专利名称：用于防治老年性痴呆的天麻植物提取物及其制备方法
技术领域：
本发明属于天然药物技术领域。具体涉及一种含有派立辛A、B、C和/或其衍生物的天麻(Gastrodia elata Blume)植物提取物在制备益智、增强记忆或防治老年性痴呆等疾病的药物中的用途。从中药天麻中提取、精制得到的植物提取物及其提取方法。
背景技术：
随着我国人口老龄化的加快，老年性痴呆患者日益增加，老年性痴呆，也叫阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease简称AD)，是大脑高级聚合过程的慢性功能障碍，由于起病隐匿，故使早期症状易被忽略，患AD的病人生活不能自理，时时需要家人照料，给患者、家庭、社会带来沉重的负担。治疗老年性痴呆的药物研究与开发范围除脑血循环改善剂、脑能量代谢激活剂外，在脑神经传递功能改善剂方面包括神经递质前体物质、神经递质合成促进剂、神经递质分解酶抑制剂等。近年来在神经肽、神经生长因子和中草药等方面的研究也十分活跃，并取得了一定进展。
不过，治疗老年性痴呆的药物有一个不得不面对的问题，由于防治记忆及认知障碍的用药周期相对较长，对AD患者也许是终生的，因此药物的安全使用至关重要。从已知的安全性较高的中药材中提取中药有效成分，研制和开发中药新药是很有必要的。
天麻别名明天麻、白龙草、赤箭根。为兰科多年生寄生草本植物天麻Gastrodia elata Blume的块茎。多年生植物，生于湿润的林下，现多栽培。在我国主要产自四川、云南、贵州、湖北和陕西等地。在中药中天麻主要用于息风止痉、平肝潜阳、祛风止痛及偏正头痛等。
派立辛(parishin)是植物天麻中的一种主要化学成分，文献1-5报道了派立辛(parishin)A、B、C的结构如下 其中，派立辛A(parishin A)在以前的文献中通常简称为派立辛(parishin)，本文中为与另外两个已知的派立辛类化合物(派立辛B、C)区分开，将其称为派立辛A(parishin A)。
参考文献1、Li Y.M.，Zhou Z.l.，Hong Y.F.New phenolic derivativesfrom Galeola faberi.Planta Med.1993，59(4)363-5。
2、Lin J.H.，Liu Y.C.，Hau J.P.，et al.Parishins B and Cfrom rhizomes of Gastrodia elata.Phytochemistry，1996，42(2)549-551。
3、周俊，浦湘渝，杨雁宾。新鲜天麻的九种酚性成分。科学通报，1981，26(18)1118-1120。
4、Dahmen J.，Leander K.Studies on Orchidaceae glucosides.Part 7.The structure of parishin，a glucoside from Vandaparishii.Phytochemistry，1976，15(12)1986-7。
5、Taguchi H.，Yosioka I.，Yamasaki K.，et al.Studies onthe constituents of Gastrodia elata Blume.Chem.Pharm.Bull.，1981，29(1)55-62。
