专利名称：普伐他汀钠的制造方法
技术领域：
本发明涉及普伐他汀钠的制造方法。
背景技术：
普伐他汀是被称为他汀(スタチン)的医药化合物的一种，是具有降低动脉粥样硬化及高胆固醇疾病患者的血清胆固醇作用的HMG-CoA抑制剂。普伐他汀钠是普伐他汀的单钠盐，作为高脂血症的治疗剂被销售。
普伐他汀＝[1S-[1α(β+，δ+)，2α，6α，8β(R+)，8aα]]-1，2，6，7，8，8a-六氢-β，δ，6-三羟基-2-甲基-8-(2-甲基-1-氧代丁氧基)-1-萘庚酸(CAS登记号81093-37-0号)在日本特表2003-516959号中，公开了普伐他汀钠的多晶形形式的制造方法。例如，在日本特表2003-516959号的例8中，公开了使用乙酸乙酯进行普伐他汀钠的结晶化的方法。然而，在该例中，在结晶化时，用250ml的乙酸乙酯稀释5g的普伐他汀钠。如此，在使用乙酸乙酯进行普伐他汀钠重结晶时，为了使普伐他汀钠溶解于乙酸乙酯中，通常必需大容量的乙酸乙酯。特别是在进行普伐他汀钠的工业生产时，人们要求通过减少所使用的有机溶剂的量来开发出高效的制造方法。
日本特表2003-516959号公报发明内容本发明的目的是提供普伐他汀钠的制造方法，其可以大幅度地减少所使用的有机溶剂的量，并且可以以简便的方法高效地得到类似物质的含量被极度降低的普伐他汀钠。
为实现上述目的，本发明人等对普伐他汀钠的结晶化条件反复进行了精心的研究，结果发现，通过下述方法可以降低所使用的有机溶剂(乙酸乙酯)的量，即，调制粗制普伐他汀和/或其盐与乙酸乙酯的混合物，使该混合物溶解于乙醇和水的混合液中，在钠离子存在的条件下从调制成的溶液中析出普伐他汀钠，从而完成本发明。
本发明的普伐他汀钠的制造方法包含如下工序(a)调制粗制普伐他汀和/或其盐与乙酸乙酯的混合物的工序；(b)使所述混合物溶解于乙醇和水的混合液中，来调制溶液的工序；以及(c)将所述溶液的pH调整到9或更高之后，将该溶液在钠离子存在的条件下使普伐他汀钠析出的工序。
在此，在上述本发明的普伐他汀钠的制造方法中，所述工序(a)可以包含通过使所述粗制普伐他汀和/或其盐悬浊于所述乙酸乙酯中，来调制所述混合物的工序。
在此，对于上述本发明的普伐他汀钠的制造方法而言，在所述工序(a)中，相对于所述粗制普伐他汀钠的使用量1g，所述乙酸乙酯的使用量可以为2～6ml。
在此，对于上述本发明的普伐他汀钠的制造方法而言，在所述工序(a)中，相对于所述粗制普伐他汀钠的使用量1g，所述乙酸乙酯的使用量可以为4～6ml。
在此，对于上述本发明的普伐他汀钠的制造方法而言，在所述工序(b)中，所述混合液中的相对于乙醇的水的比例(容积比)可以为1/15～1/5，且相对于所述粗制普伐他汀钠的使用量1g，所述混合液的使用量可以为1～6ml。
在此，对于上述本发明的普伐他汀钠的制造方法而言，在所述工序(b)中，所述混合液中的相对于乙醇的水的比例(容积比)可以为1/15～1/5，且相对于所述粗制普伐他汀钠的使用量1g，所述混合液的使用量可以为2～4ml。
在此，在上述本发明的普伐他汀钠的制造方法中，相对于所述粗制普伐他汀钠的使用量1g，所述混合液的使用量和所述乙酸乙酯的使用量的合计可以为3～10ml。
在此，在上述本发明的普伐他汀钠的制造方法中，相对于所述粗制普伐他汀钠的使用量1g，所述混合液的使用量和所述乙酸乙酯的使用量的合计可以为4～9ml。
在此，在上述本发明的普伐他汀钠的制造方法中，可以包含如下工序将所述工序(a)～(c)作为1组，在该组中，将由所述工序(c)得到的所述普伐他汀钠作为在所述工序(a)中的所述粗制普伐他汀和/或其盐，多次重复该组的工序。
