专利名称：新的抗微生物药物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种抗微生物药物，该药物含有由下面通式[1]代表的β-内酰胺化合物和碳青霉烯的组合。
背景技术：
由于广泛临床应用第三代头胞菌素，已经经常性分离出革兰氏阳性细菌。特别地，耐甲氧苯青霉素的金黄色葡萄球菌(下文中缩写为MRSA)已经更经常地被分离出来并成为临床领域中的严重问题，因为MRSA导致的传染病是难以治疗的。虽然近来万古霉素已经广泛地用于由MRSA引起的传染病，但是其具有由于其副作用而难于给药的缺点，此外，预计将来耐糖肽的细菌会由于给药万古霉素而增加。
此外，最近有关于耐甲氧苯青霉素且凝固酶阴性的葡萄球菌(MRCNS)的分离的报道增加。在这些情况下，希望开发出具有优异MRSA抗性和MRCNS活性的更安全的药物。
本发明人经过深入研究，发现下面的化合物[1]对革兰氏阳性细菌、特别是MRSA和MRCNS表现出优异的抗菌活性，并已经提交了一份专利申请(参见WO 02/38564)。
发明内容
本发明人经过进一步研究，发现通过共存给药(concomitantadministration)下面的化合物[1]和碳青霉烯，不仅各作用谱(spectrum)互补，而且获得了增强的碳青霉烯抗菌活性，并与已知的抗菌剂的抗菌活性相比表现出优良的抗菌活性。这样，已经完成了本发明。
本发明涉及一种抗微生物药物，该药物含有由下面通式[1]代表的β-内酰胺化合物和碳青霉烯的组合。
即，本发明涉及一种抗微生物药物，该抗微生物药物含有下式代表的β-内酰胺化合物
其中，R1是低级烷基或被羟基取代的低级烷基，R2是氢原子或低级烷基，X是O、S或NH，m和n独立地是0-4，且m和n的和为0-4，Y1是卤素原子、氰基、任选地被保护的羟基、任选地被保护的氨基、低级烷氧基、低级烷基氨基、任选地被保护的羧基、任选地被取代的氨基甲酰基或任选地被取代的低级烷基；和Y2是氢原子、任选地被取代的低级烷基、氰基或-C(R3)＝NR4(其中R3和R4独立地是氢原子、任选地被保护的或被取代的氨基、或者任选被取代的低级烷基，或者R3和R4可以和与它们相连接的碳原子和氮原子组合形成5-7元杂环，该杂环可以被取代)，条件是1-4个Y1可以存在于相同的环上且2个Y1可以存在于相同碳原子上，其药学可接受的盐或其无毒酯；和碳青霉烯的组合。
本发明涉及上述抗微生物药物，其中在通式[1]中X是S，并且m和n的和是2或3。
本发明涉及上述抗微生物药物，其中在通式[1]中R1是1-(R)-羟乙基。
本发明涉及上述抗微生物药物，其中在通式[1]中R1是1-(R)-羟乙基，R2是甲基，X是S，m和n的和是2或3，Y1是甲基或羟甲基，和Y2是氢原子。
本发明涉及上述抗微生物药物，其中该β-内酰胺化合物[1]是(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-4-甲基-3-({4-[(5S)-5-甲基-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基]-1，3-噻唑-2-基}硫烷基)-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。
本发明涉及上述抗微生物药物，其中该β-内酰胺化合物[1]是(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-3-({4-[(5R)-5-(羟甲基)-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基]-1，3-噻唑-2-基}硫基)-4-甲基-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸或(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-3-({4-[(5S)-5-(羟甲基)-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基]-1，3-噻唑-2-基}硫基)-4-甲基-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。
本发明涉及上述抗微生物药物，其中该碳青霉烯是美罗培南、亚胺培南、帕尼培南、比阿培南、厄他培南(ertapenem)、多利培南(S-4661)、CS-023或ME-1036。
本发明涉及上述抗微生物药物，该抗微生物药物含有(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-4-甲基-3-({4-[(5S)-5-甲基-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基]-1，3-噻唑-2-基}硫烷基)-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸或其药学可接受盐和美罗培南、亚胺培南或帕尼培南的组合。
