁醇溶液在80℃下在密封试管中加热16小时。将反应混合物用CH2Cl2(10mL)稀释，将溶液用NaHCO3(10mL)、H2O(10mL)和盐水(10mL)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，浓缩得到油状物。进行色谱分离(SiO2，10-60％EtOAc-己烷梯度洗脱)得到产物(21mg，99％)。HRMS ESI m/z 384.2158(M+H+，要求384.2188)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.44(d，J＝6.0Hz，1H)，8.32(d，J＝6.0Hz，1H)，8.25(s，1H)，7.91(d，J＝9.0Hz，1H)，7.62(t，J＝6.0Hz，1H)，7.53(d，J＝9.0Hz，2H)，7.51(m，1H)，7.34(d，J＝9.0Hz，2H)，6.75(d，J＝3.0Hz，1H)，5.16(bro，1H)，2.99(d，J＝3.0Hz，2H)，1.27(s，9H)。
实施例17(4-叔丁基-苯基)-[4-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-异喹啉-1-基]-胺将3c(4-硼酸-异喹啉-1-基)-(4-叔丁基苯基)-胺(1.1g，1.5当量)、4-氯-2-甲硫基-嘧啶(161mg，1.0当量)和Pd(PPh3)4(0.1当量)的DME(10mL)溶液用Na2CO3(2M，5mL)处理，然后回流1.5小时。将溶液冷却至室温，然后真空除去DME。将残余物用CH2Cl2和H2O处理。将有机萃取液合并，干燥(MgSO4)，然后浓缩得到油状物。进行色谱分离(SiO2，40％EtOAc-己烷)得到浅黄色固体状的(4-叔丁基-苯基)-[4-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-异喹啉-1-基]-胺(600mg，65％)。MS ESI m/z 368.20(M+H)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.34(d，J＝6.0Hz，1H)，8.38(d，J＝9.0Hz，1H)，8.29(d，J＝9.0Hz，1H)，8.08(s，1H)，7.69(t，J＝6.0Hz，1H)，7.61(d，J＝9.0Hz，1H)，7.54(d，J＝6.0Hz，2H)，7.49(d，J＝3.0Hz，1H)，7.38(d，J＝6.0Hz，1H)，2.73(bro，3H)，1.32(s，9H)。
实施例18[4-(4-苄氧基-喹唑啉-6-基)-异喹啉-1-基]-(2-叔丁基-嘧啶-5-基)-胺将NaH(18mg，0.66mmol，4当量)加入到5-氨基-2-叔丁基嘧啶(37mg，0.25mmol，1.5当量)的THF(1mL)溶液中，然后将形成的悬浮液搅拌30分钟。将4-苄氧基-6-(1-氯-异喹啉-4-基)-喹唑啉(65mg，0.164mmol，1当量)加入到该溶液中并在80℃下加热4小时。加入CH2Cl2(5mL)，将溶液用H2O和盐水洗涤。进行色谱分离(SiO2，10-60％EtOAc-己烷梯度洗脱)得到产物[4-(4-苄氧基-喹唑啉-6-基)-异喹啉-1-基]-(2-叔丁基-嘧啶-5-基)-胺(39mg，46％)。MS/ESI，M+1＝513.19。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.18(s，2H)，8.81(s，1H)，8.37(d，J＝8.0Hz，1H)，8.04(d，J＝8.0Hz，2H)，7.98(s，1H)，7.90(d，J＝8.0Hz，1H)，7.66(m，2H)，7.57(m，1H)，7.51(d，J＝4.0Hz，2H)，7.38(d，J＝8.0Hz，2H)，7.35(m，1H)，5.60(s，2H)，1.43(s，9H)。
18a)4-苄氧基-6-碘-喹唑啉将NaH(152mg，5.7mmol，1.5当量)加入到苄基醇(820mg，7.6mmol，2当量)的DMF(10mL)溶液中，然后将形成的悬浮液搅拌30分钟。然后将4-氯-6-碘-喹唑啉(1.1g，3.8mmol，1当量)加入到该溶液中，将反应混合物在100℃下加热4小时。加入CH2Cl2(50mL)并将溶液用H2O和盐水洗涤。进行色谱分离(SiO2，10-60％EtOAc-己烷梯度洗脱)得到4-苄氧基-6-碘-喹唑啉(1.21g，88％)。MS/ESI，M+1＝362.88。
18b)4-苄氧基-6-(1-氯-异喹啉-4-基)-喹唑啉将4-溴-1-氯-异喹啉(802mg，3.31mmol)的THF(20mL)溶液冷却至-72℃。滴加n-BuLi(2.5M的己烷溶液)(1.6mL，3.97mmol)，然后将反应温度在-70℃下维持30分钟。将ZnBr2(900mg，4.2mmol)溶于THF(6mL)，然后在-70℃下将其缓慢转移到上述混合物中。将溶液在-70℃下搅拌40分钟，然后升温至室温。将Pd(PPh3)4(400mg，0.36mmol)的THF(6mL)溶液和4-苄氧基-6-碘-喹唑啉(1.2g，3.31mmol)的THF(4mL)溶液滴加到反应混合物中。将溶液在60℃下加热30分钟，然后在室温下静置过夜。将反应混合物用乙酸乙酯稀释，用饱和NH4Cl和盐水洗涤，然后用硫酸钠干燥。将溶液浓缩至从溶液中沉淀白色固体。将该固体通过过滤收集，用乙醚洗涤并真空干燥。得到600mg 4-苄氧基-6-(1-氯-异喹啉-4-基)-喹唑啉。收率为46％。MS/ESI+，M+1＝397.96。
实施例19(4-甲硫基-苯基)-[4-(6-吗啉-4-基-吡嗪-2-基)-异喹啉-1-基]-胺将NaH(11mg，0.4mmol，4当量)加入到4-甲硫基-苯基胺(17mg，0.12mmol，1.2当量)的THF(1mL)溶液中，然后将形成的悬浮液搅拌30分钟。然后加入1-氯-4-(6-吗啉-4-基-吡嗪-2-基)-异喹啉(33mg，0.1mmol，1当量)并将反应混合物在80℃下加热4小时。加入CH2Cl2(5mL)并将溶液用H2O和盐水洗涤。进行色谱分离(SiO2，10-60％EtOAc-己烷梯度洗脱)得到标题化合物(33mg，99％)。MS/ESI，M+1＝430.17。
1H NMR(400MHz，CDCl3)8.35(d，J＝12.0Hz，1H)，8.29(s，1H)，8.20(s，1H)，8.13(s，1H)，8.00(d，J＝8.0Hz，1H)，7.98(s，1H)，7.90(d，J＝8.0Hz，1H)，7.69(t，J＝8.0Hz 2H)，7.65(d，J＝8.0Hz，2H)，7.61(t，J＝8.0Hz 1H)，7.34(d，J＝8.0Hz，2H)，3.86(t，J＝4.0Hz 4H)，3.65(t，J＝8.0Hz，4H)，2.50(s，3H)。
19a)4-(6-溴-吡嗪-2-基)-吗啉将PBr3(11g，36.9mmol，5.5当量)在室温下加入到2，6-二氯-吡嗪(1.0g，6.7mmol，1当量)中，然后在150℃下加热24小时。将该溶液真空干燥，将残余物溶于CH2Cl2(50mL)。将有机液用H2O、盐水洗涤，然后干燥。将吗啉于0℃下加入到该溶液中，然后在5小时内升温至室温。将溶液用H2O和盐水洗涤。进行色谱分离(SiO2，10-60％EtOAc-己烷梯度洗脱)得到产物4-(6-溴-吡嗪-2-基)-吗啉(0.5g，31％)。MS/ESI，M+1＝246.01。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.99(s，1H)，7.95(s，1H)，3.82(t，J＝4.0Hz，4H)，3.58(t，J＝4.0Hz，4H)。