尽管文献报道了通过正相和反相硅胶进行反复多次色谱分离，得到派立辛衍生物的单体化合物的方法，但从未报道过这些单体化合物与益智和防治老年性痴呆的作用有关。
由于天麻中化学成分复杂，而派立辛类化合物极性有较大差别，利用适合工业化生产的单次色谱分离技术富集高含量(大于50％)派立辛衍生物有较大难度，目前还没有文献报道得到了高含量(大于50％)的派立辛衍生物的天麻植物提取物，也没有报道过利用色谱分离技术实现制备富含派立辛其衍生物的天麻植物提取物的方法，也从未发现含派立辛衍生物的天麻植物提取物或者派立辛衍生物的单体化合物(特别是派立辛A、B、C)或混合物具有增智和防治老年性痴呆作用。
发明内容
本发明提供了含有派立辛衍生物(特别是派立辛A、B、C)的天麻植物提取物或者派立辛单体化合物或混合物在制备益智、增强记忆或防治老年性痴呆等疾病的药物中的用途。其中该提取物中派立辛衍生物总含量为25％以上，优选派立辛衍生物总含量为50％以上的提取物。所述派立辛衍生物可以为派立辛衍生物中任意单体，特别是派立辛A、B、C，也可以为派立辛衍生物中任意多种单体化合物的混合物。
现通过对小鼠学习记忆获得障碍模型，包括用东莨菪碱致小鼠学习记忆获得障碍模型、用环己烯亚胺(CHX)致小鼠记忆形成障碍模型等的研究，通过暗箱实验、跳台实验等的研究，表明派立辛衍生物的单体化合物或混合物以及含有派立辛衍生物(特别是派立辛A、B、C)的植物提取物具有益智和防治老年性痴呆作用。
所述“单体”定义为单一化合物。
本发明还提供了一种含有派立辛衍生物的天麻植物提取物，该提取物中派立辛衍生物总含量为25％以上，优选派立辛衍生物总含量为50％以上，更优选派立辛衍生物总含量为50％-95％，优选所述派立辛衍生物为派立辛A、B、C。
本发明还提供了一种制备含有派立辛衍生物植物天麻提取物的方法，其中提取物中派立辛衍生物总含量为25％以上，优选派立辛衍生物总含量为50％以上，更优选派立辛衍生物总含量为50％-95％，优选所述派立辛衍生物为派立辛A、B、C。
通过我们对分离纯化工艺的研究，发现通过独特的提取、精制工艺是可以得到富含派立辛衍生物的天麻植物提取物。
本发明还提供了含有天麻植物提取物的药物组合物及其制剂以及所述天麻植物提取物在保健品和制药领域中的应用，特别是在制备益智和防治老年性痴呆等疾病的保健品和药物中的应用，所述天麻植物提取物中派立辛衍生物总含量为25％以上，优选派立辛衍生物总含量为50％以上，更优选派立辛衍生物总含量为50％-95％，优选所述派立辛衍生物为派立辛A、B、C。其中百分比％未经特别说明，均为重量百分比％。
本发明所指派立辛衍生物结构通式如下 其中，R1，R2和R3各自独立地选自 等；R4选自氢、C1-C6烷基(优选甲基，乙基，丙基，乙丙基，丁基，异丁基)，C1-C6烷基苯基(优选苄基)，对羟基苄基，或 等；Glu表示β-D-吡喃葡萄糖基，Me表示甲基。
本发明制备所述天麻植物提取物的工艺方法如下1.提取方法将植物天麻(块茎)粉碎，然后用20-100％(其中优选50-95％)C1-C6烷基醇的水溶液作为溶剂在0℃-溶剂回流的温度(优选室温至溶剂回流的温度)下提取，提取液经常压或减压浓缩得浸膏；其中所述C1-C6烷基醇优选为甲醇、乙醇、异丙醇或正丁醇或它们组成的混合溶剂，其中更优选甲醇、乙醇。
2精制方法将浸膏用色谱方法精制、纯化，用洗脱溶剂洗脱，收集富含派立辛A、B、C类化合物的流份，浓缩，过滤，干燥，检测并收集富含派立辛衍生物的植物提取物。