本发明涉及上述抗微生物药物，该抗微生物药物含有(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-4-甲基-3-({4-[(5S)-5-甲基-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基]-1，3-噻唑-2-基}硫烷基)-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸或其药学可接受盐和美罗培南的组合。
本发明涉及上述抗微生物药物，该抗微生物药物为注射剂或小瓶或试剂盒的形式。
本发明涉及用于治疗传染病的方法，该方法包括向需要下面药物的患者以有效量给药β-内酰胺化合物[1]或其药学可接受的盐和碳青霉烯。
本发明涉及用于治疗传染病的方法，该方法包括向需要下面药物的患者以有效量给药β-内酰胺化合物[1]或其药学可接受的盐和碳青霉烯的组合。
本发明涉及β-内酰胺化合物[1]或其药学可接受的盐和碳青霉烯的组合在制备用于治疗传染病的抗微生物药物中的用途。
本发明涉及为与碳青霉烯组合的β-内酰胺化合物[1]或其药学可接受的盐在制备用于治疗传染病的抗微生物药物中的用途。
用于本发明的低级烷基包括直链或支链的C1-6烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基和正己基。被羟基取代的低级烷基包括具有1-6个碳原子的那些，例如，羟甲基、1-羟乙基、2-羟乙基、1-羟基-1-甲基乙基、1-羟丙基和2-羟丙基。低级烷氧基包括直链或支链的C1-6烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基和正己氧基。低级烷基氨基包括被直链或支链的C1-6烷基单或双取代的氨基，例如甲氨基、乙氨基、正丙氨基、异丙氨基、正丁氨基、异丁氨基、叔丁氨基、正戊氨基、正己氨基、甲基乙氨基、二甲基氨基、二乙基氨基、二(正丙基)氨基、二(异丙基)氨基、二(正丁基)氨基、二(正戊基)氨基和二(正己基)氨基。卤素原子包括氟原子、氯原子、溴原子和碘原子。5-7元杂环包括例如3，4-二氢-2-H-吡咯环、2，3，4，5-四氢吡啶环、3，4，5，6-四氢-2-H-氮杂环等。任选地被取代的低级烷基的取代基包括羟基、低级烷氧基、低级烷基硫基、低级烷基亚磺酰基、低级烷基磺酰基、低级烷基羰基、低级烷基羰氧基、低级烷氧基羰基、羧基、卤素原子、氰基、-NR6R7(其中R6和R7独立地是氢原子或低级烷基，或R6和R7可以与氮原子一起形成5-7元环，例如吡咯烷、哌啶、氮杂环庚烷(azepane)、吗啉、哌嗪、或N-低级烷基哌嗪)，-CONR6R7(其中R6和R7如上定义)，-NR6aCOR7a(其中R6a和R7a独立地是氢原子或低级烷基)，-OCONR6R7(其中R6和R7如上定义)，-SO2NR6R7(其中R6和R7如上定义)，-NR6aSO2NR6R7(其中R6a、R6和R7如上定义)，-NR6aCONR6R7(其中R6a、R6和R7如上定义)，和-COOCH2OCOR8(其中R8是低级烷基)。这些取代基可以通过合适的保护基保护。只要在化学上是可能的，所述取代位置不受限制，而且一个或者多个取代基是可能的。
低级烷基羰基包括直链或支链的C2-7烷基羰基，例如甲基羰基、乙基羰基、正丙基羰基、异丙基羰基、正丁基羰基、异丁基羰基、叔丁基羰基、正戊基羰基和正己基羰基。低级烷基羰氧基包括直链或支链的C2-7烷基羰氧基，例如甲基羰氧基、乙基羰氧基、正丙基羰氧基、异丙基羰氧基、正丁基羰氧基、异丁基羰氧基、叔丁基羰氧基、正戊基羰氧基和正己基羰氧基。
低级烷氧基羰基包括直链或支链的C2-7烷氧基羰基，例如甲氧基羰基、乙氧基羰基、正丙氧基羰基、异丙氧基羰基、正丁氧基羰基、异丁氧基羰基、叔丁氧基羰基、正戊氧基羰基和正己氧基羰基。低级烷基硫基、低级烷基亚磺酰基和低级烷基磺酰基的低级烷基部分包括直链或支链的C1-6烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基和正己基。任选地被取代的氨基甲酰基的取代基包括一或两个低级烷基，和被取代的氨基甲酰基包括吡咯烷、哌啶和氮杂环庚烷，其借助氨基甲酰基的氮原子形成。任选地被取代的氨基的取代基包括一或两个低级烷基，和被取代的氨基包括吡咯烷、哌啶和氮杂环庚烷，其借助氨基的氮原子形成。
任选地被取代的5-7元杂环基的取代基包括例如低级烷基、羟基、低级烷氧基、低级烷基羰基、低级烷基羰氧基、低级烷氧基羰基、羧基、卤素原子和氰基。
用于羧基的保护基可以是任何常规保护基，但是优选例如具有1-5个碳原子的直链或支链的低级烷基(例如甲基、乙基、异丙基、叔丁基等)，卤代C1-5低级烷基(例如2-碘乙基、2，2，2-三氯乙基等)，C1-5烷氧基甲基(例如甲氧基甲基、乙氧基甲基、异丁氧基甲基等)，C1-5低级脂族酰氧基甲基(例如乙酰氧基甲基、丙酰氧基甲基、丁酰氧基甲基、新戊酰氧基甲基等)，1-(C1-5)低级烷氧基羰氧基乙基(例如1-乙氧基羰氧基乙基)，被取代的或未被取代的芳烷基(例如苄基、对甲氧苄基、邻硝基苄基、对硝基苄基)，C3-7低级链烯基(例如烯丙基、3-甲代烯丙基)，二苯甲基和2-苯并[c]呋喃酮基。