19b)1-氯-4-(6-吗啉-4-基-吡嗪-2-基)-异喹啉将4-溴-1-氯-异喹啉(400mg，1.65mmol)的THF(20mL)溶液冷却至-72℃。滴加n-BuLi(2.5M的己烷溶液)(0.80mL，2mmol)并将反应温度在-70℃～-68℃下维持30分钟。将ZnBr2(408mg，1.91mmol)溶于THF(6mL)，然后在-70℃下将其缓慢转移到上述混合物中。将溶液在-70℃下搅拌40分钟，然后通过除去冷却浴而升温至室温。将Pd(PPh3)4(190mg，0.164mmol)的6ml THF溶液和4-(6-溴-吡嗪-2-基)-吗啉(400mg，1.65mmol)的THF(4mL)溶液滴加到反应混合物中，然后将溶液在60℃下加热30分钟，然后在室温下静置过夜。将反应混合物用乙酸乙酯稀释，用饱和NH4Cl和盐水洗涤，然后用硫酸钠干燥。将溶液浓缩至白色固体从溶液中析出。将固体通过过滤收集，用乙醚洗涤并真空干燥。得到300mg 1-氯-4-(6-吗啉-4-基-吡嗪-2-基)-异喹啉。收率为56％。MS/ESI+，M+1＝327。
实施例20(4-叔丁基-苯基)-[8-氯-4-(2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-异喹啉-1-基]-胺将(4-叔丁基-苯基)-[8-氯-4-(2-氯-嘧啶-4-基)-异喹啉-1-基]-胺(15mg，0.03mmol)与吗啉(10mL)混合，然后在80℃下加热1小时。将溶液真空浓缩，然后通过硅胶柱纯化。收率10mg，60％的收率。MS473。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.42，8.40(d，2H)，8.36(d，2H)，8.26(s，1H)，7.65-7.41(m，5H)，3.88-3.78(m，8H)，1.34(s，9H)。
20a)1，8-二氯-异喹啉向8-氯-异喹啉(J.Org.Chem.1977，42(19)，3208-9.)(11g，54mmol)的CH2Cl2(200mL)溶液中分几批加入MCPBA(25g，112mmol)。搅拌3小时后加入乙醚(400mL)，然后加入己烷(1L)。将溶液搅拌过夜并真空浓缩，加入乙醚(200mL)和己烷(400mL)，搅拌过夜。将沉淀过滤，风干，然后与20gPCl5和甲苯(150mL)混合。将溶液加热回流3小时，用NaHCO3中和。将溶液用CH2Cl2萃取。将有机层用硫酸钠干燥并真空浓缩得到8g(72％)1，8-二氯-异喹啉。MS198。
20b)(4-叔丁基-苯基)-(8-氯-异喹啉-1-基)-胺将1，8-二氯-异喹啉(8g，39mmol)的丁醇(8mL)溶液、HCl(4N的二烷溶液，6mL)和4-叔丁基-苯基胺(6g，40mmol)在70℃下加热20分钟，真空浓缩，然后加入NaHCO3溶液。用EtOAc萃取，然后将有机层真空浓缩，通过硅胶柱纯化。得到3.6g(30％)(4-叔丁基-苯基)-(8-氯-异喹啉-1-基)-胺。MS310。
20c)(4-溴-8-氯-异喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺向冰冷的(4-叔丁基-苯基)-(8-氯-异喹啉1-基)-胺(3.6g，7mmol)的THF(20mL)溶液中分几批加入Me3PhNBr3(2.88g，7.6mmol)。然后除去冰浴并将溶液升温至室温，15分钟后加入NaHCO3溶液。用EtOAc萃取，然后真空浓缩得到2.6g(89％)(4-溴-8-氯-异喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺。MS388。
20d)(4-硼酸-8-氯-异喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺将(4-溴-8-氯-异喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺(1.6g，2.88mmol)的THF(20mL)溶液冷却至-78℃，然后滴加n-BuLi(1.6M的己烷溶液，3.9mL)。将溶液在-78℃下静置1小时，然后除去冷却浴，将反应混合物缓慢升温至室温。在室温下搅拌30分钟后加入水(1mL)，将溶液真空浓缩。将HCl(50mL，1M)加入到粗油中并搅拌4小时。然后将溶液倾析，加入乙醚以形成沉淀物。然后将沉淀物过滤并风干，得到611mg(60％)(4-硼酸-8-氯-异喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺。MS354。
20e)(4-叔丁基-苯基)-[8-氯-4-(2-氯-嘧啶-4-基)-异喹啉-1-基]-胺将(4-硼酸-8-氯-异喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺(100mg，0.28mmol)、2，4-二氯-嘧啶(41.4mg，0.28mmol)、PdCl2(PPh3)2的DME(2mL)溶液和Na2CO3(2mL，1M溶液)在密封试管中于80℃下加热1小时，用CH2Cl2萃取，通过硅胶柱纯化得到31mg，26％的收率。MS422。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.45(s，1H)，8.67(d，2H)，8.39(d，2H)，8.27(s，2H)，7.66-7.60(m，3H)，1.35(s，9H)。
实施例21(4-叔丁基-苯基)-[6-氟-4-(2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-异喹啉-1-基]-胺将脱气的(4-叔丁基-苯基)-[6-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-异喹啉-1-基]-胺、2，4-二氯嘧啶(117mg，0.785mmol)、K2CO3(291mg，2.141mmol)和Pd(PPh3)4的DME(3mL)溶液在60℃下加热过夜。将水加入到该混合物中，然后用Et2O萃取。将有机层通过硅胶垫过滤，将溶液浓缩得到油状物。然后将该油状物溶于吗啉(1mL)并在80℃下加热过夜。将混合物浓缩并通过制备型TLC和制备型HPLC纯化(35％-65％CH3CN/水的0.1％TFA溶液)。将级分通过饱和NaHCO3游离碱化，用EtOAc萃取得到棕色固体(6mg)。M+H+＝458.25。
1H NMR(500MHz，DMSO)δ1.31(s，9H)，3.70(m，4H)，3.77(m，4H)，7.02(d，1H，J＝5.14Hz)，7.38(d，2H，J＝8.44Hz)，7.59(m，1H)，7.72(d，2H，J＝8.80Hz)，8.30(m，2H)，8.47(d，1H，J＝5.14Hz)，8.72(dd，1H，J＝5.87，9.17Hz)，9.51(s，1H)。