其中所述用于精制、纯化的色谱方法为大孔吸附树脂色谱、正相硅胶和反相硅胶色谱，或者它们的组合，或者将提取得到的浸膏混合于硅胶或硅藻土中，晾干后用洗脱溶剂进行回流洗脱；所述洗脱溶剂为水，C1-C6烷基醇，如甲醇、乙醇、异丙醇或正丁醇等，卤代烃，如二氯甲烷、氯仿(三氯甲烷)等，醚类溶剂，如乙醚、甲基叔丁醚等，酮类溶剂，如丙酮、2-丁酮等，酯类溶剂，如乙酸乙酯、甲酸乙酯等，以及由上述溶剂组成的混合溶剂，其中优选的洗脱溶剂为氯仿(三氯甲烷)、乙酸乙酯、乙醇、甲醇和水中的一种或数种混合溶剂。所述精制方法中，当用苯乙烯型大孔吸附树脂精制时，洗脱溶剂优选为水和10-75％的乙醇或甲醇水溶液；当用反相硅胶色谱精制时，洗脱溶剂优选为水和10-50％的乙醇或甲醇水溶液；当用正相硅胶精制时，洗脱溶剂优选为三氯甲烷或乙酸乙酯和90-100％乙醇水溶液或甲醇组成的混合溶剂，它们的比例优选为10∶1-2∶1。
其中所述制备方法中，富含派立辛A、B、C类化合物的流份是通过薄层层析(TLC)、紫外(UV)、高压液相色谱(HPLC)等方法检测的，其中优选HPLC检测方法。
优选本发明得到的天麻植物提取物中派立辛衍生物的总含量是通过HPLC方法检测的。优选用高效液相外标法测定，以派立辛A作标准，计算其中派立辛类化合物的总含量。
按照上述方法得到的天麻植物提取物中派立辛衍生物总含量为25％以上，优选派立辛衍生物总含量为50％以上，更优选派立辛衍生物总含量为50％-95％，优选所述派立辛衍生物为派立辛A、B、C。
按照上述方法得到的含有派立辛衍生物的天麻植物提取物具有益智、增强记忆的作用。
本发明介绍的制备方法是提供具有高含量派立辛衍生物的天麻植物提取物制备方法中的一种，并不意味着只有通过上述方法得到的高含量派立辛衍生物的天麻植物提取物才能用作制备益智、增强记忆或防治老年性痴呆等疾病的药物。可以想见，本领域技术人员用其他方法获得的富含派立辛衍生物的天麻植物提取物也会具有同样的药物作用。
用以上提取和精制方法制备中药天麻中的植物提取物，其中有效成分-派立辛衍生物在植物提取物中的含量可高达50％以上。其中大孔吸附树脂法精制更适合于工业化生产。
利用本发明方法得到的植物提取物可以与药物上可接受的载体一起制成药物制剂，例如注射剂、片剂、胶囊、口服液或滴丸等。利用本发明方法得到的植物提取物制备所需药物的各种剂型时，可以按照药学领域的常规生产方法制备。优选本发明的这类药物制剂可以被口服、肠胃外给药。优选制剂是口服或静脉内给药的。
本发明组合物的无菌可注射形式可以是水性或油性混悬剂。这些混悬剂可以按照本领域已知的技术、利用适合的分散或润湿剂和悬浮剂加以配制。无菌的可注射制剂还可以是在无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液剂或混悬剂，例如在1，3-丁二醇中的溶液。可以采用的可接受的载体和溶剂有水、林格氏溶液和等渗的氯化钠溶液。另外，无菌的不挥发油也经常被用作溶剂或悬浮介质。为此，可以采用任何温和的不挥发油，包括合成的单-或二-甘油酯。脂肪酸、例如油酸及其甘油酯衍生物可用于制备注射剂，它们是天然的药学上可接受的油，例如橄榄油或蓖麻油，尤其是它们的聚氧乙基化形式。这些油溶液剂或混悬剂还可以含有长链醇稀释剂或分散剂，例如羧甲基纤维素或相似的分散剂，它们普遍用于配制药学上可接受的剂型，包括乳剂和混悬剂。出于制剂的目的，还可以使用其他常用的表面活性剂，例如吐温类、司盘类，和其他乳化剂或生物利用度增强剂，它们普遍用在药学上可接受的固体、液体或其他剂型的制造中。