用于羟基或氨基的保护基可以是任何常规保护基，并优选C1-5低级烷氧基羰基(例如叔丁氧基羰基)，卤代C1-5烷氧基羰基(例如2-碘乙氧基羰基、2，2，2-三氯乙氧基羰基)、取代或未被取代的C3-7低级链烯氧基羰基(例如烯丙氧基羰基)、被取代的或未被取代的芳烷氧基羰基(例如苄氧基羰基、对甲氧基苄氧基羰基、邻硝基苄氧基羰基、对硝基苄氧基羰基)或三烷基甲硅烷基(例如三甲基甲硅烷基，三乙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基)。
通式[1]的β-内酰胺化合物的Y1的优选取代基是C1-3烷基，例如甲基、乙基、异丙基等，羟甲基、氯甲基、氟甲基、甲氧基甲基、氨基甲酰氧基甲基(-CH2OCONH2)、脲基甲基(-CH2NHCONH2)、氨磺酰甲基(-CH2SO2NH2)、氨磺酰氨基甲基(-CH2NHSO2NH2)、氨基甲酰基等，和Y2优选的取代基是氢原子，C1-3烷基例如甲基、乙基、异丙基等，亚氨基甲基(-CH＝NH)、-C(CH3)＝NH等，优选R2是甲基等，和优选R1是1-(R)-羟乙基。
上式[1]的化合物的药学可接受的盐是常规的无毒盐。这样的盐包括，作为与分子内羧酸的盐与无机碱的盐例如钠、钾、钙、镁、铵盐，与有机碱的盐例如三乙基铵、吡啶、二异丙基铵盐，或者与3位侧链的阳离子(例如季铵离子)形成的分子内盐。作为与分子内的碱的盐，可以例举与无机酸例如盐酸、硫酸、磷酸的盐，或者与有机酸例如甲酸、乙酸、草酸、甲磺酸或苯磺酸的盐。
通式[1]的化合物的无毒酯包括碳青霉烯抗菌剂的2-羧基处的常规药学可接受的酯，并且可以是能在活体中容易地水解的酯，例如具有乙酰氧基甲基、新戊酰氧基甲基、1-(乙氧基羰氧基)乙基和2-苯并[c]呋喃酮基的酯。
通式[1]的β-内酰胺化合物或其药学可接受的盐或其无毒酯可以为其酸酐、其水合物或其溶剂化物形式。
通式[1]的化合物可以具有基于碳青霉烯核的4-、5-和6-位的不对称碳原子的旋光异构体，如下式所示， 全部这些异构体方便地仅通过一个式子表达。然而，本发明的范围不应受限于此，而是包括基于各个不对称碳原子的全部异构体和异构体的混合物。因为可能存在由于取代基Y1的异构体，本发明的范围包括全部异构体和异构体的混合物。在此例举当R2是低级烷基时，其中4位碳原子具有R构型和5位碳原子具有S构型的化合物，例如(4R，5S，6S)化合物或(4R，5S，6R)化合物。此外，当R1是1-羟乙基时，化合物[1]可以具有在8位具有R构型或S构型的异构体，如上式所示，优选的是在8位具有R构型的异构体。
式[1]的β-内酰胺化合物、其药学可接受的盐或其无毒酯是已知的，并可以根据WO02/38564中描述的方法制备。
在式[1]的β-内酰胺化合物中的优选化合物例举如下。
(1)(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-4-甲基-3-({4-[(5S)-5-甲基-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基]-1，3-噻唑-2-基}硫烷基)-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸(简称为化合物1)。
(2)(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-4-甲基-3-({4-[(5R)-5-甲基-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基]-1，3-噻唑-2-基}硫烷基)-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。
(3)(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-4-甲基-3-({4-[(6S)-6-甲基-1，2，3，6-四氢-4-吡啶基]-1，3-噻唑-2-基}硫烷基)-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。
(4)(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-4-甲基-3-({4-[(6R)-6-甲基-1，2，3，6-四氢-4-吡啶基]-1，3-噻唑-2-基}硫烷基)-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。
(5)(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-3({4-[(2R)-2-(羟甲基)-1，2，3，6-四氢-4-吡啶基]-1，3-噻唑-2-基}硫烷基)-4-甲基-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。