21a)1-氯-6-氟-异喹啉将6-氟-2H-异喹啉-1-酮(PCT/GB02/00514；WO 02/062816)(1.3g，7.97mmol)和POCl3(3.7g，23.9mmol)在CH3CN(20mL)和4N HCl/二烷(2mL)中的溶液在50℃下加热过夜。将反应混合物用NaHCO3溶液稀释，用EtOAc萃取。将有机层浓缩得到橙色固体(1.1g，78％)。M+H+＝181.8。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.42(m，2H)，8.26(m，3H)。
21b)(4-叔丁基-苯基)-(6-氟-异喹啉-1-基)-胺将1-氯-6-氟-异喹啉(1g，6.13mmol)和4-叔丁基-苯胺(1.1g，6.74mmol)在n-BuOH(20mL)和4N HCl/二烷(1mL)中的溶液在80℃下加热过夜。将混合物浓缩，将残余物用饱和NaHCO3碱化并用EtOAc萃取。将有机层干燥，浓缩，通过硅胶柱纯化(己烷至10％EtOAc/己烷)得到黄色固体(900mg，56％)。M+H+＝295.3。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.29(s，9H)，7.13(d，1H，J＝6Hz)，7.34(d，2H，J＝8.67Hz)，7.50(m，1H)，7.60(dd，1H，J＝2.64，9.8Hz)7.72(d，2H，J＝8.67Hz)，7.96(d，1H，J＝5.65Hz)，8.61(dd，1H J＝5.46，9.23Hz)，9.16(s，1H)。
21c)(4-溴-6-氟-异喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺将(4-叔丁基-苯基)-(6-氟-异喹啉-1-基)-胺(2.17g，7.37mmol)和PhMe3NBr3(2.93g，7.81mmol)的THF(30mL)溶液在0℃下搅拌30分钟。蒸发THF并将固体溶于CH2Cl2和水(每次均为200mL)。将有机层用水(2×50mL)和盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩得到浅棕色固体(2.75g，99％)。M+H+＝375.2。
1H NMR(300MHz，DMSO)1.29(s，9H)，7.36(d，2H，J＝8.67Hz)，7.65(dd，4H，J＝7.35，8.85Hz)，8.17(s，1H)，8.70(dd，1H，J＝5.27，9.42Hz)，9.38(s，1H)。
21d)(4-叔丁基-苯基)-[6-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-异喹啉-1-基]-胺将脱气的(4-溴-6-氟-异喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺(500mg，1.34mmol)、二(频那醇)二硼(748mg，2.93mmol)、KOAc(391mg，4.019mmol)和Pd(pddf)Cl2的DMF(10mL)溶液在80℃下加热过夜。将水加入到该混合物中并用乙醚萃取。将乙醚层通过硅胶垫过滤，然后旋转蒸发得到棕色固体。M+H+＝421.3。该固体不经进一步纯化即可用于下一步骤。
实施例22(4-叔丁基-苯基)-[6-氯-4-(2-氯-嘧啶-4-基)-异喹啉-1-基]-胺该化合物通过与实施例21相类似的顺序制得。
MS4221H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.66(d，1H)，8.59(s，1H)，8.38(d，1H)，8.25(s，1H)，8.72(d，1H)，7.6-7.5(m，5H)，1.34(s，9H)。
实施例23(4-叔丁基-苯基)-[6-氯-4-(2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-异喹啉-1-基]-胺该化合物通过与实施例21相类似的顺序制得。
MS4731H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.65(m，1H)，8.37-8.32(m，2H)，8.15(s，1H)，7.55-7.51(m，3H)，7.39(d，2H)，6.86(d，2H)。
实施例24将氰尿酰氯(1.8g，10mmol)和DME(20mL)冷却至0℃，然后缓慢加入原料胺(3.3mmol)。然后除去冰浴，将溶液升温至室温并搅拌过夜。然后将溶液真空浓缩，将固体与(4-硼酸-异喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺(3.3mmol)、PdCl2(PPh3)2(144mg)、DME(6mL)和Na2CO3(1M溶液，5.4mL)混合，然后在80℃下加热2小时。分离出有机层，真空浓缩，然后通过反相HPLC系统纯化。分离收率5％。
(4-叔丁基-苯基)-[4-(4-氯-6-吗啉-4-基-[1，3，5]三嗪-2-基)-异喹啉-1-基]-胺MS475.1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.11(d，1H)，8.55，(s，1H)，8.00(d，1H)，7.81-7.76(m，1H)，7.41-7.36(m，1H)，7.32(d，2H)，7.19(d，2H)，3.94-3.73(m，8H)，1.25(s，9H)。
(4-叔丁基-苯基)-{4-[4-氯-6-(2，6-二甲基-吗啉-4-基)-[1，3，5]三嗪-2-基]-异喹啉-1-基}-胺MS5031H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.02(d，1H)，8.37(s，1H)，8.21(d，1H)，7.81-7.76(m，1H)，7.49-7.44(m，1H)，7.29(d，2H)，7.13(d，2H)，4.60-4.56(m，2H)，3.59-3.54(m，2H)，2.27-2.62(m，2H)，1.23-1.20(m，15H)。
4-{4-[1-(4-叔丁基-苯基氨基)-异喹啉-4-基]-6-氯-[1，3，5]三嗪-2-基}-哌嗪-1-甲酸乙酯MS5461H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.08(d，1H)，8.57(s，1H)，7.97(d，1H)，7.79-7.74(m，1H)，7.61-7.59(m，1H)，7.33(d，2H)，7.20(d，2H)，4.17-4.10(q，2H)，3.93-3.86(m，4H)，3.55(b，4H)，1.25-1.18(m，12H)。
(4-叔丁基-苯基)-[4-(4-氯-6-硫代吗啉-4-基-[1，3，5]三嗪-2-基)-异喹啉-1-基]-胺MS4911H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.07(d，1H)，8.49(s，1H)，8.06(d，1H)，7.80-7.75(m，1H)，7.60(m，1H)，4.18(b，4H)，2.67(b，4H)，1.24(s，9H)。
实施例25(4-叔丁基-苯基)-[4-(6-吗啉-4-基-吡嗪-2-基)-异喹啉-1-基]-胺按照Suzuki偶联反应的一般方法(实施例1)制得。M+H+＝440.2。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.37(s，1H)，8.61(d，J＝8.29Hz，1H)，8.34(s，1H)，8.28(d，J＝7.91Hz，1H)，8.16(d，J＝8.67Hz，2H)，7.75(m，3H)，7.67(t，J＝7.91Hz，1H)，7.37(d，J＝8.67Hz，2H)，3.75(m，4H)，3.60(m，4H)，1.31(s，9H)。