本发明药物组合物可以按任意口服可接受的剂型口服给药，包括但不限于胶囊剂、片剂、水性混悬剂或溶液剂。在口用片剂的情况下，常用的载体包括乳糖和玉米淀粉。通常还加入润滑剂，例如硬脂酸镁。就按胶囊剂型口服给药而言，有用的稀释剂包括乳糖和干燥的玉米淀粉。当口用需要水性混悬剂时，活性成分是与乳化和悬浮剂联用的。如果需要的话，还可以加入某些甜味剂、矫味剂或着色剂。
如果必要的话，一旦患者的条件有所改善，可以给以本发明化合物、组合物或组合的维持剂量。随后，可以根据症状减少给药的剂量或频率或者剂量与频率至已改善的条件得以保留的水平，当症状已经减轻至所需水平，应当停止治疗。不过，一旦疾病症状有任何复发，患者可能需要在长期基础上接受间歇性治疗。
本发明的药物制剂中还可以包含其他用于治疗阿尔茨海默病的活性剂或与其他治疗阿尔茨海默病(老年性痴呆)的药物一起或顺序给药。
还应当理解的是，任意特定患者的具体剂量和治疗制度将依赖于多种因素，包括所采用的具体提取物的活性、年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、给药时间、排泄速率、药物组合、主治医师的判断和所治疗的特定疾病的严重性。
具体实施例方式
下面的制备实施例和实验实施例可进一步说明本发明，但不以任何方式限制本发明。
实施例11.提取中药天麻药材1kg，粉碎后加入50％乙醇浸泡提取3次，每次24小时。合并提取液，回收乙醇并浓缩至稠浸膏，加入蒸馏水加热溶解，冷却至室温，静置24小时，离心甩滤，得澄清滤液。
2.精制上述滤液通过经处理的HPD-100型大孔吸附树脂，用水和10％、20％、30％、40％、50％、75％的乙醇梯度洗脱，HPLC检测，收集富含派立辛类化合物的流份，合并，减压浓缩，喷雾干燥即得植物提取物4.48g。经过高效液相色谱法测定，其中派立辛类化合物含量为51.8％。
实施例2
1.提取中药天麻药材1kg，粉碎后加入50％乙醇，50℃温浸泡提取3次，每次6小时。合并提取液，回收乙醇并浓缩至稠浸膏，加入蒸馏水加热溶解，冷却至室温，静置24小时，离心甩滤，得澄清滤液。
2.精制上述滤液通过经处理的HP-20型大孔吸附树脂，用水和10％、20％、30％、40％、50％、75％的乙醇梯度洗脱，HPLC检测，收集富含派立辛类化合物的流份，合并，减压浓缩，喷雾干燥即得植物提取物4.42g。经过高效液相色谱法测定，其中派立辛类化合物含量为52.6％。
实施例31.提取中药天麻药材1kg，粉碎后加入50％乙醇浸泡过夜后，加热回流提取3次，每次3.0小时。合并提取液，回收乙醇并浓缩至稠浸膏，加入蒸馏水加热溶解，冷却至室温，静置24小时，离心甩滤，得澄清滤液。
2.精制上述滤液通过经处理的HP-20型大孔吸附树脂，用水、10％、20％、30％、40％、50％和75％浓度的甲醇依次梯度洗，HPLC检测，收集富含派立辛类化合物的流份，合并，减压浓缩，喷雾干燥即得植物提取物4.68g。经过高效液相色谱法测定，其中派立辛类化合物含量为54.4％。
实施例41.提取中药天麻药材1kg，粉碎后加入75％乙醇，室温浸提3次，每次24.0小时。合并提取液，回收乙醇并浓缩至稠浸膏，加入蒸馏水加热溶解，冷却至室温，静置24小时，离心甩滤，得澄清滤液。减压浓缩得浓缩液。