(6)(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-3({4-[(2S)-2-(羟甲基)-1，2，3，6-四氢-4-吡啶基]-1，3-噻唑-2-基}硫烷基)-4-甲基-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。
(7)(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-4-甲基-3-({4-[(2R)-2-甲基-1，2，3，6-四氢-4-吡啶基]-1，3-噻唑-2-基}硫烷基)-4-甲基-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。
(8)(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-4-甲基-3-({4-[(2S)-2-甲基-1，2，3，6-四氢-4-吡啶基]-1，3-噻唑-2-基}硫烷基)-4-甲基-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。
(9)(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-4-甲基-3-({4-[(2S)-2-甲基-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基]-1，3-噻唑-2-基}硫烷基)-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。
(10)(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-4-甲基-3-({4-[(2R)-2-甲基-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基]-1，3-噻唑-2-基})硫烷基)-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。
(11)(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-3-({4-[(2S)-2-(羟甲基)-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基]-1，3-噻唑-2-基})硫烷基)-4-甲基-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。
(12)(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-3-({4-[(2R)-2-(羟甲基)-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基]-1，3-噻唑-2-基})硫烷基)-4-甲基-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。
(13)(4R，5S，6S)-6-[(1 R)-1-羟乙基]-3-({4-[(2R)-2-(甲氧基甲基)-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基]-1，3-噻唑-2-基})硫烷基)-4-甲基-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。
(14)(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-4-甲基-3-{[4-(6-甲基-1，2，5，6-四氢-3-吡啶基]-1，3-噻唑-2-基}硫烷基)-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。
(15)(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-4-甲基-3-({4-[(6R)-6-甲基-1，2，5，6-四氢-3-吡啶基]-1，3-噻唑-2-基}硫烷基)-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。
(16)(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-4-甲基-3-({4-[(6S)-6-甲基-1，2，5，6-四氢-3-吡啶基]-1，3-噻唑-2-基}硫烷基)-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。
(17)(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-3({4-[(6S)-6-(羟甲基)-1，2，5，6-四氢-3-吡啶基]-1，3-噻唑-2-基}硫烷基)-4-甲基-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。