25a)4-(6-氯-吡嗪-2-基)-吗啉将2，6-二氯-吡嗪(2g，13.4mmol)和吗啉(4.7g，56.7mmol)的CH3CN(50mL)溶液搅拌过夜。滤出白色固体，将溶液减压浓缩。将残余物通过短硅胶柱进一步纯化得到白色固体状产物(2g，75％)。M+H+＝200.13。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.29(s，1H)，7.9(s，1H)，3.70(m，4H)，3.54(m，4H)。
实施例26(4-叔丁基-苯基)-[4-(2-吗啉-4-基-噻唑-4-基)-萘-1-基]-胺按照Suzuki偶联反应的一般方法(实施例1)制得。M+H+＝445.21。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.24(s，1H)，8.56(d，J＝7.54Hz，1H)，8.35(d，J＝8.29Hz，1H)，8.12(s，1H)，7.75(m，3H)，7.64(t，J＝7.54Hz，1H)7.35(d，J＝8.67Hz，2H)，7.04(s，1H)，3.76(m，4H)，3.44(m，4H)，1.30(s，9H)。
26a)4-(4-氯-噻唑-2-基)-吗啉将噻唑烷-2，4-二酮(0.5g，4.27mmol)和POCl3(2mL，21mmol)在CH3CN(20mL)和4N HCl/二烷(1mL)中的溶液在70℃下加热过夜。将混合物倒在冰水中并用饱和NaHCO3中和，然后用EtOAc萃取。将有机层干燥，浓缩，用吗啉(1.8g，21mmol)处理。将混合物在室温下搅拌过夜。将混合物用EtOAc稀释，用水(3×50mL)和盐水(50mL)洗涤。将EtOAc相减压浓缩，通过硅胶色谱纯化得到产物(126mg，15％)。M+H+＝205.6。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ6.81(s，1H)，3.69(m，4H)，3.35(m，4H)。
实施例27(4-叔丁基-苯基)-[4-(2-吗啉-4-基-1H-咪唑-4-基)-异喹啉-1-基]-胺将吗啉-4-基甲脒氢溴化物(40mg，0.189mmol)、K2CO3(32mg，0.227mmol)和2-溴-1-[1-(4-叔丁基-苯基氨基)-异喹啉-4-基]-乙酮(30mg，0.076mmol)的DMF(1mL)悬浮液在室温下搅拌30分钟，然后用水稀释，用Et2O萃取。将有机相干燥，浓缩，通过制备型TLC进一步纯化，用5％MeOH的EtOAc溶液展开。收集橙色带(Rf＝0.394)，用EtOAc萃取得到浅黄色化合物(20mg，60％)。M+H+＝335.1764。
1H NMR(300MHz.CD3OD)δ8.37(d，J＝7.91Hz，1H)，8.12(d，J＝7.91Hz，1H)，7.89(s，1H)，7.71(t，J＝7.72Hz，1H)，7.61(t，J＝7.54Hz，1H)，7.52(d，J＝9.04Hz，2H)，7.40(d，J＝8.67Hz，2H)，6.87(s，1H)，3.82(m，4H)，3.35(m，4H)，1.34(s，9H)。
27a)1-[1-(4-叔丁基-苯基氨基)-异喹啉-4-基]-2-羟基-乙酮向(4-溴-异喹啉-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺(500mg，1.407mmol)的无水THF(50mL)溶液中于-78℃下加入2.5M BuLi的己烷溶液(1.407mL，2.62mmol)。在相同的温度下搅拌1小时后，将混合物缓慢升温至-40℃。将反应混合物冷却至-78℃，然后缓慢加入(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-乙酸甲酯(460mg，2.11mmol)的THF(5mL)溶液。将混合物在相同的温度下搅拌2小时，然后在40℃下加热2小时。将反应液冷却至室温，用5mL饱和NH4Cl终止反应。将溶液真空浓缩，向混合物中加入水和EtOAc，然后用EtOAc萃取，用水(20mL)和盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥。将溶液浓缩，通过快速柱进一步纯化(100％己烷至40％EtOAc的己烷溶液)得到黄色固体(155mg，33％)。M+H+＝335.1764。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.76(s，1H)，8.99(d，J＝8.67Hz，1H)，8.69(s，1H)，8.60(d，J＝7.91Hz，1H)，7.84(t，J＝7.16Hz，1H)，7.72(d，J＝8.67Hz，2H)，7.67(d，J＝7.16Hz，1H)，7.40(d，J＝8.67Hz，2H)，4.96(t，J＝5.84Hz，1H)，4.75(d，J＝5.28Hz，2H)，1.31(s，9H)。
27b)2-溴-1-[1-(4-叔丁基-苯基氨基)-异喹啉-4-基]-乙酮将1-[1-(4-叔丁基-苯基氨基)-异喹啉-4-基]-2-羟基-乙酮(25mg，0.075mmol)在CH2Cl2中形成悬浮液，依次加入PPh3(59mg，0.224mmol)和CBr4(74mg，0.224mmol)。将混合物搅拌过夜。将混合物上样到制备型TLC板上，然后用CH2Cl2展开。收集黄色带(Rf＝0.5)并用EtOAc萃取得到黄色固体(15mg，50％)。M+H+＝335.1764。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.99(s，1H)，9.07(d，J＝8.29Hz，1H)，8.98(s，1H)，8.73(d，J＝8.29Hz，1H)，7.88(m，3H)，7.72(t，J＝7.16Hz，1H)，7.47(d，J＝9.04Hz，2H)，4.95(s，2H)，1.34(s，9H)。
实施例28(4-叔丁基-苯基)-{4-[2-(四氢-吡喃-4-基)-嘧啶-4-基]-异喹啉-1-基}-胺将4-氯醛吡喃于室温下滴加到Mg(66mg，95％，2.6mmol)的THF(5mL)悬浮液中，然后将溶液加热回流2小时。冷却至室温后，将该溶液于-78℃下转移到化合物(4-叔丁基-苯基)-[4-(2-氯-嘧啶-4-基)-异喹啉-1-基]-胺(50mg，013mmol)的THF溶液中。然后将溶液在4小时内升温至室温。加入CH2Cl2(10mL)并将溶液用H2O和盐水洗涤。进行色谱分离(SiO2，10-60％EtOAc-己烷梯度洗脱)得到产物(15mg，26％)。MS ESI m/z 437(M+H+)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.76(d，J＝6.0Hz，1H)，8.51(d，J＝6.0Hz，1H)，8.34(s，1H)，8.01(d，J＝9.0Hz，1H)，7.73(t，J＝9.0Hz，1H)，7.65(m，3H)，7.43(m，3H)，4.15(m，1H)，4.11(m，1H)，3.25(m，1H)，3.19，2.38(s，3H)，1.26(d，J＝3.0Hz，6H)。