2.精制浓缩液通过反相硅胶柱(C-18)，用水和10％醇溶液洗脱后，再用50％浓度的醇溶液洗脱，HPLC检测，收集富含派立辛类化合物的流份，合并，减压浓缩，干燥得植物提取物2.18g。经过高效液相色谱法测定，其中派立辛类化合物含量为66.2％。
实施例51.提取中药天麻药材1kg，粉碎后，加入75％乙醇浸泡过夜后，75℃加热浸提3次，每次6.0小时。合并提取液，回收乙醇并浓缩至稠浸膏。
2.精制浸膏硅胶拌样，通过正相硅胶(100-200目)色谱柱，氯仿-甲醇(9∶1)洗脱后，再用氯仿-甲醇(5∶1)洗脱，HPLC检测，收集富含派立辛类化合物的流份，合并，减压浓缩，干燥得植物提取物4.51g。经过高效液相色谱法测定，其中派立辛类化合物含量为50.3％。
实施例61.提取中药天麻药材1kg，粉碎后，加入75％乙醇浸泡过夜后，加热回流提取3次，每次3.0小时。合并提取液，回收乙醇并浓缩至稠浸膏。
2.精制浸膏硅胶拌样，通过正相硅胶(100-200目)柱，乙酸乙酯-95％乙醇(10∶1)洗脱后，再用乙酸乙酯-95％乙醇(3∶1)和乙酸乙酯-95％乙醇(2∶1)依次洗脱，HPLC检测，收集富含派立辛类化合物的流份，合并，减压浓缩，干燥得植物提取物4.88g。经过高效液相色谱法测定，其中派立辛类化合物含量为56.0％。
实施例71.提取中药天麻药材1kg，粉碎后加入95％乙醇室温浸提3次，每次24.0小时。合并提取液，回收乙醇并浓缩至稠浸膏，加入蒸馏水加热溶解，冷却至室温，静置24小时，离心甩滤，得澄清滤液。减压浓缩得浓缩液。
2.精制浓缩液通过反相硅胶(C-18)柱，水和10％乙醇溶液洗脱后，再用50％浓度的醇溶液洗脱，HPLC检测，收集富含派立辛类化合物的流份，合并，减压浓缩，干燥得植物提取物1.69g。经过高效液相色谱法测定，其中派立辛类化合物含量为60.9％。
实施例81.提取中药天麻药材1kg，粉碎后，加入95％乙醇，75℃温浸提取3次，每次8.0小时。合并提取液，回收乙醇并浓缩至稠浸膏。
2.精制浸膏硅胶拌样，通过正相硅胶(100-200目)柱，氯仿-甲醇(9∶1)洗脱后，再用氯仿-甲醇(5∶1)洗脱，HPLC检测，收集富含派立辛类化合物的流份，合并，减压浓缩，干燥得植物提取物1.22g。经过高效液相色谱法测定，其中派立辛类化合物含量为55.1％。
实施例91.提取中药天麻药材1kg，粉碎后，加入95％乙醇浸泡过夜后，加热回流提取3次，每次4.0小时。合并提取液，回收乙醇并浓缩至稠浸膏。
2.精制浸膏硅胶拌样，通过正相硅胶(100-200目)柱，乙酸乙酯-95％乙醇(10∶1)洗脱后，再用乙酸乙酯-95％乙醇(5∶1)和乙酸乙酯-95％乙醇(3∶1)洗脱，HPLC检测，收集富含派立辛类化合物的流份，合并，减压浓缩，干燥得植物提取物1.86g。经过高效液相色谱法测定，其中派立辛类化合物含量为55.8％。
实验实施例天麻植物提取物对于益智和防治老年性痴呆的作用下文中采用的缩写“clb”是指派立辛A、B、C和/或其衍生物含量大于50％的天麻提取物。
实验实施例1用东莨菪碱致小鼠学习记忆获得障碍模型[实验材料和仪器]1.实验动物雄性昆明种小鼠，体重20-22g，由中国药品检定所动物室提供，实验前动物在本所动物房笼养两天。
2.受试药物派立辛(parishin)A及通过以上制备实施例1得到的植物提取物clb(实施例1的产物，含量51.8％)，用蒸馏水混悬溶解。