通过本发明的普伐他汀钠的制造方法，可以大幅度地减少所使用的有机溶剂的量(乙酸乙酯)，并且可以以简便的方法高效地得到类似物质的含量被极度降低的普伐他汀钠。从而可以大幅度地降低制造成本。
图1(a)表示在比较例中通过结晶化而得到的普伐他汀钠的HPLC谱图；图1(b)表示在实施例1中得到的普伐他汀钠的HPLC谱图。
具体实施例方式
以下说明本发明。在此，本发明中的“％”是指“质量％”，“份”是指“质量份”。
1.普伐他汀钠的制造方法本发明的普伐他汀钠的制造方法，包含如下工序(a)调制粗制普伐他汀和/或其盐与乙酸乙酯的混合物的工序；(b)使所述混合物溶解于乙醇和水的混合液中，来调制溶液的工序；(c)将所述溶液的pH调整到9或更高之后，在钠离子存在的条件下使普伐他汀钠析出的工序。以下，对各个工序进行详细说明。
1.1.工序(a)工序(a)包含调制粗制普伐他汀和/或其盐与乙酸乙酯的混合物的工序。
1.1.1.原料(粗制普伐他汀和/或其盐)在工序(a)中，首先将粗制普伐他汀和/或其盐作为原料使用。在本发明中，“粗制普伐他汀”是指利用微生物发酵而制成的普伐他汀。另外，在本发明中，作为“粗制普伐他汀的盐”没有特别的限定，优选普伐他汀在化学上能够容许的盐，例如，可以举出钠盐、钾盐、钙盐、锌盐、镁盐、铵盐等。
更具体而言，作为在工序(a)中使用的原料，可以只是粗制普伐他汀，也可以是粗制普伐他汀盐，或者还可以是两者的混合物。在本发明中，“粗制普伐他汀和/或其盐的使用量”，在使用粗制普伐他汀或粗制普伐他汀的盐的任意一种时，是指它的使用量；在使用粗制普伐他汀和粗制普伐他汀的盐两者时，是指它们的合计使用量。
在粗制普伐他汀和/或其盐中通常含有普伐他汀的类似物质(例如，作为原料的康百汀(コンパクチン)等)。这种类似物质的存在可以用一般的分析方法(例如HPLC)来鉴定。
如上所述，粗制普伐他汀和/或其盐可以通过微生物发酵来制造。例如，在制造粗制普伐他汀钠时，可以例示如下的2阶段工序(a-1)通过微生物培养来生成康百汀(美伐他汀(メバスタチン))的工序；(a-2)用氢氧化钠水溶液处理康百汀之后，通过微生物转化在康百汀6α位上导入羟基，来制造粗制普伐他汀钠的工序。
在工序(a-1)中使用的微生物，可例举如，Penicillium Citrinum。在工序(a-1)中，使用Penicillium Citrinum，可以由葡萄糖得到康百汀。
在工序(a-2)中使用的微生物，可以使用导入羟基的菌株，可例举如Mucor Hiemalis，Amycolata Autotrophica，Streptmyces Carbophilus。另外，在上述的工序中，显示了使用氢氧化钠来转换成钠盐的例子，通过使用其他的碱，可以转换成各种盐。
另外，在工序(a-1)和(a-2)之后，根据需要，可以利用过滤除去菌体。进而，根据需要，也可以利用树脂吸附来除去杂质。这时，可以使粗制普伐他汀和/或其盐吸附于树脂上之后，通过用含水有机溶剂进行洗脱，从而得到粗制普伐他汀和/或其盐。所使用的树脂的种类没有特别的限定，可以例举如Amberlite XAD(ORGANO株式会社制)、DIAION HP(三菱化学株式会社制)。另外，在含水有机溶剂中使用的有机溶剂，只要是与水混合的物质就没有特别的限定。另外，优选用例如减压浓缩来除去在此使用的有机溶剂，得到粗制普伐他汀和/或其盐。
在本发明中使用的粗制普伐他汀和/或其盐的纯度，在没有进行利用重结晶的精制的阶段，通常为97～98％。