实施例29(4-异丙基-苯基)-[4-(2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-[2，6]萘啶-1-基]-胺将脱气的(4-硼酸-[2，6]萘啶-1-基)-(4-异丙基-苯基)-胺(400mg，1当量)、4-(4-溴-嘧啶-2-基)-吗啉(300mg，1.2当量)、PdCl2(PPh3)2(0.1当量)在DME(5mL)和Na2CO3(2M，5mL)中的溶液加热回流1.5小时。真空除去DME，将残余物溶于CH2Cl2(20mL)。用H2O和盐水洗涤后，将该有机溶液干燥(MgSO4)，然后浓缩得到油状物。进行色谱分离(SiO2，40％EtOAc-己烷)得到浅黄色固体状的(4-异丙基-苯基)-[4-(2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-[2，6]萘啶-1-基]-胺(200mg，47％)。HRMS ESI m/z 427.2275(M+H+，C25H27ON6要求427.2246)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ10.06(s，1H)，8.75(d，J＝6.0Hz，1H)，8.48(t，J＝3.0Hz 1H)，7.75(d，J＝6.0Hz，1H)，7.64(d，J＝9.0Hz，2H)，7.31(d，J＝9.0Hz，2H)，6.90(d，J＝3.0Hz 1H)，3.92(m，4H)，3.94(m，4H)，2.96(m，1H)，1.30(d，J＝6.0Hz，6H)。
29a)(4-异丙基-苯基)-[2，6]萘啶-1-基-胺将HCl/二烷溶液(4N，2.18mL)加入到1-氯-[2，6]萘啶(J.HetercyclicChem.，18，1349(1981)和4-异丙基苯胺的正丁醇(5mL)溶液中，然后将形成的溶液在80℃下加热4小时，然后蒸发至干。将残余物溶于CH2Cl2(20mL)，用饱和NaHCO3(20mL)、H2O(1×10mL)和盐水(1×10mL)洗涤。将有机液干燥(Na2SO4)并浓缩。进行色谱分离(SiO2，20-80％EtOAc-己烷梯度洗脱)得到(4-异丙基-苯基)-[2，6]萘啶-1-基-胺(1.0g，48％)。MS ESI m/z264.15(M+H+)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.21(s，1H)，8.09(d，J＝6.0Hz，1H)，8.25(d，J＝6.0Hz，1H)，7.69(d，J＝6.0Hz，1H)，7.63(d，J＝9.0Hz，2H)，7.28(d，J＝9.0Hz，2H)，7.21(d，J＝6.0Hz，1H)，7.12(s，1H)，2.95(m，1H)，1.29(d，J＝6.0Hz，6H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)δ152.4，144.8，143.4，127.4，121.3，114.4，111.1，77.6，34.0，24.5。
29b)(4-溴-[2，6]萘啶-1-基)-(4-异丙基-苯基)-胺将三甲基苯基三溴化铵(1.03g，2.74mmol)在0℃下加入到(4-异丙基-苯基)-[2，6]萘啶-1-基-胺(680mg，2.58mmol)的THF(10mL)溶液中。将溶液升温至室温并搅拌1小时。将THF蒸发至干，将残余物溶于CH2Cl2(20mL)。将溶液用H2O(1×10mL)和盐水(1×10mL)洗涤。将有机液干燥(Na2SO4)并浓缩至2mL。进行色谱分离(SiO2，20-80％EtOAc-己烷梯度洗脱)得到(4-溴-[2，6]萘啶-1-基)-(4-异丙基-苯基)-胺(650mg，74％)。MS ESIm/z 342(M+H+)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.54(s，1H)，8.80(d，J＝6.0Hz，1H)，8.34(s，1H)，7.67(d，J＝6.0Hz，1H)，7.59(d，J＝6.0Hz，2H)，7.29(d，J＝9.0Hz，2H)，7.14(s，1H)，2.95(m，1H)，1.29(d，J＝6.0Hz，6H)。
29c)(4-硼酸-[2，6]萘啶-1-基)-(4-异丙基-苯基)-胺将BuLi的己烷溶液(1.1mL，2.57mmol，2.5当量)溶液在-78℃下加入到(4-溴-[2，6]萘啶-1-基)-(4-异丙基-苯基)-胺(350mg，1当量，1.02mmol)的THF(10mL)溶液中。将反应溶液用B(O-iPr)3(0.31mL，1.3当量)处理，然后在5小时内升温至23℃。将溶液0.5mL H2O终止反应，然后真空干燥。将残余物用4N HCl(2mL)处理，有浅黄色固体沉淀析出。将固体过滤，用1N HCl洗涤，干燥得到粗产物(4-硼酸-[2，6]萘啶-1-基)-(4-异丙基-苯基)-胺(400mg)。
实施例304-[1-(4-叔丁基-苯基氨基)-异喹啉-4-基]-嘧啶-2-甲腈将(4-叔丁基-苯基)-[4-(2-氯-嘧啶-4-基)-异喹啉-1-基]-胺(25mg，0.064mmol)、KCN(8.4mg.2当量)、PdCl2(PPh3)4(5mg)和Et3N(10mg)的DMF(1mL)溶液在80℃下加热4小时。加入10ml DCM，将溶液用NH4Cl(10mL)、H2O和盐水洗涤。进行色谱分离(SiO2，10-60％EtOAc-己烷梯度洗脱)得到标题化合物(24mg，99％)。MS ESI m/z 380.20(M+H)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.89(d，J＝6.0Hz，1H)，8.48(t，J＝9.0Hz，2H)，8.24(s，1H)，8.00(d，J＝6.0Hz，1H)，7.81(t，J＝6.0Hz，1H)，7.70(d，J＝6.0Hz，1H)，7.60(d，J＝9.0Hz，2H)，7.45(d，J＝9.0Hz，2H)，1.36(s，9H)。
生物学实施例利用杆状病毒表达系统从昆虫细胞纯化具有人类序列的活性B-Raf、C-Raf和V599E B-Raf蛋白。Raf抑制作用在涂有IκB-α并用Superblock封闭的96-孔微板中进行试验。利用磷-IκB-α特异性抗体(Cell Signaling#9246)、抗-小鼠IgG碱性磷酸酶结合的二级抗体(Pierce #31320)和碱性磷酸酶底物ATTOPHOS(Promega，#S101)检测IκB-α在丝氨酸36的磷酸化作用。
表2和3中的下列化合物抑制野生型C-Raf的IC50为0.05mmol/L至4.0mmol/L，和/或抑制突变型B-Raf(V599E)的IC50为0.08mmol/L至4.0mmol/L。
表2


































表3
实施例A人B-Raf基因中T1796A突变的检测检测引物GATTTTGGTCTAGCTACAGA次级引物GACTTTCTAGTAACTCAGCAG基因DNA利用GENELUTE哺乳动物基因DNA试剂盒(Sigma Cat.#G1N 350)由人类黑素瘤细胞系分离得到。PCR反应在PCR机(MJ Research，PTC100型)上以总体积50mL进行，使用Roche的PCR Core试剂盒(Cat.#1578553)。PCR反应混合物含有5mL 10x反应缓冲液，1mL 10mMdNTPs，100-1000ng模板DNA，0.5mL Taq聚合酶(2.5-5单位)，1mL 31μM各引物的储备液。