3.给药途径灌胃，对照组灌胃等体积的蒸溜水4.剂量parishin0.25，0.5，1.0mg/kg体重；clb2.5，510mg/kg体重5.阳性对照药多萘哌齐2.5mg/kg体重6.仪器小鼠水迷宫程序自控仪SMG-27.试剂东莨菪碱，购自Sigma公司结果经跳台法检测发现parishin A和clb分别0.25-1.0mg/kg和2.5-10mg/kg范围内可明显延长动物第一次跳下平台的潜伏期，同时5分钟内的下台次数(错误次数)减少，表明clb可有效地改善东莨菪碱导致的小鼠学习记忆获得障碍，作用强度与阳性药多奈哌齐接近。结果见表1。
表1 clb对东莨菪碱致痴呆模型小鼠跳台实验潜伏期和错误次数的影响
表中潜伏期和错误次数表示为Mean±SEM(平均值±标准偏差)。
模型组与正常对照组比较#P＜0.05，##P＜0.01，给药组与模型组比较*P＜0.05，**P＜0.01.
实验实施例2小鼠避暗实验动物SPF昆明种雄性小鼠，体重19-20g，由中国药品检定所动物室提供，实验前在本所动物房笼养两天。
试剂及配制clb(实施例1的产物，含量51.8％)用蒸馏水稀释成2.5mg/10ml(2.5mg/kg)、10mg/10ml(10mg/kg)，灌胃给药。
多萘哌齐2.5mg/kg，用蒸馏水配成2.5mg/5ml灌胃给药。
仪器SBA-2小鼠避暗仪，由中国医学科学院药物研究所提供。
方法SPF昆明种小鼠，体重19-20g，雄性，随机分5组，正常对照组，模型组，多萘哌齐组(2.5mg/kg)，clb组(2.5mg/kg和10mg/kg)。正常对照组灌服水，其余灌服给药，给药第8和第9天进行小鼠避暗实验。第8天学习前20分钟腹腔注射氢溴酸东莨菪碱(5mg/kg)。
实验装置为一条件反射箱，分为明暗两部分，两室中有一小孔洞使小鼠可自由通行，箱底有铜栅，其中暗室底部的铜栅通以36V电压。实验时将小鼠放入明室并背向暗室，因小鼠有喜暗及钻洞的习性，所以在实验训练期间会多次钻入暗室，当小鼠一走入暗室四足接触铜栅时就会受到电击，此行为即为错误，其正常反应为马上设法退出暗室。第一天训练时，记录小鼠在3分钟内进入暗室的次数及第一次进入暗箱的时间。24小时后再做实验，观察5分钟内小鼠首次进入暗箱的时间即潜伏期，小鼠进入暗箱的次数即错误次数。
对实验结果进行统计并比较各组小鼠第一次进入暗室的潜伏期及进入暗室的次数即错误次数。从下表可以看出在小鼠避暗实验中，模型组与正常组相比有非常显著差异，实验方法造模型成功。与模型组相比，多萘哌齐组、clb低剂量(2.5mg/kg)组以及高剂量(10mg/kg)或中剂量(5mg/kg)组均能显著性增加第一次进入暗室的潜伏期及减少进入暗室的次数即错误次数，说明多萘哌齐、clb在小鼠避暗实验中有对抗氢溴酸东莨菪碱引起的记忆获得障碍的作用。结果见下表。
表2 clb在小鼠避暗实验中对抗氢溴酸东莨菪碱引起的记忆获得障碍的作用
与正常组比较##P＜0.01，与模型组比较*P＜0.05，**P＜0.01表3 clb在小鼠避暗实验中对抗氢溴酸东莨菪碱引起的记忆获得障碍的作用