1.1.2.混合物的调制接着，调制粗制普伐他汀和/或其盐与乙酸乙酯的混合物。在此，通过使粗制普伐他汀和/或其盐悬浊于乙酸乙酯中，可以调制出流动状的前述混合物。例如，在该混合物中，使粗制普伐他汀和/或其盐的大部分不溶解于乙酸乙酯中，而是分散在乙酸乙酯中。更具体而言，优选粗制普伐他汀和/或其盐的大部分结晶保持固体状态膨润于乙酸乙酯中。
调制混合物时，所使用的乙酸乙酯的量没有特别限定，为了在后述工序(b)中容易进行溶液的调制，相对于粗制普伐他汀和/或其盐(干燥物)的使用量1g，优选乙酸乙酯的使用量为2～6ml，更优选为4～6ml。在此，如果乙酸乙酯的使用量如果超过6ml，则有时会难以去除类似物质；另一方面，如果乙酸乙酯的使用量小于2ml，则在后述工序(c)中会难以析出普伐他汀钠。
1.2.工序(b)工序(b)包含如下工序使上述工序(a)中调制成的混合物溶解于乙醇和水的混合液中，来调制溶液的工序。
在此，上述混合液中的相对于乙醇的水的比例(容积比)优选为1/15～1/5，更优选为1/15～1/10。此时，如果水的比例超过1/5，则有时普伐他汀钠结晶会变得难以析出；另一方面，如果水的比例小于1/15，则为了使粗制普伐他汀和/或其盐溶解所必需的混合液的量会显著地增加。另外，在这种情况下，相对于粗制普伐他汀和/或其盐(干燥物)的使用量1g，上述混合液的使用量优选为1～6ml，更优选为2～4ml。此时，由于上述混合液的使用量在上述范围，所以不大幅度地增加上述混合液的使用量，就能使普伐他汀钠的结晶高效地析出。
另外，在此，相对于粗制普伐他汀和/或其盐(干燥物)的使用量1g，上述混合液的使用量及在上述工序(a)中所使用的乙酸乙酯的使用量的合计优选为3～10ml，更优选为4～9ml。这时，由于上述混合液的使用量在上述范围，所以可以不大幅度地增加上述混合液的使用量，可以减少在上述工序(a)中所使用的乙酸乙酯的使用量。
另外，在调制上述溶液时，根据需要也可以加热溶液。加热温度优选为基本上不增加类似物质含量的范围，虽然根据所使用的乙酸乙酯及混合液的量而异，但更优选为例如40～55℃。
1.3.工序(c)工序(c)包含如下工序将上述溶液的pH调整到9或更高之后，在钠离子存在的条件下(即，在上述溶液中存在有钠离子的条件下)使普伐他汀钠析出的工序。通过该工序，可以得到利用结晶化而被精制的普伐他汀钠。
在工序(c)中，通过将上述溶液的pH调整到9或更高，可以促进普伐他汀钠的析出。其理由是，普伐他汀钠在pH为9或更高的环境下，难以溶解在有机溶剂(乙酸乙酯)中。在此，为了抑制类似物质的产生，更优选将上述溶液的pH调整到9～10。
另外，为了将上述溶液的pH调整到9或更高而使用的碱没有特别的限定，优选在溶液中产生钠离子的碱。作为这样的碱，可例举如氢氧化钠、碳酸钠。这些碱优选作为溶液(例如水溶液或醇溶液)添加到上述溶液中。
另外，在工序(c)中，在钠离子存在的条件下，使普伐他汀钠析出时的温度优选为30℃或更低，更优选为25℃或更低。此时，根据需要，也可以通过冷却上述溶液，来调节溶液到规定的温度。
另外，可以将上述工序(a)～(c)作为1组，在该组中，将由工序(c)得到的普伐他汀钠作为工序(a)中的粗制普伐他汀和/或其盐，将该组反复进行多次。反复的次数没有特别限定，可以通过将上述组反复进行多次，从而进一步降低类似物质的含量。
接着，根据需要，可以将得到的普伐他汀钠进一步精制。例如，将得到的普伐他汀钠用有机溶剂(例如乙酸乙酯)进行洗涤，或者也可以过滤分离后进行干燥。
通过上述制造方法，可以得到普伐他汀钠。由本发明的制造方法得到的普伐他汀钠是白色的粉末(结晶性粉末)，pH为7.2～8.2，旋光度[α20D]为+153～159°。