PCR条件如下95℃ 3分钟 72℃ 10分钟4℃扩增后，将8mL PCR反应混合物与2mL核酸样本载入缓冲液(BioRadCat.#161-0767)混合。将10mL样本加到含有0.3μg/mL溴化乙锭(PierceCat.#17898)的1.5％琼脂糖(GIBCO-BRL Cat.#15510-027)凝胶上。将分子量标准物(100bp DNA梯，来自Invitrogen Cat.#10380-012)加到相邻的泳道内。通过在TAE缓冲液中电泳分离出DNA(0.04M Tris-乙酸，0.01MEDTA，0.02M冰乙酸，pH 8.4)(Roche Cat.#1666690)。电泳条件是在120伏下保持30-40分钟。分离后，将凝胶置于UV光下并用AlphaImager 2000记录系统拍照。
通常可在凝胶中检测到两个谱带。快速移动的谱带在100bp标志线的前面，其代表引物。由T1796A突变特异性PCR扩增产生的DNA具有152bp的预测大小，并且移动在100bp标准物和200bp标准物之间。PCR扩增产物通过测序进行确认。PCR扩增产物的存在表明T1796A突变存在于模板DNA中。PCR扩增产物的缺乏表明组织样本中不存在突变。
其它B-RAF突变通过该方法利用下表中关于突变所示的检测引物和次级引物进行检测
权利要求
1.式(I)化合物其中n是0-2；r是0-2m是0-4；J是未取代的或者被Q取代一次或两次，其中J是芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基，其中芳基是含有6-14个碳原子的芳香族基团，诸如苯基、萘基、芴基和菲基；杂芳基是含有4-14个、特别是5-7个环原子、其中1、2或3个环原子彼此独立地选自N、S和O的芳香族基团，诸如呋喃基、吡喃基、吡啶基、1，2-、1，3-和1，4-嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、三唑基、唑基、喹唑啉基、咪唑基、吡咯基、异唑基、异噻唑基、吲哚基、异二氢吲哚基、喹啉基、异喹啉基、嘌呤基、噌啉基、萘啶基、2，3-二氮杂萘基、异苯并呋喃基、色烯基、嘌呤基、噻蒽基、呫吨基、吖啶基、咔唑基和吩嗪基；环烷基是含有3-8个、优选5-6个环原子的饱和环状基团，诸如环丙基、环戊基和环己基；杂环烷基是含有3-8个、优选5-6个环原子、其中1、2或3个环原子彼此独立地选自N、S和O的饱和环状基团，诸如哌啶基、哌嗪基、咪唑烷基、吡咯烷基和吡唑烷基；Q是选自下列的在1或2个碳原子上的取代基卤素、未取代的或取代的低级烷基、-OR2、-SR2、-N(R)R、-NRS(O)2N(R)R、-NRS(O)2R、-S(O)R2、-S(O)2R2、-OCOR2、-C(O)R2、-CO2R2、-NR-COR2、-CON(R2)R2、-S(O)2N(R2)R2、氰基、三甲基硅烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的杂芳基，诸如取代或未取代的咪唑基和取代或未取代的吡啶基、未取代的或取代的环烷基、未取代的或取代的杂环烷基，诸如取代或未取代的哌啶基、取代或未取代的piperazolyl、取代或未取代的四氢吡喃基和取代或未取代的氮杂环丁烷基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-杂芳基、-C1-4烷基-杂环基、氨基、单-或二-取代的氨基、杂芳基-芳基；R是H、低级烷基或低级烷氧基-烷基；R2是未取代的或取代的烷基、未取代的或取代的环烷基、未取代的或取代的苯基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-杂芳基或-C1-4烷基-杂环烷基；X是键、Y、-N(R)-、-O-、-S-、砜、亚砜、磺酰胺、酰胺或1，3-亚脲基，优选-NH-、-NHC(O)-、-NHC(O)NH-；Y是H、低级烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的环烷基或取代或未取代的杂环烷基；并且Z是氨基、单-或二-取代的氨基、卤素、烷基、取代的烷基、羟基、醚化的或酯化的羟基、硝基、氰基、羧基、酯化的羧基、烷酰基、氨基甲酰基、N-单-或N，N-二-取代的氨基甲酰基、脒基、胍基、巯基、磺基、苯硫基、苯基-低级烷硫基、烷基苯硫基、苯基亚磺酰基、苯基-低级烷基亚磺酰基、烷基苯基亚磺酰基、苯基磺酰基、苯基-低级烷基磺酰基或烷基苯基磺酰基，并且其中，如果存在一个以上的基团Z(m≥2)，则取代基Z相同或不同；或者其中一个或多个N原子带有氧原子的上述化合物的N-氧化物；或其可药用盐。
2.式(Ia)化合物或其N-氧化物或可药用盐 其中r是0-2；n是0-2；m是0-4；A、B、D、E和T均为CH或CQ或者A、B、D和E均为CH或CQ且T是N或者B、D、E和T均为CH或CQ且A是N或者A、B、T和E均为CH或CQ且D是N或者A、B、D，和T均为CH或CQ且E是N或者A、B和D均为CH或CQ且E和T是N或者B、E，和T均为CH或CQ且A和D均为N或者A、D和T均为CH或CQ且B和E均为N或者A和D均为CH或CQ且B、E和T均为N；Q是选自下列的在1或2个碳原子上的取代基卤素、未取代的或取代的低级烷基、-OR2、-SR2、-N(R)R、-NRS(O)2N(R)R、-NRS(O)2R、-S(O)R2、-S(O)2R2、-OCOR2、-C(O)R2、-CO2R2、-NR-COR2、-CON(R2)R2、-S(O)2N(R2)R2、氰基、三甲基硅烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的杂芳基诸如取代或未取代的咪唑基和取代或未取代的吡啶基、未取代的或取代的环烷基、未取代的或取代的杂环烷基，诸如取代或未取代的哌啶基、取代或未取代的piperazolyl、取代或未取代的四氢吡喃基和取代或未取代的氮杂环丁烷基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-杂芳基、-C1-4烷基-杂环基、氨基、单-或二-取代的氨基、杂芳基-芳基；R是H、低级烷基或低级烷氧基-烷基；R2是未取代的或取代的烷基、未取代的或取代的环烷基、未取代的或取代的苯基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-杂芳基或-C1-4烷基-杂环烷基；X是键、Y、-N(R)-、-O-、-S-、砜、亚砜、磺酰胺、酰胺或1，3-亚脲基，优选-NH-、-NHC(O)-、-NHC(O)NH-；Y是H、低级烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的环烷基或取代或未取代的杂环烷基；并且Z是氨基、单-或二-取代的氨基、卤素、烷基、取代的烷基、羟基、醚化的或酯化的羟基、硝基、氰基、羧基、酯化的羧基、烷酰基、氨基甲酰基、N-单-或N，N-二-取代的氨基甲酰基、脒基、胍基、巯基、磺基、苯硫基、苯基-低级烷硫基、烷基苯硫基、苯基亚磺酰基、苯基-低级烷基亚磺酰基、烷基苯基亚磺酰基、苯基磺酰基、苯基-低级烷基磺酰基或烷基苯基磺酰基，并且，如果存在一个以上的基团Z(m≥2)，则取代基Z相同或不同。