与正常组比较##P＜0.01，与模型组比较*P＜0.05，**P＜0.01实验实施例3用环己烯亚胺(CHX)致小鼠记忆形成障碍模型方法SPF昆明种小鼠，体重19-20g，雄性，随机分5组，正常对照组，模型组，多萘哌齐组(2.5mg/kg)，clb组(实施例1的产物，含量51.8％)(2.5mg/kg，5.0mg/kg和10mg/kg)。正常对照组灌服水，其余灌服给药，给药第9和第10天进行跳台实验。第9天学习前20分钟腹腔注射环己烯亚胺(5mg/kg)结果经跳台法检测发现clb在2.5mg/kg，5mg/kg和10mg/kg能有效延长小鼠第一次下台的潜伏期，减少小鼠下台次数，提示clb对环己烯亚胺致小鼠记忆形成障碍有改善作用，作用相当于多萘哌齐。
表4.clb对CHX致小鼠记忆巩固障碍的影响(跳台实验)(X±SEM)
模型组与正常对照组比较###P＜0.001，给药组与模型组比较*P＜0.05，**P＜0.01。
权利要求
1.一种天麻植物提取物在制备益智、增强记忆或防治老年性痴呆等疾病的药物中的用途，其中所述植物提取物中派立辛衍生物总含量为25％以上，优选派立辛衍生物总含量为50％以上，更优选派立辛衍生物总含量为50％-95％，优选所述派立辛衍生物为派立辛A、B、C；所述衍生物可以为一种派立辛衍生物的单体化合物，也可以为派立辛衍生物中任意多种化合物的混合物；所述派立辛衍生物结构通式如下 其中，R1，R2和R3各自独立地选自 等；R4选自氢、C1-C6烷基(优选甲基，乙基，丙基，乙丙基，丁基，异丁基)，C1-C6烷基苯基(优选苄基)，对羟基苄基，或 等；Glu表示β-D-吡喃葡萄糖基，Me表示甲基；其中派立辛(parishin) A、B、C的结构式如下 。
2.派立辛衍生物在制备益智、增强记忆或防治老年性痴呆等疾病的药物中的用途，其中优选所述派立辛衍生物为派立辛A、B、C；所述衍生物可以为一种派立辛衍生物的单体化合物，也可以为派立辛衍生物中任意多种化合物的混合物；所述派立辛衍生物结构通式如下 其中，R1，R2和R3各自独立地选自 等；R4选自氢、C1-C6烷基(优选甲基，乙基，丙基，乙丙基，丁基，异丁基)，C1-C6烷基苯基(优选苄基)，对羟基苄基，或 等；Glu表示β-D-吡喃葡萄糖基，Me表示甲基；其中派立辛(parishin) A、B、C的结构式如下 。
3.一种含有派立辛衍生物的天麻植物提取物，该提取物中派立辛衍生物总含量为25％以上，优选派立辛其衍生物总含量为50％以上，更优选派立辛衍生物总含量为50％-95％；其中所述派立辛衍生物结构通式如下 其中，R1，R2和R3各自独立地选自 等；R4选自氢、C1-C6烷基(优选甲基，乙基，丙基，乙丙基，丁基，异丁基)，C1-C6烷基苯基(优选苄基)，对羟基苄基，或 等；Glu表示β-D-吡喃葡萄糖基，Me表示甲基；其中优选派立辛衍生物为派立辛(parishin)A、B、C，其结构式如下 。
4.一种天麻植物提取物的制备方法，其特征在于该提取物通过下述步骤获得(1)将植物天麻块茎粉碎，然后用50-95％C1-C6烷基醇的水溶液作为溶剂在室温至加热回流的温度下提取，提取液经常压或减压浓缩得浸膏；(2)将浸膏用色谱方法精制、纯化，用洗脱溶剂洗脱，收集富含派立辛衍生物的流份，浓缩，过滤，干燥，得到含有派立辛衍生物的提取物，其中派立辛衍生物总含量为25％以上，优选派立辛衍生物总含量为50％以上，更优选派立辛衍生物总含量为50％-95％；其中所述派立辛衍生物结构通式如下 其中，R1，R2和R3各自独立地选自 等；R4选自氢、C1-C6烷基(优选甲基，乙基，丙基，乙丙基，丁基，异丁基)，C1-C6烷基苯基(优选苄基)，对羟基苄基，或 等；Glu表示β-D-吡喃葡萄糖基，Me表示甲基；其中优选派立辛衍生物为派立辛(parishin)A、B、C，其结构式如下