(18)(4R，5S，6S)-3-{[4-((2R)-2-{[(甲酰胺基)氧]甲基}-1，2，3，6-四氢-4-吡啶基)-1，3-噻唑-2-基}磺酰基}-6-[(1R)-1-羟乙基]-4-甲基-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。
(19)(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-3({4-[(6R)-6-(羟甲基)-1，2，5，6-四氢-3-吡啶基]-1，3-噻唑-2-基}硫烷基)-4-甲基-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。
(20)(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-3-({4-[(5R)-5-(羟甲基)-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基]-1，3-噻唑-2-基})硫基)-4-甲基-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。
(21)(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-3-({4-[(5S)-5-(羟甲基)-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基]-1，3-噻唑-2-基})硫基)-4-甲基-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。
和上述化合物的药学可接受的盐。
另一方面，用于本发明的碳青霉烯不受限制，包括美罗培南、亚胺培南、帕尼培南、比阿培南、厄他培南、多利培南(S-4661)、CS-023和ME-1036，优选对革兰氏阴性细菌(包括铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosae))表现出优异抗菌活性的碳青霉烯，例如美罗培南、亚胺培南、帕尼培南、比阿培南、多利培南(S-4661)和CS-023，特别优选美罗培南。
多利培南(S-4661)记载于Journal of Antibiotics，49卷，No.2，199-205，1996和日本专利公开A Hei 5294970，其具有下式 CS-023记载于Journal of Antibiotics，56卷，第6期，第565-579页，2003，其具有下式 ME-1036记载于Antimicrobial Agents and Chemotherapy，2004年8月，第2381-2837页和WO02/42321中，其具有下式 β-内酰胺化合物[1]和碳青霉烯的比值不受限制，且该比值应根据各药物的药动学性能而变化。当以两种化合物相结合的形式给药时，在活体中β-内酰胺化合物[1]/碳青霉烯优选维持的比值优选为1/10-10的范围，特别是在美罗培南的情况下，β-内酰胺化合物[1]/美罗培南的比值保持在1-4的范围内尽可能长的时间是优选的。
用作用于治疗传染病的抗微生物剂的共存药物(concomitantmedicant)的给药形式包括肠胃外给药，例如静脉注射、肌肉注射、灌输、直肠内给药或吸入。根据患者的疾病，该药物可以含有其他适合的药品。
如上所述，所述合适的给药形式可以根据常规方法使用活性成份与常规药学可接受的载体、赋形剂、粘合剂或稳定剂制备。
例如，可以通过将活性成份和分散剂(例如Tween80(AtlasPowder，USA)，HCO 60(Nikko Chemicals)、聚乙二醇、羧甲基纤维素、海藻酸钠)、防腐剂(例如对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、苯甲醇、氯代丁醇、苯酚)、张度剂(tonicity agent)(例如氯化钠、甘油、山梨糖醇、葡萄糖、转化糖)等溶解、悬浮或乳化在水溶剂(例如蒸馏水、盐溶液、林格式溶液)或油性溶剂(例如植物油例如橄榄油、芝麻油、棉籽油、或玉米油、丙二醇)中制备注射剂(例如皮下注射、静脉注射、肌肉注射、腹膜内注射等)。如果需要，可以向其中添加添加剂例如增溶剂(例如水杨酸钠、乙酸钠)、稳定剂(例如人血清白蛋白)或者安抚剂(例如苯扎氯铵、盐酸普鲁卡因)。
对于包括β-内酰胺化合物[1]、其药学可接受盐或其无毒酯和碳青霉烯的组合的本发明的抗微生物药物，两种活性成份可以肠胃外一起或单独地给药。在制备过程中各个活性成份分开形成的情况下，各成份可以在给药时与稀释剂混合，和在一定间隔时间内分开给药到相同对象。
本发明的抗微生物药物的剂量根据症状、年龄、体重、给药形式、给药频率等变化，但是通常对于成年人而言为每天100mg-12g范围内，其被一次给药或者分成若干剂量单位，优选在若干天内给药。如果需要的话，剂量可以增加或减少。