就用本发明的制造方法得到的普伐他汀钠中所含有的类似物质而言，一个类似物质的HPLC的峰面积为0.1％或更小，类似物质的HPLC的峰面积的合计为0.5％或更小。
2.用途用本发明的制造方法得到的普伐他汀钠作为医药品组合物，可以用于治疗家族性胆固醇血症、高脂血症。
3.实施例接着，根据实施例和比较例进一步详细说明本发明。本发明并不限于这些例子。
3.1.评价方法在本实施例中，使用如下仪器测定被测定物质的HPLC谱图、吸光度、旋光度及pH。
HPLC装置waters 2690，996(waters制)旋光度SEPA-200((株)堀场制作所制)pHF-52((株)堀场制作所制)3.2.实施例1
3.2.1.粗制普伐他汀及其盐的混合物的制造用Penicillium Citrinum培养葡萄糖来制造康百汀，接着，用导入羟基的菌株(Mucor Hiemalis)，在含有康百汀0.07％的培养液2000L中，在25℃、pH为6～7的条件下，进行40小时培养(例如参照“岸田他，药学杂志，111(9)，469-487(1991)”)。
接着，将使用后的菌体用过滤除去后，用树脂(Amberlite XAD(ORGANO株式会社制)、DIAION HP(三菱化学株式会社制))吸附杂质而将其除去，用含水有机溶剂洗脱粗制普伐他汀及其盐的混合物。然后，通过减压浓缩由洗脱得到的粗制普伐他汀及其盐的混合物来除去上述含水有机溶剂，得到粗制普伐他汀及其盐的混合物(干燥物)1.2kg。
3.2.2.普伐他汀钠的制造首先，将得到的粗制普伐他汀及其盐的混合物500g添加到1000ml的乙酸乙酯中，调制成流动状的混合物。接着，在该混合物中添加乙醇和水的混合液(乙醇∶水＝10∶1)1000ml，加热到40℃，搅拌1小时，通过使粗制普伐他汀及其盐完全溶解来调制成溶液。
接着，向该溶液中添加20％的氢氧化钠水溶液，将pH调整到9.5之后，将该溶液保持在25℃，静置一个晚上之后，结晶析出。将该结晶用乙酸乙酯洗涤之后，通过在50～60℃下进行减压干燥10小时，得到普伐他汀钠(PVNa)的白色结晶状粉末442.1g。
所得普伐他汀钠的pH为7.82、旋光度[α20D]为+156°，用HPLC装置确认类似物质(类似物质A～D)的存在比例，确认结果为类似物质A～D的峰面积都为0.1％或更小，合计也降低到0.5％或更小(参照图1和表1)。
3.3.实施例2用与实施例1同样的方法，由葡萄糖得到粗制普伐他汀及其盐的混合物的粉末(干燥物)500g。预先在其中添加1500ml的乙酸乙酯，将粗制普伐他汀及其盐物理性地微小化，得到结晶处于没有固结状态的混合物。
向其中加入乙醇和水的混合液1500ml(乙醇∶水＝5∶1)，加热到40℃，搅拌1小时，通过使粗制普伐他汀及其盐完全溶解，来调制成溶液。
接着，在该溶液中添加20％的氢氧化钠水溶液，将pH调整到9.2之后，将该溶液保持在25℃，静置一个晚上之后，结晶析出(第1次结晶化)。
接着，在该含有乙酸乙酯的结晶中添加乙酸乙酯500ml，再次重复进行上述工序。即，添加乙醇和水的混合液1500ml，加热到40℃，搅拌1小时，使第1次结晶化处理得到的结晶完全溶解，添加氢氧化钠水溶液，将pH调整到9.2之后，将该溶液保持在25℃，静置一个晚上之后，结晶析出(第2次结晶化)。
用乙酸乙酯洗涤该析出的结晶之后，通过在50～60℃下进行10小时的减压干燥，得到普伐他汀钠(PVNa)的白色结晶状粉末410g。
所得普伐他汀钠的pH为7.90、旋光度[α20D]为+156°，用HPLC装置确认类似物质的存在比例，确认结果为类似物质的峰面积分别为0.1％或更小，即使合计也降低到0.5％或更小(表1)。