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于所用的原料植物天麻为中药材天麻。
6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于所述C1-C6烷基醇为甲醇、乙醇、异丙醇或正丁醇或它们组成的混合溶剂。
7.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于用于精制、纯化的色谱方法为大孔吸附树脂色谱、正相硅胶、反相硅胶色谱，或者它们的组合，或者将浸膏混合于硅胶或硅藻土中，晾干后用有机溶剂或水回流洗脱。
8.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于洗脱所用的溶剂为水，C1-C6烷基醇，如甲醇、乙醇、异丙醇或正丁醇等，卤代烃，如二氯甲烷、氯仿(三氯甲烷)等，醚类溶剂，如乙醚、甲基叔丁醚等，酮类溶剂，如丙酮、2-丁酮等，酯类溶剂，如乙酸乙酯、甲酸乙酯等，以及由上述溶剂组成的混合溶剂。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于洗脱所用的溶剂优选为氯仿(三氯甲烷)、乙酸乙酯、乙醇、甲醇和水中的一种或数种混合溶剂；特别是，所述精制方法中，当用苯乙烯型大孔吸附树脂精制时，洗脱溶剂优选为水和10-75％的乙醇或甲醇水溶液；当用反相硅胶色谱精制时，洗脱溶剂优选为水和10-50％的乙醇或甲醇水溶液；当用正相硅胶精制时，洗脱溶剂优选为三氯甲烷或乙酸乙酯和90-100％乙醇水溶液或甲醇组成的混合溶剂，它们的比例优选为10∶1-2∶1。
10.一种益智、增强记忆或防治老年性痴呆等疾病的药物组合物，其中含有富含派立辛衍生物的天麻植物提取物，以及药学上可接受的载体，所述组合物优选被制成片剂、注射剂、胶囊、软胶囊、口服液或滴丸等药物制剂，优选天麻植物提取物中派立辛衍生物总含量为25％以上，优选派立辛衍生物总含量为50％以上，更优选派立辛衍生物总含量为50％-95％；其中所述派立辛衍生物结构通式如下 其中，R1，R2和R3各自独立地选自 等；R4选自氢、C1-C6烷基(优选甲基，乙基，丙基，乙丙基，丁基，异丁基)，C1-C6烷基苯基(优选苄基)，对羟基苄基，或 等；Glu表示β-D-吡喃葡萄糖基，Me表示甲基；其中优选派立辛衍生物为派立辛(parishin)A、B、C，其结构式如下
全文摘要
本发明涉及含有派立辛衍生物的天麻植物提取物在制备用于益智和防治老年性痴呆等疾病的药物的用途。本发明还涉及从植物天麻(Gastrodia elata Blume)中提取、精制植物提取物的制备方法，其中有效成分为派立辛衍生物，特别是派立辛A，B，C。其中采用醇提取，提取物经色谱方法精制、纯化，得到派立辛衍生物含量在25％，特别是50％以上的植物提取物。本发明的药物剂型优选包括注射剂、片剂、胶囊、软胶囊、口服液或滴丸等。
文档编号C07H1/00GK1977951SQ20051012878
公开日2007年6月13日 申请日期2005年12月2日 优先权日2005年12月2日
发明者王珂, 石建功, 刘晔, 赵立敏, 张猛, 谭晓川, 徐文娟 申请人:北京科莱博医药开发有限责任公司