此外，所含药物的比值根据对象、年龄、体重、症状、给药期限、给药形式、给药路径、药物组合等进行选择。特别地，在本发明的β-内酰胺化合物[1]和碳青霉烯组合的情况下，每份碳青霉烯，β-内酰胺化合物[1]、其药学可接受盐或其无毒酯为0.1-10重量份，优选0.3-1.5重量份。特别是当碳青霉烯是美罗培南三水合物时，每份美罗培南，β-内酰胺化合物[1]、其药学可接受的盐或其无毒酯为0.1-10重量份，优选0.3-1.5重量份，更优选0.5-1.0重量份。
实施例制剂1(用于注射的溶液)将化合物1(250mg)和美罗培南三水合物(250mg)溶解在J.P.(Japanese Pharmacopeia)盐溶液(100ml)中。该溶液通过无菌过滤杀菌并填充入小瓶中，以制备用于注射的溶液。
制剂2(用于注射的溶液)将化合物1(250mg)和美罗培南三水合物(250mg)溶解在J.P.盐溶液(100ml)中。该溶液通过无菌过滤杀菌并填充入安瓿中，以制备用于注射的溶液。
制剂3(冷冻干燥制剂)将化合物1(250mg)和美罗培南三水合物(250mg)溶解在蒸馏水(50ml)中。该溶液通过无菌过滤杀菌并填充入小瓶中。将该填充溶液冷冻干燥以制备冷冻干燥制剂。
制剂4(粉末制剂)将化合物1(250mg)粉末和美罗培南三水合物(250mg)粉末填充入小瓶中以制备粉末。
对比实施例以下两种化合物是根据WO 02/38564实施例1中所述方法合成的。
(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-3-({4-[(5R)-5-(羟甲基)-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基]-1，3-噻唑-2-基})硫基)-4-甲基-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。
1H NMR(300MHz，DCl3)δ 1.02(3H，d，J＝7.3Hz)，1.20(3H，d，J＝6.2Hz)，3.19-3.30(1H，m)，3.34(1H，dd，J＝6.1，2.7Hz)，3.84(1H，dd，J＝12.6，5.0Hz)，3.95(1H，dd，J＝12.6，3.3Hz)，4.13-4.22(2H，m)，4.38-4.50(2H，m)，6.27(1H，s)，7.62(1H，s)。
(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-3-({4-[(5S)-5-(羟甲基)-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基]-1，3-噻唑-2-基})硫基)-4-甲基-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ 0.93(3H，d，J＝7.3Hz)，0.98(3H，d，J＝6.4Hz)，3.13-3.19(1H，m)，3.33(1H，dd，J＝6.1，2.9Hz)，3.71(1H，dd，J＝12.5，5.1Hz)，3.82(1H，dd，J＝12.5，3.4Hz)，4.06-4.13(2H，m)，4.28-4.33(2H，m)，6.18(1H，s)，7.51(1H，s)。
测试实施例灵敏度测试1)测试菌株对18种不同细菌(27个标准菌株)进行了抗菌活性测试，所述细菌是临床上引起传染病的代表性菌株金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus 3株表皮葡萄球菌Staphylococcus epidermidis1株藤黄微球菌 Micrococcus luteus1株酿脓链球菌 Streptococcus pyogenes1株粪肠球菌Enterococcus faecalis 1株屎肠球菌Enterococcus faecium 1株枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis 1株大肠杆菌Eschenchia coli 3株肺炎克雷伯氏杆菌Klebsiella pneumoniae 1株奇异变形菌 Proteus mirabilis 1株普通变形菌 Proteus vulgaris 2株铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa3株粘质沙雷氏菌Serratia marcescens 2株产气肠杆菌 Enterobacter aerogenes1株嗜麦芽糖寡养单胞菌 Stenotrophomonas maltophilia 1株阴沟肠杆菌Enterobacter cloacae1株弗氏柠檬酸杆菌Citrobacter freundii1株粘膜炎莫拉氏菌Moraxella catarrhalis 2株。
此外，对以下菌株进行了抗菌活性测试，这些菌株对β-内酰胺化合物相对不敏感，也即临床上分离的13株醋酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus)和鲁沃夫氏不动杆菌(Acinetobacterlwoffi)，临床上分离的11株粘质沙雷氏菌，临床上分离的12株洋葱伯克霍尔德氏菌(Burkholderia cepacia)和临床上分离的15株铜绿假单胞菌。