3.4.实施例3、4在实施例3、4中，除了将从添加乙酸乙酯开始、到调制溶液、调整溶液pH及结晶析出为止的操作(结晶化)分别重复进行3次、4次之外，进行与实施例2相同的操作，从而得到普伐他汀钠的白色结晶状粉末。
对实施例1～4中分别得到的普伐他汀钠，用HPLC装置进行了纯度确认。其结果示于表1、图1(a)及图1(b)中。在表1中，实施例1～4表示最终得到的普伐他汀钠中类似物质的含量(％)，比较例表示在粗制普伐他汀及其盐(原料)中类似物质的含量(％)。另外，在表1中，“-”表示没有检测出此类似物质。
图1(a)是表示比较例的粗制普伐他汀及其盐(原料)的HPLC谱图的部分扩大图，图1(b)表示在实施例1中得到的普伐他汀钠的HPLC谱图的部分扩大图。在图1(a)和图1(b)的HPLC谱图中，示出普伐他汀钠(或原料)的峰及类似物质A～D的峰。
表1
由表1所示的HPLC的结果确认，实施例1～4中得到的普伐他汀钠与比较例的原料相比，类似物质A～D各自的含量及类似物质的含量总量(合计)降低了。另外，比较实施例1～4，确认了结晶化的次数越多则类似物质的含量越少。
因此，通过实施例1～4的普伐他汀钠的制造方法，可以大幅度地减少所使用的有机溶剂(乙酸乙酯)的量，并且类似物质的含量大幅度地降低。
3.5.实施例5在实施例5中，所使用的混合液中的乙醇和水的比例(容积比)分别为乙醇∶水＝4∶1、5∶1、10∶1、15∶1、20∶1时，改变乙酸乙酯的使用量，进行与实施例1同样的操作(结晶化1次)。
另外，在实施例5的各试验例中，将粗制普伐他汀及其盐的混合物的使用量设定为与实施例1相同的500g，将混合液的使用量设定为与实施例1相同的1000ml。在实施例5中使用的粗制普伐他汀及其盐是用与实施例1相同的方法调制成的。
在表2中示出(1)所使用的混合液中的乙醇和水的比例(容积比)；(2)相对于粗制普伐他汀及其盐的混合物1g，乙酸乙酯的使用量(mL/g)；(3)相对于粗制普伐他汀及其盐的混合物1g，混合液的使用量(mL/g)；以及(4)相对于粗制普伐他汀及其盐的混合物1g，乙酸乙酯的使用量及混合液的使用量的合计(mL/g)。
表2
在表2中，在试验例1～5(混合液为乙醇∶水＝4∶1的情况)中，结晶的析出量为微量。另外，在试验例21～25(混合液为乙醇∶水＝20∶1的情况)中，粗制普伐他汀及其盐没有完全溶解。
另外，在表3中示出在试验例7～10、12～15、17～20中最终得到的普伐他汀钠的类似物质的含量(％)。
表3
由表3所示的结果可知，与试验例10、15、20(相对于粗制普伐他汀及其盐的混合物1g，乙酸乙酯的使用量为8mL或更多的情况)相比较，在试验例7～9、12～14、17～19中，可以大幅度减少所使用的有机溶剂(乙酸乙酯)的量，并且可以大幅度地降低类似物质的含量。
3.6.实施例6在实施例6中，所使用的混合液中的乙醇和水的比例(容积比)分别为乙醇∶水＝4∶1、5∶1、10∶1、15∶1、20∶1的情况下，改变混合液的使用量，进行与实施例1同样的操作(结晶化1次)。
另外，在实施例6的各试验例中，将粗制普伐他汀及其盐的混合物的使用量设为与实施例1同样的500g，将乙酸乙酯的使用量设为1500mL。另外，在实施例6中使用的粗制普伐他汀及其盐是用与实施例1相同的方法调制成的。
在表4中示出(1)所使用的混合液中的乙醇和水的比例(容积比)；(2)相对于粗制普伐他汀及其盐的混合物1g，乙酸乙酯的使用量(mL/g)；(3)相对于粗制普伐他汀及其盐的混合物1g，混合液的使用量(mL/g)；以及(4)相对于粗制普伐他汀及其盐的混合物1g，乙酸乙酯的使用量及混合液的使用量的合计(mL/g)。