3.权利要求2所述的化合物或其N-氧化物或可药用盐，其中r是0-2；n是0或1；m是0或1；A、B、D和E均为CH或CQ且T是N或者A、B、T和E均为CH或CQ且D是N或者A、B和D均为CH或CQ且E和T均为N；Q是选自下列的在1或2个碳原子上的取代基卤素、未取代的或取代的低级烷基、-OR2、-SR2、-NR2、-NRS(O)2N(R)2、-NRS(O)2R、-S(O)R2、-S(O)2R2、-OCOR2、-C(O)R2、-CO2R2、-NR-COR2、-CON(R2)2、-S(O)2N(R2)2、氰基、三甲基硅烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的杂芳基、未取代的或取代的环烷基、未取代的或取代的杂环烷基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-杂芳基、-C1-4烷基-杂环基、氨基、单-或二-取代的氨基；R是H或低级烷基，R2是未取代的或取代的烷基、未取代的或取代的环烷基、苯基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-杂芳基或-C1-4烷基-杂环烷基；X是-NR-、-O-或-S-；Y是未取代的或者被选自下列的一个或两个相同或不同的取代基所取代的苯基氨基；低级烷酰基氨基、卤素、低级烷基、卤代-低级烷基、羟基；低级烷氧基、苯基-低级烷氧基和氰基，或者与前述取代基二者择一地或额外地，低级链烯基、C8-12烷氧基、低级烷氧基羰基、氨基甲酰基、低级烷基氨基甲酰基、低级烷酰基、卤代-低级烷氧基、低级烷氧基羰基、低级烷基巯基、卤代-低级烷基巯基、羟基-低级烷基、低级烷基磺酰基、卤代-低级烷基磺酰基、苯基磺酰基、二羟基硼(-B(OH)2)和低级亚烷基二氧基，或者Y是吡啶基；并且Z是卤素；氨基；N-低级烷基氨基；羟基-低级烷基氨基；苯基-低级烷基氨基；N，N-二-低级烷基氨基；N-苯基-低级烷基-N-低级烷基氨基；N，N-二-低级烷基苯基氨基；低级烷酰基氨基；或选自苯甲酰基氨基和苯基-低级烷氧基羰基氨基的取代基，其中在所有情况下的苯基均是未取代的或者被硝基或者氨基取代，或者还被卤素、氨基、N-低级烷基氨基、N，N-二-低级烷基氨基、羟基、氰基、羧基、低级烷氧基羰基、低级烷酰基或者被氨基甲酰基所取代。
4.权利要求3所述的化合物或其N-氧化物或可药用盐其中r是0-2；n是0或1；m是0或1；A、B、D和E均为CH或CQ且T是N，或者A、B和D均为CH或CQ且E和T均为N；Q与A、与D或与A和D成键，并且选自氟、氯或溴、甲基、乙基、丙基；羟基、甲氧基、乙氧基、2-羟基乙氧基、2-甲氧基乙氧基、(2-(1H-咪唑-1-基)乙氧基、羟基亚氨基甲基、乙酰基、甲酰基、甲基巯基或氨基、N-甲基氨基、N-乙基氨基、N-正丙基-或N-异丙基氨基、2-氰基乙基氨基、3-(甲氧基苯基)氨基、3-(4-吗啉基)丙基氨基、3-(吡啶基)甲基氨基、2-(2-吡啶基)乙基氨基、4-(1H-咪唑-1-基)丁基氨基、4-(三氟甲氧基苯基)氨基)、(甲基氨基磺酰基)氨基、(甲基磺酰基)氨基、(四氢-2H-吡喃-4-基)氨基、(四氢-2H-吡喃-4-基)甲基氨基、(四氢-3-呋喃基)氨基、(2-(1H-咪唑-1-基)乙基)氨基、2-羟基乙基氨基、(2-甲氧基乙基)甲基氨基、2-(2-羟基乙氧基)乙基氨基、螺烷、1-氮杂环丁烷基、3-乙氧基羰基-1-氮杂环丁烷基、3-羧基-1-氮杂环丁烷基、四氢-2H-1，3-嗪基、二氢-1，2，5-噻嗪-5(6H)-基、四氢-1(2H)-嘧啶基)、3-(乙酰基四氢)-1(2H)-嘧啶基、哌嗪基、4-(2-羟基乙基)-1-哌嗪基、4-(乙氧基羰基)-1-哌嗪基、4-乙酰基-1-哌嗪基、哌啶基、4-(三氟甲基)-1-哌啶基、4-(二氟甲基)-1-哌啶基、4-(苯基甲基)-1-哌啶基、4-苯氧基-1-哌啶基、4-氰基-1-哌啶基、4-甲氧基-1-哌啶基、4-乙氧基羰基-1-哌啶基、4-羟基-1-哌啶基、4-羧基-1-哌啶基、4-(氨基羰基)-1-哌啶基、4-甲硫基-1-哌啶基、4-甲基磺酰基-1-哌啶基、(四氢-2H-吡喃-4-基)氧基、4-吗啉基、3，5-二甲基吗啉基或2-苯基-4-吗啉基；R是H或甲基；X是-NR-、-O-或-S-；Y是未取代的或者被选自下列的一个或两个相同或不同的取代基所取代的苯基氨基；乙酰基氨基；氟、氯或溴；叔丁基、甲基、乙基或丙基；三氟甲基；羟基；甲氧基、乙氧基；苄氧基；氰基或者(与前述取代基二者择一地或额外地)乙烯基、C8-12烷氧基、叔丁氧基羰基、氨基甲酰基、N-甲基-氨基甲酰基或N-叔丁基-氨基甲酰基、乙酰基、苯基氧基、三氟甲氧基、1，1，2，2-四氟乙基氧基、乙氧基羰基、甲基巯基、三氟甲基巯基、羟基甲基、甲磺酰基、三氟甲磺酰基、苯基磺酰基、二羟基硼(-B(OH)2)、2-甲基-嘧啶-4-基、唑-5-基、2-甲基-1，3-二氧戊环-2-基、1H-吡唑-3-基、1-甲基-吡唑-3-基、连接到两个相邻碳原子上的亚甲基二氧基，或者Y是吡啶基、2-、3-或4-氨基苯基、2-、3-或4-乙酰基氨基苯基、2-、3-或4-氟苯基、2-、3-或4-氯苯基、2-、3-或4-溴苯基、2，3-、2，4-、2，5-或3，4-二氯苯基、氯-氟-苯基、4-氯-2-氟苯氨基、2-、3-或4-甲基苯基、2-、3-或4-乙基苯基、2-、3-或4-丙基苯基、甲基-氟-苯基、2-、3-或4-三氟甲基苯基、2-、3-或4-羟基苯基、2-、3-或4-甲氧基苯基、2-、3-或4-乙氧基苯基、甲氧基-氯-苯基、2-、3-或4-苄氧基苯基、2-、3-或4-氰基苯基、2-、3-或4-甲基苯基、4-氯-5-三氟甲基苯基、3-溴-5-三氟甲基苯基、3，5-二甲基苯基、4-甲基-3-碘苯基、3，4-二(三氟甲基)苯基、3-溴-4-乙基-苯基或3-氯苄基苯基；并且Z是卤素、氨基、N-低级烷基氨基、羟基-低级烷基氨基、苯基-低级烷基氨基、N，N-二-低级烷基氨基、N-苯基-低级烷基-N-低级烷基氨基；N，N-二-低级烷基苯基氨基、低级烷酰基氨基或选自苯甲酰基氨基和苯基-低级烷氧基羰基氨基的取代基，其中在所有情况下的苯基均是未取代的或者被硝基或氨基取代，或者还被卤素、氨基、N-低级烷基氨基、N，N-二-低级烷基氨基、羟基、氰基、羧基、低级烷氧基羰基、低级烷酰基或氨基甲酰基所取代。
5.权利要求2所述的化合物或其N-氧化物或可药用盐其中r是1；n是0；m是0；B、D、E和T是CH或CQ且A是N或者A、B、D和E均为CH或CQ且T是N；Q是选自下列的在1或2个碳原子上的取代基氟、氯、甲基、乙基、丙基；氨基、N-甲基氨基、N-乙基氨基、N-正丙基氨基、N-异丙基氨基、2-氰基乙基氨基、3-(甲氧基苯基)氨基、3-(4-吗啉基)丙基氨基、3-(吡啶基)甲基氨基、2-(2-吡啶基)乙基氨基、4-(1H-咪唑-1-基)丁基氨基、4-(三氟甲氧基苯基)氨基)、(甲基氨基磺酰基)氨基、(甲基磺酰基)氨基、(四氢-2H-吡喃-4-基)氨基、(四氢-2H-吡喃-4-基)甲基氨基、(四氢-3-呋喃基)氨基、(2-(1H-咪唑-1-基)乙基)氨基、2-羟基乙基氨基、2-(2-羟基乙氧基)乙基氨基、四氢-1(2H)-嘧啶基、3-(乙酰基四氢)-1(2H)-嘧啶基、哌嗪基、4-(2-羟基乙基)-1-哌嗪基、4-(乙氧基羰基)-1-哌嗪基、4-乙酰基-1-哌嗪基、哌啶基、4-(三氟甲基)-1-哌啶基、4-(二氟甲基)-1-哌啶基、4-(苯基甲基)-1-哌啶基、4-苯氧基-1-哌啶基、4-氰基-1-哌啶基、4-甲氧基-1-哌啶基、4-乙氧基羰基-1-哌啶基、4-羟基-1-哌啶基、4-羧基-1-哌啶基、4-(氨基羰基)-1-哌啶基、4-甲硫基-1-哌啶基、4-甲基磺酰基-1-哌啶基、4-吗啉基、3，5-二甲基吗啉基或2-苯基-4-吗啉基；R是H或甲基，X是-NH-；并且Y是未取代的或者被选自下列的一个或两个相同或不同的取代基所取代的苯基氟、氯、溴；低级烷基、三氟甲基；4-氯苯基、2-、3-或4-甲基苯基、4-氯-5-三氟甲基苯基、3-溴-5-三氟甲基苯基、3，5-二甲基苯基；4-甲基-3-碘苯基、3，4-二(三氟甲基)苯基或3-溴-4-乙基-苯基。