2)测验方法根据Japan Chemotherapeutic Society的标准方法(Chemotherapy，129卷，第76-79页，(1981))，该测试使用琼脂稀释法进行。在将试样溶于蒸馏水之后，用下面方式制备含所述试样的琼脂培养基，即通过将稀释的组合药物溶液或单个药物溶液连续倒入琼脂培养基使得最后浓度变成两倍连续稀释(twice serial dilution)。使用Mueiler Hinton琼脂培养基(MHA)作为琼脂培养基。然后，各菌株在培养器中于37℃培养过夜并以大约106CFU/ml的浓度悬浮在具有凝胶(BSG)的缓冲盐水溶液中。通过微型植入机(Micro Planter)将含测试菌株的悬浮液(大约5μl)移植到含试样的介质中。于37℃培养该琼脂培养基大约20小时后，检测菌株的生长，并测定其中试样抑制细菌生长的最低抑菌浓度(MIC，μg/ml)。
3)试样制备各药物经称量并溶于蒸馏水中，从而获得试样。当所述药物组合使用时，混合含有各个药物的两种溶液，以便以各种浓度比得到混合溶液。当样品进行灵敏度测试时，通过两倍连续稀释方法对该混合溶液进行稀释。
此外，当单独使用该药物时，各试样以原样使用，并通过两倍连续稀释方法从最大浓度稀释到最小浓度。
4)组合效果的评价与各自药物的MIC相比，当含于组合药物(其显示出抗菌株MIC)中的测试药物的各自浓度低于1/2时，所述比率的组合药物的效果被评价为加成的或协同的。
在各表中示出了碳青霉烯、其它抗生素、化合物1和组合药物的MIC值。计算了基于MIC值的FIC指数。FIC指数通常用作抗生素组合中组合效果的标准评价参数(例如The Japanese Journal ofAntibiotics，58卷，第168-178页，2005)。即，当通过下式计算出的FIC指数等于或小于1时，所述比率的组合药物的增强效果被认为是积极的。当FIC指数大于1时，所述比率的组合药物的增强效果被认为是消极的。
FIC指数公式FIC指数＝(组合中药物A的MIC/单独药物A的MIC)+(组合中药物B的MIC/单独药物B的MIC)在表格中N.C.表示未进行计算。
测试1美罗培南和化合物1对上述标准菌株的组合效果在表1-a至表1-d中示出。测试方法和药物的制备根据上述方法进行。
如表1-a至表1-d所示，以较高频率观察到增强效果，特别是对革兰氏阴性菌株。
测试2美罗培南和化合物1对上述临床上分离菌株的组合效果在表2-a和表2-b中示出。测试方法和试样的制备根据上述方法进行。
如表2-a和表2-b所示，类似于对标准菌株，也观察到对临床上分离菌株的增强效果。
测试3化合物1和亚胺培南、帕尼培南、比阿培南、多利培南、哌拉西林、头孢他啶、氨曲南或环丙沙星对上述标准菌株的组合效果在表3-a至表3-h中示出。测试方法和药物的制备根据上述方法进行。
如表3-e至表3-g示出，甚至在相同的β-内酰胺化合物情况下，属于青霉素的哌拉西林、属于头孢菌素的头孢他啶或者属于单酰胺菌素的氨曲南与化合物1的组合都对相当多的菌株表现出显著高的FIC指数和通过组合降低了效力，也即观察到拮抗现象。此外，如表3-h所示，在属于新喹诺酮抗生素的环丙沙星的情况下，几乎未观察到组合效果。
相反地，如表3-a至3-d所示，当属于碳青霉烯的亚胺培南、帕尼培南、比阿培南或多利培南与化合物1相结合时，所有组合对许多菌株显示出等于或者小于1的FIC指数，所观察到的组合效果类似于美罗培南。
在表格中，分别地，MEPM或ME表示美罗培南，SM表示化合物1，IPM表示亚胺培南，PAPM表示帕尼培南，BIPM表示比阿培南，DRPM表示多利培南，PIPC表示哌拉西林，CAZ表示头孢他啶，AZT表示氨曲南和CPFX表示环丙沙星。
在各个表格中数字表示其中各药物或组合药物抑制菌株生长的最低抑菌浓度(MIC)(μg/ml)。
表1-a
表1-b
表1-c
表1-d
表2-a
表2-b
表3-a
表3-b
表3-c
表3-d
表3-e
表3-f
表3-g
表3-h
工业实用性本发明的共存药物表现出对抗各种菌株的增强效果，并有用于对各种传染病的预防性或者治疗性药物。
权利要求
1.一种抗微生物药物，该抗微生物药物含有下式代表的β-内酰胺化合物 其中，R1是低级烷基或被羟基取代的低级烷基，R2是氢原子或低级烷基，X是O、S或NH，m和n独立地是0-4，且m和n的和为0-4，Y1是卤素原子、氰基、任选地被保护的羟基，任选地被保护的氨基、低级烷氧基、低级烷基氨基、任选地被保护的羧基、任选地被取代的氨基甲酰基或任选地被取代的低级烷基；和Y2是氢原子、任选地被取代的低级烷基、氰基或-C(R3)＝NR4(其中R3和R4独立地是氢原子、任选地被保护的或被取代的氨基或者任选被取代的低级烷基、或者R3和R4可以和与它们相连接的碳原子和氮原子组合形成5-7元杂环，该杂环可以被取代)，条件是1-4个Y1可以存在于相同的环上且2个Y1可以存在于相同碳原子上，或其药学可接受的盐或其无毒酯；和碳青霉烯的组合。
2.权利要求1的抗微生物药物，其中在式[1]中X是S，并且m和n的和是2或3。
3.权利要求1或2的抗微生物药物，其中在式[1]中R1是1-(R)-羟乙基。