表4
在表4中，在试验例26～32(混合液为乙醇∶水＝4∶1的情况)及试验例38、39、45、46、52、53、59、60(混合液的使用量为3500mL、4000mL的情况)中，结晶的析出量为极微量。另外，在试验例54～58(混合液为乙醇∶水＝20∶1，并且混合液的使用量为3000mL或更少的情况)及试验例33、40、47(混合液的使用量为250mL的情况)中，粗制普伐他汀及其盐没有完全溶解。
另外，在表5中示出在试验例34～37、41～44、48～51中最终得到的普伐他汀钠的类似物质的含量(％)。
表5
由表5所示的结果可知，在任何试验例中，都可以大幅度地减少所使用的有机溶剂(乙酸乙酯)的量，并且可以大幅度地降低类似物质的含量。
权利要求
1.普伐他汀钠的制造方法，其特征为，包含如下工序(a)调制粗制普伐他汀和/或其盐与乙酸乙酯的混合物的工序；(b)将所述混合物溶解于乙醇和水的混合液中，来调制溶液的工序；(c)将所述溶液的pH调整到9或更高之后，在钠离子存在的条件下使普伐他汀钠析出的工序。
2.如权利要求1所述的普伐他汀钠的制造方法，其特征为，所述工序(a)包含通过使所述粗制普伐他汀和/或其盐悬浊于所述乙酸乙酯中，来调制所述混合物的工序。
3.如权利要求1或2所述的普伐他汀钠的制造方法，其特征为，在所述工序(a)中，相对于所述粗制普伐他汀和/或其盐的使用量1g，所述乙酸乙酯的使用量为2～6ml。
4.如权利要求1或2所述的普伐他汀钠的制造方法，其特征为，在所述工序(a)中，相对于所述粗制普伐他汀和/或其盐的使用量1g，所述乙酸乙酯的使用量为4～6ml。
5.如权利要求1～4中的任一项所述的普伐他汀钠的制造方法，其特征为，在所述工序(b)中，以容积比计，所述混合液中的相对于乙醇的水的比例为1/15～1/5，且相对于所述粗制普伐他汀和/或其盐的使用量1g，所述混合液的使用量为1～6ml。
6.如权利要求1～5中的任一项所述的普伐他汀钠的制造方法，其特征为，在所述工序(b)中，以容积比计，所述混合液中的相对于乙醇的水的比例为1/15～1/5，且相对于所述粗制普伐他汀和/或其盐的使用量1g，所述混合液的使用量为2～4ml。
7.如权利要求1～6中的任一项所述的普伐他汀钠的制造方法，其特征为，相对于所述粗制普伐他汀和/或其盐的使用量1g，所述混合液的使用量和所述乙酸乙酯的使用量的合计为3～10ml。
8.如权利要求1～7中的任一项所述的普伐他汀钠的制造方法，其特征为，相对于所述粗制普伐他汀和/或其盐的使用量1g，所述混合液的使用量和所述乙酸乙酯的使用量的合计为4～9ml。
9.如权利要求1～8中的任一项所述的普伐他汀钠的制造方法，其特征为，包含如下工序将所述工序(a)～(c)作为1组，在该组中，将由所述工序(c)得到的所述普伐他汀钠作为在所述工序(a)中的所述粗制普伐他汀和/或其盐，多次重复该组的工序。
全文摘要
本发明提供普伐他汀钠的制造方法，其可以大幅度地减少所使用的有机溶剂的量，并且可以以简便的方法高效地得到类似物质的含量被极度降低的普伐他汀钠。所述普伐他汀钠的制造方法，包含如下工序(a)调制粗制普伐他汀和/或其盐与乙酸乙酯的混合物的工序；(b)将上述混合物溶解于乙醇和水的混合液中，来调制溶液的工序；以及(c)将上述溶液的pH调整到9或更高之后，在钠离子存在的条件下使普伐他汀钠析出的工序。
文档编号C07C67/00GK1903825SQ20061010327
公开日2007年1月31日 申请日期2006年7月24日 优先权日2005年7月25日
发明者小田中亘, 金光智行 申请人:丘比株式会社