6.权利要求2所述的化合物或其N-氧化物或可药用盐其中r是1；n是0；m是0；A、B、D和E均为CH或CQ且T是N；Q是选自下列的在一个碳原子上的取代基氨基、N-甲基氨基、N-乙基氨基、N-正丙基氨基、N-异丙基氨基、2-氰基乙基氨基、3-(甲氧基苯基)氨基、3-(4-吗啉基)丙基氨基、3-(吡啶基)甲基氨基、2-(2-吡啶基)乙基氨基、4-(1H-咪唑-1-基)丁基氨基、4-(三氟甲氧基苯基)氨基)、(甲基氨基磺酰基)氨基、(甲基磺酰基)氨基、(四氢-2H-吡喃-4-基)氨基、(四氢-2H-吡喃-4-基)甲基氨基、(四氢-3-呋喃基)氨基、(2-(1H-咪唑-1-基)乙基)氨基、2-羟基乙基氨基、2-(2-羟基乙氧基)乙基氨基、哌啶基、4-(三氟甲基)-1-哌啶基、4-(二氟甲基)-1-哌啶基、4-(苯基甲基)-1-哌啶基、4-苯氧基-1-哌啶基、4-氰基-1-哌啶基、4-甲氧基-1-哌啶基、4-乙氧基羰基-1-哌啶基、4-羟基-1-哌啶基、4-羧基-1-哌啶基、4-(氨基羰基)-1-哌啶基、4-甲硫基-1-哌啶基、4-甲基磺酰基-1-哌啶基或吗啉基；R是H；X-NH-；并且Y是未取代的或者被下列基团所取代的苯基氯、甲基、三氟甲基、异丙基、叔丁基、甲氧基、4-三氟甲氧基苯基；萘基；未取代的或者被低级烷基所取代的环己基、未取代的或者被卤素或低级烷基所取代的吲哚基。
7.权利要求6所述的化合物或其N-氧化物或可药用盐其中r是1；n是0；m是0；A、B、D和E均为CH且T是N；Q是选自吗啉基的在一个碳原子上的取代基；R是H；X是-NH-；并且Y是在4-位上被叔丁基或三氟甲基取代的苯基。
8.权利要求4所述的化合物或其N-氧化物或可药用盐其中r是1；n是0；m是0；A、B和D均为CH且E和T均为N；X是-NH-；Y是在4-位上被叔丁基取代的苯基；并且Q是D上的2-羟基乙基氨基取代基。
9.权利要求1所述的化合物或其N-氧化物或可药用盐其中n是0-2；r是0-2；m是0-4；J是二环杂芳族环系，其选自吲哚基、异二氢吲哚基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、嘌呤基、噌啉基、萘啶基、2，3-二氮杂萘基、异苯并呋喃基、萘啶基、2，3-二氮杂萘基、色烯基和嘌呤基；Q是在二环环系的任一个或两个环上并且在二环环系的任一个或两个环上的一个或两个碳原子上的取代基，其选自卤素、未取代的或取代的低级烷基、-OR2、-SR2、-NR2、-NRS(O)2N(R)2、-NRS(O)2R、-S(O)R2、-S(O)2R2、-OCOR2、-C(O)R2、-CO2R2、-NR-COR2、-CON(R2)2、-S(O)2N(R2)2、氰基、三甲基硅烷基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的杂芳基、未取代的或取代的环烷基、未取代的或取代的杂环烷基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-杂芳基、-C1-4烷基-杂环基、氨基、单-或二-取代的氨基；R是H或低级烷基；R2是未取代的或取代的烷基、未取代的或取代的环烷基、苯基、-C1-4烷基-芳基、-C1-4烷基-杂芳基或-C1-4烷基-杂环烷基；X是Y、-N(R)-、-O-、-S-、砜、亚砜、磺酰胺、酰胺或1，3-亚脲基；Y是H、低级烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的环烷基或取代或未取代的杂环烷基；并且Z是氨基、单-或二-取代的氨基、卤素、烷基、取代的烷基、羟基、醚化的或酯化的羟基、硝基、氰基、羧基、酯化的羧基、烷酰基、氨基甲酰基、N-单-或N，N-二-取代的氨基甲酰基、脒基、胍基、巯基、磺基、苯硫基、苯基-低级烷硫基、烷基苯硫基、苯基亚磺酰基、苯基-低级烷基亚磺酰基、烷基苯基亚磺酰基、苯基磺酰基、苯基-低级烷基磺酰基或烷基苯基磺酰基，并且，如果存在一个以上的基团Z(m≥2)，则取代基Z相同或不同。
10.权利要求9所述的化合物或其N-氧化物或可药用盐其中n是0；r是0；m是0；J是二环杂芳族环系，其选自吲哚基、异二氢吲哚基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、嘌呤基、噌啉基、萘啶基、2，3-二氮杂萘基、异苯并呋喃基、萘啶基、2，3-二氮杂萘基、色烯基和嘌呤基；R是H或低级烷基；X是Y、-N(R)-、-O-、-S-、砜、亚砜、磺酰胺、酰胺或1，3-亚脲基；并且Y是H、低级烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的环烷基或取代或未取代的杂环烷基。
11.权利要求10所述的化合物或其N-氧化物或可药用盐其中n是0；r是0；m是0；J是异喹啉基；X是NH；并且Y是4-叔丁基苯基。
12.权利要求10所述的化合物或其N-氧化物或可药用盐其中n是0；r是0；m是0；J是喹唑啉基；X是NH；并且Y是4-叔丁基苯基。
13.权利要求10所述的化合物或其N-氧化物或可药用盐其中n是0；r是0；m是0；J是异喹啉基；X是NH；并且Y是2-叔丁基-嘧啶-5-基。
14.包含与可药用载体混合的权利要求1所述的化合物的药物组合物。
15.对患有其特征在于通过MAP激酶信号传导途径传导的信号过多的疾病的患者进行治疗的方法，该方法包括向患者施用抑制RAF激酶有效量的权利要求1的化合物。
16.权利要求15所述的方法，其中，其特征在于通过MAP激酶信号传导途径传导的信号过多的疾病是癌症。
17.权利要求16所述的方法，其中的癌症是黑素瘤、结肠直肠癌、卵巢癌、神经胶质瘤、腺癌、肉瘤、乳腺癌或肝癌。
18.权利要求17所述的方法，其中癌症是黑素瘤。
19.治疗患者的黑素瘤的方法，该方法包括(a)对患者的黑素瘤组织进行检测以确定黑素瘤组织是否表达突变型RAF激酶或过度表达野生型RAF激酶；和(b)如果发现黑素瘤组织过度表达野生型RAF激酶或表达活化的突变型B-RAF激酶，则用抑制RAF激酶有效量的权利要求1所述的化合物对患者进行治疗。
20.权利要求19所述的方法，其中突变型RAF激酶对应于选自下列的B-RAF激酶基团的突变G1388A、G1388T、G1394C、G1394A、G1394T、G1403C、G1403A、G1753A、T1782G、G1783C、C1786G、T1787G、T1796A和TG1796-97AT。
21.权利要求20所述的方法，其中的黑素瘤表达突变型RAF激酶。
22.权利要求21所述的方法，其中突变型RAF激酶是V599E突变。
全文摘要
本发明涉及式(I)化合物，其中的可变取代基如本文所述。该化合物可用于治疗其特征在于异常的MAP激酶信号传导途径的病症和疾病，诸如癌症。
文档编号C07D413/14GK1886378SQ200480034678
公开日2006年12月27日 申请日期2004年9月23日 优先权日2003年9月24日
发明者C·A·芬克, L·B·佩雷斯, T·M·拉姆齐, N·尤素夫, R·W·韦萨塞, D·B·巴特, M·L·萨比奥, S·金 申请人:诺瓦提斯公司