4.权利要求1的抗微生物药物，其中在式[1]中R1是1-(R)-羟乙基，R2是甲基，X是S，m和n的和是2或3，Y1是甲基或羟甲基，和Y2是氢原子。
5.权利要求1的抗微生物药物，其中β-内酰胺化合物[1]是(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-4-甲基-3-({4-[(5S)-5-甲基-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基]-1，3-噻唑-2-基}硫烷基)-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。
6.权利要求1的抗微生物药物，其中β-内酰胺化合物[1]是(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-3-({4-[(5R)-5-(羟甲基)-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基]-1，3-噻唑-2-基}硫基)-4-甲基-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸，或者(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-3-({4-[(5S)-5-(羟甲基)-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基]-1，3-噻唑-2-基}硫基)-4-甲基-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。
7.权利要求1-6中任一项的抗微生物药物，其中该碳青霉烯是美罗培南、亚胺培南、帕尼培南、比阿培南、厄他培南、多利培南(S-4661)、CS-023或ME-1036。
8.一种抗微生物药物，该抗微生物药物含有(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-4-甲基-3-({4-[(5S)-5-甲基-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基]-1，3-噻唑-2-基)硫烷基)-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸或其药学可接受的盐与美罗培南、亚胺培南或帕尼培南的组合。
9.一种抗微生物药物，该抗微生物药物含有(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-4-甲基-3-({4-[(5S)-5-甲基-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基]-1，3-噻唑-2-基)硫烷基)-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸或其药学可接受的盐与美罗培南的组合。
10.权利要求1-9中任一项的抗微生物药物，其中所述β-内酰胺化合物[1]、其药学可接受的盐或其无毒酯和碳青霉烯形成共存药物。
11.权利要求1-9中任一项的抗微生物药物，其中所述药物是注射剂。
12.一种用于注射剂的抗微生物药物，该注射剂含有作为活性成份的(4R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羟乙基]-4-甲基-3-({4-[(5S)-5-甲基-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基]-1，3-噻唑-2-基)硫烷基)-7-氧-1-氮杂二环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸或其药学可接受盐和美罗培南的组合。
13.权利要求1的抗微生物药物，该抗微生物药物为用于同时或者以一定时间间隔给药β-内酰胺化合物或其药学可接受的盐和美罗培南的注射剂或小瓶或试剂盒的形式。
14.一种用于治疗传染病的方法，该方法包括向需要下面药物的患者以有效量给药β-内酰胺化合物[1]或其药学可接受的盐和碳青霉烯的组合。
15.一种用于治疗传染病的方法，该方法包括向需要下面药物的患者以有效量给药包括β-内酰胺化合物[1]或其药学可接受的盐和碳青霉烯的组合。
16.β-内酰胺化合物[1]或其药学可接受的盐和碳青霉烯的组合在制备用于治疗传染病的抗微生物药物中的用途。
17.为与碳青霉烯组合的β-内酰胺化合物[1]或其药学可接受的盐在制备用于治疗传染病的抗微生物药物中的用途。
全文摘要
一种用于注射的抗微生物组合药物，包括由下式[1]代表的β－内酰胺化合物，其中，R
文档编号C07D477/00GK101039669SQ20058003442
公开日2007年9月19日 申请日期2005年9月9日 优先权日2004年10月8日
发明者砂川洵, 上田丰, 金泽胜则 申请人:大日本住友制药株式会社